Machine Translated by Google

NGHIÊN CỨU BAN ĐẦU xuất

bản: 03 tháng 11 năm 2015 doi:

10.3389 / fpls.2015.00955

Arabidopsis LEAFY COTYLEDON1 kiểm soát

việc xác định số phận tế bào trong quá
trình phát triển sau phôi thai
Mingkun Huang1,2, Yilong Hu1,2, Xu Liu1, Yuge Li1 và Xingliang Hou1 *

1
Phòng thí nghiệm chính của Phân tích phân tử thực vật nông nghiệp Nam Trung Quốc và cải thiện di truyền, Bách thảo Nam Trung Quốc
2
Garden, Học viện Khoa học Trung Quốc, Quảng Châu, Trung Quốc, Đại học Viện Khoa học Trung Quốc, Bắc Kinh, Trung Quốc

Yếu tố phiên mã Arabidopsis LEAFY COTYLEDON1 (LEC1) là cơ quan điều hòa tổng thể định hình sự

phát triển phôi thực vật và hình thành cây con sau phôi.

Sự mất chức năng của LEC1 làm thay đổi nhận dạng của lá mầm, gây ra sự hình thành trichomes

ngoài tử cung, điều này không xảy ra ở cây con hoang dại, ngụ ý rằng LEC1 có thể điều chỉnh việc

xác định số phận tế bào phôi trong quá trình phát triển sau phôi. Để kiểm tra giả thuyết này,

chúng tôi so sánh sự biểu hiện của các gen liên quan đến sự phát triển trichome giữa kiểu hoang

dã và đột biến lec1. Chúng tôi quan sát thấy rằng các bản sao của GLABROUS1 (GL1), GL2 và GL3,

các gen mã hóa các gen điều hòa tích cực trong sự phát triển trichome, được điều chỉnh đáng kể,

trong khi các gen TRICHOMELESS1 (TCL2), NÂNG CAO THỬ VÀ CPC1 (ETC1), và các gen ETC2, mã hóa

các chất điều hòa tiêu cực trong sự phát triển trichome, đã được điều chỉnh giảm ở thể đột biến

Sửa bởi: lec1.

Anja Geitmann,
Hơn nữa, sự biểu hiện quá mức của LEC1 đã kích hoạt các biểu hiện của TCL2, CAPPICE (CPC) và
Đại học Montréal, Canada
ETC1, dẫn đến việc tạo ra các lá mầm có không hoặc ít trichome trong quá trình phát triển sinh
Xét bởi:

Sergey Morozov, dưỡng. Ngoài ra, chúng tôi đã chứng minh rằng LEC1 tương tác với TCL2 trong nấm men và trong
Đại học Tổng hợp Moscow, Nga
ống nghiệm. Một thí nghiệm di truyền cho thấy rằng sự mất chức năng của GL2 đã giải cứu sự hình
Biswapriya Biswavas Misra,
thành trichome ngoài tử cung ở thể đột biến lec1.
Đại học Florida, Hoa Kỳ

Những phát hiện này ủng hộ mạnh mẽ rằng LEC1 điều chỉnh sự phát triển trichome, cung cấp bằng
* Thư từ: Xingliang

Hou chứng trực tiếp cho vai trò của LEC1 trong việc xác định số phận tế bào trong quá trình phát
houxl@scib.ac.cn
triển sau phôi thai.

Phần chuyên môn: Từ khóa: Arabidopsis, LEAFY COTYLEDON1, trichome, xác định số phận tế bào, phát triển sau phôi
Bài báo này đã được gửi đến

Sinh học tế bào

thực vật, một phần của tạp chí

GIỚI THIỆU
Biên giới trong Khoa học Thực vật

Nhận: ngày 22 tháng 7 năm 2015

Ở thực vật bậc cao, quá trình phát sinh phôi thường kết thúc với thời gian ngủ đông để phát triển
Được chấp nhận: 20 tháng 10 năm 2015
bào tử trong tương lai. Một khi điều kiện thuận lợi, hạt giống nảy mầm và trải qua quá trình phát
Xuất bản: 03 tháng 11 năm 2015
triển sau phôi, trong đó các tế bào có được các số phận cụ thể. Các nghiên cứu mở rộng đã chỉ ra
Trích dẫn:
rằng việc xác định số phận tế bào cụ thể trong quá trình phát triển sau phôi thai được kiểm soát
Huang M, Hu Y, Liu X, Li Y và Hou X (2015)
chính xác bởi nhiều yếu tố phiên mã (Peris và cộng sự, 2010; Perianez-Rodriguez và cộng sự, 2014).
Arabidopsis LEAFY COTYLEDON1
kiểm soát việc xác định số phận tế Yếu tố phiên mã Nhân tố hạt nhân Y (NF-Y) thực vật LEAFY COTYLEDON1 (LEC1), một bộ điều chỉnh chính

bào trong quá trình phát triển sau phôi kiểm soát sự hình thành phôi (Meinke, 1992; West và cộng sự, 1994; Harada, 2001; Lee và cộng sự,
thai. Đổi diện. Khoa học thực vật. 6: 2003), đã được tiết lộ gần đây đóng một vai trò tiềm năng trong việc điều chỉnh sự phát triển sau
955. doi: 10.3389 / fpls.2015.00955 phôi thai (Junker và Baumlein, 2012). LEC1 được thể hiện ở cả phôi đang phát triển và cây con sau phôi, nhưng

