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Sanger Sequencing 원리
Sanger Sequencing 원리
DNA 복제는 주형 DNA 에 상보적인 dNTP 가 결합하여 이루어지는데 이 염기서열 분석할 때 dNTP
대신에 ddNTP 가 결합하게되면 DNA 복제가 중단되는 원리를 이용하는것이다.
sanger sequncing 에서는 이러한 원리를 이용하여 4 개 각각의 튜브에 ddGTP, ddATP, ddCTP, ddTTP
와 dNTP 들을 각 튜브에 다 넣어주고 주형가닥을 넣으면 조각의 길이들이 다른 여러 조각들이
생성되게 되는데 이것을 전기영동에 각각 4 개의 튜브에서 만들어진 것을 흘려보내게 되면 길이가
짧은 순서대로 밑에서 부터 나타나게 되고 이를 통해 염기의 서열을 알 수 있게된다. 이러한
염기서열은 ddNTP(5’-3’)에 의한 염기서열이므로 상보적인 결합(3’-5’)을 통해 알고자 하는
염기서열을 알 수 있다. 이러한 시퀀싱 방법은 적은 수의 표적을 빠르고 효율적인 측면이 있으나
많은 수의 타겟을 대상으로는 선호되지 않는 방법이다. 이러한 한계를 극복하기 위해 NGS 라는
방법이 고안되었으며 이는 sanger 보다 더 높은 감도와 같은 양의 DNA 로 더 많은 데이터를 얻을 수
있는 snager 의 한계점을 극복할 수 있는 방법이있다.