You are on page 1of 53

MOLEKULARNA BIOLOGIJA

MOLEKULARNA BIOLOGIJA

Izučava strukturu i funkciju nukleinskih kiselina, proteina i drugih bio-makromolekula, kao i


njihove medjusobne odnose.

Protok informacija kroz ćeliju i sa generacije na generaciju.

Njen cilj je da objasni molekularnu osnovu bioloških pojava i procesa.

Molekularna biologija
NUKLEINSKE KISELINE
NUKLEINSKE KISELINE

U prirodi postoje dve vrste


nukleinskih kiselina:

 Dezoksiribonukleinska
kiselina (DNK) i

 Ribonukleinskakiselina (RNK)

 Ove vrste nukleinskih


kiselina razlikuju se po
hemijskom sastavu, a imaju i
različite biološke funkcije.

 Nukleinske kiseline su
makromolekuli, POLIMERI
koji se sastoje iz sitnijih
jedinica NUKLEOTIDA
(MONOMERI), koji su
međusobno povezani u
polinukleotidni lanac.

Molekularna biologija
PRIMARNA STRUKTURA DNK

DNK molekul je nosilac genetičke informacije kod svih organizama.

DNK može da ostvaruje tu izuzetno važnu ulogu jer je sposoban za samoreprodukciju


(sam je sebi model za umnožavanje), jer je stabilan (nije ga lako iseći) ali i promenljiv
( promenljivost genetičkog materijala je važna za uspostavljanje raznovrsnosti a bez
nje nema evolucije).

Jedino je kod jedne podgrupe virusa ( RNK virusi), nosilac genetičke informacije RNK
a ne DNK.

Molekularna biologija
DEZOKSIRIBONUKLEINSKA KISELINA - DNK
DNK je NASLEDNA SUPSTANCA i nosilac naslednih informacija u ćeliji.
DNK SADRŽI GENETIČKE ŠIFRE ZA SINTEZU PROTEINA I SVIH VRSTA RNK.
Najveća količina DNK se nalazi u jedru gde zajedno sa proteinima obrazuje hromozome.
Znatno manja količina nalazi se u mitohondrijama a kod biljnih ćelija i u hloroplastima.

Nukleotid DNK sastoji se od tri


člana

Dezoksiriboza Fosfatna grupa Jedne od četiri


(pentozni šećer) azotnih baza

Jednoprstenasti pirimidini

Dvoprstenasti purini

Molekularna biologija
DEZOKSIRIBONUKLEINSKA KISELINA - DNK

Azotne baze predstavljaju specifični deo svakog nukleotida tako da od njih zavisi i kakav će nukleotid biti.
Razlikujemo dve grupe azotnih baza:

DVOPRSTENASTI PURINI

ADENIN (A) GUANIN (G)

JEDNOPRSTENASTI PIRIMIDINI

CITOZIN (C) TIMIN (T)

Molekularna biologija
PRIMARNA STRUKTURA DNK

Azotna baza
(npr.timin)

FOSFAT

DEZOKSIRIBOZA

Molekularna biologija
PRIMARNA STRUKTURA DNK
Nukleotid DNK je izgradjen od pentoznog šećera dezoksiroboze za čiji je C1 atom vezana azotna baza a za
C5 atom fosfatna grupa.

DVOPRSTENASTI JEDNOPRSTENASTI
PURINI PIRIMIDINI

BAZA

FOSFAT

3
ADENIN ( A ) TIMIN ( T )

DEZOKSIRIBOZA

GUANIN ( G ) CITOZIN ( C )

Građa i tipovi nukleotida D.N.K.

Azotne baze predstavljaju specifični deo svakog nukleotida tako da od njih zavisi i kakav će nukleotid biti.
Molekularna biologija
PRIMARNA STRUKTURA DNK

ŠEĆER + BAZA = NUKLEOZID + FOSFAT =


NUKLEOZID NUKLEOTID

Baza Baza

Šećer Šećer

NUKLEOZID NUKLEOTID

NUKLEOZID NUKLEOTID

Molekularna biologija
PRIMARNA STRUKTURA DNK
NH2

N
azotna
baza
=O
N
-
O CC55
fosfatna -
O - P - O -CH2
grupa O
O- CC11
H H

H H

OH H

šećer

nukleozid

nukleotid
Molekularna biologija
PRIMARNA STRUKTURA DNK

HOCH2 OH
O

H H dezoksiriboza
H
H C2
C 5’
O OH H

4’ 1’
3’ 2’ HOCH2 OH
O
pentoza
H H riboza
H
H C2

OH OH

Molekularna biologija
PRIMARNA STRUKTURA DNK

C-NH2

HC N
C
HC C=O
NH C=O
4 citozin HC NH
5 3 N
U
6
1
2 HC C=O
N C=O NH

H3C-C NH uracil
P I R I M I D I N
T
HC C=O
NH
timin
Molekularna biologija
PRIMARNA STRUKTURA DNK

