Uputstvo za odreivanje biohemijske potronje kiseonika (BPK5)

Pribor:

1) BPK inkubator
2) Birete
3) Vinklerovi sudovi, 300 mL
4) Erlenmajeri, 500 mL
5) Pipete i propipete
6) Menzure, 250 mL
7) pric boca

Reagensi:
1) Kalcijum-hlorid (rastvoriti 27,5g anhidrovanog CaCl2 u destilovanoj vodi u normalnom sudu
od 100mL i dopuniti vodom do oznake)
2) Magnezijum-sulfat (rastvoriti 22,5g MgSO4 u destilovanoj vodi u normalnom sudu od 100mL
i dopuniti vodom do oznake)
3) Gvoe-(III)-hlorid (rastvoriti 0,15g FeCl3 u destilovanoj vodi u normalnom sudu od 100mL i
dopuniti vodom do oznake)
4) Fosfatni pufer (odmeriti 8,5g KH2PO4 i rastvoriti u destilovanoj vodi, dodati 21,75g K2HPO4 i
33,4g Na2HPO4*7H2O, nakon oga dodati 1,7g NH4Cl, prebaciti u normalni sud od 1L i dopuniti
do oznake)
5) Vinkler 1, rastvor (rastvoriti 480g MnSO4*4H2O ili 400g MnSO4*2H2O ili 364g MnSO4*H2O u
svee kljualoj i ohlaenoj destilovanoj vodi u normalnom sudu zapremine 1L i dopuniti do
oznake destilovanom vodom)
6) Vinkler 2, rastvor (rastvoriti 700g KOH i 150g KI u svee kljualoj i ohlaenoj destilovanoj
vodi u normalnom sudu zapremine 1L i dopuniti do oznake destilovanom vodom. Rastvoriti 10g
natrijum azida NaN3 u 40mL destilovane vode i dodati alkalnom rastvoru jodida)
7) Sumporna kiselina, koncentrovana
8) Skrob ( odmeriti 2g skroba i rastvoriti u 100mL vrue destilovane vode)
9) Natrijum-tiosulfat, standardni rastvor ( odmeriti oko 25g Na2S2O3*5H2O i rastvoriti u svee
kljualoj i ohlaenoj destilovanoj vodi u normalnom sudu zapremine 1L i dopuniti do oznake
destilovanom vodom. Dodati 1g NaOH za konzerviranje ovog rastvora)
10) Destilovana ili dejonizovana voda

Priprema vode za razreenje:

U 5L destilovane vode dodati po 5mL rastvora CaCl2, MgSO4 i FeCl3 i 5mL fosfatnog pufera.

Postupak:

Priremiti 4 Vinklerova suda (dva za uzorak, dva za slepu probu). Dodati po 10mL uzorka u dva
suda i dopuniti sudove vodom a razreenje. Druge dve boce napuniti samo vodom za razreenje.
Nakon toga boce odmah zatvoriti i oznaciti za identifikaciju.
Jedan sud sa uzorkom i jedan sa slepom probom inkubirati 5 dana na 20oC.
U preostalim bocama odmah odrediti koncentraciju rastvorenog kiseonika.
Nakon 5 dana izvaditi boce iz inkubatora i odrediti koncentraciju rastvorenog kiseonika
Odreivanje koncetracije rastvorenog kiseonika

Pipetom zaronjenom do dna suda dodati 2 mL rastvora Vinkler 1( MnCl2), zatim 2 mL rastvora
Vinkler 2 (KOH, KI i NaN3). Sud se paljivo zatvori da ne ostane mehuri vazduga i promuka
okretanjem. Saekati da se talog slegne a zatim polako pipetom zaronjenom do dna dodati 2 mL
koncentrovane sumporne kiseline. Nakon rastvaranja taloga uzorak se kvantitativno prenese u
erlenmajer i titruje standardnim rastvorom Na2S2O3. Zapisati zapreminu utroenog standardnog
rastvora za izraunavanje koncentracije rastvorenog kiseonika.

Proraun:

Izraunavanje koncentracije rastvorenog kiseonika:

eq g
mg
V ( mL )N ( )
L
10008( )
eq
O2( )
L
=
( V w 4 ) mL
V - zapremina utroenog rastvora Na2S2O3 (mL)
N normalitet rastvora Na2S2O3 (eq/L)
Vw zapremina Vinklerove boce (mL)
8 hemijski ekvivalent kiseonika

Izraunavanje BPK5

BPK 5=( c 1c 2 )(c 3c 4 )

c1 - koncentracija rastvorenog kiseonika u uzorku, na poetku (mg/L)

c2 - koncentracija rastvorenog kiseonika u slepoj probi, na poetku (mg/L)
c3 - koncentracija rastvorenog kiseonika u uzorku, nakon 5 dana (mg/L)
c1 - koncentracija rastvorenog kiseonika u slepoj probi, nakon 5 dana (mg/L)