ÔN THI CUỐI KỲ VI SINH VẬT HỌC

CHƯƠNG 7
Câu 1: Prion là gì? Đặc điểm của prion?
Prion (PrPC / PrPSc) - protein gấp khúc, không chứa axit nucleic - gây ra bệnh não
xốp có thể truyền nhiễm - bệnh thoái hóa thần kinh gây tử vong
- Thường gặp ở động vật:
• Ở cừu và dê
• Bệnh não xốp ở bò (BSE), hay còn gọi là bệnh bò điên
• Bệnh gầy mòn
• Ở người - Hội chứng Creutzfeldt-Jakob (CJS)
• Cực kỳ bền với các kỹ thuật tiệt trùng thông thường
Câu 2: Các yếu tố dinh dưỡng cần thiết cho sự sống của vi sinh vật là gì? Cho
biết Vai trò của từng yếu tố?
Chất dinh dưỡng:
• Các chất dinh dưỡng vô cơ - nguyên tử hoặc phân tử có chứa sự kết hợp của các
nguyên tử khác ngoài cacbon và hydro - kim loại và muối của chúng (magie sunfat,
nitrat sắt, natri photphat), khí (oxy, carbon dioxide) và nước
• Chất dinh dưỡng hữu cơ - chứa cacbon và hydro nguyên tử và thường là sản phẩm
của sinh vật
- metan (CH4), cacbohydrat, lipid, protein và nucleic axit
Các chất dinh dưỡng cần thiết:
●70% nước
●Protein
● 96% tế bào bao gồm 6 phần tử: carbon, hydro, ôxy, phốt pho, lưu huỳnh, nitơ
Nguồn dinh dưỡng thiết yếu:
Nguồn carbon:
• Dị dưỡng - phải thu được carbon trong dạng hữu cơ như protein, carbohydrate, lipid
và axit nucleic, được tạo ra bởi các sinh vật sống khác sinh vật
• Tự dưỡng - sinh vật sử dụng CO2, một khí vô cơ làm nguồn cacbon của nó - không
phụ thuộc dinh dưỡng vào các sinh vật sống khác
Nguồn nitơ:
• Bình chứa chính là khí nitơ (N2); 79% trái đất khí quyển là N2.
• Nitơ là một phần cấu trúc của protein, DNA, RNA & ATP - đây là nguồn N chính
cho sinh vật dị dưỡng.
• Một số vi khuẩn và tảo sử dụng chất dinh dưỡng N vô cơ (NO3,NO2 hoặc NH3).
• Một số vi khuẩn có thể cố định N2.
• Bất kể N đi vào tế bào như thế nào, nó phải được chuyển thành NH3, hình thức duy
nhất có thể được kết hợp với cacbon để tổng hợp axit amin, v.v.
Nguồn oxy:
• Thành phần chính của carbohydrate, lipid,axit nucleic và protein
• Đóng một vai trò quan trọng trong cấu trúc và chức năng enzym của tế bào
• Thành phần của muối vô cơ (sunfat, phốt phát, nitrat) và nước
• O2 chiếm 20% bầu khí quyển
• Cần thiết cho sự trao đổi chất của nhiều sinh vật
Nguồn hydro:
• Nguyên tố chính trong tất cả các hợp chất hữu cơ và một số chất vô cơ (nước, muối
và khí)
• Các chất khí được sản xuất và sử dụng bởi vi sinh vật.
• Vai trò của hydro:
- Duy trì độ pH. hình thành liên kết H giữa các phân tử
- Là nguồn cung cấp năng lượng tự do trong các phản ứng khử oxy hóa của quá trình
hô hấp
Phốt pho (Nguồn phốt phát):
• Nguồn vô cơ chính là photphat (PO4-3) có nguồn gốc từ axit photphoric (H3PO4)
tìm thấy trong đá và các mỏ khoáng sản đại dương.
• Thành phần chính của axit nucleic, cần thiết để di truyền học
• Phục vụ trong việc truyền năng lượng (ATP)
Nguồn lưu huỳnh:
• Phân bố rộng rãi trong môi trường, đá; trầm tích chứa sunfat, sunfua, hydro khí
sunfua và lưu huỳnh
• Thành phần thiết yếu của một số vitamin và axit amin: methionine và cysteine
• Đóng góp vào sự ổn định của protein bằng cách hình thành liên kết disulfua
Các chất dinh dưỡng khác quan trọng đối với vi sinh vật - Sự trao đổi chất:
• Kali - cần thiết để tổng hợp protein và chức năng màng
• Natri - quan trọng đối với một số loại vận chuyển tế bào
• Canxi - chất ổn định thành tế bào và nội bào tử
• Magie - thành phần của chất diệp lục; chất ổn định màng và ribosome
• Sắt - thành phần của protein trong quá trình hô hấp của tế bào
• Kẽm - đồng, niken, mangan, v.v.
Câu 3: Vẽ dường cong tăng trưởng của vi sinh vật khi nuôi cấy trong môi trường
không bổ sung thêm dinh dưỡng và giải thích?

