中国生物工程杂志　Ｃｈ

ｉｎａＢｉ
ｏｔ
ｅｃｈｎｏ
ｌｏｇ
ｙ，２
０１０，３０（５）：
１４０?
１４８

酵母细胞甘油代谢与生理功能研究进展
陈献忠１，２　王正祥１，２ 　诸葛健１
（１江南大学工业生物技术教育部重点实验室　无锡　２１
４１２２２）
（２江南大学生物工程学院 生物资源与生物能源研究中心　无锡　２１
４１２２）

摘要　甘油是酵母细胞生长代谢过程中常见的多元醇物质。尽管甘油的结构简单，代谢途径并
不复杂，但是其在细胞内的生理功能十分重要。甘油代谢过程主要参与细胞的高渗透压生理调
节和厌氧条件下的胞内氧化还原平衡调节。近年来许多学者在酵母细胞的甘油代谢及生理功能
方面开展了深入的研究。在扼要介绍甘油生理代谢的基础上，重点阐述甘油代谢参与细胞高渗
压甘油应答信号途径和氧化还原平衡调节的生理机制，同时就酵母细胞甘油合成的代谢工程进
行归纳和评述。
关键词　酵母细胞　甘油代谢　高渗压甘油途径　氧化还原平衡
中图分类号　Ｑ５９１

　　酵母细胞在长期的进化过程中形成一种非常保守 进展。本文介绍了酵母细胞甘油代谢的生理功能，结
的生理适应机制来应对外界环境的胁迫。这种机制表 合作者的工作阐述了酵母细胞过量合成甘油的机制和
现为细胞在胁迫条件下一系列信号转导过程和基因表 甘油途径代谢工程研究，同时对今后的研究方向进行
达调控过程，特别是转录水平上的激活和阻遏。生长 了展望。
因子、营养成分、供氧限制、渗透压改变、ｐＨ的变化或
温度的改变都会影响基因的表达，这种基因表达调节
１　酵母细胞甘油代谢途径
方式是由细胞的信号转导级联介导的。信号级联把胞 　　在酵母细胞内，
甘油的合成代谢由糖酵解途径的中
外胁迫信号传递到胞内，然后细胞迅速作出应答来适 间代谢产物磷酸二羟丙酮（ＤＨＡＰ）开始通过两步催化反
应或抵御这些胁迫环境。甘油在胞内快速的合成和积 应来完成的。如图 １所示，ＤＨＡＰ首先在胞浆 ＮＡＤ＋
依
累是酿酒酵母（Ｓａｃ
ｃｈａｒ
ｏｍｙ
ｃｅｓｃ
ｅｒｅ
ｖｉｓ
ｉａｅ
）以及其他酵母 赖的 ３
磷酸甘油脱氢酶（ＧＰＤ）作用下以 ＮＡＤＨ为氢供
细胞中一 种 重 要 的 高 渗 压 胁 迫 环 境 的 调 节 策 略 ［１２］。 体被还原为 ３
磷酸甘油（Ｇ３Ｐ），再在 ３
磷酸甘油酯酶
Ｓ．ｃ
ｅｒｅ
ｖｉｓ
ｉａｅ在以葡萄糖为碳源的培养环境中，遇到由 （ＧＰＰ）作用下脱去磷酸基而生成甘油。这条催化途径对
高盐引起的外界渗透压的升高时，甘油是最主要的生 于许多 酵 母 来 说 都 是 主 要 的 甘 油 合 成 途 径，对 于 Ｓ．
物相容性物质，同时海藻糖也常用来调节酵母胞内的 ｃ
ｅｒｅ
ｖｉｓ
ｉａｅ细胞，
参与催化反应的 ＧＰＤ和 ＧＰＰ分别存在两
渗透压平衡。另外，在厌氧或微氧条件下的甘油合成
个同功酶，ＧＰＤ１、ＧＰＤ２和 ＧＰＰ１、ＧＰＰ２，它们的编码基因
是调节酵母细胞胞内氧化还原电势平衡的重要途径之
分别为 ＧＰＤ１、ＧＰＤ２和 ＧＰＰ１、ＧＰＰ２［３］。大量研究表明
一。在细菌中，尽管甘油也有渗透压保护作用，但海藻
ＧＰＤ１和 ＧＰＰ２受渗透压诱导表达，而 ＧＰＤ２和 ＧＰＰ１则
糖和甘氨酸是主要的生物相容性物质。
是细胞处于厌氧环境时诱导表达的［３４］。
　　近年来，以酿酒酵母为模式菌株的细胞甘油生理
　　甘油的合成，作为葡萄糖代谢的一个重要的分支
代谢，特别是细胞在高渗压环境、厌氧条件或其他生理
途径，还受到许多其它胞内代谢中间产物的影响，比如
胁迫因素下的甘油应答信号途径的研究取得了很大的
ＡＴＰ，ＡＤＰ，ＮＡＤ＋和 １，
６二磷酸果糖等。代谢控制分析

收稿日期：２００
９１２
１６　　修回日期： ２０１００
３ ０９
研究发现，当胞内 ＡＴＰ／
ＡＤＰ升高 ５倍时，流向甘油的
 通讯作者，电子信箱：ｚ ｘ
ｗａｎｇ
＠ｊｉ
ａｎｇｎａｎ．ｅｄｕ．ｃｎ 碳代谢流量减少了 １０％，而当其比率由 １．７
２下降至
２０１０，
３０（５） 陈献忠 等：酵母细胞甘油代谢与生理功能研究进展 １４１

０．
８５时流向甘油的碳代谢流量增长约 １０％，有趣的是， 梭系统中发挥着重要的功能 ［６］，该基因的表达在转录
当 ＮＡＤ＋ ／
ＮＡＤＨ下降同样的幅度时，通向甘油的代谢 水平上受到葡萄糖阻遏。分解甘油的另一条途径是，
［５］
流量仅提高 １％ 。 或 ＹＰＲ１基因编码的 ＮＡＤＰ＋
甘油首先经由 ＧＣＹ１和 ／
　　在酵母细胞中也存在着两条分解甘油的途径（图 甘油脱氢酶催化生成二羟丙酮，后者再经由 ＤＡＫ１和 ／
１）。其中 一 条 主 要 的 途 径 是：甘 油 先 经 甘 油 激 酶 或 ＤＡＫ２基因编码的二羟丙酮激酶参与下进行磷酸化
（ＧＵＴ１）催化生成 ３
磷酸甘油，后者再经由 ＧＵＴ２基因 反应生成 ＤＨＡＰ，然 后 进 入 糖 酵 解 途 径，其 中 ＧＣＹ１，
＋
编码的线粒体 ＦＡＤ 
３磷酸甘油脱氢酶催化生成磷酸 ＹＰＲ１和 ＤＡＫ１基因在一定程度上受渗透诱导表达 ［７］。
二羟 丙 酮 （ＤＨＡＰ），最 后 ＤＨＡＰ由 磷 酸 丙 糖 异 构 酶 研究发现 ｇ
ｕｔ１／
ｇｕｔ
２缺失突变株不能以甘油为唯一碳源
（ＴＰＩ
）催化生成 ３
磷酸甘油醛（ＧＡ３Ｐ），后者进入糖酵 进行生长代谢 ［８］，因此，这条甘油分解途径对酵母细胞
解途径。该过程生成的电子通过 ＦＡＤＨ２ 进入线粒体的 并不是必需的。
呼吸链参与能量代谢。研究表明，ＧＵＴ２基因在 Ｇ３Ｐ穿

