ГЕНЕТИКА

НА БАКТЕРИИТЕ

ДОЦ. Д-Р К. БОЖКОВА, Д.М.

 ГЕНЕТИЧНА ПРОМЯНА
ПРИ БАКТЕРИИТЕ
Извършва се по два основни
механизма:

1. МУТАЦИИ

2. ГЕНЕТИЧЕН ТРАНСФЕР
МЕЖДУ БАКТЕРИАЛНИ КЛЕТКИ
 МУТАЦИИ
Мутации
 МУТАЦИИ
 Генни мутации
 Хромозомни мутации
 МУТАЦИИ
ГЕННИ мутации
  точкови (моносайтови) мутации —
 полисайтови мутации
 МУТАЦИИ
 ХРОМОЗОМНИ
• делеция (изпадане)
• инверзия –
• дупликация –
 МУТАЦИИ
• 1. Мълчаща мутация —
• 2. Новият триплет кодира друга
аминокиселина
 МУТАЦИИ
• 3. Аминокиселината кодирана от
новия триплет
• 4. Безмислена мутация.
 МУТАЦИИ
 Видове мутации:
■ Летални мутации
■ Обратни мутации
Супресорни мутации
Те могат да бъдат вътрегенни и
извънгенни.
 МУТАЦИИ
 Мутации - в производството на
 Дисоциацията на бактериите
също се дължи на мутации.
 ГЕНЕТИЧЕН ТРАНСФЕР
МЕЖДУ БАКТЕРИАЛНИ
КЛЕТКИ
• Може да се извърши по един от
следните три механизма:

1.ТРАНСФОРМАЦИЯ
Трансфекция
2.ТРАНСДУКЦИЯ
3. КОНЮГАЦИЯ
 ТРАНСФОРМАЦИЯ
• Ейвъри (1943) – при пневмококи
• Доказва, че ДНК е носител на
първичната генетична информация.
 ТРАНСФОРМАЦИЯ
• Компетентност
• Компетентността трае
• Зависи от външна фактори:
 ТРАНСФОРМАЦИЯ
• Този механизъм се извършва, когато
донорът и реципиентът са от един и
същи вид
• Установена при различни патогенни
и непатогенни бактерии
Продължителност ~ 1 час.
 ТРАНСФОРМАЦИЯ
Етапи:
1.Свързване на донорната ДНК с
рецепторни участъци
2. Транспортиране на ДНК в
реципиентната клетка;
3. Рекомбинация на проникналата ДНК с
хомоложен участък от реципиентната
хромозома
 ТРАНСФОРМАЦИЯ
• При Грам-положителните
бактерии в реципиента се
транспортира
• При последващата рекомбинация
 ТРАНСФОРМАЦИЯ
• При Грам-отрицателните
бактерии в реципиента
прониква
• Двете вериги се разплитат
 ТРАНСФЕКЦИЯ
• Заразяване на
бактериалната клетка с
фагова ДНК.
• Разновидност на
трансформацията.
 ТРАНСДУКЦИЯ
• Това е пренасяне чрез умерен
фаг на гени
• Бива два вида:
–Специфична трансдукция
–Неспецифична трансдукция
 ТРАНСДУКЦИЯ
• Специфична трансдукция:
–
 ТРАНСДУКЦИЯ
• Неспецифична трансдукция:
 ТРАНСДУКЦИЯ
Абортивна:
 ТРАНСДУКЦИЯ
Трансдукцията има широко
разпространение в природата,
 КОНЮГАЦИЯ
Представлява пренасяне на
генетични детерминанти от
една бактериална клетка
донор в друга-реципиент,
протичащо при контакт на
двете клетки.
 КОНЮГАЦИЯ
Свързва се с половия процес,
▪ донорна (мъжка)
 ▪ реципиентна (женска)
 КОНЮГАЦИЯ
• Конюгацията е процес на
разпространение на
конюгативни плазмиди.
• В донорната клетка трябва да
има конюгативен плазмид.
• Тази клетка става донорна
 КОНЮГАЦИЯ
• Конюгацията протича по два
начина:
• Първите етапи протичат и при
двата случая еднакво.
 КОНЮГАЦИЯ
• Етапи:
– 1. Образуване на специфични
конюгационни двойки
– 2. Специфичните двойки се
превръщат в ефективни
– Тези етапи са общи за двата вида
плазмиди.
 КОНЮГАЦИЯ
• При плазмиди в автономно състояние:
– 3. Мобилизиране за конюгационен
пренос на плазмидна ДНК
– 4. Пренасяне на плазмидната ДНК от
донорната в реципиентната клетка.
 КОНЮГАЦИЯ
• При плазмиди в автономно
състояние:
– 5. Фенотипно проявяване на
плазмида в реципиентната клетка.
Така плазмидите се
разпространяват много бързо в
бактериалната популация.
 КОНЮГАЦИЯ
• При плазмиди в интегрирано
състояние
–3. След началната част на
плазмида започва да преминава
съответната верига от
бактериалната хромозома.
 КОНЮГАЦИЯ
• Широко разпространен феномен
сред различни видове бактерии:
 ГЕНЕТИКА
НА БАКТЕРИИТЕ

