BIODIBERTSITATEA

PRAKTIKAK 2022-2023
 Mikrobiologiako laborategiko segurtasun-arauak

1. Lan egin behar da mantala jantzita eta ondo lotuta, gu eta gure arropak babesteko
(kutsadura, koloratzaile eta substantzia kimikoetatik). Ez da irten behar laborategitik
laborategiko mantalarekin (kafea hartzera, hitz egitera, klasera...).
2. Lan-eremua beti egon behar da ahal bezain garbi, txukun eta huts (bai praktika
hasterakoan, bai amaitutakoan). Lan-eremutik kanpo egon behar dira liburu, poltsa
eta arropa guztiak. Lan-eremuan soilik egon daitezke lanerako beharrezko gauzak
(koadernoak, protokoloak, materialak).
3. Debekatuta dago laborategian jatea (txiklea mastekatzea barne), edatea edo
erretzea. Ekidin ahoratzea eskuak zein beste edozein objektu. Ez haginka egin
boligrafoari, eta ez ukitu aurpegia, begiak eta abar.
4. Ez hasi lanean azalpenak adi entzun eta protokoloa ondo irakurri baino
lehen. Galdetu irakasleari metodoa edo esperimentuaren helburua ulertzen ez
duzunean. Zer egin behar den eta nola egin behar den aurrez ezagutzeak istripuak
gutxitzen ditu eta denbora hobeto erabiltzea ahalbidetzen du. Idatzi laborategiko
koadernoan praktiketan egindakoari buruzko informazio esanguratsu guztia.
 Mikrobiologiako laborategiko segurtasun-arauak

5. Ondo identifikatu erabilitako gauza guztiak beharrezko datuekin (adibidez, Petri

kutxetan, portetan eta saiodietan adierazi izena, taldea, data edota esperimentua).
Era horretan, materialaren erabilera ez-zuzena saihestuko da.
6. Lanean zehar, ekidin kutsadura eragin dezaketen aire-korronteak. Eduki saiodi
esterilak edo kultibodunak bertikalki euskarrietan, sekula ez mahai gainean etzanda.
7. Kontuz metxeroekin, batez ere metxeroaren atzeko aldean dagoen zerbait hartu nahi
denean. Istripuak ekiditeko, itzali metxeroa beharrezkoa ez denean.
8. Utzi kutsatutako material guztia dagokion lekuan (begiratu kartelak). Paperak,
pospoloak eta kutsakorrak ez diren materialak zakarrontzira botako dira. Inoiz ere ez
harraskara edo beste edukiontzi batera.
9. Edozein istripuren edo arazoren aurrean (ebaketak, erredurak, kultiboen
isurketak...), jakinarazi berehala irakasleari beharrezko neurriak har daitezen.
10. Laborategitik atera baino lehen, bai aldi batez edo behin betiko, garbitu eskuak
xaboi germizidaz.
Mikrobiologiako laborategiko segurtasun-arauak

2. arrisku-taldeko agenteak
Mikrobiologia laborategiak Gizakiarengan edo animaliengan gaixotasunak
Farmazia Fakultatean eragiteko aukera gutxi dituzten
mikroorganismoak.
Gizakiei edo animaliei gaixotasunak eragin
C2 Babes maila diezazkieketen patogenoak barne hartzen ditu,
baina egoera normalean ez diete arrisku
larririk eragiten laborategiko langileei,
komunitateari, baliabide naturalei edo
ingurumenari.
Laborategiko esposizioek gutxitan eragiten
dute gaixotasun larriak eragiten dituzten
infekzioetara. Tratamendu eraginkorrak eta
prebentzio-neurriak daude, eta komunitatean
sakabanatzeko arriskua txikia da.