图 １　酿酒酵母甘油代谢途径示意图
Ｆｉ
ｇ．１　Ｔｈｅｏ
ｖｅｒ
ｖｉｅ
ｗｏｆｇ
ｌｙｃ
ｅｒｏ
ｌｍｅ
ｔａｂｏ
ｌｉｓ
ｍ ｐａ
ｔｈｗａ
ｙｉｎＳａ
ｃｃｈａ
ｒｏｍｙ
ｃｅｓｃ
ｅｒｅ
ｖｉｓ
ｉａｅ
ＡＹＲ１：
１酰基
３磷酸二羟丙酮氧化还原酶基因；
ＤＡＫ１／
ＤＡＫ２：二羟丙酮激酶基因；
ＦＰＳ
１：甘油通道蛋白基因；ＧＡＴ１：３
磷酸甘油乙酰转移酶和
ＧＣＹ１／
磷酸二羟丙酮乙酰转移酶； ＹＰＲ１：ＮＡＤＰ＋
甘油脱氢酶；
ＧＰＤ１／ 胞浆 ＮＡＤ＋
ＧＰＤ２： ３磷酸甘油脱氢酶；
ＧＰＰ
１／ＧＰＰ２：
３磷酸甘油酯酶基因；
ＧＵＴ ＧＵＴ２：线粒体 ＦＡＤ＋
１：甘油激酶基因； ３磷酸甘油脱氢酶基因；
ＴＤＨ１／
ＴＤＨ２／
ＴＤＨ３：３
磷酸甘油醛脱氢酶基因。ＥＴＣ：线粒体电子传递链

移 ［１０］。ＮＡＤＨ的产生 主 要 是 在 胞 浆 中 的 糖 酵 解 过 程
２　酵母细胞甘油代谢的生理功能
（包括细胞合成、氨基酸、核酸和磷脂的合成）和在线粒
２．
１　甘油合成参与细胞厌氧条件下的氧化还原调节 体内的三羧酸（ＴＣＡ）循环中，即异柠檬酸脱氢酶催化
　　无论是在有氧条件下还是在厌氧环境中，酿酒酵 α
酮戊二酸生成异柠檬酸时产生。由于酿酒酵母细胞
母为了维持正常的生理代谢和生长繁殖必须保持胞内 缺乏转运酶活力，胞质中的 ＮＡＤ＋ ／
ＮＡＤＨ无法穿过线
的氧化还原势处于平衡状态。一般而言，胞内氧化还 粒体膜，所以为了维持胞内氧化还原平衡，还原性的辅
原势主要由 ＮＡＤ＋ ／
ＮＡＤＨ和 ＮＡＤＰ＋ ／
ＮＡＤＰＨ来 决 定 酶必须在相应的区室内重新氧化成 ＮＡＤ＋。如图 ２所
的，但是前者所占比重要高于后者。在酿酒酵母中，超 示，在好氧条件下，胞质中 ＮＡＤＨ的重新氧化是分别通
过 ２００个代谢反应都需要这些辅酶的参与，因此这些 过线 粒 体 外 膜 上 由 ＮＤＥ１和 ＮＤＥ２基 因 编 码 的 两 种

辅酶在细胞中发挥着重要的功能 ［９］。在细胞整个代谢 ＮＡＤＨ脱氢酶催化完成的 ［１１］。当 ＮＡＤＨ生成速度超过

网络中 ＮＡＤＨ与代谢中间产物密切相连，即使 ＮＡＤ＋ ／ 其氧化速度时，Ｇ３Ｐ穿梭体系和乙醇

乙醛穿梭系统会

ＮＡＤＨ的 微 小 改 变 都 会 引 起 细 胞 整 个 代 谢 发 生 迁 发挥作用来氧化 ＮＡＤＨ ［６，１１］。而线粒体中的 ＮＡＤＨ是

通过线粒体内膜上由 ＮＤＩ
１基因编码的 ＮＡＤＨ脱氢酶
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ｌ．３０Ｎｏ
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重新被氧化的。如图 ２所示，在由 ６
磷酸葡萄糖生成 通过快速调节胞内的小分子生物相容性物质的浓度以
乙醇途径中，整个过程是氧化还原中性的，不会产生剩 免受到伤害。这也说明了在生物进化过程中为什么细
余的氧化力或还原力，但是在合成细胞和其它代谢产 胞的一些大分子物质对渗透压胁迫应答中的作用受到
物的过程中会产生过量的 ＮＡＤＨ，为维持细胞正常生长 限制。尽管不同物种和细胞之间存在差异，但是这种
＋
繁殖，多余的 ＮＡＤＨ必须重新氧化成 ＮＡＤ 。因此，在 生物相容性物质的积累通常都是受到促有丝分裂原激
厌氧 环 境 中 通 过 由 ＤＨＡＰ到 Ｇ３Ｐ的 生 化 反 应 消 耗 酶蛋白（ＭＡＰ
ｋｉｎ
ａｓ）调控的 ［１］。酵母的高渗透压甘油
ｅ
ＮＡＤＨ成为调节胞内氧化还原平衡的最主要而且最重 应答（ＨＯＧ）途径是目前已知研究最为透彻的渗透压胁
要的方式之一，而催化这个反应的酶正是由 ＧＰＤ２基因 迫应答调控机制 ［１６］。
编码的胞浆 ＮＡＤ＋
３磷酸脱氢酶 ［６，１２１５］。 　　当 酵 母 细 胞 处 于 渗 透 压 胁 迫 状 态 时，ＧＰＤ１和
　　当酵母细胞处于厌氧环境中时，
诱导 ＧＰＤ２和 ＧＰＰ１ ＧＰＰ２在短时间内诱导表达，促使代谢流迅速转向甘油
表达，
促使细胞合成甘油，
同时将胞内积累的过量 ＮＡＤＨ 合成途径并大量在胞内积累以平衡外界渗透压，从而
＋
再氧化为 ＮＡＤ ，维持胞内氧化还原电势的平衡。在厌 保护细胞免受渗透脱水的损伤。当 ＧＰＤ１基因缺失后，
ＧＰＤ２基因的缺失导致细胞甘油合成能力下降
氧环境中， 突变株表现出渗透压极为敏感，在高渗透压培养环境
４
０％左右，
乙醇生成能力提高，
同时细胞生物量也显著下 中不能正常生长，同时细胞的甘油合成能力显著下降，
［１
３］
降。而 ＧＰＤ１基因的缺失对甘油的合成影响不大 。 而 ＧＰＤ２基因的缺失对细胞的耐渗透压能力和渗透压
ｇ
ｐｄ１△ｇ
ｐｄ２△双重突变株则不能合成甘油，表现为渗透 胁迫条件下的甘油合成能力没有显著影响 ［１２，１７］。
压敏感及在厌氧环境中不能生长［１４１５］。但是，ＧＰＰ１和
３　酵母细胞甘油合成与 ＭＡＰＫ 信号级联
ＧＰＰ２中一个基因的缺失不会显著影响细胞在高渗透压
介导的 ＨＯＧ途径
或厌氧条件下甘油合成能力及表型改变，只有二者同时
缺失的突变株才会表现出甘油合成能力下降，对高渗透 ３．
１　ＭＡＰＫ信号转导途径
压的敏感性和厌氧生长缺陷 ［４］
。 　　酿酒酵母像其他真菌、植物和动物等真核生物一
样拥有典型的有丝分裂原激活蛋白激酶（ＭＡＰＫ）信号
转导途径，目前所知的酵母细胞 ＭＡＰＫ途径中存在至
少 ５种 ＭＡＰＫ级联体系，如图 ３所示，主要包括信息素
应答途径、单倍体侵袭和二倍体假菌丝形成途径、细胞
壁完整性途径、ＨＯＧ途径和孢子形成途径 ［１８］。它们是
酵母细胞非常重要并且高度复杂的信号转导途径，因
此研究 者 对 此 领 域 进 行 了 深 入 的 研 究 ［１８２０］。一 般 而
言，酿酒酵母细胞中的 ＭＡＰＫ级联系统主要由 ３个相
关 的 蛋 白 激 酶 组 成：ＭＡＰＫ ｋ
ｉｎａ
ｓｅ ｋｉ
ｎａｓ
ｅｋｉ
ｎａｓ
ｅ
（ＭＡＰＫＫＫ），ＭＡＰＫ ｋ
ｉｎａ
ｓｅｋ
ｉｎａ
ｓｅ（ＭＡＰＫＫ）和 ＭＡＰ
ｋｉ
ｎａｅ（ＭＡＰＫ）［２１］。在 ＭＡＰＫＫＫ的 Ｎ
ｓ 末端和 Ｃ
末端
图 ２　酿酒酵母细胞有氧呼吸和无氧发酵过程比较
分别存在一个调控结构域和丝氨酸 ／
苏氨酸（Ｓｅ
ｒ／Ｔｈ
ｒ）
Ｆｉ
ｇ．２
　Ｃｏ
ｍｐａ
ｒｉｓ
ｏｎｏ
ｆｍｅ
ｔａｂｏ
ｌｉ
ｃｐｒ
ｏｃｅ
ｓｓｉ
ｎＳａ
ｃｃｈａ
ｒｏｍｙ
ｃｅｓ
蛋白激酶保守域，当上游膜蛋白受体受到刺激后会激
ｃ
ｅｒｅ
ｖｉｓ
ｉａｅｕｎｄｅ
ｒａｅ
ｒｏｂｉ
ｃｒｅ
ｓｐｉ
ｒａｔ
ｉｏｎａ
ｎｄａ
ｎａｅ
ｒｏｂｉ
ｃ
活 ＭＡＰＫＫＫ，而 激 活 状 态 下 的 ＭＡＰＫＫＫ通 过 磷 酸 化
ｆ
ｅｒｍｅ
ｎｔａ
ｔｉｏ
ｎｃｏ
ｎｄｉ
ｔｉ
ｏｎｓ
ＭＡＰＫＫ保 守 位 点 的 丝 氨 酸 ／
苏氨残基从而激活
２．
２　高渗环境中的酵母胞内渗透压的调解 ＭＡＰＫＫ，被激活的 ＭＡＰＫＫ会通过磷酸化 ＭＡＰＫ蛋白
　　渗透压调解是细胞随着外界环境渗透压的改变而 中保守序列 Ｔｈ
ｒＸ
Ｔｙｒ中的苏氨酸和酪氨酸残基而导
自身作出的反应机制，通过这种机制细胞能够复原或 致 ＭＡＰＫ处于激活状态 ［１９］。当整个信号转导途径激活
维持自身的体积、压力和生理活性。胞内水的积累和 时，
ＭＡＰＫ的磷酸化会调节胞内一些常用的转录因子的
外溢都能干扰细胞正常的生理和生化过程从而导致细 活性，而 ＭＡＰＫ级联系统自身也受到胞内或胞外信号
胞的死亡。因此，当细胞受到外界渗透压胁迫时必须 的调控 ［２０］。尽管酿酒酵母 ＭＡＰＫ信号转导途径研究取
２０１０，
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图 ３　酿酒酵母细胞 ５种 ＭＡＰＫ介导的信号转导途径 ［１８，２０，２２］

