Machine Translated by Google
Phosphatase kiềm
David Goltzman và Đặng Thuận Miao
Đại học McGill, Montréal, Québec, Canada
Thuật ngữ
phosphatase kiềm Một loenzyme kim loại gắn màng
bao gồm một nhóm isoenzyme, tất cả là glycoprotein,
được mã hóa bởi ít nhất bốn locus gen khác nhau:
phosphatase kiềm không đặc hiệu của mô, ruột,
nhau thai và tế bào mầm; xúc tác quá trình thủy
phân của một loạt các phosphomonoesters ở pH kiềm.
hypophosphatasia Một rối loạn di truyền có đặc điểm là do quá
trình khoáng hóa xương bị khiếm khuyết và sự thiếu hụt hoạt
tính phosphatase kiềm không đặc hiệu của mô.
isoenzym Các enzym có cùng hoạt tính xúc tác nhưng hơi khác
nhau về trình tự axit amin và/hoặc biến đổi sau dịch mã.
Kể từ mô tả đầu tiên của Suzuki và các đồng nghiệp vào năm 1907,
phosphatase kiềm (ALP) đã được nghiên cứu liên tục và rộng rãi.
Trong phần lớn thế kỷ qua, hoạt động ALP trong huyết thanh đã được
sử dụng rộng rãi như một tín hiệu enzym cho nhiều tình trạng bệnh
liên quan, đặc biệt là gan và xương. Các cuộc điều tra hướng vào
các đặc tính phân tử của enzyme đã được tiến hành tương đối gần
đây. Định lượng hoạt tính ALP huyết thanh đã trở thành thói quen
trong các phòng thí nghiệm của bệnh viện từ những năm 1930 và xét
nghiệm này có lẽ là xét nghiệm enzyme được thực hiện thường xuyên
nhất. Bone ALP đã trở thành enzyme phù hợp nhất về mặt lâm sàng trong
chẩn đoán bệnh xương. Mặc dù được sử dụng rộng rãi như một dấu hiệu
lâm sàng, nhưng chức năng sinh lý của protein này, phổ biến trong tự
nhiên, phần lớn vẫn chưa được biết đến.
Việc xác định các đột biến gen ALP trong chứng giảm phosphatasia,
một dạng còi xương di truyền hiếm gặp, đã xác nhận rằng ALP có chức
năng quan trọng trong quá trình khoáng hóa xương ở người. Tuy nhiên,
vẫn còn nhiều câu hỏi.
DI TRUYỀN VÀ BIỂU HIỆN
Alkaline phosphatase (ALP) là một metallicoenzyme gắn màng
bao gồm một nhóm các isoenzyme.
Mỗi isoenzyme là một glycoprotein được mã hóa bởi các
locus gen khác nhau. Ít nhất bốn locus đã được xác định:
mô không đặc hiệu, ruột, nhau thai và tế bào mầm ALP.
164
Người ta tin rằng sự tiến hóa của họ gen ALP có liên
quan đến sự nhân đôi của một gen ALP không đặc hiệu ở mô
nguyên thủy (TN-ALP) để tạo ra gen TN-ALP và một gen ALP
ruột trung gian (IAP), tiếp theo là các nhân đôi bổ sung
của gen ALP. thứ hai để tạo ra các gen ALP ở ruột, nhau
thai và tế bào mầm. Chỉ con người và loài vượn lớn có ALP
nhau thai; tất cả các động vật có vú khác đều có IAP.
Gen mã hóa TN-ALP ánh xạ tới nhánh ngắn của nhiễm sắc
thể 1, các dải p36.1–p34. Nó được ép ở mức cao nhất trong
gan, xương và thận (do đó có tên thay thế là L/B/K ALP)
cũng như ở mức thấp hơn trong nhiều mô khác. Quá trình xử
lý khác biệt của sản phẩm gen TN-ALP xảy ra trong tế bào
hoặc trong quá trình di chuyển phân tử protein ra khỏi tế
bào gốc của nó. Theo cách này, quá trình glycosyl hóa khác
biệt của TN-ALP tạo ra các dạng đồng phân đặc hiệu cho mô.
IAP mã hóa gen là một thành viên của họ gen ánh xạ tới
nhánh dài của nhiễm sắc thể 2 (q34–q37). IAP hiện diện ở
mức độ cao trong mô ruột và ở mức độ vi lượng trong thận.
Trái ngược với các isoenzym ALP khác, các chuỗi bên
carbohydrate của IAP không bị kết thúc bởi axit sialic.
