Machine Translated by Google

Suy thoái sinh học & Phân hủy sinh học quốc tế 49 (2002) 245 – 252
www.elsevier.com/locate/ibiod

Phân hủy sinh học của polyurethane: đánh giá

GaryT. Howard
Khoa Khoa học Sinh học, Đại học Đông Nam Louisiana, SLU 10736, Hammond, LA70402, Hoa Kỳ

trừu tượng

Thiếu khả năng phân hủy và việc đóng cửa các bãi chôn lấp cũng như các vấn đề ô nhiễm đất và nước ngày càng gia tăng đã dẫn đến mối lo ngại về nhựa.

Ngày càng có nhiều nguyên liệu thô như dầu thô bị thiếu hụt để tổng hợp nhựa và việc tái chế nhựa thải ngày càng trở nên quan trọng. Khi tầm quan trọng

của tái chế tăng lên, thì các nghiên cứu làm sáng tỏ khả năng phân hủy sinh học của polyurethan cũng tăng theo. Polyurethane là một loại polyme nhân tạo

quan trọng và linh hoạt được sử dụng trong nhiều loại sản phẩm trong lĩnh vực y tế, ô tô và công nghiệp. Polyurethane là một thuật ngữ chung được sử dụng

cho một loại polyme có nguồn gốc từ sự ngưng tụ của polyisocyanate và polyalcohol. Mặc dù có nguồn gốc xenobiotic, polyurethane đã được phát hiện là dễ

bị phân hủy sinh học bởi các vi sinh vật tự nhiên. Sự phân hủy polyurethan do vi sinh vật phụ thuộc vào nhiều đặc tính của polyme như định hướng phân tử,

độ kết tinh, liên kết ngang và các nhóm hóa học có trong chuỗi phân tử xác định khả năng tiếp cận hệ thống enzyme phân hủy. Hoạt động esterase (cả liên

kết màng và ngoại bào) đã được ghi nhận ở vi khuẩn cho phép chúng sử dụng polyurethane. Sự phân hủy polyester polyurethane do vi sinh vật được cho là chủ

yếu do quá trình thủy phân các liên kết este bởi các enzym esterase này. ? 2002 Elsevier Science Ltd. Bảo lưu mọi quyền.

Từ khóa: Polyurethane; Suy thoái; Polyurethaneza; Esteza

1. Giới thiệu
Polyurethane (PU) có mặt trong nhiều mặt của cuộc sống
hiện đại. Chúng đại diện cho một loại polyme đã được sử
dụng rộng rãi trong các lĩnh vực y tế, ô tô và công
nghiệp. Polyurethane có thể được tìm thấy trong các sản
phẩm như lông thú, sơn phủ, chất kết dính, vật liệu xây
dựng, đệm, đệm, sơn, chất đàn hồi và da tổng hợp.
Polyurethane đang thay thế các polyme cũ vì nhiều lý
do. Chính phủ Hoa Kỳ đang loại bỏ dần cao su clo hóa
trong hàng hải, máy bay và lớp phủ vì chúng có chứa hợp
chất hữu cơ dễ bay hơi nguy hiểm cho môi trường (Hegedus
et al., 1989; Reisch, 1990). Các nhà sản xuất ô tô đang
thay thế cao su latex trong ghế ô tô và đệm nội thất bằng
bọt PU vì mật độ thấp hơn và tính linh hoạt cao hơn
(Ulrich, 1983).
Ưu điểm khác của PU là chúng đã tăng cường độ sile và
điểm nóng chảy làm cho chúng bền hơn (Bayer, 1947). Khả
năng chống lại sự xuống cấp của nước, dầu và dung môi
khiến chúng trở nên tuyệt vời để thay thế nhựa (Saunders
và Frisch, 1964). Là lớp phủ, chúng thể hiện độ bám dính
tuyệt vời với nhiều chất, mài mòn
Điện thoại: +1-504-549-3501; fax: +1-504-549-3851.
Địa chỉ email: ghoward@selu.edu (GT Howard).
điện trở, tính chất điện và khả năng chống chịu thời tiết cho
các mục đích công nghiệp (Saunders và Frisch, 1964; Urbanski
et al., 1977; Fried, 1995).
2. Tính chất lý hóa của polyuretan
Polyurethane được sản xuất và nghiên cứu lần đầu tiên
bởi Tiến sĩ Otto Bayer vào năm 1937. Polyurethane là một
polyme trong đó đơn vị lặp lại chứa một nửa urethane.
Urethane là dẫn xuất của axit cacbamic chỉ tồn tại ở dạng
este của chúng (Dombrow, 1957). Cấu trúc này có thể được
biểu diễn bằng amit-este tổng quát của axit cacbonic sau
đây:
Ô
R–O–C–NH2
Các biến thể trong nhóm R và sự thay thế của hydro amit
tạo ra nhiều niệu đạo. Mặc dù tất cả các PU đều chứa các
nhóm urethane lặp lại, nhưng có thể bao gồm các nhóm khác
như urê, este, ete và chất thơm (Saunders và Frisch,
1964). Việc bổ sung các nhóm chức năng này có thể dẫn đến
ít gốc urethane hơn trong polyme so với các nhóm chức năng.

0964-8305/02/$ - xem mặt trước ? 2002 Elsevier Science Ltd. Bảo lưu mọi quyền.
PII: S 0964-8305(02)00051-3
Machine Translated by Google

246 GT Howard / Sự hủy hoại sinh học & Sự phân hủy sinh học quốc tế 49 (2002) 245 – 252

Liên kết urethane tạo ra dễ dàng nhất thông qua phản ứng của dẫn đến sự hình thành các vùng kết tinh. Điều này hạn chế khả
isocyanate, –N!C!O, với rượu, –OH (Dombrow, 1957; Kaplan et al., năng tiếp cận của các chuỗi polyme với các chất phân hủy.
1968). Nguyên tử hydro của nhóm hydroxyl được chuyển đến nguyên
tử nitơ của isocynanate (Bayer, 1947). Ưu điểm chính của PU là
chuỗi không chỉ bao gồm các nguyên tử carbon mà là các nguyên tử 4. Giảm thoái hóa polyurethane
dị hợp tử, oxy, carbon và nitro (Bayer, 1947). Công thức đơn giản
nhất cho PU là tuyến tính và được biểu diễn bởi Nghiên cứu đã được bắt đầu để làm sáng tỏ liệu các chất phụ gia