Các giai đoạn đường cong tăng trưởng bình thường

1. Giai đoạn thích nghi – giai đoạn điều chỉnh “bằng phẳng” , lớn dần, tăng
trưởng ít
2. Giai đoạn tăng trưởng theo cấp số nhân – giai đoạn tăng trưởng tối đa sẽ tiếp
tục miễn là tế bào có đủ chất dinh dưỡng và môi trường thuận lợi
3. Giai đoạn tĩnh – tốc độ phát triển của tế bào bằng tốc độ của tế bào tử vong do
cạn kiệt chất dinh dưỡng và Oxi, sự bài tiết của axit hữu cơ và chất ô nhiễm
4. Giai đoạn chết – khi các yếu tố hạn chế tăng cường, tế bào chết theo cấp số
nhân trong chất thải của chúng
CHƯƠNG 8
Câu 1: Hãy chia nhóm vi sinh vật trên dựa trên các nhu cầu về nguồn cacbon,
nguồn năng lượng, nguồn oxy, nguồn CO2, giá trị pH, nhiệt độ môi trường. Giải
thích.
  Nhiệt độ môi trường:
3 nhiệt độ hồng y
• Nhiệt độ tối thiểu – nhiệt độ thấp nhất cho phép vi sinh vật phát triển và sự trao đổi
chất
• Nhiệt độ tối đa – nhiệt độ cao nhất cho phép vi sinh vật phát triển và sự trao đổi chất
• Nhiệt độ tối ưu – phát huy nhanh nhất tốc độ tăng trưởng và trao đổi chất
 Nguồn năng lượng:
Hóa năng: thu được năng lượng từ hóa chất
Quang năng: thu được năng lượng thông qua quang hợp (ánh sáng)
 Nguồn Cacbon:
Dị dưỡng: nhóm không tổng hợp được chất hữu cơ, sống nhờ vào vật
Tự dưỡng: vật khác nhau tự tổng hợp được chất hữu cơ
 Nguồn Oxygen:
Khi oxy được sử dụng, nó được biến đổi thành một số sản phẩm độc hại:
– oxy nhóm đơn (1O2), ion superoxit (O2), peroxit (H2O2), và các gốc hydroxyl
(OH-)
• Hầu hết các tế bào đã phát triển các enzym để trung hòa các hóa chất này:
– superoxide dismutase, catalase, peroxidase
Hạng mục yêu cầu oxy:
• Hiếu khí (Aerobe): sử dụng oxy và có thể giải độc nó
• Hiếu khí bắt buộc (Obligate aerobe): không thể phát triển nếu thiếu oxy
• Vi hiếu khí (Microaerophilic): chỉ cần một lượng nhỏ oxy (thường là 2–10% O2)
• Hiếu khí không bắt buộc: có thể sống trong môi trường hiếu khí và kỵ khí
• Kỵ khí: không thể sử dụng oxi
• Kỵ khí bắt buộc: Không thể sống trong môi trường có oxi
• Kỵ khí dung nạp: không sử dụng oxi nhưng vẫn có thể tồn tại và phát triển trong môi
trường có oxi
• Kỵ khí tùy tiện: có hoặc không có oxi cũng được
 Nguồn CO2:
Tất cả các vi khuẩn yêu cầu một số carbon dioxide trong trao đổi chất của chúng.
• Capnophile – phát triển tốt nhất ở CO 2 cao hơn căng thẳng hơn bình thường trong
khí quyển (5% – 10% CO2 và ~15% O2)
 Nguồn pH:
Phần lớn vi sinh vật phát triển ở pH giữa 6 và 8 (Bạch cầu trung tính)
• Bắt buộc ưa axit – phát triển ở cực độ axit pH
• Alkaliphiles – phát triển ở độ pH cực kiềm
Câu 2: Vẽ dường cong tăng trưởng của vi sinh vật khi nuôi cấy trong môi trường
có bổ sung thêm dinh dưỡng liên tục và giải thích?