N C-NH2
C
N
HC A
CH
C
N NH N
7 6 N
5 1 adenin
8
4 2
9 3

N N N C=O
C
NH
P U R I N
HC G
C-NH2
C
NH N

guanin
Molekularna biologija
PRIMARNA STRUKTURA DNK

Puni nazivi nukleotida koji grade DNK su:

dezoksiadenozin 5’-monofosfat
(dAMP)

dezoksiguanozin 5’-monofosfat
(dGMP)

dezoksicitidin 5’-monofosfat
(dCMP)

dezoksitimidin 5’-monofosfat
(dTMP)

Molekularna biologija
PRIMARNA STRUKTURA DNK

Baza
5

Nukleotidi se u polinukleotidnom lancu povezuju


1 u linearni niz FOSFODIESTARSKIM VEZAMA
Dezoksiriboza (jake, kovalentne veze).
3 Fosfatna
grupa

Fosfo-
diestarske Fosfodiestarska veza se gradi izmedju fosfatne
veze
grupe na C5 atomu novog nukleotida i hidroksilne
grupe na C3 atomu prethodnog nukleotida.
To znači da novi polinukleotidni lanac uvek mora
5 da raste u 5’ – 3’ smeru.

Povezivanje nukleotida u polinukleotidni lanac


Molekularna biologija
PRIMARNA STRUKTURA DNK

Baza
5

1 Svaki polinukleotidni lanac ima i svoju


Dezoksiriboza orijentaciju.

3 Fosfatna
Na početku lanca nalazi se slobodna fosfatna
grupa grupa na C5 atomu prvog nukleotida , pa se
početak lanca označava kao 5’ kraj.
Fosfo-
diestarske Na kraju lanca nalazi se slobodna hidroksilna
veze grupa na C3 atomu poslednjeg nukleotida, pa
se taj deo lanca naziva 3’ kraj.

Povezivanje nukleotida u polinukleotidni lanac


Molekularna biologija
PRIMARNA STRUKTURA DNK

Šećeri i fosfatne grupe koji se medjusobno


povezuju čine OKOSNICU (kičmu)
O S
P polinukleotidnog lanca tj. njegov nespecifični
K E deo (svi polinukleotidni lanci imaju iste
C okosnice).
O
I Ono što je specifično na svakom
S F polinukleotidnom lancu jesu njegove azotne
I baze.
N Č
I N
I
C
PRIMARNU STRUKTURU MOLEKULA DNK
A D
E predstavlja redosled nukleotida u njegovim
O polinukleotidnim lancima.
L Broj mogućih kombinacija nukleotida u jednom
A L polinukleotidnom lancu je 4n, gde je n broj
N A nukleotida u tom lancu.
C N Primarna struktura DNK može da obezbedi
A C osnovu za ogromnu genetičku raznovrsnost.
A

Molekularna biologija
PRIMARNA STRUKTURA DNK

5’ kraj
O

O-P=O
-

S
O
O P
C5H2 O
T E
K C
O I
F
S O H I
O-P=O Č
N
-

N
I O I
CH2 O G
C
D
A E
O H
O

L
-
O-P=O
L
A O A
N T N
CH2 O
C C
A
A C3
OH H

3’ kraj
Molekularna biologija
PRIMARNA STRUKTURA DNK
5’ kraj

baza baza
O-
O-
5’
-
O - P - O -CH2
O -
O - P - O -CH2
O
O
- O
C3 -

OH
3’ O

+ baza
-
O - P = O
baza
fosfodiestarska O
O- veza
-
O - P - O – C5 H2 5’ CH2
O O
O
-

OH 3’ kraj 3’ OH

Molekularna biologija
PRIMARNA STRUKTURA DNK

Baza

Dezoksiriboza

Fosfatna
grupa

Fosfo-
diestarske
veze

Povezivanje nukleotida u polinukleotidni lanac


Molekularna biologija
SEKUNDARNA STRUKTURA DNK

Ervin Čargaf
Rosalind Franklin

Molekularna biologija
SEKUNDARNA STRUKTURA DNK

Strukturu dvolančane zavojnice su 1953. god. rasvetlili James Watson i Francis Crick

Watson and Crick 1953

Molekularna biologija
SEKUNDARNA STRUKTURA DNK

Molekul DNK sastavljen je od dva antiparalelna


polinukleotidna lanca koji spiralno uvijena u obliku
dvostruke zavojnice.

