Translated from English to Vietnamese - www.onlinedoctranslator.

com

Xem các cuộc thảo luận, số liệu thống kê và hồ sơ tác giả của ấn phẩm này tại:https://www.researchgate.net/publication/244289801

Tính ổn định quang hóa của collagen - Hỗn

hợp Chitosan

Bài báoTRONGTạp chí Quang hóa học và Quang sinh học A Hóa học · Tháng 3 năm 2004

DOI: 10.1016/S1010-6030(03)00397-6

TRÍCH DẪN ĐỌC

38 176

5 tác giả, bao gồm:

Alina Sionkowska Craig Kennedy

Đại học Nicolaus Copernicus Đại học Heriot-Watt
132CÔNG BỐ2,683TRÍCH DẪN 41CÔNG BỐ900TRÍCH DẪN

XEM HỒ SƠ XEM HỒ SƠ

Tim J Wess
Đại học Charles Sturt
152CÔNG BỐ4.323TRÍCH DẪN

XEM HỒ SƠ

Một số tác giả của ấn phẩm này cũng đang thực hiện các dự án liên quan sau:

cấu trúc collagenXem Kế hoạch

Mạng lưới chuyên môn về kết dính sinh học Châu Âu (ENBA)Xem Kế hoạch

Tất cả nội dung sau trang này đã được tải lên bởiCraig Kennedyvào ngày 06 tháng 1 năm 2017

Người dùng đã yêu cầu nâng cao tệp đã tải xuống. Tất cả các tài liệu tham khảo trong văn bảnđược gạch chân màu xanhđược thêm vào tài liệu gốc và

được liên kết tới các ấn phẩm trên ResearchGate, cho phép bạn truy cập và đọc chúng ngay lập tức.
 Tạp chí Quang hóa và Quang sinh học A: Hóa học 162 (2004) 545–554

Độ ổn định quang hóa của hỗn hợp collagen-chitosan

A. SionkowskaMột,∗, M. WisniewskiMột, J. Skopinska Một, CJ Kennedyb,c, TJ Wessb,c
MộtKhoa Hóa học, Đại học N. Copernicus, Gagarin, 87-100 Torun, Ba Lan
bTrung tâm Sinh học Ma trận Ngoại bào, Đại học Stirling, Stirling FK9 4LA, Vương quốc Anh
cKhoa Đo thị lực và Khoa học Thị giác, Đại học Cardiff, Tòa nhà Redwood,
Đại lộ King Edward VII, Công viên Cathays, Cardiff CF10, 3NB Wales, Vương quốc Anh

Nhận ngày 6 tháng 6 năm 2003; nhận theo mẫu sửa đổi ngày 26 tháng 9 năm 2003; chấp nhận ngày 29 tháng 9 năm 2003

trừu tượng

Độ ổn định quang hóa của hỗn hợp collagen-chitosan trong dung dịch và dạng màng được nghiên cứu bằng phép đo độ nhớt, phép đo
quang phổ UV-Vis, quang phổ FTIR và nhiễu xạ tia X góc rộng. Người ta nhận thấy rằng độ nhớt tương đối của collagen giảm khi chiếu tia
UV. Độ nhớt tương đối ban đầu của hỗn hợp collagen-chitosan lớn hơn độ nhớt của collagen; khi chiếu tia UV, độ nhớt của hỗn hợp giảm
nhanh chóng. Sự hấp thụ/tán xạ collagen trong dung dịch tăng lên trong quá trình chiếu xạ mẫu như được thể hiện bằng UV-Vis, cho
thấy sự chuyển đổi về hình dạng trong mẫu. FTIR cho thấy các dải amit A, B, I và II từ collagen bị dịch chuyển sau khi chiếu tia UV về số
sóng thấp hơn; những thay đổi này trong hỗn hợp collagen-chitosan ít rõ ràng hơn. Nhiễu xạ tia X góc rộng chỉ ra rằng hỗn hợp collagen
và collagen-chitosan ở dạng màng giữ được nhiều đặc điểm cấu trúc của chúng sau khi chiếu xạ.

Kết quả đo độ nhớt và quang phổ UV-Vis đã chỉ ra rằng dung dịch hỗn hợp collagen-chitosan kém ổn định về mặt quang hóa hơn so với
dung dịch collagen nguyên chất. Phổ FTIR đã chỉ ra rằng màng pha trộn collagen-chitosan cũng kém ổn định về mặt quang hóa hơn so với
màng collagen nguyên chất. Nhiễu xạ tia X góc rộng cho thấy các mẫu hỗn hợp collagen và collagen-chitosan ở dạng màng ít bị thay đổi về
hình dạng hơn các mẫu tương đương trong dung dịch.
© 2004 Elsevier BV Mọi quyền được bảo lưu.

