HEMOSZTÁZIS-A

1-2. előadás 2020

Tőzsér József
1
A HEMOSZTÁZIS DEFINÍCIÓJA
• Vérzés megakadályozása sérülés után
• Az érfal integritásának biztosítása és kijavításának képessége

2
A HEMOSZTÁZIS KULCSLÉPÉSEI
1. INICIÁLÁS
Érfal – endotél sejtek, szubendoteliális komponensek
2. LOKALIZÁCIÓ
Trombociták – cirkuláló celluláris elemek
3. PROPAGÁCIÓ/AMPLIFIKÁCIÓ
Plazma véralvadási faktorok
4. TERMINÁLÁS
Plazma véralvadási faktorok inhibitorai
5. ELIMINÁLÁS
Fibrinolitikus rendszer

3
A VÉRALVADÁS HÁROM FŐ KOMPONENSE:

érfal sérülés
Kontakt/
Szöveti
idegi
faktor

Érfal Trombociták Koagulációs

összehúzódása aggregációja Kaszkád

Primer hemosztatikus dugó

Csökkent Trombociták Fibrin

véráramlás aktivációja képződése

4
Stabil hemosztatikus dugó
A VÉRALVADÁS ÁTTEKINTÉSE:

5
KÉRDÉSEK
• Trombocita granulumok tipusai és tartalmuk.
• A hemosztatikus dugó kialakulásában szerepet játszó
trombocita mechanizmusok.
• Adhézió eseményei, receptorok.
• A trombocita aggregáció mechanizmusa.
• Trombocita aktiváló ágensek, aktivációs mechanizmusok.
• A trombocita aktiváció gátlása.

6
A VÉR ELEKTRONMIKROSZKÓPOS KÉPE

7
ALVADÉK ELEKTRONMIKROSZKÓPOS KÉPE

8
 Érfal
endotélium

Szubendotélium
SÉRÜLÉS
Szöveti
Kollagén vWF
Érfal faktor
összehúzódása

Trombocita adhézió Véralvadási kaszkád

és szekréció
Trombin

Trombociták aggregációja Fibrin

9
Stabil hemosztatikus dugó
PRIMER HEMOSZTÁZIS:
A TROMBOCITÁK FUNKCIÓJA

10
Nyugvó trombocita Aktivált trombocita
NYUGVÓ TROMBOCITA MORFOLÓGIÁJA
2-4 m átmérő (vvt: 6-8 m)

Miktrotubulus
Denz-tubuláris rendszer
Nyitott csatornarendszer
Glikogén
Lizoszóma
Mitokondrium
Denz testecske
-granulum

Plazma membrán

A trombociták megakariocitákból képződnek lefűződéssel

11
NYUGVÓ TROMBOCITA MORFOLÓGIÁJA
1. Perifériás zóna
Külső köpeny (membrán fehérjék, glükokalix)
Sejtmembrán: aszimmetrikus,
foszfatidil szerin csak a belső részen van
Szubmembrán régió (membrán szkeleton)

2. Szol-gél zóna (citoplazma és citoszkeleton)

Mikrotubuláris gyűrű (diszkosz alak fenntartása)
Mikrofilamentumok
a fehérjék > 50%-a kontraktilis fehérje

3. Organellumok
Mitokondriumok, Golgi maradványok
Granulumok (denz testecskék, -granulumok, lizoszómák)

4. Intracelluláris membránrendszerek
Nyitott csatorna rendszer (szekréció ezeken keresztül is)
Denz tubuláris rendszer (Ca2+ raktár) 12
A TROMBOCITA GRANULUMOK TARTALMA:
Denz testecskék (kevés van belőlük):
ATP, ADP, szerotonin,
Ca2+, Pi, PPi
-granulumok (sok van belőlük):
véralvadást segítő fehérjék:
V. faktor, fibrinogén
(véralvadási faktorok)
trombocita 4-es faktor (heparin hatás inhibitora)
-tromboglobulin (heparin hatás inhibitora)
PAI-1
mitogén fehérjék: PDGF, IGF-1, stb.
adhezív fehérjék:
von Willebrand faktor, trombospondin, fibronektin
Lizoszómák:
savi hidrolázok

