Ngày thí nghiệm: 29/07/2023 - 12/08/2023 Nhóm 3 / Tổ: 3 Từ ngày 29/7 đến 12/08

Điểm: Họ và tên SV:

Vũ Hoàng Hương Giang - 2153023025
Vũ Lê Nhật Hà - 2153023026
Chữ ký GVHD:
Lê Thị Quỳnh – 2153023092
Phạm Thị Minh Thư - 2153020242

BÀI 1 PHÂN LẬP GIỐNG GỐC

1 Cách thức thực hiện

Khoai tây: Gọt vỏ, thái hạt lựu,
lấy 60g đun với 100ml nước từ
15 – 20 phút, sau đó dùng tay
nghiền nhỏ rồi chiết lấy dịch
qua lớp vải lọc => thu dịch chiết
Gía đậu xanh: Lấy 60g
đun sôi với 100ml nước
đến khi chín, sau đó
nghiền lấy dịch nước qua
vải lọc => thu dịch chiết
Bột ngô + cám gạo: Cho 7,5g vào
100ml nước ấm ( 55oC) khuấy đều
5 phút rồi để lắng 10 – 15 phút, rồi
chiết lấy nước qua vải lọc => thu
dịch chiết

Chuẩn bị môi trường cấp I: Cho tất cả dịch chiết vào chai thủy tinh
và thêm nước cho đủ 300ml, cho tiếp 6g đường và 6g Agar vào
ngâm khoảng 10 phút sau đó đo pH = 7.0 ± 0.5

Dùng bông nhét chặt vừa chai thủy tinh và lấy giấy bịt đầu. Mang đi
hấp ở nhiệt độ 1210C trong 1 tiếng mở nồi khi nhiệt độ giảm còn
500C. Sau khi hấp xong mang đi đổ đĩa, mỗi đĩa 20ml.

Chọn giống: nấm bào ngư trắng, là giống

gốc, giống to đẹp, không dập nát

Thực hiện thao tác cấy: Dùng cồn 96 khử trùng dụng cụ cấy, nơi cấy,
tay, và đốt đèn cồn, đốt dao cấy ngâm trong cồn vào lửa để nguội, tách đôi
nấm, dùng dao cắt mẫu mô nấm 5x5mm để vào giữa bề mặt đĩa thạch, dùng
màng bọc đĩa và ghi tên.

Nuôi sợi: Nuôi ở phòng sạch sẽ không có bụi bẩn, không bị ẩm mốc, phòng
càng ít ánh sáng càng tốt, khô thoáng, nuôi ở nhiệt độ phòng.
2 Công thức phối trộn
Công thức môi trường cấp I Định lượng
Khoai tây 60g
Gía đậu xanh 60g
Bột ngô + cám gạo 7.5g
Đường gluco 6g
Agar 6g
Nước sạch 300 ml
pH 7.0 ± 0.5

3 Kết quả và lí do nhiễm

Tổng có 12 đĩa ( mỗi bạn 3 đĩa)
Có 4/12 đĩa đạt (mỗi bạn 1 đĩa đạt)
Mẫu đạt Nhận xét Mẫu không đạt Nhận xét và Lí do
- Bề mặt đĩa thạch Sợi nấm chuyển màu đen
không có đốm đen, + Nguồn giống có thể
màu sắc lạ so với ban nhiễm khuẩn trước khi
đầu cấy
- Xuất hiện tơ nấm + Qúa trình cấy không
trắng phân nhánh thực hiện đúng cách:
nhiều, phát triển tốt không vệ sinh khu vực
cấy, tay, không đốt dao
cấy, dao cấy còn nóng
làm tổn thương nấm.
+ Nếu môi trường không
đủ sạch sẽ hoặc không
đúng nhiệt độ, độ ẩm,
pH.
 BÀI 2 MEO GIỐNG CẤP II

1 Meo giống cấp II dạng hạt

a Cách thực hiện ( quy trình )