Từ khóa:Collagen; Chitosan; Bức xạ của tia cực tím; nhiễu xạ tia X; Kết cấu

1. Giới thiệu (290–320 nm) và UVA (320–400 nm) cũng như ánh sáng nhìn
thấy và bức xạ hồng ngoại. Hơn nữa, vật liệu sinh học dựa
1.1. colagen trên collagen đôi khi phải chịu tác động của bức xạ UVC từ các
nguồn nhân tạo trong quá trình khử trùng. Collagen chứa các
Collagen là một trong những polyme sinh học quan trọng nhất trong axit amin thơm (phenylalanine và tyrosine)
động vật[1]. Sự phong phú và đặc tính cấu trúc của sự hấp thụ trong phạm vi tia cực tím xa (250–280nm). Nhiều
collagen đã dẫn đến nhiều ứng dụng rộng rãi, bao gồm cả da, các nghiên cứu đã chứng minh sự thay đổi của chỉ khâu do collagen
và khả năng cầm máu.[2S]. Collagen có đặc tính do bức xạ tia cực tím - người ta đã chứng minh rằng trong dung dịch keo tụ như
một vật liệu sinh học khác biệt với các loại gen tổng hợp sẽ mất khả năng hình thành các sợi tự nhiên sau khi chiếu xạ polyme -
collagen có khả năng hoạt động như cơ sở cho[3]. Ngoài ra, huỳnh quang quan sát được sau khi chiếu tia UV
Vật liệu sinh học có thể được sử dụng để tương tác với mô sống là do sự hiện diện của các sản phẩm quang học của
phenylalaas, nó có dư lượng cơ sinh học và sinh hóa-ine và tyrosine tương xứng trong chuỗi axit amin collagen
tính chất ical cho mô sống. Collagen chịu sự điều chỉnh của[4–9]. Liên kết ngang ảnh[10–12]và hoạt động phân hủy
quang của bức xạ mặt trời; quang phổ mặt trời là một phức hợp[6,13–15]collagen cũng có thể xảy ra khi tiếp xúc với
dải bức xạ UV bao gồm UVC (220–290nm), UVB sự bức xạ.
Loại quá trình quang hóa và hiệu quả của nó phụ thuộc
vào sự có mặt của các chất phụ gia để kết dính [1e6N–20].
∗Đồng tác giả. Địa chỉ hiện tại: Khoa Đo thị lực và Khoa học Thị giác,
Sự biến đổi độ ổn định quang hóa của collagen khi có
Đại học Cardiff, Tòa nhà Redwood, Đại lộ King Edward VII, Công viên
Cathays, Cardiff, CF10 3NB, Wales, Vương quốc Anh. ĐT.:
mặt--carotene[15–17], riboflavin[18], hắc tố
+48-56-6214302; fax+ : 48-56-6542477. [19], xanh metylen[21], H2ồ2và thiourea[12]đã được
Địa chỉ email:as@chem.uni.torun.pl (A. Sionkowska). báo cáo.

1010-6030/$ – xem mặt trước © 2004 Elsevier BV Mọi quyền được bảo lưu.
doi:10.1016/S1010-6030(03)00397-6
546 A. Sionkowska và cộng sự. / Tạp chí Quang hóa và Quang sinh học A: Hóa học 162 (2004) 545–554

