Bài 10: ĐỊNH LƯỢNG ĐỒNG THỜI PARACETAMOL VÀ CAFEIN TRONG CHẾ

PHẨM BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO

1/ Cho biết tên cột sắc ký, kích thước, đường kính hạt pha tĩnh nhồi cột?
Cột sắc ký: cột pha đảo C18.
Kích thước pha tĩnh: 3,5 - 10 micromet hoặc 3 - 5 micromet.
Đường kính cột: 2 - 10mm, hoặc 1-4 mm. Số liệu này trong sgk, không chắc rõ cái nào đúng.
Theo như mấy anh chị là kích thước cột 250mm x 4,6mm. Đường kính hạt là 5 micromet.
2/ Kiểu rửa giải của pha động trong bài thực tập thuộc loại đẳng dòng (isocratic) hay gradient?
Isocratic là đẳng dòng, là chỉ dùng 1 loại dung môi, không pha trộn được các loại dung môi ->
nồng độ / thành phần của các chất trong pha động không thay đổi.
Gradient là hệ thống bơm mà có thể tự pha trộn các loại dung môi tạo nên các hệ dung môi có
thành phần / tỉ lệ khác nhau.
Kiểu rửa giải pha động trong bài là kiểu isocratic.
3/ Chất lượng của dung môi sử dụng để triển khai HPLC thuộc loại? Sử dụng dung môi này để
chiết xuất được không? Ngược lại có thể sử dụng dung môi chiết xuất thông thường để chuẩn bị
pha động trong HPLC không? Tại sao?
Chất lượng dung môi sử dụng: Acid acetic băng, methanol đạt tiêu chuẩn phân tích. Methanol và
nước cất đạt tiêu chuẩn dùng cho sắc ký lỏng.
Acid acetic bang là acid acetic tinh khiết.
Chất lượng dung môi dùng trong HPLC rất tinh khiết, Ngoài ra trước khi sử dụng còn phải lọc,
và khử khí. Điều này cần thiết là vì HPLC hoạt động ở áp suất rất cao, do đó chỉ cần có tạp chất
nhỏ hoặc có bọt khí, cả hệ thống có thể sẽ bị hư, ảnh hưởng kết quả phân tích và các hệ lụy khác.
Dung môi này có thể được sử dụng để chiết xuất.
Tuy nhiên không dùng dung môi chiết xuất thông thường để chuẩn bị pha động trong HPLC vì
dung môi chiết xuất thông thường có độ tinh khiết không đủ cao.
4/ Nước cất sử dụng trong HPLC có thể được sử dụng trong bao lâu sau khi cất? \
Nước cất xong phải sử dụng liền, không để lâu do ảnh hưởng của tạp chất, vi sinh vật,…
5/ Đầu dò trong máy thuộc loại đầu dò nào? Ưu và nhược điểm của đầu dò này?
Đầu dò trong bài là đầu dò phát hiện đa sóng PDA - Photodiode Array Dectector.
- Ưu điểm: có thể thử các bước sóng từ 190 - 800 nm, độ tin cậy cao, không hủy hoại mẫu thử,
tương đối nhạy và đặc hiệu, rất thuận tiện cho nghiên cứu., sử dụng được trong trường hợp triển
khai dung môi theo gradient.
- Nhược điểm: giá thành đắt.
5/ Cần chú ý thông số sắc ký nào khi định lượng đồng thời hai chất trở lên bằng HPLC?
Cần chú ý gì đó không biết =))))
6/ Nguyên tắc:
Hỗn hợp paracetamol và cafein trong dược phẩm sau khi chiết có thể được tách và định lượng
bằng phương pháp HPLC với đầu dò dãy diod quang (photodiode array detector) do cấu trúc của
hai dược chất này có các nối đôi liên hợp và các nhóm mang màu.