Lúa: lấy 600g rửa sạch để ráo rồi đem đi luộc với nước đến
khi tách 1/3 vỏ, lấy ra để nguội 45 -500C

Trộn đều với 6g cám bắp và 6g CaCO3

Cho hỗn hợp vào 3 bịch nilong, mỗi bịch 200g, đậy miệng
bằng nút bông và đậy nắp mang đi hấp ở nhiệt độ 1210C
trong 90 phút lấy ra khi nhiệt độ còn 50-600C

Chọn giống: giống cấp I, tơ nấm túi phôi thóc phát triển và
ăn trắng hết túi phôi

Thực hiện thao tác cấy: : Dùng cồn khử trùng dụng cụ cấy, nơi cấy, và tay, sau đó
đốt đèn cồn, đốt muỗng cấy đã nhúng trong cồn trên đèn cồn và đề nguội, tiếp đó
mở giống cấp I múc 2 muỗng rồi chuyển sang môi trường cấp II sau đó đậy nắp
bông lại

Nuôi sợi: Nuôi ở phòng sạch sẽ không có bụi bẩn, không bị ẩm mốc, phòng
càng ít ánh sáng càng tốt, khô thoáng, nuôi ở nhiệt độ phòng.

b Công thức phối trộn

Công thức môi trường cấp II Định lượng

Lúa 600g
Cám bắp 1% 6g
CaCO3 1% 6g

c Kết quả
 Nhóm có 3/3 mẫu đạt, không có mẫu không đạt

Mẫu đạt Nhận xét VD Mẫu không đạt Nhận xét Lí do nhiễm

Kết quả mẫu - Tơ nấm bị nhiễm, xuất hiện

xuất hiện màu đen
những sợi nấm
trắng lên đều + Sử dụng giống nấm bị
và đẹp, không nhiễm mầm bệnh hoặc bị
bị rối tơ, thoái hóa trước khi cấy
không bị
nhiễm khuẩn. + Nếu môi trường không đủ
sạch sẽ hoặc không đúng nhiệt
độ, độ ẩm, thóc luộc không
tách vỏ hay tách hết vỏ cũng
có thể bị nhiễm bệnh.

+ Qúa trình cấy truyền không

đúng: không khử trùng sạch
sẽ, không hơ muỗng qua lửa
hoặc muỗng quá nóng làm tổn
thương nấm

2 Meo giống cấp 2 dạng lỏng

a Cách thực hiện (quy trình)

Khoai tây: Gọt vỏ, thái hạt lựu, Gía đậu xanh: Lấy 40g Cám bắp: Cho 0,2g vào 50ml nước
lấy 40g đun với 50ml nước từ đun sôi với 50ml nước ấm ( 55oC) khuấy đều 5 phút rồi để
15 – 20 phút, sau đó dùng tay đến khi chín, sau đó lắng 10 – 15 phút, rồi chiết lấy
 Cho tất cả dịch chiết vào chai thủy tinh và thêm nước cho đủ 200ml,
cho tiếp 4g đường sacharose, 0,2g Cao nấm men, 1g MgSO4 và 1g
KH2PO4 trộn đều sau đó đo pH = 7.0 ± 0.5

Đổ hỗn hợp đầy 2/3 ống cho 3 ống nghiệm Dùng bông nhét chặt vừa
ống nghiệm và lấy giấy bịt đầu. Mang đi hấp ở nhiệt độ 1210C trong
1 tiếng mở nồi khi nhiệt độ giảm còn 500C.

