Professional Documents
Culture Documents
استخراج و جداسازی با ماکروفر
استخراج و جداسازی با ماکروفر
استخراج همزمان با مایکروویو و جداسازی ترکیبات آلی فرار و غیرفرار برگهای بولدو .از آزمایشگاه تا مقیاس صنعتی
1
لویک پتینی ، 1،2ساندرین پرینو ،* ،1ماتئو مینوتی ، 3فرانچسکو ویسینونی ، 3جوئل وجسمن 2و فرید چمت
1
INRA،تیم استخراج سبز ،موسسه ملی تحقیقات کشاورزی
آوینیون ،فرانسه؛ ، F-84000دانشگاه آوینیون UMR 408،واحد تحقیقات مختلط
): loic.petigny@univ-avignon.fr (LP); farid.chemat@univ-avignon.fr (FCایمیل
2
: joel.wajsman@basf.comلیون ،فرانسه؛ ایمیل ، F-69007فرانسه BASF، Beauty Care Solutions
3
برگامو ،ایتالیا؛ Milestone srl، Via Fatebenefratelli 1/5، I-26010 Sorisole،
) f.visinoni@milestonesrl.com (FV؛): m.minuti@milestonesrl.com (MMایمیل
تلفن ;426-144-490-33+ :فکس: sandrine.perino@univ-avignon.fr; + :نویسنده ای که مکاتبات باید خطاب به او باشد .ایمیل *
441-144-490-33.
دریافت 17 :فوریه ;2014به صورت اصالح شده 9 :آوریل / 2014پذیرش 11 :آوریل / 2014انتشار 25 :آوریل 2014
چکیده :استخراج و جداسازی با مایکروویو برای افزایش غلظت عصاره نسبت به روش معمولی با نسبت جامد به مایع یکس††ان،
.از ترکیب††ات آلی غ††یرفرار اس††تفاده ش††ده است ) (VOCک††اهش زم††ان اس††تخراج و جداس††ازی همزم††ان ترکیب††ات آلی ف††رار
از برگ های بولدو .به عنوان مطالعه اولیه ،یک روش سطح پاس††خ ب††رای بهین††ه س††ازی اس††تخراج م††واد محل††ول و )(NVOC
از گیاه در مقیاس آزمایشگاهی استفاده شده است .نتایج حاصل از تجزیه و تحلیل آماری نشان داد ک††ه ش††رایط VOCجداسازی
بهینه عبارتند از :توان مایکروویو 200وات ،زمان استخراج 56دقیق††ه و نس††بت م††ایع جام††د 7.5درص††د گیاه††ان در آب .روش
آب W/gمایکروویو بهینه شده در مقیاس آزمایشگاهی ب†ا تقط†یر معم†ولی مقایس†ه ش††ده اس††ت و ب†ه نس†بت ت†وان ب††ه ج††رم 0.4
.مصرفی نیاز دارد .این نسبت توان/جرم به منظور ارتقاء سطح از آزمایشگاه به کارخانه آزمایشی حفظ می شود
کلمات کلیدی :بولدو; استخراج و جداسازی به کمک مایکروویو؛ آلکالوئید مقیاس آزمایشی؛ اسانس
معرفی 1.
یک گیاه دویی بومی در شیلی است [ .]1چندین داروسازی استفاده از آن را ب††ه عن†وان دم ک††رده ) ( Peumus boldus Molinaبولدو
برگ برای اثرات محافظتی گوارشی و کبدی -صفراوی مستند کرده اند .این اثرات توسط مولک††ول ه††ای فع††ال ایج††اد می ش††ود ک††ه می توانن††د ب††ه
.طبقه بندی شوند ) (NVOCیا ترکیبات آلی غیر فرار ) (VOCعنوان ترکیبات آلی فرار
فعال فالونوئیدها ،پلی فنل ها [ †]4-2یعنی کوئرستین ،ایزورامنتین ،کامفرول و آلکالوئیدهایی مانن†د بول†دین ک†ه آلکالوئی†د NVOCدر میان
اصلی ،آنتی اکسیدان قوی و پاک کننده رادیکال های آزاد است ،وجود دارد [ .]5،6این ترکیب اصلی مسئول اث††رات مح††افظت از گ†وارش و کب†د
مانن††د VOCاست .بولدین را می توان با خیساندن در آب استخراج کرد .برگ های بولدو همچنین حاوی ٪0.4تا ٪3اسانس است که عم††دتا ً از
تشکیل شده است .این مولکول ها می توانند حاللیت کمی در آب داشته باشند و ب††ه )، p -cymene، d -limonene...آسکاریدول( ترپن ها
بین المللی جی .مول .علمی 15 ، 2014 7184
در گیاه میتوان††د چن††دین نگ†رانی ب††رای س††المتی ایج††اد کن††د :آنه††ا اج†زای س††می ،مح††رک ی††ا VOCعصاره آبی بوی متمایزی بدهند .وجود این
را می ت†وان ب††ه راح†تی ب†ا VOCآلرژیزا هستند [ .]9-7اسانس زیست فعال ،پرو اکسیدان است و خواص ضد ق††ارچی دارد [ .]12-4،10این
.تقطیر آزئوتروپیک از برگ ها استخراج کرد
با تقطیر . VOCقابل استخراج و جداسازی فیزیکی هستند NVOCو ، VOCتقطیر با آب یک فرآیند بسیار کامل است .در یک مرحله
. NVOCآزئوتروپیک از ماتریکس جدا می شود ،س††پس م††تراکم می ش††ود ،جم††ع آوری می ش††ود و در ی††ک فالس††ک فلورانس††ی ج††دا می ش††ود
محلول در آب جوش در تماس با ماتریکس داخل آالمبی†ک اس††تخراج می ش††ود .ب††ا این ح††ال ،تقط††یر ب††ا آب بس††یار ان††رژی ب††ر و زم††ان ب††ر اس††ت.
یک روش جایگزین قاب††ل اعتم††اد ب†رای اس††تخراج اس††ت .در مقایس††ه ب††ا تقط††یر ب††ا آب ،ان††رژی کم††تری ) (MAEاستخراج به کمک مایکروویو
.مصرف می کند و به زمان کمتری برای انجام استخراج اسانس نیاز دارد []13،14
ما از این روش مایکروویو استفاده کردیم تا ترکیبات مختلف برگ بول†دو را در ی†ک مرحل†ه اس†تخراج ک†نیم و تقط†یر ب†ا آب را تس†ریع ک†نیم.