Các IAP riêng biệt có thể được phân lập từ mô ruột của
thai nhi và người trưởng thành, với bào thai hình thành
một isoenzyme sialyl hóa trái ngược với người trưởng
thành. Dạng bào thai và dạng trưởng thành không chỉ khác
nhau về hàm lượng carbohydrate mà còn ở bản thân protein,
cho thấy rằng một locus gen ALP riêng biệt có thể tồn tại
ở người trong quá trình phát triển của bào thai. IAP của
thai nhi có trong nước ối và trong phân su. Gen onic của
bào thai/phôi này cũng đã được xác định trong các tế bào
ung thư và được chỉ định là isoenzyme Kasahara.
Gen ALP của nhau thai người cũng được ánh xạ tới nhiễm
sắc thể số 2. Nó thể hiện 87% tương đồng với gen IAP. Tuy
nhiên, có sự khác biệt về axit amin ở các đầu carboxyl của
chúng. Placental ALP là một loại enzyme ổn định nhiệt có
ở mức độ cao trong nhau thai.
Một lượng vết của isoenzyme này có thể được phát hiện trong huyết
thanh bình thường. Một phần của hoạt động kiểu nhau thai trong
huyết thanh bắt nguồn từ bạch cầu trung tính. Hoạt động ALP của
nhau thai cũng đã được phát hiện trong các tế bào phổi loại I bình thường
Bách khoa toàn thư về các bệnh nội tiết, Tập 1. 2004 Elsevier Inc. Bảo lưu mọi quyền.
Machine Translated by Google
Phosphatase kiềm
và trong buồng trứng và cổ tử cung của con người. Gen
ALP của nhau thai có thể được biểu hiện lại bởi các
tế bào ung thư dưới dạng isoenzyme Regan. Placental
ALP là một enzyme rất đa hình thái, có tới 18
allelozyme được xác định do đột biến điểm, trái ngược
với các isoenzyme ALP khác.
Gen mã hóa ALP của tế bào mầm (GCAP) cũng được ánh
xạ tới nhiễm sắc thể số 2. Nó mã hóa ALP của tinh hoàn/
tuyến ức và có thể được biểu hiện trong nhau thai ở
mức độ thấp. GCAP trong tinh hoàn dường như được
định vị vào màng tế bào của các tế bào mầm chưa
trưởng thành và, giống như các isoenzyme ALP khác,
được gắn vào màng tế bào bằng neo glycan–phosphatidyl–
inositol (GPI). Giống như các gen ALP trong ruột và
khuẩn. E. coli ALP tồn tại dưới dạng dime của các tiểu
nhau thai, nó có thể được biểu hiện lại bởi các tế bào ung thư.
đơn vị giống hệt nhau, mỗi tiểu đơn vị chứa 429 axit
NỘI ĐỊA HÓA ALP
Nội địa hóa ALP trong tế bào đã được thực hiện bằng
cách phân đoạn các thành phần dưới tế bào bằng
phương pháp siêu ly tâm và sau đó thực hiện hóa tế
bào bằng kính hiển vi điện tử. Từ những nghiên cứu
này, người ta có thể kết luận rằng hầu hết hoạt động
của ALP trong phần lớn các loại tế bào đều nằm trên
màng sinh chất. Tuy nhiên, một lượng nhỏ hoạt động
của enzyme đã được chứng minh là có mặt ở các vị trí
nội bào khác như nhân, mạng lưới nội chất và bộ máy Golgi.
Các kỹ thuật mô hóa học ở cấp độ của kính hiển vi
điện tử cho thấy sản phẩm phản ứng của ALP trên màng
vi nhung mao, thể đa bào, phức hợp Golgi, lysosome,
mạng lưới nội chất và màng nhân của các tế bào biểu
mô hấp thụ của niêm mạc ruột. ALP ở thận được khu trú
trên các vi nhung mao của các tế bào ống lượn gần. Ở
gan, sản phẩm phản ứng của ALP hiện diện trên các vi
nhung mao của ống mật. Trong xương, hoạt động của ALP
hiện diện trên bề mặt ngoài của màng sinh chất của các
tế bào sụn trưởng thành và phì đại cũng như của các
nguyên bào tạo xương và nguyên bào tạo xương. Sản
phẩm của phản ứng cũng có mặt trong các lỗ hổng của
tế bào sụn, trong các túi chất nền trong chất nền sụn,
cũng như trong các sợi collagen không bị canxi hóa
của chất tạo xương trong xương. Ở pla centa, hoạt
động của ALP được tìm thấy dọc theo màng màng plasma
lót các vi nhung mao và trong các túi của tế bào nuôi
tế bào hợp bào. Tuy nhiên, trong các tế bào bạch cầu
ái toan, sản phẩm phản ứng ALP chỉ được tìm thấy với
số lượng tối thiểu trong màng sinh chất nhưng nổi bật
trên màng nhân và phần bên ngoài của ty thể. Màng
Golgi và mạng lưới nội chất phản ứng nhưng ít căng
thẳng hơn. Các phản ứng tế bào học tích cực đối với
ALP chỉ giới hạn trong tế bào chất của các tế bào
trưởng thành hơn.