Chọn giống: giống cấp I

Thực hiện thao tác cấy: : Dùng cồn khử trùng dụng cụ cấy, nơi cấy, và tay, sau đó đốt
đèn cồn, đốt dao cấy đã nhúng trong cồn trên đèn cồn và đề nguội, tiếp đó mở giống cấp I
hơ miệng ống qua ngọn lửa rồi cắt khối giống cấp I hơ miệng ống rồi đậy nắp, mở ống
môi trường cấp II mơ miệng ống qua lửa rồi đưa môi trường cấp II sau đó hơ miệng ống
qua lửa đậy nắp bông lại. ( tất cả thao tác phảu thực hiện gần ngọn đèn cồn )

Nuôi sợi: Nuôi ở phòng sạch sẽ không có bụi bẩn, không bị ẩm mốc, phòng
càng ít ánh sáng càng tốt, khô thoáng, nuôi ở nhiệt độ phòng.

b Công thức phối trộn

Công thức môi trường cấp II Định lượng

Khoai tây 40g
 Gía đậu xanh 40g
Đường sacharose 4g
Cao nấm men 0,2g
Cám bắp 0,2g
MgSO4 0,5% 1g
KH2PO4 0,5% 1g
Nước sạch 200ml

c Kết quả và lí do

Nhóm có 2/3 mẫu đạt

Mẫu đạt Nhận xét Mẫu không đạt Nhận xét và Lí do

Tơ nấm màu trắng Khối giống bị chìm
lan đều và đẹp,
không bị chìm - Môi trường quá
lỏng do tỉ lệ pha trộn
không đúng giống
nấm không có sự hỗ
trợ để nổi lên bề mặt

- Khối giống quá lớn

khiến nó bị chìm

- Do thao tác cấy

chuyển chưa chính
xác khiến khối giống
bị chìm

BÀI 3 MEO GIỐNG CẤP III DẠNG CÂY

1 Cách thực hiện ( quy trình )

Dạng cây mà cứng, hàm lượng xenlulose cao, tơ nấm có thể phát triển và bám được

Mía: Gọt vỏ, dài khoảng 10-12cm, chẻ mía thành 6- 8 miếng theo chiều dọc (60
miếng/ 3 bọc)

Pha CaCO3 với nước (khoảng 5g với 2 lít nước) và đo pH khoảng 8.3 – 8.8 (lượng
pH ổn định cho tơ nấm phát triển) sau đó cho ngập vào mía và đun khoảng 1 giờ đến
khi mía chuyển sang màu trắng, việc đun mía sẽ làm mềm xenlulose, giảm lượng
đường giúp cho nấm phát triển

Sau khi đun xong thì vớt ra để nguội sau đó trộn đều với 5,7g CaCO3 và 17,1g cám
bắp, sau đó đóng bịch, đậy nút bông và đậy nắp đem hấp khử trùng ở 1210C 1atm

Chọn giống: giống cấp II để cấy vào bịch mía đã xử lí

Thực hiện thao tác cấy: : Dùng cồn khử trùng dụng cụ cấy, nơi cấy, và tay, sau đó
đốt đèn cồn, đốt muỗng cấy đã nhúng trong cồn trên đèn cồn và đề nguội, tiếp đó
mở giống cấp II múc 2 muỗng rồi chuyển sang môi trường cấp III sau đó đậy nắp
bông lại, tương tự cho đến hết.

Nuôi sợi: Nuôi ở phòng sạch sẽ không có bụi bẩn, không bị ẩm mốc, phòng
càng ít ánh sáng càng tốt, khô thoáng, nuôi ở nhiệt độ phòng.

2 Công thức phối trộn

Công thức môi trường cấp III Định lượng

Mía 570g
CaCO3 1% 5,7g
Cám bắp 3% 17,1g
pH 8.71
 3 Kết quả và lí do nhiễm

Nhóm có 3/3 mẫu

Mẫu đạt Nhận xét Mẫu nhiễm Nhận xét và Lí do

nhiễm
Bề mặt thân mía không có Có màu sắc khác lạ, xuất
màu xanh, đen. hiện những đốm đen,
nhiễm mốc.
Sợi to nấm vẫn đang ăn
chất dinh dưỡng, đường từ + Sử dụng giống nấm bị
môi trường để phát triển nhiễm mầm bệnh hoặc bị
thoái hóa trước khi cấy

+ Để xa bịch giống với

đèn cồn, không vệ sinh
tay, nơi cấy

+ Qúa trình cấy truyền

không đúng: không khử
trùng sạch sẽ, không hơ
muỗng qua lửa hoặc
muỗng quá nóng làm tổn
thương tế bào nấm

+ Luộc mía chưa đạt yêu

cầu.