Hondakinen kudeaketa
Prozedura normalizatuen arabera.
 Hondakinen kudeaketa
Hondakinetarako ontziak

1. Autoklabean 2. Autoklabean
esterilizatu 1 2 esterilizatzea eskatzen
beharrik ez duten duten material
material ez- kutsatuak
kutsatuak
3

4
3. Kutsatzaile
kimikoak
(koloratzaileak)
5

4. Ebakitzaileak eta zorrotzak 5. Kutsatutako

(portak, estalkiak, orratzak) material plastiko
txikia (pipeta-puntak,
eppendorf hodiak,
isipuak,...)
Laborategiko material arrunta: lanpostua
 Kronograma
PRAKTIKAK ASTELEHENA ASTEARTEA ASTEAZKENA 1h
Hazkuntza-medioak. Hazkuntza-medio
Hazkuntza-medioak Hazkuntza-medio motak - Winogradski zutabea.
Ereintza teknikak
Ereintza teknikak - Ereinketa medio likidoan.
- Ereinketa medio solidoan.
Mikroorganismoen isolatzea. Mikroorganismoen isolatzea. Mikroorganismoen
Kultibo puruen - Kultibo mistoa. - Kolonien behaketa. isolatzea.
lorpena. - Medio bereizgarri / hautakorrak - Berisolaketa medio - Kultibo purua
Mikroorganismoen - Murrizketa bidezko ereintza eta hautakor/bereizgarrian - Kolonien behaketa eta
isolatzea inkubazioa (inkubazioa) interpretazioa
.

Maiatzak 8an. 1.9 gelan.

Determinazio kualitatiboa Petri kutxatilen irakurketa:
- Ingurumeneko laginen inokulua - Kolonien deskribapena
- PCA medioa. - Mikroskopioan behaketa
Ingurumeneko
mikroorganismoak Determinazio kuantitatiboa Petri kutxatilen irakurketa:
- Aireko laginaren inokulua - Kolonien deskribapena
- PCA medioa. - Mikroskopioan behaketa
- DRBC medioa (lizunak).
Biodibertsitate Behaketa freskuan Tindatutako prestakinak:
mikrobianoa - Saccharomyces cerevisiae. - Gram tindaketa (E. coli)
Behaketa - Ur-laginak - Esporen tindaketa
mikroskopikoa (Bacillus sp.)
E. coli-ren suspentsioa: Kolonien zenbaketa:
Dentsitate
- Diluzio hamartarrak prestatu - uke/ml kalkulatu
mikrobianoaren
- Ereintza mikrotanta teknikaren
determinazioa
bidez
 Hazkuntza-medioa

DEFINIZIOA
Laborategian mikroorganismoen hazkuntzarako
erabili daiteken edozein substantzia (solidoa edo likidoa).

Hazkuntzarako behar den guztia daukate:

ura, energia-iturria, karbono-iturria, konposatu nitrogenatuak eta
beste hazkuntza faktore batzuk.
 Hazkuntza-medioa
SAILKAPEN MOTAK

1. Jatorriaren arabera:
 Hazkuntza-medio konplexuak
Digeritutako konposatuak, landare edo animaliaren ehunen estraktuak. Mikroorganismoak
hazteko behar diren elementu guztiak daude, nahiz eta konposaketa eta kontzentrazio
zehatzak ez ezagutu.

 Hazkuntza-medio definituak
Konposatu kimiko puruak
Kontzentrazio ezagunean aurkitzen dira

2. Egoera fisikoaren arabera:

Solidoa (agarrarekin) – Likidoa edo salda (agarrik ez, saiodietan) - Semisolidoa
 Hazkuntza-medioa

3. Funtzioaren arabera:

Orokorrak edo
Mikroorganismo gehienen hazkuntza baimendu.
elikagarriak
Mikroorganismoak bereizteko osagaiak dauzkan
Bereizgarriak
medioak.

Hautakorrak Mikroorganismo batzuk bakarrik hazten dira.

