Đánh giá về các phương pháp thử nghiệm phát hành thuốc invito dành cho

dạng bào chế nano

Tổng quan này tóm tắt các phương pháp được sử dụng để nghiên cứu giải
phóng thuốc theo thời gian thực (37∘C) từ hệ thống phân phối thuốc dạng hạt
nano và thiết lập IVIVC. Do không có tiêu chuẩn bổ sung nào nên việc giải
phóng thuốc hiện được đánh giá bằng nhiều phương pháp khác nhau bao gồm
phương pháp mẫu và riêng biệt (SS), dòng chảy liên tục (CF), màng lọc máu
(DM) và sự kết hợp của chúng, cũng như các kỹ thuật mới như vôn kế và đo độ
đục. Đánh giá này mô tả nguyên tắc của từng phương pháp cùng với ưu điểm và
nhược điểm của chúng, bao gồm cả những thách thức khi thiết lập và lấy mẫu.
Phương pháp SS cho phép đo trực tiếp lượng thuốc giải phóng với yêu cầu thiết
lập đơn giản nhưng việc lấy mẫu lại phức tạp. Với phương pháp CF, việc lấy
mẫu rất đơn giản nhưng việc thiết lập lại tốn thời gian. Việc thiết lập cũng như
lấy mẫu dễ dàng hơn với DM, nhưng nó có thể không phù hợp với các thuốc
liên kết với màng. Các phương pháp mới cung cấp khả năng đo lượng thuốc giải
phóng theo thời gian thực nhưng có thể bị hạn chế ở một số loại thuốc nhất
định. Trong số các phương pháp này, cấp độ AIVIVC đã đạt được bằng lọc máu,
một mình hoặc kết hợp với mẫu và kỹ thuật riêng biệt. Các nỗ lực trong tương
lai nên tập trung vào việc phát triển các mô hình toán học mô tả cơ chế giải
phóng thuốc cũng như tạo điều kiện thuận lợi cho việc phát triển công thức bào
chế các dạng bào chế có kích thước nano.

1. Giới thiệu

Kể từ khi có báo cáo ghi lại công dụng của polycyanoacry viên nang nano muộn
và poly-𝜀-caprolactone dùng để nhỏ mắt đã được cho ra mắt hơn hai thập kỷ
trước, một số ấn phẩm đã nhấn mạnh lợi ích của việc sử dụng các dạng bào chế
có kích thước nano cho mục đích y tế và chẩn đoán hình ảnh. Thật vậy, những
ưu điểm như độ hòa tan và độ ổn định của thuốc được cải thiện, hiệu suất nâng
cao cũng như hiệu quả tăng lên đã được khẳng định rõ ràng với các chế phẩm
hạt nano. Sự quan tâm ngày càng tăng đối với các hệ thống phân phối thuốc dựa
trên công nghệ nano là yếu tố then chốt trong việc thiết kế và phát triển nhiều
dạng bào chế mới và các liệu pháp phân phối phức tạp như liposome, nano nhũ
tương, tinh thể nano, hạt nano polyme, hạt nano lipid rắn, sợi nano và dendrimer
để điều trị nhiều trạng thái bệnh lý khác nhau. Ví dụ, các nhà nghiên cứu đã
nghiên cứu các hạt nano Fenofibrate để điều trị chứng tăng cholesterol máu và
các hạt nano Cyclosporine chống ung thư. Không có gì đáng ngạc nhiên, một số
chế phẩm hạt nano đang được nghiên cứu lâm sàng để cung cấp nhiều loại
phương pháp điều trị như kháng sinh, kháng nguyên, thuốc kìm tế bào, v.v., qua
đường tiêm bắp, dưới da, đường uống và đường tĩnh mạch. Một vài ví dụ về các
dạng bào chế dựa trên công nghệ nano hiện đang được bán trên thị trường được
liệt kê trong bảng 1.

Theo định nghĩa ISO, kích thước của các công thức này có thể nằm trong
khoảng từ 1 đến 100nm. Vì các kích thước dưới 10nm có xu hướng thanh lọc
qua thận và thoát mạch mô lớn hơn, đồng thời các kích thước lớn hơn nhanh
chóng được opsonin hóa thông qua các đại thực bào của hệ thống lưới nội mô,
nên phạm vi kích thước 10-100nm được coi là tối ưu cho các chế phẩm hạt
nano. Do đó, đối với các mục đích y tế và điều trị, phạm vi nhỏ hơn 10–100nm
(trong ít nhất một chiều) đối với các hạt nano dường như được chấp nhận rộng
rãi, với một số ngoại lệ khi kích thước lớn hơn 100nm có thể áp dụng được. Do
kích thước nhỏ, các dạng bào chế có kích thước nano có tỷ lệ bề mặt trên thể
tích lớn bất thường làm thay đổi các đặc tính hóa học, vật lý và sinh học của
dạng bào chế cho phép chúng xuyên qua hàng rào tế bào và mô, do đó làm thay
đổi dược động học và dược lực học của thuốc điều trị. Khía cạnh này của các
chế phẩm hạt nano đã được khai thác để cung cấp phương pháp điều trị cho các
tế bào, cơ quan cụ thể và các mục tiêu in vivo đầy thách thức khác. Một hậu quả
khác của việc tăng cường phân phối đến vị trí mục tiêu là tăng hiệu lực của
thuốc, bao gồm cả khả năng tăng độc tính do vật liệu mang, có thể dẫn đến giảm
độ an toàn. Do đó, việc xác định chất lượng và hiệu suất của sản phẩm trở thành
một khía cạnh quan trọng trong quá trình phát triển dạng bào chế hạt nano.

Giống như hầu hết các dạng bào chế, chất lượng sản phẩm và hình thức có thể
được xác minh thông qua một số thí nghiệm in vivo và/hoặc in vitro. Trong đó,
động học giải phóng thuốc cung cấp thông tin quan trọng về hành vi của dạng
bào chế và là thông số chính được sử dụng để đánh giá tính an toàn và hiệu quả
của sản phẩm. Do chi phí, thời gian, nhân công và nhu cầu đối với con
người/động vật khi thực hiện các phép đo động học giải phóng thuốc trong ống
nghiệm, việc giải phóng thuốc trong ống nghiệm đang được chú ý nhiều hơn
như một thử nghiệm thay thế cho hiệu quả của sản phẩm. Thực vậy, thử nghiệm
giải phóng in vitro thường được sử dụng như một công cụ dự đoán hành vi in
vivo, trước đây với các dạng bào chế truyền thống như viên nang và viên nén
(tức là hòa tan), và gần đây hơn với các dạng bào chế mới như vi cầu phân hủy
sinh học tiêm được và mô cấy. Nói chung, các nghiên cứu giải phóng in vitro
được thực hiện ở 37∘C (nhiệt độ sinh lý), mặc dù trong một số trường hợp, thử
nghiệm ở nhiệt độ cao đã được khám phá để mô tả đặc điểm giải phóng thuốc từ
nhiều dạng bào chế khác nhau. Một số mục tiêu chính của thử nghiệm phóng
thích in vitro là một hoặc nhiều mục tiêu sau:

(a) đánh giá tác động của các yếu tố công thức và quy trình sản xuất phương
pháp sản xuất trên sản phẩm thuốc,

