第 ３９ 卷　 第 ３ 期 实验动物科学 Ｖｏｌ． ３９　 Ｎｏ． ３

２０２２ 年 ６ 月 ＬＡＢＯＲＡＴＯＲＹ ＡＮＩＭＡＬ ＳＣＩＥＮＣＥ Ｊｕｎｅ ２０２２

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技术
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骨质疏松症动物模型中大鼠卵巢切除手术要点及其术后护理
马艳芳１ 　 张　 鑫２ 　 李　 慧３ 　 程　 东３ 　 孙昌华３
（１． 泰安市岱岳区畜牧兽医事业发展服务中心，泰安　 ２７１０００） （２． 山东泰山生力源集团股份有限公司，泰安　 ２７１０００）
（３． 山东省疾病预防控制中心，济南　 ２５００１４）

摘要：目的　 建立并探讨骨质疏松症大鼠卵巢切除手术要点及其术后护理，为动物模型的成功建立提供参考依据。
方法　 通过外科手术方法对大鼠应用卵巢切除手术构建动物模型，动物模型的设计应符合相似性、可靠性、重复
性、适用性、可控性、易行性和经济性的原则。 结果与结论　 动物模型的建立在研究骨质疏松方面极其重要，合理
的选择动物模型对实验的结果起着关键作用。 大鼠是骨质疏松动物模型最常选用的动物。
关键词： 骨质疏松症；动物模型；大鼠；手术；护理
中图分类号： Ｑ９５－３　 　 文献标识码： Ａ　 　 文章编号： １００６－６１７９（２０２２）０３⁃００５７⁃０６
ＤＯＩ：１０． ３９６９ ／ ｊ． ｉｓｓｎ． １００６⁃６１７９． ２０２２． ０３． ０１１

　 　 骨质疏松症（ ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ，ＯＰ ） 是由 Ｐｏｍｍｅｒ 在 护理，为骨质疏松动物模型的成功建立提供了参考

１８８５ 年提出来的，它是一种以骨组织微细结构退变 依据。
和骨质量降低为特性的全身性骨骼疾病，易引起骨
骼脆性增加，导致骨折的发生 ［１⁃７］ 。 研究表明，骨折 １　 材料
发生率与骨密度密切相关 ［８］
。 骨质疏松症及由其
引起的骨折等并发症，对中老年人尤其是绝经后妇 １. １　 实验动物与饲养环境
女的身体健康和生存质量构成了严重威胁，目前正 　 　 ＳＤ 大 鼠， ＳＰＦ 级， 雌 性，１４０ 只， 体 质 量 ２２０ ～
日益成为一个公众健康问题，因此骨质疏松症的防 ２５０ ｇ，购于济南朋悦实验动物繁育有限公司，许可
治成为广大科研人员广泛关注的热点问题。 证号：ＳＣＸＫ（ 鲁） ２０１９⁃０００３。 本实验由山东省疾病
选择并建立理想的实验动物模型是骨质疏松症 预防控制中心实验动物福利伦理委员会批准，实验
预防和治疗的基础，深入实验研究的关键则是实验 动物伦理编号为 ２０１９０２００７。
动物和动物模型的选择。 目前，常用于骨质疏松研 ＳＤ 大鼠饲养于屏障环境动物实 验 室， 使 用 许
究的动物有大鼠、兔、狗、小鼠、羊、猪和灵长类动物 可证号： ＳＹＸＫ （ 鲁） ２０１８⁃００１４， 环 境 温 度 ２０ ℃ ～
等，但主要选用大鼠 ［９］
，其中 ＳＤ 大鼠 ［１０⁃１１］
和 Ｗｉｓｔａｒ ２６ ℃ ，相对 湿 度 ４０％ ～ ７０％， 动 物 照 明 昼 夜 交 替
大鼠 ［１２⁃１３］
较为适宜。 １９６９ 年 Ｓａｖｉｌｌ 通过手术切除大 １２ ｈ ／ １２ ｈ，ＳＰＦ 级大小鼠生长繁殖饲料，自由采食
鼠卵巢，造成动物机体内雌激素水平下降，使其对成 饮水。
骨细胞的促成熟功能和对破骨细胞的抑制功能减 １. ２　 主要试剂与仪器
弱，最终使得骨量严重丢失，从而导致骨质疏松，该 　 　 戊巴比妥钠（ 上海氟德化工有限公司） 、新洁儿
模型与女性绝经或卵巢切除后的骨丢失极为相似， 灭、７５％ 乙 醇 （ 山 东 利 尔 康 消 毒 科 技 有 限 公 司） 、
是 ＦＤＡ 和 ＷＨＯ 推荐的研究绝经后骨质疏松症的经 ０. ９％氯 化 钠 注 射 液 （ 山 东 辰 欣 药 业 股 份 有 限 公
典模型 之 一 ［１４⁃１８］
。 本 文 选 择 ＳＤ 大 鼠 作 为 模 型 动 司） 、青霉素（ 山东鲁抗医药股份有限公司） 、高压蒸
物，探讨卵巢切除手术过程中的技术要点及其术后 汽灭菌器（ 山东新华医疗器械股份有限公司） 。

