RNA interference (RNAi)

Một phản ứng của tế bào khi có

mặt RNA sợi kép (dsRNA)

Các yếu tố Dicer – enzyme cắt

có hoạt tính RNAaseIII liên kết
vào vùng trình tự đặc biệt

Cắt các đoạn dsRNA thành Klug et al., 9th Ed.

siRNA
 Cơ chế của RNAi

dsRNA trong tế bào chất

 Cơ chế của RNAi

Dicer
dsRNA trong tế bào chất

Dicer là một enzyme cắt – cắt dsRNA thành các phân đoạn
dài 20—25 bp với 2-3 bp nhô ra
 Cơ chế của RNAi

Dicer
dsRNA trong tế bào chất

Dicer là một enzyme cắt – cắt dsRNA thành các phân đoạn
dài 20—25 bp với 2-3 bp nhô ra

Small interfering RNAs (siRNAs) – RNA can thiệp nhỏ

 Cơ chế của RNAi

RISC
siRNA

The RNA-induced silencing complex (RISC – phức hệ tắt gen kích ứng
bởi RNA) là phức hệ protein liên kết với siRNAs và bẽ gãy các liên kết
Hydro giữa hai mạch.
 Cơ chế của RNAi

RISC
siRNA

The RNA-induced silencing complex (RISC – phức hệ tắt gen kích ứng
bởi RNA) là phức hệ protein liên kết với siRNAs và bẽ gãy các liên kết
Hydro giữa hai mạch.

RISC với ssRNA Các mạch ssRNA tự do

 Cơ chế RNAi

RISC với ssRNA

Khi ở trạng thái đơn, RISC sẽ được hoạt

hóa (RISC*) và hướng đến các phân tử đích
là mRNA (có trình tự bổ sung với siRNA của
nó)

mRNA
m7G
Đuôi poly A
 Cơ chế RNAi

RISC với ssRNA

Khi ở trạng thái đơn, RISC sẽ được hoạt

hóa (RISC*) và hướng đến các phân tử đích
là mRNA (có trình tự bổ sung với siRNA của
nó)

mRNA
m7G
poly A tail
 Cơ chế RNAi

m7G
poly A tail
RISC xúc tác phân cắt
mRNA

poly
m
7G A ta
il
 Cơ chế RNAi

poly
7G
m A ta
il

Không có đuôi PolyA Không có mũ methylated

 Cơ chế RNAi

poly
7G
m A ta
il

Không có đuôi PolyA Không có mũ methylated

RNAase phá hủy mRNA

siRNA có thể được tổng hợp và đưa vào tế bào để
nhắm mục tiêu là gen cụ thể → “hạ gục”.
dsRNA kích hoạt phản ứng Interferon (một loại phản ứng miễn
dịch) ở động vật có xương sống → ngừng tổng hợp protein

Tổng hợp
hóa học

Vector
biểu hiện

Klug et al., 9th Ed.

RNAi như một cơ chế chống virus
 Thí nghiệm Điện di
Thí nghiệm nghiên cứu khả năng liên kết của
các yếu tố cắt với DNA

Protein và các đoạn DNA được trộn

và chạy trên Gel acrylamide

Molecular Biology of the Cell, Alberts, 4th ed.

Lodish, Molecular Cell Biology
Chào đón sách mới nhất của Doubletee