ODREĐIVANJE ALANIN AMINOTRANSFERAZE

EC 2.6.1.2 ALT

Aminotransferaze su grupe enzima koji katalizuju konverciju aminokiselina, putem prenosa amino grupa.
ALT katalizuje prenos amino grupe sa L-alanina na 2-ketoglutarat, pri čemu nastaje piruvat i L-glutamat. Ova
reakcija je značajna u procesu glukoneogeneze.

COO¯ COO¯ COO¯ COO¯

I I ALT, P-5-P I I
H–C–NH3 + C=O –––––––→ C=O + H–C–NH3
I I ←––––––– I I
CH3 CH2 CH3 CH2
I I
CH2 CH2
I I
COO¯ COO¯

L-alanin 2-ketoglutarat piruvat L-glutamat

Pirodoksal-5-fosfat (P-5’-P) učestvije u reakciji kao koenzim koji posredno vezuje amino grupu za fosfatnu
grupu, a zatim je predaje 2-ketoglutaratu pri čemu nastaje L-glutamat.

ALT se naliazi u dve molekulske forme (izoenzimi), i to jedna koja potiče iz citoplazme, a druga koja potiče iz
mitohondrija. Ova dva izoenzima se međusobno razlikuju po kinetičkim , fizičkim i elektrohemijskim
osobinama.
Zahvaljujući razlici u elektroforetskoj pokretljivosti ovi izoenzimi se mogu određivati posebno.

Klinički značaj
ALT se pretežno nalazi u jetri ali ga ima i u bubrezima, sleletnim mišičima i pankreasu.Aktivnost ALT se
naročito povećava kod oštećenja jetre.
Vrednosti AST i ALT su zanačajno povaćene kod virusnog hepatitisa do 100 puta čak i pre pojave kliničkih
znakova bolesdti. Odnos ALT/AST koji je normalno manji od 1, postaje identičan ili čak veći od 1. Iako se nivo
AST i ALT povećava kod svakog oštećenja jetre, za ALT je dokazano da je specifičnija za tkivo jetre od AST.
Posle infarkta miokarda dolazi do povećanja aktivnosti AST u serumu dok je aktivnost ALT blago povećana ili
je u granicama normalnog.

Određivanje ALT

Katalitička aktivnost AST meri se na osnovu sledećih reakcija:

ALT
L-aspartat + 2-ketoglutarat ------------ piruvat + L-glutamat

LDH
piruvat + NADH + H+ ---------------- L-laktat + NAD+
LDH Laktat dehidrogenaza
Reakcija se može kvantitativno pratiti spektrofotometrijski zhvaljijući pretvaranju NADH u NAD +
na 339 ili 334 nm.

Referentne vrednosti

5-35 U/L na 30 stepeni C

ili 83,35-583,45 nkat/L