đến cấu trúc hóa học của PU có thể làm giảm quá trình phân hủy

sinh học. Kanavel và cộng sự. (1966) đã quan sát thấy rằng PU

polyester và polyether được xử lý bằng lưu huỳnh có một số tính trơ do nấm.
Ô Ô
Tuy nhiên, họ lưu ý rằng ngay cả khi thuốc diệt nấm được thêm
vào PU được xử lý bằng lưu huỳnh và peroxide, sự phát triển của
(–R–O–C–NH–R2–NH–C–O–)n
nấm vẫn xảy ra trên PU polyester và hầu hết các loại thuốc diệt
nấm đều có tác dụng phụ đối với công thức. Kanavel và cộng sự.
trong đó n là số lần lặp lại và R2 là chuỗi bon hydrocar. R là
(1966) cũng nhận ra sự cần thiết phải thử nghiệm vật lý đối với
hiđrocacbon chứa nhóm OH. Diisocyanate được sử dụng trong các
PU sau khi tiếp xúc lâu với hoạt động của nấm.
phản ứng sản xuất PU vì chúng sẽ phản ứng với bất kỳ hợp chất nào
Santerre và cộng sự. (1994) đã thay đổi lượng sản phẩm phân
có chứa hydro hoạt động (Dombrow, 1957).
hủy được giải phóng bằng cách thay đổi cấu trúc vật lý của PU
polyester, dưới dạng lớp phủ trên ống thủy tinh hoặc dưới dạng
Đối với các ứng dụng công nghiệp, có thể sử dụng hợp chất
phim. Điều này ngụ ý rằng trong khi các nhóm uretan và urê dễ bị
polyhydroxyl. Tương tự như vậy, các hợp chất nitơ đa chức năng
thủy phân, chúng không phải lúc nào cũng có thể tiếp cận được
có thể được sử dụng ở các liên kết amit. Bằng cách thay đổi và
với enzyme và sự phân hủy có thể không bao giờ tiến hành qua bề mặt polyme.
thay đổi các hợp chất polyhydroxyl và nitơ đa chức năng, các PU
Mặc dù các PU polyether không cho thấy sự xuống cấp đáng kể,
khác nhau có thể được tổng hợp (Dombrow, 1957). Nhựa polyester
nhưng chúng luôn cho thấy các sản phẩm có nhãn phóng xạ cao hơn
hoặc nhựa polyether có chứa các nhóm hydroxyl được sử dụng để sản
được giải phóng từ các mẫu được ủ bằng enzym, được đánh dấu phân
xuất polyester- hoặc polyether-PU tương ứng (Urbanski et al.,
đoạn mềm so với các mẫu đối chứng. Các tác giả cho rằng những kết
1977).
quả này là do sự che chắn của các vị trí este bằng các cấu trúc
Các biến thể về số lượng thay thế và khoảng cách giữa và
bậc hai và liên kết hydro gen trong phân đoạn cứng.
trong các chuỗi nhánh tạo ra các PU khác nhau, từ tuyến tính đến
Santerre và Labrow (1997) đã thử nghiệm tác động của kích
phân nhánh và linh hoạt đến cứng nhắc. PU tuyến tính được sử dụng
thước phân đoạn cứng đối với tính ổn định của PU chống lại sự
để sản xuất gờ và khuôn đúc (Urbanski et al., 1977). PU linh hoạt
phân cắt. Phân tích được thực hiện với PU polyether và tính nhạy
được sử dụng trong sản xuất chất kết dính và chất phủ (Saunders
cảm của chúng với cholesterol esterase. Ba PU polyether được tổng
và Frisch, 1964).
hợp với các tỷ lệ mol khác nhau của [14C]-diisocyanate để tạo
Chất dẻo xốp mềm và cứng, tạo nên phần lớn PU được sản xuất, có
thành chuỗi cấu tạo polyether mềm và không đổi. Sự gia tăng gấp
thể được tìm thấy ở nhiều dạng khác nhau trong công nghiệp (Fried,
10 lần nồng độ enzyme cholesterol esterase được sử dụng trước đây
1995). Sử dụng các hợp chất chuẩn bị polyme có khối lượng phân
(Santerre et al., 1994) đã được sử dụng để tiếp cận các giá trị
tử thấp, có thể tạo ra các chất đồng trùng hợp khối khác nhau.
cao nguyên đối với quá trình thủy phân PU polyether. Sau khi xử
Nhóm hydroxyl đầu cuối cho phép các khối xen kẽ, được gọi là các
lý bằng cholesterol esterase, Santerre và Labrow (1997) đã quan
phân đoạn, được chèn vào chuỗi PU. Sự thay đổi trong các phân
sát thấy rằng việc giải phóng nhãn phóng xạ phụ thuộc đáng kể vào
đoạn này dẫn đến mức độ khác nhau của độ bền kéo và độ đàn hồi.
lượng phân đoạn cứng có trong polyme. Trong polyme có nồng độ
Các khối cung cấp pha tinh thể cứng và chứa bộ mở rộng chuỗi được
phân đoạn cứng thấp nhất, số lượng nhóm cacbonyl tiếp xúc với bề
gọi là các đoạn cứng (Fried, 1995). Những chất tạo ra pha cao su
mặt cao hơn. Với kích thước phân đoạn cứng tăng lên, một số lượng
vô định hình và chứa polyester=polyether được gọi là phân đoạn
lớn hơn các nhóm carbonyl được tích hợp vào cấu trúc phân đoạn
mềm. Về mặt thương mại, những polyme khối này được gọi là PU phân
cứng thứ cấp thông qua liên kết hydro. Các nhà điều tra cũng kết
đoạn (Young và Lovell, 1994).
luận rằng sự gia tăng kích thước phân đoạn cứng dẫn đến hạn chế
tính di động của chuỗi polyme.

