Kromoszóma

a genetikai informá
információ
ciót hordozó
hordozó DNS egysé
egység.

„ A ví
vírusok nukleinsava (ez lehet
DNS vagy RNS) nem ké képes önálló
lló
reprodukció
reprodukcióra. A má
másolá
solást a
fertő
fertőzött bakté
baktérium vagy
eukarió
eukarióta sejt vé
végzi.

1
 „ T2,T4 fág:

„ Terminá
Terminális redundancia
„ Cirkulá
Cirkuláris permutá
permutáció
ció

„ T3, T5,T7, fág:

„ Terminá
Terminális redundancia

Teljes genom:
genom:
12345
Terminá
Terminális redundancia:
12345612
Cirkulá
Cirkuláris permutá
permutáció
ció:
123456
456123
345612
Terminá
Terminális redundancia és cirkulá
cirkuláris
permutá
permutáció
ció:
12345612
34561234

„ A prokarió
prokarióták DNS-
DNS-e gyű
gyűrű alakú
alakú, s
nem kapcsoló
kapcsolódik hozzá
hozzá [szerkezeti]
fehé
fehérje.

2
„ Az eukarió
eukarióták DNS-
DNS-éhez fehé
fehérjé
rjék -
hisztonok is kapcsoló
kapcsolódnak.

3
„ Gélelektroforé
lelektroforézis
„ Kromoszó
Kromoszóma polimorfizmus

„ Az emberek testi sejtjeiben 23 pá

pár
kromoszó
kromoszóma van, minden pá párban az
egyik apai, a má
másik anyai. „ Kariotí
Kariotípus

„ Az ivarsejtek 23 pá
párosí
rosítatlan
kromoszó
kromoszómát tartalmaznak.

Heterokromatin (sötét),
eukromatin (világos)(gének)

4
 „ Metacentrikus
„ Submetacentrikus
„ Akrocentrikus
„ G sá
sávok-
vok- Giemsa
„ Telocentrikus
„ Q sá
sá vok - quinacrin
„ R sá
sávok - reverz
„ Rövid kar-
kar-p
„ Hosszú
Hosszú kar-
kar-q

„ 9q34-
9q34-pl. 9. kromoszó
kromoszóma
hosszú
hosszú karjá
karjának
3.ré
3.régió
gióján a 4.sá
4.sáv

5
 A metafázisos kromoszóma
kialakulása
DNS
+hiszton fehé
fehérjé
rjék
+nem hiszton fehé
fehérjé
rjék

6
 A H1 hiszton
szerepe
146 védett nukleotid nukleoszómánként.

166 védett nukleotid nukleoszómánként,

ha a H1 hiszton jelen van.

H4 hiszton
szekvenciája
Nukleoszómás hisztonok (102-135 aa):
H2A
H2B
H3
H4

H1 (~220aa)

A borsó és tehén H4 hisztonjának

szekvenciája két aminósavba tér csak el.
K = lizin (+)

nem-hiszton fehérjék

7
Nukleoszóma mentes helyek
érzékenyek a DNS bontó
enzimekre

A human genom ~ 2,3 cm ebben az állapotában.

8
 A telomer szerkezete

„ Stabilitá
Stabilitás
„ Telomer hossza

„Mini-
Mini-kromoszó
kromoszómák „ B kromoszó
kromoszómák
Csirke:39-
Csirke:39-6 makro-
makro-kromoszó
kromoszóma Növények , gombá
gombák, rovarok,
-33mini-
33mini-kromoszó
kromoszóma Csö
Csökkent életké
letképessé
pesség
rövid, gé
génekben gazdag
Eredet:
A kromoszó
kromoszómákbó
kból
(intraspecifikus)
intraspecifikus)
Idegen eredet
(fajok kö
közötti pá
párosodá
rosodás)

9
„ Nasonia vitripennis X N. giraulti

„ rokon fajok, kü
különbö
nböző morfoló
morfológiai és
viselkedé
viselkedésbeli mintá
mintázat

„ Új keletkezé
keletkezésű B kromoszó
kromoszóma kimutatá
kimutatása
„ N. giraulti eredetű
eredetű
„ Centrikus fragmentek fennmaradtak, s
tová
továbbadó
bbadódtak

„ (Evolution,
Evolution, 2001, 55:5. ,1069-
,1069-1073)

10
Kromoszóma vizsgálatok Kromoszó
Kromoszómák szá
száma

Pulzáló gélelektroforézis
Sávtechniká
vtechnikák

Aneuploidia
N+1
N-1

1
 Turner - XO

Klinefelter szindróma
47 XXY
férfias, nyúlánk,
de nőies jegyek,
sterilitás
csökkent értelmi képesség

Down-kór 21. triszómia

13-
13-triszó
triszómia: Patau szindró
szindróma
hexadaktylia,
hexadaktylia, farkastorok, nyú
nyúlajak
testi és szellemi visszamaradottsá
visszamaradottság
túlélés kb. 3 hó
hónap

18-
18-triszó
triszómia:Edwards szindró
szindróma
testi és szellemi visszamaradottsá
visszamaradottság
túlélés kb. 1é
1év

2
Kromoszó
Kromoszóma mutá
mutáció
ció

X kromoszó
kromoszóma

Az egyik X, korai embrioná fejlődés

embrionális fejlő
sorá
során génikusan inaktivá
inaktiválódik
(gé
(géndó
ndózis kompenzá
kompenzáció
ció)

Véletlen, kloná
klonális jelleg

3
XO (narancs) / Xo (fekete)

fekete

4
 Drosophila XX XY XXY XO
nősté
stény hí
hím nősté
stény hí
hím

Ember nő férfi férfi nő

Drosophila: X - autoszó
autoszóma aráarány
1:1 nősté
stény

Ember: Y kapcsol

Kender, komló, sóska, fehér mécsvirág

Y: női jelleg represszora

portok képződés
hím fertilitás

XXXY-hím

Euploidok Polyploid
Minden kromoszó
kromoszómából tö
több van
Monoploid
Autopolyploid (tö
(többszö
bbszörös monoploid készlet)
Minden
kromoszó
kromoszómából triploid (3n)
csak egy van (baná
(banán, mag né
nélkü
lküli dinnye, ezü
ezüst ká
kárász)
tetraploid (4n)
Diploid (nagyobb mé
méret, steril)
Minden
kromoszó
kromoszómából Allopolyploid (ké
(két vagy tö
többfé
bbféle kromoszó
kromoszóma –
kettő van
kettő
készlet) (mustá
(mustár, repce) (bú
(búza,6X)

5
 káposzta, karfiol, brokkoli,
Kelkáposzta, karalábé
kelbimbó

mustár repce

6
 Sejtciklus
Replikáció

kettős szálú DNS-molekula

szintézise
egy egyszálú molekulából,
az első szál mentén,
a bázispárosodási
szabályoknak megfelelően.

Meselson -Stahl Replikáció

• Szemikonzervatív
• Origó
• 1 vagy 2 irányú
• 5’—3’
• Rátája általában konstans
• Szemidiszkontinuus (okazaki fragment)
• Replikon (önálló replikációs egység)

1
 Replikáció típusai

Duplaszálú cirkuláris DNS

2
 • Humán kromoszóma: átlag 150X106 nt
• E. coli :4.7 x 106 nt
pár
• Replikáció sebessége: kb. 1000 nt/sec
• 50nt pár/sec
• 40 minutes.
• "proof-reading" function
• ↓
• 1 hibás nt /109 beépített nt.

• Szabályzása: pozitív – negatív

3
 Pozitív szabályzás
♥ORC (végig kötődik)
♥ „licensing factors” : CDC6, CDT1(ORC-hez kötődik)
MCM
replikáció elkezdődik: CDC6, CDT1 leválik

Negatív szabályzás
• Geminin nevű fehérje
• Akadályozza az MCM összeszerelését

4
5
 Pontosság-ellenőrzés

Termináció
A primerek eltávolítása után visszamaradt hézagot
ki kell tölteni

• Eukarióta kromoszóma végei:

GC gazdag, ismétlődő szekvencia

Pl. Tetrahymena: TTGGGG

AACCCC

6
 • Tetrahymena telomeráz:
• 159 nt RNS szakasz
• CAACCCCAA szekvenciát tartalmaz

Primer lehasítás a lineáris molekula végéről és a

Telomeráz nem pótolja

Tetrahymena telomeráinak kialakulása

Hibridizáció a telomeráz templát RNS-e és a telomera 3’

végének G - gazdag szakasza között

7
 MUTÁCIÓ • Mutagén anyagok
kémiai, vagy más tényező (pl. sugárzás),
• De Vries amely a sejt DNS-ében mutációt okoz[-
hat].

• mutáció - véletlenszerű változás a DNS

vagy a kromoszóma szerkezetében.

• Mutációs ráta

2.Testi-ivari sejt (gén-onkogén)

Típusai:
1.Spontán-indukált

1
3. Fenotípus szerint:
morfológiai

letális

feltételes (hőmérséklet)

biokémiai

2
• Auxotróf mutáció

• trpE- trpD- trpC- trpB- trpA rezisztencia

• ↓ ↓ ↓ ↓ ↓
• géntermék ‫٭‬
• →→→→→→→→ nincs géntermék
• ↓
• nincs triptofán

4.Pont-kromoszóma
5.Back mutáció
6.Szuppresszor mutáció

A genetikai kód

tulajdonképpen egy jelkulcs.

Három bázisból álló csoport
(kodon), mely egy adott
aminosavat kódol.

