１

３５４ 医学杂志 ２００

４年 ８月 １
７日第 ８４卷第 ｌ
６期 Ｎａ
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ｎａ，Ａｕｇ
ｕ ！ 坠 ．鱼

临床论 著 ．

去 细胞组 织 工程 同种 心脏瓣 膜 的构建

崔彬 刘迎龙 谢宁 于存涛 宋来凤 李建荣 吴松

【摘 要 】 目的 全 面评 价 去 细胞 组 织 工程 同种 心脏 瓣 膜 的生 物 学 、
生 物 力 学 及免 疫 学 特性 。
方法 采用低 渗液一
去污剂［
０．５％去 氧 胆 酸 （ＤＯＡ），
１％ ＤＯＡ，
１％Ｔｒ
ｉｔ
ｏｎ］・
核 酸 酶去 细 胞法 ，
测定了
４
７例去细胞 同种心脏 瓣膜去 细胞前后组 织学 、
免疫学 、
组织厚 度 、
组 织含 水量 、
热 皱缩 温度 、
组织 基 因
组 ＤＮＡ 含量 、
胶原蛋 白含量 、
应 力 应变 曲线 、
破坏 强 度及 组织 伸 长 比变 化 。结果 组 织 学 检查 １
％
ＤＯＡ２４ｈ组完 整地去 除了同种心脏 瓣膜 、
管壁及 肌 肉组 织 中所 有 的细胞 成分 ，
保 留了完 整 的细胞 外
基质 ；
免疫组 织化学 证实 白细胞 ＤＲ（ＨＬＡ—
ＤＲ）抗 原表 达 明显 下 降 ；
组织 基 因组 ＤＮＡ含量 显 著下 降
（
瓣 叶下降 ９１．
１４％ ，
管壁 下降 ９１
．５３％ ）；
与去 细胞前相 比 ，
只有 管壁组织 的含水 量 （去 细胞前 ７５．
４±
１
．８，
去细胞 后 ８
２．０±０．
７，Ｐ＜０
．０５）明显 增加 ，
组 织厚 度 、
瓣 叶组 织 含水 量 、
热 皱缩 温度 、应力应 变 曲
线、
破坏 强度及组 织伸长 比差异无 显著意义 。结论 低渗 液一
去污 剂（１
％ＤＯＡ）一
核酸 酶去 细胞法 方便
有效 ，
去 细胞组织 工程 同种心脏瓣 膜 的生 物学及生 物力学 特性 稳定 ，
免疫性 显著 下降 ，
符 合机 体 的要
求，
为受体细 胞化组织 工程心脏瓣 膜 的研 制提供 了可靠 的天然的纤维支 架材料 。
【关键词 】 组织工程 ； 心脏瓣膜 ，
人工 ； 生物学

Ｄｅｃｅｌ
ｌｕｌ
ａｒｉ
ｚｅｄ ｈｕｍａｎ ｔ
ｉｓｓｕｅ ｅｎｇｉ
ｎｅｅｒｉ
ｎｇ ａｏｒｔ
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ｖｅｓ ｃｏｎｄｕｉ
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ｅｔｒ
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ｏｎｉ
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ｉｔｏｎ ｆ
ｏ ｒ１２ ｈｏｕｒ
ｓ一２４ｈ ；ｌａｎｄ ｔ
ｈｅｎ ｐＨ ７．６ ｉ
ｓｏｔ
ｏｎｉ
ｃ
ｂｕｆ
ｆｅｒｗｉ
ｔｈ ＤＮＡａｓ
ｅ ２００ ｇ／ｍｌ，ＲＮＡａ
ｓ ｅ ２０ ｇ／ｍｌ ｆ
ｏｒ ２ ｈｏｕｒ
ｓ． ｔ
ｈｅ ｈｉ
ｓｔｏｌ
ｏｇｙ，ＨＬＡ—ＤＲ ａｎｔ
ｉｇｅｎ，ｗａ
ｔｅｒ
ｃｏｎｔ
ｅｎｔ，ｔ
ｈｉｎｋｎｅｓｓ，ｄｅｎａｔ
ｕｒａｔ
ｉｏｎ ｔ
ｅｍｐｅ
ｒａｔ
ｕｒｅ，ＤＮＡ ｃｏｎｔ
ｅｎｔ， Ｃｏｌ
ｌａｇｅｎ Ｃｏｎｔ
ｅｎｔ
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ｉｓｏｎ ｗ
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ｈｅ ｖａｌ
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ｘｐｒ
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ＤＮＡ ｃｏｎｔ
ｅｎｔ
ｓ，ａ ｄｅｃ
ｒｅｓ ｅ ｂｙ ９１．１４ ％
ａ ｉ
ｎｔｈｅ ｖａ
ｌｖｅｓ， ａｎｄ ｂｙ ９１．５３％ ｉ
ｎ ｔ
ｈｅ ｗａ
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ＤＲ ａｎｔ
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４±１
．８ｖ
ｓ８２．
０±０
．７，
Ｐ ＜０
．０５）．Ｎｏｓ
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ｇ