Ｆｉ
ｇ．３　Ｆｉ
ｖｅＭＡＰＫ ｓ
ｉｇｎａ
ｌｔｒ
ａｎｓ
ｄｕｃ
ｔｉｏ
ｎｐａ
ｔｈｗａ
ｙｓｉ
ｎＳａ
ｃｃｈａ
ｒｏｍｙ
ｃｅｓｃ
ｅｒｅ
ｖｉｓ
ｉａｅ

得了很大进展，但由于各个信号途径行使的功能不同， 达，这些靶基因包括 ＧＰＤ１，ＨＳ

各途径的上游激活因子作用机制十分复杂，与甘油代
谢相关的 ＨＯＧ途径亦是如此。
３．
２　甘油合成与 ＭＡＰＫ介导的 ＨＯＧ途径
　　酵母细胞在生长过程中要求胞内的渗透压要高于
胞外，这样才能维持胞内的水分含量，以利于细胞的正
常生长繁殖。因此，胞外渗透压的升高对细胞来说是
有害的，必然会引起细胞作出胁迫应答。由 ＭＡＰＫ级
联系统介导的 ＨＯＧ在高渗透压胁迫应答中发挥着重
要的作用。ＨＯＧ信号途径如图 ４所示，主要由 ５个蛋
２和 ＨＯＧ１［１，２３］。
白激酶组成：ＳＫＫ２，ＳＳＫ２２，ＳＴＥ１１，ＰＢＳ
但是在 ＨＯＧ途径上游的渗透压信号感应受体可能存
在着两条支路：一是由 ＳＨＯ１和 Ｓ
ＴＥ１１跨膜蛋白组成；
另一条信 号 输 入 途 径 是 相 对 复 杂，由 ＳＬＮ１，ＹＰＤ１和
ＳＳＫ１三组分蛋白组成的跨膜复合物构成，这三个蛋白
在结构和功能上与其他细菌和植物中的二组分或三组
分磷酸化系统非常相似。尽管 ＳＨＯ１和 ＳＬＮ１均是作
为膜感应蛋白引发 ＨＯＧ途径起始的，但是到 目 前 为
止，这两种感应蛋白识别和接受外界渗透压改变的具
体机制还不清楚。
　　 任 意 一 条 上 游 支 路 的 激 活 均 可 引 起 ＨＯＧ１的
Ｔｈｒ
１７４和 Ｔｙ
ｒ１７６氨 基 酸 残 基 双 重 磷 酸 化，从 而 导 致
ＨＯＧ１蛋白 激 酶 由 细 胞 质 转 移 至 细 胞 核 内，在 核 内
ＨＯＧ１能够激活许多转录因子包括 ＨＯＴ１，ＭＳ
Ｎ２／
ＭＳＮ４
和 ＳＫＯ１［１，２３２４］等。这些反式转录因子通过与一些顺式
作用原件结合（主要是胁迫应答原件 ＳＴＲＥ，其保守序
列是 ＡＧＧＧＧ／
ＣＣＣＣＴ）调节受渗透压诱导型基因的表
Ｐ１２和 ＤＤＲ１等 ［１９］。胞
浆 ＮＡＤ
３磷酸甘油脱氢酶基因（ＧＰＤ１）是极其典型的
ＨＯＧ途径的靶基因，ＧＰＤ１基因的表达能够使细胞过量
合成并积累甘油，从而在短时间内提高胞内渗透压水
平来抵抗外界高渗透压的胁迫。另一方面，ＨＯＧ在细
胞中的持续激活会使细胞生长受损甚至致死，因此细
胞同时拥有下调 ＨＯＧ活性的调控机制。在酿酒酵母
细胞中，ＨＯＧ途径的负调控是由蛋白磷酸酯酶来完成
的，主 要 包 括 酪 氨 酸 蛋 白 磷 酸 酯 酶 （ｐｒ
ｏｔｅ
ｉｎｔ
ｙｒｏ
ｓｉｎｅ
ｐｈ
ｏｓｐ
ｈａｔ
ａｓｅ
ｓ，ＰＴＰ）ＰＴＰ２和 ＰＴＰ３［２５］，以及 ２Ｃ类蛋白磷
酸酯酶（ＰＰ２Ｃ）ＰＴＣ１和 ＰＴＣ３［２２］。这些调控因子能够
对已经磷酸化的 ＨＯＧ１进行去磷酸化，通过降低 ＨＯＧ１
的活性引起那些胁迫诱导型转录因子的失活，从而降
低 ＧＰＤ基因的表达，细胞的甘油合成能力会随之下降，
同时胞内过量的甘油也通过甘油通道蛋白（ＦＰＳ
１）迅速
输送到胞外，从而控制胞内甘油水平。因此，细胞通过
ＨＯＧ信号途径能够精确调控自身甘油合成能力和积累
水平来应对外界环境渗透压的改变。有趣的是，最近
的研究表明 ＨＯＧ信号途径并不仅仅具有调控细胞渗
透压平衡的作用，而且在细胞受到低温胁迫或高温冲
击时也发挥着不可忽视的作用 ［２６２７］。另外研究发现在
条件致病菌 Ｃａ
ｎｄｉ
ｄａａ
ｌｂｉ
ｃａｎ
ｓ中 ＨＯＧ还参与胞内 Ｄ
阿
拉伯醇的合成和积累 ［２４］，同时也对细胞壁中几丁质的
合成起着调节作用 ［２８］。
　　在高渗透压胁迫条件下，酵母细胞能够在数秒内
体积收缩，在 １ｍｉ
ｎ内会关闭甘油输出通道蛋白 Ｆｐ
ｓ１，
从而防止甘油向胞外泄露 ［２９］，与此同时，ＨＯＧ信号途
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ｏｔ
ｅｃｈｎｏ
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ｌ．３０Ｎｏ
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集于细胞核内通过激活一些反式转录因子来控制与甘
油合成和吸收蛋白编码基因的表达。研究发现细胞对
外界渗透压胁迫的适应程度依赖于胞内甘油的积累，
一旦胞内甘油水平达到最大值的三分之一时，激活状
态的 Ｈｏ
ｇ１ｐ就会开始被去磷酸化，从而削弱渗透压诱
导型基因的表达 ［３０］。