Biên giới trong Khoa học Thực vật | www.frontiersin.org 1 Tháng 11 năm 2015 | Tập 6 | Điều 955
Machine Translated by Google
Huang và cộng sự.
không có trong lá thật sinh dưỡng (Kwong và cộng sự, 2003; Warpeha
và cộng sự, 2007; Le và cộng sự, 2010). Sự mất chức năng của LEC1
gây ra kiểu hình đa hướng, bao gồm không dung nạp phôi thai và
khiếm khuyết trong việc tích lũy các hợp chất lưu trữ hạt trong hạt
đang phát triển, cũng như lá mầm có trichomes, phát triển sớm mô
mạch và tế bào trung mô, và các lá mầm ngắn ở giai đoạn đầu cây con
(Meinke, 1992; Meinke và cộng sự, 1994; West và cộng sự, 1994;
Brocard-Gifford và cộng sự, 2003). Ngược lại, biểu hiện ngoài tử
cung LEC1 cho phép cây con ở trạng thái phôi với một lá mầm chưa
nở ra sau khi nảy mầm và đủ để tạo ra sự chuyển đổi lá thật thành
các cấu trúc phôi thiếu trichomes (Lotan và cộng sự, 1998; Junker
và cộng sự, 2012) . Những phát hiện này ủng hộ vai trò đa chức năng
của LEC1 trong quá trình phát triển phôi và sau phôi.
Trichomes bắt nguồn từ lớp tế bào biểu bì mà nhân của chúng đã trải
qua nhiều vòng nhân giống, sau đó sẽ to ra và mở rộng ra khỏi bề
mặt (Hulskamp và cộng sự, 1994; Pattanaik và cộng sự, 2014). Quy
định của sự hình thành trichome đã được ghi nhận trong nhiều nghiên
cứu. Yếu tố phiên mã R2R3 MYB GLABROUS1 (GL1) là yếu tố điều hòa
tích cực đầu tiên được xác định liên quan đến sự phát triển trichome
(Marks và Feldmann, 1989; Oppenheimer và cộng sự, 1991). GL1 tương
tác với yếu tố phiên mã bHLH GLABRA3 (GL3), chất NÂNG CAO tương
đồng gần của nó của GLABRA3 (EGL3) và yếu tố lặp lại WD40 TRANSPARENT
TESTA GLABRA1 (TTG1), dẫn đến sự hình thành trichome dương tính
lặp lại MYB-bHLH-WD phức hợp phiên mã (Zhao và cộng sự, 2008). Phức
hợp protein này sau đó gây ra sự hình thành trichome bằng cách kích
hoạt sự biểu hiện của gen hạ lưu GLABRA2 (GL2), mã hóa yếu tố phiên
mã homeodomain-leucine (HD-Zip) (Rerie et al., 1994; Morohashi et
al., 2007). Ngược lại, một họ protein R3 MYB đơn lặp lại nhỏ, bao
gồm TRICHOMELESS1 (TCL1), TCL2, TRIPTYCHON (TRY), CAPPICE (CPC),
ENHANCER OF TRY AND CPC1 (ETC1) và ETC2, đóng các vai trò dư thừa
trong quy định tiêu cực của phát triển trichome. Các protein này
cạnh tranh với GL1 để liên kết với GL3 / EGL3, dẫn đến việc hình
thành một phức hợp protein không hoạt động, không thể kích hoạt biểu
hiện GL2 và do đó ngăn chặn sự hình thành trichome (Wang và Chen,
2014; Zhou và cộng sự, 2014).
Sự hình thành Trichome được coi là đặc điểm phân biệt lá thật
với lá mầm ở Arabidopsis (Chandler, 2008). Một giả thuyết cho sự
hình thành trichome ngoài tử cung trên các lá mầm của đột biến lec1
là sự mất chức năng của LEC1 có thể dẫn đến sự xáo trộn trong việc
xác định số phận tế bào phôi, cho phép các sự kiện hậu nảy mầm sớm
trong đó các lá mầm được chuyển đổi một phần thành lá thật. (West
và cộng sự, 1994; Chandler, 2008). Tuy nhiên, cơ chế mà LEC1 hoạt
động trong việc xác định số phận tế bào trong quá trình phát triển
sau phôi thai vẫn còn khó hiểu.
Do đột biến LEC1 gây ra sự phát triển đáng kể của trichome ngoài
tử cung trên các lá mầm, các gen liên quan đến trichome có thể đóng
vai trò là ứng cử viên tốt để nghiên cứu chức năng của LEC1 trong
giai đoạn phát triển sau phôi. Ở đây, chúng tôi đã chứng minh rằng
LEC1 ngăn chặn sự phân hóa tế bào trichome trong quá trình phát
triển sau phôi bằng cách điều chỉnh các gen liên quan đến trichome.
Ngoài ra, LEC1 đã được chứng minh là tương tác với TCL2, một bộ kìm hãm
Biên giới trong Khoa học Thực vật | www.frontiersin.org
LEC1 kiểm soát xác định số phận tế bào
của sự phát triển trichome, chỉ ra rằng LEC1 có thể kết hợp với các
yếu tố phiên mã khác để cùng điều chỉnh sự hình thành trichome. Một
thí nghiệm di truyền cho thấy sự mất chức năng của GL2 đã giải cứu
kiểu hình phát triển trichome ngoài tử cung của thể đột biến lec1.
Những kết quả này đã ủng hộ mạnh mẽ quan điểm rằng LEC1 có chức năng
xác định số phận tế bào trong giai đoạn sau phôi thai, cung cấp
những hiểu biết mới về vai trò của LEC1 ngoài quá trình hình thành
phôi.
NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP
Vật liệu thực vật và điều kiện sinh trưởng Tất cả các cây
Arabidopsis được sử dụng trong nghiên cứu này đều có nền tảng di
truyền Col. Gl2 đột biến đã được mô tả trước đây (Wang và cộng sự,
2010). Đột biến lec1-4 (Salk_095699) được lấy từ Trung tâm Tài
nguyên Sinh vật Arabidopsis (http: // www.arabidopsis.org). Dòng
chuyển gen pER10: LEC1- MYC cảm ứng estradiol thu được bằng cách
chọn lọc kanamycin sau khi biến nạp (Mu et al., 2008). Thể đột biến
kép được tạo ra bằng cách lai giữa gen. Sau khi khử trùng bề mặt,
hạt được gieo trên môi trường Murashige và Skoog nửa cường độ có
chứa 0,8% agar và ủ ở 4 C trong bóng tối trong 3 ngày. Sau đó, cây
con được chuyển sang buồng sinh trưởng ở 22 C trong điều kiện
ngày dài (16 giờ sáng / 8 giờ tối). Đối với xử lý bằng estradiol,
10 μM estradiol được thêm vào đĩa môi trường Murashige và Skoog
nửa cường độ và dimethyl sulfoxide, dung môi cho estradiol, được
dùng làm phương pháp xử lý giả. Sau khi xử lý, những cây con này
được thu hoạch để phân tích thêm.
Kính hiển vi Sự
hình thành trichomes trên lá mầm và lá được quan sát và chụp ảnh
bằng kính lập thể LEICA M165C (Leica, Wetzlar, Đức).
Phân tích thống kê Các cây
con năm ngày tuổi được quan sát để tính toán tần suất xuất hiện của
các bộ ba ngoài tử cung trên các lá mầm. Ít nhất 15 Col và 50 cây
con lec1-4 được sử dụng trong mỗi thí nghiệm. Dữ liệu đại diện cho
trung bình ± SD của ba lần lặp lại độc lập. Để tính toán tần số của
các loại trichome khác nhau trên lec1-4 lá mầm, ít nhất 50 trichome
đã được phân tích trong mỗi thí nghiệm. Dữ liệu đại diện cho giá
trị trung bình ± SD của bảy lần lặp lại độc lập.
Phân tích biểu hiện gen RNA tổng số
được chiết xuất từ cây con Arabidopsis 5 ngày tuổi bằng Bộ RNA thực
vật (OMEGA, Atlanta, GA, USA), theo hướng dẫn của nhà sản xuất. Một
microgram RNA tổng số đã được sử dụng cho phản ứng phiên mã ngược.
CDNA sợi thứ nhất được tổng hợp bằng cách sử dụng enzym phiên mã
ngược M-MLV (Promega, Madison, WI, USA), theo hướng dẫn của nhà
sản xuất. Định lượng PCR thời gian thực được thực hiện bằng hệ
thống LightCycler480 (Roche, Basel, Thụy Sĩ) với tổng thể tích là
10 μl, với 0,25 μl mỗi mồi (10 μM), 1 μl sản phẩm cDNA và 5 μl SYBR
Premix ExTaq ( Takara, Tokyo, Nhật Bản). Chương trình PCR bao gồm
một bước biến tính ban đầu tại
2 Tháng 11 năm 2015 | Tập 6 | Điều 955
Machine Translated by Google
Huang và cộng sự.
94 C trong 1 phút, tiếp theo là 40 chu kỳ trong 10 s ở 94
ở 60 C. Mỗi mẫu được định lượng ít nhất trong ba lần và chuẩn hóa
bằng cách sử dụng gen TUB2 làm kiểm soát nội bộ. Các loại mồi được sử
dụng trong nghiên cứu này được liệt kê trong Bảng bổ sung S1.