(b) đánh giá thường xuyên việc kiểm soát chất lượng để hỗ trợ xuất xưởng lô,

(c) chứng minh các tuyên bố về nhãn sản phẩm,

(d) thiết lập mối tương quan/mối quan hệ in vitro in vivo (IVIVC/R),

(e) đảm bảo tính giống nhau của sản phẩm theo hướng dẫn của SUPAC,

(f) như một yêu cầu bổ sung

Không có ngoại lệ, thử nghiệm phát hành in vitro là một công cụ phân tích quan
trọng được sử dụng để điều tra và thiết lập hành vi của sản phẩm trong các giai
đoạn phát triển sản phẩm thuốc khác nhau cũng như quản lý vòng đời. Khi được
thiết kế một cách thích hợp, hồ sơ giải phóng in vitro có thể tiết lộ thông tin cơ
bản về dạng bào chế và hoạt động của nó, cũng như cung cấp thông tin chi tiết
về cơ chế giải phóng và động học, cho phép tiếp cận thuốc một cách hợp lý và
khoa học phát triển sản phẩm. Có thể hiểu được, đối với các dạng bào chế phức
tạp như hạt nano, thử nghiệm giải phóng trong ống nghiệm có ý nghĩa quan
trọng hơn.

Mặc dù có những bước tiến lớn trong việc thiết kế và phát triển các dạng bào
chế có kích thước nano, nhưng không có quy định bổ sung hoặc quy định nào
về thử nghiệm phát hành trong ống nghiệm. Mặc dù đã có những nỗ lực sử dụng
thiết bị USP hiện có để đánh giá thuốc trong ống nghiệm đối với các hạt nano,
nhưng việc thiết lập được thiết kế chủ yếu cho các sản phẩm uống và thẩm thấu
qua da và do đó đặt ra nhiều thách thức trong quá trình nghiên cứu phát hành.
Do đó, một số phương pháp giải phóng in vitro, cả bổ sung và không bổ sung,
đã được sử dụng và báo cáo. Chắc chắn, lĩnh vực thử nghiệm hạt nano trong
ống nghiệm còn tụt hậu so với những tiến bộ đạt được trong phát triển sản phẩm
thuốc.

Do nhu cầu cấp thiết về cải thiện độ an toàn của sản phẩm trong khi vẫn duy trì
chất lượng của các dạng bào chế mới như hạt nano, thập kỷ qua đã chứng kiến
một loạt hội thảo quốc tế về phát hành in vitro được đồng tài trợ bởi AAPS
(Hiệp hội các nhà khoa học dược phẩm Hoa Kỳ), FDA Hoa Kỳ (Thực phẩm và
Dược phẩm). Cơ quan quản lý), FIP (Liên đoàn Dược phẩm Quốc tế), và một số
nhóm và cơ quan khoa học khác. Kết quả của các cuộc hội thảo này đã được
xuất bản dưới dạng báo cáo quan điểm với sự đồng thuận chung rằng thử
nghiệm độ hòa tan hoặc giải phóng in vitro là một công cụ quan trọng trong
phát triển dược phẩm và kiểm soát chất lượng đối với rất nhiều dạng bào chế, cả
truyền thống và mới. Hơn nữa, những người tham dự nhấn mạnh thực tế là khi
so sánh với các công thức truyền thống, đặc điểm của các dạng bào chế mới/đặc
biệt bao gồm vị trí và phương thức sử dụng là rất khác nhau, và do đó, cần cân
nhắc thích hợp trong quá trình lựa chọn thiết bị, môi trường giải phóng, khuấy
trộn (tốc độ dòng chảy) và nhiệt độ. Tóm lại, các hội thảo đã kết luận rằng, cùng
với một số dạng bào chế mới khác, các chế phẩm dạng hạt nano được phân loại
là “các dạng bào chế cần nhiều công việc hơn trước khi có thể đề xuất phương
pháp (hòa tan)”.

Trong một nỗ lực riêng biệt, Nhóm công tác đánh giá rủi ro công nghệ nano tại
Trung tâm nghiên cứu và đánh giá thuốc (CDER) thuộc USFDA, đã xuất bản
ghi chú quy định nêu rõ quy trình quản lý và đánh giá rủi ro đối với một loại
thuốc vật liệu nano giả định, được sử dụng bằng đường uống. Trong ví dụ này,
Nhóm công tác đã xác định “tốc độ hòa tan/giải phóng” là một yếu tố rủi ro có
thể ảnh hưởng đến việc đánh giá chất lượng, độ an toàn và hiệu quả của thành
phẩm thuốc chứa thuốc có kích thước nano, nghĩa là trong quá trình uống và
giải phóng/hòa tan trong ống nghiệm. Do đó, không thể bỏ qua tiện ích của thử
nghiệm giải phóng in vitro, từ quan điểm phát triển sản phẩm thuốc cũng như
quan điểm quản lý.

Vì vậy, mục đích của bài đánh giá này là cung cấp cho người đọc bản tóm tắt
về các phương pháp giải phóng in vitro hiện có đối với các dạng bào chế có kích
thước nano cùng với điểm mạnh và những tiến bộ của chúng trong Dược phẩm.
Hy vọng rằng đánh giá này sẽ đóng vai trò là kim chỉ nam để phát triển các kỹ
thuật phù hợp để đánh giá các công thức nghiên cứu, dạng bào chế lâm sàng và
thương mại cũng như thiết lập mối tương quan in vitro in vivo (IVIVC).

2. Phương pháp phát hành in vitro

Nhiều sự chú ý đã được dành cho việc phát triển trang phục thiết bị có khả năng
đánh giá sự giải phóng in vitro từ các hạt nano. Tuy nhiên, những cân nhắc bổ
sung, như lựa chọn môi trường giải phóng, khuấy trộn, v.v., không thể bị bỏ
qua. Ngược lại với các dạng bào chế uống trong đó môi trường giải phóng
thường bắt chước độ pH của đường tiêu hóa, việc lựa chọn môi trường giải
phóng ở dạng bào chế có kích thước nano sẽ khác nhau tùy thuộc vào vị trí sử
dụng cũng như vị trí tác dụng của chế phẩm và do đó việc mô phỏng các điều
kiện in vivo có thể gặp khó khăn.

Do đó, việc giải phóng thuốc từ các dạng bào chế có kích thước nano có thể
được đánh giá bằng cách sử dụng một trong ba loại sau, đó là phương pháp mẫu
và riêng biệt (SS), dòng chảy liên tục (CF) và phương pháp màng lọc (DM).
Gần đây hơn, thiết bị kết hợp các nguyên lý của SS và DM hoặc CF và DM
cũng đã được báo cáo. Cuối cùng, một số phương pháp mới sử dụng phép đo
vôn kế, đo độ đục, v.v. sẽ được thảo luận. Đối với mỗi phương pháp này, một
mô tả ngắn gọn được cung cấp cùng với các điều chỉnh, cân nhắc bổ sung, ưu
điểm và nhược điểm.

2.1. Lấy mẫu và tách biệt.

Trong phương pháp SS, dạng bào chế hạt nano được đưa vào môi trường giải
phóng được duy trì ở nhiệt độ không đổi, sau đó việc giải phóng thuốc được
đánh giá bằng cách lấy mẫu môi trường giải phóng (dịch lọc hoặc chất nổi) hoặc
các hạt nano. Từ tài liệu, có một số điều chỉnh phù hợp với phương pháp SS, với
những khác biệt được ghi nhận trong cách bố trí, kích thước thùng chứa,
phương thức khuấy trộn và kỹ thuật lấy mẫu.