TROMBOCITA CITOPLAZMA:
13
XIII. faktor (véralvadási faktor)
TROMBOCITÁK AKTIVÁLÓDÁSA
A trombociták aktiválódása: intracelluláris Ca2+ növekedése
Trombocita stimulálható fehérjékkel:
• kollagén és egyéb szubendotelális struktúrák/felszínek
• trombin – koagulációs kaszkád

Trombocita stimulálható kis móltömegű agonistákkal is:

• ADP/ATP – trombocitákból vagy sérült sejtekből
• PGH2/TXA2 – trombocitákból
• PAF – trombocitákból (foszfolipid)
• adrenalin – cirkuláló hormon

partikuláris vagy szolubilis ágensek

14
A HEMOSZTATIKUS DUGÓ KIALAKÍTÁSÁBAN
SZEREPET JÁTSZÓ TROMBOCITA
MECHANIZMUSOK

1. Adhézió
primer adhézió: kontaktus, alakváltozás, szétterülés
szekunder adhézió

2. Aggregáció

3. Szekréció

4. Prokoaguláns aktivitás

A lépések sorrendje az aktiváló ágenstől függ:

kollagén (partikuláris ágensek): 1  3  2  (4)

ADP: 2  3  2
trombin: 2  3  2  4
15
A TROMBOCITA MEMBRÁN LEGFONTOSABB
GLIKOPROTEIN RECEPTORAI
Receptor Glikoprotein Funkció

vWF receptor GP Ib-IX-V adhézió

(nagy nyíróerők esetén)
Kollagén receptor GP Ia-IIa (integrin 21 ) adhézió
(direkt)
GP VI (főleg szignalizáció) adhézió
Fibrinogén receptor GP IIb-IIIa (integrin IIb3) aggregáció
(szintén köti a von Willebrand faktort és egyéb RGD-fehérjéket is)

szignalizáció

16
TROMBOCITÁK ADHÉZIÓJA

trombocita

endotél sejt

kollagén
17
 VON WILLEBRAND FAKTOR RECEPTOR
GLIKOPROTEIN IB-IX-V KOMPLEX
Leucin-gazdag régió (LRR)

A GP Ib citoplazmatikus doménje a
membrán szkeletonhoz kötődik.
A receptor csak a felülethez kötött
von Willebrand faktorhoz kötődik
(konformációváltozás!!)
Intracelluláris szignalizációhoz vWF
mediálta GP Ib oligomerizáció kell.
A receptor nem az RGD szekvenciát
ismeri fel.

GP V
GP IX GP IX GP Ib-IX-V komplex trombin 18
GP Ib GP Ib GP Ib GP Ib receptorként is működik!
VON WILLEBRAND FAKTOR

Óriás molekula (600 kD - 10 MD), endotél sejtek, megakariociták

szintetizálják.

Csak az óriás multimer forma alkalmas a trombocita adhézióhoz.

A fehérje 250 kD alegységekből áll, ezeket diszulfid hidak tartják
össze. Minden alegységben van egy 24 kD A1 domén, ezen
keresztül kötődik a faktor a GPIb amino-terminális részéhez.
A keringésben a vWF a VIII. faktorral asszociálva van.
A vWF kollagén szálakhoz és egyéb szubendoteliális struktúrákhoz
képes kötődni, megváltozik a konformációja, majd kölcsönhatásba
léphet a következő trombocita receptorokkal:
GP Ib-IX-V (von Willebrand faktor receptor)
GP IIb-IIIa (fibrinogén receptor)
GP VI (kollagén receptor) 19
Szerepe: az adhézió és aggregáció elősegítése
 A GPIb / vWF KÖLCSÖNHATÁS
ALAPVETŐ JELENTŐSÉGŰ NAGY SEBESSÉGŰ
VÉRÁRAM ESETÉN

Diszkosz Guruló Gélgömb alakú Szétterült

alakú labda trombocita trombocita
trombocita alakú
trombocita

20
 A VON WILLEBRAND FAKTOR SZEREPE
A TROMBOCITA ADHÉZIÓBAN,
NAGY NYÍRÓERŐK ESETÉN
Egy A1 domén/vWF

7LRR
• A vWF szubendoteliális struktúrákhoz kötődik  konformáció változás.
• a trombocita kötődik a módosult szerkezetű vW faktorhoz: reverzibilis,
„guruló” adhézió.
• a reverzibilis guruló kölcsönhatás elegendő időt biztosít a többi, 21
kinetikailag lassú receptor- ligand kölcsönhatások kialakulásához.
TROMBOCITÁK AGGREGÁCIÓJÁBAN
SZEREPET JÁTSZÓ FAKTOROK

