세포와 관련된 다양

한 이론적 실험
STEPUP-2 차시
목차

■ 생명과학 실험도구 설명
■ 생명과학 첨단기자재 설명
■ 백조목 플라스크 실험
■ 그리피스 실험
■ 에이버리 - 매크로드 - 맥카티 실험
■ 허쉬 - 체이스 실험
■ 비들 - 테이텀 실험
■ 메셀슨 - 스탈 실험
■ cf) Blue-White Screening
생명과학 실험도구 설명

■ micropipette
– 마이크로 단위로 물질을 움직일 때 사용함 . 눈금을 돌려 물질을 움직이며 ,
스프링에 의해 고정되는 부분 까지만 pipette 을 눌러야 원하는 양 만큼을 덜
어낼 수 있음 . 또한 , 그래야 pipette 을 오래 사용할 수 있음 . ( 개당 20~30
만원 선 )
– pipette tip 은 한번 사용하면 버려야 하지만 , 국내 연구 지원이 부족한 실험실
에서는 비싼 pipette tip 소모비용 때문에 재사용하는 편이 강함 .
생명과학 실험도구 설명

■ e-tube(eppendorf tube)
– eppendorf 사의 tube 가 널리 사용되어 그 이름이 굳혀져 고유명사처럼 쓰임 .
여러 물질들을 옮기고 , centrifuge, heat block 등에 넣을 때 사용함 .
(centrifuge, heat block 등이 대부분 eppendorf 사의 것임 ..)
– tube rack 위에 비치할 수 있음 .
생명과학 실험도구 설명

■ LB plate
– E.coli 등의 균을 기르며 실험을 진행하는 곳 . 주로 Gel 로 이루어져 있으며 ,
균이 colony 를 형성하기 위해 최소한의 영양분을 가지고 있음 . Ampicillin 등
의 다양한 항생제가 들어간 LB plate 도 존재함 .
■ culture plate
– 균이나 시료 등을 여러 군데에 나누어 놓아서 물질을 관찰 , 실험하는 곳 .
RT-PCR 등 다양한 첨단기자재에 culture plate 에 시료를 놓은 상태로 넣는 경
우가 대부분임 .
생명과학 실험도구 설명

■ parafilm
– LB plate 등의 시료를 밀봉할 때 사용 . 잘 늘어나고 , 기본적으로는 접착력이
없지만 매끈매끈한 플라스틱이나 유리 등에 꽉 누르면 잘 달라붙는 편임 . 허
접해보이는 외형과는 달리 생각보다 비싼 녀석 .
■ wiper
– wiper 이지만 kimtech 라고 통상적으로 부른다 . kimteh 사의 것 밖에 사용하지
않기 때문이다 . 이 녀석도 마찬가지로 굉장히 비싸서 , 실험실에서는 막 쓰
지 않는 녀석임 . 막 쓰다 lab 에서 혼날 수도 있으니 주의 .
생명과학 첨단기자재 설명

■ autoclave
– 고압 멸균기 . 밥솥같이 생겨서 밥솥이라고 부름 . 저래봐도 몇백은 하는 물
건.
■ incubator
– 배양기 . 동물세포 , 식물 등 다양한 배양기가 존재 . 아쉽게도 동물실험은
모종의 이유로 학교에서는 금지됨 .
■ fume hood
– 멸균이 되어 있는 환풍기 달린 조그만 철제 박스 . 박스인데 더럽게 비쌈 .
생명과학 첨단기자재 설명

■ RT-PCR
– 유전자를 증폭시키는 기기 . 유전자가 증폭되었는지는 전기 영동을 통해 알
아볼 수 있음 . 집에 있는 컴퓨터보다 작지만 대당 2000~5000 만 원의 매우
비싼 고가의 물건 .
– 코로나 19 검사에서 검출된 유전자를 RT-PCR 을 통해 증폭시킨 후 , 증폭된
유전자를 통해 코로나 19 확진 판정을 내림 .
■ gel documentation system/western imaging system
– 둘이 같이 사용함 . 분광학적인 원리를 이용해 물질은 구분해줌 .
생명과학 첨단기자재 설명

■ microtome
– 세포 등의 시료를 현미경 관찰 등을 위해 마이크로 단위로 잘게 절편으로 쪼
개는 기기 . 동결해서 자르는 것과 그냥 자르는 것으로 구분되어 있음 . 잘못
해서 손가락까지 같이 잘릴 수 있으니 주의 .
■ freeze dryer
– 초저온에서 건조시키는 동결건조기 . 24 시간 동안 돌리면 대부분 건조되어
있음 . 유기체 시료의 경우 SEM 을 찍기 위해 수분을 빼는 데 필수적임 .
생명과학 첨단기자재 설명

