Tema 7

Cadena respiratòria i
fosforilació oxidativa

Stryer “Bioquímica. Curso Básico” . Ed. Reverté 2014

Nelson, Cox “Lehninger. Principles of Biochemistry. Ed
Freeman, 5th ed

Bioquímica
Rutes centrals del metabolisme energètic: etapes

Les rutes es poden dividir en tres

nivells de complexitat
 -Fosforilació oxidativa
-Entrada d’electrons a la cadena de transport (NADH/FADH2)
-Cadena respiratòria
-Complexes i transportadors electrònics de la cadena respiratòria
-Transferència dels transportadors d’electrons a les mitocòndries

-Fotosíntesi
-Unitats funcionals de la fotosíntesi i reaccions de la fase llumínica
-Transport no cíclic i transport cíclic
-Fase fosca

Bioquímica
 -Fosforilació oxidativa
-Entrada d’electrons a la cadena de transport (NADH/FADH2)
-Cadena respiratòria
-Complexes i transportadors electrònics de la cadena respiratòria
-Transferència dels transportadors d’electrons a les mitocòndries

http://highered.mcgraw-hill.com/olc/dl/120071/bio11.swf

Bioquímica
 Cadena de transport electrònic mitocondrial i
electrofosforilació

En els organismes aeròbis totes

les etapes enzimàtiques de la
degradació de sucres, greixos i
aminoàcids convergeixen en la fase
final de la respiració cel·lular en la
que els es- flueixen des dels
substrats orgànics fins a l'oxigen,
donant energia per generar ATP a
partir de l'ADP i P

O2
-Molt abundant
-Difon fàcilment a través
de les membranes 4e-
O2 2H2O
-És molt reactiu: bon
acceptor d’electrons ADP + P ATP
Exemple:
l'oxidació total de la glucosa per l'O2 es
pot descriure per:

C6H12O6 + 6O2 = 6CO2 + 6 H2O

Els es implicats en l'oxidació de la Glc no es

transfereixen directament a l'O2 sinó que es
transfereixen a altres substrats: NAD+ i FAD,
formant-se NADH i FADH2.
NADH NAD+
e-
Cadena
transportadora
d’electrons

O2 4e- 2H2O
 La cadena respiratòria
mitocondrial

fumarate
succinate
Succinate
dehydrogenase

Enzims que catalitzen reaccions redox, situats a la membrana interna, que

oscil·len entre la forma oxidada i la reduïda.
Les cadenes de transport electrònic es basen en l’encadenament de reaccions
redox que individualment impliquen la transferència d’electrons.
Les cadenes de transport electrònic es basen en l’encadenament de reaccions
redox que individualment impliquen la transferència d’electrons.

Perquè flueixen
els electrons a la
cadena de
transport?
Transport d’electrons dels coenzims reduïts a l’oxigen: els electrons flueixen pels transportadors.

Potencial de reducció (E)

Tendència a reduir-se
(o a captar electrons)

ΔG0’= -nF ΔE0’

Per a què sigui espontània, ΔE >0
Les substàncies amb potencial de reducció més positiu (més
positiu) rebran electrons de una substància amb potencial més
negatiu
 Perquè flueixen els electrons a la cadena de
transport?

Calcula ΔG0’ del pas dels

electrons des del NADH fins l’O2

ΔG0’= -nF ΔE0’

F= 96.48 kJ/mol* V
 Potencial de reducció (E)
Sentit de
la reacció
per Δ E
positiu:

Cadascuna de les reaccions redox

acoblades en el transport electrònic
biològic comporta la transferència
d’electrons desde una parella redox
a una altra de potencial de reducció
major
 Potencial de reducció (E)
Sentit de
la reacció

NADH, agent reductor fort

Els transportadors
electrònics sofreixen
reaccions de oxidoreducció

O2, agent oxidant fort

Cadascuna de les reaccions redox

acoblades en el transport electrònic
biològic comporta la transferència
d’electrons desde una parella redox
a una altra de potencial de reducció
major
 COMPLEXES I
TRANSPORTADORS
ELECTRÒNICS DE LA
CADENA RESPIRATÒRIA
Complexes i transportadors electrònics de la cadena respiratòria

Elements de la cadena respiratòria:

- Complexes multienzimàtics
- Transportadors electrònics
Transportadors electrònics de la cadena respiratòria

complexe I

NADH deshidrogenasa
NADH-CoQ reductasa
Transport d’electrons dels coenzims reduïts a l’oxigen: els electrons flueixen pels transportadors.