Trong lĩnh vực y tế, PU cho thấy khả năng chống lại quá trình

3. Sự xuống cấp của polyurethane
Sau nhiều năm sản xuất PU, các nhà sản xuất nhận thấy chúng dễ
bị xuống cấp. Các biến thể trong mô hình phân hủy của các mẫu PU
khác nhau được cho là do nhiều đặc tính của PU như cấu trúc liên
kết và thành phần hóa học (Pathirana và Seal, 1983). Các polyme
tổng hợp đều đặn cho phép chuỗi polyme đóng gói dễ dàng,
oxy hóa, thủy phân và vôi hóa của các đại phân tử (Marrant,
1992). Chất đàn hồi polyurethane đang được sử dụng thay thế cho
các chất đàn hồi khác do tính đàn hồi và độ dẻo dai cao hơn,
cũng như khả năng chống rách, oxy hóa và độ ẩm (Dombrow, 1957;
Saunders và Frisch, 1964; Ulrich, 1983). Ngoài ra, các dẫn xuất
polyether không tốn kém để sản xuất dưới dạng chuẩn bị polyme,
điều này có thể làm giảm chi phí sản xuất polyme tổng thể.
Machine Translated by Google
GT Howard / Sự hủy hoại sinh học & Sự phân hủy sinh học quốc tế 49 (2002) 245 – 252
Huang và Roby (1986) đã thử nghiệm khả năng phân hủy sinh học
của polyamide-niệu đạo cho mục đích y tế. Họ tổng hợp các PU có
kích thước với các đơn vị lặp lại dài và xen kẽ các nhóm amide và
urethane từ 2-aminoethanol. Kết quả là một phần bers kết tinh đã
được quan sát thấy trải qua quá trình thủy phân bởi subtilisin ít
dễ dàng hơn so với polyamitester với quá trình phân hủy diễn ra
theo cách chọn lọc. Các vùng vô định hình trên PU đã bị suy giảm
trước các vùng tinh thể. Những sợi vải này hứa hẹn là chỉ khâu và
mô cấy có thể hấp thụ được ở những nơi cần có sự phân hủy trong
cơ thể sống.
Các nhà điều tra cũng lưu ý rằng các PU có đơn vị lặp lại dài và
các nhóm ưa nước sẽ ít có khả năng đóng gói thành các vùng kết
tinh cao như PU thông thường và các polyme này dễ phân hủy sinh
học hơn.
Tăng và cộng sự. (1997) đã thêm các phân tử vĩ mô biến đổi bề
mặt (SMM) có chứa các nhóm cuối được uor hóa vào PU cơ bản để
giảm tính nhạy cảm của vật liệu đối với quá trình thủy phân bởi
các enzyme lysosomal. Urê-uretan polyester tổng hợp được đánh dấu
phóng xạ bằng [14C] và phủ lên các ống rỗng nhỏ. Các thí nghiệm
phân hủy sinh học đã được thực hiện bằng các phương pháp được
thiết lập trước đó bởi Santerre et al. (1994). Kết quả chỉ ra
rằng sự xuống cấp bị ức chế bởi bề mặt SMM. Các công thức SMM
khác nhau cung cấp các mức độ kháng enzym khác nhau. Cần lưu ý
rằng một số công thức SMM không tương thích với PU và dẫn đến
tăng khả năng phân hủy sinh học. Cơ chế ức chế không được suy
luận và sẽ là chủ đề của nghiên cứu thêm.
Trong nỗ lực tăng khả năng tương thích sinh học và giảm sự
bám dính của vi khuẩn trên bề mặt PU, Baumgartner et al. (1997)
tổng hợp PUs phosphonated. Họ đã sử dụng glycerophospho rylcholine
(GPC) làm chất mở rộng chuỗi, kết hợp các nhóm đầu phosphorylcholine
vào xương sống PU. Điều này đã mang lại cho bề mặt PU một số đặc
điểm của bề mặt tế bào hồng cầu. Các thử nghiệm vật lý trên PU
cho thấy độ bền kéo và nhiệt độ chuyển tiếp giảm nhẹ khi nồng độ
GPC tăng. Sự hấp thụ nước của PU được tăng lên với hàm lượng GPC
tăng lên. Để kiểm tra độ bám dính của vi khuẩn với PU, Baumgartner
et al. (1997) đã sử dụng buồng quay số. Họ truyền nuôi cấy
Staphylococcus aureus qua PU được phosphon hóa và không phosphon
hóa với tốc độ 8 ml min-1 . PU phosphonated cho thấy sự giảm độ
bám dính của vi khuẩn với hàm lượng GPC tăng lên.
5. Tăng thoái hóa polyurethane
Khả năng phân hủy kém và sự cạn kiệt ngày càng tăng của các
bãi chôn lấp cũng như các vấn đề về nước và đất ngày càng gia
tăng đã dẫn đến mối lo ngại về nhựa (Kawai, 1995). Khi ngày càng
có nhiều nguyên liệu thô (ví dụ như dầu thô) trở thành nguồn cung
cấp ngắn hạn cho quá trình tổng hợp chất dẻo, việc tái chế nhựa
phế thải đang trở nên quan trọng (Schnabel, 1981). Các vấn đề về
khả năng phân hủy đã thúc đẩy các nhà nghiên cứu điều tra việc
sửa đổi hoặc sản xuất dẫn đến PU có thể phân hủy về mặt hóa học
hoặc có thể phân hủy sinh học.
247
Hoàng và cộng sự. (1981) đã tạo ra PU polyester từ poly
caprolactonediols trong nỗ lực sản xuất PU có thể phân hủy sinh
học để sử dụng trong lĩnh vực y tế. Một số PU khác nhau được tạo
ra có chứa các tiểu đơn vị polyester có độ dài khác nhau. Các
polyme đã bị phân hủy bởi enzyme axion và hai loài nấm. Enzyme và
nấm phân hủy từng PU. Ngoài ra, người ta cũng lưu ý rằng có sự
gia tăng khả năng phân hủy sinh học của PU polyester với sự gia
tăng chiều dài chuỗi của polyester.
Trong một nghiên cứu sau đó, Phua et al. (1987) đã quan sát
thấy rằng hai enzyme phân giải protein, papain và urease đã phân
hủy PU polyester y tế. PU mà họ đã thử nghiệm là BiomerJ, PU
polyester liên kết chéo, phân đoạn. Mặc dù liên kết chéo trước
đây được mô tả như một cách ức chế sự phân hủy (Kaplan et al.,
1968), papain (trọng lượng phân tử 20:7 kDa) ít dicultyin xâm
nhập vào màng và gây ra sự phá vỡ tính toàn vẹn cấu trúc. Hoạt
tính của urease, do kích thước của nó (trọng lượng phân tử 473
kDa), bị giới hạn ở bề mặt PU và do đó không có ý nghĩa. Phua et
al. (1987) cũng đề xuất rằng papain đã phân hủy polyme bằng cách
thủy phân các liên kết uretan và urê tạo ra các nhóm amin và
hydroxyl tự do. Ảnh hưởng của papain lên polyether PU được đánh
giá bởi Marchant et al. (1987). So sánh hoạt động của papain với
quá trình thủy phân trong nước dẫn đến cả hai đều giải phóng các
sản phẩm thoái hóa. Các liên kết ether không bị thủy phân bởi
nước trong khi sự phân hủy của các nhóm urethane phụ thuộc vào sự
có mặt của enzyme phân giải protein.
Labrow và cộng sự. (1996) đã xử lý PU polyester và PU polyether
bằng elastase bạch cầu trung tính của người và elastase tuyến tụy
của lợn. PU polyester dễ dàng bị phân hủy bởi elastase của tuyến
tụy lợn với tốc độ cao gấp 10 lần so với elastase của bạch cầu
trung tính ở người. Tốc độ phân hủy PU polyester bởi elastase tụy
lợn cũng cao hơn 10 lần so với hoạt tính của nó đối với PU
polyether. Elastase bạch cầu trung tính của con người không có
hoạt động đáng kể đối với PU polyether. Những kết quả này cho
thấy sự tương đồng rõ rệt với sự phân hủy PU bởi cholesterol
esterase (Santerre và cộng sự, 1993, 1994; Santerre và Labrow,
1997). Sự ức chế elastase tụy lợn đã đạt được với chất ức chế đặc
hiệu elastase NMSAAPVCMK.
6. Phân hủy sinh học do nấm
Sau nhiều năm sản xuất PU, nhà sản xuất nhận thấy chúng dễ bị
xuống cấp. Các biến thể trong mô hình phân hủy của các mẫu PU
khác nhau được cho là do nhiều đặc tính của PU như định hướng