165
bạch cầu hạt trung tính. Hoạt động của ALP cũng được
tập trung vào các nguyên bào sợi, cơ trơn mạch máu và
các tế bào nội mô trong não, tim và các tuyến nội tiết.
CẤU TRÚC VÀ NEO CỦA
ALP ĐẾN MÀNG TẾ BÀO
Enzyme ALP của con người chưa thu được ở dạng tinh
thể phù hợp cho phân tích tia X. Tuy nhiên, các vị trí
hoạt động của chúng và vị trí hoạt động của Escherichia
coli ALP, cho thấy mức độ tương đồng cao, do đó, các
vùng chính của isoenzyme của con người có thể được
diễn giải dựa trên các vùng tương ứng của enzyme vi
amin. Các quan sát tinh thể học của phân tử từ E. coli
đã tiết lộ cấu trúc ba chiều của ALP dimeric: một
hình giống con dơi với bộ ba ion kim loại trong mỗi
vùng vị trí hoạt động. Kẽm có thể liên kết với tất cả
các vị trí này nhưng liên kết đặc biệt mạnh với bốn
vị trí trên mỗi dime, với magiê chiếm hai vị trí của
dime.
ALP thuộc về một nhóm lớn các protein được gắn vào
bề mặt bên ngoài của các tế bào bằng một mỏ neo GPI ở
đầu C. Như vậy, nó là một ectoenzyme thể hiện ở bên
ngoài tế bào. Enzim là một tetramer khi nó liên kết
với màng, nhưng nó lưu thông dưới dạng dime.
Phospholipase C hoặc D, có nhiều trong huyết tương,
có khả năng chuyển đổi dạng liên kết màng thành dạng
hòa tan.
XÁC ĐỊNH ALP
ISOENZYMES
Tổng hoạt động ALP huyết thanh vẫn là một trong những
hoạt động enzyme được đo thường xuyên nhất trong y
học lâm sàng. Một số chất nền khác nhau đã được giới
thiệu cho thử nghiệm của nó. Trong số này,
paranitrophenyl phosphate (PNPP) có lẽ được sử dụng rộng rãi nhất.
Nhiều phương pháp đã được đề xuất để phân tách các
isoenzym ALP khác nhau, bao gồm biến tính nhiệt, ức
chế hóa học đối với hoạt động chọn lọc, điện di trên
gel, kết tủa bằng lectin mầm lúa mì và xét nghiệm miễn
dịch.
Phương pháp biến tính nhiệt dựa trên sự tăng dần
độ ổn định nhiệt ở 56 8C của các enzym ALP có trong
huyết thanh. Độ ổn định nhiệt này dao động từ ALP nhau
thai, hoàn toàn ổn định nhiệt; đến gan ALP, có độ ổn
định trung bình; đến xương ALP, vốn rất không ổn định.
Hoạt tính trung bình còn lại của enzym sau 15 phút ở
56 8C là 11, 21, 90 và 87% hoạt tính ban đầu đối với
xương,
Machine Translated by Google
166
isoenzyme gan, ruột và nhau thai, tương ứng.
Việc xác định nguồn gốc mô của các enzym bằng cách sử dụng
bất hoạt nhiệt vi sai đòi hỏi phải kiểm soát chính xác
nhiệt độ trong quá trình xét nghiệm.
Các chất ức chế hóa học chọn lọc cũng đã được sử dụng
để tách các isoenzyme ALP. l-phenylalanine và l-tryptophane
ức chế ALP ở ruột và nhau thai, trong khi levamisole và l-
homoarginine ức chế TN ALP. Mỗi chất ức chế này là đặc
hiệu lập thể và không cạnh tranh.
Một phương pháp phổ biến khác để phân biệt giữa các
isoenzyme ALP là điện di trên gel polyacrylamide (TRANG).
ALP ở gan mang điện tích âm ròng cao nhất, tiếp theo là ở
dạng nhau thai, xương và ruột. ALP của gan và xương có
thể được phân tách đủ để cho phép đánh giá trực quan về
tỷ lệ tương đối của chúng, nhưng các phương pháp này khá
tẻ nhạt và thường có sự chồng chéo giữa hai isoenzyme,
khiến việc định lượng chính xác trở nên khó khăn.
Lectin mầm lúa mì liên kết với N-acetylglucosamine và
dư lượng axit sialic, và nó cung cấp một phương pháp để
tách ALP gan và xương. Dựa trên các kiểu glycosyl hóa khác
nhau của gan và xương, lectin mầm lúa mì liên kết có chọn
lọc với dạng xương.
Tuy nhiên, các tiêu chuẩn và nồng độ lectin thích hợp là
cần thiết để giải quyết chính xác.