Các thiết lập được báo cáo phổ biến bao gồm USP I (rổ), USP II (mái chèo),
hoặc lọ và thường phụ thuộc vào thể tích của môi trường phát hành được sử
dụng trong nghiên cứu phát hành in vitro. Ví dụ, lọ được sử dụng khi thể tích
môi trường giải phóng nhỏ (1–15mL) và bình giải phóng in vitro được sử dụng
với thể tích lớn hơn (600–900mL).
Ngoài việc xác định kiểu bố trí, kích thước thùng chứa cũng ảnh hưởng đến chế
độ khuấy trộn được sử dụng trong nghiên cứu giải phóng in vitro bằng phương
pháp SS. Nói chung, việc lựa chọn môi trường giải phóng để chuẩn bị hạt nano
thường dựa trên độ hòa tan và độ ổn định của thuốc, độ nhạy của khảo nghiệm
và phương pháp được sử dụng. Mặc dù việc duy trì các điều kiện chìm là tốt
hơn nhưng các điều kiện không chìm vẫn được sử dụng. Việc khuấy trộn,
thường được sử dụng để ngăn chặn sự kết tụ của các dạng bào chế trong quá
trình nghiên cứu giải phóng in vitro, sẽ phụ thuộc vào thiết bị được sử dụng.
Tương tự, kỹ thuật lấy mẫu và thay thế dung dịch đệm (toàn bộ hoặc một phần)
cũng dựa trên loại phương pháp in vitro được sử dụng. Với các dạng bào chế có
kích thước nhỏ như hạt nano, việc khuấy trộn môi trường giải phóng là rất quan
trọng đối với quá trình giải phóng trong ống nghiệm vì nó làm giảm khả năng
kết tụ và tăng cường làm ướt, do đó làm giảm tác động của các yếu tố này lên
tốc độ giải phóng trong ống nghiệm. Trong khi việc khuấy trộn môi trường giải
phóng có thể được thực hiện dễ dàng thông qua thiết bị USP I hay USP II, thì
hàm lượng môi trường trong lọ đã được khuấy trộn bằng các kỹ thuật thay thế.
Ví dụ, Danhier và Li và cộng sự. sử dụng máy khuấy từ với hạt nano Paclitaxel
và BSA tương ứng, trong khi Prabha và cộng sự đã báo cáo việc sử dụng máy
lắc quỹ đạo với các hạt nano DNA.Việc giải phóng thuốc được theo dõi bằng
cách tách vật lý các hạt nano khỏi môi trường giải phóng, sau đó là phân tích cái
trước hoặc cái sau. Trong khi một số tác giả có ghi lại việc sử dụng bộ lọc ống
tiêm để đạt được hiệu quả vật lý sự tách biệt giữa môi trường giải phóng và các
hạt nano, kích thước nhỏ của hạt nano đã đòi hỏi phải sử dụng của các kỹ thuật
tách năng lượng cao như ly tâm, siêu ly tâm và siêu lọ. Vì lọc, bộ lọc ống tiêm
có kích thước lỗ lớn tới 0,45𝜇m đã được sử dụng để hút phần nổi phía trên để
theo dõi giải phóng thuốc của các phân tử nhỏ như Celecoxib. So sánh, các kỹ
thuật tách năng lượng cao đã được được báo cáo với các phân tử sinh học lớn
hơn như Insulin, BSA (Bovine Serum Albumin) và DNA. Sau khi tách ra, việc
giải phóng thuốc thường được theo dõi bằng cách lấy mẫu một phần chất nổi
phía trên hoặc gạn toàn bộ hàm lượng chất nổi phía trên theo các khoảng thời
gian định kỳ. Trong các trường hợp khác, việc phân tách được thực hiện sau đó
bằng phân tích các hạt nano (kỹ thuật phá hủy). Sau khi lấy mẫu, một lượng
tương đương môi trường giải phóng mới hoặc dung dịch đệm được thêm vào
thiết lập sao cho chìm điều kiện được duy trì trong suốt thời gian nuôi cấy in
vitro nghiên cứu phát hành.

Nhìn chung, phương pháp SS cung cấp cách tiếp cận trực tiếp để theo dõi quá
trình giải phóng thuốc. Với phương pháp này, hầu hết các thiết lập mẫu, chế độ
khuấy trộn và kỹ thuật lấy mẫu đều khá đơn giản và đơn giản. Tuy nhiên, do
kích thước nhỏ của các dạng bào chế hạt nano nên một số thách thức thực tế đã
được ghi nhận. Ví dụ, sự kết tụ của các hạt nano trong quá trình giải phóng in
vitro dường như là mối quan tâm chính. Ngoài ra, trong khi các kỹ thuật lấy
mẫu như lọc có vẻ khá hợp lý về nguyên tắc, thì việc tắc bộ lọc trong quá trình
lấy mẫu, hấp phụ thuốc vào bộ lọc, v.v., đã được báo cáo. Thật vậy, khó khăn
trong việc phân tách vật lý ngay cả với các kỹ thuật năng lượng cao, việc giải
phóng thuốc liên tục trong quá trình phân tách năng lượng cao, v.v., là một số
thách thức thường thấy trong quá trình lấy mẫu.

Mặc dù các điều kiện chìm được khuyến nghị với phương pháp SS, nhưng các
điều kiện không chìm đã được báo cáo là có tính phân biệt đối xử cao hơn với
các thuốc hòa tan kém. Tuy nhiên, giống như các dạng bào chế vi hạt, phương
pháp SS cung cấp cho các nhà nghiên cứu một cách tiếp cận đơn giản và dễ hiểu
để theo dõi sự giải phóng trong ống nghiệm từ các dạng bào chế có kích thước
nano.

2.2. Dòng chảy liên tục

Trong phương pháp CF, việc giải phóng thuốc từ dạng bào chế hạt nano được
theo dõi bằng cách sử dụng thiết bị USPIV hoặc cải tiến thiết bị đó. Sự giải
phóng thuốc xảy ra do chất đệm hoặc môi trường liên tục tuần hoàn qua cột
chứa dạng bào chế cố định và được theo dõi bằng cách thu thập chất rửa giải
theo các khoảng thời gian định kỳ.

Không giống như phương pháp SS được sử dụng rộng rãi, chỉ có một số ví dụ
về phương pháp CF được báo cáo cho các dạng bào chế có kích thước nano. Ví
dụ, cấu hình giải phóng của các hạt nano vô định hình và dạng tinh thể chưa qua
xử lý của Cefuroxime Axetil, một loại kháng sinh cephalosporin BCS II, được
đánh giá bằng phương pháp CF cũng như các phương pháp khác được mô tả
dưới đây:

(a) USP I (rổ): dung dịch đệm 900mL ở tốc độ 100 vòng/phút;

(b) USP II (mái chèo): dung dịch đệm 900mL ở tốc độ 100 vòng/phút;

(c) USP IV (dòng qua tế bào): dung dịch đệm 900mL với tốc độ dòng
1,6mL/phút (bơm nhu động, vòng kín) qua tế bào (đường kính trong =25 mm)
và bộ lọc đĩa màng 0,2 𝜇m;

(d) túi lọc máu (MWCO 12kDa, thể tích bên trong = 7mL) được đặt vào máy
thử giải phóng in vitro USP II (mái chèo) (thể tích bên ngoài = 900mL, tốc độ
vòng quay cánh khuấy =100).