22
FIBRINOGÉN RECEPTOR
Glikoprotein IIb-IIIa komplex
Integrin receptor (IIb3) GP IIIa

A receptor csak a trombocita

aktiváció következtében
aktiválódik (konformáció
változással), nyugvó
trombocitákban nem
funkcióképes („dormant
receptor”)

RGD szekvenciát ismeri fel

a fibrinogénben,
von Willebrand faktorban,
fibronektinben, stb. GP IIb
23
TROMBOCITA INTEGRIN RECEPTOROK AKTIVÁCIÓJA

trombin
(TXA2, ADP)

trombin
TROMBOCITA AGGREGÁCIÓ: FIBRINOGÉN
KÖTŐDÉSE AZ AKTIVÁLT TROMBOCITÁK
GP IIB-IIIA RECEPTORÁHOZ

25
 TROMBOCITÁK AKTIVÁCIÓJA A SÉRÜLÉS HELYÉN

ADP, TXA2

adhézió (GPIb-vWF)  alacsony szintű aktiváció (GPVI-

kollagén)  release reakció (ADP, TXA2)  erős aktiváció 
fibrinogén receptor activáció  aggregáció
TROMBOCITA AKTIVÁCIÓ GÁTLÁSA
Trombocita aktiváció gátlása az intracelluláris cAMP és cGMP szint
növelésén keresztül valósul meg.
Trombociták aktiválódását gátolja:
• PGI2 – endotél sejtekből
• PGD2 – masztocitákból
• adenozin – hipoxiás sejtekből, ADP/ATP lebontásakor
keletkezik (ekto ADP-áz: CD39)
• NO – trombocitákból és endotél sejtekből

Általános szabály:
• trombocita aktiváló anyagok vazokonstriktor hatásúak
• trombocita gátló anyagok relaxáló hatásúak az érfalra

27
TROMBOCITA-ÉRFAL KÖLCSÖNHATÁS
• A trombocita-érfal kölcsönhatás határozza meg a kismértékű
trombocita aggregáció végső kimenetelét

• Az endotél tulajdonságai határozzák meg, hogy az aggregáció

tovább terjed, vagy visszafordul

• Egészséges, intakt endotél gátló anyagokat szekretál – PGI2 és NO

• Sérült endotél esetén

az aggregáció és a vazo-
konstrukció dominál –
TROMBÓZIS

28
TROMBOCITÁKBAN LEJÁTSZÓDÓ SZIGNÁL-
FOLYAMATOK
Kollagén
Endotélium
vWF
Trombin
(release)
NO
PLC GC
PLC PKC
cGMP PGI2
IP3 DAG cAMP
-
- AC
TXA2 TXA2 PLA2 Ca2+

fibrinogén
29
CIKLOOXIGENÁZ ÚTVONAL SZEREPE
A HEMOSZTÁZISBAN

30
A PAR-1 RECEPTOR
SZERKEZETE

31
TROMBOCITÁK PROKOAGULÁNS AKTIVITÁSA
Csak aktivált trombocitáknak van!!
A nyugvó trombociták esetében egy aktív mechanizmus biztosítja
a membrán foszfolipidek aszimmetrikus eloszlását.
A trombociták aktivációja során foszfatidil-szerin (PS)
transzlokálódik a külső membránba
A negatív töltésű PS biztosítja a felszínt a véralvadási faktorok
aktiválódásához

32
KÉRDÉSEK
• Trombocita granulumok tipusai és tartalmuk.
• A hemosztatikus dugó kialakulásában szerepet játszó
trombocita mechanizmusok.
• Adhézió eseményei, receptorok.
• A trombocita aggregáció mechanizmusa.
• Trombocita aktiváló ágensek, aktivációs mechanizmusok.
• A trombocita aktiváció gátlása.

33
RÖVID KÉRDÉSEK
• Mit nevezünk szűkebb ill. tágabb értelemben hemosztázisnak?
• Trombociták prokoaguláns aktivitásának lényege.
• Trombocita aktiváló ágensek.
• A trombocita membrán legfontosabb glikoprotein (GP) receptorai.
• A von Willebrand faktor receptor szerepe és működése.
• A trombociták fibrinogén receptorának szerepe és működése.

34