收稿日期：２０２０－０５－１２
作者简介：马艳芳（１９８２—） ，女，预防兽医硕士，研究方向：动物疫病监测、检测、流行病学调查． Ｅ⁃ｍａｉｌ：ｘｉａｏｈａｎ４３０＠ １６３． ｃｏｍ
通信作者： 孙昌华（１９８４—） ，男，兽医学博士，国家执业兽医师，研究方向：食品、药品、化妆品、化学品安全性评价． Ｅ⁃ｍａｉｌ：ｓｕｎｃｈａｎｇｈｕａｖｉｐ
＠ １６３． ｃｏｍ
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残留被毛，保证剃毛区干净，大鼠仰卧位固定四肢和
２　 手术前准备
头部于手术板上（ 图 １Ｂ） 。
２. １　 手术器械、器皿消毒
　 　 本试验应用高压蒸汽灭菌法 ［１９］ ， 设定条件为 ３　 卵巢切除要点
１２１ ℃ 、３０ ｍｉｎ。
２. ２　 手术场所、辅助用具消毒 ３. １　 大鼠保定与卵巢摘除
　 　 手术前将手术场所地面、手术台、手术板等清洁 大鼠保定后，剃毛处碘伏消毒，两指绷紧大鼠腹
干净，用 ０. １％ 新洁儿灭喷洒、喷雾消毒，打开紫外 中部皮肤，沿腹部正中线在腹中部切 ２ ～ ３ ｃｍ 的切
线灯照射过夜。 口，止血钳剥离切口处两侧皮肤（ 图 １Ｃ ～ Ｅ） 。
２. ３　 禁食 眼科镊 提 起 皮 肤 开 口 处 腹 壁 肌 肉， 纵 向 剪 开
　 　 动物在手术麻醉前不禁饮水，禁食 １２ ～ １６ ｈ。 ２ ～ ２. ５ ｃｍ 开口，止血钳分别夹住切口向两侧分离，
２. ４　 麻醉 眼科镊紧贴腹壁内侧寻找子宫体或子宫角，动作轻
　 　 大鼠腹腔注射 １％ 戊巴比妥钠（ ４０ ｍｇ ／ ｋｇ） ，３ ～ 柔避免损伤腹腔其他组织脏器，子宫体或子宫角定
５ ｍｉｎ 后麻醉成功 ［２０］
（ 图 １Ａ） 。 位后顺势寻找被脂肪组织包裹呈粉红色桑葚装的卵
２. ５　 剃毛、保定 巢（ 图 １Ｆ） 。
　 　 大鼠麻醉后，用剃毛刀清除腹部被毛，纱布清理

注：Ａ． 麻醉；Ｂ． 剃毛、保定；Ｂ． 消毒；Ｄ． 手术切口；Ｅ． 手术切口剥离；Ｆ． 卵巢定位

Ｎｏｔｅ：Ａ． Ａｎｅｓｔｈｅｓｉａ；Ｂ． Ｓｈａｖｉｎｇ ａｎｄ Ｂａｏｄｉｎｇ；Ｃ． Ｄｉｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎ；Ｄ． Ｓｕｒｇｉｃａｌ ｉｎｃｉｓｉｏｎ；
Ｅ． Ｓｕｒｇｉｃａｌ ｉｎｃｉｓｉｏｎ ｐｅｅｌｉｎｇ；Ｆ． Ｏｖａｒｉａｎ ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ
图 １　 卵巢切除手术
Ｆｉｇ． １　 Ｏｏｐｈｏｒｅｃｔｏｍｙ
第３期 马艳芳等：骨质疏松症动物模型中大鼠卵巢切除手术要点及其术后护理 ·５９·　