■ fluorescence microscope
– 형광현미경 . 세포 내에 형광을 띄는 물질들의 분포를 알아보거나 관찰 대상을 형
광 물질로 염색해 대상의 이동이나 분포 등을 관찰함 . 얘 하나에 세단 1 대 .
■ scanning electron microscope(SEM)
– 어디서 굉장히 많이 본 것 같은 사진을 뽑아내는 현미경 . 매우 작은 물체의 표면
을 관찰하는 데 사용됨 . 주로 옆에 energy dispersive x-ray spectroscopy(EDS) 와 함
께 사용함 . 크기에 걸맞게 한 대당 아파트 1 채 가격임 .
■ transmission electron microscope(TEM)
– SEM 과는 다르게 주로 시료의 단면을 촬영하는 데 사용됨 . 단면을 촬영한 것을
적층하여 전체적인 시료의 3D 모습을 관찰할 수 있음 . 국내에 몇 대 없는 ( 사실
SEM 도 많지 않음 ) 매우매우 비싼녀석 . 사실 잘 쓰일 데도 없다 .
백조목 플라스크 실험

■ 루이 파스퇴르의 실험
■ 살균되고 , 밀폐된 공간 내에서 유기물을 가열하여 부패여부를 판단함 .
■ 자연발생설을 부정하게 되는 실험임 .
그리피스 실험

■ 폐렴쌍구균을 이용한 형질 전환을 발견한 실험 .

– S(Smooth) 형 균 : 다당류 협막을 가지고 있어 매끈한 콜로니를 형성함 . 숙주
면역계에 내성이 있음 . ( 병원성 O)
– R(Rough) 형 균 : 다당류 협막이 없어 거친 콜로니를 형성함 . 숙주 면역계에
내성이 없어 쉽게 파괴됨 . ( 병원성 X)
■ 죽은 S 형 균에 있던 어떤 물질에 의해 살아있는 R 형 균이 S 형 군으로 형질 전
환되었다 .
에이버리 - 매크로드 - 맥카티 실험

■ 열처리로 죽은 S 형 균에 단백질 분해 효소 , RNA 분해 효소 , DNA 분해 효소를

처리한 후 살아있는 R 형 균과 배양함 .
– DNA 분해 효소를 처리한 경우 S 형 균이 관찰되지 않음 . 나머지 경우에 S
형 균이 관찰됨 .
■ DNA 가 R 형 균을 S 형 균으로 형질 전환시킨 물질임을 간접적으로 보임 .
허쉬 - 체이스 실험

■ 방사성 동위 원소 S(A=35) 로 단백질을 표지한 박테리오파지와 방사성 동위 원소

P(A=32) 로 DNA 를 표지한 박테리오파지를 각각 대장균에 감염시켜 후에 방사능
이 검출되는지 여부를 판단함 .
– 단백질 : C, H, O, N, S
– DNA: C, H, O, N, P
– S(A=35) 로 표지한 파지의 경우 단백질 껍질이 있는 상층액에서 방사선이 검
출됨 . P(A=32) 로 표지한 파지의 경우 대장균의 침전물이 있는 곳에서만 방
사선이 검출됨 .
■ 파지의 DNA 만이 대장균 안으로 들어가며 , 이 DNA 가 다음 세대의 파지를 만
드는 유전 물질임을 보임 .
비들 - 테이텀 실험

■ 1 유전자 1 효소설을 증명하기 위한 실험 . 이것이 훗날 1 유전자 1 폴리펩다이드

설로 이어짐 .
■ 붉은빵곰팡이 야생형 균주와 영양 요구성 균주들을 통해 실험을 진행함 .
메셀슨 - 스탈 실험

■ 대장균을 질소 동위원소의 배지에서 배양한 후 실험 .

■ DNA 추출 후 원심분리기를 통해 DNA 를 밀도에 따라 구분함 .
■ 질량이 클수록 밀도가 높아 밑으로 내려가고 , 질량이 작을수록 밀도가 낮아 위로
올라감 .
– 용매 : 6M CsCl(d=1.7g/cm^3) 을 사용 .
– N(A=14) E.coli DNA(1.710g/cm^3)
– N(A=15) E.coli DNA(1.724g/cm^3)
– 원심분리기 : 평형 밀도구배 원심분리기 사용 .
메셀슨 - 스탈 실험

■ N(A=15) 로 이루어진 DNA 가 N(A=14) 가 포함된 배지에서 복제된 1 세대의

N(A=14) 와 N(A=15) 를 포함한 DNA 가 생성되어 중간 무게의 DNA 띠가 이루어
진다 .
■ 2 세대에서는 N(A=14), N(A=15) 를 포함한 DNA 와 N(A=14) 만을 포함한 DNA
가 생겨 중간 무게의 DNA 와 가벼운 무게의 DNA 2 개의 띠가 만들어진다 .
메셀슨 - 스탈 실험

■ DNA 의 반보존적 복제를 증명함 .

QUIZ

■ 메셀슨 - 스탈 실험 결과로 지지되는 모델을 바탕으로 3rd Generation E.coli 의 가

벼운 DNA 의 비율은 몇 % 인지 구해보자 .
■ 위를 바탕으로 nth Generation E.coli 의 ( 가벼운 DNA):( 중간 DNA):( 무거운
DNA) 의 비율을 알아보자 .
ANSWER

■ 3:1 의 비율
■ 2^(n-1)-1:1 의 비율
Blue-White Screening

■ transformation 을 이용한 실험 .
■ 형질전환된 대장균은 Ampicillin 에 대해 저항성을 가지는 것을 통하여 , 어떤 대
장균이 형질전환되었는지를 판단하는데 쓰임 .
■ 자세한 것은 한글파일을 통해서 !