1.2. chitosan sao cho một loạt 11 dung dịch được tạo thành hai lần có
chứa hỗn hợp collagen-chitosan với nồng độ cuối cùng là 1
Chitosan là một polyme tự nhiên được điều chế từ chitin bằng phương pháp gl−1. Phim thu được bằng cách đúc dung dịch
deacetyl hóa. Tính chất vật lý và hóa học của tấm thủy tinh chitosanonto hoặc Ca 2Cửa sổ đo quang F. Af-
phụ thuộc nhiều vào trọng lượng phân tử và mức độ bay hơi của dung môi, mẫu được sấy khô trong quá trình deacetyl hóa
chân không[22]. Chitosan nhạy cảm với nhiều loại phân hủy khác
lúc nhau
20◦C. như phân hủy oxy hóa, thủy phân, nhiệt, quang và
siêu âm.[N Hỗn hợp này được chiếu xạ trong không khí ở nhiệt độ
23]. phòng bằng đèn thủy ngân Philips TUV-30 phát ra ánh
sáng ở bước sóng 254 nm. Mức độ lưu loát của bức xạ là
1.3. Hỗn hợp collagen-chitosan 0,263 J cm− 2phút−1. Liều lượng bức xạ tới trong thời gian
phơi sáng 1 giờ là 16 J c−tôi2. Cường độ của sự cố
Collagen và chitosan không tồn tại cùng nhau vì ánh sáng pha trộn được đo bằng Máy đo phóng xạ IL 1400A (Bản chất bên
trong, nhưng tính chất cụ thể của từng loại có thể được sử dụng ở Light, Hoa Kỳ). Các thí nghiệm chiếu xạ đã được thực hiện
để tạo ra hỗn hợp tổng hợp mang lại cấu trúc độc đáo trong cuvet thạch anh ở khoảng cách 3 cm so với nguồn sáng. và tính
chất cơ học. Việc sử dụng chi phí tương đối thấp Tất cả các phép đo được thực hiện ở◦2C0 để tránh bất kỳ vật liệu sinh học ô
nhiễm thấp nào có các đặc tính cụ thể có ảnh hưởng lớn phụ thuộc vào nhiệt độ đến tiềm năng hóa lý, ví dụ như trong việc
phát triển một thế hệ đặc tính mới của màng collagen.
cấy ghép chân tay giả[24–26].
Trong nghiên cứu trước đây của chúng tôi, chúng tôi đã chỉ ra rằng collagen–chitosan2.2. Đo quang phổ UV-Vis
hỗn hợp có thể trộn được và tương tác ở cấp độ phân tử, mới
mạng lưới liên kết hydro dường như làm thay đổi collagen he- Phổ hấp thụ UV-Vis của dung dịch collagen, đặc tính
lical và do đó, các thông số vật lý tổng thể trước và ngay sau khi chiếu tia UV được ghi lại của hỗn hợp[27].
bằng máy quang phổ Shimadzu (Model UV-1601PC).
Hỗn hợp collagen và chitosan đã được sử dụng cho thiết kế. Dữ liệu được thu thập và lập biểu đồ bằng chương trình
UVPC của giàn giáo polyme để nuôi cấy in vitro tế bào người và trạm dữ liệu máy tính do nhà sản xuất cung cấp.
tế bào ung thư biểu mô da[S28], như màng để giải phóng có
kiểm soát[29–31], và như sợi cấy ghép[S32,33]. 2.3. Đo độ nhớt tương đối
Từ những điều đã nói ở trên, có thể kết luận rằng sự pha
trộn giữa collagen và chitosan ngày càng có tầm quan trọng Độ nhớt tương đối của collagen, chitosan và collagen–
trong lĩnh vực vật liệu sinh học vì hỗn hợp có đặc tính dung dịch hỗn hợp chitosan được đo lường◦Thông số tC20in 0,5 M cho phép
chúng được sử dụng trong một số axit axetic y tế (pH 2,7) bằng cách sử dụng nhớt kế thạch anh Ubbelohde. những cách quan
trọng. Sự tương tác của tia UV và hỗn hợp
là quan trọng, vì hành vi của hỗn hợp cần phải được2.4. Đo FTIR được hiểu trong
những điều kiện có thể khắc nghiệt và tia UV
có thể được sử dụng để tinh chỉnh quy trình chuẩn bị hỗn hợp thành pro- Phổ FTIR thu được bằng cách sử dụng hỗn
hợp Mattson Geneduce có đặc tính hóa học và cấu trúc cụ thể (Hoa Kỳ). Phương pháp này cho phép quan sát. Mục
đích của nghiên cứu này là xác định ảnh hưởng của sự thay đổi cấu trúc xảy ra do chitosan đến độ ổn định quang hóa
của các phản ứng quang hóa dung dịch collagen. Các nhóm chức trong chitosan và màng.
và đặc tính hóa học tương ứng của chúng có thể được
quan sát thấy trongBảng 1. Tất cả các phổ được ghi ở độ
phân giải 4 cm−1và quét 16 lần.
2. Vật liệu và phương pháp
2.5. Nhiễu xạ tia X góc rộng
2.1. Chuẩn bị mẫu
Nhiễu xạ tia X góc rộng được thực hiện ở
Collagen được lấy trong phòng thí nghiệm của chúng tôi từ cơ sở NanoSTAR gân đuôi (Bruker AXS, Karlsruhe) tại Stirling của
những con chuột bạch tạng non. Các gân được pha trộn tại Đại học Waring. Các mẫu màng mỏng được nạp vào máy lấy mẫu trong
axit axetic 0,5 M, sau đó quay với tốc độ 10.000 vòng / phút trong buồng ple và hồ sơ tán xạ được thu thập tại máy ly tâm aa Sorvall
và phần hòa tan được khử và khoảng cách từ mẫu đến máy dò là 4,5 cm trong 2 giờ mỗi expolyophilized. Phương pháp được sử
dụng cũng giống như phương pháp trước đây. Quy trình thu thập dữ liệu được sử dụng tuân theo quy trình được sử dụng[15,16].
Chitosan (trọng lượng phân tử 360.000) được lấy từ Fluka, Thụy Sĩ.được mô tả chi tiết trong Wess et a[tôi3.4]. Các hình ảnh không
có mẫu đã được chụp và dữ liệu đã được sửa để loại bỏ các
Các mẫu ở dạng dung dịch phổ UV-Vis và màng cho thành phần phụ thuộc vào máy ảnh. Hình ảnh được phân tích
nhiễu xạ tia X và FTIR đã được xử lý trước bằng phần mềm nội bộ. Đầu ra của máy dò hai chiều là
sánh ngang. Hỗn hợp polyme được điều chế bằng cách trộn các ap-chuyển đổi thành các cấu hình một chiều để chuẩn bị
cho lượng collagen và chitosan thích hợp trong phân tích axit axetic.
 A. Sionkowska và cộng sự. / Tạp chí Quang hóa và Quang sinh học A: Hóa học 162 (2004) 545–554 547