3
• univerzális (általános érvényű) • bázishármasok
• egy bázis egyidejűleg csak egy tripletthez
tartozik
pl. ATGTTT
• degenerált (egyetlen aminosavat több
bázishár-mas is kódolhat)
• pl. leucin: CUU, AUA, UUA
• lötyögés
pl. szerin: UCU, UCC, UCA,
UCG
• vesszőmentes leolvasás
pl. ATGCCCTTGAGC

„ Missense” mutáció
ATG GGA GCT CTA TTA ACC TAA
Met gly ala leu leu thr stop

↓
TTT
phe

4
 „Silent” mutáció „Frameshift” mutáció
Inszerció deléció

ATG GGA GCT CTA TTA ACC TAA

G
Met gly ala leu leu thr stop
↓
↓ ATG GGA GCT CTA TTA ACC TAA
Met gly ala leu leu thr stop
TTG ↓
GGG AGC TCT ATT AAC CTA ATT TGA
leu gly ser ser ile asn leu ile stop

• Báziscsere: tranzíció
„Nonsense” mutáció
purin purin
ATG GGA GCT CTA TTA ACC TAA pirimidin pirimidin
Met gly ala leu leu thr stop

↓ • transzverzió
TGA purin pirimidin
pirimidin purin
stop

5
• Forró pontok

E. coli CCAGG
↓
5-metil citozin→T

6
 Replikációs hiba vad mutáns
• CACACACACA
GTGTGTGTGT Hdh gén 10-35X 5’- CAG-3’ 36-121X
CACACACACA ↓
GTGTGTGTGT Huntington szindróma
↓ CACACACACA
CACACACACACA GTGTGTGTGT FRAXA 6-52X 5’- CGG-3 60-1000
↓
törékeny X

7
 Repair-hibajavítás Fotorepair
Replikáció gátlódik
• E. coli 1947
Fotoliáz kapcsolódik a
dimerhez

Látható fény

Eredeti állapot
visszaállítása

NER (nukleotid excízió)

• Javítás a hibás DNS szakasz
kivágásával
• (excíziós repair)

• BER
(bázis excízió)

C→U

1
 • Javítás O6-metil guanozin alkil
transzferázzal

Nem-komplementer
bázispárok kijavítása

Rekombinációs vagy replikáció utáni javítás

2
 Gátolt állapot
SOS repair
• A DNS-ben felismerhetetlenné vált egy
bázis→replikáció leáll, aktiválódik az SOS

• lexA represszor + SOS regulon (20 gén)

• umuC,umuD kapcsolódnak a DNS

polimerázhoz→ felfüggesztik annak
szigorúságát →véletlenszerűen beépül egy
nukleotid → replikáció megy tovább,
magas mutációs gyakoriság

3
 z Rekombiná
Rekombináció
ció: A szü
szülői gé
gének és
Rekombináció kromoszó
kromoszómák újrarendező
jrarendezőséből
létrejö
trejött új genetikai kombiná
kombináció
ciók.
z Részben a gégénkicseré
nkicserélődés, ré
részben a
kromoszó
kromoszómák vé véletlenszerű
letlenszerű
eloszlá
eloszlásának kökövetkezmé
vetkezménye

Rekombináció replikáció során

z Homoló
Homológ

z Helyspecifikus

z Nem-
Nem-homoló
homológ

Gamétaképzés

z Homoló
Homológ rekombiná
rekombináció
ció

1
Rekombiná
Rekombináció
ció menete

kettő
kettős szá
szálú törés

2
 z Rekombiná
Rekombináció
ció egyszá
egyszálú töréssel

Kettős rekombináció

E. coli

Rekombináció
iniciálása

3
 Kapcsolt gé
gének:

Azonos kromoszó
kromoszómapá
mapáron egymá
egymás
közelé
zelében elhelyezkedő
elhelyezkedő gének, amelyek
együ
együttesen öröklő
klődnek.

zA génté
ntérké
rképezé
pezés sorásorán a gének z Crossing over-
over-gének távolsá
volsága-
ga-T. Morgan
egymá
egymástó
stól való
való távolsá
volságát, a genomban
való
való viszonylagos elhelyezkedé
elhelyezkedésüket
hatá
határozzuk meg ané anélkü
lkül, hogy való
valóban
megszekvená
megszekvenálná lnánk a DNS-
DNS-t.
z Amint ké
készen áll a té
t rkép, ké
é rké képesek
vagyunk egy ismert gén vagy marker
(ismert DNS szekvencia) alapjáalapján
megmondani egy má másik gégén helyé
helyét a
genomban.
genomban .

z Rekombiná
Rekombináció
ciós gyakorisá
gyakoriság= z Helyspecifikus rekombináció
rekombiná
rekombinánsok szá
száma / összes
egyed szá
száma
zΛ fág- E. coli
z 1% rekombiná
rekombináció
ció= 1 té
térké
rképegysé
pegység
z Immunrendszer
(cM)
cM)
z S. cerevisiae párosodási típus
cseréje

4
5
 • Genetikai információ átvitele és
rekombináció baktériumokban

• Transzformáció

• Konjugáció

• Transzdukció

1
2
IS
IS

3
 Expresszió z Transzkripció (DNS→
DNS→RNS)
z Posztranszkripciós
Az információ hű modifikációk (RNS-érés)
megnyilvánultatása z Transzláció
z Poszttranszlációs
modifikációk (fehérje-érés)

Transzkripció

DNS bázisszekvenciá
zisszekvenciái RNS
komplementer szekvenciá
szekvenciáiba
íródnak át.

z Szelektív információelőhívás
-értelmes-
rtelmes-értelmetlen szá
szál
-informá
áció
nform ció s blokkok átírása
Egy adott sejtben adott idő
időpillanatban nem minden gén
íródik át. Bizonyos gének a sejt v. szervezet életé
letének csak
egy meghatá
meghatározott szakaszá
szakaszában aktí
aktívak,
vak, míg mások,
sok, pl. az
energiatermelé szereplők, állandó
energiatermelésben szereplő llandóan működnek.
dnek.

-RNS kó
kópiaszá
piaszám
-RNS élettartam

1
 z Iniciá
Iniciáció
ció

z Elongá
Elongáció
ció

z Terminá
Termináció
ció

z RNS polimerá
polimeráz enzim vé
végzi az átírást E. coli RNS polimerá
z Az polimeráz enzim két fő
komponensbő
komponensből áll.
ll.
Prokarió
Prokarió ta Eukarió
Eukarióta

Sok alegysé
alegység z ”coreenzim”
enzim”
Működése: Iniciá
Iniciáció
ció,elongá
,elongáció
ció,terminá
,termináció
ció z szigma-
szigma-faktor
Templá
Templátja a ss DNS
Promó
Promóter
Kezdé
Kezdés (pppG
(pppG,, pppA)
pppA) core enzim + szigma-
szigma-faktor = holoenzim.
holoenzim.
Foszfodié
Foszfodiészter kötések, 5’ 5’-3’
Terminá
Termináció
ciós szigná
szignált érzé
rzékeli
Aktivá
Aktivátor vagy represszor proteinek

„core enzim” szigma-faktor

z ”core enzim”
enzim” amely
egy-egy β és
két α , egy- szigma-
szigma-faktor (σ):az iniciá
iniciáció
cióhoz,
hoz,
β ’ alegysé
alegységbő
gből áll (2 közelebbrő
zelebbről a promó
promóter szekvencia
α β β’). felismeré
felismeréséhez szü
szüksé
kséges.
ges.
z α : promó
promóterhez való
való
kötődés
z β’ felelő
felelős a DNS
templá
templáthoz való
való
kötődésért
z β felelő
felelős a
nukleotidkö
nukleotidkötésért

2
z Speciá
Speciális körülmé
lmények között Prokarióta átírási egység:
(hősokk v. nitrogé
nitrogén-éhezé
hezés ) új
szigma-
szigma-faktorok megjelené
megjelenése

z →új RNS polimerá

polimeráz holoenzimek

z eddigiektő
eddigiektől elté
eltérő szekvenciá
szekvenciájú
promó
promótereket ismernek fel.
fel.

3
 A Rho faktor a
transzkriptumhoz
kötődik

A Rho faktor
fellazítja az RNS-
DNS kötéseket

Eukarióták

4
5
6
 Génexpresszió
Prokarió
Prokarióta Eukarió
Eukarióta

z 1 RNS polimerá
polimeráz 3 RNS polimerá
polimeráz
z Transzkripció
Transzkripció-transzlá
transzláció
ció RNS érés,
egyidejű
egyidejűleg transzport,
transzlá
transzláció
ció

z DNS-
DNS-RNS Exon-
Exon-intron

z mRNS policisztronos mRNS

monocisztronos

7
 rRNS és tRNS érése
Poszttranszkripciós • Transzkripciós egységekbe
modifikáció tömörülnek a gének
• Nagy molekulatömegű elsődleges
RNS-érés átírat szintetizálódik
• Az egységekről készült másolatot
fel kell darabolni

t-RNS

Endonukleázok
Exonukleázok

• mRNS-ek érése

• Eukariótákban
• 5’- 7-metil-guanozin-tri vagy
polifoszfáton át Védelem
• 3’- poli-A-farok (átlag 200X)
• splicing=összeillesztés mRNS- riboszóma
illesztés

1
 Az eukarióta gének mozaikosak

poliA-farok: hossza
különböző lehet

Intron kihasítás (splicing)

mRNS-DNS hibridizáció

Exon/GU-intron-AG-exon
Kis nukleáris RNS-ek
(snRNS-ek)