Molekularna biologija
SEKUNDARNA STRUKTURA DNK

5’ kraj 3’ kraj

Dva polinukleotidna lanca jednog molekula DNK su


komplementarna tj. uvek se purin iz jednog lanca
sparuje sa pirimidinom iz drugog lanca, i to
ADENIN sa TIMINOM i GUANIN sa
CITOZINOM.
Veze između baza su vodonične (slabe veze, lako se
raskidaju što je vrlo bitno za procese replikacije i
transkripcije)

3’ kraj 5’ kraj

Molekularna biologija
SEKUNDARNA STRUKTURA DNK

dezoksiriboza

dezoksiriboza

GUANIN CITOZIN

dezoksiriboza

dezoksiriboza
Komplementatne baze
ADENIN
ADENIN TIMIN
TIMIN
adenin – timin vezani su sa 2 vodonične veze
guanin – citozin vezani su sa 3 vodonične veze Čargafovo pravilo A=T
G=C

Što je organizam na višem evolutivnom nivou količina AT parova je veća GC ≠ AT


Molekularna biologija
SEKUNDARNA STRUKTURA DNK

5’ kraj 3’ kraj

Dva polinukleotidna lanca jednog DNK molekula su


ANTIPARALELNI tj. suprotno su orijentisani
(naspram 5’ kraja jednog lanca ide 3’ kraj drugog).

3’ kraj 5’ kraj
Molekularna biologija
SEKUNDARNA STRUKTURA DNK

Veliki
Veliki zavoj
zavoj

Mali
Mali
zavoj
zavoj

DNK spirala uvijena je u desno i širine je 2 nm. U jednom zavrtnju spirale nalazi se 10 nukleotidnih parova
ukupne dužine 3,4nm.
Molekularna biologija
Broj nukleotidnih parova u genomu različitih vrsta

VRSTA BROJ NUKLEOTIDNIH PAROVA

Mycoplasma genitalium 5,8 x 10 5

Saccharomyces cerevisiae 12 x 10 6

Arabidopsis thaliana 142 x 10 6

Drosophila melanogaster 137 x 10 6

Homo sapiens 3,2 x 10 9

Amoeba dubia 67×10 10

Fritillary assyrica 13×1010

Molekularna biologija
SEKUNDARNA STRUKTURA DNK

Kod prokariota DNK je kružnog oblika i ‘’gola’’ (nije udružena sa proteinima) ili ima samo malu količinu
proteina koji je okružuju.

Plazmid
Bakterijska
DNK

Bakterije pored svog glavnog hromozoma mogu da


imaju i plazmid. Plazmid je ekstrahromozomska DNK
(takodje kružnog oblika ) koja sadrži gene kojih nema
na glavnom hromozomu.

Molekularna biologija
TERCIJARNA STRUKTURA DNK

dužina DNK u jednoj ćeliji čoveka je 2m


ukupna dužina DNK u svim ćelijama jedne osobe je oko
2x1011km, a udaljenost Zemlje od Sunca 1,5x108km

prečnik jedra 5-10mm

Molekularna biologija
TERCIJARNA STRUKTURA DNK

Najveći deo genetičkog materijala eukariotske ćelije nalazi se u jedru gde izgrađuje hromatin
( hromozome), ali jedan znatno manji deo postoji i u mitohondrijama (ili u hloroplastima kod biljnih ćelija).
Jedarna DNK je linearnog oblika, dok je mitohondrijalna i hloroplastna DNK kružnog oblika.

Jedarna
opna

Jedarce

Euhromatin
nekondezovani
hromatin

Heterohromatin
kondezovani
hromatin

U interfazi, u jedru se vidi samo disperzna Hromozomi se formiraju usled uspostavljanja


masa hromatina, jer je tada hromatin viših nivoa kondenzacije hromatina. Hromatin
dekondenzovan. Procesi replikacije i je najviše kondenzovan u metafazi.
transkripcije mogu se odigravati kad je
hromatin despiralizovan. G1,S, G2 period ćel.
ciklusa.
Molekularna biologija
TERCIJARNA STRUKTURA DNK

Jedarna
opna

Euhromatin je najčešće smešten Jedarce


u centralnom delu jedra i znatno
je svetlije obojen od
heterohromatina jer predstavlja
despiralizovani hromatin. U ovom Euhromatin
hromatinu najveća površina DNK nekondezovani
hromatin
je izložena transkripciji.