Bảng 1 trong vùng 250–280 nm. Phổ UV-Vis đặc trưng cho dung
Xác định các nhóm chức trên phổ FTIR của chitosan dịch collagen đã bị thay đổi đáng kể sau khi chiếu tia UV (
[23]
Hình 1); chiếu xạ dung dịch collagen ở bước sóng 254 nm
Dải (cm−1) Nhóm đặc trưng dẫn đến tăng nhẹ độ hấp thụ tổng thể, đáng chú ý nhất là
3450 Ồ trong khoảng từ 240 đến 300 nm. Sau khi chiếu xạ, đỉnh ở
3360 NH (Rung động kéo dài) bước sóng 275 nm kém rõ rệt hơn, trở nên giống vai hơn
2920, 2880, CH2 Rung động kéo dài đối xứng khi tăng thời gian chiếu xạ.
14h30, 13h20 hoặc không đối xứng Đây có thể là tác động của việc tăng độ đục trong dung
do vòng pyranose dao
C=O
dịch được chiếu xạ, vì bức xạ UV gây ra những thay đổi về
17h30 động nhóm cacbonyl Dải
1655 C=O trong Amide I hình dạng của phân tử collagen (chuyển tiếp cuộn xoắn).
dải amide Sự hiện diện ngày càng tăng của cấu trúc cuộn dây và sự
1560 NH– Dao động uốn trong nhóm mất dần đặc tính xoắn ốc của collagen dẫn đến sự gia tăng
amit tổng thể về mức độ tán xạ của mẫu [11–14]. Sau 1 giờ và 2
1590 NH2 Trong nhóm amin
giờ chiếu tia UV, độ hấp thụ/tán xạ tối đa không bị thay đổi
1380 – CH3 Trong nhóm amit
1150–1040 – C–O–C– Trong liên kết glycosid thêm.
Phổ hấp thụ của chitosan được thể hiệnFiTôigN. 2. Sau
khi chiếu tia UV, phổ hấp thụ bị thay đổi
Phân tích thành phần chính (PCA) được thực hiện với sự phát triển của dải hấp thụ riêng biệt ở bước sóng 300 nm của cấu
hình WAXS để xác định bản chất của những thay đổi đang được hình thành và sự mất vai ở bước sóng 250 nm. Các
xảy ra trong các hỗn hợp do hàm số hấp thụ cấu trúc của các mẫu được chiếu xạ luôn thấp hơn các đặc tính của hỗn
hợp hoặc do hàm số của bức xạ cực tím của các mẫu đối chứng. Các nhiễm sắc thể chịu trách nhiệm
ation trên hỗn hợp. Cơ sở toán học của PCA là rõ ràng vì dải hấp thụ ở bước sóng 250 nm rõ ràng đã bị phá hủy
tài liệu[35,36]; PCA là một kỹ thuật có khả năng chiếu xạ tia cực tím và các nhiễm sắc thể mới được tạo ra để phân tích
bản chất và mức độ biến thiên trong tập dữ liệu và hấp thụ ở bước sóng khoảng 300nm. Một nghiên cứu của
có thể phát hiện các xu hướng cơ bản có trong dữ liệu. Andrady và cộng sự.[37]cho rằng sự tăng độ hấp thụ là do
sự gia tăng nhóm carbonyl và amino trong chitosan sau
khi chiếu xạ.
3. Kết quả và thảo luận Đối với hỗn hợp collagen-chitosan (tỷ lệ 50:50), sự thay
đổi về độ hấp thụ/tán xạ xảy ra sau thời gian chiếu xạ ngắn
3.1. Đo quang phổ UV-Vis hơn so với chỉ sử dụng collagenF(ví dụ: 3). Khi chiếu tia UV,
mức độ hấp thụ của mẫu tăng lên đáng kể; lớn hơn so với
Sự hấp thụ collagen nguyên chất hoặc hỗn hợp lý thuyết dựa trên đặc
Tôi gân đuôi chuột c tính hấp thụ collagen và chitosan có trọng số. Các

Hình 1. Phổ UV-Vis của collagen trước và sau khi chiếu tia UV (chìa khóa thời gian trên biểu đồ). Các đặc điểm của biểu đồ thay đổi theo thời gian: sau khi chiếu xạ,
đỉnh ở bước sóng 275 nm kém rõ ràng hơn, trở nên giống vai hơn khi thời gian chiếu xạ tăng lên.
548 MỘT.

Hình 2. Phổ UV-Vis của chitosan trước và sau khi chiếu tia UV (biểu đồ hiển thị trên biểu đồ). Với thời gian chiếu xạ tăng lên, p0enam giống như vai k lúc 25
biến mất và được thay thế bằng cực đại ở bước sóng 300 nm.

sự khác biệt giữa sự hấp thụ/tán xạ sau 1 và 2 giờ chuỗi) hoặc sự biến đổi quang học (với sự thay đổi về độ bức xạ lớn
hơn ở collagen nguyên chất đối với hỗn hợp có sự hình thành các phân tử collagen). Ngoài ra, sự gia tăng của các tác
phẩm khác cũngFtôiTôi(g. 4). Khi mức độ hấp thụ chitosan của hỗn hợp collagen-chitosan với bức xạ UV tăng lên
trong mẫu và mức độ collagen giảm xuống, thì do dải hấp thụ mới được hình thành ở độ hấp thụ ở bước sóng 275
nm cũng tăng lên. Ngoài ra, chitosan được chiếu xạ tinh khiết (seFeví dụ: 2). mẫu collagen cho thấy độ hấp thụ không
tăng thêm nữa
trong khoảng từ 60 đến 120 phút, trong khi các mẫu pha trộn cho thấy3.2. Đo độ nhớt tương đối độ
hấp thụ tăng lên trong khoảng thời gian này.
Điều này gợi ý rằng chitosan làm giảm sự chiếu xạ quang hóa trên tia UV với bước sóng 254 nm, độ ổn định tương
đối của protein này và tăng tốc độ nhớt (ηliên quan) của collagen giảm nhanh và sau đó tụt xuống dẫn đến
nguồn điện ở mức thấp ổn định ở mức 1,1 mà không có bất kỳ thay đổi nào khi
sự xuống cấp của ảnh tiếp tục chiếu xạF (ví dụ: 5).

