Phương pháp xét nghiệm di truyền tế bào

I. Phương pháp NST đồ (karyotyping)

1. Không phát hiện được đột biến gen:

Nhưng kỹ thuật karyotyping không thể quan sát được những biến thể đa hình ở cấp độ
gen. Các gen khác nhau quá nhỏ hoặc nhỏ hơn và không thể nhìn thấy qua kính hiển
vi.

Các dải G tô màu toàn bộ các vùng dị nhiễm sắc và đa nhiễm sắc nhưng không thể
nhuộm các gen riêng lẻ và do đó không thể phát hiện ra các gen khác nhau. Đột biến
gen liệt kê dưới đây không thể được đánh giá bằng cách sử dụng karyotyping,

Bệnh xơ nang
bệnh Huntington
Thalassemia
Thiếu máu hồng cầu hình liềm
đột biến gen MTHFR
2. Không thể phát hiện những thay đổi ở cấp độ DNA:

DNA là trình tự mã hóa hoặc phần không mã hóa. Các phần mã hóa là các gen trong
khi phần không mã hóa là các trình tự hỗ trợ giúp điều hòa biểu hiện gen.

Một số đột biến trong DNA không mã hóa hoặc mã hóa có thể gây ra các vấn đề sức
khỏe nghiêm trọng. Một ví dụ, thay đổi trong quá trình methyl hóa hoặc các yếu tố tăng
sinh hoặc tính đa hình liên quan khác,… không thể được nhìn thấy bằng cách sử dụng
so sánh kiểu nhân.

Và do đó, những bất thường như thay đổi biểu hiện gen không thể được phát hiện
bằng kỹ thuật hiện tại.

3. Sự lẫn lộn giữa tế bào của người mẹ và con không thể được phát hiện
(trong xét nghiêm trước sinh):

Việc sự trộn lẫn tế bào của mẹ từ mẫu trước khi sinh là rất cần thiết nếu không có mẫu
thì không thể xử lý được. Kỹ thuật karyotyping không thể phân biệt mẫu là nhiễm sắc
thể của mẹ hay thai nhi.

Và do đó, mặc dù mẫu trước khi sinh được gửi đi để đánh giá các bất thường về nhiễm
sắc thể, nhưng nó được xử lý để phát hiện sự bất thường trong nhân tế bào của người
mẹ bằng các kỹ thuật di truyền khác trước.

4. Không thể phát hiện các đôt biến chưa từng gặp:
Kỹ thuật karyotyping chỉ có thể phát hiện các biến thể đã biết và từ đó trở đi bất kỳ đột
biến mới nào về nhiễm sắc thể mặc dù nó có thể quan sát được, nhưng không thể liên
kết với tình trạng bệnh lí.

5. Các hạn chế khác:

Các hạn chế khác của kỹ thuật karyotyping là độ phân giải dải G. Thực hiện karyotyping
từ một mẫu máu cũng cho kết quả và dải G có độ phân giải tốt, nhưng không thể sao
chép tương tự trên các mẫu như nước ối, lông nhung màng đệm hoặc các loại mô
khác.

Do đó, rất khó để xác định các bất thường về kiểu nhân thông thường do độ phân giải
dải hạn chế hoặc độ phân giải kém của dải G.

Toàn bộ quy trình karyotyping là thủ công và được thực hiện trong 3 ngày từ khi nuôi
cấy tế bào đến tạo dải G. Nó dễ bị nhiễm bẩn gây ra lỗi hoặc sai sót trong kết quả.

Việc sao chép kết quả từ các cơ sở khác nhau hoặc các loại mẫu từ cùng một bệnh
nhân cũng rất khó khăn.

Ngoài ra, một số hạn chế phổ biến là;

 Độ phân giải băng tần G hạn chế

 Chuyển đoạn nhiễm sắc thể không thể gặp chính xác.
 Kỹ thuật này kéo dài, tốn nhiều thời gian và chi phí.

II. FISH (Fluorescence in-situ hybridisation)

FISH chỉ có thể phát hiện các đột biến cấu trúc NST ở các vùng được nhắm mục
tiêu cụ thể lớn hơn hoặc bằng đầu dò được sử dụng.
Có thể không phát hiện được các đột biến ở các đoạn NST rất nhỏ, hiếm gặp.
III. Chromosome painting
Nguyên lý tương tự FISH nhưng thay đổi là tổng hợp nhiều đoạn mồi ở các vị trí
khác nhau trên NST
 Quan sát rất rõ các đột biến chuyển đoạn giữa các cặp NST không tương đồng
 Tuy nhiên không phát hiện được các loại đột biến cấu trúc NST khác.
IV. Spectral karyotype
Nguyên lý tương tự Chromosome painting nhưng các đoạn mồi ở các vị trí khác
nhau được đánh dấu bằng màu khác nhau.
 Quan sát được rất rõ các loại đột biến NST
 Giá thành cao