４　酵母胞浆 ３
磷酸甘油脱氢酶基因结构与
功能研究
４．
１　胞浆 ３
磷酸甘油脱氢酶基因的结构、亚细胞定位
与功能之间的关系
　　由于胞浆 ＮＡＤ＋
３磷酸甘油脱氢酶基因在酵母细胞
的渗透压适应和氧化还原调节中的重要作用，
因此，许多
学者通过遗传互补或 ＰＣＲ以及酵母全基因组搜索预测
图 ４　酿酒酵母细胞在高渗透压胁迫作用下的 等方法从不同的酵母细胞中克隆了胞浆 ＮＡＤ＋
３磷酸甘
高渗压甘油（ＨＯＧ）途径
油脱氢酶编码基因，并且部分基因进行了详细深入的功
Ｆｉ
ｇ．４　ＨＯＧ ｓ
ｉｇｎａ
ｌｔｒ
ａｎｓ
ｄｕｃ
ｔｉｏ
ｎｐａ
ｔｈｗａ
ｙｉｎ
能鉴定。已经从酵母中克隆或从基因组中搜索分析出的
Ｓａ
ｃｃｈａ
ｒｏｍｙ
ｃｅｓｃ
ｅｒｅ
ｖｉｓ
ｉａｅｕｎｄｅ
ｒｈｙ
ｐｅｒ
ｏｓｍｏ
ｔｉｃｓ
ｔｒｅ
ｓｓ
胞浆 ＮＡＤ＋
３磷酸甘油脱氢酶基因归纳如表 １。

径在很短的时间内被激活。激活状态的 Ｈｏ
ｇ１主要聚
表 １　来源于不同酵母中的胞浆 ＮＡＤ＋ ３
磷酸甘油脱氢酶基因
Ｔａ
ｂｌｅ１　ＮＡＤ＋
ｄｅｐｅ
ｎｄｅ
ｎｔｇ
ｌｙｃ
ｅｒｏ
ｌ３
ｐｈｏ
ｓｐｈａ
ｔｅｄｅ
ｈｙｄｒ
ｏｇｅ
ｎａｓ
ｅｅｎｃ
ｏｄｉ
ｎｇｇ
ｅｎｅ（ＧＰＤ）
ｃ
ｌｏｎｅ
ｄｏｒｓ
ｅａｒ
ｃｈｅ
ｄｉｎｇ
ｅｎｏ
ｍｉｃ
ｓｆｒ
ｏｍｖ
ａｒｉ
ｏｕｓｙ
ｅａｓ
ｔｓｐｅ
ｃｉｅ
ｓ
Ｓｔｒａｉｎｓ Ｇｅｎ
ｅ ＧｅｎｅＩ
Ｄ Ａｍｉ
ｎｏａｃｉ
ｄｒｅｓｉ
ｄｕｅ
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ｏｎ
Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙ ｃ
ｅｓｃ ｅ
ｒｅｖｉｓｉ
ａｅ ＧＰＤ１ ｇ
ｉ：６８３
６７５ ３９１ａａ 渗透压调节
Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙ ｃ
ｅｓｃ ｅ
ｒｅｖｉｓｉ
ａｅ ＧＰＤ２ ｇ
ｉ：５１１
１３５ ３８４ａａ 厌氧诱导
Ｚｙｇｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙ ｃ
ｅ ｓｒｏｕｘｉ
ｉ ＺｒＧＰＤ１ ｇ
ｉ：９８５
７６０９ ４０１ａａ 渗透压调节
Ｚｙｇｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙ ｃ
ｅ ｓｒｏｕｘｉ
ｉ ＺｒＧＰＤ２ ｇ
ｉ：９８５
７６１１ ３８９ａａ 能量合成和代谢
Ｄｅｂａｒｙｏｍｙ ｃｅ
ｓｈａｎ ｓｅ
ｎ ｉ
ｉ ＤｈＧＰＤ１ ｇ
ｉ：４０３
８５８６２ ３６９ａａ 渗透压调节
Ｓｃｈｉ
ｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙ ｃｅｓｐｏｍｂｅ ＳｐＧＰＤ１ ｇ
ｉ：１５８
６８１４ ３８５ａａ 渗透压调节
Ｓｃｈｉ
ｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙ ｃｅｓｐｏｍｂｅ ＳｐＧＰＤ２ ｇ
ｉ：１３４
６１６１ ３７３ａａ 未见报道
Ｃａｎｄ ｉ
ｄａａｌ ｂｉｃａｎ ｓ ＣａＧＰＤ１ ｇ
ｉ：６８４
８３４１２ ４０３ａａ 未见报道
Ｃａｎｄ ｉ
ｄａａｌ ｂｉｃａｎ ｓ ＣａＧＰＤ１ ｇ
ｉ：４６４
３５３８２ ３７１ａａ 未见报道
Ｋｌｕｙｖｅｒ
ｏｍｙ ｃｅｓｔ ｈｅｒｍｏ ｔ
ｏｌｅ
ｒａｎｓ ＫｔｈＧＰＤ ｇ
ｉ：３１３
２３２６４ ４１１ａａ 未见报道
Ｙａｒｒ
ｏ ｗｉａｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ Ｙｌ
ＧＰＤ１ ｇ
ｉ：８４７
００６２ ３９８ａａ 未见报道
Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙ ｃ
ｏｐ ｓｉｓｆｉｂｕｌｉ
ｇｅｒ
ａ Ｓｆ
ＧＰＤ１ ｇ
ｉ：１０７
１２４４２８ ３８７ａａ 未见报道
Ｐｉｃｈｉａｊａｄｉｎｉ
ｉ Ｐｊ
ＧＰＤ１ ｇ
ｉ：４５５
９７９１４ ３９３ａａ 未见报道
Ｐｉｃｈｉａｊａｄｉｎｉ
ｉ Ｐｊ
ＧＰＤ２ ｇ
ｉ：５９６
６８６９０ ３９４ａａ 未见报道
Ｃａｎｄ ｉ
ｄａｇｌ ａｂｒａ ｔａ ＣｇＧＰＤ１ ｇ
ｉ：７４６
６１４５２ ４２２ａａ 未见报道
Ｃａｎｄ ｉ
ｄａｇｌ ａｂｒａ ｔａ ＣｇＧＰＤ２ ｇ
ｉ：７４６
６１１５４ ４００ａａ 未见报道
Ｋｌｕｙｖｅｒ
ｏｍｙ ｃｅｓｌ ａｃｔｉｓ ＫｔＧＰＤ ｇ
ｉ：５０３
０４８３９ ４３９ａａ 未见报道
Ｃａｎｄ ｉ
ｄａｔ ｒｏｐｉ
ｃ ａｌｉｓ ＣｔＧＰＤ ｇ
ｉ：７４７
０５１４５ ３９１ａａ 未见报道
Ｐｉｃｈｉａｓｔｉ
ｐｉｔｉ
ｓ ＰｓＧＰＤ ｇ
ｉ：１５０
８６５３７８ ３９１ａａ 未见报道
Ｐｉｃｈｉａａｎｇｕｓ ｔ
ａ ＰａＧＰＤ ｇ
ｉ：７４６
６３４００ ３８１ａａ 未见报道
Ｐｉｃｈｉａｆａｒｉｎｏｓ
ａ ＰｆＧＰＤ ｇ
ｉ：１４８
５３５２３４ ３７０ａａ 未见报道
Ｃａｎｄ ｉ
ｄａｍａｇ ｎｏ ｌｉａｅ ＣｍＧＰＤ ｇ
ｉ：８３４
１５６０６ ３６０ａａ 未见报道
Ｃａｎｄ ｉ
ｄａｖ ｅｒｓ
ａｔ ｉｌｉ
ｓ ＣｖＧＰＤ ｇ
ｉ：１５７
０６０２１５ ３７８ａａ 未见报道
Ｃａｎｄ ｉ
ｄａｇｌ ｙｃｅｒｉｎｏ ｇｅｎｅｓ ＣｇＧＰＤ ｇ
ｉ：１５８
４２６７１７ ３８８ａａ 渗透压调节，氧化还原平衡