Hình 3. Phổ UV-Vis của hỗn hợp collagen-chitosan (tỷ lệ 50:50 của mỗi loại). Khi chiếu xạ, mức độ hấp thụ của mẫu tăng lên đáng kể; hơn so với collagen
nguyên chất.
 A. Sionkows
Hình 4. Sự thay đổi độ hấp thụ của mẫu ở 275MỘTNttôi
mức độ hấp thụ
colla giữa
Hình 5. Độ nhớt tương đối của hỗn hợp collagen-chitosan (60/40). Cái-
đường cong oretic trong đồ thị là đường cong được tính toán bằng phương pháp thích hợpnhanh
bổ sung theo tỷ lệ collagen (0,6) và chitosan (0,4) trong hỗn hợp lý thuyết.với
Kết quả thực nghiệm có sự khác biệt rõ rệt so với kết quả lý thuyết
trong đó độ nhớt tương đối ban đầu thậm chí còn cao hơn độ nhớt của colla-giảm
gen và cho thấy sự suy giảm rõ rệt hơn so với collagen, chitosan hoặc theoreticac
trộn.
Hình 6. Độ nhớt tương đối của hỗn hợp collagen-chitosan sau khi chiếu xạ ở thời điểm 1 và 2 giờ. Độ nhớt của tất cả các mẫu giảm mạnh trong khoảng thời gian chiếu
xạ từ 1 đến 2 giờ.
549
− MỘT
(0/MỘT0) khi chiếu xạ. Khi mức độ chitosan tăng lên trong mẫu và
cũng dịu đi. Ngoài ra, mẫu collagen nguyên chất cho thấy không có sự gia tăng
thêm về độ hấp thụ trong khoảng thời gian này.
Trong nghiên cứu trước đây của chúng tôi[27], chúng tôi đã
chỉ ra rằng độ nhớt của hỗn hợp collagen-chitosan cao hơn
nhiều so với độ nhớt của các thành phần đơn lẻ. Giải thích của
chúng tôi về sự thay đổi độ nhớt là thông qua hệ thống ba pha
trong đó hỗn hợp collagen-chitosan chứa pha thứ ba, có thể là
trạng thái tiền keo hóa. Thành phần thứ ba chịu trách nhiệm
tăng cường độ nhớt của hỗn hợp với mức tối ưu khoảng 50%
collagen và 50% chitosan (theo trọng lượng). Độ nhớt tương
đối thực nghiệm của hỗn hợp collagen-chitosan cao hơn độ
nhớt của hỗn hợp được dự đoán trong tính toán lý thuyết (lần
lượt là 5,8 và 4,1 đối với hỗn hợp 60% collagen và 40%
chitosan, như được hiển thịFTôigN. 5). Sau khi chiếu tia UV vào
collagen, độ nhớt tương đối giảm
chóng và đạt giá trị thấp nhất là 1,1 mà không có bất kỳ thay đổi nào
sự chiếu xạ tiếp theo. Độ nhớt tương đối của chitosan
chậm hơn nhiều theo thời gian chiếu tia UV so với vis-
tôiđộ đậm đặc của dung dịch collagen.
Sau khi chiếu tia UV vào hỗn hợp collagen-chitosan, mức độ ổn
định thấp đạt được sớm hơn so với collagen nguyên chất (Quả
sung. 5 và 6 ) . Đối với collagen nguyên chất đạt mức ổn định
550 A. Sionkowska

Hình 7. Phổ FTIR của màng collagen-chitosan (60/40) trước và sau khi chiếu tia UV. Các dải amit A, B, I và II dường như bị dịch chuyển về số sóng thấp
hơn sau khi chiếu tia UV.

sau 3 giờ chiếu tia UV, trong khi đối với hỗn hợp collagen- ban 2
chitosan, kết quả đạt được sau 2 giờ chiếu tia UV. Khi Vị trí các dải amide A, amide I và amide II trong collagen-chitosan
hỗn hợp chứa 80% collagen và 20% chitosanpha trộn (50/50) sau khi chiếu tia UV
− 1)
độ nhớt tương đối là 1,2 sau 2 giờ chiếu tia UV, trong khi đối với Dải amide Vị trí (cm
collagen nguyên chất, độ nhớt thấp như vậy đạt được sau 3 giờ 0Một 0,5Một 2Một 4Một số 8Một

chiếu tia UV. Khi hỗn hợp chứa 30% collagen và 70% chitosan, độ
MỘT 3326 3326 3325 3323 3320
nhớt tương đối là 1,5 sau 1 giờ chiếu tia UV, trong khi đối với
TÔI 1658 1658 1658 1658 1658
collagen nguyên chất sau 1 giờ là khoảng 2.II 1556 1556 1556 1556 1556
Những kết quả này cho thấy pha thứ ba trong hỗn hợp rất
MộtSau thời gian chiếu tia UV tính bằng giờ.
nhạy cảm với bức xạ UV. Thật hấp dẫn khi suy đoán rằng
sau khi chiếu tia UV, pha thứ ba này đã bị phân hủy
và một lần nữa độ nhớt rất thấp. Các dải kết quả độ nhớt được quy cho liên kết peptide. Chúng có thể hữu ích vì có thể đề xuất một
lần nữa rằng collagen-chitosan hòa trộn trong dung dịch để xác định thêm đặc tính của các phân tử nước liên kết và
kém ổn định về mặt quang hóa hơn so với collagen đơn thuần. liên kết hydro trong collagen. Vị trí của chúng rất nhạy cảm
với những thay đổi về hình dạng của các phân tử. Dải
3.3. Đo FTIR collagen amit A (liên quan đến tần số kéo dài NH) thường
được tìm thấy ở 3325–3330−c1m. Dải amide B của collagen
Độ ổn định quang hóa của co thường được tìm thấy ở mức 3080−c1m. Dải collagen
được nghiên cứu bằng phổ FTIR của amide I thường được tìm thấy ở 1650–1668−c1tôi .
protein và polypeptide tổng hợp Dải collagen amide II tập trung ở khoảng