同种心脏瓣膜及其带瓣管道广泛应用于瓣膜替 换手术及矫治婴幼儿 复杂先心病术 中 ，

取得 良好 的
临床疗效 。但同种心脏瓣膜移植 于体 内可激发免疫
反应 ，
供体特异性 ＨＬＡ—
Ｉ抗体 、
ＨＬＡ一Ⅱ抗体 、
特异性
基金项 目：
国家高技术研 究发 展计划 （８６３计划 ）基金 资助项 目
（
２００１
ＡＡ２１
６０６１）；
国家 自然科 学基金资助项 目（
３０２７１
２８９）
的高亲和性细胞毒性 Ｔ淋 巴细胞前体 （Ｃ
ＴＬｐ）、
外周
作者单 位 ：
１０００３７北京 ，中国医学科 学 院 中 国协和 医科 大学阜 血中辅 助性 Ｔ淋 巴细胞 （ＨＴＬＰ）的表达 均显 著增
外心血管病 医 院 心 血 管 病 研 究所 先 心 病 研究 室 （崔彬 、
刘迎龙 、 高，
且与瓣叶远期 的毁 损、
钙化 有显著 的相关性 ，
再
谢宁 、
于存涛 、
李建荣 、
吴松 ），
病理科 （宋来凤 ） 次移植率明显提高 ，
在婴幼儿患者更为显著 ¨＿
３＿
。新

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中华 医学 杂志 ２００４年 ８月 １
７日第 ８
４卷第 １
６期 Ｎａ
ｔｌＭｅ
ｄＪＣｈｉ
ｎａ，Ａｕｇ
ｕｓｔ１
７，２０
０４，
Ｖｏｌ８４，Ｎｏ．１
６