Nỗ lực tạo ra các kháng thể đơn dòng đặc hiệu cho mô đã
dẫn đến các kháng thể có khả năng nhận dạng ưu tiên ALP
của gan, ruột và nhau thai. Một xét nghiệm đo phóng xạ
miễn dịch hai vị trí dựa trên việc sử dụng hai kháng thể
đơn dòng đã được phát triển cho đồng dạng xương.
CHỨC NĂNG CỦA ALP
chức năng sinh hóa
Ba chức năng trong ống nghiệm đã được quy cho ALP: (1) sự
thủy phân phospho của phosphomonoester hữu cơ có khối
lượng phân tử thấp, (2) hoạt động của phosphotransferase,
và (3) hoạt động của protein phosphatase. Cho dù bất kỳ
điều nào trong số này liên quan đến vai trò sinh lý của
enzyme vẫn chưa được biết. ALP ít ưu tiên cho một chất
nền cụ thể và sẽ thủy phân tất cả các monoeste phospho
(diester không phải là chất nền). Xúc tác bao gồm quá
trình phosphoryl hóa dư lượng serine tại vị trí hoạt
động, tiếp theo là chuyển nhóm phos phoryl thành nước
(thủy phân phospho) hoặc rượu nhận hữu cơ
(phosphotransferase).
Tuy nhiên, sự phân cắt phosphoester sẽ nhanh hơn nếu quá
trình chuyển photphat thành chất nhận chứ không phải nước,
và bản chất kỵ nước của ALP liên kết với màng sinh chất
có thể dẫn đến ưu tiên cho chất hữu cơ.
Phosphatase kiềm
chất nhận và do đó chủ yếu là phản ứng chuyển hóa phospho.
Vai trò sinh lý của ALP
ALP được phân phối rộng rãi trong tự nhiên; chúng có mặt
ở tất cả các loài, từ vi khuẩn đến con người. Đây là dấu
hiệu cho thấy các enzym tham gia vào các quá trình sinh
hóa cơ bản.
Sự phát triển của phôi Các
nghiên cứu về phôi của động vật lưỡng cư đã dẫn đến
những dự đoán liên quan đến sự phân bố dự kiến, trên trung
bì sườn của phôi, của một phân tử bề mặt tế bào liên quan
đến thông tin hướng dẫn cho sự di chuyển tế bào phôi của
các tế bào ống tiền mô. Một cuộc điều tra về tác động của
sự gián đoạn gen ALP phôi đối với sự phát triển tiền làm
tổ của chuột cho thấy rằng sự vắng mặt của gen ALP phôi
dẫn đến ít phôi nang hơn trong ống nghiệm, chậm sinh nở và
giảm kích thước lứa đẻ trong cơ thể. Quan sát này chỉ ra
rằng
sự hiện diện của một gen ALP hoạt động có lợi cho sự phát
triển tiền làm tổ.
Điều hòa vận chuyển lipid và vận chuyển phốt phát ở
ruột và thận Sự phong phú cục bộ của
ALP trên màng của các tế bào liên quan đến việc vận chuyển
nhiều chất (ví dụ: tế bào tá tràng và tế bào ruột non, tế
bào ống thận, tế bào phổi loại I trong phổi) gợi ý một Vai
trò của enzyme trong hoạt động phức tạp
chuyên chở.
Bằng chứng đã được tích lũy rằng IAP có thể đóng một
vai trò trong vận chuyển lipid. Độ cao của hoạt động IAP
huyết thanh đã được chứng minh ở chuột sau khi cho ăn
chế độ ăn nhiều chất béo. Độ lớn của phản ứng này phụ
thuộc vào độ dài chuỗi axit béo. Mối tương quan giữa
nồng độ lipid và hoạt động IAP trong bạch huyết người đã
dẫn đến suy đoán rằng IAP có thể liên quan đến vận chuyển
lipid.
Các quan điểm liên quan đến vai trò của ALP trong vận
chuyển phốt phát vô cơ (Pi) ở thận khác nhau đáng kể.
Việc sử dụng các chất ức chế ALP làm giảm tái hấp thu Pi ở
thận in vivo. Tuy nhiên, các nghiên cứu trong ống nghiệm
đã chỉ ra rằng các hợp chất ức chế hoạt động của ALP không
ngăn chặn sự hấp thu Pi, cho thấy ALP không phải là enzyme
vận chuyển Pi tương tự như ATPase trong vận chuyển Na+
mà đúng hơn là vai trò của ALP trong vận chuyển Pi là gián
tiếp . Ở thận, hoạt động của ALP cao nhất ở đầu ống lượn
gần, trùng khớp với vùng vận chuyển Pi qua màng viền bàn
chải lòng ống gần. Tích cực
Machine Translated by Google
Phosphatase kiềm
mối tương quan được tìm thấy giữa sự vận chuyển Pi qua
màng viền bàn chải và hoạt động của ALP chứ không phải
của các enzyme màng viền bàn chải khác.