　 　 卵巢定位后，在输卵管下方子宫角处用可吸收 时用无菌纱布按压，顺势将子宫角和脂肪轻轻推回
缝合线结扎打结，剥离卵巢周围脂肪后摘除卵巢，检 腹腔，采用同法摘除另一侧卵巢（ 图 ２） 。
查卵巢是否切除干净及术部有无出血，如有出血及

注：Ａ ～ Ｆ． 输卵管结扎、脂肪剥离、卵巢摘除
Ｎｏｔｅ：Ａ－Ｆ． ｔｕｂａｌ ｌｉｇａｔｉｏｎ， ｆａｔ ｓｔｒｉｐｐｉｎｇ， ａｎｄ ｏｖａｒｙ ｒｅｍｏｖａｌ
图 ２　 卵巢切除手术
Ｆｉｇ． ２　 Ｏｏｐｈｏｒｅｃｔｏｍｙ

３. ２　 手术缝合及处理
关闭腹 腔 前 仔 细 检 查 是 否 有 异 物， 腹 腔 注 射 ４　 术后护理措施
１ ｍＬ ６０ 万 Ｕ 的青霉素，用可吸收缝合线缝合腹部
肌肉层，创缘、创壁应相互均匀接近对合，合理调整 ４. １　 麻醉苏醒期护理（ 图 ４）
针间距，缝合时松紧适度，打结时适当收紧，缝合完 ４. １. １　 保证呼吸畅通：手术结束后，大鼠在麻醉期
毕后用碘伏消毒（ 图 ３Ａ） 。 需要一段时间方可苏醒，苏醒期间机体保护性反射
用不可吸收缝合线缝合皮肤，缝合完毕后用眼 还没有完全恢复，容易发生呕吐物、舌部或垫料阻塞
科镊轻轻 调 整 缝 合 口， 避 免 创 缘 内 翻 而 影 响 愈 合 而引起窒息死亡，为保证其呼吸道通畅，大鼠应呈仰
（ 图 ３Ｂ） 。 卧或侧卧姿势单笼饲养于鼠盒内，尽量减少颗粒粉
皮肤缝合完毕后，缝合处碘伏消毒。 手术结束 尘的吸入。
后，解除保定并肌肉注射 １ ｍＬ ６０ 万 Ｕ 的青霉素，仰 ４. １. ２　 保暖保温：术后大鼠处于麻醉苏醒过程，机
卧于鼠盒内（ 图 ３Ｃ ～ Ｄ） 。 体反应处于抑制状态，此时身体非常虚弱，避免出现
低体温休克或引发其他并发症，需要保温保暖，饲养
　 · ６０· 实验动物科学 ３９ 卷

注：Ａ，Ｂ． 消毒、手术切口缝合；Ｃ． 消炎；Ｄ． 大鼠仰卧

Ｎｏｔｅ：Ａ，Ｂ． Ｄｉｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｓｕｔｕｒｅ ｏｆ ｓｕｒｇｉｃａｌ ｉｎｃｉｓｉｏｎ；Ｃ． Ａｎｔｉ－ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ；Ｄ． Ｒａｔ ｌｙｉｎｇ ｓｕｐｉｎｅ
图 ３　 手术缝合及处理
Ｆｉｇ． ３　 Ｓｕｒｇｉｃａｌ ｓｕｔｕｒｅ ａｎｄ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ

注：Ａ． 仰卧姿势；Ｂ． 保暖保温

Ｎｏｔｅ：Ａ． Ｓｕｐｉｎｅ ｐｏｓｉｔｉｏｎ； Ｂ． Ｋｅｅｐ ｗａｒｍ
图 ４　 手术后护理
Ｆｉｇ． ４　 Ｐｏｓｔ－ｏｐｅｒａｔｉｖｅ ｃａｒｅ

室温度应保持在 ２４ ～ ２６ ℃ ，为大鼠提供一个较为舒 清创是否彻底以及动物的全身抵抗力等密切相关，

适的环境。 同时与术后的护理情况也有很大关系，有时术后护
４. １. ３　 术部消毒：手术结束后，术部碘伏消毒，用无 理不良是术部感染的主要原因 ［２１］ 。 术后 １ ～ ３ ｄ 的
菌纱布沿术部、腹部包裹，仰卧后用消毒的百洁布覆 护理是手 术 成 败 的 关 键， 这 期 间 创 口 进 入 急 性 炎
盖于体表。 性期 ［２２⁃２３］ 。
４. １. ４　 体征监视：术后增加观察频率并详细记录， ４. ２. １　 全面消毒：急性炎性期需进行全面消毒，主
密切监视大鼠呼吸、心跳、体温等生命体征。 要包括手术部位、饲养室、鼠盒笼具及垫料。 术部采
４. ２　 急性炎性期护理 用碘伏消毒；饲养室选用 ０. １％ 新洁儿灭和 ８４ 消毒
　 　 手术的感染率与手术时无菌操作的执行情况、 液轮流交替使用；鼠盒笼具、垫料采用高压蒸汽灭菌
第３期 马艳芳等：骨质疏松症动物模型中大鼠卵巢切除手术要点及其术后护理
器消毒，每周至少更换 ２ 次。
４. ２. ２　 预防术后感染：按照临床要求，防止术后创
口感染和激发感染，故术后肌肉注射 １ ｍＬ ６０ 万 Ｕ
的青霉素，连用 ３ ｄ，抗菌消炎。
４. ２. ３　 状态观察及饮食护理：保证充足饮食，密切
观察动物精神状态、饮水、饮食及排便等情况。
４. ３　 创口恢复期护理
　 　 急性炎性期后创口开始进入愈合阶段，恢复期
（ 时间段约为术后 ４ ～ １０ ｄ） 创口会有不同程度的发
痒症状，大鼠表现为不断舔咬和抓挠术部，动物的本
能活动会延迟创口的愈合 ［２４］ ，此时皮肤的缝合线会
被大鼠自行拆除，故术部碘伏消毒持续至术后 ７ ｄ
即可。 此时，大鼠各项体征和饮食情况逐步恢复正
常，恢复期每日观察动物饮食饮水、精神及活动等情
况，饲养室定期消毒，鼠盒笼具及垫料定期更换，加
强日常饲养管理。
５　 结论
众所周知，骨质疏松是由各种原因导致骨组织
结构破坏，常见破骨细胞活性较成骨细胞活性更强，
最终新骨形成减少而骨吸收增多 ［２５⁃２６］
。 随着老龄
化社会的来临，骨质疏松的发病率较高，严重影响患
者的生活质量，因此，骨质疏松越来越多的受到社会
的关注。 在研究人类疾病时，模型动物和造模方法
的选择尤为重要，只有在模型与人类疾病发病机制
和组织学变化相似的情况下，试验才有借鉴意义。
因此，理想骨质疏松试验动物模型的病变过程、病理
改变及转归都应该与人类骨质疏松尽可能相似
研究表明，大鼠是骨质疏松造模最稳定、最实
用、应用最广泛的一种动物模型，其中卵巢切除大鼠
模型是目前公认的研究绝经后骨质疏松的经典动物
模型 ［１４，２８］ ，此动物模型于 １９６９ 年 Ｓａｖｉｌｌｅ 建立，后被
反复证实，具有造模因素单一、模型确定、重复性好、
实验结果可信度大、能很好的模拟绝经后骨质疏松
症代谢的特点等优点 ［２９⁃３４］ 。 动物模型是实验研究
的基础，本文从实验技术和动物福利伦理角度探讨
了大鼠卵巢切除手术要点及其术后护理，为骨质疏
松动物模型的成功建立提供了参考依据。
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备与评价［ Ｊ］ ． 中国骨质疏松杂志，２０１７，２３（１０） ：１３２７⁃１３５８．