Behar bereziak dituzten mikroorganismoen hazkuntza

Aberasgarriak
faboratzeko. Hautakorrak dira.
 Mikroorganismoen hazkuntza
Laborategian mikroorganismoak aztertzeak hazkuntza-medioan
mikroorganismoak haztea dakar.
Laborategian hazkuntza-medio egoki aukeratu behar dira
mikroorganismoen kopurua handitzeko.

Behin azterketaren helbururako medio egokia dugunean,

mikroorganismoak erein behar ditugu ingurune horretan. Horretarako,
medio esterilean inokulatu behar ditugu, zenbait arau kontuan hartuta.

Mikroorganismoen ereintzarako :
 erabili behar diren aldez aurretik esterilizatutako tresnak.
 erabili behar da teknika aseptikoa (kutsadura ekidin).
 prozesu osoa egin behar da suaren ondoan.
 Ereintza teknikak

Mikroorganismoen transferentzia egiteko ereinketa-euskarria:

 Platino edo kromo-nikelezko alanbre bat da, eta diametro txikiko kiribila
du muturrean.
 Plastikozkoa, erabilera bakarrekoa.

Ereinketa-euskarriaren esterilizazioa:
 Mantendu ahalik eta bertikalena metxero-
sugarraren gainean alanbre-harizpiaren
gorritasuneraino.
 Hoztu arte itxaron sugarraren inguruan.
 Ereintza teknikak
Saioditik saiodira transferitzea

https://www.youtube.c
Ereintza teknikak om/watch/mLjGPD_ht
 Inokuluaren berresekidura, ingurune likidoa denean. WY
https://www.youtube.c
 Gainazaleko ildaskak edo ziztadak, ingurune solidoa denean. om/watch/IWIBRJOzM
BQ
 Ereintza teknikak
Saioditik plakara
Ereintza Petri kutxan egitean pausu berdinak jarraitu behar dira. Kutxak suaren ondoan
ireki beharko dira esterilitatea mantentzeko. Hazkuntza-medioa likidoa denean inokulua
(euskarrian dauden zelulak) medioan murgildu beharko da.

Plakak buruz-behera mantentzen dira eta suaren ondoan erdi irekitzen dira, eta inokulua
duen ereintza-euskarria agarraren gainazaletik irristatu egiten da, ez hausten saiatuz.

Ereintza amaitu ondoren, eta ereintza-euskarria mahaian utzi aurretik, esterilizatu behar
da gainerako zelulak suntsitzeko.

Ereintza teknikak
 Agortzeagatik edo ildaskagatik.
 Ildoango ereintza (hedaduraz)

Ildaska bidezko ereintza.

Ildoango ereintza hisopo
batekin
 Ereintza teknikak
Murrizketa bidezko ereintza (ildaskak), kultibo puruak lortzeko
Ingurune solido batetik zein ingurune likido batetik abiatuta erabiltzen da,
isolamendu eta identifikazio baterako kolonia isolatuak lortu nahi direnean.

https://www.youtube.com/watch?v=6NckVGCobwY
1. Kultibo puruen lorpena.
Mikroorganismoen isolatzea
 1. Isolamendua hazkuntza puruan
Ingurumenetik lortutako ia lagin guztiak mikroorganismo-populazioen multzo misto
batek osatzen ditu. Horiek aztertu ahal izateko, lehenik eta behin banakoen
populazioetan edo kultibo puruetan bereizi behar dira. Horretarako, medio
hautakorrak eta bereizgarriak erabiliko ditugu. Kultibo-medioak eta inkubazio-
baldintzak aukeratzeko erreferentzia gisa, gutxienez arazoaren laginaren jatorria
jakin beharko dugu; kasu honetan, kutsadura fekala duen uraren lagin bat izango
dugu.

1 Hazkuntza-medio bereizgarriak
3
eta hautakorrak
1. MacConkey agarra.
2. Manitol gatz agarra.
4 3. Sabouraud-kloranfenicol agarra.
Populazio 2 4. Zetrimida agarra.
mistoa duen
lagina 5 (x2) 5. P eta F agar bereizgarriak.