Chức năng của ALP trong cổng vận chuyển Pi (và canxi)
biểu mô ruột cũng là một chủ đề gây tranh cãi ở chỗ các
chất ức chế ALP không thể ức chế Pi.
vận chuyển của tế bào ruột.
Hình thành xương
Một vai trò quan trọng khác đã được giao cho ALP là vai
trò của nó trong quá trình khoáng hóa xương. Robison là
người đầu tiên nhận ra vai trò của ALP trong quá trình
khoáng hóa xương. Bằng chứng rõ ràng nhất cho thấy chức
năng của TN-ALP trong quá trình hình thành xương đi kèm
với sự phân định chứng giảm phosphatasia di truyền. Rối
loạn này được đặc trưng bởi quá trình khoáng hóa xương
bị khiếm khuyết. Mức độ nghiêm trọng của chứng giảm
phosphatasia rất khác nhau, từ thai chết lưu hầu như
không có xương khoáng hóa đến gãy xương bệnh lý xuất
hiện lần đầu khi trưởng thành. Tính không đồng nhất về
mặt lâm sàng của tình trạng giảm phosphatasia có thể phản
ánh nhiều đột biến đã được mô tả trong gen TN-ALP và điều
đó có thể dẫn đến các mức độ nghiêm trọng về mặt lâm sàng khác nhau.
Các vai trò sau đây đã được đặt ra cho ALP của xương
trong quá trình khoáng hóa: (1) thủy phân este phốt phát
hữu cơ, dẫn đến nồng độ Pi cục bộ cao và tạo điều kiện
kết tủa canxi phốt phát; (2) phá hủy các chất ức chế tăng
trưởng tinh thể sinh lý như pyrophosphate vô cơ và
adenosine triphosphate (ATP) thông qua hoạt động hydro
lase của nó; (3) hành động như một người vận chuyển số
Pi; và (4) vận chuyển tích cực Ca2+ hoặc Pi thông qua
hoạt động ATPase của nó.
Trong các túi chất nền xương (các mảnh màng plasma hoạt
động chức năng của các nguyên bào xương) và vị trí ban
đầu hình thành tinh thể hydroxyapatite, hoạt động ALP của
xương có thể nhiều hơn gấp 20 lần so với hoạt động trên
bề mặt màng plasma của các vụ nổ xương còn nguyên vẹn.
ALP có thể tham gia ở đây để bắt đầu quá trình vôi hóa
bằng cách tăng nồng độ cục bộ của các ion phốt phát. Miền
liên kết ma trận ngoại bào của TN-ALP cũng có thể đóng
vai trò quan trọng trong việc định hướng sự di chuyển
của các túi ma trận dọc theo các sợi gen colla trong quá
trình khoáng hóa xương.
ALP ở gan Mặc
dù ALP ở gan thường đại diện cho ít nhất một nửa tổng
hoạt động của ALP huyết thanh ở người trưởng thành khỏe
mạnh, nhưng có rất ít bằng chứng chứng minh chức năng
gan quan trọng đối với ALP ở gan. Nó thường được giả
định từ vị trí của nó trên màng hình sin mà ALP gan hoạt
động như một protein vận chuyển. Tuy nhiên, người ta
nghi ngờ rằng ALP hoàn thành một chức năng chính trong
gan do sự thiếu hụt tổng thể của isoenzyme gan ở trẻ sơ sinh bẩmxương
167
hypophosphatasia dường như không dẫn đến bất kỳ biểu
hiện lâm sàng rõ ràng nào. Tuy nhiên, một báo cáo đã gợi
ý rằng ALP của gan có thể bảo vệ chức năng gan khỏi tổn
thương miễn dịch bằng cơ chế liên quan đến trung hòa nội
độc tố.
ALP trong vi mạch
ALP là một trong những enzyme chính có trong vi mạch não
và tim. ALP có thể có một vai trò trong quá trình chuyển
hóa me của pyridoxal 50 -phosphate, một đồng yếu tố của
các enzym như glutamate decarboxylase và glutamate
transaminase tham gia vào quá trình chuyển hóa mô thần
kinh và có thể là một enzym chủ chốt của hàng rào máu-não
được điều hòa bởi insulin . Do đó, insulin đã được phát
hiện là có tác dụng ức chế đáng kể hoạt động ALP của não.
Hoạt động của ALP liên quan đến các tế bào nội mô mao
mạch cũng bị ảnh hưởng rõ ràng bởi môi trường thiếu oxy.