U1 szekvenciája-
Alternatív helyek komplementere a
konszenzusszekvenci
ának

2
 Self-splicing

• Ribozimek: RNS enzimek, melyek RNS

molekulák hasítására alkalmasak

Alternatív splicing

3
4
Szabályzás transzkripciós
szinten

Laktóz operon

Laktóz operon struktúrája

Laktóz jelenléte Glükóz és laktóz jelenléte

1
 Triptofán (trp) operon Másik szabályzás: attenuáció
Azon enzimek gé génjeit tartalmazza, amelyek Represszor jelenlé jelentős a
jelenlétében is jelentő
a triptofá
triptofán szinté
szintézisé
ziséhez szü
szüksé
kségesek (5 db trp operon átírása.
gén).
(felépítő folyamatot katalizá
(felé katalizáló enzimek) Az operá első struktú
operátor és az első struktúrgé
rgén
(a szinté
szintézis vé
végtermé
gtermékének jelenlé
jelenlétében között van a: trp vezé
vezér szekvencia
általá
ltalában represszá dnak, azaz magas
represszálódnak, attenuá
attenuátor
triptofá
triptofán koncentrá
koncentráció
ciónál, a trp operon
struktú
struktúrgé
rgénjei nem íródnak át)

attenuá
attenuátor

A transzkripció idő elő

transzkripció idő előtti megszakí
megszakítása
A magas trp koncentrá
koncentráció ció ellené
ellenére megindult
transzkripció
transzkripció 90%-
90%-os esé befejeződik az
eséllyel befejező
attenuá
attenuátor régió
gióban
Az attenuá
attenuátor régió
giótartalmaz egy inverz
repetití
repetitív szekvenciá hajtűszerkezet alakul
szekvenciát- hajtű
ki-
ki-a polimerá
polimeráz leá
leáll-
ll-a transzkripció
transzkripció
megszakad

A polimeráz áthalad az attenuátor szekvencián

2
Az attenuátor leállítja a transzkripciót

3
 Transzláció

m-RNS riboszóma

Különbsé
nbségek az eukarió
eukarióta és prokarió
prokarióta mRNS
felé
felépítésében.

riboszóma

„ riboszóma - E. coli (25% szá

20 000 riboszó szárazanyag).
„ 10 000 000 riboszó
riboszóma -a gyorsan szaporodó
szaporodó
emberi sejtekben .

1
A 16S rRNS „ Kötőhely m-RNS részé
szére
szerkezete „ Kötőhely t-RNS részé
szére

t-RNS Aminoacil t-RNS szintetáz

Aktiváló
enzim Riboszómához
helye való kötődés

„ Iniciá
Iniciáció
ció
iniciáció
„ Elongá
Elongáció
ció

„ Terminá
Termináció
ció

2
Kodon-antikodon A lötyögési szabály

A kódszótár A transzláció kezdő szignálja

3
 „ Homo sapiens
„ similar to Transcription initiation factor TFIID
subunit 11 (Transcription
(Transcription initiation factor TFIID
28 kDa subunit)
subunit)
„ (TAF(II)28) (TAFII-
(TAFII-28) (TAFII28) (TFIID subunit
p30-
p30-beta) (LOC391766), mRNA

„ ATGGAGACCGGCAGGCAAACAGGCGTGTCTGCTGAG
ATGGAGACCGGCAGGCAAACAGGCGTGTCTGCTGAGATG
ATGCTCGCC
CTCGCCATG
ATGCCC
CCC
CGAGGTCTGAAGGGCAGCAAGAAGGATG
CGAGGTCTGAAGGGCAGCAAGAAGGATGGAATCCCTGAGGACCTAGATGGG
GAATCCCTGAGGACCTAGATGGG
AACTTGGAAGAACCCAGGGATCAGGAAGGTGAGCTCAGGAGTGAGGATG
AACTTGGAAGAACCCAGGGATCAGGAAGGTGAGCTCAGGAGTGAGGATGTC
TC
ATGGACCTCACAGAAGGTGACAGTGAGGCCTCAGCCTCAGCTCCTCCTGCA
ATGGACCTCACAGAAGGTGACAGTGAGGCCTCAGCCTCAGCTCCTCCTGCA
GCCAAAAGACGGAAAACACATACGAAACGCAAGAAGGAGAGGAAGCCCACC
GTGGATG
GTGGATGCAGAGGAGGCTCAGAGGATGACAACCCTGCTGTCTGCCATGTCT
CAGAGGAGGCTCAGAGGATGACAACCCTGCTGTCTGCCATGTCT
GAGGAGCAGCTGTCCCGCTACGAAGTGTGTCGCCGGTCAGCTTTCCCAAGA
GCACGCATTGCGGGTCTGATG
GCACGCATTGCGGGTCTGATGCGGTCTATCACTGGCAGTTCGGTGTCTGAG
CGGTCTATCACTGGCAGTTCGGTGTCTGAG
AACGCGGCCATTGCCATGGCTGGAATAGCCAAGGTCTTTGTTGGAGAGGTG
GTGGAAGAGGCCCTGGACATGTGTGAGATGTGGGGAGAGACGCCCCCGCTG
CAGCCCAAGCATTTAAGGGAGGCTGTTCACAGGTTAAAGCCCAAGGGCCTC
TTCCCCAACAGCAACTACAAAAGAGTCATGTTCTAG

elongáció

termináció

4
A transzlációs faktorok

5
 Transzlációs frameshift
+1 -1 tö
több nukleotidnyi csú
csúszá
szás

Spontá
Spontán: ritka
Gyakorisá
Gyakorisága megnő
megnőhet:
‫٭‬tRNS antikodon hurok strukturá
strukturális
változá
ltozása

‫٭‬hiá
hiány valamelyik
Szabályzás transzlációs
„
aminosavbó
aminosavból
„
„ lassulá
↓
lassulás, szü
szünet
szinten
„ Pl. éhezé
hezés, ví
vírus fertő
fertőzés, hősokk
„ ‫٭‬csú
csúszá
szásra hajlamosí
hajlamosító
helyek stb. hatá
hatására a sejt csö
csökkenti a
„ pl. A-
A-AAU-
AAU-UUA-
UUA- protein szinté
szintézist
„ U-UUA-
UUA-AAC-
AAC-

Protein érési folyamata

1
 „ Diszulfid hidak

„ Szigná
Szignál szekvencia hasí
hasítása

„ Glikozilá
Glikozilálás

„ N terminá
terminális szigná
szignál Mesterséges protein hibrid
„ hossz gének létrehozásával
„ Mitokondriumba:
Mitokondriumba: 12-
12-30
„ Kloroplasztisz 25 „ Protein X Protein Y
„ Mitokonrium citoszó
citoszólban marad
„ Belső
Belső szigná
szignál
„ Nukleusz 7-
7-9

„ C terminá
terminális szigná
szignál Hibrid

„ Peroxiszó
Peroxiszóma 3

2
3
 Saccharomyces
cerevisiae Animal Cell Illustration With Hyperlinked Labels

Human Liver
Human Red
Cell
Blood Cells

Sejtciklus

„ A sejtciklus az eukarió
eukarióta sejtben két
osztó
osztódás kö
között lejá
lejátszó
tszódó folyamat.

„ Interfá
Interfázisbó
zisból, mitó
mitózisbó
zisból és a sejt
osztó
osztódásából áll.

„ A G1 fázis az első
első
növekedé
vekedési szakasz.

„ Az S fá
fázis a DNS
repliká
replikáció
ció helye.

„ A G2 fáfázis a má
második
növekedé
vekedési szakasz, a
sejt felké
felkészí
szítése az
osztó
osztódásra.

„ Az M fá
fázis vagy
mitózis és citokiné
mitó citokinézis,
zis, a
sejt ketté
kettéválása ké
két
utó
utódsejtre.

1
„ Ha a rendszer hibá
hibát észlel:
Utasí
Utasítja a sejtet a programozott „ A sejtciklust a ciklin fehé
fehérjé
rjék
sejthalá
sejthalál véghezvitelé
ghezvitelére (pl. ha a p53 és a ciklin-
ciklin-dependens kiná
kinázok
nevű
nevű fehé
fehérje DNS károsodá
rosodást észlel). együ
együttesen szabá
szabályozzá
lyozzák.

„ Kisebb mémérté
rtékű károsodá
rosodásná
snál a
repará
reparáció
ciót indí
indítja be, emellett pedig
leá
leállí
llítja a sejtciklust.

„ Ciklinek:
Ciklinek:
– G1 ciklin (ciklin D)
– S-phase ciklinek (ciklin E és A)
– mitotikus ciklinek (ciklin B és A)
Szintje fluktuá
fluktuál

„ Ciklin-
Ciklin-dependens kiná
kinázok (Cdks)
Cdks)
– G1 Cdk (Cdk4)
– S-phase Cdk (Cdk2)
– M-phase Cdk (Cdk1)
Szintje stabil

2
 „ Mitó
Mitózis:
zis: azt a folyamatot jelenti,
során a sejt két egyenlő
mely sorá egyenlő
utó
utódsejtbe váválasztja megkettő
megkettőződött
genomjá
genomját.
„ Általá
ltalában ezt citokiné
citokinézis követi,
citoplazmát és a
amely a citoplazmá
sejtmembránt is ketté
sejtmembrá kettéosztja.
„ Az eredmé
eredmény, ké két azonos utó
utódsejt,
közel azonos organellum elosztá
elosztással.

Interfázis

„ Profá
Profázisban a kromatin magasan szervezett
Profázis kromoszó
kromoszómákkákká kondenzá
kondenzálódik.
„ Az S fá
fázis DNS megkettő
megkettőződése utá után a
kromoszó
kromoszómák testvé
testvérkromatidokbó
rkromatidokból állnak,
melyek a centromeren keresztü
keresztül kapcsoló
kapcsolódnak
össze.
„ A sejtmagon kívül talá
találjuk a ké
két centroszó
centroszómát,
melyek a sejt mikrotubulusait koordiná
koordináljá
lják.
Ezek a centroszó
centroszómák a sejt ellenté
ellentétes
pólusaiba vá
vándorolnak, mikö
miközben formá
formálódik
az osztó
osztódási orsó
orsó.
„ A maghá
maghártya egyes terü
területeken elveszti
folytonossá
folytonosságát.