Xét nghiệm lai hai nấm men Trình tự mã
hóa có chiều dài đầy đủ của LEC1 và TCL2 được khuếch đại và nhân bản
thành vectơ pGBKT7 và pGADT7 (Clontech, Palo Alto, CA, USA), tương
ứng. Các chất mồi được liệt kê trong Bảng bổ sung S1. Các thử nghiệm
lai hai nấm men được thực hiện theo hướng dẫn của nhà sản xuất của
Hệ thống chuyển đổi nấm men Yeastmaker 2 (Clontech). Tóm lại, một
khuẩn lạc nấm men AH109 đơn lẻ được ủ ở 30 ° C qua đêm (OD600 > 1,0).
Các tế bào được thu hoạch bằng cách ly tâm và sau đó được ngâm lại
trong 25 mL ddH2O. Sau khi thu hoạch lại các tế bào bằng cách ly tâm,
dung dịch 1 × Tris-EDTA / LiAc vô trùng 1,5 ml được thêm vào để chuẩn
bị các tế bào có khả năng sinh men. Đối với thử nghiệm lai hai nấm
men, plasmid mồi (0,5 μg) và / hoặc mồi (0,5 μg) với 0,1 mg DNA mang
được đồng biến nạp vào các tế bào có thẩm quyền của nấm men bằng dung
dịch Polyethylene glycol / LiAc. Sau khi ủ ở 30 ° C trong 30 phút, 70
μL dimethyl sulfoxide được thêm vào và tiếp tục ủ ở 42 ° C trong 15
phút. Các tế bào
được ly tâm và rửa bằng dung dịch Tris-EDTA. Sau khi biến nạp, tế bào
nấm men được nuôi cấy trên môi trường SD / -Trp / -Leu / - His / -Ade
để thử nghiệm tương tác.
Thử nghiệm kéo xuống Để tạo
ra các protein tái tổ hợp glutathione-S-transferase (GST) -TCL1, GST-
TCL2, GST-CPC, GST-ETC1, His-LEC1 và His-GFP, trình tự mã hóa có chiều
dài đầy đủ của các gen được thử nghiệm tương ứng được nhân bản thành
vectơ pGEX-4T-1 (Pharmacia, Piscataway, NJ, USA) hoặc pQE30 (QIAGEN,
Dusseldorf, Germany).
Các chất mồi được liệt kê trong Bảng bổ sung S1. Những cấu trúc này
được biến đổi thành chủng Escherichia coli Rosetta DE3 (Novagen,
Billerica, MA, USA). Một trăm mililit (OD600 ≈ 0,5) chủng Rosetta chứa
các vectơ khác nhau được ủ ở 16 C trong 16 giờ với 0,1 mM isopropyl
β D-1-thiogalactopyranoside. Các protein dung hợp GST hòa tan được
tinh chế bằng cách sử dụng các hạt glutathione sepharose (Amersham
Biosciences, Piscataway, NJ, USA), trong khi các protein dung hợp của
His được tinh chế bằng cách sử dụng hạt agarose axit Ni-nitrilotriacetic
(QIAGEN), theo hướng dẫn của nhà sản xuất. Đối với các thử nghiệm kéo
xuống, 2 μg His-LEC1 hoặc His-GFP được ủ với các protein dung hợp GST
hoặc GST cố định trong đệm liên kết (50 mM Tris-HCl, pH 8,0, 100 mM
NaCl và 1 mM EDTA) ở 4 C trong 4 giờ. Sau khi rửa bằng đệm liên kết
ba lần, các protein giữ lại trên hạt sau đó được phân giải bằng điện
di polyacrylamide natri dodecyl sulfat và được phát hiện bằng kháng
thể kháng His (GBI, Bắc Kinh, Trung Quốc).
KẾT QUẢ
Ectopic Trichome hình thành trên
Lá mầm của đột biến lec1
Các nghiên cứu mở rộng đã chỉ ra rằng LEC1 đóng vai trò như một bộ
điều chỉnh chính trong sự phát triển của phôi, phù hợp với
Biên giới trong Khoa học Thực vật | www.frontiersin.org
LEC1 kiểm soát xác định số phận tế bào
C và 1 phút biểu hiện ở hạt đang phát triển (Kwong và cộng sự, 2003). Tuy nhiên,
những quan sát gần đây cho thấy vai trò tiềm năng của LEC1 trong quá
trình biệt hóa tế bào sau phôi thai, bao gồm kéo dài hypocotyl và hình
thành mô mạch, tế bào trung mô và trichomes (Warpeha và cộng sự, 2007;
Junker và Baumlein, 2012; Junker và cộng sự, 2012 ; Hình bổ sung S1A).
Đóng vai trò là một hệ thống mô hình chung trong nghiên cứu xác định
số phận tế bào ở Arabidopsis (Yang và Ye, 2013), chúng tôi tập trung
vào sự hình thành trichome để tiết lộ chức năng của LEC1 trong quá
trình phát triển sau phôi thai. Nghiên cứu này đã sử dụng một alen
lec1-4 rò rỉ chịu khô hạn có hạt trưởng thành nảy mầm bình thường (dữ
liệu chưa được công bố). Phù hợp với các báo cáo trước đó, các lá
mầm kiểu hoang dại có màu sáng, trong khi 85% các lá mầm lec1 tạo ra
một số lượng đa dạng các trichome ngoài tử cung (Hình 1A; Bảng bổ sung
S2). Hơn nữa, không giống như các trichomes chủ yếu là ba nhánh phát
triển trên lá thật, các trichomes trên lá mầm lec1 chủ yếu không phân
nhánh ( 44%) hoặc hai nhánh ( 55%), và hiếm khi ba nhánh (ít hơn 1%;
Hình 1B; Bổ sung Bảng S3). Những quan sát này ngụ ý sự chuyển đổi
không hoàn toàn của lá mầm lec1 thành lá thật.
Ngoài ra, không có sự khác biệt đáng kể nào được quan sát thấy về số
lượng trichome hoặc hình thái của lá hoa thị giữa loại hoang dã và
lec1, điều này phù hợp với quan sát rằng không có bản sao LEC1 nào
được tích lũy trong các mô sinh dưỡng (Hình bổ sung S1A, B).
Sự điều chỉnh sai các gen liên quan đến Trichome trong
sự hình thành Trichome đột biến lec1 trên lá đã được
nghiên cứu kỹ lưỡng trong suốt hai thập kỷ qua và một số gen liên
quan đến trichome đã được xác định, có thể được chia thành hai nhóm:
trichome dương và gen âm (Yang và Ye, 2013). Để kiểm tra xem liệu sự
tham gia của LEC1 trong việc ức chế sự hình thành trichome trên lá mầm
có xảy ra bằng cách làm trung gian điều hòa các gen liên quan đến
trichome, năm gen trichome dương và sáu gen trichome âm tính đã được
chọn để phân tích PCR thời gian thực định lượng ở loại hoang dã và
lec1 hay không cây con. Điều thú vị là trong số các gen dương tính
với trichome, các biểu hiện của GL1, GL2 và GL3 được điều chỉnh đáng
kể ở thể đột biến lec1 so với gen hoang dã, trong khi ở gen EGL3 và
TTG1 không có sự thay đổi (Hình 2A). Hơn nữa, các biểu hiện của các
gen âm tính trichome TCL2, ETC1 và ETC2 được điều chỉnh giảm đáng kể
ở thể đột biến lec1 so với kiểu gen hoang dã, trong khi ở gen TRY và
CPC có ít thay đổi.
Bảng điểm TCL1 hầu như không được phát hiện ở cây con hoang dã hoặc
lec1 (Hình 2B). Những kết quả này chỉ ra rằng sự hình thành trichome
ngoài tử cung có thể là do điều hòa sai các gen liên quan đến trichome
trong đột biến lec1.
Sự biểu hiện quá mức của LEC1 kích hoạt một số yếu tố
phiên mã âm tính với Trichome Cho rằng sự mất chức năng của LEC1
dẫn đến điều hòa sai các gen liên quan đến trichome, chúng tôi tự
hỏi liệu sự biểu hiện quá mức của LEC1 có thể kích hoạt hoặc đàn áp
các gen này hay không. Sự biểu hiện quá mức của LEC1, được thúc đẩy
bởi promoter 35S, gây ra phức tạp
3 Tháng 11 năm 2015 | Tập 6 | Điều 955
Machine Translated by Google
Huang và cộng sự.
HÌNH 1 | Sự hình thành trichome ngoài tử cung trên lá mầm đột biến lec1-4. (A) So sánh Col 5 ngày tuổi kiểu dại và lec1-4 lá mầm đột biến.
Thanh = 0,5 mm. Bảng bên phải cho biết tần suất cây con có (w /) hoặc không (w / o) trichomes ngoại tử trên lá mầm của chúng. (B) Ảnh hiển vi ánh sáng của ba loại nhánh trichome trên lá mầm
đột biến lec1-4. Thanh = 0,5 mm. Bảng bên phải cho biết tần số của các loại trichomes khác nhau. 0 cho biết không có nhánh nào trên trichome; 1 chỉ ra rằng trichome có hai nhánh; 2 chỉ ra một
trichome có ba nhánh.
HÌNH 2 | Điều chỉnh sai các gen liên quan đến trichome ở cây con đột biến lec1-4.