phân tử, độ kết tinh, liên kết ngang và các nhóm hóa học có trong
chuỗi phân tử xác định khả năng tiếp cận các hệ thống enzyme phân
hủy (Pathirana và Seal, 1983). Tính đều đặn trong các polyme tổng
hợp cho phép các chuỗi polyme đóng gói dễ dàng, dẫn đến sự hình
thành các vùng kết tinh. Điều này hạn chế khả năng tiếp cận của
chuỗi polyme đối với sự xuống cấp trong khi đó, các vùng vô định
hình trên PU có thể
Machine Translated by Google
248 GT Howard / Sự hủy hoại sinh học & Sự phân hủy sinh học quốc tế 49 (2002) 245 – 252
thoái hóa dễ dàng hơn. Huang và Roby (1986) đã quan sát thấy sự
phân hủy PU diễn ra một cách có chọn lọc, với các vùng vô định
hình bị phân hủy trước các vùng kết tinh. Ngoài ra, người ta
quan sát thấy rằng các PU có đơn vị lặp lại dài và các nhóm
thủy phân sẽ ít có khả năng đóng gói thành các vùng kết tinh
cao như polyurethan bình thường và các polyme này dễ phân hủy
sinh học hơn. Một số nhà điều tra đã đề xuất rằng vi sinh vật
tấn công PU có thể thông qua hoạt động enzym của các hydrolase
như urease, protease và esterase (Evans và Levisohn, 1968;
Hole, 1972; Flilip, 1978; Grin, 1980).
Một số báo cáo đã xuất hiện trong tài liệu về tính nhạy cảm
của PU đối với sự tấn công của nấm (Darbyand Kaplan, 1968;
Kaplan et al., 1968; Ossefort và Testroet, 1966).
Những nghiên cứu này cho thấy PU dạng polyester dễ bị nấm tấn
công hơn các dạng khác. Ngoài ra, PU polyether được ghi nhận
là có độ bền tương đối cao. Boubendir (1993) đã phân lập được
các enzyme có hoạt tính esterase và urethane hydrolase từ nấm
Chaetomium globosum và Aspergillus terreus. Những sinh vật này
không chỉ phát triển trên PU và các enzym phải được tạo ra. Quá
trình cảm ứng enzym được thực hiện bằng cách bổ sung PU
polyester lỏng vào môi trường nuôi cấy. Hoạt tính của enzim
được xác định bằng các xét nghiệm dựa trên etyl carbamat
(urêtan) làm chất nền nhân tạo.
Bốn loài nấm Curvularia senegalensis, Fusar ium solani,
Aureobasidium pullulans và Cladosporium sp. được phân lập dựa
trên khả năng sử dụng PU polyester dạng keo (Impranil DLNTM)
làm nguồn carbon và năng lượng duy nhất (Crabbe et al., 1994).
Curvularia senegalensis được quan sát thấy có hoạt tính phân
hủy PU cao hơn và do đó phân tích tiếp theo về phân lập nấm này
đã được thực hiện. Một polyurethanase ngoại bào (PUase) hiển
thị hoạt tính esterase đã được tinh chế từ sinh vật này. Pro
tein có khối lượng phân tử là 28 kDa, ổn định nhiệt ở 100
trong 10 phút và bị ức chế bởi phenylmethylsulphonyluoride
(PMSF).
Wales và Sagar (1988) đã đề xuất một cơ chế phân hủy PU
polyester bằng các este ngoại bào.
Sự phân hủy polyurethane là kết quả của hoạt động hiệp đồng
giữa endopolyurethanase và exopolyurethanase.
Các endoenzyme thủy phân phân tử PU tại các vị trí ngẫu nhiên
trong toàn bộ chuỗi polyme dẫn đến mất độ bền kéo. Tuy nhiên,
các exoenzyme loại bỏ các đơn vị monome liên tiếp khỏi các đầu
chuỗi, cho thấy ít mất mát về độ bền kéo.
7. Vi khuẩn phân hủy sinh học
Trong một thử nghiệm quy mô lớn về hoạt động của vi khuẩn
chống lại PU, Kay et al. (1991) đã nghiên cứu khả năng phân hủy
polyester-PU của 16 chủng vi khuẩn. Bảy trong số các chủng phân
lập được thử nghiệm phân loại PU khi môi trường được bổ sung
dịch chiết từ nấm men. Hai chủng vi khuẩn Corynebacterium sp.
và Pseudomonas aeruginosa, có thể làm suy giảm PU khi có mặt cơ bản
phương tiện truyền thông. Tuy nhiên, không có chủng nào phát triển trên PU một mình.
Các thử nghiệm vật lý của PU polyester đã phân hủy cho thấy sự
giảm khác nhau nhưng đáng kể về độ bền kéo và độ giãn dài đối
với từng mẫu phân lập. Trong một nghiên cứu sâu hơn, (Kay et
al., 1993), đã thử nghiệm những thay đổi về hóa học và vật lý
trong PU polyester đã được phân loại. Polyurethan lấy từ vi
khuẩn Coryne sp. các nền văn hóa đã giảm đáng kể về cả độ bền
kéo và độ giãn dài sau ba ngày ủ. Phân tích quang phổ kế hồng
ngoại cho thấy phân đoạn este của polyme là vị trí tấn công
chính.
Các nhà điều tra lưu ý rằng việc bổ sung môi trường bằng glucose
ức chế sản xuất esterase. Tuy nhiên, việc bổ sung PU không làm
tăng hoạt động của esterase.
Halim El-Sayed et al. (1996) đã thử nghiệm sự phát triển của
một số loài vi khuẩn trên sơn PU quân sự. Các nhà điều tra đã
phân lập được Acinetobacter calcoaceticus, hai loại Pseudomonas
sp., Pseudomonas cepacia và Arthrobacter globiformis. Ngoài ra,
Hải quân Hoa Kỳ đã cung cấp hai chủng A. calcoaceticus,
Pseudomonas aeruginosa và Pseu domonas putida. Tất cả các loài
đều có khả năng sử dụng sơn polyurethane làm nguồn năng lượng
và carbon duy nhất, ngoại trừ P. cepacia. Sử dụng uorescein
diacetate làm chất nền esterase, các loài còn lại cho thấy hoạt
động esterase khi không có PU. Dữ liệu này chỉ ra rằng các
PUase đã được biểu hiện cấu thành.
Trong một nghiên cứu bổ sung, chủng Comamonas acidovorans
TB-35 được phân lập từ các mẫu đất nhờ khả năng phân hủy
polyester PU (Nakajima-Kambe et al., 1995).
Các khối polyester PU rắn được tổng hợp với các phân đoạn
polyester khác nhau. Các khối này đã bị phân hủy hoàn toàn sau
7 ngày ủ khi chúng được cung cấp dưới dạng nguồn carbon duy
nhất và bị phân hủy 48% khi chúng là nguồn carbon và nitơ duy
nhất. Phân tích các sản phẩm phân hủy của PU cho thấy các chất
C chuyển hóa chính là từ phân đoạn polyester của polyme. Phân
tích sâu hơn về chủng TB-35 cho thấy rằng các sản phẩm phân hủy
từ polyester PU được tạo ra bởi hoạt động của esterase (Nakajima-
Kambe et al., 1997). Chủng TB-35 sở hữu hai enzym esterase, một
loại hòa tan, ngoại bào và một loại gắn màng. Enzym liên kết
màng đã được tìm thấy để xúc tác phần lớn quá trình phân hủy PU
polyester. Enzyme PUase gắn màng được tinh sạch và đặc trưng
(Akutsu et al., 1998). Protein có khối lượng phân tử 62 kDa, ổn
định nhiệt lên đến 65 C và bị ức chế bởi PMSF. Gen cấu trúc,
pudA, cho PU esterase được tạo dòng trong Escherichia coli. Khi
sắp xếp trình tự nucleotide của khung đọc mở (ORF), trình tự
axit amin được dự đoán chứa đặc tính chuyển động Gly-X-Ser-X-Gly
của serine hydrolase. Mức độ tương đồng cao nhất được phát hiện
với Torpedo californica acetylcholinesterase (T AchE), sở hữu
bộ ba xúc tác Ser–His–Glu, với dư lượng glutamate thay thế dư
lượng aspartate thông thường. Sự giống nhau về số lượng và vị
trí của các liên kết cysteine và muối là rất rõ ràng giữa PudA
và T AchE, cũng như sự đồng nhất của các trình tự và vị trí
của chúng trong vùng -helix và -strand giữa
Machine Translated by Google