مایکروویو فق†ط ب†رگ ه†ا و آب را گ†رم می کن†د .از آنج†ایی ک†ه م†اتریس مس†تقیما ً از داخ†ل ب†ه خ†ارج گ†رم می ش†ود ،اس†تخراج و انحالل ب†رگ
.را بهبود می بخشد .بخار تولید شده نیز برای استخراج اسانس برگ ها با استفاده از دستگاه کلونجر متراکم می شود NVOC
در این مقاله ما یک مطالعه از مقیاس آزمایشگاهی به آزمایشی را برای استخراج و جداسازی ترکیبات فرار و غیر فرار از برگهای بول††دو
NVOCگزارش میکنیم .ما شرایط آزمایشی (قدرت مایکروویو و زمان استخراج) را با طراحی طرح آزمایشی بهینه ک††ردیم .ب††ازده اس††تخراج
اس††تخراج ش††ده در این فرآین††د نظ††ارت می ش††ود .س††پس ،از بهین††ه س††ازی ب††رای نش††ان دادن اینک††ه این روش مقی††اس VOCو همچ††نین ب††ازده
) (HPTLCآزمایشگاهی را می توان در مقیاس پایلوت انجام داد ،استفاده می شود .تجزیه و تحلی†ل کروم†اتوگرافی الی††ه ن†ازک ب†ا ک††ارایی ب†اال
ب††رای ) (GC-MSجالب استخراج شده اس††ت .کروم††اتوگرافی گ††ازی هم††راه ب††ا طی††ف س††نجی ج††رمی NVOCبولدین به عنوان نشانگری از
.استخراج شده استفاده شد .تا به ما در نظارت بر کارایی مقیاسبندی باال کمک کند VOCشناسایی و داشتن نسبت نسبی هر مولکول در
پس از VOCبرای ارزیابی محتوای اسانس برگ های بولدو ،تقطیر با آب معمولی 500گرم برگ بولدو و 5لیتر آب انجام شد .اس††تخراج
با وزن 7.4گرم جمع آوری می شود .دسته ای 120 VOCدقیقه تقطیر با آب متوقف شد .به طور متوسط در سه آزمایش مکرر 11 ،میلی لیتر
.بود VOC 1.4٪از برگ های بولدو ما دارای میانگین
.و سایر مواد محلول ٪2.83را نشان داد NVOCبا بازده 24.90درصد استخراج شد .عصاره غلظت NVOC
.نشان داد ppmتجزیه و تحلیل عصاره برگ بولدو محتوای بولدین در برگ را 105.4
( S /برای تعیین نسبت رضایتبخش برگهای بولدو و آب ،مجموعهای از آزمایشها با دستگاه مایکروویو برای تعیین نسبت جامد به مایع
انجام شد .با 500میلی لیتر آب در ظرف ،از 5تا 50گرم برگ بولدو اضافه کردیم .مایکروویو بر روی 900وات برای 1س††اعت تنظیم ) L
.شده است
همانطور که از مطالعه قبلی ما مشاهده شد ٪10 ،نسبت جامد به مایع ،حرکت آزاد ب†رگ ه††ای بول††دو در آب را در ط†ول آزم††ایش مخت†ل می
کند [ .]15همانطور که در شکل 1می بینیم ،نسبت %7.5نسبت ج††رم خش††ک و ب††ازده اس††تخراج م†واد محل††ول را ارائ††ه می ده††د .بن††ابراین 7.5
درصد از برگ های بولدو در آب برای انجام مطالعات طراحی تجربی انتخ††اب ش††ده اس††ت .نس††بت ب††االتر همگن ش††دن را مخت††ل می کن††د و ت††ورم
.ماتریکس مقادیر غیر قابل اغماض آب را به دام می اندازد .شکل .1مواد محلول استخراج شده بر اساس نسبت جامد/مایع
بین المللی جی .مول .علمی 15 ، 2014 7185
مقادیر رمزگذاری شده و رمزگشایی شده متغیرهای مستقل و پاسخ های به دست آمده در مطالعه چند متغیره ب†رای ه†ر آزم††ایش در ج††دول 1
.به عنوان پاسخ ارزیابی می شوند VOCو NVOCنشان داده شده است .زمان و توان مایکروویو با بازده
.و پاسخ به دست آمده ) (CCDجدول .1متغیرهای دخیل در طراحی مرکب مرکزی
زمان )کد (W/برق NVOCبازده VOCبازده
(دقیقه/کدگذاری شده) )(% )(%
20 -1 200 -1 24 0.6
40 0 200 -1 24.6 1.2
60 1 200 -1 25 1.4
20 -1 550 0 24.9 0.6
40 0 550 0 24.1 1.2
60 1 550 0 25.9 1.4
20 -1 900 1 23.1 0.6
40 0 900 1 23.3 1.4
60 1 900 1 23.2 1.4
40 0 550 0 25.1 1.2
40 0 550 0 24.7 1.2
40 0 550 0 24.2 1.2
40 0 550 0 24.7 1.2
40 0 550 0 24.9 1.2
ج††دا ش††ده از VOCدر این بخش دوم از مطالعه ،اثر قدرت مایکروویو و زمان اس††تخراج ب††ر ب††ازده م††واد محل††ول در عص††اره و ب††ر ب††ازده
) ( R2ضریب تعیین NVOCبرای بازده . ANOVAمحصول با روش سطح پاسخ ارزیابی شد 83.2
را نشان داد که نشان دهنده توافق ٪
که در ANOVAنزدیک بین مقادیر تجربی و پیش بینی است .می توان آن را با نتایج بسیار نزدیک بین تمام آزمایش ها توضیح داد .داده های
خالصه شده است ،اثرات قابل توجه همه متغیرها (خطی و درجه دوم) و تع†امالت آنه†ا را نش†ان NVOCنمودار پارتو در شکل 2برای بازده
دارن††د .این نش††ان NVOCمی دهد .مشاهده می شود که اثر درجه دوم توان مایکروویو و همچنین توان مایکروویو بیشترین تأثیر را ب††ر ب††ازده
می دهد که ح††داکثر ت††وان م††ایکروویو قاب††ل اس††تفاده ب†رای اس††تخراج بهین††ه اس††ت .زم††ان ب††ا ت††أثیر کم††تری دنب††ال می ش††ود .ع††دم مع††نی دار ب††ودن
به م††ا این امک††ان CCFاصطالحات متقابل بیانگر عدم وجود تعامل بین متغیرها در محدوده مورد مطالعه است .دادههای تجربی بهدستآمده از
را میدهد که یک رابطه تجربی مرتبط پاسخ مورد مطالعه (بازده) و متغیرهای کلیدی درگیر در مدل (در واحدهای کدگذاریشده) را تعیین کنیم.