Kết quả cho thấy rằng việc giải phóng thuốc hoàn toàn chỉ đạt được với thiết bị
USP II và thiết bị USP IV, các cấu hình giải phóng bằng phương pháp USPIV
được tách biệt rõ ràng. Sự cố định của các hạt nano được cho là một yếu tố góp
phần vào kết quả phân biệt thu được với thiết bị USP IV.

Tương tự, trong một thí nghiệm trên màng dải chứa nano và vi hạt của một loại
thuốc BCS II khác, Griseofulvin, việc giải phóng in vitro được thực hiện bằng
hai phương pháp:

(a) USPI (giỏ): phương tiện 500 và 900mL ở mức 50, 100 và 150 vòng/phút;
 (b) USP IV (dòng chảy qua tế bào): 100mL môi trường với tốc độ dòng 4, 8 và
16mL/phút (bơm nhu động, vòng kín) qua tế bào (đường kính trong = 22,6mm)
và bộ lọc đĩa màng 0,2𝜇m với dải màng được nạp với 6 cấu hình khác nhau.

Trong khi việc giải phóng hoàn toàn chỉ được quan sát với USP I và cấu hình B
(màng dải được đặt trong ngăn trên các hạt thủy tinh tròn) của phương pháp
USP IV, kết quả là có cấu hình A (màng dải được đặt trong phần hình nón của ô
không có hạt thủy tinh tròn) và C (màng dải được kẹp giữa các hạt thủy tinh
tròn) của USP IV ở tốc độ dòng cao nhất có tính phân biệt cao hơn tất cả các
cấu hình giải phóng khác thu được trong nghiên cứu in vitro. So với các dạng
bào chế hạt nano trong đó tài liệu về việc sử dụng phương pháp USP IV còn ít,
có thể suy ra một số khía cạnh nổi bật của phương pháp CF từ nó sử dụng ở
dạng bào chế vi hạt. Ví dụ, tốc độ dòng chảy được sử dụng trong phương pháp
CF phụ thuộc vào loại máy bơm (nhu động so với ống tiêm) cũng như các bộ
lọc được sử dụng (màng so với siêu lọc). Tốc độ dòng chảy thấp được biết đến
là yếu tố chính gây ra sự giải phóng chậm hoặc không hoàn toàn từ các dạng
bào chế. Nhìn chung, sự sẵn có của thiết bị tự động đã đơn giản hóa việc lấy
mẫu thường xuyên và thay thế phương tiện bằng phương pháp CF trong các hệ
thống vòng kín (phương tiện tuần hoàn) và mở (phương tiện không tuần hoàn).
Tuy nhiên, phương pháp CF gặp phải một số nhược điểm bao gồm chi phí thiết
bị, khó thiết lập, tắc nghẽn bộ lọc, hấp phụ vào bộ lọc và hạt thủy tinh và khó
duy trì tốc độ dòng không đổi dẫn đến kết quả có nhiều biến đổi.

2.3. Phương pháp lọc máu.

Trong số tất cả các phương pháp được sử dụng để đánh giá khả năng giải phóng
thuốc từ các dạng bào chế có kích thước nano, phương pháp lọc máu (DM) là
phương pháp linh hoạt và phổ biến nhất. Trong phương pháp này, việc phân
tách vật lý các dạng bào chế đạt được bằng cách sử dụng màng lọc cho phép lấy
mẫu dễ dàng theo các khoảng thời gian định kỳ. Cũng như các phương pháp
khác, một số thích ứng của DM đã được báo cáo trong tài liệu với những khác
biệt chính về cách thiết lập, kích thước thùng chứa và giới hạn trọng lượng phân
tử (MWCO). Trong số nhiều cách thiết lập DM được sử dụng, phương pháp
được trích dẫn phổ biến nhất là lọc máu túi (lọc máu thông thường), các điều
chỉnh khác là thiết lập lọc máu ngược và lọc máu song song. Với kỹ thuật lọc
máu thông thường, các hạt nano được đưa vào túi lọc máu chứa vật liệu giải
phóng (vật liệu/ngăn bên trong), sau đó được niêm phong và đặt trong một bình
lớn hơn chứa vật liệu giải phóng (vật liệu/ngăn bên ngoài), được khuấy trộn để
giảm thiểu tác động của lớp nước không khuấy. Nói chung, thể tích chứa trong
túi lọc máu (môi trường bên trong) nhỏ hơn đáng kể so với thể tích bên ngoài.
Ví dụ: khối lượng nội dung được báo cáo trong phạm vi văn học từ 1 đến 10mL,
trong khi khối lượng nội dung đa phương tiện được báo cáo lớn hơn nhiều,
thường khoảng 4090mL. Do đó, kích thước thùng chứa sẽ phụ thuộc vào tổng
thể tích môi trường giải phóng cần thiết cho nghiên cứu giải phóng in vitro.
Trong kỹ thuật lọc máu thông thường, thuốc được giải phóng từ các hạt nano sẽ
khuếch tán qua màng lọc đến ngăn ngoài nơi lấy mẫu để phân tích. Ngược lại,
với thiết lập lọc máu ngược, các hạt nano được đặt ở ngăn bên ngoài (được
khuấy trộn để giảm thiểu lớp nước không khuấy) và ngăn bên trong được lấy
mẫu để giải phóng thuốc. Các phiên bản thích ứng khác của DM bao gồm thiết
lập lọc máu song song trong đó tế bào cho và tế bào nhận, cả hai đều chứa thể
tích môi trường bằng nhau được khuấy trộn bằng máy khuấy từ, được phân tách
bằng màng lọc và lấy mẫu xảy ra từ tế bào nhận và tế bào khuếch tán Franz dọc.

Cũng như các phương pháp khác, độ hòa tan của thuốc trong môi trường giải
phóng là điều cần thiết cho việc vận chuyển thuốc qua màng lọc. Ngoài môi
trường giải phóng, không thể bỏ qua tầm quan trọng của việc lựa chọn ngưỡng
trọng lượng phân tử thích hợp (MWCO) cho màng lọc máu. Thật vậy, tiền đề cơ
bản của DM là thuốc được giải phóng từ dạng bào chế sẽ khuếch tán nhanh
chóng từ một ngăn, qua màng và đi vào ngăn thứ hai từ đó nó được lấy mẫu để
phân tích. Vì vậy, các màng có MWCO màng đủ cao thường được lựa chọn cho
các nghiên cứu giải phóng in vitro để việc vận chuyển thuốc không phải là yếu
tố hạn chế. Ví dụ: trong một nghiên cứu với 3 dạng bào chế của Indomethacin
(ví dụ: hạt nano và viên nang nano sử dụng poly-𝜀-caprolactone và nhũ tương
dưới micromet), Calvo và cộng sự đã lưu ý rằng gần 85% thuốc được giải
phóng trong vòng 2 giờ và giải phóng hoàn toàn đạt được trong 4 giờ khi sử
dụng màng 12kDa. Tuy nhiên, lý do để chọn một MWCO là khá chủ quan. Ví
dụ: MWCO mức cao 10–14kDa được sử dụng để nghiên cứu giải phóng thuốc
của các phân tử nhỏ như Risperidone và Indomethacin, và MWCO thấp tới
1kDa mặc dù thích hợp để đánh giá sự giải phóng in vitro của một phân tử lớn,
pDNA, được chứng minh là hạn chế sự khuếch tán của Cefuroxime Axetil, một
loại kháng sinh cephalosporin. Nhìn chung, MWCO phải đủ lớn để cho phép
vận chuyển thuốc.