Medio bereizgarriak eta

hautakorrak
 Isolamendua hazkuntza puruan
Lehenengo eguneko prozedura.

Lagina nahastu
homogeneizatzeko. Murrizketa bidezko ereintza
medio bakoitzean.

Behaketa
mikroskopikoa
(aukerakoa). 2 4 5 (x2)
1 3

24 orduz inkubazioa, Plakak beti buruz

37 ºC-tan, behera egoten dira.
berogailuan.

Emaitzen irakurketa
Inkubazio-berogailua
 Isolamendua hazkuntza puruan
MacConkey agarra

MacConkey Agarra
 Bereizgarria: Laktosa hartzitzean azidoak ekoiztu.
Gorri neutroa pH indikatzailea duenez, azidoak
askatzean koloniak arrosa kolorearekin hazi.
 Hautakorra: Gatz biliarrak + kristal violeta, Gram (+)-
en hazkuntza inhibituta egongo da.
 Isolamendua hazkuntza puruan
Bigarren eguneko prozedura
24 orduko inkubazioaren
1 ondoren, plakaren itxura plaka
Emaitzen irakurketa esterilarekin alderatzen dugu.

Gorriak, laktosa hartzitu. LAKTOSA positiboa.

Txuriak. Ez dute laktosa hartzitzen. LAKTOSA negatiboa.

Kolonien itxura ez-homogeneoa.

Kultivo mistoa.

Ingurune berean birisolatzea, ondo isolatutako

kolonia bakar batetik abiatuta. 24 ordu gehiago
inkubatzea, baldintza berberetan.
 Isolamendua hazkuntza puruan
Manitol agarra

Manitol agarra
 Bereizgarria: Manitola hartzitzean azidoak ekoiztu.
Gorri fenola pH indikatzailea duenez, azidoak
askatzean medioa oria kolorea edukiko du.
 Hautakorra: NaCl kontzentrazio , Gram (-)-en
hazkuntza inhibituta egongo da. Batez ere
Staphylococcus hazteko.
 Isolamendua hazkuntza puruan
Bigarren eguneko prozedura
24 orduko inkubazioaren
2 ondoren, plakaren itxura plaka
Emaitzen irakurketa esterilarekin alderatzen dugu.

Manitola ez dute
Manitola hartzitu hartzitzen.
Manitol positibo. Manitol negatibo.

Kolonien itxura homogeneoa. Ingurune berean birisolatzea, ondo isolatutako

Kultibo puru posiblea kolonia bakar batetik abiatuta. 24 ordu gehiago
inkubatzea, baldintza berberetan.
Isolamendua hazkuntza puruan

Sabouraud+kloranfenicol agarra
 Hautakorra: antibakterianoa duenez, bakterioen
hazkuntza inhibituta egongo da. Soilik haziko dira
onddoak.
 Isolamendua hazkuntza puruan
Bigarren eguneko prozedura
24 orduko inkubazioaren
3 ondoren, plakaren itxura plaka
Emaitzen irakurketa esterilarekin alderatzen dugu.

Kolonien itxura homogeneoa.

Kultibo puru posiblea.

Ingurune berean birisolatzea, ondo

isolatutako kolonia bakar batetik abiatuta.
24 ordu gehiago inkubatzea, baldintza
berberetan.
Isolamendua hazkuntza puruan

Zetrimida agarra
 Bereizgarria: Magnesio kloruroa eta potasio
sulfato gatzek pigmentuen ekoizpena
bultzatuko dute, medioaren kolorea aldatuko da
urdin-berdexkara.
 Hautakorra: zetrimida konposatua Pseudomonas ez
diren mikroorganismoen hazkuntza inhibitu.
Isolamendua hazkuntza puruan