بین المللی جی .مول .علمی 15 ، 2014 7186
در NVOC 20بنابراین ،یک معادله چند جمله ای مرتبه دوم معادله ( )1به دست آمد .مقدار ثابت بزرگ نشان می ده††د ک††ه بیش††تر اس††تخراج
.دقیقه اول عملیات مایکروویو انجام می شود
NVOC.شکل .2نمودار استاندارد پارتو از مطالعه چند متغیره بهینه سازی عملکرد
AA +
-
A:MW Power
B:Time
BB
AB
) ( R2خالصه شده است که 2/98درصد به عنوان ضریب تعیین VOCدر نمودار پارتو در شکل 3برای بازده ANOVAداده های
داده شده است که نشان دهنده تطابق خوب بین مقادیر تجربی و پیش بینی است .اثر زمان به طور عمده بر نتایج و به دنبال آن اث††ر درج††ه دوم آن
به فالت رسیده است .هر دو اثر خطی و درجه دوم توان م††ایکروویو کم††تر از س††طح VOCتأثیر می گذارد و نشان می دهد که برای استخراج
مهم است و اثر درجه دوم زمان حاکی از وجود زمان نهایی VOCتأثیر قابل توجه است .این بدان معنی است که تنها زمان در فرآیند جداسازی
و ) VOCب†ازده( به ما این امکان را میدهد که یک رابطه تج†ربی پاس††خ م†ورد مطالعه CCFاستخراج است .دادههای تجربی بهدستآمده از
متغیرهای کلیدی درگیر در مدل (در واحدهای کدگذاریشده) را تعیین کنیم .بنابراین ،یک معادله چن††د جمل††ه ای مرتب††ه دوم معادل††ه ( )2ب††ه دس††ت
:آمد
VOC.شکل .3نمودار پارتو استاندارد شده پاسخ چند متغیره برای بازده
B:Time +
-
BB
AA
A:MW Power
AB
و همچ††نین جداس††ازی NVOCانجام شد .ما می خواهیم بازده VOCو NVOCبهینه سازی پارامترها به لطف داده های ترکیبی بازده
را می توان با افزایش زمان اندکی اف†زایش داد ،ام†ا هم†انطور ک†ه در ش†کل 4ال†ف مش†اهده می NVOCرا به حداکثر برسانیم .بازده VOC
با افزایش زمان افزایش می یابد و به حداکثر می رسد .با این حال VOC ،شود ،می توان آن را با قدرت مایکروویو باالتر کاهش داد .جداسازی
.می بینیم ،در سطح قابل توجهی تحت تأثیر قدرت قرار نمی گیرد bهمانطور که در شکل 4
همانطور که ما برای استخراج سبز هدف داریم ،هرچه انرژی کمتری مصرف شود ،بهتر است .بنابراین ،باید به یک بهینه با زم††ان و ت††وان
.باال رسید .ما فقط در 15دقیقه به جوشش رسیدیم VOCو NVOCکم برای بازده
بین المللی جی .مول .علمی 15 ، 2014 7187
محاس†به VOCبا ترکیب دو نتیجه ،میتوان مجموعهای از شرایط بهینه را برای به†ترین فرآین†د اس†تخراج م†واد محل†ول و جداس††ازی کامل
٪ VOCپیش بی†نی ش†ده ٪25و NVOC 1.36کرد .نرم افزار این مجموعه ش†رایط بهین†ه را در 200وات و 56دقیق†ه اس†تخراج ،ب†ا ب†ازده
.مدل سازی کرد cمحاسبه می کند .این پیش بینی ها را می توان به عنوان یک سطح در شکل 4
در مطالعه ) NVOC (%شکل .4بهینهسازی استخراج برگهای بولدو به کمک مایکروویو در آب ( :الف ) بررسی عملکرد
به عنوان بررسی در مطالعه چند متغیره به ) VOC (%چند متغیره به عنوان تابعی از توان و زمان مایکروویو ( .ب ) بازده
.عنوان یک تابع ( .ج ) سطح پاسخ بهینه سازی بین عملکرد و جداسازی اسانس
)ج(
برای هدف این مطالعه ،ضریب افزایش مقیاس با یک نسبت ثابت بین توان مایکروویو و جرم آب درگیر محاسبه میشود .شرایط بهینه مورد
کیلو وات به 15لیتر آب برای کار نی††از دارد .وزن ک††ل MAC-75 6 1.125نیاز 200وات برای 500میلی لیتر آب ،حداکثر توان خروجی
کیلوگرم برگ بولدو پردازش می شود .این نشان دهنده ضریب افزایش 30است .سیستم مایکروویو در حداکثر توان برای 56دقیق††ه تنظیم ش††د و
جوشش در 15دقیقه به دست آمد .همانطور که در جدول 2مشاهده می شود ،مقدار اسانس استخراج شده از برگ های بولدو معادل روش مقیاس
.آزمایشگاهی است .به طور مشابه ،کیفیت عصاره از نظر عملکرد و همچنین محتوای بولدین با استخراج در مقیاس آزمایشگاهی یکسان است
عالوه بر این ،کیفیت و کمیت استخراج شده از بولدو توسط مایکروویو بیشتر از تقطیر با آب معمولی است و تقریبا ً ی††ک س††وم زم††ان و ی††ک
.چهارم انرژی برای استخراج آن است
پیشنهادی ما به کاهش مصرف انرژی و زمان متکی است .از آنجایی که تقطیر با آب MAEکاهش هزینه استخراج ارائه شده توسط روش
فقط ب†ه 5دقیق†ه نی†از داش††ت .این ک†ارایی ان†رژی گرمایش†ی MAEنیاز داشت ،جایی که VOCبه 30دقیقه برای شروع تقطیر آزئوتروپیک
.تحویل شده در ماتریس را ثابت کرد
در اسانس بولدو با استفاده از سه تکنیک استخراج شناسایی شد .ماهیت و مقادیر نسبی آنها در جدول 3گزارش شده VOCدر مجموع 40
p-cymene،و آزمایشی و همچنین تقطیر با آب ،تشخیص اکثر ترکیبات فعال ف††رار در اس††انس بول††دو مانند MAEاست .مقیاس آزمایشگاهی
را امکان پذیر کرد .با این حال ،نسبت آنها با تکنی†ک اس†تخراج متف†اوت اس††ت .مق†دار کم†تری از ترکیب†ات ascaridoleو d - limonene
به††تر MAEدر آزمایش††گاه . p -cymeneوج†ود دارد HDدر مقایس††ه با MAEاکسیژن دار در اسانس بولدو اس††تخراج ش††ده توس††ط دو
وجود دارد ،با HDو MAEبه مقدار معادل در مقیاس آزمایشگاهی . d - limoneneاست HDاستخراج می شود و در مقیاس باالتر از
اسانس برگ های بولدو جدا شده با تمام تکنیک ها حاوی همان اجزای غالب است .آسکاریدول ،ی††ک مون††وترپن MAE.مقدار باالتر در مقیاس
اکسیژن دار ،جزء اصلی فراوان در اسانس با افزایش مقادیر نسبی برای سه روش استخراج ،به ترتیب 40.94 † ،36.51و 46.90درصد ب††رای
.است .این نشان می دهد که قسمت کوچکی از این ترکیب در داخل برگ ها باقی می ماند HDو MAEمقیاس آزمایشگاهی MAE،مقیاس
آنقدر طوالنی نیست MAEتفاوت نسبت نسبی بین ترکیبات مختلف را می توان با اختالف زمانی استخراج اسانس توضیح داد ،جایی که در
.که سخت ترین مولکول ها مانند مولکول های اکسیژن دار به طور کامل استخراج شوند []16
و افزایش مقیاس (MAE)،استخراج به کمک مایکروویو (HD)،جدول .3ترکیب شیمیایی اسانس بولدو به دست آمده با تقطیر با آب
MAE.