Hoạt động của ALP giảm đáng kể hoặc không có ở những vùng
cơ xương và cơ tim bị thiếu oxy, và mức giảm tương tự
được tìm thấy ở thuyên tắc não liên quan đến bắc cầu tim
phổi. Mất khu trú hoạt động ALP được chứng minh bằng các
phương pháp hóa mô dường như là một thăm dò hữu ích
trong việc xác định các locus thiếu máu cục bộ hoặc thiếu
oxy trong các mô này. Người ta cũng đề xuất rằng sự biểu
hiện của ALP trong lớp nội mô ở các vi mạch não và tim có
thể góp phần làm xơ cứng và vôi hóa mạch máu được quan
sát thấy ở người. Ngược lại, điều này có thể liên quan
đến quá trình lão hóa mạch máu, bệnh mạch máu và hậu quả
là làm suy yếu và/hoặc vỡ thành mạch.
Ý NGHĨA BỆNH HỌC
CỦA ALP
Các yếu tố chính ảnh hưởng đến hoạt động của ALP là tuổi
tác, giới tính và tình trạng nội tiết tố (dậy thì hoặc
mãn kinh). Từ sơ sinh đến 6 tuần, cả ALP trong xương và
ALP trong ruột đều tăng. Không quan sát thấy ALP gan cho
đến 6 tháng tuổi. Ở trẻ em, một loạt các hoạt động của
ALP tồn tại và tương quan với chiều cao và cân nặng, và
cho đến tuổi dậy thì, isoenzyme của xương chiếm 77 đến
87% tổng số. Hoạt động gia tăng ở trẻ em trong độ tuổi
dậy thì, với mức tối đa là sớm hơn ở bé gái so với bé
trai và tương ứng theo thời gian với sự phát triển vượt
bậc ở cả hai giới. ALP xương đã được báo cáo là tăng lên
trong thời kỳ mang thai; tuy nhiên, sự gia tăng dần dần
trong tổng hoạt động ALP được quan sát thấy trong 6 tháng
đầu của thai kỳ, sau đó là sự gia tăng nhanh chóng trong
tam cá nguyệt cuối cùng. Sự gia tăng này chủ yếu là do
enzyme nhau thai.
Ở người trưởng thành khỏe mạnh, tỷ lệ hoạt động của
sinh. so với hoạt động của gan là khoảng 1:1. Sau 50 tuổi,
Machine Translated by Google

168 Phosphatase kiềm

tổng ALP lại tăng lên. Hoạt động ALP của xương thường
được thấy ở phụ nữ mãn kinh cao hơn so với phụ nữ tiền
mãn kinh. Có rất nhiều sự khác biệt giữa các cá nhân về
mức độ ALP ở người trưởng thành, nhưng đối với bất kỳ cá
nhân nào, các giá trị thay đổi rất ít theo thời gian.
ALP được loại bỏ khỏi máu rất chậm; thời gian bán hủy
thay đổi từ 40 giờ đối với xương đến 7 ngày đối với các
dạng đồng phân của nhau thai. Biến thiên sinh học hàng
ngày của tổng ALP ước tính nhỏ hơn 4%.
khoáng hóa của chất nền dạng xương được tổng hợp bởi các
nguyên bào xương, nhưng do tấm tăng trưởng được đóng
lại, các rối loạn của sụn đầu xương không xảy ra và do đó
không thấy sự bất thường về tăng trưởng. Kết quả là sự
tích tụ của xương không được khoáng hóa, từ đó làm giảm
mật độ xương, như được thể hiện bằng X-quang hoặc các kỹ
thuật khác. Giống như ở trẻ em, rối loạn chuyển hóa
vitamin D ở người lớn là nguyên nhân phổ biến nhất của
chứng nhuyễn xương và ALP của xương tăng lên đáng kể
trong những trường hợp này.

Căn bệnh về xương Bệnh Paget Xương Bệnh

Paget xương là một rối loạn phổ biến ở người cao tuổi,
Còi xương và nhuyễn xương
nơi diễn ra quá trình luân chuyển xương quá mức, dẫn đến
Bệnh còi xương ở trẻ em đang lớn được đặc trưng bởi sự
việc tạo ra xương có cấu trúc bất thường. Nó được đặc
thay đổi trong quá trình biệt hóa tế bào sụn và giảm quá
trưng trong giai đoạn đầu bởi sự gia tăng tiêu xương, sau
trình khoáng hóa chất nền trong đĩa tăng trưởng sụn, do
đó là phản ứng tạo xương dữ dội. ALP là một biểu hiện
hoạt động tạo xương tăng lên và do quá trình khoáng hóa
dấu hiệu sinh hóa rất nhạy cảm của bệnh Paget xương, cũng
khiếm khuyết của chất nền xương. Nguyên nhân phổ biến nhất
như các chỉ số tiêu xương. Hoạt động của ALP trong bệnh
là thiếu vitamin D. Rối loạn cơ bản về cân bằng nội môi
Paget cao hơn bất kỳ bệnh xương nào khác, ngoại trừ các
phốt phát và rối loạn ống thận cũng có thể gây ra bệnh còi
khối u nguyên phát của xương (sarcoma xương) và các
xương ở trẻ em.