GT Howard / Sự hủy hoại sinh học & Sự phân hủy sinh học quốc tế 49 (2002) 245 – 252 249

Bảng 1
một protein 63 kDa đã được nhân bản trong E. coli. Gen mã
Đặc điểm của PUase tinh khiết được phân lập bởi phòng thí nghiệm của chúng tôi
hóa PUase 65 kDa, pueA, đã được biểu hiện và giải trình tự
phân lập Tính đặc hiệu của ức chế nhiệt (Genebank, Accession AF069748). Một ORF, có độ dài 1854
vi khuẩn khối lượng phân tử Enzyme (kDa) ổn định nucleotide, đã được quan sát thấy trong phân tích mã bổ trợ
chèn nhân bản, bắt đầu với một codon AUG trong nucleotide
P. uorescens 29 P. protease PMSF + PMSF
uorescens 48bc P. Esteza 175 và dừng lại với một mã UGA trong nucleotide 2029. Tìm

chlororaphis 63bc P. Esterase=protease PMSF + PMSF + kiếm danh tính trong cơ sở dữ liệu với chương trình BLAST
chlororaphis 31 C. Esteza cho thấy sự tương đồng mạnh mẽ của ORF này với một số gen
acidovorans 42 Esterase=protease PMSF=TI + hoạt lipaza. Do đó, gen đã giải trình tự được gọi là pueA
tính aEnzyme (100%) sau 10 phút ở 100 C. bEnzyme đã được (polyurethanase-esterase A). Codon khởi đầu AUG có trước 7
nhân bản và thể hiện trong E. coli. cGene đã được giải trình nucleotide bởi vị trí liên kết hợp lý của ribosome với
tự.
AAGAGG. PueA protein được suy ra có 617 gốc axit amin và
khối lượng phân tử là 65 kDa. Trình tự axit amin được mã hóa
của PueA được liên kết với sáu lipase ngoại bào khác từ
cả hai. Trong vùng lân cận dư lượng glutamate của miền xúc Pseudomonas uorescens và Serratia marcescens. Trình tự axit
tác Ser199–His433– Glam324 của PudA, có ba miền kỵ nước, một amin PueA cho thấy sự đồng nhất cao với các lipase này (từ

trong số đó cấu thành miền liên kết bề mặt, xảy ra ở đầu C
của hầu hết các vi khuẩn poly(hydroxyalkanoate) (PHA)
depolyme hóa.
Các báo cáo trước đây trong tài liệu về sự xuống cấp của
PU đã tập trung vào sự tấn công của nấm với một số nghiên
cứu đề cập đến sự xuống cấp của vi khuẩn đối với các polyme
này. Blake và Howard (1998) đã báo cáo sự phân hủy vi khuẩn
của polyester PU (Im pranil DLN) bởi một loài Bacillus. Mô
hình thoái hóa liên quan đến sự gắn kết của các tế bào với
polyme với sự hình thành oc sau đó, và sự thoái hóa của chất nền. vị trí được bảo tồn. Điều thú vị là, vị trí của mô-đun bài
Một số thành viên của chi Pseudomonas đã được phân lập vì
khả năng sử dụng PU polyester làm nguồn năng lượng và bon
xe duy nhất. Phòng thí nghiệm của chúng tôi hiện đang nghiên
cứu các enzyme và gen PUase mã hóa chúng từ ba loài
Pseudomonas (Bảng 1). Điều thú vị là ba loài vi khuẩn tạo
ra các hoạt động PUase khác nhau nhưng bị ức chế bởi chất
ức chế hydrolase byserine. Những dữ liệu này gợi ý rằng hoạt
động của esterase và=hoặc protease có liên quan đến sự phân
hủy của Impranil.
Sự phát triển của Comamonas acidovorans trên PU dẫn đến
thu được các thông số tăng trưởng cho KS và
tối đavà
0:3
0:7
mg nhân
ml 1đôi
h 1 , tương ứng (Allencủa
và chúng
cộng sự,
tôi 1999).
đã tinhPhòng
chế và
thímônghiệm
tả
enzyme PUase 42 kDa thể hiện hoạt tính esterase=protease
(Allen và cộng sự, 1999). Nakajima-Kambe và cộng sự. (1995,
1997) đã báo cáo một chủng Comamonas acidovoranscó thể sử
dụng PU polyester rắn làm nguồn carbon và nitơ duy nhất. Các
58% đến 75%).
Hai vùng được bảo tồn cao đã được quan sát đối với PueA
và các lipase ngoại bào (Hình 1). Miền xúc tác giả định cho
serine hydrolase, axit amin 203–211, đã được phục vụ. Mô típ
trình tự, GHSLG, cũng như vị trí được bảo toàn trong số bảy
polypeptide. Ngoài ra, một khu vực bảo tồn thứ hai đã được
quan sát cho PueA và sáu lipase. Một mô típ phổ biến giữa
các lipase được tiết ra đã được quan sát thấy ở các axit
amin 364 – 400. Mô típ trình tự tiết ra, GGXGXDXXE cũng như
tiết luôn là 163 gốc axit amin xuôi dòng từ mô-đun xúc tác
giả định cho mỗi trong số bảy polypeptit.
Gen mã hóa protein 31 kDa chưa được phân lập, tuy nhiên,
thư viện P. chlororaphis được tạo ra hiện đang được kiểm
tra sự hiện diện của nó. Ngoài ra, một gen PUase thứ hai đã
được nhân bản và giải trình tự. PueB mã hóa PUase 60 kDa và
cũng chứa chất xúc tác giả định đóng vai trò chính cho các
hydrolase serine cũng như mô típ trình tự bài tiết,
GGXGXDXXE. Thật thú vị, pueA và pueB được chứa trong một
operon tương tự như operon protein ABC được tìm thấy trong
Pseudomonas uorescens (Hình 2).
Toán hạng PUase được đề xuất chứa PueA và PueB trong P.
chlororaphis dường như là một sự sắp xếp lại hoặc một sự
kiện chèn vào giữa hai toán hạng protein ABC được quan sát
thấy trong P. uorescens.

tác giả này đã chỉ ra vai trò của hoạt động esterase gắn Sự phát triển của Pseudomonas uorescens trên PU dẫn đến

màng ngoại bào trong quá trình thoái biến PU. Tinh sạch
esterase gắn màng cho thấy một protein không bền với nhiệt
có khối lượng phân tử 62 kDa (Akutsu et al., 1998).
Sự phát triển của Pseudomonas chlororaphis trên
polyurethane dẫn đến các giá trị lần lượt là 0:9 mg ml
1:3 h 1 đối với KS vàPUase
enzyme max (Ruiz và tinh
đã được cộng sạch
sự, 1999a). Hai
và đặc trưng,
một esterase 65 kDa=protease và một esterase 31 kDa (Ruiz
et al., 1999b). Enzyme PUase thứ ba, 60 kDa esterase, đã
được tinh sạch một phần và đặc trưng (Ruiz et al., 1999a).
Ngoài enzyme, mã hóa gen PUase
các giá trị lần lượt là 0:9 mg ml 1 và 1:6 h 1 đối với KS
và max (Howard và Blake, 1999). Hai enzyme PUase đã được
tinh chế và đặc trưng từ phân lập vi khuẩn này, một protease
29 kDa (Howard và Blake, 1999) và một esterase 48 kDa (Vega
et al., 1999). Ngoài ra, đối với enzyme của PUase, gen mã
1 và hóa protein 48 kDa đã được sao chép và biểu hiện ở E. coli
(Vega et al., 1999). PulA mã hóa gen đã được giải trình tự
(Genebank, Accession AF144089). Trình tự axit amin suy ra
có 461 gốc axit amin và khối lượng phân tử là 49 kDa. Trình
tự axit amin PulA thể hiện tính đồng nhất cao với sáu lipase
(58–75%) và PueA từ
Machine Translated by Google

250 GT Howard / Sự hủy hoại sinh học & Sự phân hủy sinh học quốc tế 49 (2002) 245 – 252

MỘT Trang web đang hoạt động

% Danh tính

Pseudomonas fluorescens SIK W1 202- Val Được Gly Của anh ấy Được Sư Tử Gly Gly Sư Tử -210 58
Pseudomonas fluorescens B52 203- Val Được Gly Của anh ấy Được Sư Tử Gly Gly Sư Tử -211 70
Pseudomonas LS107d2 203- Val Được Gly Của anh ấy Được Sư Tử Gly Gly Sư Tử -211 67
Serratia marcescens SM6 203- 202- 203- Val Được Của anh ấy Được Sư Tử Sư Tử -211 61
xin chào xin chào xin chào