3
 „ A magmembrá
magmembrán felbomlott, mikrotubulusok
Prometafázis árasztottá
rasztották el a sejtmag belsejé
belsejét. Ezt nyitott
mitó
mitózisnak nevezzü
nevezzük és csak a tö
többsejtű
bbsejtű
szervezetekben jelenik meg.

„ Néhány esetben (gomba, alga) a zá zárt

„ A kromoszó
kromoszómák kinetokó
kinetokórjaihoz
mitó
mitózisban is ké
képes penetrá
penetrálni a (azokhoz a helyekhez, melyekben a
mikrotubulus a sé
sértetlen magmembrá
magmembránt. testvé
testvérkromatidok összekapcsoló
sszekapcsolódnak)
kötődnek a hú
húzófonalak (osztó
(osztódási
orsó
orsók).

„ A prometafá
prometafázist gyakran a profá
profázis
részeké
szeként emlí
említik.

Metafázis

4
„ A kromoszó
kromoszómák, melyek a ké két pó
pólus
irá
irányá
nyába má
már elkö
elkötelezettek, de mé
még Anafázis
egymá
egymáshoz tapadó
tapadó testvé
testvérkromati-
rkromati-
dokbó
dokból állnak, felsorakoznak az ún.
egyenlí
egyenlítői sí
síkban.
„ A sejt a sejtosztó
sejtosztódás ezen állapotá
llapotában
vizsgá
vizsgálható
lható a legeredmé
legeredményesebben.
Klinikai kromoszó
kromoszómavizsgá
mavizsgálatokná
latoknál is a
metafá
metafázisban blokkoljá
blokkolják a sejtet,
plé
plédául kolhicinnel.
kolhicinnel.
„ Ez a legrö
legrövidebb szakasz. Mikor a sí síkba
rendező
rendeződtek a kromoszó
kromoszómák, má már
véget is ér.

„ Két folyamat já játszó

tszódik le:
A testvé
testvérkromatidokat összekösszekötő fehé
fehérjé
rjék Telofázis
levá
leválnak, ezá
ezáltal a testvé
testvérkromatidokbó
rkromatidokból
testvé
testvérkromoszó
rkromoszóma keletkezik, hiszen a
húzófonalak megrö
megrövidü
vidülnek a megfelelő
megfelelő
pólusban elhelyezkedő
elhelyezkedő centroszó
centroszóma
irá
irányá
nyában.
A kinetokkó
kinetokkórhoz nem kapcsoló
kapcsolódó
mikrotubulusok hosszabodnak,
hosszabodnak, ezzel a sejt
tökéletesen ellenté
ellentétes pópólusá
lusába szorí
szorítva a
centroszó
centroszómákat. kat.
(Ezt a ké
két fá
fázist gyakran nevezik korai és
anafázisnak.)
késői anafá zisnak.)
„ Az anafá
anafázis jelenti a sejtciklus egyik
ellenő
ellenőrzé
rzési pontjá
pontját. Ha nem vá váltak szé
szét
megfelelő
megfelelően a kromoszó
kromoszómák, a sejtciklus
gátlá
tlás alá
alá kerü
kerül.

„ A mitó
mitózis utó
utóhatá
hatásait tü
tünteti el. A
kinetokó
kinetokórokhoz nem kapcsoló
kapcsolódó Citokinezis
mikrotubulusok tová
tovább
hosszabbodnak, ezzel is nönövelve a
sejtek átmé
tmérőjét. A pó
pólusokhoz húhúzott
kromoszó
kromoszómák dekondenzá
dekondenzálódnak,
dnak,
újbó
jból összeszerelő
sszeszerelődik a maghá
maghártya
körülöttü
ttük.

5
„ A citokiné
citokinézis,
zis, azaz a sejt fizikai
ketté
kettéválása ekkor mámár folyamatban
van. Állati sejtekben az egyenlí
egyenlítői
síkban egy kontraktilis gyű
gyűrű-rendszer
jelenik meg, mely folyamatosan
elszorí
elszorítja a membrá
membránt, ezzel mintegy
ketté
kettévágva a sejtet kékét utó
utódsejtre.

„ A mitó
mitózis befejező
befejeződött. Az eredmé
eredmény:
két teljesen azonos sejt.

Nobel díj 2001

Paul Nurse

6
 Hibák a mitózisban
„ Veszé
Veszélyesek, hiszen az utó
utódsejt minden
felmerü
felmerülő defektust hordozni fog.

„ A non-
non-diszjunkció
diszjunkcióban a kromoszó
kromoszómák
képtelenek egymá
egymástó
stól szé
szétvá
tválni, így az egyik
sejtben tö
többlet (trisz
(triszó
ómia,
mia, hiszen háhárom
kromoszóma van jelen), a má
kromoszó másikban hiá
hiány
(monoszó
monoszómia,
mia, hiszen csak egy kromoszó
kromoszóma
talá
található
lható) fog keletkezni. Ezek a sejtek
aneuploid sejtek, melyek hajlamosak rákos
burjá
burjánzá
nzásra.

„ A mitó
mitózis traumatikus megpró
megpróbáltatá
ltatás
a sejt szá
számára. A sejt organellumainak
szerkezete drádrámaian megvá
megváltozik, a
genetikai anyag kondenzá
kondenzálódik, majd
újbó
jból felbomlik, ami kromoszó
kromoszóma
hibá
hibákat, sésérüléseket eredmé
eredményezhet,
ami pedig genetikai betegsé
betegségekhez
vezethet.
„ Ilyen sé
sérülés lehet az inverzió
inverzió,
transzlok ci dupli ció, delé
transzloká á ció
ó , dupliá
áció deléció
ció. Ezen
sérülések nagy ré része halá
halálhoz vezet.

7
 A genomok típusai
A genom struktúrája
ƒ mikró
mikróba : kromoszó
kromoszómális tartalom +
ƒ A bioló
biológiá
giában egy szervezet genomja a plazmidok
teljes örökítő információt jelenti, amely a
információ
DNS-
ƒ gerincesek:
gerincesek: kromoszó
kromoszómális tartalom +
DNS-ben van kó kódolva.
ƒ mitokondrium

ƒ A kifejezé előszö
kifejezést először 1920-
1920-ban Hans
Winkler, a hamburgi egyetem botanikus
Winkler, ƒ amit azonban nem tekintenek az emberi
professzora haszná
használta. genom részé
szének. Ezt mitokondriá
mitokondriális
genomnak nevezik.

A DNS mennyisé
mennyisége nincs korrelá
korreláció
cióban a faj komplexitá
komplexitásával

A humá
humán genom 46 kromoszó
kromoszómából áll, melyeknek
Gének száma egyes mindegyike tö
több ezer gé
gént és intergé
intergénikus szakaszt tartalmaz.

genomokban Az intergé
intergénikus szakaszok tartalmazhatnak szabá
szekvenciá
szekvenciákat és hulladé
hulladék DNS-
szabályozó
DNS-t is.
lyozó

2% 30 000

Humán: „döglött” vírusok, ugráló gének

Schizosaccharomyces pombe ~15 Mb és ~ 6700 gé

gén

1
 Kromoszóma és gén ƒ Eukarió
Eukarióta genom általá jellemzői
ltalános jellemző
sűrűség
Gén sű
lesztő: 50kb-
Élesztő 50kb- os fragmenten kb.20 gé
gén talá
található
lható
Humá
Humán: 50kb-
50kb- os fragmenten kb.6 gé
gén talá
található
lható

ƒ Gé n
ƒ Homo sapiens Gének
ƒ similar to Transcription initiation factor TFIID subunit
11 (Transcription
(Transcription initiation factor TFIID 28 kDa
subunit)
subunit) ƒ
ƒ (TAF(II)28) (TAFII-
(TAFII-28) (TAFII28) (TFIID subunit p30-
p30-
beta) (LOC391766), mRNA

ƒ ATGGAGACCGGCAGGCAAACAGGCGTGTCTGCTGAG
ATGGAGACCGGCAGGCAAACAGGCGTGTCTGCTGAGATG
ATGCTCGCC
CTCGCCATG
ATGCCCCGAGGTCTGAAGGGCAGCA
CCCCGAGGTCTGAAGGGCAGCA
ƒ AGAAGGATG
AGAAGGATGGAATCCCTGAGGACCTAGATGGGAACTTGGAAGAACCCAGGGATCAGGAAGGTGAGCTCAG
GAATCCCTGAGGACCTAGATGGGAACTTGGAAGAACCCAGGGATCAGGAAGGTGAGCTCAG
ƒ GAGTGAGGATG
GAGTGAGGATGTC
TCATG
ATGGACCTCACAGAAGGTGACAGTGAGGCCTCAGCCTCAGCTCCTCCTGCAGCCAAA
GACCTCACAGAAGGTGACAGTGAGGCCTCAGCCTCAGCTCCTCCTGCAGCCAAA
ƒ AGACGGAAAACACATACGAAACGCAAGAAGGAGAGGAAGCCCACCGTGGATG
AGACGGAAAACACATACGAAACGCAAGAAGGAGAGGAAGCCCACCGTGGATGCAGAGGAGGCTCAGAGGA
CAGAGGAGGCTCAGAGGA
ƒ TGACAACCCTGCTGTCTGCCATGTCTGAGGAGCAGCTGTCCCGCTACGAAGTGTGTCGCCGGTCAGCTTT
TGACAACCCTGCTGTCTGCCATGTCTGAGGAGCAGCTGTCCCGCTACGAAGTGTGTCGCCGGTCAGCTTT
ƒ CCCAAGAGCACGCATTGCGGGTCTGATG
CCCAAGAGCACGCATTGCGGGTCTGATGCGGTCTATCACTGGCAGTTCGGTGTCTGAGAACGCGGCCATT
CGGTCTATCACTGGCAGTTCGGTGTCTGAGAACGCGGCCATT
ƒ GCCATGGCTGGAATAGCCAAGGTCTTTGTTGGAGAGGTGGTGGAAGAGGCCCTGGACATGTGTGAGATGT
GCCATGGCTGGAATAGCCAAGGTCTTTGTTGGAGAGGTGGTGGAAGAGGCCCTGGACATGTGTGAGATGT
ƒ GGGGAGAGACGCCCCCGCTGCAGCCCAAGCATTTAAGGGAGGCTGTTCACAGGTTAAAGCCCAAGGGCCT
GGGGAGAGACGCCCCCGCTGCAGCCCAAGCATTTAAGGGAGGCTGTTCACAGGTTAAAGCCCAAGGGCCT
ƒ CTTCCCCAACAGCAACTACAAAAGAGTCATGTTCTAG