(A) Phân tích sự biểu hiện của các gen dương tính với trichome ở cây con kiểu hoang dại
Col 5 ngày tuổi và cây con đột biến lec1-4. (B) Phân tích sự biểu hiện của gen âm tính
trichome ở cây con kiểu hoang dại Col 5 ngày tuổi và cây con đột biến lec1-4. TUB2 được sử
dụng như một kiểm soát nội bộ. Dấu hoa thị cho thấy sự khác biệt đáng kể giữa Col và đột
biến lec1-4 (p <0,05, bằng phép thử t của Student).
kiểu hình và khả năng chết phôi (Lotan và cộng sự, 1998).
Do đó, thay vào đó, chúng tôi đã sử dụng cây chuyển gen cảm ứng
chứa pER10: LEC1-MYC, trong đó sự biểu hiện LEC1 có thể được gây
ra đáng kể bởi estradiol (Mu và cộng sự, 2008; Hình bổ sung S2).
Thật bất ngờ, trichome-positive
Biên giới trong Khoa học Thực vật | www.frontiersin.org
LEC1 kiểm soát xác định số phận tế bào
các gen GL1, GL2, GL3, EGL3 và TTG1 không được điều hòa bởi LEC1
cảm ứng (dữ liệu không được hiển thị). Tuy nhiên, sự biểu hiện quá
mức của LEC1 đã kích hoạt các biểu hiện của TCL2, CPC và ETC1,
nhưng không ảnh hưởng đến các biểu hiện của TCL1, TRY và ETC2
(Hình 3A), điều này cho thấy vai trò của LEC1 trong việc điều hòa
các gen âm tính với trichome. Một nghiên cứu trước đây đã báo cáo
rằng các dòng biểu hiện quá mức TCL2, CPC và ETC1 đều có kiểu hình
lá bóng (Wang và Chen, 2014); do đó, chúng tôi đã hỏi liệu sự biểu
hiện LEC1 ngoài tử cung có ảnh hưởng đến sự hình thành trichome
trên lá thật hay không. Cuộc điều tra đã chứng minh rằng các lá mầm
của pER10: LEC1- MYC được xử lý bằng mô hoặc bằng estradiol có kiểu
hình sáng bóng tương tự như kiểu hoang dã (dữ liệu không được hiển thị).
Đáng chú ý là trong thời gian dài cảm ứng bằng estradiol (14 ngày),
cây con pER10: LEC1-MYC đã phát triển ít trichome hơn và lá hình
hoa thị giống một lá mầm (Hình 3B). Cùng với một báo cáo trước đó
rằng thể đột biến ngũ bội R3 MYB lặp lại một lần thử cpc etc1 etc3
tcl1 tạo ra trichome ngoài tử cung trên các lá mầm tương tự như
đột biến lec1 (Wang và cộng sự, 2008), các quan sát của chúng tôi
đã ủng hộ giả thuyết rằng LEC1 ngăn chặn sự hình thành trichome
thông qua hoạt hóa của biểu thức TCL2, CPC và ETC1.
LEC1 Tương tác vật lý với TCL2 Trong ống nghiệm và trong
Nấm men LEAFY COTYLEDON1 thuộc họ NF-Y, các thành viên của
chúng tương tác với các yếu tố phiên mã khác để đồng điều chỉnh
biểu hiện gen mục tiêu (Yamamoto và cộng sự, 2009). Để điều tra xem
liệu LEC1 có kết đôi với đồng yếu tố để làm trung gian hình thành
trichome hay không, chúng tôi đã thực hiện xét nghiệm sàng lọc lai
hai nấm men.
Điều thú vị là, bộ kìm hãm phiên mã trichome TCL2 đã được quan sát
để tương tác với LEC1 trong nấm men (Hình 4A). Sau đó, chúng tôi
thực hiện một xét nghiệm kéo xuống để xác nhận sự tương tác giữa
LEC1 và TCL2 bằng cách sử dụng các protein được gắn thẻ GST và His
tinh khiết (Hình bổ sung S3). Như mong đợi, GST-TCL2 tương tác
với His-LEC1, nhưng không tương tác với protein His-GFP, trong khi GST
4 Tháng 11 năm 2015 | Tập 6 | Điều 955
Machine Translated by Google
Huang và cộng sự.
HÌNH 3 | Sự biểu hiện quá mức của LEC1 ngăn chặn sự hình thành trichome. (A) Phân
tích sự biểu hiện của các gen âm tính với trichome ở cây con chuyển gen pER10: LEC1-
MYC 5 ngày tuổi với 10 μM estradiol hoặc xử lý giả. TUB2 được sử dụng như một kiểm
soát nội bộ. Dấu hoa thị cho biết
sự khác biệt đáng kể giữa estradiol và giả (p <0,05, bằng phép thử t của Student). (B)
Sự biểu hiện quá mức của LEC1 thúc đẩy quá trình chuyển đổi lá thật thành cấu trúc phôi.
PER10 mười bốn ngày tuổi: Cây con chuyển gen LEC1-MYC với 10 μM estradiol hoặc xử lý giả
được sử dụng để quan sát kiểu hình. Đầu mũi tên màu đỏ chỉ lá hình hoa thị; đầu mũi tên
trắng chỉ lá mầm. Thanh = 1 mm.
không kết tủa một trong hai protein được gắn thẻ His (Hình 4B). TCL2
và các chất tương đồng của nó là TCL1, TRY, CPC, ETC1 và ETC2 đóng
vai trò chính trong việc ngăn chặn sự hình thành trichome trong suốt
cuộc đời của thực vật; do đó, chúng tôi đã kiểm tra thêm sự liên kết
giữa LEC1 và các protein tương đồng này. Kết quả kéo xuống cho thấy
LEC1 cũng tương tác với TCL1, CPC và ETC1 trong ống nghiệm (Hình S4
bổ sung); tuy nhiên, liên kết của chúng không được quan sát thấy trong
xét nghiệm lai hai nấm men, có thể là do tương tác yếu trong nấm men
(dữ liệu không được hiển thị).
Những kết quả này chỉ ra rằng, bên cạnh việc điều chỉnh sự biểu hiện
của các gen R3 MYB lặp lại một lần, LEC1 có thể làm trung gian hình
thành trichome thông qua tương tác trực tiếp của protein với các gen
kìm hãm này, một kết quả cần được nghiên cứu thêm.
GL2 Hoạt động về mặt di truyền Dòng chảy của LEC1 GLABRA2 có
chức năng như chất kích hoạt phiên mã quan trọng trong quá
trình phát triển trichome, mà sự biểu hiện của nó được kích hoạt bởi
MYB-bHLH-WD trichome dương và bị kìm hãm bởi phức hợp phiên mã lặp lại
đơn lặp lại R3 MYB-bHLH-WD trichome ( Zhao và cộng sự, 2008). Sự mất
chức năng của GL2 đã loại bỏ hoàn toàn sự hình thành trichome trên cặp
lá thật đầu tiên ở cây con sớm (Hình 5). Biểu thức GL2 tăng cao trong
lec1 (Hình 2A) ngụ ý hiệu ứng tĩnh điện
Biên giới trong Khoa học Thực vật | www.frontiersin.org
LEC1 kiểm soát xác định số phận tế bào
HÌNH 4 | TCL2 tương tác vật lý với LEC1 trong nấm men và trong ống nghiệm.
(A) Các xét nghiệm lai hai nấm men cho thấy TCL2 tương tác với LEC1.
Tế bào nấm men biến nạp được nuôi cấy trên cả môi trường SD / -Trp / -Leu / -His /
-Ade và SD / -Trp / -Leu. (B) Một xét nghiệm kéo xuống cho thấy sự tương tác trực tiếp
giữa các protein dung hợp His-LEC1 và GST-TCL2 trong ống nghiệm. Protein His-LEC1 hoặc
His-GFP được ủ với protein GST hoặc GST-TCL2 cố định và các phần kết tủa miễn dịch được
phát hiện bởi một kháng thể chống His.
của GL2 trên LEC1 trong sự hình thành trichome trên lá mầm. Để kiểm
tra giả thuyết này, chúng tôi đã tạo ra một đột biến kép gl2 lec1 và
nhận thấy rằng tương tự như gl2, đột biến kép gl2 lec1 hiển thị những
chiếc lá thật sáng màu (Hình 5). Ngược lại, đột biến gl2 kìm hãm sự
hình thành trichome ngoài tử cung trên lá mầm của cây con lec1 một cách
đáng kể (Hình 5), khẳng định vai trò chính của GL2 trong sự hình thành
trichome, bất kể giai đoạn phát triển. Những kết quả này đã ủng hộ mạnh
mẽ giả thuyết rằng GL2 cần thiết cho sự ức chế sự hình thành trichome
qua trung gian LEC1 trên lá mầm.
THẢO LUẬN
Sự phát triển sau phôi là một trạng thái chuyển tiếp quan trọng từ
trạng thái phôi sang sinh dưỡng, trong đó cây con cảm nhận được các
dấu hiệu môi trường khác nhau, chẳng hạn như ánh sáng và nhiệt độ, để
cho phép các bào tử non sống sót. Ở giai đoạn này, việc xác định số
phận tế bào xảy ra để thúc đẩy quá trình hình thành cơ quan sau phôi
thai phát sinh từ các mô phân sinh sơ cấp, trong đó có thể quan sát
thấy các đặc điểm có thể nhìn thấy được, chẳng hạn như sự kéo dài lá