Sự dễ dàng thiết lập và lấy mẫu bằng DM khiến cho việc nghiên cứu giải phóng
thuốc từ nhiều dạng bào chế có kích thước nano khác nhau như dạng cầu nano,
liposome, nhũ tương, huyền phù nano, v.v. trở nên rất đơn giản và dễ hiểu. Tuy
nhiên, các vấn đề đã được báo cáo với phương pháp lọc máu thông thường. Nếu
bịt kín không đúng cách, có thể xảy ra rò rỉ môi trường và dạng bào chế từ cả
hai đầu của túi lọc máu. Dữ liệu giải phóng không đầy đủ có thể được quan sát
nếu tồn tại các điều kiện không chìm hoặc thời gian cân bằng cao. Mặt khác, sự
khác biệt về thời gian không cân bằng có thể được khai thác như một công cụ
phân biệt đối xử để phân biệt hành vi giải phóng giữa các dạng bào chế giải
phóng nhanh và chậm. Một yếu tố khác cần được xem xét là DM không thể
được sử dụng với các thuốc liên kết với màng thẩm tách được nêu trong một bài
báo đánh giá về dạng bào chế vi hạt, khuyến nghị nên đánh giá tính phù hợp của
màng thẩm tách trước khi sử dụng.

2.4. Các phương pháp kết hợp

Một số ấn phẩm đã sửa đổi các thiết lập được sử dụng trong các phương pháp
SS, CF và DM để đánh giá khả năng giải phóng thuốc từ các dạng bào chế có
kích thước nano. Trong hầu hết các báo cáo này, việc thiết lập phương pháp SS
được kết hợp với máy thẩm tách để cho phép lấy mẫu dễ dàng. Trong các ấn
phẩm khác, thiết lập DM và CF được sử dụng để đánh giá sự giải phóng trong
ống nghiệm từ các hạt nano. Ví dụ, Mottaleb và cộng sự so sánh hồ sơ giải
phóng của Ibuprofen từ liposome, viên nang nano lipid và hạt nano bằng
phương pháp lọc máu thông thường (túi lọc máu) và thiết lập USP I (giỏ) đã sửa
đổi trong đó trục được gắn với giỏ thủy tinh có màng lọc máu ở phía dưới,
nghĩa là, chạy thận trong giỏ thủy tinh (GBD) ,và được đặt trong một chiếc bình
lớn hơn.Việc lấy mẫu được thực hiện từ bên ngoài. Không giống như túi lọc
máu có diện tích bề mặt màng lớn, GBD có thể phân biệt sự khác biệt giữa các
cấu hình giải phóng từ các công thức khác nhau (viên nang nano lipid, hạt nano,
liposome). Trong một nghiên cứu khác, Lobenberg và cộng sự so sánh sự giải
phóng thuốc từ các hạt nano Rifampicin và Moxifloxacin hydrochloride với
phương pháp lọc máu thông thường (túi lọc máu) cũng như sự thích ứng của
USP I (giỏ), trong đó một ống trụ chứa màng lọc máu ở phía dưới được gắn vào
trục giỏ. Kết quả từ nghiên cứu này cho thấy rằng thiết lập USP I đã sửa đổi có
bản chất phân biệt đối xử hơn và có thể là do diện tích bề mặt của màng lọc máu
giảm. Trong một sửa đổi khác của thiết lập USP (giỏ), một túi lọc máu chứa
chất mang lipid có cấu trúc nano của Artemether được đặt bên trong giỏ và việc
giải phóng thuốc được theo dõi theo thời gian. Mặc dù hầu hết các nghiên cứu
đã sử dụng thiết lập USPI, nhưng những nghiên cứu khác đã sử dụng kết hợp
thiết lập USP II (mái chèo) với DM. Ví dụ, Cao và cộng sự. gắn các túi lọc máu
có chứa hạt nano Silybin meglumine lên thiết bị USP II (mái chèo) và đánh giá
sự giải phóng thuốc trong năm môi trường giải phóng khác nhau. Sự kết hợp
của DM, được báo cáo trước đây bởi Kostanskiet và cộng sự, và phương pháp
CF đã được sử dụng để đánh giá sự giải phóng thuốc từ các hạt nano BSA nạp
5-Fluorouracil. Thiết bị này bao gồm một ống thủy tinh (có màng lọc máu ở
phía dưới) được đặt vào một bình lớn hơn chứa đệm. Việc lấy mẫu cũng như
thay thế đệm được thực hiện từ bình lớn hơn với sự hỗ trợ của hai máy bơm có
cùng tốc độ dòng chảy. Bộ DM-CF kết hợp có thể được thiết lập để chứng minh
mức độ bền vững của 5-Fluorouracil và không có sự giải phóng bùng nổ từ các
hạt nano BSA. Phương pháp lọc máu-CF thay thế được sử dụng phương pháp
lọc máu thích ứng bên trong thiết lập CF.

2.5. Phương pháp mới.

Ngoài các phương pháp SS, CF và DM thường được báo cáo, một số phương
pháp thay thế đã được sử dụng để theo dõi quá trình giải phóng thuốc. Phần lớn
trong số này dường như nhắm mục tiêu vào các loại thuốc có hoạt tính chọn lọc.
Mặc dù các kỹ thuật này có thể khác nhau về nguyên tắc hoặc ứng dụng, nhưng
chúng có một số yếu tố chung là không cần phải tách biệt vật lý dạng bào chế
khỏi môi trường giải phóng. Ngoài ra, những kỹ thuật này còn cung cấp khả
năng đo lường trong điều kiện thời gian thực.