Serratia marcescens Sr41 Với Được Của anh ấy Được Sư Tử Sư Tử -210 61

xin chào xin chào xin chào

Pseudomonas clororaphis Val Được Của anh ấy Được Sư Tử Sư Tử -211 --

xin chào xin chào xin chào

Pseudomonas huỳnh quang 180- Val Được xin chào

Của anh ấy Được Sư Tử xin chào xin chào Của -188 85

Serratia marcescens SM6 364- ETHSGPTFI Tôi GSDGNDL tôi g

g g KNYERGDFĐ. L g Đ. Đ. TÔI r -400
Serratia marcescens Sr41 363- ETHSGPTFI Tôi GSDGNDL tôi g
g g KNYERGDFĐ. L g Đ. Đ. TÔI r -399
Pseudomonas fluorescens SIK W1 363- EPHTGNTFI Tôi GSDGNDL IQKAFEGGDI g g g Đ. TÔI g K N t r -399
Pseudomonas huỳnh quang B52 363- ĐẠO ĐỨC Tôi GSDGNDL IQNAFEGGDI g g g Đ. TÔI g K N t r -399
Pseudomonas LS107d2 363- ĐẠO ĐỨC TÔI GSAGNDL IQKAFEAGDI g g g Đ. TÔI MỘT K N t r -399

Pseudomonas clororaphis 364-ETH K GST F TÔI

TÔI
GSDGNDL IQSNYEGGDF g g g Đ. L g MỘT N t r -400
Pseudomonas huỳnh quang 340- EA GTI HK N F TÔI GD SG L
Đ. TỪ
K g
g g RAFEGGDI
Đ. TÔI g K N t P -376

Trình tự đồng thuận GGXGXDXXX

Hình 1. So sánh các vị trí hoạt động và vị trí bài tiết giả định cho PueA từ P. chlororaphis và sáu lipase ngoại bào. Các con số chỉ vị trí của các gốc
axit amin trong chuỗi protein. Phần trăm nhận dạng của gen hoàn chỉnh khi so sánh với PueA được chỉ định. Bảng A, Vùng trang web đang hoạt động với
phần còn lại giống hệt nhau được đóng hộp. Bảng B, Vùng tín hiệu bài tiết với dư lượng giống hệt nhau được tô bóng.

Pseudomonas fluorescens (Gia nhập Ngân hàng Gene# AF083061)

Chất đạm ABC Protein tổng hợp màng Protein màng ngoài
ổn nhiệt Liasep

Pseudomonas fluorescens (Gia nhập Ngân hàng Gene # AB015053)

Chất đạm ABC Protein tổng hợp màng Protein màng ngoài Psp A Psp B Lipase ổn định nhiệt

Pseudomonas chlororaphis (Hệ thống đề xuất)

Chất đạm ABC PueB Puê A

Protein tổng hợp màng Protein màng ngoài Psp A Psp B

Hình 2. So sánh operon trình báo ABC từ Pseudomonas uorescens và operon PUase từ Pseudomonas chlororaphis. Protein phóng viên ABC, protein dung hợp
màng và protein màng ngoài tham gia vào quá trình chuyển vị của protein ngoại bào. Các protein PspA và PspB là các chất tương đồng serine protease.

