METODE INFRACRVENE

SPEKTROSKOPIJE

-VIBRACIONA SPEKTROSKOPIJA-

Prof. dr Ljiljana Damjanović-Vasilić

E-mail adresa: ljiljana@ffh.bg.ac.rs
• Spektroskopija je oblast nauke koja se bavi proučavanjem
interakcija elektromagnetnog zračenja i materije.

• Energetski nivoi molekula imaju složeniju strukturu u odnosu

na atomske.

• Pored potencijalne energije elektrona, što imamo i kod atoma,

molekuli imaju i vibracionu i rotacionu energiju, koja je takođe
kvantirana.

• Vibraciona spektroskopija izučava vibracione prelaze kod

molekula.
SPEKTAR ELEKTROMAGNETNOG ZRAČENJA

gama
zraci

x-zraci
nevidljivo
UV zraci

vidljivo

IC
nevidljivo
Mikrotalasi

TV
talasi

radio
talasi
 INFRACRVENI DEO SPEKTRA
(od 0,78 do 1000 m)
OBLAST TALASNA DUŽINA () ~)
TALASNI BROJ ( Frekvencija ()

bliska IC 0,78 do 2,5 m 12800 do 4000 cm-1 3,8·1014 do 1,2·1014 Hz

srednja IC 2,5 do 50 m 4000 do 200 cm-1 1,2·1014 do 6,0·1012 Hz

daleka IC 50 do 1000 m 200 do 10 cm-1 6,0·1012 do 3,0·1011 Hz

NAJČEŠĆE KORIŠĆENA OBLAST

2,5 do 15m 4000 do 670 cm-1 1,2·1014 do 2,0·1014 Hz
OBLAST OTISAKA PRSTIJU ZA HEMIJSKA JEDINJENJA
• Apsorpcija IC zračenja od strane molekula je
kvantirana i molekul može da apsorbuje samo
one talasne dužine koje odgovaraju vibracionim
energijama tog molekula.

• Vibracione frekvencije su karakteristične za

određene funkcionalne grupe. Ove
karakteristične vibracije se koriste za
identifikaciju materijala i za određivanje strukture
nepoznatog jedinjenja.
 Apsorpcija zračenja

Io I

(b) Energetski dijagram

 I 
A   log T   log  
 Io 
 TIPOVI VIBRACIJA ATOMA U MOLEKULU

ISTEŽUĆE (VALENTNE) SAVIJAJUĆE (DEFORMACIONE)

+ +

ljuljajuće
- mašuće
simetrične (klanjajuće)

+ -

makazaste uvijajuće
asimetrične
simetrične asimetrične makazaste

uvijajuće
ljuljajuće mašuće
 ~ 1
 cm 1 
cm
~
E  h  hc

Do apsorpcije IC zračenja dolazi samo ukoliko se dipolni moment menja

usled sopstvenog vibracionog ili rotacionog kretanja molekula.

Kada je vibracija polarne hemijske veze ili rotacija asimetričnog molekula ista
sa frekvencijom promenljivog električnog polja EM zračenja dolazi do prenosa
energije, tj. do apsorpcije zračenja.

Homonuklearni molekuli poput N2, O2 ili Cl2 sa nepolarnim vezama ne

apsorbuju (“transparentni su”) u IC oblasti.
 E to t  E r o t  E vib  E el
za
~  1 0 0 0 c m 1 ~
 E  h c   0 .1 2 5 e V
Eel ~ 3 - 4 eV
Erot ~ 0,01 eV (100 cm-1)

• Rotacioni prelazi: spektri gasova- diskretne, jasno definisane linije (fina

rotaciona struktura); tečnosti i čvrsti uzorci proširenje linija usled
intramolekularnih sudara i interakcija

• Vibraciono-rotacioni prelazi: spektri gasova - serije bliskih linija

(više rotacionih stanja za svako vibraciono);
tečnosti i čvrsti uzorci- trake
Transparencija, %

Talasni broj

Vibraciono-rotacioni spektar CO
 Shema FT-IC spektrofotometra

S(x)