型组织工程学方法和技术的应用促进 了人类组织器 组及实验组标本各 ７例 ，

取瓣 叶长轴 、
横 向管壁 和纵
官领域的研究及开发 。我们探讨低渗液．
去污剂．
核 向管壁修剪成试 件条 （平 均长 度 ８ｍｍ，
宽度 ：
管壁
酸酶去细胞法构建新 型的去细胞组织工程 同种心脏 ３ｍｍ、
瓣膜 ６ｍｍ）固定 于拉 伸机上 ，
使用 １
００ Ｎ的
瓣膜 ，
全面评价去细胞 组织工程 同种 心脏瓣膜 的生 力传感器 ，
载荷范 围定为２
０Ｎ，
以１０ｍｉ
ｌ
ｌ／ｒ
ａｉｎ的速
物学、
生物力学及免疫学特性 。 度分 别 将 试 件 条 拉 到 瓣 叶 ０
．８ ＭＰａ、横 向 管 壁
０．
７ＭＰａ、
纵向管壁 ０
．４ＭＰａ的柯 氏应 力时卸载 ，
预
对 象与 方 法
调 ３次后可见滞后环基本消失 ，
然后 以 １
０ｍｍ／ｒ
ａｉ
ｎ
１．
对象：
取 液氮保存 的 ２
００２年 １～ １
２月 内健 的速度加载至标本 破坏 ，
计算应力应变 曲线 的斜率
康成年男性志愿捐献者脑死亡 ６ｈ内的同种 主动脉 和同一应力下 的伸长 比及标 本破坏时 的柯 氏应力。
带瓣管道标 本共 ９４例 。分 为对照组 （
深 低温 液氮 （
５）免疫学特性 ：鼠抗人单 克隆抗体 免疫组 织化学
保存同种心脏瓣 膜 ）和实验组 （去细胞 同种 心脏瓣 方法 标 记 白细 胞 ＤＲ（ＨＬＡ—
ＤＲ）抗 原 。
膜 ）各 ４７例 。 ４．统 计 学 分 析 ：数 据 以 元±ｓ表 示 ，采 用
２．
去细胞组织 工程 同种心脏瓣膜 的制备 ：
将同 Ｓ
ＰＳＳＩ
Ｏ．０统计软 件分析 。两样本均 数 比较 采用 组
种主动脉带瓣管道 置于 ｐ
Ｈ８．
０的 Ｔ
ｒｉｓ低 渗缓 冲液 问或配对 比较 ｔ检验。
中（１
０ｋＩ
Ｕ／ｍｌ抑肽酶和 ０．１
％ ＥＤＴＡ）
４￣Ｃ静置１
２ｈ；
结 果
分别在 含 ０
．５％ 去 氧胆 酸 （ＤＯＡ）、１
％ ＤＯＡ 和 １
％
Ｔｒ
ｉｔ
ｏｎ的 ｐＨ ８．０的 Ｔｒｉ
ｓ等渗缓 冲液 （１ ０ｋＩＵ／ｍｌ抑 １
．组织学观察 ：
１％ＤＯＡ２
４ｈ组 完整地去 除 了
肽 酶 和 ０．１％ ＥＤＴＡ）中 ，３７ｃ
Ｃ持 续 振 荡 １
２、１８及 瓣叶、管壁及肌肉组织中的所有细胞成分 ，组织纤维
２
４ｈ；
最后在 ｐＨ ７
．６的 Ｔｒ
ｉｓ等渗缓 冲液 中（
ＲＮａ
ｓｅＡ 网状结构完整 ；
ＶＧ＋ＥＴ染色表明弹力纤维 、
胶 原纤
２
０ ｇ
／ｍｌ
、ＤＮａ
ｓｅＩ２
００ ｇ
／ｍ１
）中 ３
７。Ｃ持续振荡 ２ｈ。 维的三维 网状结 构完 整存 在 ，
波 浪状规则 排列 （图
３．
观察指 标 ：（１）组织 学 ：
４％ 甲醛 溶液 固定 ， １—８）。
扫描电镜示 瓣叶及 管壁 表 面可见 粗大 的纤
ＨＥ染 色观察瓣 叶及管壁 的大体结构及 细胞 成分变 维成分 ，
无内皮细胞残 留。
化；
ＶＧ＋ＥＴ染 色观察胶原纤 维和 弹性 纤维结 构变 ２．组织厚度 ：
实验组瓣 叶及 管壁组织 的厚度 比
化 。３％戊二醛固定 ，
扫描 电镜 观察瓣叶及管壁表面 对照组厚 ，
但 差异无显著意义 （
Ｐ＞０．
０５，
表 １）。
组织 细胞结构 变化。取对照组及 实验 组标本各 ２
４ ３．
组织含水量 ：
与对照组相 比，
管壁组织含水量
例，
均分为 ３组 ，
分别测定组织厚度（精确度 ０
．Ｏ１）、 大（去细胞 前 ７
５．４％ ±１
．８％ ，去细胞 后 ８
２．０％ ４
－
组织含水量 （
百分 比）以及组织热 皱缩 温度（
取瓣 叶 ０．
７％ ，
Ｐ ＜０．
０５），
但 瓣 叶 对 比不 明显 （Ｐ＞０．
０５，
长轴及管壁横 向大小约 ３ｅ
ｍ ｘ３ｍｍ 的试件条 ，
热 表 １）。
收缩温度仪 ，
蒸馏 水为介质 ，
从 室温开始 ，
每分钟升 ４．
组织热皱缩温度 ：
与对 照组相 比，
实验组瓣叶
高 ２ｏ
Ｃ，完成测试 ）。（２）
基 因组 ＤＮＡ含量 ：
取对照 及管壁组织 的热皱缩 温度略低 ，
但 差异无显 著意义
组及 实 验 组 各 ８例 ，
剪碎样本 ，
加 入 蛋 白酶 Ｋ 和 （Ｐ＞０．０５，
表 １）。
ＴＮＥＳ（ｐＨ ７．５，１
０ ｍｍｏＬ
／Ｌ Ｔｒ
ｉｓ，４００ ｍｍｏＬ
／Ｌ ＮａＣｌ， ５．
组织基因组 ＤＮＡ含量 ：
实验组瓣叶组织基 因
１
００ｍｍｏ
ｌ／ＬＥＤＴ
Ａ，０
．６％ Ｓ
ＤＳ），
５５℃水浴至消化完 组 ＤＮＡ含量 比对照组低 ９１
．１４％ ；
管壁 组织基 因组
全；
加入等 体积的氯仿提纯 ；
７０％ 的冷 乙醇沉淀 ；
加 ＤＮＡ含量低 ９１
．５３％（
Ｐ＜０
．０５，
表 ２）。
入ｐＨ８．０ＴＥ ，
６５ｏ
Ｃ水浴溶解 ；波长 ２６０ｎｍ处测定 ６．
组织胶原蛋 白含量 ：
与对照组相 比，
实验组瓣
样本 的吸光度 （Ａ）值 ，
计 算组织 基 因组 ＤＮＡ含量 。 叶及管壁组织 的胶原蛋 白含量变化不大 ，
差异无 显
（
３）胶原蛋 白含量 ：
取对照组及实验组标本各 ８例 ， 著 意 义 （Ｐ＞０．０５，表 ２）。
采用羟脯氨酸法 测定 。（
４）生 物力学 特性 ：
对照 ７．生物 力学特性 ：
与对照组相 比，
实验组瓣 叶