ДОЦ. Д-Р К. БОЖКОВА, Д.М.

 ПРЕДМЕТ
• Изучава наследствеността
и унаследяемата
изменчивост при
бактериите, на които се
дължат сходствата и
• различията между
родителските клетки и
поколенията.
 ГЕНЕТИЧНИ
ИЗСЛЕДВАНИЯ
• Предимства:
 ГЕНОТИП
• Съвкупност от гени, които
Относително стабилен.
• Проявява се чрез фенотипа
 ГЕНОТИП
• Генотипната изменчивост е два
вида:
–Мутационна
–Генетична рекомбинация
 ФЕНОТИП
• Фенотип –
 ГЕНОМ
• Геном –
• Състои се от:
– Бактериална хромозома
– Извънхромозомни
генетични детерминанти
 ИСТОРИЯ
• След 1860 г.
• Мендел
• Морган
 ИСТОРИЯ
• Ф. Грифит-1928

• трансформация
 ИСТОРИЯ
• О. Ейвъри, МакЛеод, Мак Карти-1944
 БАКТЕРИАЛНА ХРОМОЗОМА
• Съществена структура на клетката.
• От генетичен аспект e
• Дължина ~1 mm.
 БАКТЕРИАЛНА ХРОМОЗОМА
• ГЕНИ –
• E. coli - дължина около 1 мм и около
3000 гени
• Различия в големината и броя на
гените
● Генетични карти – отразяват
последователността на гените в
хромозомата и тяхната
характеристика.
 БАКТЕРИАЛНА ХРОМОЗОМА
• Бактериалната хромозома
е хаплоидна и както всяка
друга единица ДНК
• Може да се реплицира
самостоятелно в клетките.
• Нарича се репликон.
 ДНК
• ДНК –
• ДНК представлява генетичната
структура, която е носител на
първичната генетична
информация (геном) и е
хромозомата на бактериалната
клетка.
 ДНК