I-izvor; O1-pokretno ogledalo; O2-nepokretno ogledalo; P-delitelj snopa zračenja

Zračenje iz izvora se usmerava na delitelj snopa koji polovinu zračenja reflektuje
u pravcu pokretnog ogledala, a drugu propušta na nepokretno ogledalo. Posle refleksije
na ogledalima, zraci se vraćaju na delitelj snopa gde dolazi do njihove interferencije
posle čega prolaze kroz uzorak i padaju na detektor.
Signal detektora, S(x), se zove interferogram i predstavlja funkciju pomeraja (x) ogledala
O2, koji se Furijeovom transformacijom prevodi u IC spektar.
• Prednosti FT-IC spektrometara:

1. Znatno povećan odnos signal/šum

2. Veći svetlosni fluks
3. Povećana osetljivost
4. Visoka tačnost i preciznost određivanja talasnih
dužina
5. Visoka moć razlaganja
6. Znatno povećana brzina snimanja spektra
7. Olakšane operacije sa spektrima (čuvanje, sabiranje i

oduzimanje spektara, automatsko konsultovanje

biblioteke spektara) i samim tim otvorene nove
mogućnosti korišćenja IC spektara
Infracrveni spektar: predstavlja odnos intenziteta svetlosti propuštene
kroz uzorak i kroz praznu ćeliju (ili referenti uzorak) u funkciji frekvencije

Ordinata: TRANSPARENCIJA (% ) ILI APSORBANCIJA A = log (1/T)

Apcisa: TALASNA DUŽINA ILI TALASNI BROJ (često se zove skala frekvencija)

Talasna dužina, m
Transparencija, %

Talasni broj, cm-1

IC spektar tankog filma polistirena; Skala apcise se menja na 2000 cm-1

FTIC spektar polistirenskog filma
(rezultat oduzimanja
spektra 1 od spektra 2)
Poboljšanje odnosa
signal/šum sa većim
brojem akumulacija:
• IC spektroskopija je nedestruktivna
metoda i relativno lako se mogu dobiti
spektri uzoraka u sva tri agregatna stanja:
gasnom, tečnom i čvrstom.
Gasna ćelija

Usled slabe apsorpcije gasova

poželjan duži optički put
Gasna ćelija
Montirajuća ćelija za tečne uzorke
Čiste tečnosti se snimaju kapilarno.

Za rastvore se mora izabrati pogodna

debljina ćelije u zavisnosti od koncentracije.

• Ćelije konstantne –kalibrisane debljine.

• Ćelije promenljive debljine (0,01 – 10 mm).

Najčešće korišćeni rastvarači: CCl4,

CS2 i CHCl3.
Koriste se i benzen, dihlormetan,
cikloheksan.
Za polarna jedinjenja dimetilsulfoksid.

Neophodno sušenje, nekad i prečišćavanje.

Montirajuća ćelija za tečne uzorke
 Analiza čvrstih uzoraka
1. Tehnika KBr pastile (KBr ne pokazuje apsorpciju
između 4000 i 350 cm-1)
Oko 1,5 mg uzorka
se pomeša sa 150
mg KBr praha,
spraši u avanu,
prenese u kalup i
presuje.
Može usled visokog
pritiska doći do
modifikacije uzorka
Kalup za pravljenje KBr pastila

Hidraulična presa
2. Tehnika suspenzije
 Kvalitativna analiza
Veza Vrsta jedinjenja Opseg frekvencija, cm-1 Intenzitet
C-H Alkani 2850-2970 jak
C-H Alkeni H 3010-3095 srednji
C C
675-995 jak

C-H Alkini C C H 3300 jak

C-H Aromatični prstenovi 3010-3100 srednji

690-900 jak
O-H Monomerni alkoholi, fenoli 3590-3650 promenljiv
Vodonična veza kod alkohola, fenoli 3200-3600 promenljiv, ponekad široka
Monomerne karboksilne kiseline 3500-3650 srednji
Vodonična veza kod karboksilnih kiselina 2500-2700 široka traka
N-H Amini, amidi 3300-3500 srednji
C=C Alkeni 1610-1680 promenljiv
C=C Aromatični prstenovi 1500-1600 promenljiv
C C Alkini 2100-2260 promenljiv
C-N Amini, amidi 1180-1360 jak
C N Nitrili 2210-2280 jak
C-O Alkoholi, etri,karboksilne kiseline, estri 1050-1300 jak
C=O Aldehidi, ketoni, karboksilne kiseline, estri 1690-1760 jak
NO2 Nitro jedinjenja 1500-1570 jak
1300-1370
Kvalitativna analiza

Nepoznat uzorak

US000022 Benzen
Oblast “otiska prstiju” – prednosti i
ograničenja:
Kvantitativna analiza

Beer-ov zakon:

A=a·b·c

a molarni apsorpcioni
koeficijent
b debljina sloja
c koncentracija

A apsorbancija

Potrebne kalibracione
krive
• IC spektroskopija se koristi za kvalitativnu i
kvantitativnu analizu svih molekulskih vrsta.