表 １ 两组 同种主动脉 带瓣管壁及 瓣 叶的物 理学性状 变化 （ ＿ｓ

－
４
－）

注：
与对照组 比较 ， Ｐ＜０、
０５

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 Ｉ

目Ｉ 雕鲲 瓣 叶 ｌ
｛Ｅ ｘ１
１）
０ 目２ 蜘胞 瓣 ＨＥ ｘｌ
ｏ０ 目３ 对 射 褂 叶 ＶＣ＋ ｘｔ
００ 圄４ 胞组
ＶＣ＋ ｘ１
００ 目， 照 组 臂壁 眦 ｘｌ
ｏ０ 目 ６ ＾挪 胆蛆 臀壁 ＨＥ ｘ１
００ 囤 ７ 对照蛆 季硅 ｖｃ｛耵 １
０（１
目ｓ 魁蛆 曾 ｖＧ＋ＥＴ ｘ１
００ 田 ９ 埘照蛆 蜡叶 ＨＬＡ－
ＤＨ ｘ１
００ 圈 ＩＯ 圭劓胞 瓣叶 ＨＬ＾－ ｘＩ
∞ 日“
对舭 管肇 ｌ
ｕ＾－
ⅡＨ Ｌ
∞ ｇｕ 去细啦蛆 管 肇 ｌ
ＩＬ＾．
Ｄｎｘｌ
ｏｏ

衰 ２ 两组同种主动脉带瓣管壁及瓣ｇＩ
的组成成分变化（ ± ）

刖 标卒数 — 群叶 营广
壁 （
Ⅲ ）
对ｎ
ａ纽 ８ ０ ２ ±０ １
７１
实控 ８ ０叫７ Ｏ∞ｐ

驶管壁组织的断裂强度 、仲长 比放血力 『 血变 曲线 的 组瓣膜业管壁组织 有较 强的 ＨＩ Ｊ

ＡＤＲ抗 厝【表达 ，
尤
斜率差异尢显诺意 义（Ｐ＞００５，袁 ３） 内皮细胞披问质细胞 品著 ； 去细 胞后 ＨＬＡ—
ＤＲ抗
８
．鼠机 凡单克隆抗 体标 记 Ｉ
Ⅱ＿＾－
ＤＲ抗 原：对照 原表诘 品著下降 （固 ９一Ｉ
２）。

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中华医学 杂志 ２０
０４年 ８月 １
７日第 ８
４卷第 ｌ
６期 Ｎａ
ｌＭｅｄＪＣｈｉ
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ｕｓｔ１
７，２００４，
Ｖｏｌ８４，Ｎｏ．１
６