شماره الف
ترکیبات )HD (% ) MAE (%مقیاس مقیاس آزمایشگاهی ب RI
MAE
هیدروکربن های مونوترپن 35.8 47.1 40.4
بر روی ستون مویرگی C5-C24آلکان های n-شاخص های حفظ نسبت به . bترکیبات اسانس طبقه بندی شده بر اساس خانواده های شیمیایی
.محاسبه شده است HP5MSغیرقطبی
نتایج آزمایشهای حسی نشان میدهد که عصارههای حاصل از تقطیر با آب و استخراج با مایکروویو دارای شدت بوی بسیار کمتری نس††بت
به خیساندن هستند ،با بوی مالیمتر با مایکروویو همانطور ک†ه در ش†کل 5ال†ف مش††اهده میش†ود .کیفیت عص†اره م†ایکروویو ن†یز در مقایس†ه ب†ا
تقطیر با آب و خیساندن بهبود یافته است ،زیرا کمتر به عنوان "جوشیده" شناخته می شود ،کیفیت طبیعی به††تری دارد ،ت††ازگی خ††ود را حف††ظ می
میتوان مشاهده کرد که دو اسانس مختلف بسیار نزدیک ب††ه هم مرتب††ط هس††تند ،ب††ا b،کند و به طور کلی به بقیه ترجیح داده می شود .در شکل 5
.عطر کمی بهتر و بوی جوش کمتری برای مایکروویو نسبت به تقطیر با آب .همچنین به تفاوت بوی جزئی بین این دو اشاره شده است
بین المللی جی .مول .علمی 15 ، 2014 7190
GPRدی اتیل آمین HiPerSolv،برگ های بولدو در ماه می 2012جمع آوری شد ،آنها حاوی ٪5رطوبت هستند .کرومانورم کلروفرم
(Illkirch،می آیند .معرف تحلیلی تولوئن توسط فیشر )دارمشتات ،آلمان ( VWR Prolaboرکتاپور ،اسید کلرهیدریک %35رکتاپور از
ارائه شده است .پوریس )دانمارک Acros Organics (Slangerup،متانول برای آنالیز گرادیان توسط . HPLCارائه شده است )فرانسه
و مطالعه تخ††ریب HPTLCخریداری می شود .بولدین استاندارد برای )ایاالت متحده آمریکا ، MO،سنت لوئیس( آمونیاک به سیگما آلدریچ
.می آید )فرانسه Extrasynthèse (Genay،از
و جداسازی آنها .هر دو عصاره ب††ا اس††تفاده از NOVCو VOCبرگهای بولدو به طور همزمان تحت دو عملیات قرار گرفتند :استخراج
.روش های مختلف تجزیه و تحلیل می شوند .تمام فرآیندهای استخراج ،جداسازی و تجزیه و تحلیل را می توان در شکل 6دنبال کرد
بین المللی جی .مول .علمی 15 ، 2014 7191
که در شکل 7نشان داده شده است انجام شد .مخزن Milestone EOS-Gدر اجاق مایکروویو ) (MAEاستخراج به کمک مایکروویو
استخراج 1لیتری از پیرکس ساخته شده است .از سیستم کلونجر برای جمع آوری بخارات متراکم شده ،جمع آوری اس†انس و برگش††ت آب مقط†ر
.در ظرف استخراج استفاده می شود
در فشار اتمسفر انجام شد .حجم ثابتی از 500میلی لیتر آب مقطر با مقدار انتخابی برگ بولدو استفاده شد که با بهین††ه س††ازی MAEروش
نسبت جامد به مایع تعیین شد .آنها در ظرف استخراج اضافه می شوند .زمان و قدرت مایکروویو انتخاب شده است .هنگامی که اس††تخراج انج††ام
از کلونجر جمعآوری میشود ،روی سولفات منیزیم خشک میشود ،فیلتر میشود و در یک تعادل تحلیلی با حاشیه خطای 1درصد ، VOCشد
جمع آوری شده تا زمان استفاده در وی††ال شیش††ه ای کهرب††ایی در دم††ای 4درج††ه س††انتیگراد نگه††داری می ش††ود .مخل††وط . VOCوزن میشود
عصاره و برگ ها روی الک صاف می شوند .برگ های بولدو را فشار می دهند تا تمام عصاره جمع شود .مقدار کمی از عصاره ب††رای تجزی††ه
و تحلیل ساخته شده و بر روی 0.45میکرومتر فیلتر می شود
.تا زمان استفاده در ویال شیشه ای کهربایی در دمای -20درجه سانتیگراد نگهداری می شود PTFEفیلتر
تقطیر با آب معمولی در یک مجموعه آلمبیک از جنس استنلس استیل با سیستم کلونجر [ ]17طبق فارماکوپ††ه اروپ††ایی انج††ام ش††د 500 .گ††رم
برگ بولدو با 5لیتر آب مقطر به مدت 146دقیقه (تا زمانی که اسانس بیشتری به دست نیامد) به تقطیر با آب فرستاده شد .س††پس این دس††تگاه ب††ا
.برای مقایسه استفاده میشود ) (MAEشرایط بهینه یافت شده پس از طراحی آزمایشی بر روی استخراج به کمک مایکروویو
جمعآوری میشوند ،روی سولفات منیزیم خشک میشوند ،روی یک تعادل تحلیلی ب††ا حاش††یه خط††ای %1وزن ) (VOCترکیبات آلی فرار
.میشوند و تا زمان استفاده در ویال شیشهای کهربایی در دمای 4درجه سانتیگراد نگهداری میشوند
همانطور که در شکل 7مشاهده می شود یک راکتور م††ایکروویو چن††د حالت††ه اس††ت .این ش††امل چه††ار مگن††ترون ( MAC-75 × 4دستگاه
1500وات 2450 ،مگاهرتز) با حداکثر توان 6000وات است که با افزایش 500وات تحویل داده می شود .حفره مایکروویو از جنس اس††تنلس
بین المللی جی .مول .علمی 15 ، 2014 7192
است که امکان بارگیری تا 75لی††تر از م†واد گی†اهی را PTFEاستیل دارای ظرفیت 150لیتر است و دارای یک درام قابل جابجایی و چرخان
فراهم می کند .چرخش توزیع همگن مایکروویو را به مواد داخل درام تضمین می کند .محیط درام کامال سوراخ شده است تا بخار و م††ایع عب††ور