Ｋｅｙ Ｐｏｉｎｔｓ ｏｆ Ｏｖａｒｉｅｃｔｏｍｙ ａｎｄ Ｐｏｓｔ⁃ｏｐｅｒａｔｉｖｅ Ｎｕｒｓｉｎｇ ｉｎ Ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ Ａｎｉｍａｌ Ｍｏｄｅｌ

ＭＡ Ｙａｎｆａｎｇ １ ， ＺＨＡＮＧ Ｘｉｎ ２ ， ＬＩ Ｈｕｉ ３ ， ＣＨＥＮＧ Ｄｏｎｇ ３ ， ＳＵＮ Ｃｈａｎｇｈｕａ ３

（１． Ｔａｉ′ａｎ Ｄａｉｙｕｅ Ｄｉｓｔｒｉｃｔ Ａｎｉｍａｌ Ｈｕｓｂａｎｄｒｙ ａｎｄ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ Ｓｅｒｖｉｃｅ Ｃｅｎｔｅｒ， Ｔａｉ′ａｎ ２７１０００，Ｃｈｉｎａ）
（２． Ｓｈａｎｄｏｎｇ Ｔａｉｓｈａｎ Ｓｈｅｎｇｌｉｙｕａｎ Ｇｒｏｕｐ Ｃｏ． Ｌｔｄ， Ｔａｉ′ａｎ ２７１０００，Ｃｈｉｎａ）
（３． Ｓｈａｎｄｏｎｇ Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｃｏｎｔｒｏｌ ａｎｄ Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ， Ｊｉｎａｎ ２５００１４，Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　 Ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ａｎｄ ｄｉｓｃｕｓｓ ｔｈｅ ｋｅｙ ｐｏｉｎｔｓ ｏｆ ｏｖａｒｉｅｃｔｏｍｙ ａｎｄ ｐｏｓｔｏｐｅｒａｔｉｖｅ ｃａｒｅ ｉｎ ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ
ｒａｔｓ， ａｎｄ ｔｏ ｐｒｏｖｉｄｅ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔ ｏｆ ａｎｉｍａｌ ｍｏｄｅｌｓ． Ｍｅｔｈｏｄ 　 Ａｎｉｍａｌ ｍｏｄｅｌｓ ｗｅｒｅ
ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｅｄ ｂｙ ｓｕｒｇｉｃａｌｌｙ ａｐｐｌｙｉｎｇ ｏｖａｒｉｅｃｔｏｍｙ ｔｏ ｒａｔｓ． Ｔｈｅ ｄｅｓｉｇｎ ｏｆ ａｎｉｍａｌ ｍｏｄｅｌｓ ｓｈｏｕｌｄ ｃｏｎｆｏｒｍ ｔｏ ｔｈｅ ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ
ｏｆ ｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ， ｒｅｌｉａｂｉｌｉｔｙ， ｒｅｐｅａｔａｂｉｌｉｔｙ， ａｐｐｌｉｃａｂｉｌｉｔｙ， ｃｏｎｔｒｏｌｌａｂｉｌｉｔｙ， ｆｅａｓｉｂｉｌｉｔｙ ａｎｄ ｅｃｏｎｏｍｙ． Ｒｅｓｕｌｔ ａｎｄ
Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　 Ｔｈｅ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔ ｏｆ ａｎｉｍａｌ ｍｏｄｅｌｓ ｉｓ ｅｘｔｒｅｍｅｌｙ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｉｎ ｔｈｅ ｓｔｕｄｙ ｏｆ ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ， ａｎｄ ｔｈｅ
ｒａｔｉｏｎａｌ ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ａｎｉｍａｌ ｍｏｄｅｌｓ ｐｌａｙｓ ａ ｋｅｙ ｒｏｌｅ ｉｎ ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔ ｏｆ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ． Ｒａｔｓ ａｒｅ ｔｈｅ ｍｏｓｔ ｃｏｍｍｏｎｌｙ ｕｓｅｄ
ａｎｉｍａｌ ｆｏｒ ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ ａｎｉｍａｌ ｍｏｄｅｌｓ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ； ａｎｉｍａｌ ｍｏｄｅｌ； ｒａｔｓ； ｏｐｅｒａｔｉｏｎ； ｎｕｒｓｉｎｇ