表 ３ 两组 同种 主动脉带瓣管壁及瓣叶 的生物 力学特性变化 （ ±ｓ

）

表达显著下降，
去细胞 同种心脏瓣膜 的免疫原性下
讨 论
降，
减少 了移植后钙化的诱因 ，
将延长瓣膜 的使用寿
人体心脏瓣膜及管壁组织 由内皮细胞 、
成纤维 命，
有望取得 良好 的临床疗效 ；
也为受体细胞化组织
细胞、
平滑肌细胞及胶原、
弹性蛋 白、
黏多糖等构成 ， 工程心脏瓣膜的研制提供 了可靠的天然 的纤维支架
有着复杂的结构和分布形式 以符合 机体 的需要 ，
耐 材料 ，
”。
受瓣叶启闭过程 中不断变化的应力作用。研究表明
参 考 文 献
内皮细胞是抗原性最强的细胞成分 ，
间质细胞及细
ｌ Ｊ
ｏｈｎＡＨ，
Ｊｏｈｎ ＰＢ。
Ｌｉｎ
ｄａ ＭＬ，ｅ
ｔａ１． Ｃｌ
ａｓｓＩａ
ｎｄ Ｃｌ
ａｓｓ
Ｉｌａ
ｎｔｉ
—ＨＬＡ
胞外基质抗原性较 弱。瓣膜组 织 内失活 的内皮细
ａ
ｎｔｉ
ｂｏｄｉ
ｅｓ ａ
ｆｔｅｒ ｉ
ｍｐｌ
ａｎｔ
ａｔｉ
ｏｎ ｏｆｃｒ
ｙｏｐｒ
ｅｓｅ
ｒｖｅｄ ａｌ
ｌｏｇｒ
ａｆｔｍａｔ
ｅｒｉ
ｌ ｉ
ａ ｎ
胞、间质细胞 、
细胞碎片和残留的细胞核亦存在抗原 ｐｅ
ｄｉａ
ｔｒｉ
ｃｐａｔ
ｉｅｎｔ
ｓ．ＪＴｈ
ｏｒａｃＣａ
ｒｄｉ
ｏｖａｓ
ｃＳｕｒ
ｇ，２０
００，
ｌ１９：
３２４—
３３０．
２ Ｆｒ
ｎ ｓＢＳＯ，Ｍａ
ａ Ｊ
ＰＷ ，Ｌｅｎｎａ
ｒｄ ＭＢＶ，ｅ
ｔａ１．Ｉ
ｎｄｕ
ｃｔｉ
ｏｎｏｆｃ
ｙｔｏ
ｔｏｘｉ
ｃ
性，
是瓣膜移植后早期钙化的好发部位 ’
。。
Ｔｌ
ｙｍｐｈｏ
ｃｙｔ
ｅｓｗｉ
ｔｈｄｅ
ｓｔｒ
ｕｃｔ
ｉｖｅｐｏｔ
ｅｎｔ
ｉａｌａ
ｆｔｅｒｃ
ａｒｄｉ
ａｃｖ
ｌｖ
ａ ｅｈｏｍｏ
ｇｒａｆ
ｔ
本研究 探讨低渗液一
去污剂一
核 酸酶去细胞法 ， ｉ
ｍｐｌ
ａｎｔ
ａｔｉ
ｏｎ．Ｊ Ｈｃ
ａｒｔＶａ
ｌｖｅ Ｄｉ
ｓｅｓｅ，
ａ ２０００，
９：７６ｌ－
７６８．
３ Ｗｅ
ｌｔｅｒ
ｓ ＭＪ，０ｅ
ｉ ＦＢＳ，Ｖａｅ
ｓｓｅｎ ＬＭ ， ｅ
ｔａ１．Ｉ
ｎｃｒ
ｅａ
ｓｅｄ ｎｕｍｂｅｒ
ｓｏｆ
比较各种去污剂在 不同浓度及作用时间下 的效果 ，
ｃｉ
ｒｃｌａｔ
ｕ ｉｎｇ ｄｏｎ
ｏｒ—
ｓｐｅ
ｃｉｆ
ｉｃ Ｔ ｈｅ
ｌｐｅｒｌ
ｙｍｐｈｏ
ｃｙｔ
ｅｓ ａ
ｆｔｅｒ ｈｕｍａ
ｎ ｈｅ
ａｒｔ
寻求最佳简洁有效 的方法。结果表明 １
％ＤＯＡ ２
４ｈ ｖａ
ｌｖｅｔ
ｒｎｓ
ａ ｐｌ
ｎｔ
ａ ａｔ
ｉｏｎ．Ｃｌ
ｉｎ Ｅｘｐ Ｉ
ｍｍｏ１
／Ｌｕｎｏ
ｌ，２００１。ｌ
２４：
３５３－
３５８．