کنند .جذب نیروی مایکروویو توسط حسگرهایی که روی راهنماهای موج قرار می گیرند کنترل می شود .اگ††ر ج††ذب خیلی کم باش††د ،سیس††تم ب††ه
.طور خودکار توان تحویلی را تنظیم می کند
که در حفره قرار داده شده است ،کنترل می شود .تفاوت اص†لی این اس†ت که ) (RTD، PT-100دما توسط یک آشکارساز دمای مقاومتی
مقاومت الکتریکی خود را در پاسخ به تغییرات دما تغییر می دهد ،ترموکوپل تغییرات ولتاژ بسیار کمی را بین دو ماده فلزی در پاسخ به RTD
تغییرات دما ایجاد می کند .هر دو سنسور را می توان در یک سیس††تم م††ایکروویو ب††ا اس††تفاده از ب††رخی احتی††اط ه††ا اس††تفاده ک††رد ،ام††ا اس††تفاده از
به دلیل ساخت آن آسان تر است .مشکالت اندازه گیری که ممکن است با استفاده از سنسور دما در میدان م††ایکروویو رخ ده††د ب††ه ش††رح RTD
:زیر است
- .امواج مایکروویو به عنصر حسگر حسگر میرسند و صدای الکتریکی تولید میکنند که منجر به اندازهگیری نادرست میشود
- مایکروویوها محفظه فلزی حسگر را تا ولتاژ بسیار باال شارژ می کنند و جرقه هایی را در نزدیکی نوک سنسور ایجاد می کنند .دما می
.تواند به صورت محلی به دلیل جرقه افزایش یابد
:در دستگاه مایکروویو ما برای جلوگیری از هر دو عارضه جانبی شرح داده شده در باال طراحی شده است RTDاستفاده از
- تعبیه شده است و یک قفس کامل فارادی است AISI 316) .استنلس استیل( مورد استفاده ما به طور کامل در یک ظرف فلزی RTD
.به این ترتیب مایکروویوها اصال به عنصر حسگر نمی رسند
- محفظه فلزی سنسور به زمین است ،نوک آن کوتاهتر از طول موج مایکروویو است و در یک سپر فل††زی ب††ا ط††ول و قط††ر خ††اص ف††رو
رفته است .این ساختار یک فیلتر مایکروویو است 2450 :مگاهرتز تولید شده نمی تواند محفظه فلزی سنسور را ب††ه ص†ورت الک†تریکی
.با ولتاژ باال شارژ کند .به این ترتیب مایکروویوها جرقه ای روی سطح سنسور ایجاد نمی کنند
با خطای 0.3 ±درجه سانتیگراد است .این خطا باید به ) IEC 751مطابق با( مورد استفاده ما دارای زمان پاسخ کمتر از 5ثانیه RTD
.خطای مبدل الکترونیکی آنالوگ به دیجیتال که کمتر از 1درجه سانتیگراد است اضافه شود
حفره قادر است در خالء عمیق یا به عنوان یک رگ باز کار کند .قفل های روی در از باز شدن تصادفی در حین فرآیند یا زم††انی ک††ه حف††ره
حاوی مایع است جلوگیری می کند .این دستگاه توسط ترمینال کنترل صفحه نمایش لمسی صنعتی با رابط ک††اربری گ††رافیکی بص††ری کن††ترل می
.شود
توده مواد گیاهی که با بهینه سازی تعیین می شود و با ضریب افزایش مقیاس مناسب محاسبه می شود ،وزن شده و در یک کیسه الیاف خنثی
بارگذاری می شود .مقدار تنظیم شده آب در حفره مایکروویو بارگذاری می شود .دهانه باالیی با یک کندانسور تنظیم می شود تا بخارات را جمع
آوری کند و آنها را در یک فالسک فلورانس هدایت کند تا تقطیر و اسانس جدا ش††ود .دس††تگاه م††ایکروویو ب††ا زم††ان و ت††وان انتخ††اب ش††ده برنام††ه
جمع آوری می شود ،روی سولفات منیزیم خشک می شود و در یک تعادل تحلیلی ب††ا حاش††یه خط††ای ، VOC ٪1ریزی می شود .پس از تقطیر
وزن می شود ،در ویال شیشه ای کهربایی در دمای 4درجه سانتیگراد تا زمان اس††تفاده ذخ††یره می ش††ود .عص††اره موج††ود در حف††ره م††ایکروویو
جمع آوری می شود و مقدار کمی برای تجزیه و تحلیل ساخته می شود و روی آن فیلتر می شود
.میکرومتری ،تا زمان استفاده در ویال شیشه ای کهربایی در دمای -20درجه سانتیگراد نگهداری می شود PTFE 0.45فیلتر
تعیین می )سوئیس (OHAUS MB35، OHAUS، Nänikon،با استفاده از یک آناالیزر رطوبت ) (%DMدرصد جرم خشک
میکرومتری به مدت 45دقیقه در دمای 110درجه سانتیگراد حرارت داده می شود ت††ا ج††رمی PTFE 0.45شود 5 .گرم از نمونه فیلتر شده
NVOCعصاره معادله ( )3را به ما داد .بنابراین ،ب††ازده NVOCپایدار به دست آید .این روش به ما محتوای آب عصاره ،بنابراین محتوای
.به صورت زیر محاسبه می شود :رابطه ()4
به منظور بررسی اینکه آیا بولدین موجود در عصاره احتماالً در طی تابش مایکروویو دچار تخ††ریب میش††ود ،محل††ولی از بول††دین ب††ه تیم††ار
مایکروویو ارسال میشود .با غلظت نهایی 0.02میلیگرم بر میلیلیتر ،محلول در راکتور شیشهای قرار میگیرد و به دنب††ال آن ،تحت ش††رایطی
که در طراحی آزمایشها بهعنوان بهینه تعیین میشود ،عملیات مایکروویو انجام میشود .سپس یک نمونه تیمار نشده و ی††ک نمون††ه تحت درم††ان
.برای تعیین کمیت آنالیز شد .تمام آنالیزها در سه نسخه انجام می شود HPTLCبا امواج مایکروویو توسط
Darmstadt،؛ (6 M، Rectapur، VWR Prolaboپنج گرم عصاره فیلتر شده 0.45میکرومتر با 0.5میلی لیتر اسید کلریدریک
در 100درجه سانتیگراد به مدت 10دقیقه اسیدی شد .سپس ،پس از خنک شدن در دمای 20درجه سانتیگراد ،مخلوط با محلول آمونیوم )آلمان