Hình 8. Độ hấp thụ toàn phần của dải collagen Amide A và sự lựa chọn các hỗn hợp. Khi thời gian chiếu tia UV tăng lên thì độ hấp thụ tích phân của pic
giảm. Ở mức collagen cao trong hỗn hợp, có rất ít sự thay đổi về mức giảm độ hấp thụ của pic; tuy nhiên khi tỷ lệ chitosan tăng lên và tỷ lệ collagen giảm
trong hỗn hợp thì sự giảm độ hấp thụ trở nên rõ rệt hơn.
 A. Sionkowska và cộng sự. / 5–554 551

Hình 9. Sự thay đổi độ hấp thụ của am có hàm e thể hiện rõ hơn ở các mẫu ge ở
lượng collagen rất cao; mẫu thông minh đỉnh này.

Hình 10. Sự thay đổi độ hấp thụ tích phân của dải amide II ở mức 15−515acfm chiếu tia UV lên hỗn hợp collagen và collagen-chitosan.

1530–1555 cm− 1và có tính chất phức tạp với sự rung động của nó- trong hỗn hợp, sự giảm độ hấp thụ trở nên thuận lợi hơn
nguồn tional trong cả biến dạng NH và kéo dài CN được công bố. chế độ. Trong
mẫu của chúng tôi, các dải amide A được dịch chuyển về phía Độ hấp thụ tích phân của các dải amit I và amit II ở 1658
chiếu xạ UV để giảm số sóng nhưng amit I và II không bị và 1555 c−tôi 1, tương ứng, giảm
thay đổiF(ví dụ: 7,ban 2). Những thay đổi này trong nhanh chóng sau khi chiếu tia UV vào hỗn hợp collagen-chitosan
hỗn hợp collagen-chitosan nhỏ hơn trong khi ở collagen (Quả sung. 9 và 1)0. Sự giảm độ hấp thụ tích hợp là nhiều màng có
nồng độ polysacarit thấp hơn, chúng được phát hiện trong các mẫu có hàm lượng collagen rất cao; lớn hơn. Những thay đổi
này có thể xảy ra do sự phân mảnh của các mẫu hy có ít collagen hơn và nhiều chitosan hơn vì liên kết compodrogen khi tiếp
xúc với bức xạ UV dẫn đến các lỗ nhỏ cho thấy sự thay đổi ở đỉnh này giảm đi. Điều này có thể gợi ý sự giảm số lượng của
chúng – liên kết hydro là cần thiết để màng pha trộn collagen-chitosan kém ổn định hơn để duy trì cấu trúc xoắn ốc của ảnh
ghép [3N8–40]. Với tính chất hóa học hơn so với màng collagen nguyên chất. Sử dụng phương pháp FTIR
Khi tăng thời gian chiếu xạ, những thay đổi rõ rệt hơn là chúng ta có thể quan sát những thay đổi về độ hấp thụ tích phân được
quan sát thấy trong các nhóm chức năng đặc trưng. dải amide sau 30 phút chiếu tia UV, trong khi sử dụng
Đối với hỗn hợp collagen-chitosan, dải amide A nằm trong phương pháp đo độ nhớt và phổ UV-Vis cho dung dịch, chúng
tôi đặt vị trí giống như dải nhóm OH trong chitosan. Vì có thể quan sát những thay đổi sau 5 phút chiếu tia UV. pha trộn với
thành phần 60% collagen và 40% chi- Chúng ta có thể kết luận từ điều này rằng sự phân hủy quang của tosan, chúng ta
quan sát thấy sự giảm hấp thụ rõ rệt của hỗn hợp collagen-chitosan này trong dung dịch xảy ra nhanh hơn dải phức tạp.
Điều này cho thấy rằng chiếu xạ UV có tác dụng làm suy giảm đáng kể màng collagen-chitosan.
đã làm thay đổi rõ rệt cả collagen và chitosan trong hỗn hợp.
Độ hấp thụ toàn phần của dải amide A trong collagen3.4. Nhiễu xạ tia X góc rộng giảm
theo thời gian chiếu tia UVFi(g. số 8). Ở mức độ cao của collagen trong hỗn hợp, có rất ít sự
thay đổi về độ rơi Nhiễu xạ tia X góc rộng cho thấy rằng trong collagen
về độ hấp thụ của pic; tuy nhiên, khi tỷ lệ màng đặc trưng đạt cực đại ở mức 12 Å và 2,86 Å, reprechitosan tăng lên và
tỷ lệ collagen giảm thì sự đóng gói bên của các phân tử collagen sẽ tăng lên.
552 A. Sionkowska e 4