1. Người ta không lấy giống….để cấy vào phôi mùn cưa? Giống gốc

2. Giống cấp I được làm bằng cách? Cấy chuyền từ giống gốc
3. Giống nấm chưa dùng được bảo quản ở nhiệt độ? Nhiệt độ lạnh ức chế sự phát triển
của tơ nấm

4. Giống nấm cấp II dạng lỏng có hình thái sợi tơ nấm? Khuẩn lạc (cụm nấm)

5. Bào tử nấm nảy mầm tạo ra? Sợi đơn bội gồm 2 loại (+) và (-)

6. Điều kiện đủ để hệ sợi hữu thụ tạo quả thể? Sử dụng 2 loại sợi khác dấu để tạo
thành hệ sợi lưỡng bội (2n nhiễm sắc thể)

7. Chọn câu đúng nhất: Các chất bên trong khối hệ sợi tơ nấm? Có thể liên thông với
nhau, di chuyển từ chỗ này tới chỗ khác

8. Nấm ra trên bề mặt giá thể nhưng năng suất thì phụ thuộc vào? Các sợi nấm nằm sâu
bên trong khối giá thể hút chất dinh dưỡng chuyển ra ngoài để ra các tai nấm

9. Trồng nấm có 2 giai đoạn? Nuôi hệ sợi nấm, tạo điều kiện cho nấm ra quả thể

10. Nuôi hệ sợi nấm cần có các yếu tố sau? Câu A và B đúng

11. Các nấm lớn có chu trình sống qua các giai đoạn?1. Bào tử nảy mầm tạo hệ sợi sơ cấp
2. Sơ cấp phát triển thành hệ sợi thứ cấp 3. Tạo quả thể và phóng thích bào tử 4. Hệ sợi
nấm trưởng thành và gặp điều kiện thuận lợi thì tạo ra các quả thể 5. Qủa thể trưởng
thành và phóng thích bào tử? Giai đoạn 1 2 4 5

12. Chọn câu đúng nhất: Nhóm nấm lớn đòi hỏi nguồn dinh dưỡng nhiều và dễ đồng hóa
vì? Nấm có khả năng sử dụng carbohydrat đơn giản và ion ammonium ( NH4+)

13. Nhóm nấm lớn đòi hỏi nguồn dinh dưỡng nhiều và dễ đồng hóa vì? Câu A và C đúng

14. Máy trộn nguyên liệu làm giá thể trồng thay thế cho công đoạn nào của trồng nấm
truyền thống? Bổ sung chất dinh dưỡng vào giá thể và dùng xẻng xúc trộn

15. Máy phun sương được bố trí như thế nào trong nhà trồng nấm? Giữa các hàng kệ

16. Nhà nuôi ủ phôi cần bố trí các thiết bị sau? Máy điều hòa nhiệt độ, 1 đèn chiếu sáng
trên trần

17. Nhà nuôi nấm lạnh cần bố thí các thiết bị sau? Máy điều hòa nhiệt độ, đèn chiếu
sáng trên mỗi kệ, máy phun sương

18. Máy phun sương cung cấp độ ẩm cho môi trường cho nấm phát triển cần lưu ý đến
các thông số? Tốc độ phun (ml/h), khoảng cách lần phun, số lượng pet (đầu vòi
phun), khoản cách phun
19. Ưu điểm của máy đóng phôi? Đóng phôi đồng nhất, tiết kiệm nhân công

20. Chọn bịch meo để cấy vào bịch phôi cần chú ý? Tơ nấm lan trắng đầy bịch meo, tơ
bắt đầu ngả vàng tren bề mặt, không có đốm tạp nhiễm vi sinh vật khác