نمونه هیدرولیز شده با 5میلی لیتر 1 (Puriss, Sigma Aldrich; St Louis MO, USA).میلی لیتری در 25درصد بازی سازی شد
اس†تخراج ش††د و ه†ر دو ف††از در ی†ک لول††ه ب†رای )آلم††ان Darmstadt،؛ (HiPerSolv Chromanorm، VWR Prolaboکلروفرم
سانتریفیوژ (در †× 1500گرم به مدت 5دقیقه) قرار گرفتند .فاز آلی جمع آوری و در دمای 45درجه سانتی گراد تحت جریان نیتروژن خشک
Darmstadt،؛ (VWR Prolaboمیکروم††تری PTFE 0.45شد .عصاره خشک با 5میلی لیتر کلروفرم حل ش††د ،روی فیل††تر س††رنگ
.قرار داده شد ) (HPTLCفیلتر شد و در ویال برای اجرای کروماتوگرافی الیه نازک با کارایی باال )آلمان
TLC ATSکه توسط نمونه خودکار Camagنمونه ها و استاندارد در قالب نوارهایی به عرض 8میلی متر با یک سرنگ میکرولیتری
Å F254 (20لکه گیری شدند .روی صفحه شیشه ای سیلیکاژل از پیش روکش شده ) 60سوئیس Muttenz،؛ (Camagکنترل می شود 4
صفحات توسط پروپان-2-اول از قبل شسته شده و در دمای 120درج††ه س†انتیگراد ب†ه م††دت ). 20سانتی متر؛ مرک ،دارمشتات ،آلمان × 10
.مورد استفاده قرار گرفت و فضای بین دو باند 8.5میلی متر بود nL / sدقیقه قبل از لکه گیری فعال شدند .نرخ کاربرد ثابت 200
انتقال صفحه در اتاقک شیشه ای دوقلو 10×20سانتی متری انجام شد
صفحه ابتدا به مدت 5دقیقه خشک می شود تا حالل باقی مانده از نمونه ها و ).سوئیس Muttenz،؛ ADC2 (Camagاتاق توسعه خودکار
و 10میلی لی†تر ف††از متح†رک در ه†ر ) (40:5:5, v / v / vاستانداردها تبخیر ش†ود .ف††از متح†رک ش††امل تول†وئن -مت†انول -دی اتی†ل آمین
کروماتوگرافی استفاده شد .محفظه شیشه ای به مدت 10دقیقه در دمای 25درجه سانتی گراد و در رط††وبت نس††بی 45درص††د ب††ا 10میلی لی††تر
به مدت 10دقیقه از قبل اشباع شده است .طول اجرای کروماتوگرافی ) (TLCفاز متحرک اضافی اشباع شد .صفحه کروماتوگرافی الیه نازک
60میلیمتر است تا نتایج را به وضوح بهتری نشان دهد که به راحتی در توانایی دستگاه آشکارساز برای انج††ام ادغ††ام ناحی††ه پی†ک وج††ود دارد.
.خشک شدند ADC2در جریان هوا از TLCپس از توسعه ،صفحات
انجام شد .ابعاد شکاف ) × 6.00سوئیس Muttenz،؛ CAMAG TLC Scanner 3 (Camagتجزیه و تحلیل تراکم سنجی بر روی
0.10میلی متر نگه داشته شد و از سرعت اسکن 10میلی متر بر ثانیه استفاده شد .اس††کن در 307ن†انومتر در ح††الت بازت†اب/ج†ذب انج††ام ش†د.
پیوسته ای بین 190تا 400نانومتر ساطع می ک††رد .ه††ر آهن††گ اس††کن می UVمنبع تابش مورد استفاده ،المپ دوتریوم /تنگستن بود که طیف
WinCATS (V 1.4.7.2018, Camag; Muttenz,ش††ود و از تص††حیح پای††ه اس††تفاده می ش††ود .تم††امی عملی††ات توس††ط ن††رم اف††زار
در 500میلی لی††تر )فرانسه (Extrasynthèse، Genay،پایش شد .استاندارد بولدین با حل ش††دن 10میلی گ††رم بول††دین )Switzerland
کلروفرم تهیه شد .پنج نقطه از استاندارد افزایش حجم برای به دست آوردن خش†م غلظت 300-50ن†انوگرم در نقط†ه س†اخته ش†د .غلظت متوس†ط
.تکرار شد TLCمحدوده پنج بار در صفحه
Agilentبر روی کروماتوگرافی گ††ازی ) (GC-MSتوسط کروماتوگرافی گازی جفت شده به آنالیز طیف سنجی جرمی VOCترکیب
™ HP5MSبا استفاده از یک ستون غیر قطبی مویرگی ذوب شده سیلیسی تعیین شد :یک C،جفت شده به طیف سنج جرمی 7890A 5975
با استفاده از شرایط زیر به دست GC-MSکیوتو ژاپن) .طیف Agilent،ضخامت فیلم 0.25میکرومتر؛ × ).میلی متر (30 m × 0.25
آمد :گ††از حام†ل او .س††رعت جری††ان 0.7میلی لی†تر در دقیق††ه .تقس††یم ;1:200حجم تزری†ق 0.5میکرولی††تر; دم†ای ف††ر از 3دقیق††ه در 60درج†ه
سانتیگراد ،سپس به 90درجه سانتیگراد در 3درجه سانتیگراد در دقیقه ،سپس تا 115درجه سانتیگراد با دمای 1درجه سانتیگراد در دقیق††ه1 ،
دقیقه نگه دارید ،سپس تا 240درجه سانتیگراد در دمای 5درجه سانتیگراد در دقیقه ; حالت یونیزاس††یون م††ورد اس††تفاده ض††ربه الک††ترونیکی در
بین المللی جی .مول .علمی 15 ، 2014 7194
C 5 - C 24تعیین شده با اشاره به یک سری همولوگ از (RI)،بود .اکثر ترکیبات به طور آزمایشی با مقایسه شاخص های حفظ آنها 70 eV
آلکان ها و با استانداردهای معتبر موجود در آزمایشگاه نویسندگان .شناسایی با مقایسه الگوهای تکه تکه شدن طیف جرمی آنه††ا از n-
.شناسایی شدند
کتابخانه های )،سیستم تجزیه و شناسایی طیفی جرم خودکار توسط موسسه ملی استاندارد و فناوری ایاالت متحده آمریکا( AMDISنرم افزار
داخلی و عم††ومی طی††ف ج††رمی و ادبی††ات علمی تأیی††د ش††د .تجزی††ه و تحلی††ل کمی از اج††زای داده ش††ده اس††ت درص††د از ک††ل منطق††ه پی††ک ه††ای
.کروماتوگرافی با تنظیم این فرضیه :ضریب پاسخ برای همه مولکول ها یکسان است
طراحی تجربی 3.5.