Hình 11. Các biên dạng tuyến tính chuẩn hóa nhiễu xạ tia X góc rộng từ hỗn hợp collagen-chitosan (tỷ lệ 50:50) sau 0 và 8 giờ chiếu tia UV. Không có đỉnh rõ
rệt trong hồ sơ do sự hiện diện của collagen hoặc chitosan. Đặc điểm chính là đỉnh 4,5 Å có trong các mẫu protein al.

trên mỗi dư lượng trong chuỗi xoắn tương ứng đều có mặt cả hỗn hợp beforecollagen-chitosan trước và sau khi chiếu xạ UV
và sau khi chiếu xạ. Điều này chỉ ra rằng màng collagen bị chi phối bởi tỷ lệ tương đối của collagen và có khả năng chống lại
quá trình chuyển đổi cuộn xoắn do chitosan trong hỗn hợp gây ra tốt hơnF.ví dụ: 12cho thấy các hệ số từ tia UV so với
collagen trong dung dịch. Sự hiện diện của chitosan PCA từ các mẫu từ màng collagen nguyên chất đến hỗn hợp collagen-
chitosan có tác dụng loại bỏ màng chitosan tinh khiết sau khi chiếu tia UV 0 (tham khảo), 2, đặc điểm cấu trúc của ảnh ghép[2
N7]. Trong hỗn hợp có thời gian phơi sáng là 4 và 8 giờ. Sự khác biệt chính của dữ liệu là do tỷ lệ tương đối của collagen và
chitosan nằm trong phạm vi thành phần mẫu như được thể hiện bằng cách phân cụm theo tỷ lệ 7:3 đến 3:7, không có đặc
điểm nhiễu xạ từ collagen hoặc các mẫu trong biểu đồ.
chitosan có mặtFtTôi(g. 11)—Tia UV có
không ảnh hưởng đến các đỉnh collagen trong các hỗn hợp này. Trong tinh khiết chi-3.5. Thảo luận: cơ chế phân hủy
ảnh tosan, đỉnh 8,5 Å đặc trưng trở nên ít rõ ràng hơn trong cấu hình nhiễu xạ khi chiếu tia UV, nhưng vẫn là một
đặc điểm quan trọng. Người ta thường biết rằng tyrosine và phenylalanine là các
nhiễm sắc thể nhạy cảm, hấp thụ ánh sáng dưới 300nm và có thể
Dữ liệu nhiễu xạ hậu môn bắt đầu quá trình phân hủy quang của chuỗi collagen và phá hủy
thành phần chính cho thấy tha quang thông qua sự phân tách của các nhóm bên. Trên

Hình 12. Các hệ số cơ bản của hàm 1 và 2 của màng collagen, chitosan và blend sau 0, 2, 4 và 8 giờ chiếu tia UV từ PCA của dữ liệu nhiễu xạ tia X góc rộng.
Khi tỷ lệ collagen giảm trong các mẫu và mức độ chitosan tăng lên, các hệ số cho cả hai hàm cơ bản thay đổi từ âm sang dương, cho thấy bản chất của hỗn
hợp ban đầu là đặc điểm chính trong tất cả các mẫu.
 A. Sionkowska e 4 553

Sơ đồ 1. Cơ chế biến đổi hỗn hợp collagen-chitosan do chiếu tia UV.

dựa trên các nghiên cứu về độ nhớt của dung dịch pha loãng, UV-Vis ổn định hơn màng collagen nguyên chất, mặc dù phép đo
quang phổ và phổ FTIR có chiều dài lớn hơn mà chúng ta có thể nhận xét về thời gian chiếu xạ là cần thiết để mang lại những thay
đổi về quá trình phân hủy quang của hỗn hợp collagen-chitosan . Một đặc tính của hỗn hợp so với hỗn hợp trong dung dịch. Sự tăng
độ hấp thụ tích phân trong phạm vi FTIR có liên quan đến nhiễu xạ tia X xác nhận rằng đặc điểm cấu trúc của sự phân cắt chuỗi
collagen và chitosan thành các mảnh nhỏ hơn của collagen và hỗn hợp collagen-chitosan ở dạng màng là các mảnh. Điều này được
xác nhận bằng các phép đo độ nhớt không bị thay đổi đáng kể sau khi chiếu tia UV.
dung dịch collagen-chitosan pha loãng. Các gốc collagen và chitosan
hình thành khi tiếp xúc với tia cực tím có thể tương tác với nhau
khác và làm thay đổi tính chất của hỗn hợp collagen-chitosanSự nhìn nhận (
Cơ chế)1. Đặc biệt, rất năng động • khử gốc OH

được tạo ra từ chitosan được chiếu xạ có thể tương tác với collagen Hỗ trợ tài chính từ NATO GRANT 978595 và
các đại phân tử và tạo ra các gốc mới và Ủy ban nghiên cứu khoa học macroradi (KBN, Ba Lan, cấp số 3. Trong các đại
phân tử chitosan có nhiều nhóm OH, P05A 06922) và quỹ SHEFC JREI rất vui mừng vì đã có nhiều hoạt động tích cực•
Các gốc OH có thể được hình thành. hiểu biết.