+ Fe+2S CoQ
NADH FMN
+H

+
NAD FMNH2 Fe+3S CoQH2

Transfereix dos electrons des del

NADH a l'FMN, des d'on passen a
través d'una sèrie de centres Fe-S i
finalment a la ubiquinona, formant
ubiquinol (QH2), el qual es difon per
la bicapa lipídica.
Transportadors electrònics de la cadena respiratòria
complexe I:
NADH i NADH deshidrogenasa (ó NADH-CoQ reductasa): -complexe multienzimàtic
- > 20 polipèptids diferents
-Conté FMN
-Conté diversos nuclis Fe-S

+ Fe+2S CoQ
NADH + H FMN

+
NAD FMNH2 Fe+3S CoQH2

4 H+ a l’espai intermembranós
Aquesta transferència d'electrons també impulsa l'expulsió
des de la matriu de quatre protons per parell d'electrons.
Transportadors electrònics de la cadena respiratòria

complexe II

Succinat deshidrogenasa
succinat-CoQ reductasa

Els electrons es transfereixen

de l'succinat a el FAD,
després a través dels tres
centres Fe-S a la ubiquinona.
Transport d’electrons dels coenzims reduïts a l’oxigen: els electrons flueixen pels transportadors.
Transportadors electrònics de la cadena respiratòria

FADH i succinat deshidrogenasa (ó succinat-CoQ reductasa)

El FADH2 s’oxida en el complexe II:

- Format per succinat DH i ferredoxines ( Fe-S)
- També transfereix els electrons al coenzim Q

Altres flavoproteïnes també poden cedir

electrons al CoQ
Transportadors electrònics de la cadena respiratòria

Ubiquinona o coenzim Q
Transportadors electrònics de la cadena respiratòria

Ubiquinona o coenzim Q

-Benzoquinona lligada a diferents unitats de isoprè

-La cua apolar permet la difusió ràpida a través de la membrana
-Transporta els electrons del complexe I i II als citocroms
Fig. 10.3
Transport d’electrons dels coenzims reduïts a l’oxigen: els electrons flueixen pels transportadors.

Potencial de reducció (E)

Tendència a reduir-se
(o a captar electrons)

ΔG0’= -nF ΔE0’

Per a què sigui espontània, ΔE >0

Les substàncies amb potencial de reducció més negatiu
(menys positiu) rebran electrons de una substància amb
potencial més positiu
Transportadors electrònics de la cadena respiratòria

Complexe III
Complex citocrom bc1
o Ubiquinona: citocrom c
oxidoreductasa

transfereix electrons de l'ubiquinol

(QH2) a citocrom c amb el transport
vectorial de protons des de la matriu a
l'espai intermembrana
 Transportadors electrònics de la cadena respiratòria
Cytochrome bc1 complex (Complex III)
4H+ The second mobile electron
carrier → transfer a single
electron from the complex
III to complex IV

- > 20 subunits
- 3 cytochromes (b, c1 and c)
- 3 heme groups (c1, b1 and bH)
- Fe-S proteins
- Bombeja protons a l’espai
intermembranós
Transportadors electrònics de la cadena respiratòria

Cytochromes: proteïnes redoxactives

que contenen un hemo com a grup
protèsic, amb un àtom de Fe central en el
seu nucli, com a cofactor

-N’hi ha tres tipus, a, b i c segons les

longituds d’ona a què absorveixen.

Reducció:
Fe (III) + e- → Fe (II)

La transferència d’electrons del coQ al cit c

mediada pel complexe III és un procés
complex.
Transport d’electrons dels coenzims reduïts a l’oxigen: els electrons flueixen pels transportadors.
Transportadors electrònics de la cadena respiratòria

Citocrom C

Unit de manera laxa a la

cara externa de la matriu
mitocondrial interna
Transportadors electrònics de la cadena respiratòria

Complexe IV
citocrom oxidasa
Citocrom c- O2 oxidoreductasa
Transportadors electrònics de la cadena respiratòria

Complexe IV: citocrom oxidasa

- Conté varies subunitats, citocroms a i a3, i nuclis Fe-Cu
- El complexe multiproteic citocrom oxidasa (complexe IV) redueix
l’oxigen a aigua.
- Bombeja protons a l’espai intermembranós (2 H+ por cada 2e- transferidos
a la cadena)
- Es modula al·lostèricament per ATP (+ ó - ??)