Heterohromatin
kondezovani
hromatin

Heterohromatin su u nukleusu vidi kao taman region i on je čvrsto


spirilizovan tako da na njemu geni najčešće nisu dostupni za transakciju
na iRNK. Najčešće je raspoređen po periferiji jedra. U centralnom delu
jedra gradi manja ili veća ostrva a u manjoj meri je vezan i za nukleolus.
Količina hetreohromatina u ćeliji govori nam o njenoj aktivnosti. Veća
količina heterohromatina ukazuje na slabu metaboličku aktivnost ćelije.

Molekularna biologija
TERCIJARNA STRUKTURA DNK

Kod eukariota, DNK je uvek udružena sa proteinima, tako da postoji i njena tercijerna struktura , a
to je hromatin.
U sastav hromatina ulaze bazni pozitivno naelektrisani proteini histoni koji imaju gradivnu ulogu i
nehistonski proteini koji imaju funkcionalne karakteristike.

DNK
Negativno naelektrisana
fosfatna grupa

Histoni
pozitivno naelektrisani bazni proteini

Molekularna biologija
TERCIJARNA STRUKTURA DNK

Histoni su bazni pozitivno naelektrisani proteini zbog prisustva veće količine baznih aminokiselina (najviše
lizina i arginina). Razlikuju se pet klasa (vrsta) histona koji se obeležavaju kao H1, H2A, H2B, H3 i H4.

D.N.K.

D.N.K.

Nukleozomi Povezani nukleozomi

Nukleozom je oktamer sastoji od 8 histonskih molekula molekula 2H2A, 2H2B, 2H3 i 2H4 i DNK, koja je
namotana oko oktamera skoro 2 puta.
Nukleozomi su povezani histonom H1.

Molekularna biologija
TERCIJARNA STRUKTURA DNK

Nukleozom (oktamer) 8 histonskih proteina +


146 ili 147 baznih parova DNK

Amino
D.N.K. završni kraj histona

Ve
za
2
nu
k leo
zo
m a

Histon H1
11 n
m

Molekularna biologija
TERCIJARNA STRUKTURA DNK

DNK Negativno naelektrisana


fosfatna grupa

Histoni pozitivno naelektrisani


bazni proteini

Nukleozomalno vlakno
D.N.K.

D.N.K.

Nukleozomi Povezani nukleozomi Nukleozomski paketi


Molekularna biologija
TERCIJARNA STRUKTURA DNK

Obrazovanjem nukleozoma, odnosno, namotavanjem DNK oko 2 puta oko oktamera, ukupna dužina DNK
se smanjuje oko 7 puta što još uvek nije dovoljno da bi se ona mogla smestiti u jedro. Dalja spiralizacija
DNK predstavlja obrazovanje tzv. solenoidnih struktura. One se sastoje od gusto upakovanih
nukleozoma tako da se dobijaju hromatinske niti debljine 30 nm.

Nukleozomski paketi

Molekularna biologija
TERCIJARNA STRUKTURA DNK

DNK dupli
heliks

2H2A
2H2B
DNK dupli heliks Histon H1 2H3
2H4

Histon Histoni bazni


Histon H1 proteini –
Nukleozom pozitivno
naelektrisani
Nukleozom
Histon H1

Nukleozomski paketi

Petlje

Nukleozomski paketi

Stepen kondenzovanosti hromatina se menja


kroz ćelijski ciklus.
Hromatin Od G2 periode interfaze počinje kondenzacija
hromatina. U metafazi hromozomi su
najuočljiviji. Nakon metafaze počinje
despiralizacija hromozoma

Metafazni hromozom
TERCIJARNA STRUKTURA DNK
N
U
K
L
E 11 nm
O
Z
O
M
A
L
N D.N.K.
30 nm
O
Nukleozom
Histon H1

V
L
A
K
N Nukleozomski
paketi
O

Molekularna biologija
TERCIJARNA STRUKTURA DNK

Pakovanje molekula DNK

Molekularna biologija
STRUKTURA I TIPOVI RNK

RNK

su JEDNOLANČANE

imaju RIBOZU umesto DEZOKSIRIBOZE

imaju URACIL umesto TIMINA

i mnogo su MANJE u odnosu na DNK


(jer predstavljajuju prepis jednog malog
dela molekula DNK)