组完全去除了瓣叶 、
管壁及肌肉组织 中的细胞成分 ， ４ Ａｕｇｕｓ
ｔｉｎ
ｕｓＢ，Ｔｏｂ
ｉｓ Ｓ，ＯｍｋｅＥ，ｅ
ａ ｔａ１．Ｔｉ
ｓｓｕｅｅｎｇ
ｉｎｅ
ｅｒｉ
ｎｇｏ
ｆｈｅ
ａｒｔ
ｖａ
ｌｙｅ
ｓ —ｈｕｍａ
ｎ ｅｎｄｏ
ｔｈｅ
ｌｉｌ ｃ
ａ ｅｌｌｓ
ｅｅｄｉ
ｎｇ ｏ
ｆ ｄｅ
ｔｅｒ
ｇｅｎｔ ａ
ｃｅｌ
ｌｌａｒ
ｕ ｉｚｅ
ｄ
加入 ＲＮａ
ｓｅＡ、
ＤＮａ
ｓｅ１分解残余 的核酸物质 ，
组织 ｐｏｒ
ｃｉｎｅｖ
ｌｖ
ａ ｅｓ
．Ｅｕｒ
ｏｐｅ
ｎ Ｊｃａ
ａ ｒｄｉ
ｏｔｈｏ
ｒａｃｓ
ｕｒｇ，１
９９８，
１４：
２７９－
２８４．

基 因组 ＤＮＡ含量平 均下 降超过 ９１
％，同时加入抑 ５ Ｆｒ
ｎ ｓＢＳＯ，Ａｌ
ａ ｅｘａ
ｎ ｄｅ
ｒ ＰＡＳ，Ｆｒ
ｉｅｄａ ＶＤＨ， ｅ
ｔａ１． ｒ
ｈ。 ｐｒ
ｅｓｅ
ｎｃｅ ｏｆ
ｉ
ｍｍｏ１
／ Ｌｕｎｅ ｓ
ｔｉｍｕｌ
ａｔｏｒｙ ｃｅＨｓ ｉ
ｎｆｌｅｓｈ ａ
ｎ ｄ ｃｒｙｏｐｒｅｓｅｒｖｅｄ ｄｏｎｏｒ ａｏｒｔ
ｉｃ
肽酶和 ＥＤＴＡ抑制细胞破坏时释放的蛋 白酶对胶原 ｎ ｄ ｐｕｌ
ａ ｍｏｎａ
ｒｙ ｖａ
ｌｖｅ ａｌ
ｌｏｇ
ｒｆｔ
ａ ｓ
． Ｊ Ｈｅａ
ｒｔＶａ
ｌｖｅ Ｄｉ
ｓｅｓ ｅ。２０
ａ ０２，ｌｌ：

及弹性蛋 白的水解作用 ，
保留了完整的细胞外基质 ， ３ｌ５．３２４．
６ Ｓｉ
ｍｏｎＡ 。Ｗ ｉ
ｌｈｅｌ
ｆｎｌＭ ，Ｓｔ
ｅｉｎ
ｈｏｆ Ｇ，ｅ
ｔａ１． Ｃａ
ｒｄｉ
ａｃｖａ
ｌｖｅｅｎ
ｄｏｔ
ｈｅｌ
ｉｌ
ａ
弹力纤维 、
胶原纤维 的三维网状结构完整存在 ，
波浪 ｃ
ｅＨｓ：
ｒｅｌ
ｅｖａ
ｎｃｅｉ
ｎｔｈｅｌ
ｏｎｇ—
ｔｅｒ
ｍｆｕｎｃｔ
ｉｏ
ｎｏｆｂｉ
ｏｌ
ｏｇ
ｉｃｖａ
ｌｖｅｐ
ｏｔ
ｒ ｈｅ
ｓｉｓ
．Ｊ
状规则排列。细胞外基质是细胞生长分化重要的微 Ｔｈｏｒａｃ Ｃａｒ
ｄｉｏｖａ
ｓ ｃ Ｓｕｒ
ｇ ，ｌ９９８，ｌｌ６：
６０９－
６１６．