mầm, sự kéo dài hypocotyl và sự xuất hiện của các lá thật với trichomes,
có thể được quan sát thấy ở cây con. Các nghiên cứu đã chỉ ra rằng
nhiều yếu tố nội sinh, bao gồm phytohormone và các chất điều hòa phiên
mã, có liên quan đến sự phát triển cây con sau phôi (Perianez-Rodriguez
et al., 2014). LEC1, bộ điều chỉnh chính trong quá trình hình thành
phôi, gần đây đã được báo cáo là có liên quan đến quá trình kéo dài
hypocotyl sau phôi thai qua trung gian ánh sáng (Junker và
5 Tháng 11 năm 2015 | Tập 6 | Điều 955
Machine Translated by Google
Huang và cộng sự.
HÌNH 5 | Sự mất chức năng của GL2 giải cứu kiểu hình của sự hình thành trichome ngoài tử
cung trên lá mầm lec1. Các cây con Col, gl2, lec1 và gl2 lec1 mười ngày tuổi được sử dụng
để quan sát kiểu hình. Đầu mũi tên màu đỏ chỉ ra trichomes. Thanh = 1 mm.
Baumlein, 2012). Trong nghiên cứu này, chúng tôi cung cấp bằng chứng
phân tử rằng LEC1 và đối tác di truyền GL2 của nó là cần thiết để ức
chế sự hình thành trichome trên lá mầm có nguồn gốc từ phôi, đặc điểm
phân biệt chúng với lá thật. Sự đột biến của LEC1 dẫn đến điều hòa
sai một số gen liên quan đến trichome và do đó kích hoạt sự hình
thành trichome trên lá mầm. Ngược lại, ngoài tử cung LEC1 kích hoạt
sự biểu hiện của các gen R3 MYB lặp lại một lần và tạo ra các lá phôi
có ít hoặc không có trichome. Hơn nữa, kết quả chỉ ra rằng LEC1 có
thể điều chỉnh sự hình thành trichome bằng cách tương tác với các
yếu tố phiên mã khác (ví dụ, TCL2 và các chất tương đồng của nó).
Tổng hợp lại, phát hiện của chúng tôi ủng hộ giả thuyết rằng LEC1
đóng một vai trò thiết yếu trong việc xác định số phận tế bào trong
quá trình phát triển sau phôi thai.
Thực tế là LEC1 được biểu hiện ở cả hạt đang phát triển và cây
con sau phôi, kết hợp với kiểu hình đa hướng của thể đột biến lec1,
hỗ trợ các vai trò đa chức năng của LEC1 trong sự phát triển của cây
trồng (Junker và Baumlein, 2012; Hình bổ sung S1A); tuy nhiên, người
ta biết ít hơn về các protein hạ lưu của quá trình điều hòa qua
trung gian LEC1. Một báo cáo gần đây chỉ ra rằng LEC1 có thể điều
chỉnh trực tiếp một số gen liên quan đến ánh sáng, tín hiệu
phytohormone và hình thành phôi, bao gồm một số yếu tố phiên mã bHLH
và MYB (Junker và cộng sự, 2012). Tuy nhiên, bằng cách sử dụng xét
nghiệm kết tủa miễn dịch nhiễm sắc thể, chúng tôi quan sát thấy rằng
LEC1 không nhắm mục tiêu trực tiếp vào các gen liên quan đến trichome
đã chọn (dữ liệu không được hiển thị), cho thấy rằng các gen này có
thể không hoạt động ngay lập tức ở hạ nguồn của LEC1. Thay vào đó,
chúng tôi quan sát thấy rằng LEC1 tương tác với các trình ức chế
phiên mã liên quan đến sự phát triển trichome TCL1, TCL2, CPC và ETC1
trong ống nghiệm.
TCL1 được báo cáo là biểu hiện nhiều trong việc phát triển hạt và
protein của nó nhắm mục tiêu vào promoter GL1, trong khi TCL2 được
biểu hiện nhiều ở lá mầm, thay vì đang phát triển
Biên giới trong Khoa học Thực vật | www.frontiersin.org
LEC1 kiểm soát xác định số phận tế bào
hạt giống, ngụ ý vai trò khác biệt của hai gen tương đồng này trong
việc điều hòa trichome (Wang và cộng sự, 2007; Gan và cộng sự, 2011).
Sự tương tác giữa LEC1 và những chất kìm hãm này cung cấp một cơ
chế khả thi mà nhờ đó LEC1 điều chỉnh việc xác định số phận tế bào
phôi theo không gian-thời gian, thông qua việc kết hợp với các yếu
tố phiên mã khác nhau. Tuy nhiên, liệu LEC1 và TCL2 có cùng xác định
sự khởi đầu trichome sau phôi hay không thì cần phải điều tra thêm.
Phytohormones đóng vai trò là chất tích hợp nội sinh quan trọng
giúp điều hòa sự phát triển của thực vật bằng cách kiểm soát sự phân
chia và biệt hóa tế bào chính xác (Lumba và cộng sự, 2010; Vanstraelen
và Benkova, 2012). Gibberellin (GA) đã được báo cáo là hoạt động
như một yếu tố nội sinh tích cực để thúc đẩy sự hình thành trichome,
bởi vì đột biến ga1 khiếm khuyết sinh tổng hợp GA hiển thị ít
trichome hơn trên lá của nó (Perazza et al., 1998; Qi et al., 2014).
LEC2 (Stone và cộng sự, 2001) và FUSCA3 (FUS3, Keith và cộng sự,
1994), hai yếu tố phiên mã chứa miền B3, cũng được định nghĩa là gen
LEC, thúc đẩy biểu hiện GL1 thông qua kích hoạt trực tiếp gen sinh
tổng hợp GA, ATGA3ox2 . Khi lai với ga1, sự hình thành trichome ngoài
tử cung trên lá mầm lec2 và fus3 bị triệt tiêu hoàn toàn (Curaba và
cộng sự, 2004). Tuy nhiên, trichome ngoài tử cung không bị loại bỏ
trong đột biến kép lec1 ga1, điều này cho thấy rằng sự hình thành
trichome qua trung gian LEC1 là độc lập với GA (Curaba và cộng sự,
2004). Cho rằng LEC2 và FUS3 hoạt động như các ứng cử viên tiềm năng
của LEC1 (Junker và cộng sự, 2010), ảnh hưởng của GA đối với chức
năng của các yếu tố LEC có thể nằm dưới sự kiểm soát của một mạng
lưới quy định phức tạp. Axit abscisic cũng tham gia vào quá trình
hình thành trichome qua trung gian LEC1.
Một nghiên cứu trước đây đã báo cáo rằng sự chuyển đổi của lá thành
cấu trúc giống như lá mầm được tăng cường ở dòng biểu hiện quá mức
của LEC1 khi kết hợp với xử lý axit abscisic (Junker và cộng sự,
2012). Ngoài ra, một số gen đáp ứng với axit abscisic được chứng
minh là mục tiêu trực tiếp của LEC1 (Junker và cộng sự, 2012).
Tuy nhiên, vai trò của phytohormone trong việc xác định số phận tế
bào qua trung gian LEC1 vẫn còn khó nắm bắt và cần phải điều tra thêm.
Việc kiểm soát chính xác sự biểu hiện của LEC1 là rất quan trọng
đối với thực vật để điều chỉnh việc xác định số phận của tế bào trong
quá trình phát triển. Điều hòa biểu sinh đóng vai trò quan trọng
trong việc loại trừ LEC1 trong giai đoạn sinh dưỡng. PICKLE, một yếu
tố tái cấu trúc nhiễm sắc thể CHD3, ngăn chặn sự hoạt hóa phiên mã
LEC1 trong mô sinh dưỡng bằng cách thay đổi quá trình methyl hóa
histone. Ở thể đột biến dưa chua, rễ cây con tạo ra cấu trúc phôi,
được gọi là "rễ PICKLE", do biểu hiện ngoài tử cung của LEC1 gây ra
(Ogas et al., 1997, 1999; Li et al., 2005).
Ngoài ra, các protein nhóm polycomb CLF và SWN đã được chứng minh
kết hợp với PICKLE để ngăn chặn sự chuyển đổi từ mô sinh dưỡng sang
cấu trúc phôi (Chanvivattana và cộng sự, 2004; Aichinger và cộng sự,
2009). Các deacetylase histone (ví dụ, HDA6 và HDA19) cũng góp phần
vào việc kìm hãm các đặc tính của phôi bằng cách điều chỉnh một số
chất điều hòa quá trình phát sinh phôi, bao gồm cả LEC1 (Tanaka và
cộng sự, 2008). Ngoài các yếu tố biểu sinh này, một số yếu tố phiên
mã, chẳng hạn như VP1 / ABI3-LIKE và MYB115 / 118, cũng được báo
cáo là chất điều hòa âm tính của LEC1 (Suzuki và cộng sự, 2007; Wang
và cộng sự, 2009; Jia và cộng sự. , 2013). Sự phát triển phôi bắt
nguồn từ hợp tử sau khi thụ tinh ở thực vật bậc cao (Lau và cộng sự,
2012). Cao
6 Tháng 11 năm 2015 | Tập 6 | Điều 955
Machine Translated by Google
Huang và cộng sự. LEC1 kiểm soát xác định số phận tế bào