• Хромозомната ДНК
е:
• Първичната и
вторична структура
на бактериалната
хромозомна и
плазмидната ДНК е
описана по модела
на J. Watson и F.
Crick.
 ДНК
• Изградена е
• Двойната спирала е от
плектонемичен тип,
 ДНК
• Третичната структура на ДНК се
свързва с нейната гъвкавост
• а) линеен дуплекс –
• б) двойноверижна отворена
циркулярна форма,
• в) двойноверижна ковалентно
затворена циркулярна форма
•
 РЕПЛИКАЦИЯ НА ДНК
След разплитането на
двете вериги всяка
служи като матрица за
синтез на
комплементарната и
верига.
Тъй като двойната
спирала е
антипаралелна,
репликацията на
веригите се извършва в
противоположни
посоки.
 РЕПЛИКАЦИЯ НА ДНК
Протича в три етапа:
• инициация -
• елонгация –
• терминация –
 РЕПЛИКАЦИЯ НА ДНК
• Основна разлика между прокариоти и
еукариоти е в
• При прокариотите
 ИЗВЪНХРОМОЗОМНИ
ГЕНЕТИЧНИ ЕЛЕМЕНТИ
√ Плазмиди
√ Транспонируеми
елементи
√ Бактериофаги
 ПЛАЗМИДИ
• Ледерберг-1952 г. - термин
плазмид
• “Миниатюрни ” независими от
бактериалната хромозома
молекули от двойноверижна,
циркулярна и
суперспирализирана ДНК, която е
■
 ПЛАЗМИДИ
• Попадат в бактериалната клетка
отвън чрез: конюгация,
трансдукция или
трансформация, реплицират се и
се предават на потомството.
■
 ПЛАЗМИДИ
• Не са жизнено необходими и
задължителни,
• Предават различни свойства
• ■ В над 50 вида Грам-положителни и
Грам-отрицателни бактерии.
■
 ВИДОВЕ ПЛАЗМИДИ
• Големи плазмиди –
• Малки плазмиди -
 ВИДОВЕ ПЛАЗМИДИ
• Конюгативни –
• Неконюгативни
 ВИДОВЕ ПЛАЗМИДИ
• Съвместими
• Несъвместими
 ВИДОВЕ ПЛАЗМИДИ
• По функция:
• F-плазмиди
 ВИДОВЕ ПЛАЗМИДИ
• R-плазмиди (
 ВИДОВЕ ПЛАЗМИДИ
• Бактериоциногенни:
 ВИДОВЕ ПЛАЗМИДИ
• Фактори на вирулентността: -
 ВИДОВЕ ПЛАЗМИДИ
• Метаболитни:
• Кодиращи резистентност към
комплемента
• Кодиращи синтеза на сидерофори.
• Инхибиращи абсорбцията на фаги.
• Увеличаващи честотата на
мутациите.
ТРАНСПОНИРУЕМИ ЕЛЕМЕНТИ
Извънхромозомни ДНК-сегменти, които
влизат в състава на бактериалната
хромозома, плазмидите и фаговата
ДНК.
 Могат да се придвижват
 Имат свойството да се
транслоцират.
 Проявяват силен мутационен ефект
ТРАНСПОНИРУЕМИ ЕЛЕМЕНТИ
• Два вида:
– Инсерционни
последователности (IS – от
англ. insertion sequences).
–Транспозони (Tn – от англ.
transposons).
 Инсерционни
последователности
• Притежават средно 1000
нуклеотидни чифта
• Съдържат в средата един ген за
транспозаза
• Транспозазата познава
специфичния край
 ТРАНСПОЗОНИ
• Могат да носят различни гени.
• Най-добре са проучени тези, които
кодират лекарствената резистентност
или токсини.
• Най-простите транспозони са
родствени на IS и представляват две
копия на IS елемент заобикалящи 1
или повече гени;
• Известни са Tn, наречени интегрони,
 БАКТЕРИОФАГИ
• Това са вируси, които се размножават в
бактериалните клетки.
• Почти не са известни микроби,
• Гамалея (1898) - при антраксните бацили.
• Феликс Д΄Ерел (1917) е открил
бактериофага в дизентерийните култури.
• Бактериофаг, т.е. изяждащ бактериите
(фаг).
• От гръцкиphagein - изяждам.
 БАКТЕРИОФАГИ
• Многообещаващо средство за
лечение на инфекциите.