P eta F agarrak
 Bereizgarriak: pigmentuen ekoizpena sustatzen
dutelako (Pseudomonas generoan).
 P agarra: piozianinaren ekoizpena bultzatu eta
fluoreszeina inhibitu egiten du
 F agarra: fluoreszeinaren ekoizpena bultzatu
eta piozianinarena inhibitu egiten du
 Isolamendua hazkuntza puruan
Bigarren eguneko prozedura

Emaitzen irakurketa

Piozianinaren ekoizpena, Fluoreszeinaren ekoizpena,

medio urdina medio oria

Bien ekoizpena, medio

berdea
 Isolamendua hazkuntza puruan
Hirugarren eguneko prozedura
Hazkuntza-medio
Emaitzen irakurketa
hautakorrak eta
bereizgarriak Bigarren
1. MacConkey agarra. birisolamenduaren
osteko kultibo
Ziur asko bazilo Gram -
puruak.
Laktosa + / Laktosa –

2. Manitol gatz agarra.

Ziur asko koko Gram +
Manitol + / Manitol – Baieztatu
morfologia eta
3. Sabouraud-kloranfenicol Gram tindaketa,
agarra. behaketa
mikroskopikoarekin.
Ziur asko legamia

4. Zetrimida agarra.
Ziur asko bazilo Gram -
Fluoreszeina ekoizleak
2. Ingurumeneko mikroorganismoak
 2. Ingurumeneko mikroorganismoen ereintza

 Laborategia, beste edozein girotan gertatzen den bezala,

mikroorganismo askoz kolonizatuta dago. Mikroorganismo horiek
airean (suspentzioan dauden partikuletara itsatsita) edo gainazaletan
itsatsiak egon daitezke.
 Mikrobiologoek kontutan hartu behar dute ingurumeneko kutsadura
lanerako erabiltzen dituzten materialak kutsatu ez daitezen.
 Hasierako segurtasun-neurri gisa, laborategiko gainazalen, lan-
materialen eta airearen kalitatea aztertzen saiatuko gara.

Materialak:
 PCA agar elikagarria
 Hisopoak/torundak
 Ingurumeneko mikroorganismoen ereintza
Kualitatiboa

Prozedura:
1. Torunda mahairen gainazaletik igaro. 1cm2 .
2. PCA kutxatila hedaduraz inokulatu (kontuz ibili agarraren hausketa ekiditeko)
3. Kutxatila 30 ºC-tan, 48 orduz inkubatu.
4. Kutxatilak aztertu eta kolonien tamaina, itxura eta kolorea deskribatu. Egitura
makroskopikoa izango da.
 Ingurumeneko mikroorganismoak
Kuantitatiboa

Prozedura.
Iragazi zehaztutako aire-bolumen bat, 100 l/min abiadura konstantean 10
minutuz, ingurune orokorra erabiliz, PCA eta onddoetarako medio
selektiboa (DRBC) duten plaka bakoitzaren gainean.

DRBC
PCA
Aire sarrera

Aire irteera

Petri plaka hazkuntza medio

solidoarekin

Plakak buruz behera

inkubatu 48 orduz, 25 ºC-tan.
DRBC agar

Hazkuntza
azkarreko
onddoen
inhibizioa

Espektro zabala.
Bakterio
laguntzaileak
inhibitu
 Ingurumeneko mikroorganismoak
Emaitzak PCA