- "nuôi cấy liên tục" là một hệ thống mở, trong đó môi trường tươi liên tục được
thêm vào môi trường nuôi cấy với tốc độ không đổi, và môi trường cũ được
loại bỏ với tốc độ tương tự. Phương pháp này được thực hiện trong một thiết bị
gọi là chemostat.
- Thông thường, nồng độ của các tế bào sẽ đạt đến mức cân bằng không đổi
miễn là nguồn cung cấp chất dinh dưỡng được duy trì
CHƯƠNG 11
Câu 1: Nêu vai trò của từng thành phần trong môi trường trên.
- Glucose: cung cấp nguồn carbon, hidro.
- Pepton: là sản phẩm pr được phân hủy chưa hoàn toàn , cung cấp đạm (nito) ,
carbon, lưu huỳnh, oxi:
- NaCl: cung cấp Na nguyên tố khoáng
- KH2PO4: cung cấp K,P.
- MgSO4: cung cấp Mg, S.
- VitaminB2: cung cấp
Câu 2: Giả sử thời gian thích nghi là 2 giờ, hãy cho biết sau 10 giờ nuôi cấy,
chủng vi khuẩn đã trải qua bao nhiêu thế hệ? Số lượng tế bào vi khuẩn trong
bình nuôi cây sau 10 giờ là bao nhiêu?
Công thức tính “quần thể vsv theo thời gian”
Nf = (Ni).2n=(Ni).2t/g
Nf: mật độ vsv
Ni: số vsv ở thời điểm đầu
n: số lần nhân lên
t: tổng thời gian nuôi
g: thời gian thế hệ
Câu 3: So sánh hiếu khí và quá trình lên men? Mô tả quy trình, giống và khác
nhau ở chỗ nào?
Hô hấp hiếu khí Quá trình lên men
Giống nhau + Đều dùng nguyên liệu là chất hữu cơ.
+ Đều tạo ra năng lượng ATP cung cấp cho các hoạt
động sống.
+ Đều là các phản ứng oxi hóa khử.
+ Đều có quá trình đường phân.
Khác nhau + Diễn ra ở môi trường có + Diễn ra ở môi trường ko
oxi phân tử có oxi
+ Chất nhận e- là phân tử + Là quá trình chuyển hóa
oxy phân tử hữu cơ
+ Chuỗi chuyền e- diễn ra + Chất cho và nhận e- đều
ở màng sinh hoặc mà là phân tử hữu cơ
trong ti thể + Chuỗi chuyền e- diễn ra
+ Sản phẩm: năng lượng, ở tế bào chất.
CO2, H2O + Sản phẩm: năng lượng,
+ Hiệu quả năng lượng sản phẩm lên men
 40% (NL thu được so với + Hiệu quả năng lượng 2
NL trong phân tử hữu cơ)
+ Là quá trình ôxi hóa
hoàn toàn phân tử hữu cơ