P. chlororaphis (85%). Kích thước của pulA mRNA được xác định với carbohydrate bổ sung và được sử dụng để cấy vào đĩa thạch
bằng phân tích Western blot. Một bản phiên mã 1500 nucleotide Impranil DLN polyester polyurethane CRF-M + PU).
đã được phát hiện từ P. uorescens phát triển trong các nguồn Anaerovibrio lipolytica liên tục tạo ra các vùng trống lớn
carbon khác nhau. Phân tích phiên mã chỉ ra rằng gen pulA được liền kề với các khuẩn lạc hoặc vệt có thể dễ dàng nhìn thấy mà
biểu hiện cấu thành. Mã hóa gen cho protease 29 kDa chưa được không bị nhuộm màu bằng mắt thường. Các khoảng trống được đánh
phân lập, tuy nhiên, thư viện P. uorescens được tạo ra hiện dấu rõ ràng khi quan sát trên hộp đèn và sau khi nhuộm
đang được sàng lọc để phát hiện sự hiện diện của nó. Coomassie Blue (Howard và Hilliard, 1999).
Rất có khả năng là có thể phân lập được nhiều loại vi khuẩn
Vì sự phân hủy kỵ khí của chất thải rắn như polyurethane là kị khí phân hủy mỡ khác với hoạt tính phân hủy polyurethane.
một lựa chọn hấp dẫn cho cả việc xử lý chất thải và chuyển đổi
sinh học thành các sản phẩm cuối cùng có khả năng hữu ích nên
một loạt các phân lập vi khuẩn kỵ khí đã được chọn từ bộ sưu
tập nuôi cấy của chúng tôi dựa trên hoạt động phân giải protein 8. Phân hủy polyurethane bởi enzyme polyurethanase
được ghi nhận. Anaerovibrio lipolytica cũng được đưa vào và là
chủng duy nhất được biết là có hoạt tính phân giải mỡ trong bộ
sưu tập nuôi cấy của chúng tôi. Các chủng phân lập được thử Các phân tử enzyme có thể dễ dàng tiếp xúc với các cơ chất
nghiệm bao gồm Clostridium per tuabin 3624A và 3624BWT, hòa tan trong nước, do đó cho phép phản ứng enzyme diễn ra
Butyrivibrio brisolvens H17c, Prevotella ruminicola GA33, nhanh chóng. Tuy nhiên, các phân tử enzyme được cho là có một
Selenomonas rumi nantium GA192 và Anaerovibrio lipolytica 7553. hợp đồng cực kỳ kém hiệu quả với các cơ chất không hòa tan (ví
Các chủng vi khuẩn được nuôi cấy trong môi trường chứa uid dạ cỏ biến dụ
đổi
như PU). Để vượt qua điều này
Machine Translated by Google
GT Howard / Sự hủy hoại sinh học & Sự phân hủy sinh học quốc tế 49 (2002) 245 – 252
Pseudomonas
PudA
Bề mặt Polyurethane
Hình 3. Mô hình giả định về vai trò của enzyme PUase trong quá trình phân hủy polyurethane. PudA là một protein liên quan đến tế bào. PueA và PueB là các
protein ngoại bào. 4 đại diện cho miền xúc tác của PUase, đại diện cho miền liên kết cơ chất của PUase.
trở ngại, các enzyme phân hủy chất nền không hòa tan có một
số đặc tính cho phép chúng bám vào bề mặt của chất nền không
hòa tan (van Tilbeurgh et al., 1986; Fukui et al., 1988;
Hansen, 1992).
Các quan sát được thực hiện bởi Akutsu et al. (1998) đối
với polyurethanase PudA chỉ ra rằng enzyme này phân hủy PU
trong phản ứng gồm hai bước: hấp phụ kỵ nước lên bề mặt PU,
sau đó là quá trình thủy phân các liên kết este của PU. PU
esterase được coi là có miền liên kết kỵ nước-PU-bề mặt (SBD)
và miền phân tích mèo. SBD đã được chứng minh là cần thiết
cho sự xuống cấp của PU. Cấu trúc này được quan sát thấy
trong PudA cũng đã được báo cáo trong poly(hydroxyalkanoate)
(PHA) depolymerase, làm suy giảm PHA. PHA là một tổng hợp
polyester không hòa tan được sử dụng làm thức ăn dự trữ cho
vi khuẩn. Trong các enzyme PHA depolymerase, SBD kỵ nước đã
được xác định bằng cách phân tích trình tự axit amin và các
đặc tính sinh học và hóa lý khác nhau của nó (Fukui et al.,
1988; Shinomiya et al., 1997). Một loại enzyme khác có chứa
SBD là cellulase. Một số enzym xenlulaza đã được quan sát
thấy có chứa ba yếu tố cấu trúc chính: phần thủy phân chính,
vùng bản lề linh hoạt và vùng đuôi C-terminator liên quan
đến liên kết cơ chất (Knowles et al., 1987; Bayer et al.,
1985; Langsford và cộng sự, 1987).
Cho đến nay, chỉ có hai loại enzyme PUase đã được phân
lập và đặc trưng: PU-esterase liên kết với màng tế bào
(Akutsu et al., 1998) và PU-esterase ngoại bào hòa tan (Ruiz
et al., 1999b; Allen et al. cộng sự, 1999; Vega và cộng sự,
1999). Hai loại PUase dường như có vai trò riêng biệt trong
quá trình phân hủy PU. PU-esterase liên kết màng sẽ cho phép
tiếp xúc qua trung gian tế bào với chất nền PU không hòa tan
trong khi đó, PU-esterase ngoại bào không có tế bào sẽ liên
kết với bề mặt của chất nền PU và quá trình thủy phân tiếp
theo (Hình 3). Cả hai hoạt động của enzyme sẽ có lợi cho vi
khuẩn phân hủy PU. Sự kết dính của tế bào vi khuẩn với chất
nền PU thông qua PUase sẽ cho phép quá trình thủy phân chất
nền thành các chất chuyển hóa hòa tan, sau đó sẽ được tế bào
chuyển hóa. Cơ chế phân hủy PU này sẽ làm giảm sự cạnh tranh
giữa tế bào phân hủy PU với các tế bào khác và cũng cho
phép tiếp cận đầy đủ hơn với các chất chuyển hóa. PU-esterase
ngoại bào, hòa tan sẽ lần lượt thủy phân polyme thành các
đơn vị nhỏ hơn cho phép chuyển hóa các sản phẩm hòa tan và
các enzym tiếp cận dễ dàng hơn với polyme bị phân hủy một
phần.
251
PuêA PueB
Người giới thiệu
Akutsu, Y., Nakajima-Kambe, T., Nomura, N., Nakahara, T., 1998.
Tinh chế và tính chất của enzyme phân hủy polyester polyurethane từ
Comamonas acidovorans TB-35. Vi sinh Môi trường Ứng dụng64, 62–67.
Allen, A., Hilliard, N., Howard, GT, 1999. Tinh chế và xác định đặc tính của
enzyme phân hủy polyurethane hòa tan từ Comamonos acidovorans. Sự suy
thoái sinh học & sự phân hủy sinh học quốc tế 43, 37–41.
Baumgartner, JN, Yang, CZ, Cooper, SL, 1997. Phân tích đặc tính vật lý và
khả năng bám dính của vi khuẩn trên một loạt polyurethan được phosphon
hóa. Vật liệu sinh học 18, 831–837.
Bayer, O., 1947. Polyurethane. Nhựa hiện đại 24, 149–152.
Bayer, EA, Setter, E., Lamed, R., 1985. Tổ chức và phân bố xenluloza trong
Clostridium thermocellum. Tạp chí Vi khuẩn học 163, 552–559.
Blake, RC, Howard, GT, 1998. Sự bám dính và phát triển của Bacillus sp. trên
polyesterurethane. Sự suy thoái sinh học & sự phân hủy sinh học quốc tế
42, 63–73.
Boubendir, A., 1993. Tinh chế và đánh giá sinh hóa các enzyme phân hủy
polyurethane có nguồn gốc từ nấm. Luận văn Tóm tắt Quốc tế 53, 4632.
Crabbe, JR, Campbell, JR, Thompson, L., Walz, SL, Schultz, WW, 1994. Sự phân
hủy sinh học của polyurethane dựa trên este dạng keo bởi nấm đất. Sự suy
giảm sinh học và sự phân hủy sinh học quốc tế 33, 103–113.
Darby, RT, Kaplan, AM, 1968. Tính nhạy cảm với nấm của polyurethan.
Vi sinh ứng dụng16, 900–905.
Dombrow, BA, 1957. Polyurethane. Tổng công ty xuất bản Reinhold,
Newyork.
Evans, DM, Levisohn, I., 1968. Xử lý sinh học polyurethane gốc polyester.
Bản tin Khử độc Sinh học Quốc tế 4, 89–92.
Flilip, Z., 1978. Sự phân hủy polyurethane trong bãi chôn lấp rác rò rỉ nước
và các vi sinh vật trong đất. Tạp chí Vi sinh Ứng dụng Công nghệ Sinh học
Châu Âu5, 225–231.
Fried, JR, 1995. Khoa học và Công nghệ Polyme. Prentice-Hall, PTR, Englewood
Clis, NJ.
Fukui, T., Narikawa, T., Miwa, K., Shirakura, Y., Saito, T., Tomita, K.,
1988. Ảnh hưởng của sự biến đổi trypic hạn chế của depolymerase poly(3-
hydroxybutyrate) của vi khuẩn trên chất xúc tác của nó hoạt động.
Biochimica Biophysica ACTA 952, 164–171.
Grin, GJL, 1980. Polyme tổng hợp và môi trường sống. Nguyên chất
và Hóa học Ứng dụng52, 389–407.
Halim El-Sayed, AHMM, Mahmoud, WM, Davis, EM, Coughlin, RW, 1996. Phân hủy
sinh học lớp phủ polyurethane do vi khuẩn phân hủy hydrocacbon. Sự suy
thoái sinh học & sự phân hủy sinh học quốc tế 37, 69–79.
Hansen, CK, 1992. Các trình tự giống Fibronectin loại III và một loại miền
mới trong depolymerase của sinh vật nhân sơ với cơ chất không hòa tan.
FEBS Letters 305, 91–96.
Hegedus , CR , Pulley , DF , Spadafora , SJ , Eng , AT , Hirst , DJ , 1989 .
Đánh giá về công nghệ phủ hữu cơ cho máy bay hải quân Hoa Kỳ. Tạp chí
Công nghệ Lớp phủ61, 31–42.
Machine Translated by Google

252 GT Howard / Sự hủy hoại sinh học & Sự phân hủy sinh học quốc tế 49 (2002) 245 – 252

Hole, LG, 1972. Da nhân tạo. Báo cáo về tiến độ áp dụng Pathirana, RA, Seal, KJ, 1983. Gliocladium roseum (Bainier), Một chất diệt khuẩn

Hóa học57, 181–206. tiềm năng của chất đàn hồi polyester polyurethane.

Howard, GT, Blake, RC, 1999. Sự phát triển của Pseudomonas uorescens trên polyester- Suy thoái sinh học 5, 679–689.

polyurethane và quá trình tinh chế và mô tả đặc tính của enzyme polyurethanase- Phua, SK, Castillo, E., Anderson, JM, Hiltner, A., 1987. Sự phân hủy sinh học của

protease. Sự suy giảm sinh học và sự phân hủy sinh học quốc tế 42, 213–220. polyurethane trong ống nghiệm. Tạp chí Nghiên cứu Vật liệu Y sinh 21, 231–246.

Howard, GT, Hilliard, NP, 1999. Sử dụng tương tác Coomassie blue-polyurethane trong Reisch, MS, 1990. Các nhà sản xuất sơn hàng hải cố gắng đáp ứng các mối quan tâm về

sàng lọc các protein polyurethanase và vi khuẩn polyurethanolytic. International môi trường. Bản tin Hóa học và Kỹ thuật 17, 39–68.