biểu hiện trong quá trình hình thành phôi cho thấy rằng LEC1 được SỰ ĐÓNG GÓP CỦA TÁC GIẢ
giải phóng từ môi trường ức chế của mô sinh dưỡng, do đó cho phép
nó kiểm soát việc xác định số phận tế bào phôi và sau phôi. MH và XH đã thiết kế nghiên cứu. MH, YH, XL và YL đã thực hiện các
thí nghiệm. MH, YH và XH đã phân tích dữ liệu. MH và XH đã viết bài.

PHẦN KẾT LUẬN

KINH PHÍ
Trong nghiên cứu này, chúng tôi đã tiết lộ rằng LEC1 tương tác với
các yếu tố phiên mã khác và điều chỉnh sự biểu hiện của các gen liên
Công trình này được hỗ trợ bởi các khoản tài trợ từ Quỹ Khoa học
quan đến trichome để ngăn chặn sự hình thành trichome trên lá mầm.
Quốc gia Trung Quốc (số 31370342, 31301055 và 31300239) và chương
Những phát hiện này cung cấp bằng chứng ủng hộ giả thuyết rằng LEC1,
trình “Trăm tài năng” của Viện Khoa học Trung Quốc.
có thể bằng cách tích hợp các tín hiệu phytohormone và điều hòa biểu
sinh, làm trung gian cho việc xác định số phận tế bào trong giai
đoạn phát triển sau phôi thai, cung cấp những hiểu biết mới về vai
trò của LEC1 ngoài quá trình hình thành phôi.
NHÌN NHẬN

CÁC SỐ TRUY CẬP Chúng tôi cảm ơn Shucai Wang đã cung cấp hạt giống đột biến gl2,
Trung tâm tài nguyên sinh học Arabidopsis cho hạt giống lec1-4 và

Dữ liệu trình tự từ bài viết này có thể được tìm thấy trong cơ sở Jianru Zuo cho pER10: LEC1-MYC plasmid.

dữ liệu Sáng kiến gen Arabidopsis theo các số gia nhập sau: LEC1
(AT1G21970), GL1 (AT3G27920), GL2 (AT1G79840), GL3 (AT5G41315), EGL3
(AT1G63650), TCL1 (AT2G30432) TCL2 (AT2G30424), TRY (AT5G53200), TÀI LIỆU BỔ SUNG
CPC (AT2G46410), ETC1 (AT1G01380), ETC2 (AT2G30420) và TUB2
(AT5G62690). Tài liệu bổ sung cho bài viết này có thể được tìm thấy trực tuyến tại: http://

journal.frontiersin.org/article/10.3389/fpls.2015.00955

NGƯỜI GIỚI THIỆU Junker, A., Hartmann, A., Schreiber, F., và Baumlein, H. (2010). Quan điểm của một kỹ sư về

quy định sự phát triển của hạt giống. Xu hướng Thực vật Khoa học. 15, 303–307. doi:

Aichinger, E., Villar, CBR, Farrona, S., Reyes, JC, Hennig, L., và Kohler, C. (2009). Các 10.1016 / j.tplants.2010.03.005

protein CHD3 và các protein nhóm polycomb đối kháng quyết định đặc điểm nhận dạng tế bào ở Junker, A., Monke, G., Rutten, T., Keilwagen, J., Seifert, M., Thi, TM, et al.

cây Arabidopsis. PLoS Genet. 5: 605. doi: 10.1371 / journal.pgen.1000605 (2012). Các chức năng liên quan đến kéo dài của LEAFY COTYLEDON1 trong quá trình phát

triển của Arabidopsis thaliana. Thực vật J. 71, 427–442. doi: 10.1111 / j.1365-
313X.2012.04999.x
Brocard-Gifford, IM, Lynch, TJ và Finkelstein, RR (2003). Mạng lưới điều tiết trong hạt tích

hợp sự phát triển, axit abscisic, đường và tín hiệu ánh sáng. Thực vật Physiol. 131, 78– Keith, K., Kraml, M., Dengler, NG, và Mccourt, P. (1994). fusca3 - một đột biến dị điện tử ảnh

92. doi: 10.1104 / pp.011916 Chandler, JW (2008). Sự phát sinh cơ quan hai lá mầm. J. Exp. hưởng đến sự phát triển phôi muộn ở cây Arabidopsis.

Người máy. 59, 2917–2931. doi: Tế bào Thực vật 6, 589–600. doi: 10.1105 / Tpc.6.5.589

10.1093 / Jxb / Ern167 Kwong, RW, Bui, AQ, Lee, H., Kwong, LW, Fischer, RL, Goldberg, RB, et al.