Câu 4: Vận dụng các phương pháp nào để kiểm soát vi sinh vật?
 Phương pháp lý học:
 Nhiệt khô:
+ Đối với dụng cụ kim loại, đôi khi đối với thủy tinh phương pháp thường
dùng là đốt trực tiếp trên ngọn lửa hoặc nhúng cồn đốt.
+ Đối với dụng cụ thủy tinh gói giấy và sấy ở nhiệt độ 160 oC trong 1-2 giờ
hoặc trong 180oC trong 30 phút. Dụng cụ đưa vào sấy phải chịu được nhiệt độ
cao, không buộc dây nhựa hoặc thun.
 Nhiệt ẩm:
+ Phương pháp luộc: cho vật khử vào nước sôi, nhiệt sẽ thấm nhanh vào mẫu
vật làm cho protein đông kết, dẫn đến chết vi sinh vật. Tuy nhiên, chỉ diệt tế
bào sinh dưỡng, bào tử vẫn còn.
+ Phương pháp hơi nước bão hòa áp suất cao: dùng autoclave. Nhiệt độ và thời
gian hấp tùy thuộc vào loại nguyên liệu cần hấp. Thường dùng nhất ở nhiệt độ
121oC trong thời gian 15-30 phút.

 Diệt trùng bức xạ(tia âm cực, tia tử ngoại):

+ Tia tử ngoại (UV): chỉ sát trùng bề mặt, không xuyên thấu vào mẫu vật.
+ Tia âm cực: dùng trong diệt trung dụng cụ giải phẩu, thực phẩm. Vật khử
trùng phải bao gói kín. Sóng ngắn khi tác động với cường độ và thời gian thích
hợp có thể phá vỡ tế bào vsv, làm chết các tế bào sống
 Diệt trùng bằng cách lọc:
+ Dụng cụ lọc thường là những màng xốp bằng sứ, aminate, cellulose… có
kích thước lỗ từ 0.2 – 0.45µm, thường dùng để lọc những vật phẩm lỏng không
khử trung bằng nhiệt được.
- Đối với khử trùng không khí thì thiết bị khử trùng là một máy lọc khí có bị
màng lọc hay hấp thụ vi khuẩn.
 Phương pháp Tyndall: đun cách thủy nhiều lần ở nhiệt độ 70-80oC, mỗi lần
30-60 phút và liên tiếp trong ba ngày liền.
 Phương pháp Pasteur: chỉ diệt vi khuẩn gây bệnh, không diệt bào tử và vi
khuẩn hoại sinh. Phương pháp này không diệt hoàn toàn mầm bệnh mà chỉ
chọn một vài vsv đối kháng mạnh nhất. Vì vậy, thường dùng nhiệt độ 70-75 0 C,
trong thời gian 10-15 phút.
 Phương pháp hóa học:
- Chất sát khuẩn ngoài da: Xà phòng,cồn...
- Chất diệt khuẩn và tẩy uế: Phenol, hợp chất Clor,...
 Câu 5: Các loại vi sinh vật:
Vi khuẩn Vi khuẩn Cầu khuẩn Nấm men Nấm mốc
Gram dương Gram âm