　　由表 １可以看出，来源于不同酵母属种的 ＮＡＤ＋ 使同一酵母细胞的两个异构酶基因编码蛋白分子量也

３
磷酸甘油脱氢酶基因编码蛋白的分子量均有差异，即 不相同，其中来源于光滑球拟酵母（Ｃａｎ
ｄｉｄａｇｌ
ａｂｒ
ａｔａ）
２０１０，
３０（５） 陈献忠 等：酵母细胞甘油代谢与生理功能研究进展 １４５

的 ＧＰＤ１ 和 耐 热 克 鲁 维 酵 母 （Ｋｌ
ｕｙｖ
ｅｒｏ
ｍｙｃ
ｅｓ 现与 酿 酒 酵 母 中 的 ＧＰＤ２基 因 的 氨 基 酸 结 构 十 分 相
ｔ
ｈｅｒ
ｍｏｔ
ｏｌ
ｅｒ
ａｎｓ
）ＧＰＤ编码的蛋白分子量较大，而大多数 似 ［３３］。有理由相信，ＣｇＧＰＤ基因既具有 ＧＰＤ１基因的
酵母 ３
磷酸甘油脱氢酶的分子量还是比较接近的，组 功能，又能互补 ＧＰＤ２基因的缺失，其原因可能是由其
成氨基酸数大都在 ３７０～３９０个左右。然而，令人感兴 自身的独特的蛋白质结构决定的。
趣的是在有些酵母中，ＧＰＤ基因是单拷贝存在的，如德 ４．
２　胞浆 ３
磷酸甘油脱氢酶基因删除或过量表达对
巴利汉逊酵母（Ｄｅ
ｂａｒ
ｙｏｍｙ
ｃｅｓｈａｎｓ
ｅｎｉ
ｉ）等，而有些酵母 酵母甘油合成能力的影响
的基 因 组 中 ＧＰＤ 存 在 着 同 工 异 构 酶 基 因，如 Ｓ． 　　在酒类发酵过程中，甘油是除乙醇和二氧化碳之
ｃ
ｅｒｅ
ｖｉｓ
ｉａｅ 的 ＧＰＤ１ 和 ＧＰＤ２ 基 因， 鲁 氏 酵 母 外最重要的副产物。由于酿酒酵母种类、葡萄汁的组
（Ｚｙ
ｇｏｓ
ａｃｃ
ｈａｒ
ｏｍｙ
ｃｅｓｒ
ｏｕｘ
ｉｉ）的 Ｚｒ
ＧＰＤ１和 Ｚｒ
ＧＰＤ２等。 成和发酵条件的不同，在葡萄酒中甘油的含量大约在 ２
　 　 最 近 研 究 者 发 现，在 Ｓ．ｃ
ｅｒｅ
ｖｉｓ
ｉａｅ中，ＧＰＤ１和 ～１ Ｌ。因此，根据工业应用的需要通过遗传方法修
１ｇ／
ＧＰＤ２在甘油代谢中发挥不同作用的原因在于二者在 饰甘油代谢途径以提高或降低细胞甘油合成能力是最
［３
１］
细胞器内位置差异引起的 。ＧＰＤ１和 ＧＰＤ２在细胞 为常见的策略，通过代谢工程改造酵母的甘油代谢途
内呈现出区室化分布的特点，种蛋白区室化分布的现 径得到了广泛的应用。目前，通过敲除或过量表达甘
象在酵母细胞中也存在于其他蛋白。ＧＰＤ１蛋白的一 油合成关键酶基因以及糖酵解途径的相关基因来改善
部分存在于胞浆中，而另一部分存在于过氧化物酶体 细胞甘油代谢能力的报道较多。
之中，它可能参与 Ｇ３Ｐ
ＤＨＡＰ穿梭将过氧化物酶体中 　　在酿酒酵母细胞中，ＤＨＡＰ经过两次催化反应生成
［３
２］
脂肪酸 β
氧化时产生的 ＮＡＤＨ重新氧化 。而 ＧＰＤ２ 甘油，尽管 Ｇｐ
ｄ和 Ｇｐ
ｐ在甘油合成途径中是必不可少
蛋白尽管是典型的胞浆蛋白，但是研究发现其 Ｎ
端部 的，但是大量研究表明，ＧＰＤ在甘油的合成过程中起着
分１
７个氨基酸残基是作为典型线粒体靶序列而存在， “阀门”作用，这是因为在相同培养条件下胞内 ＧＰＰ的
能够被线粒体识别并切割作为线粒体输送蛋白的前导 活力 远 高 于 ＧＰＤ［３］，同 时 研 究 发 现 ＧＰＤ１或 ＧＰＤ１／
序列，同 时 以 ＧＰＤ２基 因 启 动 子 融 合 绿 色 荧 光 蛋 白 ＧＰＤ２基因缺失的突变株显著降低甚至完全缺失了细
（ＧＦＰ）基因进行蛋白亚细胞定位进一步表明该蛋白是 胞的甘油合成能力 ［１４，１７］，而过量表达 ＧＰＤ１基因的酵
同时存在于线粒体膜和胞浆中 ［３１］。在非呼吸条件下， 母菌株能够显著地提高甘油的合成能力 ［３５３６］。相反，
ＧＰＤ２可以与乙醇
乙醛穿梭协同作用维持胞浆和线粒 ＧＰＰ１和 ＧＰＰ２两个基因任何一个缺失都不会显著影响
［３
１］
体内氧化还原势平衡 ，这中 ＧＰＤ１和 ＧＰＤ２在亚细 细胞在高渗透压或厌氧条件下甘油合成能力和表型变
胞位置的不同分布也许是二者具有不同生理功能和不 化 ［４］，另一方面过量表达 ＧＰＰ基因并不能显著提高细
同表达调节方式的主要原因。这些研究表明，不同的 胞的甘油合成能力 ［３７］。Ｃａ ｎ等 ［３８］在工业酵母中通
ｍｂｏ
培养条件下甘油的合成对细胞内区室化的氧化还原调 过删除胞浆 ＮＡＤＰ＋
乙醛脱氢酶基因和过量表达 ＧＰＤ１
节似乎是必需的。 基因后，在葡萄酒发酵条件下，重组工业菌株的甘油合
　　我们从高产甘油的工业酵母产甘油假丝酵母中克 成能力显著上升而酒精产量明显下降，从而达到了低
隆了编码胞浆 ３
磷酸甘油脱氢酶基因（Ｃｇ
ＧＰＤ），并进 酒精度酿酒的目的，但是在甘油合成能力提高的同时
［３
３３
４］
行了功能鉴定 。Ｓｏ
ｕｔｈｅ
ｒｎ杂交分析显示 Ｃｇ
ＧＰＤ基 发酵产物中副产物 ３
羟基丁酮的含量也随之上升。
因在染色体中以单拷贝方式存在，并没有发现同工异 　　另一方面，在以酵母发酵法生产甘油的研究中，通
构酶基因。功能分析表明 ＣｇＧＰＤ基因在 ｇ
ｐｄ１／
ｇｐｄ
２缺 过代谢修饰改善细胞 的 甘 油 合 成 能 力 取 得 了 很 大 进
失酿酒酵母突变株表达中既具有 ＧＰＤ１基因的渗透压 展。Ｃｏ
ｒｄｉ
ｅｒ等 ［３９］以 Ｓ．ｃ
ｅｒｅ
ｖｉｓ
ｉａｅ为宿主，在删除磷酸丙
调节功能，又能在厌氧培养环境中互补 ＧＰＤ２基因的功 ）、ＮＡＤ＋
糖异 构 酶 （ＴＰＩ 乙 醇 脱 氢 酶 （ＡＤＨ１）和 胞 浆
能，使缺失突变株能够正常生长，同时提高了突变株的 ＮＡＤ＋
乙醛 脱 氢 酶 （ＡＬＤ３）编 码 基 因 后，过 量 表 达
甘油合成能力 ［３３３４］。对 ＣｇＧＰＤ基因序列进一步分析 ＧＰＤ１基因和 ＦＰＳ
１基因，获得重组酿酒酵母在分批发
时发现存在着两个重叠的开放阅读框，其差别仅在 Ｎ 酵条件下甘油合成能力达到 ０．
４６ｇ／
ｇ葡萄糖。在转录
端相差 ２７氨基酸残基。以较长的编码框蛋白进行亚 组学水平 上 分 析 发 现，这 些 代 谢 修 饰 上 调 了 ＮＡＤ＋ ／
细胞定位预测时发现，在蛋白质的 Ｎ
端存在着 ４８个氨 ＮＡＤＰ＋的结合蛋白表达，抑制了部分 ＴＣＡ循环和呼吸
基酸残基是作为线粒体识别信号序列存在的，这个发 链氧化过程中的部分酶的表达，同时下调了一些蛋白
１４６ 中国生物工程杂志 Ｃｈｉ
ｎａＢｉ
ｏｔ
ｅｃｈｎｏ
ｌｏｇ
ｙ Ｖｏ
ｌ．３０Ｎｏ
．５２０１０