Chanvivattana, Y., Bishopp, A., Schubert, D., Stock, C., Moon, YH, Sung, ZR, et al. (2004). (2003). LEAFY COTYLEDON1-LIKE xác định một loại chất điều hòa cần thiết cho sự phát triển

Tương tác của các protein nhóm polycomb kiểm soát sự ra hoa ở cây Arabidopsis. Phát triển của phôi. Tế bào Thực vật 15, 5–18. doi: 10.1105 / tpc.006973 Lau, S., Slane, D., Herud,

131, 5263–5276. doi: 10.1242 / Dev.01400 Curaba, J., Moritz, T., Blervaque, R., Parcy, F., O., Kong, JX, and Jurgens, G. (2012). Phát sinh phôi sớm ở thực vật có hoa: thiết lập kiểu

Raz, V., Herzog, M., et al. (2004). AtGA3ox2, một gen quan trọng chịu trách nhiệm sinh tổng hình cơ thể.

hợp gibberellin có hoạt tính sinh học, được điều chỉnh trong quá trình hình thành phôi bởi Annu. Rev. Plant Biol. 63, 483–506. doi: 10.1146 / annurev-arplant-042811- 105507

LEAFY COTYLEDON2 và FUSCA3 ở cây Arabidopsis. Thực vật Physiol. 136, 3660–3669. doi:

10.1104 / pp.104. 047266 Le, BH, Cheng, C., Bui, AQ, Wagmaister, JA, Henry, KF, Pelletier, J., et al.

(2010). Phân tích toàn cầu về hoạt động của gen trong quá trình phát triển hạt Arabidopsis

Gan, LJ, Xia, K., Chen, JG và Wang, SC (2011). Đặc điểm chức năng của TRICHOMELESS2, một yếu và xác định các yếu tố phiên mã cụ thể của hạt. Proc. Natl. Acad. Khoa học.

tố phiên mã R3 MYB đơn lặp lại mới trong cơ chế điều hòa mô hình trichome ở Arabidopsis. Hoa Kỳ 107, 8063–8070. doi: 10.1073 / pnas.1003530107

BMC Plant Biol. 11: 176. doi: 10.1186 / 1471-2229-11-176 Lee, HS, Fischer, RL, Goldberg, RB và Harada, JJ (2003). Arabidopsis LEAFY COTYLEDON1 đại diện

cho một tiểu đơn vị chuyên biệt về chức năng của yếu tố phiên mã liên kết CCAAT. Proc.

Harada, JJ (2001). Vai trò của gen Arabidopsis LEAFY COTYLEDON trong sự phát triển của hạt. J. Natl. Acad. Khoa học. USA 100, 2152– 2156. doi: 10.1073 / pnas.0437909100 Li, HC, Chuang,

Thực vật Physiol. 158, 405–409. doi: 10.1078 / 0176-1617-00351 Hulskamp, M., Misera, S., K., Henderson, JT, Rider, SD, Bai, Y., Zhang, H., et al.

and Jurgens, G. (1994). Phân tích di truyền về sự phát triển tế bào trichome ở cây Arabidopsis.

Ô 76, 555–566. doi: 10.1016 / 009 2-8674 (94) 90118-X (2005). PICKLE hoạt động trong quá trình nảy mầm để ngăn chặn sự biểu hiện của các tính

trạng phôi. Thực vật J. 44, 1010–1022. doi: 10.1111 / j.1365-313X.2005.02602.x Lotan, T.,

Jia, HY, Mccarty, DR, và Suzuki, M. (2013). Vai trò khác biệt của các gen mạng LAFL trong việc Ohto, M., Yee, KM, West, MA, Lo, R., Kwong, RW, et al.

thúc đẩy số phận phôi cây con trong trường hợp không áp chế VAL. Thực vật Physiol. 163, (1998). Arabidopsis LEAFY COTYLEDON1 đủ để gây ra sự phát triển phôi trong tế bào sinh

1293–1305. doi: 10.1104 / pp.113. 220988 dưỡng. Ô 93, 1195–1205. doi: 10.1016 / S0092- 8674 (00) 81463-4 Lumba, S., Cutler, S., and

Mccourt, P. (2010). Các thụ thể hormone nhân thực vật: có vai trò đối với các phân tử nhỏ

Junker, A., và Baumlein, H. (2012). Đa chức năng của yếu tố phiên mã LEC1 trong quá trình phát trong tương tác protein-protein. Annu. Rev. Cell Dev.

triển của cây. Tín hiệu thực vật. Behav. 7, 1718–1720. doi: 10.4161 / psb.22365
Biol. 26, 445–469. doi: 10.1146 / annurev-cellbio-100109-103956

Biên giới trong Khoa học Thực vật | www.frontiersin.org 7

Tháng 11 năm 2015 | Tập 6 | Điều 955
Machine Translated by Google
Huang và cộng sự. LEC1 kiểm soát xác định số phận tế bào

Marks, MD, và Feldmann, KA (1989). Sự phát triển của kiến ba khoang ở Arabidopsis thaliana.1. Vanstraelen, M. và Benkova, E. (2012). Tương tác giữa các hoocmôn trong quá trình điều hòa sự

Gắn thẻ T-DNA của gen Glabrous1. Tế bào Thực vật 1, 1043–1050. doi: 10.1105 / tpc.1.11.1043 phát triển của cây. Annu. Rev. Cell Dev. Biol. 28, 463–487. doi: 10.1146 / annurev-

Meinke, DW (1992). Một dạng đột biến đồng nhất của Arabidopsis thaliana với các lá mầm. Khoa cellbio-101011-155741

học 258, 1647–1650. doi: 10.1126 / science.258.5088.1647 Meinke, DW, Franzmann, LH, Nickle, TC, Wang, SC, Barron, C., Schiefelbein, J., và Chen, JG (2010). Mối quan hệ khác biệt giữa GLABRA2

and Yeung, EC (1994). và các yếu tố phiên mã R3 MYB lặp lại một lần trong việc điều chỉnh hình thái lông rễ và

trichome ở Arabidopsis.

Các thể đột biến trên một lá mầm của Arabidopsis. Tế bào Thực vật 6, 1049–1064. doi: 10.1105 / Phytol mới. 185, 387–400. doi: 10.1111 / j.1469-8137.2009.03067.x Wang, SC

tpc.6.8.1049 Morohashi, K., Zhao, MZ, Yang, ML, Read, B., Lloyd, A., Lamb, R., et al. và Chen, JG (2014). Quy định xác định số phận tế bào bằng các yếu tố phiên mã R3 MYB lặp lại

đơn ở cây Arabidopsis. Đổi diện. Khoa học thực vật. 5: 133. doi: 10.3389 / Fpls.2014.00133

(2007). Sự tham gia của yếu tố GL3 của Arabidopsis bHLH trong các sự kiện điều chỉnh khởi Wang, SC, Hubbard, L., Chang, Y., Guo, JJ, Schiefelbein, J. và Chen, JG

phát trichome. Thực vật Physiol. 145, 736–746. doi: 10.1104 / pp.107.104521 Mu, J., Tan, H.,

Zheng, Q., Fu, F., Liang, Y., Zhang, J., et al. (2008). LEAFY COTYLEDON1 là chất điều chỉnh chính (2008). Phân tích toàn diện các protein R3 MYB lặp lại một lần trong cấu trúc tế bào biểu bì

của quá trình sinh tổng hợp axit béo ở cây Arabidopsis. Thực vật Physiol. 148, 1042–1054. và điều hòa phiên mã của chúng ở cây Arabidopsis. BMC Plant Biol. 8:81. doi: 10.1186 /

doi: 10.1104 / pp.108.126342 Ogas, J., Cheng, JC, Sung, ZR, and Somerville, C. (1997). Sự 1471-2229-8-81

biệt hóa tế bào do gibberellin điều chỉnh ở thể đột biến dưa chua Arabidopsis thaliana. Khoa học Wang, SC, Kwak, SH, Zeng, QN, Ellis, BE, Chen, XY, Schiefelbein, J., et al. (2007). TRICHOMELESS1