Lehinger
Transport d’electrons dels coenzims reduïts a l’oxigen: els electrons flueixen pels transportadors.

Potencial de reducció (E)

Tendència a reduir-se
(o a captar electrons)

ΔG0’= -nF ΔE0’

Per a què sigui espontània, ΔE >0

Les substàncies amb potencial de reducció més negatiu
(menys positiu) rebran electrons de una substància amb
potencial més positiu
Transportadors electrònics de la cadena respiratòria

Complexe IV: citocrom oxidasa

- Conté varies subunitats, citocroms a i a3, i nuclis Fe-Cu

- El complexe multiproteic citocrom oxidasa (complexe IV) redueix
l’oxigen a aigua.
- Bombeja protons a l’espai intermembranós
- S’inhibeix al·lostèricament per ATP
SÍNTESI d’ATP

Complexe V
F1F0 ATP sintasa

Fosforilació
oxidativa
 Cadena de transport electrònic mitocondrial i
electrofosforilació

En els organismes aeròbis totes

les etapes enzimàtiques de la
degradació de sucres, greixos i
aminoàcids convergeixen en la fase
final de la respiració cel·lular en la
que els es- flueixen des dels
substrats orgànics fins a l'oxigen,
donant energia per generar ATP a
partir de l'ADP i P

O2 4e- 2H2O

ADP + P ATP
Els es són transferits des de NADH i FADH2 a l'O2 a través de la cadena de
transport mitocondrial (es reoxiden a NAD+ i FAD) i l'energia és utilitzada
per fer un gradient de protons que s'utilitzarà per sintetitzar ATP
La cadena respiratòria
mitocondrial

+
+ H
H

ADP
+Pi ATP

Alguns complexes que La ATPasa acopla el pas de

intervenen en el transport protons a la síntesi de ATP
d’electrons, alliberen
protons a l’espai
intermembranós
Síntesi de ATP

Teoria quimiosmòtica (1961 Peter Mitchell).

Síntesi de ATP (complexe V, canal F0, ATP sintasa)
 Síntesi de ATP (complexe V, canal F0, ATP sintasa)

[ADP] i [P]
[ATP]
Activa o inhibeix?
 Síntesi de ATP (complexe V, canal F0, ATP sintasa)

L’ATP sintasa
s’activa per
[ADP] i [P] i
s’inhibeix per
[ATP]
 Inhibition of electron transport → no H+ gradient → no ATP synthesis
Some poisons act at this level of cellular respiration inhibiting ATP synthesis
Recorda…
La força
protomotriu també
l’aprofiten sistemes
de transport de la
membrana
mitocondrial
interna
 Transportadors electrònics de la cadena respiratòria

En resum fins aquí…

4 H+

NADH + ½ O2 →NAD+ + H2O ΔG0’= - 219 kJ/mol

Total H+ traslocados (por cada par de e-

transferidos desde el NADH): 10

→ Moure un protó cap a fora la

4 H+ matriu mitocondrial costa: 21.9
kJ/mol

2 H+
• ATP sintasa requiere la translocación de 3H+ por cada ATP
que produce
• el transporte de Pi para la síntesis de ATP requiere de 1 H+
• Rendimiento neto: 4 H+ transportados por cada ATP
sintetizado
 TRANSFERÈNCIA DELS
TRANSPORTADORS
D’ELECTRONS A LA CADENA
RESPIRATÒRIA
Certes reaccions del metabolisme
tenen lloc a l’interior de la
mitocòndria…
 ?

NADH- NAD+
e
Cadena
Però altres reaccions transportadora
metabòliques es dónen d’electrons
al citosol, i la
membrana O2 4e- 2H2O
mitocondrial interna és
impermeable a
l’NADH…
Però altres
reaccions
metabòliques es
dónen al citosol…

Llançadora de glicerofosfat
Llançadora de malat-aspartat
Transferència dels transportadors electrònics a les mitocondries

Llançadora de glicerofosfat

Generat al
citosol

Intermediari
glucolític

Més activa en
cervell i múscul
esquelètic
Transferència dels transportadors electrònics a les mitocondries