Molekularna biologija
STRUKTURA I TIPOVI RNK

Nukleotid RNK sastoji se od tri


člana

Riboza Fosfatna grupa Jedne od četiri


(pentozni šećer) azotnih baza

Jednoprstenasti pirimidini

Dvoprstenasti purini

Molekularna biologija
STRUKTURA I TIPOVI RNK

Osnovna gradivna jedinica RNK je, kao i kod DNK, nukleotid. Nukleotidi DNK i RNK razlikuju se po:

pirimidinskim bazama umesto timina RNK ima uracil,

URACIL (U) TIMIN (T)

RNK DNK

i tipu pentoznog šećera umesto dezoksiriboze kod RNK je riboza

Riboza Dezoksiriboza
Molekularna biologija
STRUKTURA I TIPOVI RNK

DVOPRSTENASTI JEDNOPRSTENASTI
PURINI PIRIMIDINI

BAZA

FOSFAT

ADENIN ( A ) URACIL ( U )
RIBOZA

GUANIN ( G ) CITOZIN ( C )

Građa i tipovi nukleotida RNK

Molekularna biologija
STRUKTURA I TIPOVI RNK

Puni nazivi nukleotida koji grade RNK su:

adenozin 5’-monofosfat
(AMP)

guanozin 5’-monofosfat
(GMP)

citidin 5’-monofosfat
(CMP)

uridin 5’-monofosfat
(UMP)

Molekularna biologija
STRUKTURA I TIPOVI RNK

Molekuli RNK su uvek jednolančani ( jedan polinukleotidni lanac).


Nukleotidi u lancu su kao i kod DNK povezani fosfodiestarskim vezama

Fosfatna grupa

Riboza

Baza

RNK

Molekularna biologija
STRUKTURA I TIPOVI RNK

Sekundarna struktura formira se tako što komplementarne baze A, U i G,C grade kraće ili duže zavojnice
unutar istog lanca vezujući se vodoničnim vezama.

Antikodon

Mesto za
vezivanje
A.K.

Model molekula tR.N.K. sa prikazanom sekundarnom struturom

Molekularna biologija
STRUKTURA I TIPOVI RNK

DNK RNK
DNK Dvolančani molekul Jednolančani molekul

Dezoksiriboza Riboza

Timin Uracil

RNK

Molekularna biologija
STRUKTURA I TIPOVI RNK

Osobine DNK RNK


Izgrađeni od nukleotida Da Da
Dezoksiriboza - na C2 atomu Riboza - na C2 atomu ima
Tip pentoza (šećera)
ima vodonik hidroksilnu grupu
Baze A,G,C,T A,G,C,U
Nukleotidi lanca su povezani
Da Da
fosfodiestarskom vezom
Lanci Obično dupli Obično jednostruki
Sekundarna struktura Dupli heliks Više tipova
Stabilnost Vrlo stabilni molekuli Lako se degraduju

Molekularna biologija
STRUKTURA I TIPOVI RNK

Tipovi RNK

Kod Prokariota postoje samo 3 osnovna tipa RNK molekula :

iRNK (mRNK) rRNK tRNK


informacione RNK ribozomske RNK transportne RNK

Molekularna biologija
STRUKTURA I TIPOVI RNK

Molekuli iRNK su prenosioci genetičke informacije sa DNK na protein i služe kao matrica za sintezu
polipeptida. Nastaju prepisivanjem genetičke šifre sa DNK u jedru (transkripcija) i tu šifru prenose do
ribozoma u citoplazmi.

tRNK Ribozomi

Molekuli tRNK prenose amino kiseline do ribozoma Molekuli rRNK učestvuju u građi
gde se povezuju sa iRNK i učestvuju u prevođenju ribozoma gde se odvija sinteza
genetičke šifre u redosled aminokiselina u proteina.
polipeptidu.

Molekularna biologija
STRUKTURA I TIPOVI RNK

Kod Eukariota postoje 4 osnovna tipa RNK molekula :

Predstavljaju prepise gena koji kodiraju polipeptide i one se


iRNK (mRNK) prevode u procesu translacije u redosled aminokiselina u
informacione RNK polipeptidu.

rRNK Ulaze u sastav ribozoma i obavljaju katalitičke aktivnosti u


njima.
ribozomske RNK

Dovode aminokiseline do ribozoma ali i dešifruju genetičku


tRNK šifru sa iRNK i prevode je u redosled aminokiselina.
transportne RNK

snRNK Učestvuju u obradi primarnog prepisa iRNK


male nuklearne RNK

Sintezom svih vidova RNK upravlja DNK. TRANSKRIPCIJA.


Molekularna biologija

You might also like