Như vậy, các phương pháp điện hóa mang lại khả năng đo nhanh tại chỗ đồng
thời tránh được nhiễu gây ra bởi sự hiện diện của liều lượng hòa tan trong môi
trường giải phóng. Trong một cách tiếp cận như vậy, một điện cực chọn lọc của
thuốc đo điện thế đã được sử dụng để theo dõi sự giải phóng Prcaine
hydrochloride theo thời gian thực từ các nanogel phản ứng với pH. Trong một
báo cáo khác của Mora và cộng sự, một kỹ thuật đo điện áp sóng vuông lặp đi
lặp lại có độ nhạy cao đã được sử dụng để đo phản ứng oxy hóa khử của
Doxorubicin hydrochloride. Tương tự, phân cực xung vi phân được sử dụng để
đánh giá sự giải phóng thuốc liên tục từ Piroxicam, Chloramphenicol và
Diazepam. Ngoài thực tế là chỉ có các loại thuốc có hoạt tính điện mới có thể
được đo bằng các phương pháp trên, các phương pháp này còn có những hạn
chế khác. Ví dụ, độ nhạy cũng như khả năng đáp ứng của từng kỹ thuật rất khác
nhau. Ngoài ra, các cảm biến được sử dụng có thể dành riêng cho một loại thuốc
cụ thể.
Các phương pháp không điện hóa như đo nhiệt lượng, đo độ đục và nhiễu xạ
laser cũng đã được đánh giá là phương pháp giải phóng trong ống nghiệm. Phép
đo nhiệt lượng dung dịch được sử dụng bởi Kayaert và cộng sự trong quá trình
đo giải phóng in vitro của Naproxen, Cinnarizine và hợp chất A (API nghiên
cứu) từ các tinh thể nano. Nguyên tắc của kỹ thuật này dựa trên việc phát hiện
tỷ lệ trao đổi nhiệt thực trong quá trình giải phóng in vitro. Những thách thức
với phép đo nhiệt lượng bao gồm thời gian cân bằng dài. Hơn nữa, nhiệt sinh ra
bởi tất cả các quá trình cần phải được xem xét. Các phương pháp đo độ đục và
nhiễu xạ laser sử dụng đặc tính tán xạ ánh sáng thay đổi của các hạt nano trong
môi trường giải phóng phân tán cũng đã được sử dụng. Mối quan tâm với các
phương pháp này bao gồm thời gian cân bằng dài, phạm vi kích thước hạt hạn
chế và nồng độ ban đầu của mẫu có thể được sử dụng. Helle và cộng sự đã thiết
kế một hệ thống trực tuyến mới để đánh giá khả năng giải phóng thuốc từ các
hạt nano Indomethacin và Beclomethasone. Trong phương pháp này, các hạt
nano được đóng gói thành cột nhỏ được kết nối với van điều chế đa cổng gắn
với hệ thống HPLC cho phép phân tích nhanh chóng. Các phương pháp mới
khác được báo cáo trong tài liệu bao gồm tế bào Franz khuếch tán dọc và mô
hình phân giải mỡ trong ống nghiệm. Vi lọc, một thiết lập khác được sử dụng để
đo sự giải phóng thuốc từ các hạt nano, dựa trên sự khuếch tán thụ động của
thuốc thông qua gradient nồng độ qua màng bán thấm. Sự giải phóng thuốc có
thể được đo lường trong điều kiện thời gian thực bằng các phương pháp phân
tích như HPLC. Tuy nhiên, cần thận trọng khi sử dụng chất hoạt động bề mặt
trong môi trường giải phóng vì khả năng phục hồi có thể bị ảnh hưởng.

3. Mô hình phát hành thuốc

Rất ít ấn phẩm đã cố gắng mô tả việc phát hành hồ sơ từ các dạng bào chế hạt
nano sử dụng toán học các mô hình toán học. Điều này không có gì đáng ngạc
nhiên vì các dạng bào chế có kích thước nano rất phức tạp và việc đánh giá giải
phóng thuốc không hề đơn giản. Tuy nhiên, một số tác giả đã thảo luận về tầm
quan trọng của các mô hình toán học và nỗ lực mô tả quá trình giải phóng
thuốc. Ví dụ, Barzegar-Jalali và cộng sự đề xuất việc sử dụng thời gian được
cung cấp năng lượng tương tác (RPT) làm mô hình chung để phân tích bản chất
phức tạp của việc giải phóng thuốc từ các hạt nano, với các phương pháp thay
thế là mô hình xác suất Weibullandlog. Trong một báo cáo khác, Zengetal. đã
phát triển một mô hình ba tham số xem xét sự tương tác thuận nghịch của chất
mang thuốc cũng như sự giải phóng thuốc khuếch tán từ liposome. Việc sử dụng
các mô hình toán học để mô tả hồ sơ phát hành thảm mang lại một số lợi thế.
Nó cho phép làm sáng tỏ các cơ chế giải phóng thuốc và có thể được sử dụng để
hướng dẫn các nỗ lực phát triển công thức. Hơn nữa, các thông số mô hình có
thể dùng để biểu diễn cũng như so sánh các cấu hình giải phóng thuốc trong ống
nghiệm. Tuy nhiên, phải thận trọng khi áp dụng các mô hình toán học cho các
cơ chế giải phóng thuốc phức tạp.

4. IVIVCFDA

Hoa Kỳ định nghĩa IVIVC là “Mô hình toán học dự đoán mô tả mối quan hệ
giữa đặc tính in vitro của dạng bào chế giải phóng kéo dài (thường là tốc độ
hoặc mức độ giải phóng hoặc giải phóng thuốc in vitro) và phản ứng invivo có
liên quan, ví dụ, nồng độ thuốc trong huyết tương hoặc lượng thuốc được hấp
thu”. Do đó, việc thiết lập IVIVC, được mô tả là mối tương quan giữa phát hành
invitro và hoạt động in vivo, sẽ nâng cao tính hữu ích của nghiên cứu invitro.
Từ tài liệu hướng dẫn của FDA năm 1997, IVIVC sẽ giảm bớt gánh nặng pháp
lý bằng cách giảm bớt số lượng nghiên cứu in vivo cần thiết để phê duyệt sản
phẩm. Ngoài ra, nó thúc đẩy việc thiết lập các thông số kỹ thuật phát hành in
vitro có liên quan về mặt lâm sàng. Hướng dẫn của FDA cũng phân loại IVIVC
thành ba cấp độ. Cấp độ A thể hiện mối quan hệ điểm-điểm tuyến tính hoặc phi
tuyến tính giữa cấu hình phát hành in vitro và in vivo. Nếu mối quan hệ là phi
tuyến tính thì cần phải lập mô hình hoặc chia tỷ lệ phù hợp. Trong số ba cấp độ
IVIVC, cấp độ mô tả mối tương quan cao nhất và được sử dụng phổ biến nhất
để có được sự miễn trừ sinh học. Mặt khác, tương quan cấp độ B là sự so sánh
các thông số tóm tắt như thời gian hòa tan trung bình trong ống nghiệm với thời
gian hòa tan trung bình trong cơ thể hoặc thời gian lưu trú trung bình (MRT). Vì
một số đường cong in vivo sẽ tạo ra giá trị MRT tương tự hoặc thời gian hòa tan
trung bình trong ống nghiệm, mối tương quan cấp B không mang tính phân biệt
như cấp A, nhưng có thể chấp nhận được đối với IVIVC. Mối tương quan cấp C
mô tả mối quan hệ giữa thông số giải phóng in vitro (ví dụ: % hòa tan tại một
thời điểm cụ thể) và thông số dược động học (ví dụ: 𝐶max). Tuy nhiên, mối
tương quan cấp C không mô tả được hình dạng hoàn chỉnh của hồ sơ phát hành
in vivo và mặc dù có thể chấp nhận được nhưng hiếm khi được sử dụng.

Do đó, hướng dẫn của FDA dành cho các sản phẩm phóng thích kéo dài qua
đường uống. Tuy nhiên, các nguyên tắc của FDA đã được sử dụng để chứng
minh IVIVC từ một số dạng bào chế không dùng đường uống, bao gồm cả các
chế phẩm có kích thước nano.