nguyên bào xương di căn từ các khối u ngoài xương (đặc
Một số điều kiện dẫn đến bệnh còi xương do thiếu
biệt là ung thư tuyến tiền liệt). ALP xương cuối cùng có
vitamin D, bao gồm việc da tiếp xúc không đủ với bức xạ
thể giảm, có thể là do bệnh chuyển sang giai đoạn xơ cứng.
cực tím với chế độ ăn uống không đầy đủ hoặc kém hấp thu
ALP huyết thanh và các chỉ số tiêu xương tương quan tốt
vitamin này ở ruột, chức năng thận bị suy giảm mãn tính do
với mức độ liên quan của xương và đáp ứng với điều trị.
không sản xuất đủ 1,25-dihydroxy vitamin D ( dạng đồng
minh chuyển hóa có hoạt tính của vitamin này), bất thường
về thụ thể vitamin D và sự thiếu hụt di truyền enzym 1a–
hydroxylase tạo ra 1,25-dihydroxy vitamin D. ALP xương ở
Giảm phosphatasia bẩm sinh Giảm
những trẻ này tăng từ trung bình đến cao. Hoạt động ALP
phosphatasia là một rối loạn di truyền được đặc trưng
của xương có thể tăng thêm ngay sau khi bắt đầu điều trị
bởi quá trình khoáng hóa xương bị khiếm khuyết và thiếu
bằng vitamin D khi vết thương bắt đầu lành và nó có thể
hụt hoạt động TN-ALP. Hoạt động của isoenzyme ALP khác
giảm dần khi liệu pháp có hiệu quả.
không bị ảnh hưởng. Dạng đồng hợp tử nghiêm trọng gây tử
vong, trong khi những đứa trẻ ít bị ảnh hưởng nghiêm
trọng hơn có biểu hiện biến dạng xương chung chung do quá
Giảm phosphat máu liên kết X do đột biến enzyme PHEX và
trình khoáng hóa osteoid bị khiếm khuyết. Dạng trưởng
giảm phosphat máu trội nhiễm sắc thể thường do đột biến
thành nhẹ hơn được đặc trưng bởi gãy xương bệnh lý và mất răng sớm.
ở FGF23 được đặc trưng bởi biến dạng xương nghiêm trọng
Ba hợp chất phospho tích lũy nội sinh trong hypophosphatasia
dần dần và bệnh lùn. Hoạt động ALP của xương cũng cao ở
—phosphoethanolamine (PEA), pyrophosphate vô cơ (PPi) và
những trẻ này.
pyridoxal 50 - phosphate (PLP)—chỉ ra rằng đây là những
chất nền tự nhiên cho TN-ALP.
Còi xương có thể xảy ra trong nhiều rối loạn với chức
năng ống lượn gần bị suy giảm dẫn đến tăng thanh thải
phosphat vô cơ ở thận và giảm phosphat máu. Lọc cầu thận
có thể bình thường hoặc gần bình thường. Vì nồng độ
Bệnh gan mật Các bệnh về
trong huyết thanh của phốt phát vô cơ và canxi rất quan
trọng đối với sự hình thành các tinh thể hydroxyapatite và gan, chẳng hạn như viêm gan cấp tính và mãn tính, xơ gan,
quá trình khoáng hóa của xương, nên tình trạng giảm phốt ung thư biểu mô gan, ung thư biểu mô di căn của gan và
phát trong máu dẫn đến quá trình khoáng hóa bị khiếm khuyết. tắc nghẽn mật cấp tính và mãn tính, có liên quan đến sự
gia tăng hoạt động ALP của gan.
Nhuyễn xương tương đương với bệnh còi xương ở người Kể từ báo cáo đầu tiên về hoạt động ALP tăng cao trong
lớn ở trẻ em. Nó được đặc trưng bởi một khiếm khuyết trong huyết thanh người liên quan đến bệnh vàng da tắc nghẽn,
Machine Translated by Google
Phosphatase kiềm
phần lớn kiến thức hiện tại liên quan đến ALP trong ứ mật
đã thu được từ các thí nghiệm với chuột bị thắt ống dẫn
mật. Các nghiên cứu trên chuột đã chỉ ra rằng việc thắt
ống mật hoặc phơi nhiễm các mẫu nuôi cấy của gan chuột
với mật từ những con chuột bị thắt ống mật gây ra sự gia
tăng rõ rệt tổng hợp ALP ở gan, sau đó là sự gia tăng
hoạt động ALP huyết thanh trong ống mật. chuột cống. Một
số axit mật có khả năng kích thích hoạt động của ALP
theo kiểu phụ thuộc vào liều lượng trong nuôi cấy tế bào
gan chuột.
Ở bệnh nhân xơ gan, quá trình dị hóa ALP có thể giảm.