Intron:
Intron:

lesztő: nem
Élesztő

Humá
Humán: mind

2
 ƒ Gének –példá
ldányszá
nyszám

ƒ egy
ƒ több

Többszö
bbszörös gé
gének, dó
dózis ismétlődés
ismétlő ƒ Másolat működőképes marad, de
Mindké
indkét kó megőrzi eredeti funkció
kópia megő funkcióját, és
mutá
mutáció
ciók kökövetkezté
vetkeztében valamilyen
mennyiségű RNS-
ezzel a szervezet nagyobb mennyisé RNS-t mérté
rtékben megvá
megváltozik.
vagy fehé
fehérjé
rjét ké
képes termelni. Dózis
ismé tlődésnek (dose repetition) nevezik.
ismétlő ƒ pl. laktá
lakt dehidrogenáz, aldolá
á t dehidrogená aldoláz, kreatin
pl. hiszton
hiszton gégének,
nek, tRNS,
tRNS, rRNS gének.
nek. kiná
kináz), amelynek gé génjei tö
több
A humá
humán sejtek haploid genomja:
genomja: változatban vannak jelen a genomban.
genomban.
rRNS gé
gének szá
száma kb. 300, ƒ Az egyes enzimvá
enzimváltozatok ugyanazt a
tRNS génből kb. 1300 kó
génbő kópia van jelen.
reakció
reakciót katalizá
katalizáljá
lják, de bioké
biokémiai
A karmosbé
karmosbéka (Xenopus laevis) genomja tö több tulajdonsá
tulajdonságaikban, szö szövet
mint ké
kétszer nagyobb a humá
humán genomná
genomnál,
rRNS-ből kb. 500, tRNS-
rRNS- tRNS-ből tö
több mint 7 ezer specifitá
specifitásukban lehet elté eltérés.
másolat mutatható
mutatható ki.

ƒ Géncsalá
ncsaládok
eredetű, szekvenciá
Az azonos eredetű szekvenciájukban
nagyon hasonló
hasonló gének összessé
sszessége .

A gé
géncsalá
ncsalád tagjai tö
többnyire egymá
egymás
közelsé
zelségében helyezkednek el a
kromoszó
kromoszómán.

α-globulinok
β -globulinok

3
 Az α- és a β-globulinok homoló homológ ƒ A populá
populáció
ciógenetikai vizsgá
vizsgálatokban
fehé
fehérjé
rjéinek aminosav szekvenciá
szekvenciája jelentősége van azoknak a
különös jelentő
közötti kü
különbsé
nbség meghaladja az 50%-
50%- géncsalá
ncsal doknak,
á doknak, amelyek tagjai azonos
ot,
ot, így e ké
két csalá
család (a mioglobinokkal) funkció
funkciójú enzimet, vagy enzim domé
domént
együ
együtt, egy szupercsalá
szupercsaládot alkot. kódolnak.
ƒ Az enzimvá egyszerű
enzimváltozatok ugyanis egyszerű
eszkö
eszközökkel, gégél-elektroforé
elektroforézissel
kimutatható
kimutathatók, és így egy populá
populáció
cióból
sok egyed alapjá
alapján lehet mé
mérni a
genetikai vá
változatossá
ltozatosságot.

1. Gé
Gének, génkö
nközeli szekvenciá
szekvenciák 20-
20-30%

Kódoló
doló régió
giók Nem kó
kódoló
doló
Intron
előtti
Gén elő
Gén utá
utáni szekvenciá
szekvenciák

2. Pszeudogé
Pszeudogének
A pszeudogé
pszeudogének olyan gé génmá
nmásolatok,
amelyek kü nböző mutá
különbö mutáció
ciók kö
következté
vetkeztében
minden funkció
funkciót elvesztettek.
ƒ Csak lá
látszó
tszólag kó
kódol egy gé
géntermé
nterméket.

ƒ A pszeudogé
pszeudogének keletkezé
keletkezése:

ƒ Egy gén inaktivá

inaktiválódhat,
dhat, ha a rá
rá ható
ható szelekció
szelekciós
nyomá kiszűri a tö
nyomás kiszű többi kö
közül. Pé ldául, egy élőlényt
Példá
lvevő környezet úgy is megvá
körülvevő megváltozhat, hogy az
adott gé
gén termé
termékére mámár nincs szü
szüksé
kség, vagy aká
akár
károssá
rossá is vá
válhat.

ƒ Egy gé
gén dupliká
duplikáció
ciója egy genomban két ugyanolyan
gént eredmé
eredményezhet. Így egy inaktivá
inaktiváló mutá
mutáció
ció az
egyik gé
génben nem okoz szelekció
szelekciós nyomá
nyomást vele
szemben.

ƒ Egy gé
gén mRNS transzkriptumá
transzkriptumának darabjai spontá
spontán
visszaí
visszaíródhatnak reverz transzkripció
transzkripcióval a
kromoszó
kromoszómális DNS-
DNS-be.

4
 3. Génfragmentek

Génen kivü
kivüli szekvenciá
szekvenciák
70-
70-80%

Repetití
Repetitív szekvenciá
szekvenciák ƒ 2.Cluster- elhelyezkedők
2.Cluster-ben elhelyezkedő

Kukorica: sok ƒ Klasszikus szatellit DNS

ƒ Miniszatellitek (telomer)
telomer)
1.szé
1.szétszó elhelyezkedő:
tszórtan elhelyezkedő ƒ Mikroszatellitek
SINEs (Alu csalá
család) (5’
(5’-CA CA CA CA CA-
CA-3’)
hossz kb. 250 bp,
bp, 700 000 (5’
(5’-AAAAAAAAAAAAA-
AAAAAAAAAAAAA-3’)

LINEs(
LINEs( nem virá
virális retroelemek)
retroelemek)
60 000X

5
ƒ „Junk DNA”
DNA”- felesleges? ƒ A humá
humán genetikus variá
variáció
ciókró
król szó
szóló kutatá
kutatások az
Kicsi, fehé
fehérjé
rjét nem kó
kódoló
doló RNS-
RNS-ek génjei talá
található k.→mikro RNS-
lhatók.→ RNS- egyszerű nukleotid polimorfizmusra (SNP)
egyszerű
ek→speciá
ek→ fehérje komplexeket ismernek fel. →(RNS+
speciális fehé fókuszá egyszerű báziskicseré
kuszáltak, melyek egyszerű ziskicserélődések a
fehé
fehérje egysé
egység ) tö
több funkció
funkciójú kromoszó
kromoszómákon.
Pl. kromoszó
kromoszómákhoz kötödik→ dik→szakaszok elné
elnémulnak

mRNS 3’ –végi át nem íródó szekvenciá

szekvenciáihoz
kötődnek→
dnek→gátló
tlódik az mRNS működése ƒ A legtö
legtöbb vizsgá
vizsgálat szerint az SNP-
SNP-k szá
száma 1:100 és
1:1000 bázispá
zispár között van az eukromatikus
→mRNS feldarabolá
feldarabolása
régió
giókban, habá
habár nem mutatnak homogé
homogén eloszlá
eloszlást.
↓↓↓
Gazda mRNS-
mRNS-ek aktivitá
aktivitása , stabilitá
stabilitása ƒ Így nem mó
módosul a szá
számos genetikus által vallott
Parazita szekvenciá
szekvenciák aktivitá
aktivitása , stabilitá
stabilitása megá
megállapí
llapítás, miszerint minden ember 99%-
99%-ban
genetikailag megegyezik.

ƒ DNS ujjlenyomat és az apasá

apasági tesztek
tesztek ƒ Az emlő
emlős genomok komperatí
komperatív genomikai
tanulmá
tanulmányozá
nyozása sorá
során kapott eredmé
eredmények
alapjá
alapján úgy becsü
becsülik, hogy genomunk 5%-
5%-
a konzervá
konzerválódott az evolú
evolúció
ció sorá
során azon
fajok szé
szétvá
tválása óta.

ƒ A csimpá
csimpánz genom kb. 95%-
95%-ban egyezik a
humá
humán genommal.
genommal.
ƒ Átlagban, egy tipikus emberi fehé
fehérjé
rjét kó
kódoló
doló
gén 2 aminó
aminósavban különbönbözik a csimpá
csimpánz
megfelelőjétől.
megfelelő
ƒ Csak az emberi gégének egyharmadá
egyharmadának van
ugyanolyan fehé
fehérje produktuma, mint a
csimpá
csimpánzban lélévő megfelelő
megfelelőjének.
ƒ A legfő
legfőbb kü
különbsé
nbség a ké
két faj között a 2-es
kromoszó
kromoszóma,
ma, mely a csimpá
csimpánz 12-
12-es és 13-
13-
as kromoszó
kromoszómák fú fúzió
ziójának eredmé
eredménye .

6
 Mozgékony elemek a genomban

Konzervatív transzpozíció
Transzpozíció típusai
• 1.Transzpozíció (DNS)
• Konzervatív Mozgékony elem Célszekvencia
( az elem kilép az eredeti helyéről és új
helyre épül be)
(az elem száma nem változik csak a helye)
• Replikatív
• ( az elemről másolat készül és az ugrik
az új helyre) ?
• (az elem száma is változik) Cél. Mozgékony elem Cél.