DRBC
3. Biodibertsitate mikrobianoa
Behaketa mikroskopikoa
 Behaketa mikroskopikoa:
mikroskopioaren erabilera
1. Objektiboak, okularrak eta kondentsadorea garbi daudela
ziurtatu.
2. Lagina 10x objektiboarekin fokatu. Fokatzeko, hasieran torloju
makrometrikoa erabiltzen da. Fokatze finagoa lortzeko torloju
mikrometrikoa erabiliko dugu.
3. Ondoren 40x objektiboa jarri eta fokatzeko torloju
mikrometrikoa erabili.
4. Laginaren gainean olio tanta bat jarri eta 100x objektibora
pasatu.
Objektibo hau erabiltzeko olioa beharrezkoa da (difrakzio
arazoak ekiditeko). Fokatzeko torloju mikrometrikoa erabili.
5. Beharrezko bada, argi kopurua kontrolatzeko, diafragmaren
bidez argiaren sarrera kontrolatu.
6. Behaketa guztiak amaitu ondoren eta mikroskopioa gorde
aurretik objektiboak garbitu egin behar dira (batez ere 100x
objektiboa olioa kentzeko). Bukatzerakoan mikroskopioa estali.
7. Mikroskopioa erabiltzen ez den bitartean argi-iturria itzalita
mantendu.
 Behaketa mikroskopioan
Behaketa freskuan

Muntaia hezea
Mikroorganismo biziak behatzeko egokia. Mikroorganismo kromogenikoekin izan ezik,
kontrastea ahula da, eta, beraz, prokariotak ez dira beti ikusten. Prokarioto fototrofo eta
eukariotoentzat egokia.

Prozesua
1. Kultiboaren bolumen txikia portan jarri. Estalkia
2. Aire burbuilarik sortu gabe, estalkia ipini.
3. Mikroskopioan begiratu

Porta
 Behaketa mikroskopioan
Emaitzen irakurketa

Legamiak 100×

40×
 Behaketa mikroskopioan
Emaitzen irakurketa
Ur lagina: bakterio fototrofoak (zianobakterioak eta diatomeoak)

1000×

400×
 Behaketa mikroskopioan
Emaitzen irakurketa
Ur lagina: bakterio fototrofoak (sufrearen eta sufrearen ez diren bakterio gorriak eta
berdeak)
1000×

100×
 Behaketa mikroskopioan
Emaitzen irakurketa
Ur laginak: diatomeoak eta mikroalgak.

Navicula sp. Fragilaria sp.

Asterionella formosa Fragilaria sp.

1000× 1000×
 Behaketa mikroskopioan
Emaitzen irakurketa
Ur laginak: diatomeoak eta mikroalgak.

100×
 Behaketa mikroskopioan
Tindaketekin behaketa

Tindaketak
Koloratzaile basikoen erabilera oso ohikoa da mikrobiologian. Zelulen kontrastea
areagotzeaz gain, mikroorganismoetan interesgarriak diren propietate batzuk agerian
uztea ahalbidetzen dute. Tindatu beharreko mikroorganismoaren hedapenak garbiak
eta koipegabeak diren porten gainean egiten dira.

Prozedura
Tindatu beharreko hedapenak prestatzea  Portaren erdialdean ur
tanta jarri, lagina bertan
zabaldu.
 Prestakina airean lehortzen
utzi.
 Zelulak portan finkatzea
beroaren bidez: birritan
sugarratik pasatu azkar.
 Tindaketa hasi.

https://www.youtube.com/watch?v=7TSZVws4xd8
 Behaketa mikroskopioan
Tindaketekin behaketa
Tindaketa sinplea

Koloratzaile basikoak erabiliko dira: safranina

Tindaketa sinplea safraninarekin

Tindatzailea gehitu eta inkubatu 1 min Urarekin garbitu Lehortu

 Behaketa mikroskopioan
Tindaketekin behaketa

Gram tindaketa bereizgarria Fixapena

Tindaketa erabilienetarikoa
Horma zelularraren ezaugarrietan
oinarrituta:
Gram (+) (moreak,
dekoloratzaileak ez du eraginik)
Gram (-) (gorri-arrosak,
dekoloratzaileak eragina du)
Kristal morea 1´, urarekin
garbitu
Lugola (kolore finkatzailea)
1´, urarekin garbitu
Alkohola gehitu, urarekin
garbitu