Lưu lượng bạch huyết trong lồng ngực tăng lên nhiều lần
ở bệnh nhân xơ gan, và isoenzym đường ruột làm giàu bạch
huyết trong lồng ngực và huyết thanh, đặc biệt là sau bữa
ăn nhiều chất béo. Có thể hình dung rằng hai yếu tố này
(giảm độ thanh thải của gan xơ gan và làm giàu bạch huyết
lồng ngực với isoenzyme ruột) là nguyên nhân gây ra sự
xuất hiện thường xuyên của isoenzyme ruột trong huyết
thanh của bệnh nhân xơ gan.
Các dạng khối u của ALP
Kể từ mô tả đầu tiên về việc sản xuất ALP ngoài tử cung
bởi mô khối u, ba loại isoenzyme khác nhau từ các locus
gen độc lập đã được phát hiện ở bệnh nhân ung thư: (1)
Regan isoenzyme hoặc ALP từ nhau thai; (2) Nagao, tinh
hoàn hoặc giống ALP nhau thai; và (3) Kasahara hoặc ALP
đường ruột của thai nhi.
Tổng ALP huyết thanh đã được chứng minh là một chỉ số
hiệu quả đối với bệnh ung thư vú di căn, với độ nhạy
đối với di căn từ 30 đến 40%. Tổng ALP cũng đã được đề
xuất là một yếu tố tiên lượng quan trọng đối với bệnh
ung thư tuyến tiền liệt. Sử dụng các phương pháp thống
kê khác nhau, độ nhạy, độ đặc hiệu và độ chính xác của
di căn gan trong ung thư phổi lần lượt là 71, 89 và 86%.
ALP xương huyết thanh nhạy gấp đôi so với tổng hoạt động
của enzyme trong chẩn đoán sự hiện diện của di căn xương.
ALP nhau thai huyết thanh đã được
169
được mô tả như một dấu hiệu tiềm năng ở bệnh nhân mắc
hội chứng, nhưng các ảnh hưởng môi trường đã được
chứng minh là ảnh hưởng đáng kể đến mức ALP của nhau
thai (ví dụ: hút thuốc dẫn đến sự tái phát của ALP ở nhau
thai). Bất chấp những ảnh hưởng môi trường này, ALP
nhau thai đã được sử dụng thành công để theo dõi ung
thư biểu mô tinh hoàn và buồng trứng.
Do đó, các dạng ALP dường như đóng một vai trò quan
trọng trong chẩn đoán nhiều rối loạn lâm sàng lành tính
và ác tính, đặc biệt là xương và gan, và có thể là một
chỉ số hữu ích để theo dõi điều trị các bệnh này.
Đọc thêm
Bai, XY, Miao, D., Goltzman, D., và Karaplis, AC (2003). Đột biến
gen R176Q trong yếu tố tăng trưởng nguyên bào sợi 23 chống lại
sự phân cắt protein và tăng cường hiệu lực sinh học in vivo. J.
Sinh học. hóa học. 278, 9843–9849.
Dehghani, H., Narisawa, S., Millan, JL, và Hahnel, AC (2000).
Ảnh hưởng của sự gián đoạn gen phosphatase kiềm phôi đối với sự
phát triển tiền làm tổ của chuột. nhà phát triển Động lực học
217, 440–448.
Hui, M., và Tenenbaum, HC (1998). Diện mạo mới của một loại enzyme
cũ: Phosphatase kiềm có thể góp phần vào quá trình lão hóa mô của
con người bằng cách gây cứng và vôi hóa mô. Giải phẫu Rec. 253,
91–94.
Miao, D., và Scutt, A. (2002). Nội địa hóa mô học của hoạt động
phosphatase dòng kiềm trong xương và sụn khử canxi.
J. Histochem. tế bào học. 50, 333–340.
Narisawa, S., Wennberg, C., và Millan, JL (2001). Chuyển hóa vitamin
B6 bất thường ở chuột bị loại bỏ phosphatase kiềm gây ra nhiều
bất thường, nhưng không làm suy yếu quá trình khoáng hóa xương.
J. Pathol. 193, 125–133.
Van Hoof, VO, và De Broe, ME (1994). Giải thích và ý nghĩa lâm sàng
của các mẫu isoenzyme kiềm phosphatase.
chí mạng. Linh mục lâm sàng. phòng thí nghiệm. Khoa học. 31, 197–293.
Tại sao, nghị sĩ (1994). Hypophosphatasia và vai trò của phosphatase
kiềm trong quá trình khoáng hóa xương. nội tiết. Rev. 15, 439–
461.
Xu, Q., Lu, Z. và Zhang, X. (2002). Một vai trò mới của phosphatase
kiềm trong việc bảo vệ khỏi tổn thương gan miễn dịch ở chuột.
Gan 22, 8–14.