نیز میگویند ،برای دستیابی به شرایط بهینه فرآیند با حداقل تعداد آزمایش ) (CCDطراحی باکس ویلسون که به آن طراحی مرکب مرکزی
برای تع††یین ش††رایط بهینه ) (CCFمورد استفاده در این مطالعه ،طراحی تجربی مرکب مرکزی صورت محور CCDممکن استفاده شد .نوع
برای هر عامل است +α) .و (-α، -1، 0، +1روشی مناسب برای بهینه سازی یک فرآیند با پنج سطح CCFبود .استفاده از طراحی MAE
این طرح برای ارزیابی اثرات و اثرات متقابل ±α = 1±.در این طرح ،نقاط ستاره در مرکز هر وجه از فضای فاکتوریل قرار دارند ،بنابراین
مورد نیاز است .قدرت تابش مایکروویو بین 200تا 900وات متغیر بود در حالی ) ( Pو توان ) ( tدو متغیر مستقل ،یعنی زمان استخراج
که زمان استخراج از 20تا 60دقیقه متغیر است .در مجموع 12ترکیب مختلف ،شامل 22ط††رح کام††ل فاکتوری††ل ( )±1ب††ا چه††ار نقط††ه مح††وری
برای دو عامل انتخاب شدند .برای مدلس††ازی CCFو چهار تکرار از نقطه مرکزی (کد )0که به ترتیب تصادفی با توجه به پیکربندی )(±α
.سطح پاسخ استفاده میشود
پاسخهای بهینهسازی انتخاب شده ،بازده ترکیبات آلی غیر فرار و ترکیبات آلی فرار بودند .طرح های آزمایش††ی م††ورد اس††تفاده س††اخته ش††د و
، Statistical Graphics Corporation,نس††خه STATGRAPHICS PLUS (15.01.02نتایج تجربی ب††ا اس††تفاده از ن††رم اف††زار
با سطح اطمینان 95درصد برای هر متغیر ) (ANOVAپردازش شد .سپس تجزیه و تحلیل واریانس )Rockville, MD, USA, 2000
نسبت میانگین مربعات خطا به خطای خالص بدست آمده ANOVAدر . F -valueپاسخ به منظور آزمون معناداری و تناسب مدل انجام شد
اهمیت متغیرهای مختلف را مشخص می کند .توصیفی از اثرات قابل توج††ه بهدس†تآمده از p - valueاز تکرارها در مرکز طراحی است و
.توسط نمودار پارتو استاندارد شده ارائه شد ) t (minبرای زمان استخراج ANOVA
آب ،عص††ارههای حاص††ل از( تجزیه و تحلیل حسی پنج نمونه توسط ی††ک پان††ل متش††کل از 15عض†و از دانش††گاه آوی††نیون ،آویگ†ون ،فرانسه
انجام ش††د .آزم††ودنی )و خیساندن ،اسانسهای حاصل از تقطیر با آب و استخراج مایکروویو MAEتقطیر با آب معمولی ،مقیاس آزمایشگاهی
ها در غرفه های حسی با تهویه و نور مناسب قرار گرفتند .نمونه های ناشناس در بطری های شیشه ای کهربایی به هر ی††ک از ش††رکت کنن††دگان
ارائه شد .برای پنج نمونه ،ویژگی های زیر مورد ارزیابی قرار گرفت :قدرت ،جوشانده ،تازگی ،طبیعی ب††ودن ،و پ††ذیرش جه††انی .ب††رای کیفیت
کلی ،مقیاس از ( 0ضعیف ترین ویژگی) تا ( 10قوی ترین ویژگی) و نمره 5مطابق با ادراک ایده آل بود .اعضای پانل ترجیحات خود را ب††رای
.هر نمونه در مقیاس لذت ( )10-0ارائه کردند .میانگین امتیازات برای هر ویژگی محاسبه شد
سیستم استخراج به کمک مایکروویو پیشنهادی در استخراج آبی برگهای بولدو و جداسازی اسانس نسبت به تقطیر با آب معمولی کارآم††دتر
است .طراحی آزمایشی به ما اجازه میدهد تا پارامترهای استخراج را به منظور به ح††داکثر رس††اندن ب††ازده اس††تخراج و جداس††ازی اس††انس و در
عین حال کاهش زمان و مصرف انرژی ،بهینه کنیم .نشان داده شده است که عصاره نهایی دارای ترکیبات و خواص بوی††ایی مش††ابهی در مقی††اس
آزمایشگاهی آن است .استفاده از مایکروویو همچنین خواص حسی عصاره را بهبود می بخشد و در عین حال قدرت بوی آن را کاهش می دهد و
.امکان ادغام بهتر در فرمول آرایشی احتماالً معطر را فراهم می کند
ت††ا ح††د ممکن نش††ان داده ش††ده اس††ت و توس††ط مطالع††ه MAC-75مقیاس تا مقیاس آزمایشی در فاکتور 30با استفاده از دستگاه م††ایکروویو
ب††ا زم††ان MAC-75دیگری با استخراج بدون حالل اسانس از رزماری [ ]18تایید شد ،جایی که با ی††ک روغن به††تر اس††تخراج ش††د .ران††دمان
کمتر و انرژی کمتر نسبت به تقطیر با آب معمولی .حتی اگر پارامترهای فرآیند افزایش مقیاس برای دستگاه در مطالعه م††ا بهین††ه نش††ده ب††ود ،این
همراه با بهینه سازی این تجهیزات جدید MAC-75نتایج امیدوارکننده هستند .انتقال بیشتر مقیاس آزمایشگاهی به مقیاس آزمایشی با استفاده از
.در حال انجام است
این فرآیند پایدارتر است ،با بهره وری بیشتر در مصرف انرژی و زمان کمتری .این توسط سایر مطالعات استخراج به کمک مایکروویو که
به آب اضافی نیاز نب††ود NVOC، .در طول استخراج VOCدر گذشته انجام شده است تأیید شده است [ .]22-19برای استخراج و جداسازی
بین المللی جی .مول .علمی 15 ، 2014 7195
همچنین ایمنی بهبود یافته ای را نشان می دهد و به عملیات جابجایی ساده برای بارگیری و تخلیه ماتریس گیاهی و حالل اجازه می دهد .به لطف
یک درام قابل جابجایی اضافی و کیسه های فیبر متعدد ،فرآیند را می توان به راحتی به س††رعت متوق††ف ک††رد ،تم††یز ک††رد و ب††رای اج††رای جدی††د
دوباره بارگیری کرد .این روش استخراج همراه با این دستگاه جدید مایکروویو نشاندهنده پتانسیل استفاده صنعتی ب†رای عملی†ات روزان†ه اس†ت،
.اما همچنین در فرآیندی برای ایجاد تجهیزات استخراج مداوم مناسب است
تضاد عالقه
منابع
1. تحت شرایط نوری مختلف ،رطوبت خاک و تراکم کاشت ) . Razmilic, I. Boldo ( Peumus boldusووگل ،اچ .گونزالس ،بی
Ind. 2011 ، 34 ، 1310-1312.کشت می شود .محصوالت تولیدی
2. ( Peumusشناس††ایی مس††تقیم ترکیب††ات فنلی در تزری††ق بول††دو فولی††وم ; Schmeda-Hirschmann، G.س††یمیرگیوتیس ،ام جی
توسط کروماتوگرافی م†ایع ب†ا ک†ارایی ب†اال ب†ا تش†خیص آرای†ه دی†ود و طیفس†نجی ج†رمی پش†ت س†ر هم یونیزاس†یون )boldus Mol.