Bacillus Samonella Staphylococcus Sacharomyces Aspergillus niger

subtilis typhi aureus cerevisiae
Hiếu khí
Trực khuẩn Trực khuẩn Gram dương Hình cầu hay
hình trứng
Hiếu khí Kị khí tùy nghi Hiếu khí tùy nghi
không bắt Hiếu khí bắt buộc
Gây bệnh Ngộ độc TP
buộc hoặc kị khí
thương hàn
không bắt buộc
Men bia
Clostridium E. Coli Shigella dysenteriae Đuôi myces Fusarium
botulium
Trực khuẩn Trực khuẩn Hiếu khí
Trực khuẩn
Hiếu khí hay Kị khí
Kị khí kị khí không
Bệnh lỵ trực khuẩn
bắt buộc
Uốn ván
Tiêu chảy
Lactobacillus Francisella Penicillium
acidophilus Trực khuẩn Hiếu khí
hay cầu khuẩn
Trực khuẩn
Hiếu khí
Kị khí tùy
nghi Bệnh sốt rét
thỏ
Lợi khuẩn
Vibrio Trichoderma
Phẩy khuẩn Hiếu khí
Kị khí Phân vi sinh
Ngộ độc
- Vi sinh vật ưa lạnh(psychrophile): Sinh trưởng ở nhiệt độ 0oC-300C .
Nhiệt độ thích hợp 20oC
Nhóm VSV này sống ở hồ sâu, đáy biển, suối nước lạnh, vùng địa cực, hoặc trong
phòng lạnh bảo quản thực phẩm.
- Vi sinh vật ưa ấm(Mesophile): Sinh trưởng ở nhiệt độ 20oC-40oC
Nhiệt độ thích hợp 37oC
Chiếm đại đa số các VSV, nhóm này chủ yếu sống hoại sinh và những VSV ký sinh
gây bệnh cho người, động vật.
- Vi sinh vật ưa nhiệt(thermophile): Sinh trưởng ở nhiệt độ 35oC-80oC
Nhiệt độ thích hợp 50oC-60oC

CHƯƠNG 3

Câu 1: Trình bày nguyên tắc 6 chữ I trong kỹ thuật vi sinh:

Inoculation (cấy): đưa mẫu vào môi trường- dinh dưỡng thích hợp để phát triển, là
giai đoạn đầu tiên trong nuôi cấy, để xử lí và thử nghiệm với vi khuẩn, phân tích
những gì mẫu có thể chứa

Isolation (phân lập): tách một loài vi khuẩn khỏi một quần xã vi khuẩn ban đầu để
thu được loài vi khuẩn độc lập, đảm bảo các loài riêng biệt và đảm bảo là chúng
thuần- chỉ chứa loài vi khuẩn mà ta cần quan sát, thử nghiệm

Incubation (ủ): trong điều kiện cho phép tăng trưởng tối ưu, thường 1 giờ tới vài
ngày, thúc đẩy gia tăng số lượng vi khuẩn để cần thiết cho việc thực nghiệm
Inspection (Quan sát đại thể, vi thể): phân tích, khảo sát, kiểm tra, quan sát các vi
khuẩn và tế bào vi khuẩn dưới kính hiển vi, phân tích đặc điểm ban đầu
Information gathering (thu thập thông tin): nhận dạng thử nghiệm vi khuẩn với
quá trình phân tích đặc tính sinh hóa và enzyme, phản ứng miễn dịch, di truyền, để
cung cấp thông tin cụ thể của vi khuẩn từ đó nhận dạng hay kết luận
Identification (định danh): hỗ trợ xác định loài vi khuẩn có trong mẫu ban đầu (được
thực hiện bởi 1 quá trình

Câu 2: Các bạn hãy trình bày quy trình phân lập 1 chủng vi sinh vật từ nguồn
mẫu?

Bước 1: Lựa chọn nguồn phân lập

Bước 2: Xử lý mẫu: pha loãng mẫu để làm giảm hàm lượng VSV
Để tách rời khuẩn lạc VSV.

Pha loãng dạng lỏng: Lấy 10 ống nghiệm chứa 9ml NaCl 0,9%
vào từng ống nghiệm đậy nắp cho vào nồi hấp tiệt trùng
trong 15p

Bước 3: Cấy phân lập

+ Cấy trải
+ Cấy đổ

Bước 4: Cấy truyền làm thuần: Từ dĩa môi trường đã phân lập
cấy truyền nhiều lần để thu chủng thuần

Cấy ria: đối với nấm nem, vi khuẩn

Cấy gõ: đối với nấm mốc

Bước 5: Kiểm tra độ thuần khiết

Bước 6: Cấy vào ống nghiệm để lưu trữ

Cấy ria: đối với nấm men, vi khuẩn

Cấy điểm: đối với nấm mốc