‫פעילות כיתתית – קינטיקה אנזימתית‬

‫שנה א' – ביוכימיה ‪ -‬ד"ר אלי מועלם‬

‫‪ .1‬נבדק קצב ריאקציה של האנזים עמילאז‪ .‬הנתונים הוצבו על גרף של ‪:Lineweaver-Burk‬‬

‫‪0.25-‬‬ ‫נקודת חיתוך עם ציר ‪X‬‬

‫‪0.1‬‬ ‫שיפוע ‪Lineweaver-Burk‬‬

‫‪ .1‬מה הוא קצב הריאקציה של האנזים בריכוז סובסטרט של ‪ ?2mM‬פרט את חישוביך‪.‬‬

‫‪ .2‬מהי נקודת החיתוך עם ציר ‪ ?Y‬פרט את חישוביך‪.‬‬
‫(הערה‪ :‬ריכוז סובסטרט נמדד ביחידות ‪ .mM‬קצב הווצרות תוצר נבדק ביחידות ‪)µg/ml/min‬‬

‫‪ .2‬נבדקו קצבי ריאקציה (‪ ) V‬של האנזים פירובט‪-‬קינאז ללא מעכב ובנוכחות מעכב בריכוזי סובסטרט שונים‪.‬‬
‫להלן התוצאות‪:‬‬

‫‪ V‬בנוכחות מעכב ((‪nM/min‬‬ ‫‪ V‬ללא מעכב ((‪nM/min‬‬ ‫‪ S‬סובסטרט (‬

‫‪)nM‬‬
‫‪0.46‬‬ ‫‪0.75‬‬ ‫‪0.3‬‬
‫‪0.66‬‬ ‫‪1‬‬ ‫‪0.5‬‬
‫‪1‬‬ ‫‪1.33‬‬ ‫‪1‬‬
‫‪1.5‬‬ ‫‪1.7‬‬ ‫‪3‬‬

‫שרטט על גבי אותה מערכת צירים‪ ,‬על נייר מילימטרי או בתוכנת אקסל‪ ,‬עקומי ‪ Lineweaver-Burk‬לקצבי‬
‫הריאקציה ללא מעכב ובנוכחותו (זכור‪ ,‬לצורך שרטוט העקומות עליך לחשב את הערכים ההופכיים של הסובסטרט‬
‫וקצב הריאקציה)‪.‬‬
‫‪ .1‬מהם ערכי ה‪ Vmax -‬של האנזים בהעדר מעכב ובנוכחותו?‬
‫‪ .2‬מהם ערכי ה‪ Km -‬של האנזים בהעדר מעכב ובנוכחותו?‬
‫‪ .3‬על סמך הפרמטרים הקינטיים שקיבלת‪ ,‬האם המעכב הוא תחרותי או לא‪-‬תחרותי? נמק‪.‬‬
‫‪ .4‬שרטט כיצד יראו עקומי קצבי הריאקציה בנוכחות מעכב ובלעדיו בעקום ‪( Michaelis-Menten‬סכימתי‬
‫בלבד)‪.‬‬

‫שאלה ‪ 3‬בעמוד הבא‪:‬‬

‫‪1‬‬
‫‪ .3‬נבדקו קצבי ריאקציה של האנזים הקסוקינאז‪ .‬בטור ‪ A‬נבדק קצב הריאקציה בריכוז ‪ X‬של אנזים‪ .‬בטור ב'‬
‫נבדק קצב הריאקציה במחצית הריכוז של אנזים (‪ .)X*0.5‬שרטט על גבי אותה מערכת צירים עקומי‬
‫‪ Michaelis-Menten‬ומצא את הפרמטרים הקינטיים של האנזים‪ .‬מה מסקנתך?‬

‫‪B‬‬ ‫‪A‬‬ ‫‪ ‬‬

‫קצב ריאקציה (‬ ‫קצב ריאקציה (‬ ‫ריכוז סובסטרט‬
‫‪)ng/ml/min‬‬ ‫‪)ng/ml/min‬‬ ‫‪S‬‬
‫בריכוז ‪ X*0.5‬של אנזים‬ ‫בריכוז ‪ X‬של אנזים‬ ‫(‪)nM‬‬
‫‪3.5‬‬ ‫‪7‬‬ ‫‪2‬‬
‫‪8.5‬‬ ‫‪17‬‬ ‫‪5‬‬
‫‪14.75‬‬ ‫‪29‬‬ ‫‪10‬‬
‫‪22‬‬ ‫‪44‬‬ ‫‪20‬‬
‫‪33.5‬‬ ‫‪67‬‬ ‫‪50‬‬
‫‪40‬‬ ‫‪80‬‬ ‫‪100‬‬
‫‪44.5‬‬ ‫‪89‬‬ ‫‪200‬‬
‫‪47.5‬‬ ‫‪95‬‬ ‫‪500‬‬
‫‪49‬‬ ‫‪98‬‬ ‫‪1000‬‬

‫א‪ .‬הערך ‪( _______________ Vmax‬משתנה ‪ /‬אינו משתנה) כתלות בריכוז האנזים‬

‫ב‪ .‬ככל שריכוז האנזים גבוה יותר‪ ,‬ערך ה‪ Vmax-‬המתקבל __________________ (גבוה ‪ /‬נמוך) יותר‪.‬‬
‫ג‪ .‬ערך ה‪( ___________ Km-‬תלוי ‪ /‬אינו תלוי) בריכוז האנזים והוא ___________ (משתנה ‪ /‬אינו משתנה)‬

‫בהצלחה‬

‫‪2‬‬