• Лурия и Делбрюк (1939) -
изолират фаги на E. coli – в
молекулярната биология.
• Фаготипизиране
 БАКТЕРИОФАГИ
– Инертни частици без
метаболизъм
– Относително
издръжливи
–Способни да заразяват
чувствителните клетки.
 БАКТЕРИОФАГИ
• Основни типове взаимодействие
между микробната клетка и фага:
– Спектър на хазаите на фага
– Еволюция тип вирулентен фаг
– Еволюция тип умерен фаг
– Фагова инфекция с филаментозни фаги.
 БАКТЕРИОФАГИ
• Структура на фаговите вириони:
 БАКТЕРИОФАГИ
–В белтъчен капсид с
капсомери.
–Капсиди:
–ДНК- най-често двойноверижна
–РНК (едноверижна)
 БАКТЕРИОФАГИ
• Опашката служи
• Състои се от 3 части:
–Стебло -
–Контрактивна обвивка
–Терминална пластинка
 БАКТЕРИОФАГИ
• 5 Морфологични групи:
– Фаги със сложен строеж на
опашката
– Фаги с дълга несвиваща се опашка,
Фаги с къса опашка
– Фаги без опашка
– Филаментозни фаги
 БАКТЕРИОФАГИ
• Определяне и преброяване
на фагите
 ТАКСОНОМИЯ НА ФАГИТЕ
• 10 семейства
• Видове:
–Вирулентни
–Умерени
–Филаментозни
 РЕПРОДУКЦИЯ
НА БАКТЕРИОФАГИ
• Три основни начина:
–Вирулентни фаги (литичен
цикъл).
–Умерени фаги
(лизогенетичен цикъл).
–Филаментозни фаги.
 ФАГОВА ИНФЕКЦИЯ
• Вирулентни и умерени фаги
• Етапи:
– Прикрепване (адсорбция) -
общи
– Проникване - общи
– Вътреклетъчно размножаване
– Съзряване
– Лизис
 АДХЕЗИЯ
• Високоспецифично
• Бактериалната клетка да има
 ПРОНИКВАНЕ
(ПЕНЕТРАЦИЯ)
• Прониква само фаговата хромозома.
• Белтъкът от обвивката
 ВЪТРЕКЛЕТЪЧНО
РАЗМНОЖАВАНЕ
• Скрит период
 ВЪТРЕКЛЕТЪЧНО
РАЗМНОЖАВАНЕ
• Започва синтезирането на ранни
протеини
• Късни
• Фагът се размножава вътреклетъчно
 СЪЗРЯВАНЕ
• “Сглобяват се” зрели фагови
частици,
 ЛИЗИС
• Под действие на лизозима
 Литичен цикъл
(около 30 мин)
• Етапи:
– Адсорбция
– Пенетрация
– Вътреклетъчно размножаване на
фагите:
– Лизис на клетката хазаин.
 УМЕРЕНИ ФАГИ, ЛИЗОГЕНИЯ
• Хромозомата на фага се
свързва с микробната и
 УМЕРЕНИ ФАГИ, ЛИЗОГЕНИЯ
• Профагът се проявява
фенотипно в бактериалната
клетка.
• Явлението е наречено лизогенна
или фагова конверсия.
 УМЕРЕНИ ФАГИ, ЛИЗОГЕНИЯ
• При фагоимунните бактерии
протичат процесите на адсорбция
и проникване
• Но не се разможават в клетката,
 УМЕРЕНИ ФАГИ, ЛИЗОГЕНИЯ
• Специфичен репресор,
детерминиран от профага:
 УМЕРЕНИ ФАГИ, ЛИЗОГЕНИЯ
• Разпространението на умерени фаги
става става чрез преминаването на
профагът във вегетативен фаг.
УМЕРЕНИ ФАГИ, ЛИЗОГЕНИЯ

• Профагът може да
премине във вегетативен
фаг не само спонтанно,
ЛИЗОГЕНЕТИЧЕН ЦИКЪЛ
• Етапи:
– Адсорбция
– Пенетрация
– Продукция на фаговоспецифичен
репресор,
– Фаговият геном е т. нар. профаг.
Лизогенни клетки (носители на профаг).
– Лизогения.
• Фагова конверсия
 ФАГОВА ИНФЕКЦИЯ
• Изходът на инфекцията зависи от
 ИНФЕКЦИЯ
С ФИЛАМЕНТОЗНИ ФАГИ
• Инфектират само бактериални клетки,
които имат плазмид кодирани пили
(секс пили).
 ЗНАЧЕНИЕ
НА ФАГОТИПИЗИРАНЕТО
• Изолиране на фагите (стерилни,
литични петна).
• Титриране на фагите (титър на фага).
• Фаготипиране
• Идентифициране на изолирана
бактериална култура.
• Епидемиологично маркиране.