Hầu hết các tài liệu được xuất bản về IVIVC đều so sánh hành vi giải phóng in
vitro với đặc tính hấp thụ in vivo, sau này được tính toán bởi phương pháp
Wagner-Nelson được FDA khuyến nghị. Sau khi tính toán phần hấp thụ, sẽ thu
được mối tương quan bằng cách so sánh nó với đặc tính giải phóng trong ống
nghiệm và loại IVIVC (Cấp A, cấp B, v.v.) được xác định. Trong thập kỷ qua,
một số báo cáo về IVIVC từ liều lượng nano các biểu mẫu đã được công bố.
Trong một số trường hợp, người ta quan sát thấy mối tương quan thứ tự trong
khi, trong một số trường hợp khác, IVIVC cấp A được thiết lập với một số hoặc
tất cả các công thức được đánh giá trong nghiên cứu. Ví dụ, mối tương quan thứ
tự đã được quan sát thấy với ba chế phẩm Fenofibrate với sự giải phóng và hấp
thu thuốc từ các hạt ma trận lipid 100nm > vi hạt > đối chứng (huyền phù tinh
thể). Trong một nghiên cứu khác về huyền phù nano Fenofibrate, Xu và cộng sự
đã cố gắng làm sáng tỏ cơ chế hấp thu bằng mô hình tưới máu ruột tại chỗ. Phân
tích dữ liệu giữa độ hòa tan trong ống nghiệm (𝑃), hấp thu tại ruột (𝐹) và hấp
thụ trong cơ thể sống (𝐹𝑎) đã chứng minh mức độ tương quan (𝑅2 > 0,95). Do
đó, các tác giả kết luận rằng mô hình tưới máu ruột tại chỗ có thể là một yếu tố
dự báo hành vi dược động học in vivo đối với hệ thống treo sau đó. Trong một
báo cáo gần đây, Kumar và cộng sự đã nghiên cứu mối quan hệ giữa sự giải
phóng in vitro và in vivo từ các hạt nano Indomethacingelatin dùng qua đường
uống đối với chuột bạch tạng Wistar. Kết quả nghiên cứu chỉ ra rằng có được
mối tương quan tốt bằng cách vẽ đồ thị phần được hấp thụ in vivo (phương
pháp WagnerNelson) so với phần được giải phóng, phần sau được giải phóng
bằng phương pháp lọc máu thông thường (túi lọc máu). Phương pháp Wagner-
Nelson cũng được sử dụng trong một ấn phẩm khác, trong đó khả năng hấp thụ
in vivo từ Silybinmeglumine, các hạt nano silica trung mô rỗng, được dùng qua
đường uống cho chó beagle, được so sánh với kết quả in vitro thu được bằng
cách thiết lập túi lọc thận USP I (mái chèo) kết hợp. Trong số năm phương tiện
phát hành khác nhau được sử dụng trong nghiên cứu, IVIVC cấp A (𝑅2 > 0,97)
thu được với Na2CO3 0,06M và 0,08M dung dịch Na2CO3. Trong một nghiên
cứu khác với Silybin, IVIVC đã đạt được với công thức giải phóng Silybin
trong 72 giờ (SLB 72 giờ) bao gồm hệ phân tán rắn, ma trận gel và các hạt nano
silica xốp (PSN). Tương tự như nghiên cứu trước đó, các tác giả đã so sánh việc
giải phóng invivo từ chó beagle với việc giải phóng in vitro được đánh giá bằng
cách sử dụng thiết lập túi lọc máu kết hợp USP I (mái chèo). Trong một bài báo
khác, Tiwari và cộng sự đã chứng minh mối tương quan về mức độ giữa sự giải
phóng trong ống nghiệm (túi lọc máu) và phần trăm thuốc được hấp thụ
(phương pháp Wagner Nelson) đối với chất mang lipid có cấu trúc nano
Simvastatin cũng như các hạt nano (𝑅2 >0,94) (Hình 12)[34].

5. Kết Luận

Đối với các dạng bào chế mới như hạt nano không có quy định tiêu chuẩn cơ
bản hoặc tóm tắt tồn tại, việc đánh giá phát hành thuốc trong ống nghiệm có tầm
quan trọng lớn hơn trong việc đóng vai trò là chỉ số về chất lượng và hiệu suất
của sản phẩm. Các phương pháp Aplethora đã được sử dụng, mỗi phương pháp
đều có ưu điểm và nhược điểm liên quan đến việc dễ dàng thiết lập, lấy mẫu và
thay thế bộ đệm nhanh chóng. Lý tưởng nhất là phương pháp giải phóng in vitro
phải mô phỏng các điều kiện in vivo, cơ chế giải phóng và cho phép thiết lập
IVIVC. Nghiên cứu trong tương lai nên tập trung vào phát triển các mô hình
toán học có liên quan để dự đoán hành vi giải phóng thuốc cũng như các cơ chế
giải phóng có thể áp dụng cho nhiều dạng bào chế có kích thước nano.

Tài liệu tham khảo

N. Al Khouri Fallouh, L. Roblot-Treupel, and H. Fessi, “Devel opment of a

new process for the manufacture of polyisobutyl cyanoacrylate nanocapsules,”
International Journal of Pharma ceutics,vol.28,no.2-3,pp.125–132,1986.

C. Losa, P. Calvo, E. Castro, J. L. Vila-Jato, and M. J. Alonso, “Improvement of

ocular penetration of amikacin sulphate by association to
poly(butylcyanoacrylate) nanoparticles,” Journal of
PharmacyandPharmacology,vol.43,no.8,pp.548–552,1991.

C. Losa, L. Marchal-Heussler, F. Orallo, J. L. Vila Jato, and M. J. Alonso,

“Design of new formulations for topical ocular administration: polymeric
nanocapsules containing metipra nolol,” Pharmaceutical
Research,vol.10,no.1,pp.80–87,1993.

C. N. Cruz, K. M. Tyner, L. Velazquez et al., “CDER risk assessment exercise to

evaluate potential risks from the use of nanomaterials in drug products,” AAPS
Journal,vol. 15,no.3, pp. 623–628, 2013.

G.Verreck, I. Chun, J. Rosenblatt et al., “Incorporation of drugs in an

amorphous state into electrospun nanofibers composed of a water-insoluble,
nonbiodegradable polymer,” Journal of Controlled Release,vol.92,no.3,pp.349–
360,2003.
H. Heiati, R. Tawashi, R. R. Shivers, and N. C. Phillips, “Solid lipid
nanoparticles as drug carriers I: incorporation and retention of the lipophilic
prodrug 3-azido-3-deoxythymidine palmitate,” International Journal of
Pharmaceutics,vol.146,no. 1, pp. 123–131, 1997

M. Cetin, A. Atila, and Y. Kadioglu, “Formulation and in vitro characterization

of Eudragit L100 and Eudragit L100-PLGA nanoparticles containing diclofenac
sodium,” AAPS Pharm SciTech,vol.11,pp.1250–1256,2010.

A. Hanafy, H. Spahn-Langguth, G. Vergnault et al., “Pharma cokinetic

evaluation of oral fenofibrate nanosuspensions and SLNin comparison to
conventional suspensions of micronized drug,” Advanced Drug Delivery
Reviews,vol.59,no.6,pp.419 426, 2007. T.M.Allen,W.W.K.Cheng, J. I.Hare,
andK.M.Laginha, “Pharmacokinetics and pharmacodynamics of lipidic nano
particles in cancer,” Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry, vol. 6, no. 6,
pp. 513–523, 2006.