• Srednja IC oblast (engl. mid IR) se najviše

koristi, najčešće za kvalitativnu analizu.

• Bliska IC oblast (engl. near IR) se koristi pre

svega za kvantitativna merenja.

• Daleka IC oblast (engl. far IR) se koristi za

određivanje strukture neorganskih i metalo-
organskih jedinjenja.
Analiza smeša droga
Kombinacija FT-IC spektrometra sa
mikroskopom – IC oslikavanje
 Proizvođač: Perkin Elmer

Optički mikroskop (levo) povezan sa FTIC spektrofotometrom (sredina) i računarom (desno)

Savremeni trendovi usmereni ka razvoju
kompaktnih i laganih instrumenata
 Refleksione tehnike
• Koriste se kada uzorak veoma apsorbuje
ili se radi o premazu na površini koja nije
prozračna za IC oblast

1. Ogledalska refleksija
2. Difuzna refleksija
3. Ometena totalna refleksija
 Ogledalska refleksija
• Kada sama površina na kojoj je premaz (sloj boje
ili slično) ima osobine ogledala, te može IC snop
svetlosti vratiti u instrument
 Difuzna refleksija
• Uzorci nepravilne i hrapave površine, polikristalni
materijali (prah, tkanine, polimerne pene); male
količine tečnosti nanete na KBr ili KCl (5-10%).

1. Ulazno i 2. izlazno elipsoidno ogledalo,

3. sud sa uzorkom
 Ometena totalna refleksija
[Attenuated total reflection (ATR)]

• Zasniva se totalnoj refleksiji svetlosti na međuprovršini-graničnoj

površini između dve sredine različitih indeksa prelamanja.

• Uzorci koji jako apsorbuju: emulzije, vodeni rastvori, boje, vlakna

tkanina, biološki uzorci - krv
kristal

bakterije organski molekuli

kristal
• ATR je tehnika koja se često koristi jer je brza, nedestruktivna i nije potrebna nikakva priprema uzorka.
Kao optički element koristi se ATR kristal velikog indeksa prelamanja: KRS-5 (n = 2,4), Ge (n = 4), ZnSe
(n = 2,4), dijamant (n = 2,4), gde je n indeks prelamanja.

• Princip metode se zasniva na sledećem: Kada je upadni ugao zračenja veći od graničnog (kritičnog) ugla
za datu sredinu dolazi do potpunog unutrašnjeg odbijanja ili totalne unutrašnje refleksije na graničnoj
površini između dve sredine različitih indeksa prelamanja. Totalna unutrašnja refleksija se javlja samo
kada snop zračenja nailazi iz optički gušće u optički ređu sredinu. Prilikom totalne unutrašnje refleksije
zrak prodire u optički ređu sredinu pre nego što dođe do refleksije. Dubina prodiranja je obično manja od
2 m. U spektralnoj oblasti u kojoj optički ređi materijal apsorbuje zračenje doći će do smanjenja
intenziteta zračenja, dok će u oblastima u kojima nema karakteristične apsorpcije doći do refleksije
zračenja. Na taj način dolazi do ometanja (atenuacije) upadnog snopa zračenja.
Izgled ATR dodatka
Uspešna primena IC spektroskopije za analizu supstanci
koje se često javljaju kao dokazni materijal:
- krv
- veštačka vlakna
- motorna ulja
- lubrikanti
- boje
- mastila
- vlasi ljudske kose
- nelegalne droge.
 Primena bliske IC spektroskopije za
određivanje starosti krvi
• Na osnovu starosti fleka od krvi moguće je odrediti vreme kada je počinjen zločin.
Promene u IC spektrima posledica su hemijskih promena uzorka. Kako krv stari,
dezoksihemogloboni se konvertuje u metahemoglobin, što je evidentno i u promeni
boji od crvene ka braon. Posle jedan sat, javlja se nova traka između
460 and 1860 nm i raste sa starenjem krvi.
Ova traka izazvana formiranjem metahemoglobina
i vezivanja vode kontinuirano raste u periodu
od 21 dan i može biti korišćena za određivanje
starosti krvi.