质合成和核糖体合成过程中必需基因的表达。
参考文献
５　结论与展望 ［１Ｈｏ
ｈｍａ
ｎｎＳ．Ｏｓ
ｍｏｔ
ｉｃｓ
ｔｒ
ｅｓｓｓ
ｉｇｎ
ａｌｉ
ｎｇａ
ｎｄｏ
ｓｍｏ
ａｄａ
ｐｔａ
ｔｉ
ｏｎｉ
ｎｙｅ
ａｓｔ
ｓ．

　　ＭＡＰＫ信号转导途径是酵母细胞适应外界环境变 Ｍｉ
ｃｒｏ
ｂｉｏ
ｌＭｏ
ｌＢｉ
ｏｌＲｅ
ｖ，２０
０２，６６（２）：３０
０３
７２．
［２］ Ｍａ
ｅｄａＴ，Ｗｕ
ｒｇｌ
ｅｒ
Ｍｕｒ
ｐｈｙＳＭ，Ｓ
ａｉｔ
ｏＨ．Ａ ｔ
ｗｏ
ｃｏｍｐ
ｏｎｅ
ｎｔ
化的一种重要调控机制，其中 ＨＯＧ途径对于酵母细胞
ｓ
ｙｓｔ
ｅｍｔ
ｈａｔｒ
ｅｇｕ
ｌａｔ
ｅｓａ
ｎｏｓ
ｍｏｓ
ｅｎｓ
ｉｎｇＭＡＰｋｉ
ｎａｓ
ｅｃａ
ｓｃａ
ｄｅｉ
ｎｙｅ
ａｓｔ
．
在高渗条件下的生长是必需的。高渗透压环境、厌氧
Ｎａ
ｔｕｒ
ｅ，１
９９４，３
６９（６４
７７）：２４
２２
４５．
培养是酵母细胞在生长繁殖过程中经常遇到的胁迫现
［３］Ｗａ
ｎｇＺＸ，Ｚｈ
ｕｇｅＪ
，Ｆａ
ｎｇＨ，ｅ
ｔａｌ
．Ｇｌ
ｙｃｅ
ｒｏｌｐｒ
ｏｄｕｃ
ｔｉ
ｏｎｂｙ
象。在长期的生物进化过程中，酵母逐步形成了抵抗 ｍｉ
ｃｒｏ
ｂｉａ
ｌｆｅ
ｒｍｅ
ｎｔａ
ｔｉ
ｏｎ：ａｒ
ｅｖｉ
ｅｗ．Ｂｉ
ｏｔ
ｅｃｈｎ
ｏｌＡｄｖ
，２００
１，１９（３）：
外界胁迫环境的生理机制，即通过甘油代谢来调节胞 ２０１
２２３．
内渗透压的平衡和氧化还原势的平衡。渗透压胁迫条 ［４］Ｐａ
ｈｌｍａ
ｎＡＫ，Ｇｒ
ａｎａ
ｔｈＫ，Ａｎ
ｓｅｌ
ｌＲ，ｅ
ｔａｌ
．Ｔｈ
ｅｙｅ
ａｓｔｇ
ｌｙｃ
ｅｒｏ
ｌ３