Người giới thiệu

4. Kết luận
[1] M. Van der Rest, R. Garrone, FASEB J. 5 (1991) 2814–2823.
Ảnh hưởng của chitosan đến độ ổn định quang hóa [2] T. Miyata, T. Taira, Y. Noishiki, Clin. Mẹ ơi. 9 (1992) 139.
của collagen phụ thuộc vào nồng độ của polysaccha-[3] E. Fujimori, Biopolyme 3 (1965) 115–119.
đi xe trong hỗn hợp biopolymer. Nói chung collagen-chitosan[4] E. Fujimori, Hóa sinh 5 (1966) 1034–1040.
hỗn hợp trong dung dịch kém ổn định về mặt quang hóa hơn so với hỗn hợp nguyên chất[5] DV Crabtree, E. Fujimori, Biopolyme 19 (1980) 1081–1091.
[6] E. Fujimori, Eur. J. Hóa sinh. 152 (1985) 299–306.
dung dịch collagen, như đã được chứng minh bằng phép đo độ nhớt[7] JM Menter, J. Willis, Pigm. Tế bào. Res. 10 (4) (1997) 214–217.
và đo quang phổ UV-Vis. Phổ FTIR cho thấy màng [8] JM Menter, GD Williamson, CL Moore, I. Willis, K. Carlyle,
collagen-chitosan kém quang hóa hơn Photochem. Photobiol. 62 (3) (1995) 402–408.
554 A. Sionkowska và cộng sự. / Tạp chí Quang hóa và Quang sinh học A: Hóa học 162 (2004) 545–554
[9] Y. Kato, T. Nishikawa, S. Kawakishi, Photochem. Photobiol. 61 (4)
(1995) 367–372.
[10] Y. Kano, Y. Sakano, E. Fujimoto, J. Biochem. 102 (1987) 839–842.
[11] E. Fujimori, FEBS Lett. 253 (1988) 98–102.
[12] CA Miles, A. Sionkowska, SL Hulin, TJ Sims, NC Avery, AJ Bailey, J.
Biol. Chem. 275 (2000) 33014–33020.
[13] SF Curran, MA Amoruso, DB Goldstein, RA Goldstein, FEBS Lett. 176
(1984) 155–160.
[14] Y. Kato, S. Uchida, S. Kawakishi, J. Agric. Đồ ăn. Chem. 40 (1992) 373–
379.
[15] A. Kamińska, A. Sionkowska, Polimery 39 (1994) 758–762.
[16] A. Kamińska, A. Sionkowska, J. Photochem. Photobiol. A: Hóa học. 96
(1996) 123–127.
[17] A. Kamińska, A. Siinkowska, J. Photochem. Photobiol. Một Chem. 120
(1999) 207–210.
[18] Y. Kato, K. Uchida, S. Kawakishi, Photochem. Photobiol. 59 (1994)
343–349.
[19] A. Siinkowska, J. Photochem. Photobiol. 124 (1999) 91–94.
[20] J. Ramshaw, L. Stephens, P. Tullock, Biochim. Sinh lý. Acta 1206
(1994) 225–230.
[21] A. Siinkowska, Polym. Xuống cấp. Cú đâm. 67 (2000) 79–83.
[22] MH Struszczyk, Polimery 47 (2002) 316–325.
[23] M. Mucha, A. Pawlak, Polimery 47 (2002) 509–516.
[24] BL Seal, TC Otero, A. Panitch, Mater. Khoa học. Anh. R 34 (2001) 147–
230.
[25] F. Suh, J.-KF Suh, HWT Matthew, Vật liệu sinh học 21 (2000) 2589–
2598.
[26] CH Lee, A. Singla, Y. Lee, Int. J. Pharm. 221 (2001) 1–22.
[27] A. Sionkowska, M. Wisniewski, J. Skopinska, CJ Kennedy, TJ Wess, Vật
liệu sinh học 25 (2004) 795–801.
[28] N. Shanmugasundaram, P. Ravichandran, PN Reddy, N. Ramamurty,
S. Pal, KP Rao, Vật liệu sinh học 22 (2001) 1943–1951.
[29] D. Thacharodi, KP Rao, Int. J. Pharm. 120 (1995) 115–118.
[30] CC Leffler, BW Müller, Int. J. Pharm. 194 (2000) 229–237.
[31] D.ThacharodiK.P. Rao, Int. J. Pharm. 134 (1996) 239–241.
[32] S. Hirano, M. Zhang, M. Nakagawa, T. Miyata, Vật liệu sinh học 21
(2000) 997–1003.
[33] X.-G. Chen, Z. Wang, W.-S. Lưu, H.-J. Park, Vật liệu sinh học 23 (2002)
4609–4614.
[34] TJ Wess, M. Drakopoulos, A. Snigirev, J. Wouters, O. Paris, P. Fratzl, M.
Collins, J. Hiller, K. Nielsen, Archaeomerty 43 (2001) 117–129.
[35] A. Basilevsky, Phân tích nhân tố thống kê và các phương pháp, lý thuyết
và ứng dụng liên quan, Wiley, New York, NY, 1994.
[36] BS Everitt, G. Dunn, Phân tích dữ liệu đa biến ứng dụng, Nhà xuất bản
Đại học Oxford, New York, NY, 1992.
[37] AL Andrady, A. Torikai, T. Kobatake, J. Appl. Polym. Khoa học. 62
(1996) 1465–1471.
[38] A. Kamińska, A. Sionkowska, Polym. Xuống cấp. Cú đâm. 51 (1996) 19–
26.
[39] A. Siinkowska, A. Kamńiska, Int. J. Biol. Macromol. 24 (1999) 337–
340.
[40] A. Kamińska, A. Sionkowska, Polym. Xuống cấp. Cú đâm. 51 (1996) 15–
18.