M. Lamontagne et al., Spectroscopy 24 (2) 2009.

 Analiza otisaka prsta
• Svaki otisak prsta je
karakterističan samo za jednu
osobu, ali se oni mogu podeliti u
dve grupe:
1. otisci znoja
2. otisci nastali usled dodirivanja
različitih delova tela, kao što su
vrat ili lice- otisci komponenata
lojnih žlezdi.
IC spektar otiska prsta
1016 cm-1 asimetrična istežuća O-C-C, estar
• Obe grupe sadrže estre masnih 1248 cm-1 asimetrična istežuća C-C-O, estar
1456 cm-1 CH2 makazasta
kiselina, proteine iz delića kože i
1552 cm-1 NH savijajuća kombinovana sa CH
soli karboksilnih kiselina, dok istežućom, protein amid II
materijal iz lojnih žlezda 1656 cm C=O istežuća, protein amid I
-1

1744 cm-1 C=O istežuća, saturirani estar

primarno sadrži estre. 2856 cm-1 metilen C-H istežuća
2920 cm-1 metil C-H istežuća
 Analiza mastila i tonera
Verifikacija autentičnosti dokumenata može uključivati i iskaz o tome kako je sporni dokument
napravljen (mikroskopsko određivanje) ali i utvrđivanje marke štampača ili kopir aparata
(zahteva hemijsku analizu).

mastila sa metil-ljubičastim mastila sa cijanin-lutecijom gel mastila sa cijanin-lutecijom

a-benzil alkohol
trake slabih l-luksol fast plavo
g-glicerol
s-stiren intenziteta b-Bisfenol A
e-etilen glikol

Određeni su položaj i intenziteti traka → snimljeni IC spektri mogu se podeliti u nekoliko

grupa koje se značajno razlikuju u broju i intenzitetu apsorpcionih traka. Unutar grupe uzorci
mogu imati slične ili iste spektre.
 Analiza motornih ulja
Identifikacija ulja je
kompleksna zbog procesa
raspadanja, koji se odvijaju usled
korišćenja vozila.

Ispitivane dve vrste ulja

Elf Sporty Super i Castrol GTX3
u dva različita automobila.

Maksimumi u spektra-
lnom intervalu od 800 cm-1 do
900 cm-1 odgovaraju Elf ulju i
potiču od ugljovodonične baze i
fragmenata ugljovodoničnih
lanaca iz aditiva.
FTIC spektri A. Elf Sporty Super i B. Castrol GTX3.

Maksimumi u spektralnom intervalu:

od 950 cm-1 do 1040 cm-1 za Elf i Castrol ulje odgovaraju Zn-dialkilditiofosfatu,
od 1020 cm-1 do 1150 cm-1 C-O istežućoj vibraciji i Ba-sulfatu,
od 1600 cm-1 do 1780 cm-1 odgovaraju bazama i fragmenatima ugljovodoničnih lanaca
iz aditiva i C=O istežućoj vibraciji iz različitih komponenata.
 Analiza nelegalnih droga

Identifikacija metamfetamina
poređenjem FTIC spektra
uzorka sa FTIC spektrima
referentnih jedinjenja
iz baze podataka
 Analiza boja za automobile primenom optičkog mikroskopa povezanog
sa FTIC spektrometrom

Optički mikrograf ljuspice boje zatopljene Optički mikrograf ljuspice boje u KBr-u,
u smoli, pripremljene za ATR merenja pripremljene za transmisiona merenja

FTIC spektri različitih bojenih slojeva

dobijeni ATR tehnikom FTIC spektri različitih bojenih slojeva
 Analiza boja za automobile primenom optičkog mikroskopa povezanog
sa FTIC spektrometrom

FTIC spektri spoljnih bojenih slojeva Poređenje FTIC spektar žute boje (dole)
automobila različitih proizvođača sa referentnim spektrima kalcita
i kadmijum žute (gore)
 FTIC ATR analiza ofarbanih i neofarbanih
dlaka kose
Statistička klasifikacija uzoraka

A-ofarbana i neofarbana kosa; B-

različiti proizvođači farbi za kosu; C-
dve farbe za kosu