1
 Replikatív transzpozíció

Mozgékony elem
Célszekvencia

replikáció

DNS

Mozgékony elem Cél DNS Cél

• 2.Retrotranszpozíció ( RNS szintézis)

• Előbb átíródik RNS-be

• Visszaíródik cDNS-be
• Beépül az új helyre

Retrotranszpozíció

Mozgékony elem
Célszekvencia
transzkripció

RNS

Reverz transzkripció

cDNS
Cél cDNS Cél
Mozgékony elem

2
A mozgékony genetikai elemek típusai
Baktériumok: inszerciós szekvenciák
transzpozonok
Élesztők: Ty elem Bakteriális transzpozonok (1960-as évek)
Drosophila: Copia elemek • Inszerciós szekvenciák
P elemek Csak az áthelyeződéshez szükséges
FB elemek elemeket taratalmazza
Ízeltlábúak
Férgek
Emlősök

• Transzpozonok

Transzpozáz Amp. Rez. Transzpozáz

• Retroelemek

3
 Prokarióta inszerciós elemek

• IS1 5-8 példány 768bp hosszú

• IS2 5 példány a kromoszómán 1327
1 példány az F plazmidban

• IS4 1-2 példány 1400

• IS5 ismeretlen 1250

Rövid azonos állású ismétlődés

Transzpozonok eukariótákban 5-8 kb hossz

• Drosophila:
• copia-szerű elemek
• FB elemek
• P-elemek

Fordított irányú
ismétlődés Rövid fordított állású
ismétlődés

4
 • Mozgékony genetikai elemek
plazmidokon

• 1950 Japán Shigella

• Több antibiotikummal szembeni

rezisztencia

• Átadódott más törzsekbe, rokon fajokba

5
 Gazdaspecifitás
Restrikciós enzimek
1960 W. Arber
Fág
↓
A bakté
baktérium tö
törzs
↓
Fág

Fág
↓ ↓
A bakté
baktérium B bakté
baktérium
↓ ↓
↓ ↓
Fág ≥≥≥ Fá g

fertőzés mé
fertő mérté
rtéke

Restrikció
Restrikciós enzimek alkalmazá
alkalmazása:

DNS restrikció
restrikciós té
térké
rképe
Populá
Populáció
ció-polimorfizmus
trendeződés, mutá
DNS átrendező mutáció
ció
Mutá
Mutánsok lélétrehozá
trehozása
Betegsé
Betegségek diagnosztizá
diagnosztizálása

1
 Mutáció kimutatása restrikciós
enzimmel

•DNS restrikciós térképe

Alkalmazá
Alkalmazás: genetikai betegsé
betegségek
méhen belü
belüli diagnó
diagnózis:

Sarló
Sarlósejtes vé
vérszegé
rszegénysé
nység
GAG -- GTG
Glutaminsav--
Glutaminsav-- valin

Mintavé
Mintavétel, DNS izolá
izolálás, emé
emészté
sztés
restrikció
restrikciós enzimmel

Ligálás

2
Marker gén
(baktérium) Replikáció
Vektor

Klónozó
hely
Marker gén
(élesztő)

Agaróz gél elektroforézis

Alap:
tölté rendelkező részecské
ltéssel rendelkező szecskék
erőtérben elmozdulnak
elektromos erő

Agaró
Agaróz:
Tengeri moszat
D-galaktó
galaktóz-L galaktó
galaktóz polimerje

DNS mozgását befolyásoló

tényezők
DNS mé
mérete, konformá
konformáció
ciója
Agaró
Agaróz koncentrá
koncentráció
ció
Puffer
Feszü
Feszültsé
ltség
Hőmérsé
rséklet
Etidium-
Etidium-bromid jelenlé
jelenléte 15%-
15%-al
csö
csökkenti a mozgé
mozgékonysá
konyságot

3
 Első génsebé
Első nsebészeti kí
kísérletek

vírus baktérium Alkalmazás

4
Klónozás
Génmegszakítás
MCS MCS
SphI ura4+ SacI

pUC-DIS start stop

vektor

NotI adapter az ade gén az ade gént

tartalmazó
fragment

deléció

Integratív transzformálás

5
 A géntermék helyének
A géntermék túltermeltetése
beazonosítása

A magban van a
mutáns pX
fehérje.

A citoplazmában
van a pX fehérje.

6
 Szekvencia meghatározása
Maxam-
Maxam-Gilbert
(ké
(kémiai anyagokkal roncsolja a
specifikus nukleotidokat)
nukleotidokat)

Sanger
(szinté
(szintézis) Left: A DNA sequencer at California State University, San Bernardino.
Right: Door of sequencer is open to show a gel plate inside.

1980
Nobel Prize for Chemistry

e peaks and valleys of a portion of a sequenced gene that correspond to the color-coded b
bases, there are 434 = 2.951479 X 1020 or about 295 quintillion different possible sequence
or home matching the murder victim's DNA was 25 quadrillion to one.

Walter Gilbert (USA, *21.3.1932) Frederick Sanger (Great Britain,

13.8.1918)
USA, Biological Laboratories, USA, Great Britain,
Britain, MRC Laboratory of Molecular Biology,
Biology, Cambridge,
"for their contributions concerning the determination of base sequences in
Cambridge, MA, nucleic acids"
acids".

1
2
 Automata szekvenálók

Szekvenálás eredménye

a szekvená
szekvenálási módszer egy-
egy-egy
kísérlettel átlagosan mintegy 500 nukleotid
hosszú
hosszúságú DNS-DNS-szakasz sorrendjé
sorrendjét
képes meghatá
meghatározni

>embl|X13976|SPURA4 Schizosaccharomyces pombe ura4 gene for

orotidine-
orotidine-5'-
5'-phosphate (OMP) decarboxylase
A bioló
biológiá
giában a reading frame,
frame, vagy
...aagcttagctacaaatcccactggctatatgtatgcatttgtgttaaaaaagtttgtatagatt
...aagcttagctacaaatcccactggctatatgtatgcatttgtgttaaaaaagtttgtatagattatttaatctactca
atttaatctactca olvasási keret a DNS vagy RNS egy
olvasá
gcattctttctctaaataggaatttgttacttaatggagaaaaaaatgtttcgatttacctagtgtatttgtttgtatactca
gcattctttctctaaataggaatttgttacttaatggagaaaaaaatgtttcgatttacctagtgtatttgtttgtatactca
cgtttaatttcaaacatccattctatcttgtgtaatttttggcatggtgaaaaagataatcagccttataatctttacaaa
cgtttaatttcaaacatccattctatcttgtgtaatttttggcatggtgaaaaagataatcagccttataatctttacaaa
agtaagaaattctgtaaataagccttaatgcccttgctttaaattaaaatggttctttttcatgataatgtttgcactttgt
agtaagaaattctgtaaataagccttaatgcccttgctttaaattaaaatggttctttttcatgataatgtttgcactttgt
folyamatos és nem- tfedő készlete a
nem-átfedő
gaatatattttagatagttctgtgaggtataattaagatgttttagagacttatacaattttgtctttataaattcttaattga
gaatatattttagatagttctgtgaggtataattaagatgttttagagacttatacaattttgtctttataaattcttaattga
ttttaccatcccagtttaactatgcttcgtcggcatctctgcacatgtcgtgttttcttaccgtattgtcctaccaagaacc
ttttaccatcccagtttaactatgcttcgtcggcatctctgcacatgtcgtgttttcttaccgtattgtcctaccaagaacc
nukleotidból álló
három nukleotidbó lló kodonnak.
kodonnak.
tcttttttgcttggatcgaaattaaaggtttaaaagcaaagttatg
tcttttttgcttggatcgaaattaaaggtttaaaagcaaagttatggatgctagagtatttcaaagctattcagcta
gatgctagagtatttcaaagctattcagcta
gagctgaggggatgaaaaatcccattgccaaggaattgttggctttgatggaagaaaagcaaagcaa
gagctgaggggatgaaaaatcccattgccaaggaattgttggctttgatggaagaaaagcaaagcaa
cttgtcagtcgcggtcgatttgacgaagaaatccgaaatcttagaattggtagataaaattggaccctatg
Három lehetsé
lehetséges olvasá
olvasási keret lé
létezik,
cttgtcagtcgcggtcgatttgacgaagaaatccgaaatcttagaattggtagataaaattggaccctatg
tctgtgttatcaagacacatattgacgttgtcgaggatttcgaccaggatatggtagaaaaactggtggc
tctgtgttatcaagacacatattgacgttgtcgaggatttcgaccaggatatggtagaaaaactggtggc
cttaggtaaaaagcatcgttttcttatctttgaggatcgcaaattcgcagacattggaaataccgtcaagct
cttaggtaaaaagcatcgttttcttatctttgaggatcgcaaattcgcagacattggaaataccgtcaagct
melyek egyenké
egyenként a há
három nukleotidró
nukleotidról
acaatatgcatctggtgtgtacaaaattgcttcttgggctcatatcacaaattgccatacagtgccaggcg
acaatatgcatctggtgtgtacaaaattgcttcttgggctcatatcacaaattgccatacagtgccaggcg
agggtattatacaaggcctcaaagaagttggtttacctttgggacgtggtctcttgcttttggctgaaatgt
agggtattatacaaggcctcaaagaagttggtttacctttgggacgtggtctcttgcttttggctgaaatgt indulnak ki.
cttccaaaggctctttggctactggttcctacacagagaaaaccttagaatggtttgagaagcataccga
cttccaaaggctctttggctactggttcctacacagagaaaaccttagaatggtttgagaagcataccga
tttttgctttggctttatagctggtcgtcgatttcctaaccttcaaagcgactacataactatgtcccctggtat
tttttgctttggctttatagctggtcgtcgatttcctaaccttcaaagcgactacataactatgtcccctggtat
cggcttggatgttaaaggagacgggctgggacagcaatatcgtactcctgaagaagtgattgtaaact
cggcttggatgttaaaggagacgggctgggacagcaatatcgtactcctgaagaagtgattgtaaact
Azt az olvasá
olvasási keretet, mely tartalmaz egy
gcggtagcgatatcatcattgttggtcgtggagtctatggagctggtcgtaatcctgttgtcgaagccaa
gcggtagcgatatcatcattgttggtcgtggagtctatggagctggtcgtaatcctgttgtcgaagccaa
gagatatagagaagctggttggaaggcatatcagcaaagactttctcagcattaaaaaaagactaatgta
gagatatagagaagctggttggaaggcatatcagcaaagactttctcagcattaaaaaaagactaatgta
start és egy stop kodont,
kodont, open reading
aaatttttttggttggttattgaaaaagtcgatgccttgtttgcgtttgttttcctaggcgttttatgtcagaaggcatttaga
aaatttttttggttggttattgaaaaagtcgatgccttgtttgcgtttgttttcctaggcgttttatgtcagaaggcatttaga
attagtatacaagtactctttggtaaaattttatgtagcgactaaaatattaactattatagataaacaccttgggaat
attagtatacaagtactctttggtaaaattttatgtagcgactaaaatattaactattatagataaacaccttgggaat frame-
frame-nek nevezzü
nevezzük (ORF).
(ORF).
aaaaagtaatttgctatagtaatttattaaacatgctcctacaacattaccacaatcttttctcttggattgacattgaat
aaaaagtaatttgctatagtaatttattaaacatgctcctacaacattaccacaatcttttctcttggattgacattgaat
aagaaaagagtgaatttttttagacttgtaatgataactatgtacaaagccaatgaaagatgtatgtagatgaatgt
aagaaaagagtgaatttttttagacttgtaatgataactatgtacaaagccaatgaaagatgtatgtagatgaatgt
aaaataccatgtagacaaacaagataaaacttggttataaacattggtgttggaacagaataaattagatgtcaa
aaaataccatgtagacaaacaagataaaacttggttataaacattggtgttggaacagaataaattagatgtcaa
aaagtttcgtcaatatcacaagctt