Biodeterioration & Biodegrada tion 42, 23–30. Ruiz, C., Hilliard, N., Howard, GT, 1999a. Sự phát triển của Pseudomonas chlororaphis

trên polyester-polyurethane và quá trình tinh chế và mô tả đặc tính của enzyme

Huang, SJ, Macri, C., Roby, M., Benedict, C., Cameron, JA, 1981. polyurethanse-esterase. Sự suy giảm sinh học và sự phân hủy sinh học quốc tế 43,

Phân hủy sinh học polyurethane có nguồn gốc từ polycaprolactonediols. 7–12.

Trong: Edwards, KN (Ed.), Urethane Chemistryand Applications. Ruiz, C., Main, T., Hilliard, N., Howard, GT, 1999b. Tinh chế và mô tả đặc tính của

Hiệp hội Hóa học Hoa Kỳ, Washington, DC, trang 471–487. hai enzyme polyurethanse từ Pseudomonas chlororaphis. Sự suy thoái sinh học &

Huang, SJ, Roby, MS, 1986. Polyme phân hủy sinh học poly(amide-urethanes). Tạp chí sự phân hủy sinh học quốc tế 43, 43–47.

Polyme tương thích hoạt tính sinh học 1, 61–71.

Santerre, JP, Labrow, RS, 1997. Ảnh hưởng của kích thước phân đoạn cứng đến tính

Kanavel, GA, Koons, PA, Lauer, RE, 1966. Kháng nấm của niệu đạo có thể nghiền được. ổn định thủy phân của polyether-urea-urethane khi tiếp xúc với cholesterol

Thế giới cao su 154, 80–86. esterase. Tạp chí Nghiên cứu Vật liệu Y sinh 36, 223–232.

Kaplan, AM, Darby, RT, Greenberger, M., Rodgers, MR, 1968.

Sự xuống cấp do vi sinh vật của các hệ thống polyurethane. Những phát triển Santerre, JP, Labrow, RS, Adams, GA, 1993. Tương tác enzyme-vật liệu sinh học: ảnh

trong Vi sinh công nghiệp82, 362–371. hưởng của hệ thống sinh học đối với sự phân hủy của polyurethan.

Kay, MJ, McCabe, RW, Morton, LHG, 1993. Những thay đổi về hóa học và vật lý xảy ra Tạp chí Nghiên cứu Vật liệu Y sinh 27, 97–109.

trong polyester polyurethane trong quá trình phân hủy sinh học. Santerre , JP , Labow , RS , Duguat , DG , Ere , D. , Adams , GA .

Sự suy giảm sinh học và sự phân hủy sinh học quốc tế 31, 209–225. Đánh giá sự phân hủy sinh học của polyether và polyester-urethane bằng các

Kay, MJ, Morton, LHG, Prince, EL, 1991. Sự phân hủy polyester polyurethane do vi enzyme oxy hóa và thủy phân. Tạp chí Nghiên cứu Vật liệu Y sinh 28, 1187–1199.

khuẩn. Bản tin Khử độc Sinh học Quốc tế 27, 205–222.

Saunders, JH, Frisch, KC, 1964. Polyurethane: Hóa học và Công nghệ, Phần II: Công

Kawai, F., 1995. Vi sinh vật phân hủy nhựa và polyme. nghệ. Nhà xuất bản Interscience, New York.

Những tiến bộ trong Kỹ thuật Hóa sinh=Công nghệ Sinh học52, 151–194. Schnabel, W., 1981. Phân hủy polymer: Nguyên tắc và ứng dụng tiềm năng. Macmillan

Knowles, J., Lehtovaara, P., Teeri, T., 1987. Các họ cellulase và gen của chúng. Xu Publishing Co., Inc., New York, trang 178–215.

hướng Công nghệ sinh học5, 255–261. Shinomiya, M., Iwata, T., Kasuya, K., Doi, Y., 1997. Nhân bản gen cho poly(3-

Labrow, RS, Ere, DJ, Santerre, JP, 1996. Quá trình thủy phân do elastase gây ra đối hydroxybutyric acid) depolymerase của Comamonas testosteroni và phân tích chức

với chất nền rắn tổng hợp: poly(ester-urea-urethane) và poly(ether-urea-urethane). năng của miền liên kết cơ chất của nó.

Vật liệu sinh học 17, 2381–2388. FEMS MicrobiologyLetters 154, 89–94.

Langsford, ML, Gilkes, NR, Sing, S., Moser, B., Miller Jr., RC, Warren, RAJ, Tang, YW, Santerre, JP, Labrow, RR, Taylor, DG, 1997. Ứng dụng các chất phụ gia đa

Kilburn, DG, 1987. Quá trình glycosyl hóa các xenlulaza của vi khuẩn ngăn chặn phân tử để giảm sự phân hủy thủy phân của polyurethan bằng các enzyme lysosomal.

sự phân cắt protein giữa các vùng chức năng. Vật liệu sinh học 18, 37–45.

FEBS Letters 225, 163–167. Ulrich, H., 1983. Polyurethane. Trong: Modern Plastic Encyclopedia, Vol.

Marchant, RE, Zhao, Q., Anderson, JM, Hiltner, A., 1987. Sự xuống cấp của chất đàn 60. McGraw-Hill, New York, trang 76 –84.

hồi poly(ether-urethane-urea): nghiên cứu về hồng ngoại và XPS. Urbanski, J., Czerwinski, W., Janicka, K., Majewska, F., Zowall, H., 1977. Sổ tay

Polyme 28, 2032–2039. Phân tích Polyme tổng hợp và Chất dẻo. Công ty TNHH Ellis Horwood, Chichester,

Marchant, RE, 1992. Khả năng phân hủy sinh học của polyme y sinh. Trong: Hamid, SH, Vương quốc Anh.

Amin, MB, Maadhah, AG (Eds.), Handbook of Polymer Degradation. Marcel Dekker, van Tilbeurgh, H., Tomme, P., Claeyssens, M., Bhikhahai, R., Pettersson, G., 1986.

Inc., New York, trang 617–631. Sự phân giải protein hạn chế của cellobiohydrolase I từ Trichoderma reesei.

Nakajima-Kambe , T. , Onuma , F. , Kimpara , N. , Nakahara , T. , 1995 . FEBS Letters 204, 223–227.

Phân lập và mô tả đặc tính của một loại vi khuẩn sử dụng polyester polyurethane Vega, R., Main, T., Howard, GT, 1999. Nhân bản vô tính và biểu hiện ở Escherichia

làm nguồn carbon và nitơ duy nhất. FEMS Microbiology Letters 129, 39–42. coli của enzyme phân hủy polyurethane từ Pseudo monas uorescens. Sự suy thoái

sinh học & sự phân hủy sinh học quốc tế 43, 49–55.

Nakajima-Kambe, T., Onuma, F., Akutsu, Y., Nakahara, T., 1997.

Xác định các sản phẩm phân hủy polyester polyurethane và phân phối enzyme phân Wales, DS, Sagar, BR, 1988. Các khía cạnh cơ học của quá trình thoái hóa sinh học

hủy polyurethane của Comamonas acidovorans vết TB-35. Tạp chí Lên men và Kỹ polyurethane. Trong: Houghton, DR, Smith, RN, Eggins, HOW

thuật Sinh học 83, 456–460. (Eds.), Xử lý sinh học, Phiên bản thứ 7. Khoa học Ứng dụng Elsevier, London,

Vương quốc Anh, trang 351–358.

Ossefort, ZT, Testroet, FB, 1966. Tính ổn định thủy phân của chất đàn hồi urethane. Young, RJ, Lovell, PA, 1994. Giới thiệu về Polyme, Tái bản lần 2.

Hóa học và Công nghệ Cao su39, 1308–1327. Chapman & Hội trường, Luân Đôn.