Urrats diferentziala: Safranina (kontrasterako)

dekolorazioa. gehitu, urarekin garbitu

Arreta berezia jarri

behar zaio igarotze
1000×
horren denborari, zelula
guztiak koloregabetzea
saihesteko.
https://www.youtube.com/watch?v=FceD8FFhuew
 Behaketa mikroskopioan
Tindaketekin behaketa

Gram tindaketa bereizgarria

100×
 Behaketa mikroskopioan
Tindaketekin behaketa
Endosporen tindaketa hautakorra. Wirtz metodoa
Bacillus eta Clostridium generoek sortutako endosporak ikusteko.
Esporak tindatzaileekiko oso erresistenteak koloratzaile kontzentratu eta berotuak
behar dira.

1. Bakterio esporulatuen hedapena prestatu

(Bacillus subtilis, Bacillus megaterium).
2. Porta malakita berdezko soluzioarekin estali.
3. Berotu azpitik alkoholez eta sugarrez
bustitako isipuarekin, lurrunak ikusi arte.
4. Utzi hozten minutu bat.
5. Errepikatu 3 aldiz, 3. eta 4.
urratsak.
6. Garbitu urarekin.
7. Gehitu safranina minutu batez.
8. Garbitu urarekin.
9. Utzi lehortzen.
https://www.youtube.com/watch?v=AVZPbzdF8fE
 Behaketa mikroskopioan
Tindaketekin behaketa

Endosporen tindaketa hautakorra. Wirtz metodoa

10× 100×
4. Dentsitate mikrobianoaren
determinazioa
 Dentsitate mikrobianoaren determinazioa
Praktika honen helburua: hasierako esekiduran dauden bolumen-unitateko bakterio
kopurua jakitea (mikroorganismoen dentsitatea).

Zelula mikrobiano batek hazkuntza solidoko ingurune batean hazteko duen

gaitasunean oinarritzen da, kolonia ikusgarri bat sortuz. Ereitean mikrorganismo-
zelulak sakabanatzea lortzen bada, inkubazio-aldi egoki baten ondoren bananduta
gera daitezen, hasierako zelulen kopurua ezagutu ahal izango da, ikus daitezkeen
kolonien kopurua zenbatuta.

Mikroorganismoen kopurua altua bada laginaren diluzioak egin behar dira.

Teknika: diluzio hamartar seriatuak egitea

beharrezkoa da, hasierako esekiduran dauden
mikroorganismoen kopurua murriztuz joan
dadin. Horrela, diluzio batzuetan
mikroorganismoen kopurua baxuagoa izango
da eta kolonia kopuru egokia hazi kontaketak
egiteko.
 Dentsitate mikrobianoaren determinazioa
LAGINA

15 μl gota bakoitzeko

Tantak sikatu ondoren, plakak buruz behera inkubatu 37 ̊C -tan 24 orduz.

 Dentsitate mikrobianoaren determinazioa
10-1 10-2 10-3 10-4 10-5 10-6
Emaitzak

1. Aukeratu 10 eta 30 kolonia arteko diluzioa. Balioak < 10 koloniak ez du balio

estatistikorik, eta balioak >30 ez du bermatzen kolonien arteko bereizketa.
2. Kontagarria den diluzioaren Unitate Kolonia Eratzaileen (UKE) batez bestekoa
kalkulatzea.
3. Hasierako esekiduraren dentsitatea kalkulatzea ekuazioaren arabera, non 10n
diluzio-faktorea den (zenbaketaren diluzioa).
 Dentsitate mikrobianoaren determinazioa
Emaitzak

Mikrotanta eta diluzio bidezko UKEak

Diluzioa 10-1 10-2 10-3 10-4 10-5 10-6

1. tanta Kontaez Kontaez >30 18 3 0

2. tanta Kontaez Kontaez >30 15 2 0

3. tanta Kontaez Kontaez >30 16 6 0

UKE batez bestekoa= 16,33 16,33

-3 -4 = 1,09 x 10 7 UKE/ml
15 x 10 x 10