3
 >gi|3982923|gb|AF093755.1|AF093755 No putative conserved domains have
Schizosaccharomyces pombe sep15 gene,
gene, been detected
complete sequence Length=1513 Score = 2206 bits (1113), Expect = 0.0 Identities =
1140/1140 (100%), Gaps = 0/1140 (0%) Strand=Plus/Plus

Query 1 ACACATATGAATTGTAATTTATTCCTATTGTAACAAGTTTTAGGATAAAGAAAAAGCTCA 60
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Sbjct330 ACACATATGAATTGTAATTTATTCCTATTGTAACAAGTTTTAGGATAAAGAAAAAGCTCA
ACACATATGAATTGTAATTTATTCCTATTGTAACAAGTTTTAGGATAAAGAAAAAGCTCA 389

Query 11 ESLEAIRHRIAQIVQSLTHFLAILHQSESLSPWPTIHKNFNILLSQIHSLSNNLAAHSHT
ESLEAIRHRIAQIVQSLTHFLAILHQSESLSPWPTIHKNFNILLSQIHSLSNNLAAHSHT 70
++L+A+R R+AQ+ SL + ++E L W T+ N+ LSQ+ S+++ L T
Sbjct 31 QALDAVRMRLAQLTHSLRRIRDEMSKAE-
QALDAVRMRLAQLTHSLRRIRDEMSKAE-LPQWYTLQSQLNVTLSQLVSVTSTLQHFQET 89

2000. jújúnius 26-

26-án, Clinton amerikai
Genom szekvenálás elnö
elnök és Blair brit miniszterelnö
miniszterelnök kö közös
sajtóé
sajtóértekezleten
rtekezleten jelentetté
jelentették be,
hogy az ember öröklé klési anyagá
anyagának
teljes informá
információ
ciótartalmá
tartalmát lé lényegé
nyegében
megfejtetté
megfejtett é k, az a há
h rommilliárd
á rommilliá
dollá
dolláros tervezett kö költsé gvetésű
ltségveté
kutatá
kutatási program, amely 1990- 1990-ben ezt a
tűzte ki: sikerrel já
célt tű járt.

4
1. Random kló
klónok

2.A kló
klónok szekvená
szekvenálása Ellenőrzé
Ellenő rzés
tfedő szekvenciá
3. Átfedő szekvenciák keresé
keresése

Teljes szekvencia

Kromoszóma

A DNS mennyisé
mennyisége nincs korrelá
korreláció
cióban a faj
komplexitá
komplexitásával Kromoszóma és gén

5
Gének száma egyes genomokban

2% 30 000

A Single Nucleotide Polymorphism (egyszerű

(egyszerű nukleotid SNP Kimutatá
Kimutatása
polimorfizmus), másné
snéven SNP
Egy bevá
bevált mómódszer az SNP-SNP-k kimutatá
kimutatására
Egy DNS szekvencia variá variáció
ció, mely akkor jö jön lé
létre, ha egy nukleotid az RFLP (restriction fragment length
a genomban megvá
megváltozik.
Példá
ldául: AAGCCTA polymorphism,
polymorphism, azaz restrikció
restrikciós fragment
AAGCT
AAGCTTA hossz polimorfizmus), másné snéven SNP-
SNP-RFLP.
Csak akkor tekinthetjü
tekinthetjük a variá variáció
ciót SNP-
SNP-nek,
nek, ha a populá
populáció
ció
legalá
legalább 1%-
1%-ában megjelenik. Ha egy allé
allé l rendelkezik egy restrikció
restrikciós
A SNP-
SNP-k teszik ki a humá humán genetikai variá variáció
ciók 90%-
90%-át, és minden enzim hasí
hasítóhellyel,
hellyel, mí
míg egy má
másik nem,
100-
100-300 bázispá ronként megjelenik a humá
zispáronké humán genomban.
genomban.
Minden 3 SNP-
SNP - b ő l 2 - ben a citozint timin cseré
cser é li le.
akkor a ké
két allé
allél enzimatikus emé
emészté
sztése
Az emberi DNS-DNS-ben lejá lejátszó
tszódó változá ltozások hatá
hatással vannak arra, eltérő hosszú
elté hosszúságú fragmenteket fog
hogy hogyan reagá reagál az emberi szervezet a betegsé gekre,
betegségekre, eredmé
eredményezni.
bakté riumokra, vírusokra,
baktériumokra, rusokra, kemiká
kemikáliá liákra.
kra.
Az SNP-
SNP-k nagy segí segítsétséget jelentenek az orvosi kutatá kutatásokban,
sokban, Abban az esetben, ha nincs ilyen hasí hasítóhely
gyógyszerek kifejleszté
gyó kifejlesztésében, mivel ezek nem sokat vá változnak
generá
generáció
cióról generá
generáció cióra, azaz a populápopuláció ciókban való való SNP kö
követé
vetés nbség, akkor a PCR módszert
különbsé
lineá
lineáris kö
következteté
vetkeztetéseket tesz lehető lehetővé. haszná
használjá
lják.
Az SNP-
SNP-k pontmutá
pontmutáció tekinthetők, melyek voltak olyan
cióknak tekinthető
sikeresek az evolúevolúció ban, hogy vé
cióban, végül fontos ré részé
szévé váltak a
populá
populáció
cióknak.

1. Egyes kó kórokozó
rokozó bakté
baktériumok DNS-
DNS-nukleotid
sorrendjé
sorrendjének megfejté
megfejtése lehetővé
lehető teszi e 4. Az ember tö több mint ezer genetikai betegsé
betegsége
bakté
baktériumok elleni új vakciná
vakcinák és antibiotikumok közül né néhány szá
száz eseté
esetében volt eddig pontosan
kifejleszté
kifejlesztését (pé
(példá
ldául az agyhá
agyhártyagyulladá
rtyagyulladást okozó
okozó ismert a betegsé
betegségokozó
gokozó gén és annak szerkezete. Ez
Neisseiria meningitis ellen). előfelté
elő feltétele minden lehetsé
lehetséges oki terá
terápiá
piának. A
jövőben ez minden ilyen betegsé betegség eseté
esetében
2. A modellszervezetekben megtalá hamarosan ismert lesz.
megtalálható
lhatók egyes
betegsé
betegségokozó
gokozó emberi gének hasonmá hasonmásai, ezek
támpontul szolgá
szolgálhatnak e betegsé
betegségek új terá
terápiá
piáinak
kidolgozá
kidolgozásához. Pé
Példá
ldául az Alzheimer-
Alzheimer-kór
kialakulá
kialakulá sá ban szerepet já
átszó
j tszó egyik gé
génhez
hasonló
hasonlót talá
találtak fonalfé
fonalféregben, ennek segí
segítsé
tségével
remé
remélik új gyó
gyógyszer kifejleszté
kifejlesztését.

3. Egyes emberi hormonok, citokinek haszná

használatosak
gyó
gyógyszerké
gyszerként is (pé
(példá
ldául inzulin, interferon). Az
emberi DNS nukleotid sorrend alapjá
alapján má
már több új,
hormonjellegű anyagot
eddig ismeretlen emberi hormonjellegű
azonosí
azonosítottak és állí elő, ezek klinikai
llítottak elő
vizsgá
vizsgálata folyamatban van.