J. Kreuter, “Nanoparticle-based drug delivery systems,” Journal of Controlled

Release, vol. 16, no. 1-2, pp. 169–176, 1991.

M. L. Etheridge, S. A. Campbell, A. G. Erdman, C. L. Haynes, S.

M.Wolf,andJ.McCullough,“Thebigpictureonnanomedicine: the state of
investigational and approved nanomedicine prod ucts,” Nanomedicine:
Nanotechnology, Biology, and Medicine, vol.9,no.1,pp.1–14,2013.

S. Nie, “Understanding and overcoming major barriers in cancer

nanomedicine,” Nanomedicine,vol.5,no.4,pp.523–528, 2010.

W. H. de Jong and P. J. A. Borm, “Drug delivery and nanoparticles: applications

and hazards,” International Journal of Nanomedicine,vol.3,no.2,pp.133–
149,2008.
S. D’Souza, J. A. Faraj, R. Dorati, and P. P. DeLuca, “Ashort term quality
control tool for biodegradable microspheres,” AAPS
PharmSciTech,vol.15,no.3,pp.530–541,2014.
P.Buch,P.Holm,J.Q.Thomassenetal.,“IVIVCforfenofibrate
immediatereleasetablets usingsolubility and permeability as in vitro predictors
for pharmacokinetics,” Journal of Pharmaceuti cal
Sciences,vol.99,no.10,pp.4427–4436,2010.

S. D’Souza, J. A. Faraj, S. Giovagnoli, and P. P. DeLuca, “IVIVC from long

acting olanzapine microspheres,” International Jour nal of Biomaterials, vol.
2014, Article ID 407065, 11 pages, 2014.

L. C. Amann, M. J. Gandal, R. Lin, Y. Liang, and S. J. Siegel, “In vitro-in vivo

correlations of scalable PLGA-Risperidone implants for the treatment of
schizophrenia,” Pharmaceutical Research,vol.27,no.8,pp.1730–1737,2010.

G. Zackrisson, G. ¨ Ostling, B. Skagerberg, and T. Anf¨alt, “ACcel erated

Dissolution Rate Analysis (ACDRA) for controlled release drugs. Application to
Roxiam,” JournalofPharmaceu tical and Biomedical Analysis,vol.13,no.4-
5,pp.377–383,1995.

S. S. D'Souza, J. A. Faraj, and P. P. DeLuca, “A model-dependent approach to

correlate accelerated with real-time release from biodegradable microspheres,”
AAPS PharmSciTech,vol.6,arti cle 70, no. 4, 2005.

D. J. Burgess, A. S. Hussain, T. S. Ingallinera, and M. Chen, “Assuring quality

and performance of sustained and controlled release parenterals: workshop
report,” AAPS PharmSci,vol.4, article E7, 2002.

S. S. D’Souza and P. P. DeLuca, “Methods to assess in vitro drug release from

injectable polymeric particulate systems,” Pharmaceutical
Research,vol.23,no.3,pp.460–474,2006.
M. Siewert, J. Dressman, C. K. Brown, andV. P. Shah, “FIP/AAPS guidelines to
dissolution/in vitro release testing of novel/special dosage forms,” AAPS
PharmSciTech,vol.4,article 7, 2003.

C. K. Brown, H. D. Friedel, A. R. Barker et al., “FIP/AAPS joint workshop

report: dissolution/in vitro release testing of novel/special dosage forms,” AAPS
PharmSciTech,vol. 12,no. 2,pp.782–794,2011.

M.Martinez,M.Rathbone,D.Burgess,andM.Huynh,“Invitro and in vivo

considerations associated with parenteral sustained release products: a review
based upon information presented and points expressed at the 2007 Controlled
Release Society Annual Meeting,” Journal of Controlled Release, vol. 129, no.
2, pp. 79–87, 2008.

M. N. Martinez, M. J. Rathbone, D. Burgess, and M. Huynh, “Breakout session

summary from AAPS/CRS joint workshop on critical variables in the in vitro
and in vivo performance of parenteral sustained release products,”
JournalofControlled Release,vol.142,no.1,pp.2–7,2010.

N. Chidambaram and D. J. Burgess, “A novel in vitro release method for

submicron-sized dispersed systems,” AAPS Pharm Sci,vol.1,no.3,pp.32–
40,1999.

M. M. A. Abdel-Mottaleb and A. Lamprecht, “Standardized in vitro drug release

test for colloidal drug carriers using modified USPdissolution apparatus I,”
Drug Development and Industrial Pharmacy,vol.37,no.2,pp.178–184,2011.
A.Maghsoudi,S.A.Shojaosadati,andE.VasheghaniFarahani, “5-Fluorouracil-
loaded BSA nanoparticles: formulation opti mization and in vitro release study,”
AAPS PharmSciTech,vol. 9, no. 4, pp. 1092–1096, 2008.

U. Bhardwaj and D. J. Burgess, “A novel USP apparatus 4 based release testing

method for dispersed systems,” International Journal of
Pharmaceutics,vol.388,no.1-2,pp.287–294,2010. L. Mora, K. Y. Chumbimuni-
Torres, C. Clawson, L. Hernandez, L. Zhang, and J. Wang, “Real-time
electrochemical monitoring of drug release from therapeutic nanoparticles,”
Journal of Controlled Release,vol.140,no.1,pp.69–73,2009.

C. B. Michalowski, S. S. Guterres, and T. Dalla Costa, “Microdialysis for

evaluating the entrapment and release of a lipophilic drug from nanoparticles,”
JournalofPharmaceutical and Biomedical Analysis,vol.35,no.5,pp.1093–
1100,2004.

R. Kumar, R. C. Nagarwal, M. Dhanawat, and J. K. Pandit, “In-vitro and in-

vivo study of indomethacin loaded gelatin nanoparticles,” Journal of
Biomedical Nanotechnology,vol.7,no. 3, pp. 325–333, 2011.

X.Cao,W.W.Deng,M.Fuetal.,“Invitroreleaseandin vitro in vivo correlation for

silybin meglumine incorporated into Hollow-type mesoporous silica
nanoparticles,” International Journal of Nanomedicine,vol.7,pp.753–762,2012.
[34] R. Tiwari and K. Pathak, “Nanostructured lipid carrier versus solid lipid
nanoparticles of simvastatin: comparative analysis of characteristics,
pharmacokinetics and tissue uptake,” Interna tional Journal of
Pharmaceutics,vol.415,no. 1-2,pp.232–243, 2011.

X. Cao, W. Deng, M. Fu et al., “Seventy-two-hour release formulation of the

poorly soluble drug silybin based on porous silica nanoparticles: in vitro release
kinetics and in vitro/in vivo correlations in beagle dogs,” European Journal of
Pharmaceuti cal Sciences, vol. 48, no. 1-2, pp. 64–71, 2013.

Y. Xu, Y. Wang, X. M. Li et al., “Study on the release of fenofibrate

nanosuspension in vitro and its correlation with in situ intestinal and in vivo
absorption kinetics in rats,” Drug Development and Industrial
Pharmacy,vol.40,no.7,pp.972 979, 2014.
N.Borkar,D.Xia,R.Holmetal.,“Investigatingthecorrelation between in vivo
absorption and in vitro release of fenofibrate from lipid matrix particles in
biorelevant medium,” European Journal of Pharmaceutical
Sciences,vol.51,pp.204–210,2014