７ Ｂｏ
ｏｔｈＣ，Ｋｏ
ｏｓ
ｒ ｓ
ｉｓＳ，
Ｗｉｌ
ｃｏｘＨＥ，ｅ
ｔａ１．Ｔｉ
ｓｓｕｅｅｎｇ
ｉｎｅｅ
ｉｎ
ｒ ｇｏｆｃａ
ｒｄｉ
ａｃ
环境 ，
主 要 由胶 原纤 维 （Ｉ、Ⅲ 型胶 原 ）、弹性 纤 维 和 ｖａ
ｌｖｅ ｐｒ
ｏｔ
ｈｅｓ
ｅｓＩ：Ｄｅｖ
ｅｌｏ
ｐｍｅ
ｎｔａ
ｎ ｄ ｈｉ
ｓｔｏ
ｌｏｇ
ｉｃａ
ｌ ｃ
ｈａｒ
ａｃｔ
ｉｚａ
ｔｉｏｎ ｏ
ｆａｎ
黏多糖组成的复杂聚合体 ，
是生物力学性能的主要 ａｃ
ｅｌｕ
ｌｒ ｐｏｒ
ａ ｉｃｉ
ｎｅ ａ
ｏｔｉ
ｒ ｃｈ
ｅａｒ
ｔｖａ
ｌｖｅ． Ｊ Ｈｅ
ａｒｔＶａ
ｌｖｅ Ｄｉ
ｓｅａ
ｓｅ，２
００２，
ｌｌ：
４５７－
４６２．
决定物质 ，
完整的细胞外基质也提供 了细胞黏附生 ８ Ｋｏｒ
ｏｓｓ
ｉｓＳ，Ｂｏｔ
ｈ Ｃ，
Ｗｉｌ
ｃｏｘＨＥ，
ｅｔａ
１．Ｔｉ
ｓｓｕｅｅｎｇ
ｉｎｅ
ｅｒ
ｉｎｇｏ
ｆｃａ
ｒｄｉ
ｃ
ａ
长 的正常的结构和生理环境 Ｊ。 ｖａ
ｌｖｅ ｐｒ
ｏｔ
ｈｅｓ
ｅｓ Ⅱ ：Ｂｉ
ｏｍｅ
ｃｈｎｉ
ａ ｃ
ｌ ｃ
ａ ｈａｒ
ａｃｔ
ｅｉｚ
ｒ ａ
ｔｉｏｎ ｏ
ｆ ｄｅｃ
ｅｌｌ
ｕｌｒ
ａ
ｐｏｒ
ｉｃｉ
ｎｅａ
ｏｒｔ
ｉｃ ｈｅ
ａｒｔｖａ
ｌｖｅ．Ｊ Ｈｅａ
ｒｔＶａ
ｌｖｅ Ｄｉ
ｓｅａｓ
ｅ，２００２，ｌｌ：
４６３－
对 比研究结果表 明，
去细胞组织工程同种心脏 ４７１．