Llançadora de malat-aspartat

Més complexa que la de

Més activa en glicerofosfat
fetge, cor i ronyó
Més eficaç energèticament
 -Fosforilació oxidativa
-Entrada d’electrons a la cadena de transport (NADH/FADH2)
-Cadena respiratòria
-Complexes i transportadors electrònics de la cadena respiratòria
-Transferència dels transportadors d’electrons a les mitocòndries

-Fotosíntesi
- Unitats funcionals de la fotosíntesi i reaccions de la fase llumínica
-Transport no cíclic i transport cíclic
-Fase fosca

Bioquímica
 Fotosíntesi

Fase
llumínica

fotofosforilació

Fase
“fosca”
La fotosíntesi té lloc al cloroplast

Cadena de transport
electrònic
Antenes: absorció
fotons llum visible
Centres de reacció:
l’energia
electromagnètica
captada per les antenes
provoca una separació
de càrregues
 Fotosíntesi:
Reaccions de la fase lumínica

http://highered.mcgraw-hill.com/olc/dl/120072/bio12.swf
Complexos antena i centre de reacció

Clorofiles i pigments
accessoris que
completen l’espectre
d’absorció de llum
visible
Ajuda a la interacció amb lípids de membrana
Pigments
Les clorofiles a i b són
les més abundants en
plantes

Els pigments contenen

cromòfors: parts que
absorbeixen la llum

Pigments
accessoris
 Complexos antena i centre de reacció

Clorofiles i pigments
accessoris que
completen l’espectre
d’absorció de llum
visible
 Fotosistemes
Antenes + centres de reacció + agents
de transport electrònic

Fotosistema I (P700):
reducció del NADP+

Fotosistema II (clorofila
P680): oxidació de l’aigua
 Fotosistemes
Antenes + centres de reacció + agents
de transport electrònic

Fotosistema I (P700):
reducció del NADP+

Fotosistema II (clorofila
P680): oxidació de l’aigua
Unitats funcionals de la fotosíntesi: Fotosistema I
-Complexe de moltes subunitats
transmembrana
- > 200 molècules de clorofil·la a
-2 molècules de clorofil·la a en el centre
de reacció
-Altres transportadors: A0 (clorofil·la), A1 i Fx
(centres Fe-S)
Unitats funcionals de la fotosíntesi:

Fotosistema I

-Ferredoxina: proteïna hidrosoluble

mòbil
-Cedeix els electrons a una
oxidoreductasa
 Fotosistemes
Antenes + centres de reacció + agents
de transport electrònic

Fotosistema I (P700):
reducció del NADP+

Fotosistema II (clorofila
P680): oxidació de l’aigua
Unitats funcionals de la fotosíntesi:
Fotosistema II
-Complexe de moltes proteïnes i
pigments transmembrana
- centre de reacció: 2
polipèptids, citocrom b559, dues
clorofil·les a
-El complexe formadors de O2 té
manganès
-Altres pigments: feofitina ( ~
clorofil·la), PQ A i B ( ~
ubiquinona).
Unitats funcionals de la fotosíntesi:

-Complexe citocrom b6f

- transferir electrons de PSII a
PSI
-Té complexe Fe-S
-Transfereix electrons a la
plastocianina (proteïna
hidrosoluble amb Cu)
-Bombeja protons
- molt semblant a la mitocondrial Unitats funcionals de la
fotosíntesi:
-Subunitat ATPasa dins l’estroma
-Subunitat de bombeig de protons de la ATP sintasa:
llum
fotofosforilació
Transport electrònic no cíclic
 Transport electrònic no cíclic

http://highered.mcgraw-hill.com/olc/dl/120072/bio13.swf
Overview of Light Reactions
Transport electrònic cíclic

-Utilitza els elements del PSI

-Regulat pel quocient NADPH/NADP+. Com?
-Produeix O2 i NADPH??
-Es genera ATP ??
Transport electrònic cíclic

-Utilitza els elements del PSI

-Activat quan NADPH/NADP+està augmentat
-No allibera oxígen ni es produeix NADPH
-es genera gradient protònic que assegura ATP (fosforilació cíclica)
Unitats funcionals de la fotosíntesi:
Fotosíntesi:
Fase fosca
- Reaccions independents de la llum

El CO2 s’incorpora
a un sucre de tres
carbonis

+
3 CO2 + 6NADPH + 9 ATP GAPDH + 6 NADP + 9 ADP + 8 Pi