件下，甘油在胞内快速的合成和积累是通过 ＭＡＰＫ级 ｐ
ｈｏｓ
ｐｈａ
ｔａｓ
ｅｓ Ｇｐｐ
１ｐ ａ
ｎｄ Ｇｐｐ
２ｐ ａ
ｒｅ ｒ
ｅｑｕ
ｉｒｅ
ｄ ｆ
ｏｒｇ
ｌｙｃ
ｅｒｏ
ｌ
ｂｉ
ｏｓｙ
ｎｔｈ
ｅｓｉ
ｓａｎｄｄ
ｉｆｆ
ｅｒｅ
ｎｔｉ
ａｌ
ｌｙｉ
ｎｖｏ
ｌｖｅ
ｄｉｎｔ
ｈｅｃ
ｅｌｌ
ｕｌａ
ｒｒｅ
ｓｐｏ
ｎｓｅ
ｓｔｏ
联系统介导的 ＨＯＧ信号途径来实现的。促分裂原蛋
ｏ
ｓｍｏ
ｔｉ
ｃ，ａ
ｎａｅ
ｒｏｂｉ
ｃ，ａ
ｎｄｏ
ｘｉｄａ
ｔｉ
ｖｅｓ
ｔｒ
ｅｓｓ
．ＪＢｉ
ｏｌＣｈ
ｅｍ，２
００１，２７
６
白激酶 ＨＯＧ１是该途径的关键作用因子，并且这一特
（５）：３５５
５３
５６３．
点在真核生物中具有高度的保守性。ＨＯＧ途径除了负
［５］ Ｃｒ
ｏｎｗｒ
ｉｇｈｔＧ Ｒ，Ｒｏ
ｈｗｅ
ｒＪＭ，Ｐｒ
ｉｏｒＢ Ａ．Ｍｅ
ｔａｂ
ｏｌｉ
ｃｃｏ
ｎｔｒ
ｏｌ
责细胞在高渗透压环境中的胁迫应答外，其他胁迫条 ａ
ｎａｌ
ｙｓｉ
ｓｏｆｇ
ｌｙｃ
ｅｒｏ
ｌｓｙ
ｎｔｈ
ｅｓｉ
ｓｉｎＳａｃ
ｃｈａｒ
ｏｍｙ
ｃｅｓｃ
ｅｒｅ
ｖｉｓ
ｉａｅ
． Ａｐ
ｐｌ
件如热胁迫、冷胁迫等也能在一定程度上激活 ＨＯＧ途 Ｅｎｖ
ｉｒｏ
ｎＭｉ
ｃｒｏ
ｂｉｏ
ｌ，２０
０２，６８（９）：４４
４８
４４５６．
径。尽管近年来 ＨＯＧ途径的相关研究进展迅速，但是 ［６］Ｌａ
ｒｓｓ
ｏｎＣ，Ｐａ
ｈｌｍａ
ｎＩＬ，Ａｎ
ｓｅｌ
ｌＲ，ｅ
ｔａｌ
．Ｔｈ
ｅｉｍｐｏ
ｒｔａ
ｎｃｅｏ
ｆｔｈｅ
还有不少问题尚未清楚，如 Ｓｌ
ｎ１ｐ作为酿酒酵母细胞中 ｇ
ｌｙｃ
ｅｒｏ
ｌ３
ｐｈｏ
ｓｐｈ
ａｔｅｓ
ｈｕｔ
ｔｌ
ｅｄｕｒ
ｉｎｇａ
ｅｒｏ
ｂｉｃｇ
ｒｏｗｔ
ｈｏｆＳａｃ
ｃｈａｒ
ｏｍｙ
ｃｅｓ

唯一的组氨酸激酶如何接受外界渗透压变化的机制不 ｃ
ｅｒｅ
ｖｉｓ
ｉａｅ
．Ｙｅ
ａｓｔ
，１９
９８，１４（４）：３
４７
３５７．
［７］ Ｎｏ
ｒｂｅ
ｃｋＪ
， Ｂｌ
ｏｍｂ
ｅｒｇ Ａ． Ｍｅ
ｔａｂ
ｏｌｉ
ｃａｎ
ｄｒｅ
ｇｕｌ
ａｔ
ｏｒｙｃ
ｈａｎ
ｇｅｓ
详，Ｓｈｏ
１ｐ作为另一种渗透压感应蛋白，在传递渗透压
ａ
ｓｓｏ
ｃｉａ
ｔｅｄｗｉ
ｔｈｇ
ｒｏｗｔ
ｈｏｆＳ
ａｃｃ
ｈａｒ
ｏｍｙ
ｃｅｓｃ
ｅｒｅ
ｖｉｓ
ｉａｅｉ
ｎ１．４Ｍ Ｎａ
Ｃｌ．
信号 时 与 Ｓｌ
ｎ１ｐ有 无 分 分 工 也 需 研 究。 总 之，关 于
Ｅｖ
ｉｄｅ
ｎｃｅｆ
ｏｒｏ
ｓｍｏ
ｔｉ
ｃｉｎｄ
ｕｃｔ
ｉｏ
ｎｏｆｇ
ｌｙｃ
ｅｒｏ
ｌｄｉ
ｓｓｉ
ｍｉｌ
ａｔ
ｉｏ
ｎｖｉ
ａｔｈｅ
ＨＯＧ途径对细胞生理功能的影响及其作用机制的探索
ｄｉ
ｈｙｄｒ
ｏｘｙ
ａｃｅ
ｔｏｎ
ｅｐａ
ｔｈｗａ
ｙ．ＪＢｉ
ｏｌＣｈ
ｅｍ，１
９９７，２７２（９）：５５４４
是一个重要的研究方向。 ５５５
４．
　　ＧＰＤ１基因是甘油合成的限速酶基因，是 ＨＯＧ途 ［８］ Ｒｏ
ｎｎｏ
ｗ Ｂ， Ｋｉ
ｅｌ
ｌａ
ｎｄ
Ｂｒａ
ｎｄｔ Ｍ Ｃ． ＧＵＴ２， ａ ｇ
ｅｎｅ ｆ
ｏｒ
径的靶基因，其表达调控受到渗透压的严格诱导，但是 ｍｉ
ｔｏ
ｃｈｏ
ｎｄｒ
ｉａｌｇ
ｌｙｃ
ｅｒｏ
ｌ３
ｐｈｏ
ｓｐｈ
ａｔｅｄ
ｅｈｙ
ｄｒｏ
ｇｅｎ
ａｓｅｏ
ｆＳａｃ
ｃｈａｒ
ｏｍｙ
ｃｅｓ

应该看到酵母高渗压 胁 迫 应 答 机 制 远 较 甘 油 积 累 复 ｃ
ｅｒｅ
ｖｉｓ
ｉａｅ
．Ｙｅ
ａｓｔ
，１９
９３，９（１
０）：１
１２１
１１３０．

杂。在厌氧条件下，酵母细胞通过甘油合成调节胞内 ［９］Ｆｏ
ｒｓｔ
ｅｒＪ
，Ｆａ
ｍｉｌ
ｉＩ，ＦｕＰ，ｅ
ｔａｌ
．Ｇｅ
ｎｏｍｅ
ｓｃ
ａｌｅｒ
ｅｃｏ
ｎｓｔ
ｒｕｃ
ｔｉ
ｏｎｏ
ｆ
ｔ
ｈｅＳ
ａｃｃ
ｈａｒ
ｏｍｙ
ｃｅｓｃ
ｅｒｅ
ｖｉｓ
ｉａｅ ｍｅ
ｔａｂｏ
ｌｉ
ｃｎｅ
ｔｗｏ
ｒｋ． Ｇｅ
ｎｏｍｅ Ｒｅ
ｓ，
的氧化还原势的平衡，此时的甘油合成主要由 ＧＰＤ２基
２００
３，１
３（２）：２４４
２５３．
因控制，该基因的表达受厌氧诱导调控。以酿酒酵母、
［１０］Ｎｉ
ｅｌ
ｓｅｎＪ
．Ｉｔｉ
ｓａｌ
ｌａｂｏ
ｕｔｍｅ
ｔａｂ
ｏｌｉ
ｃｆｌ
ｕｘｅ
ｓ．ＪＢａ
ｃｔｅ
ｒｉｏ
ｌ，２
００３，１８
５
鲁氏酵母或毕赤酵母为宿主，以 ＧＰＤ１和 ／
或 ＧＰＤ２为
（２４）：７
０３１
７０３
５．
靶基因的甘油代谢工程研究报道较多。针对酿酒酵母 ［１１］Ｌｕ
ｔｔｉ
ｋＭ Ａ，Ｏｖ
ｅｒｋ
ａｍｐＫＭ，Ｋｏ
ｔｔ
ｅｒＰ，ｅ
ｔａｌ
．ＴｈｅＳａｃ
ｃｈａｒ
ｏｍｙ
ｃｅｓ
的 ＧＰＤ１和 ＧＰＤ２蛋白的亚细胞位置与其生理功能关 ｃ
ｅｒｅ
ｖｉｓ
ｉａｅＮＤＥ１ ａ
ｎｄＮＤＥ２ ｇ
ｅｎｅ
ｓｅｎ
ｃｏｄ
ｅｓｅ
ｐａｒ
ａｔｅｍｉ
ｔｏ
ｃｈｏ
ｎｄｒ
ｉａｌ
系的研究结果表明酵母细胞胞浆 ３
磷酸甘油脱氢酶的 ＮＡＤＨｄ
ｅｈｙ
ｄｒｏ
ｇｅｎａ
ｓｅｓｃ
ａｔａ
ｌｙｚ
ｉｎｇｔ
ｈｅｏ
ｘｉｄ
ａｔｉ
ｏｎｏ
ｆｃｙ
ｔｏｓ
ｏｌｉ
ｃＮＡＤＨ．