277, điều chỉnh kiểu hình trichome bằng cách ngăn chặn GLABRA1 ở cây Arabidopsis. Phát triển 134,
91–94. doi: 10.1126 / khoa học.277.5322.91 3873–3882. doi: 10.1242 / Dev.009597

Ogas, J., Kaufmann, S., Henderson, J., và Somerville, C. (1999). PICKLE là yếu tố tái cấu trúc

nhiễm sắc CHD3 điều chỉnh quá trình chuyển đổi từ phôi thai sang phát triển sinh dưỡng ở cây Wang, XC, Niu, QW, Teng, C., Li, C., Mu, JY, Chua, NH, et al. (2009). Sự biểu hiện quá mức của

Arabidopsis. Proc. Natl. Acad. Khoa học. PGA37 / MYB118 và MYB115 thúc đẩy quá trình chuyển đổi từ sinh dưỡng sang phôi thai ở

Hoa Kỳ 96, 13839–13844. doi: 10.1073 / pnas.96.24.13839 Arabidopsis. Tế bào Res. 19, 224–235. doi: 10.1038 / Cr.2008.276

Oppenheimer, DG, Herman, PL, Sivakumaran, S., Esch, J. và Marks, MD

(1991). Một gen myb cần thiết để phân biệt lá trichome ở cây Arabidopsis được biểu hiện Warpeha, KM, Upadhyay, S., Yeh, J., Adamiak, J., Hawkins, SI, Lapik, YR, et al. (2007). Chuỗi

trong các nốt ruồi. Ô 67, 483–493. doi: 10.1016 / 0092-8674 (91) 90523-2 Pattanaik, S., tín hiệu GCR1, GPA1, PRN1, NF-Y làm trung gian cho cả phản ứng ánh sáng xanh và axit abscisic

Patra, B., Singh, SK và Yuan, L. (2014). Tổng quan về mạng lưới điều hòa gen kiểm soát sự phát ở cây Arabidopsis. Thực vật Physiol. 143, 1590–1600. doi: 10.1104 / pp.106.089904

triển của trichorne trong cây mô hình, Arabidopsis. Đổi diện. Khoa học thực vật. 5: 259.

doi: 10.3389 / Fpls.2014.00259 Perazza, D., Vachon, G., and Herzog, M. (1998). Gibberellins West, M., Yee, KM, Danao, J., Zimmerman, JL, Fischer, RL, Goldberg, RB, et al. (1994). LEAFY

thúc đẩy sự hình thành trichome bằng cách điều chỉnh tăng GLABROUS1 ở cây Arabidopsis. Thực vật COTYLEDON1 là chất điều chỉnh thiết yếu của quá trình hình thành phôi muộn và nhận dạng lá

Physiol. 117, 375–383. doi: 10.1104 / Pp.117.2.375 Perianez-Rodriguez, J., Manzano, C., and mầm ở Arabidopsis. Tế bào Thực vật 6, 1731–1745. doi: 10.1105 / tpc.6.12.1731

Moreno-Risueno, MA (2014). Bài phát sinh cơ quan phôi và tái sinh thực vật từ mô: hai mặt

đồng tiền? Đổi diện. Khoa học thực vật. 5: 219. doi: 10.3389 / Fpls.2014.00219 Peris, CIL, Yamamoto, A., Kagaya, Y., Toyoshima, R., Kagaya, M., Takeda, S., và Hattori, T. (2009). Các tiểu

Rademacher, EH và Weijers, D. (2010). Khởi đầu màu xanh lá cây - sự hình thành khuôn mẫu đơn vị Arabidopsis NF-YB LEC1 và LEC1-LIKE kích hoạt phiên mã bằng cách tương tác với các

trong phôi thực vật ban đầu. Nhà máy Dev. 91, 1–27. doi: 10.1016 / S0070-2153 (10) 91001-6 yếu tố liên kết ABRE cụ thể của hạt giống. Thực vật J. 58, 843–856. doi: 10.1111 /

Qi, TC, Huang, H., Wu, DW, Yan, JB, Qi, YJ, Song, SS, et al. (2014). j.1365-313X.2009.03817.x Yang, CX và Ye, ZB (2013). Trichomes làm mô hình nghiên cứu sự biệt

hóa của tế bào thực vật. Tế bào. Mol Khoa học đời sống. 70, 1937–1948. doi: 10.1007 / s00018-012-

1147-6

Các protein Arabidopsis DELLA và JAZ liên kết phức hợp WD-Repeat / bHLH / MYB để điều chỉnh Zhao, M., Morohashi, K., Hatlestad, G., Grotewold, E., và Lloyd, A. (2008).

sức mạnh tổng hợp tín hiệu gibberellin và jasmonate. Tế bào Thực vật 26, 1118–1133. doi: Phức hợp TTG1-bHLH-MYB kiểm soát số phận và mô hình tế bào trichome thông qua việc nhắm mục

10.1105 / tpc.113.121731 tiêu trực tiếp vào các locus điều hòa. Phát triển 135, 1991–1999. doi: 10.1242 / Dev.016873

Rerie, WG, Feldmann, KA, và Marks, MD (1994). Gen Glabra2 mã hóa một protein miền homeo cần thiết

để phát triển trichome bình thường ở cây Arabidopsis. Genes Dev. 8, 1388–1399. doi: 10.1101 / Zhou, LM, Zheng, KJ, Wang, XY, Tian, HN, Wang, XL và Wang, SC

gad.8.12.1388 Stone, SL, Kwong, LW, Yee, KM, Pelletier, J., Lepiniec, L., Fischer, RL, et al. (2014). Kiểm soát sự hình thành trichome trongArabidopsis bằng các yếu tố phiên mã đơn lặp

lại R3 MYB của cây dương. Đổi diện. Khoa học thực vật. 5: 262. doi: 10.3389 / Fpls.2014.00262

(2001). LEAFY COTYLEDON2 mã hóa yếu tố phiên mã miền B3 có tác dụng kích thích sự phát triển

của phôi. Proc. Natl. Acad. Khoa học. Hoa Kỳ 98, 11806–11811. doi: 10.1073 / pnas.201413498 Tuyên bố xung đột lợi ích: Các tác giả tuyên bố rằng nghiên cứu được thực hiện trong trường hợp

không có bất kỳ mối quan hệ thương mại hoặc tài chính nào có thể được hiểu là xung đột lợi ích

Suzuki, M., Wang, HHY và Mccarty, DR (2007). Sự kìm hãm mạng lưới điều hòa LEAFY COTYLEDON 1 / tiềm ẩn.

B3 trong quá trình phát triển phôi thực vật bởi các gen VP1 / ABSCISIC ACID KHÔNG NHẠY CẢM 3-

GIỐNG B3. Thực vật Physiol. 143, 902–911. doi: 10.1104 / pp.106.092320 Tanaka, M., Kikuchi, Bản quyền © 2015 Huang, Hu, Liu, Li và Hou. Đây là một bài báo truy cập mở được phân phối theo

A., and Kamada, H. (2008). Arabidopsis histone deacetylases HDA6 và HDA19 góp phần kìm hãm các điều khoản của Giấy phép Ghi nhận tác giả Creative Commons ( CC BY).

các đặc tính của phôi sau khi nảy mầm. Thực vật Physiol. 146, 149–161. doi: 10.1104 / pp.107.111674 Việc sử dụng, phân phối hoặc sao chép trên các diễn đàn khác được cho phép, với điều kiện là

(các) tác giả gốc hoặc người cấp phép được ghi công và ấn phẩm gốc trên tạp chí này được trích

dẫn, phù hợp với thông lệ học thuật được chấp nhận. Không được phép sử dụng, phân phối hoặc tái

sản xuất không tuân thủ các điều khoản này.

Biên giới trong Khoa học Thực vật | www.frontiersin.org số 8

Tháng 11 năm 2015 | Tập 6 | Điều 955