瓣膜及管壁组织 的厚度及含水量增加 ，
表 明去细胞 ９ Ｉ
ｖｎ
ａ Ｖ ，Ｌｏｒ
ｅｎｚ
ｏ ＧＬ， Ｄｅｂ
ｒａ Ｇ， ｅ
ｔ ａ
１． Ｍｅ
ｃｈｎｉ
ａ ｃ
ｌ ｔ
ａ ｅｓｔ
ｉｎｇ ｏｆ
ｅ
ｒｙｏ
ｐｒｅ
ｓｅｒ
ｖｅｄａ
ｏｒｔｉ
ｃａｌｌ
ｏｇｒ
ａｌｓ ｃｏ
ｆ ｍｐａｒ
ｉｓｏｎ ｗｉ
ｈ ｘｅ
ｔ ｎｏｇｒ
ａｉｓ ａ
ｆ ｎｄ ｆ
ｒｅｓ
ｈ
过程亦去掉 了组织 中可溶性的疏水性脂质 ，
水分积 ｔ
ｉｓｓ
ｕｅ．ＪＴｈｏ
ｒａｃＣａ
ｒｄｉ
ｏｖａ
ｓｃＳｕｒ
ｇ，１９
９０，
９９，
ｌ１９－
１２３．
聚在胶原纤维及弹性纤维等亲水性物质构成的网状 １
０ Ａｎｔ
ｈｏｎｙＣＤ，Ｄｅ
ｒｅｋ Ｂ，Ｉ
ｖａ
ｎ Ｖ，
ｅｔａ
１．Ｖｉ
ｓｃｏ
ｅｌｓｔ
ａ ｉ
ｃｉｔ
ｙｏｆｄｙｎ
ａｍｉ
ｃａｌ
ｌｙ
ｉｘｅ
ｆ ｄ ｂｉ
ｏｐｒ
ｅｓｔ
ｈｅｔ
ｉｅｖ
ｌｖｅｓｅｆｅｃ
ａ ｔｏｆｇ
ｌｕｔ
ａｒａｌ
ｄｅｈ
ｙｄｅ ｃ
ｏｎｃｅ
ｎｔｒ
ａｃｔ
ｉｏｎ． Ｊ
结构 中，
导致组织厚度及水分增加 。热皱缩温度及 Ｔｈｏｒａｃ Ｃａｒ
ｄｉｏｖａｓｃ Ｓｕｒｇ，１９９７，ｌｌ３：
３０２—
３１０．
胶原蛋白的含量差异无显著意义 ，
表明胶原 的交联 １ｌ Ｒｏｎ
【
ａｉｄ ＣＥ，Ｐａ
ｔｔｉＥＤ，Ｓｔ
ｅｖｅ
ｎ Ｇ ，ｅ
ｔａ１．Ｄｅ
ｃｅｌｕｌ
ａｒ／
ｚｅｄ ｈｕ
ｍａｎ ｖａ
ｌｖｅ
ａ
ｌｌｏ
ｇｒａ
ｆｔｓ
． ＡｎｎＴｈｏｒ
ａｃＳｕｒ
ｇ，２０
０１，７ｌ：４２８－４３２．
及结构稳定性无显著影响。应力应变 曲线斜率随负
１２ Ｇｕｓ
ｔａｖ Ｓ，Ｕｌ
ｒｉ
ｃｈ Ｓ，Ｎａ
ｊｉ
ｂｕｌａ Ｋ，ｅ
ｔａ１．Ｔｉ
ｓｓｕｅ ｅｎ
ｉｎｅ
ｇ ｅｒ
ｉｎｇｏ
ｆ
荷渐增加 ，
加载卸载试验存在明显 的滞后环符合 黏 ｐｕｌ
ｍｏｎａ
ｒｙ ｈ
ｅａｒ
ｔｖｌｙ
ａ ｅｓ ｏ
ｎ ａ
ｌｌｏｇ
ｅｎｉ
ｃ ａｃ
ｅｌｕ
ｌａｒ ｍａ
ｔｒｉ
ｘ ｃ
ｏｎｄｕｉ
ｔｓ．

Ｃｉ
ｒｃｕｌ
ａｔｉ
ｏｎ，
２０００，
１０２（Ｓｕｐｐｌ
Ⅲ）：
５０－
５５．
弹性组织结构特点 。组织 的破坏强度 、
伸长 比及应 １３ Ｓｅ
ｒｇｈｅｉＣ，Ｈｅｉ
ｋｅ Ｍ ，Ｋｌ
ｎ ｓ Ｋ， ｅｔ ａ
ａ １．Ｃｏｎｓ
ｔｕｃ
ｒ ｔ
ｉｏｎ ｏ
ｆａｎｔ
ｏｌｏｇ
ｏｕｓ
力应变曲线斜率两组差 异无显著意义 ，
表 明细胞外 ｈｕｍａ
ｎ ｈｅ
ａｒｔ ｖａ
ｌｖｅ
ｓ ｂａ
ｓｅｄ ｏｎ ａ
ｎ ａｃ
ｅｌｌ
ｕｌａ
ｒ ￣
Ｕｏｇｒ
ａｆｔ ｍａ
ｔｒｉ
ｘ．
Ｃｉ
ｒｃｌａｔ
ｕ ｉｏ
ｎ，２０
０２，
１０６（ＳｕｐｐｌＩ）：
１６３—
１６８．
基质的三维螺旋状 的 自然折叠扭 曲结构稳 定 ，
胶原
（收稿 日期 ：
２００３－
１２—
１２）
和弹性纤维 的结构未发生显著改变 ，
符合机体生物
（供稿编辑 ：
陈新石）
力学的需要 。免疫组织化学证实 ＨＩ
Ａ—ＤＲ抗原

Q2xvdWRWZXJzaW9uLQo?