Ｎ端部分氨基酸对该酶的结构、细胞位置和生理功能 ＪＢｉ
ｏｌＣｈ
ｅｍ，１
９９８，２７
３（３
８）：２４
５２９
２４５
３４．

起着十分重要的作用。因此，我们相信通过定点突变 ［１
２］ Ｅｒ
ｉｋｓ
ｓｏｎ Ｐ， Ａｎｄ
ｒｅ Ｌ， Ａｎ
ｓｅｌ
ｌ Ｒ， ｅ
ｔａｌ
． Ｃｌ
ｏｎｉ
ｎｇａ
ｎｄ
ｃ
ｈａｒ
ａｃｔ
ｅｒｉ
ｚａｔ
ｉｏ
ｎｏｆＧＰＤ２，ａｓ
ｅｃｏ
ｎｄｇ
ｅｎｅｅ
ｎｃｏ
ｄｉｎｇｓ
ｎｇ
ｌｙｃ
ｅｒｏ
ｌ３
或其他分子生物学方法研究 Ｎ端氨基酸残基的功能将
ｐｈｏ
ｓｐｈ
ａｔｅｄ
ｅｈｙ
ｄｒｏ
ｇｅｎ
ａｓｅ（ＮＡＤ ＋） ｉ
ｎＳａ
ｃｃｈａｒ
ｏｍｙ
ｃｅｓｃ
ｅｒｅ
ｖｉｓ
ｉａｅ
，
进一步揭示 ＧＰＤ基因的生理功能。另外，在借鉴酿酒
ａ
ｎｄｉ
ｔｓｃ
ｏｍｐａ
ｒｉｓ
ｏｎｗｉ
ｔｈＧＰＤ１．Ｍｏ
ｌＭｉ
ｃｒｏ
ｂｉｏ
ｌ，１
９９５，１７（１）：９５
酵母研究的基础上，开展非酿酒酵母，特别是工业应用
１０７．
酵母如产甘油假丝酵母的 ＣｇＧＰＤ基因结构与特殊功 ［１
３］ Ｎｉ
ｓｓｅ
ｎ Ｔ Ｌ， Ｈａ
ｍａｎｎ Ｃ Ｗ， Ｋｉ
ｅｌ
ｌａ
ｎｄ
Ｂｒａ
ｎｄｔＭ Ｃ， ｅ
ｔａｌ
．
能及其催化机理之间的关系的研究将会更有意义而且 Ａｎ
ａｅｒ
ｏｂｉ
ｃａｎｄａ
ｅｒｏ
ｂｉｃｂ
ａｔｃ
ｈｃｕ
ｌｔｉ
ｖａｔ
ｉｏ
ｎｓｏ
ｆＳａ
ｃｃｈ
ａｒｏ
ｍｙｃ
ｅｓｃ
ｅｒｅ
ｖｉｓ
ｉａｅ
十分必要。 ｍｕ
ｔａｎｔ
ｓｉｍｐ
ａｉｒ
ｅｄｉ
ｎｇｌ
ｙｃｅ
ｒｏｌｓ
ｙｎｔ
ｈｅｓ
ｉｓ．Ｙｅ
ａｓｔ
，２０００，１６（５）：４６３
２０１０，
３０（５） 陈献忠 等：酵母细胞甘油代谢与生理功能研究进展 １４７

４
７４． ｃ
ｏｏｒ
ｄｉｎ
ａｔｅａ
ｃｔｉ
ｖｉ
ｔｙｏ
ｆＭＡＰｋ
ｉｎａ
ｓｅｐ
ａｔｈ
ｗａｙ
ｓ．Ｍｉ
ｃｒｏ
ｂｉｏ
ｌｏｇ
ｙ，２００
３，
［１４］Ａｎ
ｓｅｌ
ｌＲ，Ｇｒ
ａｎａ
ｔｈＫ，Ｈｏ
ｈｍａ
ｎｎＳ，ｅ
ｔａｌ
．Ｔｈ
ｅｔｗｏｉ
ｓｏｅ
ｎｚｙ
ｍｅｓｆ
ｏｒ １４９（Ｐｔ５）：１
１９３
１２０４．
ｙ
ｅａｔＮＡＤ＋
ｓ ｄｅｐｅ
ｎｄｅ
ｎｔｇ
ｌｙｃ
ｅｒｏ
ｌ３
ｐｈｏ
ｓｐｈａ
ｔｅｄｅ
ｈｙｄ
ｒｏｇ
ｅｎａ
ｓｅｅ
ｎｃｏ
ｄｅｄ ［２７］Ｐａ
ｎａｄ
ｅｒｏＪ
，Ｐａ
ｌｌ
ｏｔ
ｔｉＣ，Ｒｏ
ｄｒｉ
ｇｕｅ
ｚＶａ
ｒｇａ
ｓＳ，ｅ
ｔａｌ
．Ａｄｏ
ｗｎｓ
ｈｉｆ
ｔｉｎ
ｂｙＧＰＤ１ａ
ｎｄＧＰＤ２ｈａ
ｖｅｄｉ
ｓｔ
ｉｎｃ
ｔｒｏ
ｌｅｓｉ
ｎｏｓ
ｍｏａ
ｄａｐ
ｔａｔ
ｉｏ
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ｙｃｅ
ｒｏｌｐ
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ｙ　 Ｒｅ
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ｌａｎ
ｃｅ

沃特世推出新款质谱仪，扩展 Ｘｅ
ｖｏ质谱平台
　　近日，沃特世公司在美国质谱协会（ＡＳ
ＭＳ）第 ５
８届年会上推出了新款质谱仪 Ｘｅ
ｖｏＴＱ－Ｓ和 Ｘｅ
ｖｏＧ２ＱＴｏ
ｆ，从而将台式
质谱的定性和定量分析性能提升到了崭新水平。此两款新型质谱仪是沃特世台式质谱仪 Ｘｅ
ｖｏ家族的最新成员，与沃特世
公司的 ＡＣＱＵＩ
ＴＹ超高效液相色谱（ＵＰＬＣ）系统结合使用，可以为科研工作者在化合物鉴定、定量分析和筛查，或通
过一次分析从最小样品量中提取最多信息等工作提供更高灵敏度水平与更强大分离能力相结合的分析技术。