6
5. Az embert sú sújtó
jtó legfontosabb betegsé
betegségek (pé
(példá
ldául 6. Az ismert emberi gyó
gyógyszerek tö többnyire
rák, magas vé vérnyomá
rnyomás, érelmeszesedé
relmeszesedés, cukorbaj, valamilyen emberi fehé
fehérjé
rjével (a gyó
gyógyszer cécélpontja)
skizofré
skizofrénia, Parkinson-
Parkinson-kór stb.) a szó szó szoros való
való kölcsö
lcsönhatá
nhatás ré
révén hatnak. A jelenleg ismert
értelmé
rtelmében nem örökletes betegsé
betegségek. összes cécélpontok szá
száma 4- 4-500. A teljes DNS-
DNS-
Mai tudátudásunk szerint azonban kisebb nagyobb szekvencia ismereté
ismeretében elvileg valamennyi
mértértékben örökletes té nyezők, egyes gé
tényező eltérő
gének elté (tö
(többszá
bbszázezer) emberi fehé
fehérje megvizsgá
megvizsgálható
lható a
működése is szerepet já játszik e betegsé
betegségek gyógyszerkutató
gyó gyszerkutatók szá
számára, mint potenciá
potenciális cé
célpont.
lpont.
kialakulá
kialakulásában (pé (példá
ldául a cukorbaj eseté
esetében eddig
17 kü nböző
különbö gént azonosí
azonosítottak, amelyek
zreműködhetnek e kó
közremű kórké
rképben).
A terá
terápia szempontjá
szempontjából e té nyezők tisztá
tényező tisztázása sokat
elsősorban azé
jelenthet, első azért, mert a betegek
csoportosí
csoportosítható
thatók genetikai alapon, és a kü nböző
különbö
csoportokba tartozó
tartozó páciensek mind életmó letmódban,
mind gyó
gyógyszerezé
gyszerezésben más-más
má elbá
elbánást
igé
igényelhetnek.

7. A farmakogenomika nevűnevű új tudomá

tudomány azt 8. A má
már megvaló
megvalósult, de nyilvá
nyilvánvaló
nvalóan rohamosan
vizsgá
vizsgálja, hogy az emberi DNS nukleotid-
nukleotid- terjedő alkalmazá
terjedő alkalmazások kö között kell emlíemlíteni az
meglévő egyedi kü
sorrendben meglé különbsé
nbségek örökletes betegsé
betegségek DNS- DNS-diagnosztiká
diagnosztikáját. Itt
hogyan befolyá
befolyásoljá
solják a gyó
gyógyszerekre valóvaló tulajdonké
tulajdonképpen nem is helyes a betegsé betegség
érzé
rzékenysé
kenységet. Az USA-
USA-ban évente mintegy diagnosztiká
diagnosztikájáról beszé
beszélni, hiszen tö többnyire arró
arról
100 000 ember hal meg helytelen van szószó, hogy egé egészsé emberekről lehet
szséges emberekrő
gyó
gyógyszeralkalmazá
gyszeralkalmazás kö következté
vetkeztében. Ez a megá
megállapí
llapítani azt, hogy lá látens hordozó
hordozói-e egy
betegsé
betegségokozó
gokozó génnek, amelynek csalá családtervezé
dtervezési
szá
szám nem mű műhiba vagy hanyagsá
hanyagság miatt szempontbó jelentősége, vagy azt, hogy ké
szempontból van jelentő később
ilyen riasztó
riasztóan magas, hanem azé azért, mert ki fog-
fog-e ná
náluk alakulni a betegsé
betegség, esetleg azt, hogy
minden gyógyógyszerrel kapcsolatban lé léteznek tlagosnál hajlamosabbak-
az átlagosná hajlamosabbak-e valamely nem
egyé
egyének, akik szá
számára a szoká
szokásos adagban örökletes betegsé
betegségre (pé
(példá
ldául rá
rák). Ez kü
különösen
az adott gyó
gyógyszer mé rgező és má
mérgező más egyedek, akkor lehet fontos, ha életmó megelőző műtéttel
letmóddal, megelő
akikre a gyó
gyógyszer egyá
egyáltalá
ltalán nem hat. A lehetsé
lehetséges lé lépéseket tenni a betegsé
betegség kékésőbbi
kialakulásának
kialakulá megelőzésére.
megelő
farmakogenomika célja az, hogy
megvalósulhasson az egyedre, az egyed
megvaló
genetikai "alkatá
"alkatára" szabott
gyó
gyógyszerrendelé
gyszerrendelés.

9. A genetikai betegsé
betegségek
gyó
gyógyí
gyításának potenciá
potenciálisan
legfontosabb eszkö
eszköze az úgynevezett
génterá
nterápia, azaz ép gé működőképes
gén mű
bevitele a beteg egyé egyén sejtjeibe,
szervé
szervébe. Noha ez az eljá eljárás szá
számos
nehé
nehézsé
zséggel kü küzd és alkalmazá
alkalmazása
néhány bí bíztató
ztató kezdeti eredmé
eredménnyel
még csak kí kísérleti stá
stádiumban van,
nyilvá
nyilvánvaló
nvalóan a gé
gének teljes
megismeré
megismerése az elő előfelté
feltétele minden
jövőbeli alkalmazá
sikeres jö alkalmazásnak.

7
 PCR
Polimerase Chain Reaction

1
2
 A genomika genom lépté
ptékû bioló
biológiá
giát
jelent,

hogy a gének funkció

funkcióit megé
megértsü
rtsük vagyis azt, hogy a vizsgá
vizsgálatok
kiterjedhetnek akáakár az adott élõlé
lõlény
(pé
(példá
ldául az ember) összes gé génjé
njének
DNS-
DNS-szintû
szintû, illetve expresszió
expressziós (mRNS
és/vagy fehé
fehérje) analí
analízisé
zisére.
A teljes genom DNS-DNS-szintû
szintû
megkö
megközelí
zelítését szerkezeti, az
expresszió
expressziós vizsgá
vizsgálatokat pedig
funkcioná
funkcionális genomiká
genomikának nevezzü
nevezzük.

mutá
mutáció
ciók (példá
ldául nukleotidcsere)
nukleotidcsere)
jelenlé
jelenlétét vagy hiá
hiányá
nyát keressü
keressük. Ez a
módszer veleszü
veleszületett génhibá
nhibák, illetve
http://www.bio.davidson.edu/courses/g
az úgynevezett „single nucleotide
enomics/chip/chip.html
polymorphism”
polymorphism” (SNP) vizsgá
vizsgálatá
latára
haszná
használható
lható.
génexpresszió
nexpressziós profil

3
 Adatbá
Adatbányá
nyászá
szás – bioinformatika klón genetikailag azonos élőlények
A kló
összessé
sszességét jelenti.
jelenti.
Az identikus (egypeté
(egypetés, monozigotikus,
monozigotikus,
esetleg embrió
embriófelezé
felezéssel lé
létrehozott)
ikrek kló tekinthetők, mivel
klónoknak tekinthető
genetikailag azonos egyedek.

Idegen DNS bejuttatá

bejuttatása petesejtbe:

Egé
Egérbe nyú eredetű β-globin gént
nyúl eredetű Szuperegé
Szuperegér:
↓ Egé
Egér zigó
zigótába patká
patkány nö
növekedé
vekedési
kifejlődött egerek 15-
A kifejlő 15-20%-
20%-ban hormon gé
génjé
njét
kimutatható
kimutatható volt a nyú eredetű β-
nyúl eredetű ↓
globin fehé
fehérje ő
Különbö
nb öz m retű egerek
éretű

1.É
1.Érett petesejt A sejtmag-
sejtmag-átülteté
ltetéses kló
klónozá lehetőségei:
nozás lehető gei:
2. A petesejt DNS-
DNS-ének eltá eltávolí
volítása
Dolly szü
születé
letése forradalmian új volt a
3. Szeder-
Szeder- csí
4. Az embrió
csíra
embrió szé szétvá
tválasztá
lasztás sejtjeire
korá
korábbi kló
klónozá
nozásos kísérletekhez
5. Hó
Hólyagcsí
lyagcsíra felnőtt állat má
képest, mert egy felnő már
6. A hó
hólyagcsí
lyagcsíra embrió
szé
szétvá
tválasztá
embriócsomó
csomójának
lasztása sejtekre differenciá
differenciálódott sejtjé
sejtjét haszná
használtá
lták.
Embrionális őssejt-
7. Embrioná ssejt-tenyé
tenyészet
indí
indítása a hó hólyagcsí
lyagcsíra
embrió
embrió- csomó
csomójának
sejtjeiből
sejtjeibő A kló
klónozá
nozás alapjá
alapjául szolgá
szolgáló hámsejtek
Embrionális őssejtek
8. Embrioná
9. Sejttenyé
Sejttenyészet indí indítása már nem élő,
ugyanis egy akkor má
10. Sejttenyé
sejtekből
testi sejtekbő
Sejttenyészet- eredetű testi
szet-eredetű
haté tőgyé
hatéves, vemhes állat tő gyéből vett,
sejtek
11. Sejtmag-
Sejtmag-átülteté ltetés
lefagyasztott mintá
mintából szá
származtak.
12. A kló
klónkonstrukció
nkonstrukció
membrá
membránjá njának
elektrofú
elektrofúzióziója
13. Mestersé
Mesterséges zigó zigóta

első sikeres testi sejtes kló

14. Kló
Klónozá
nozással
előállí
elő llított hó
hólyagcsí
lyagcsíra első klónozá
nozás(1997)
15. Embrió
Embrióbeübeülteté
ltetés

4
Dolly és anyja Dolly utá
után mámás fajok eseté
esetében is
(szarvasmarha, egé egér, kecske, serté
sertés,
macska, nyú
nyúl, gaur,
gaur, banteng,
banteng, muflon,
öszvé
szvér, ló
ló, afrikai vadmacska;
összefoglaló
sszefoglaló cikket lálásd Dinnyé
Dinnyés et al.,
al.,
sikerült élő utó
2002) sikerü utódokat nyerni testi
sejtekből.
sejtekbő