.کروماتوگر .آ . J. 449-443 ، 1217 ، 2010الکترواسپری
3. پاک کننده های رادیکال آزاد و ، A.تاپیا ;. Astudillo، SL; Feresin, GEاشمدا هیرشمن ،جی .رودریگز ،جی .تئودولوز ،سی
").بولدو"( Peumus boldus Mol.آنتی اکسیدان ها از
. Res. 2003 ، 37 ، 447-452.رادیک آزاد
4. فع†الیت آن†تی اکس†یدانی عص†اره خ†ام ،کس†ر آلکالوئی†دی و کس†ر . Gómez، B.آگیل†را ،جی.ام ;، JMکوزادا ،ن .آسنسیو ،ام .دل واله
( Peumus boldus Molina). J. Food Sci. 2004 ، 69 ، C371-C376.فالونوئیدی از برگهای بولدو
5. از پراکسیداس††یون لیپی††د میک††روزومی کب††د انس††ان و غیرفع††ال ک††ردن س††یتوکروم . Cederbaum، AI Boldineکرینگش††تاین ،پی
.پزشکی . Biol. 563-559 ، 18 ، 1995جلوگیری می کند .رادیک آزاد P4502E1
6. مهار پراکسیداسیون لیپیدی میکروزومی کبد موش توسط بولدین .بیوشیمیCederbaum، AI; Ukielka، EK; Speiskyf، H. .
.فارماکول1772-1765 ، 44 ، 1992 .
7. بدون تزریق . Sorger، G. Ascaridoleمک دونالد ،دی .ونکری ،ک .هریسون ،پی .رنگاچاری ،پی کی; روزنفلد ،جی .وارن ،سی
. J.ح†††اوی نماتوس†††ید(ه†††ایی) اس†††ت ک†††ه ب†††رای ماهیچ†††ه ص†††اف پس†††تانداران س†††می نیس†††تند Chenopodium ambrosioides
Ethnopharmacol. 2004 ، 92 ، 215-221.
8. آلرژن های قوی ایجاد می کند) .حالل مرکبات( d -limoneneاکسیداسیون هوای . Nilsson، U.مگنوسون ،ک ، A.-T.کارلبرگ
Dermat. 1992 ، 26 ، 332-340.تماس با
9. ترپینن ،یک آنتی اکسیدان موجود در روغن درخت چای، A.-T. α- ،کارلبرگ ، U.بورژ ،ا .نیلسون ;، MAرودبک ،جی .برگستروم
.سموم . Res. 721-713 ، 25 ، 2012در مواجهه با هوا به سرعت در برابر آلرژن های پوستی خود اکسید می شود .شیمی
10. . Res.یک م†ورد در ح†ال ظه†ور از توس††عه داروه††ای ط†بیعی .فارم†اکول Boldine:و . Cassels، BK Boldoاسپایسکی ،اچ
. Soc. 1994 ، 29 ، 1-12.خاموش جی ایتالیا .فارماکول
11. غربالگری برای فعالیت ضد قارچی اسانس ها و ترکیبات مرتبط برای کن††ترل آل††ودگی Rakotonirainy، MS; Lavédrine، B.
.زیستی در کتابخانه ها و مناطق ذخیره سازی آرشیو
.بین المللی زوال زیستی .تجزیه زیستی 147-141 ، 55 ، 2005
12. فوق بحرانی CO 2با ) ( Peumus boldus M.استخراج برگهای بولدو . Brunner, G.دل واله ،جی.ام .روگالینسکی ،تی .زتزل ،سی
.بین المللی Res. 213-203 ، 38 ، 2005و آب تحت فشار داغ .مواد غذایی
13. Plocharski، W.؛، CMGCچمت ،اف .پیج ،دی .لو بورولک ،سی .مارکوفس††کی ،جی .زبرژنی††اک ،م .رن††ارد ;Cendres، A.
.تکنولوژی . LWT Food Sci. 237-229 ، 49 ، 2012مقایسه بین هیدرودیفیوژن مایکروویو و پرس برای استخراج آب آلو
14. کراوتو ،جی .استخراج سبز از محصوالت طبیعی :مفهوم و اصول .بین المللی جی .مول .علمی ، MA; ، 13 †، 2012چمت ،اف .ویان
8627-8615.
بین المللی جی .مول .علمی 15 ، 2014 7196
( استخراج دسته ای و مداوم با کمک اولتراسوند برگهای بول†دو . Chemat، F.وجسمن ،جی . Périno-Issartier، S.پتیگنی ،ال 15.
.بین المللی جی .مول .علمی Peumus boldus Mol.). 5764-5750 ، 14 ، 2013
.سایبی ،س .تأثیر ترکیب اسانس بر سینتیک تقطیر آب ، E.-H.بنیوسف 16.
.طعم عطر .جی308-300 ، 28 ، 2013 .
17. Conseil de l'Europe. Pharmacopée Européenne ; Maisonneuve, SA, Ed. Conseil de l'Europe:
.فرانسهSainte Ruffine، 1996 ،
اس††تخراج ب††دون حالل م††ایکروویو اس††انس از گیاه††ان . Chemat، F.فیلی ،ا .فرناندز ،ایکس .مینوتی ،م .ویسینونی ،اف .کراوتو ،جی 18.
.معطر :از آزمایشگاه تا آزمایشی و مقیاس صنعتی .مواد شیمیایی مواد غذایی 198-193 ، 150 ، 2014
استخراج آنتی اکسیدان بدون حالل به کمک مایکروویو از خوالن . Chemat، F.زیله هما; آبرت ویان ،ام 19. Périno-Issartier، S.
.رامنوئیدها ) فرآورده های جانبی غذایی ) ( Hipophaeدریایی
.فناوری بیوپروسس مواد غذایی 1028-1020 ، 4 ، 2011
استخراج آب با کم†ک م†ایکروویو از پلی . Dangles, O.چمت ،اف ;، E.-S.بوستانی . ELنخیلی ،ای .تومائو ،وی .ال حاجی ،ح 20.
.فنول های چای سبز .فیتوشیمی .مقعدی 415-408 ، 20 ، 2009
فرآیند سازگار با محیط زیست و تمیزتر برای جداسازی اسانس با استفاده از انرژی . Chemat، F.فرهت ،ع .جینیس ،سی .رومدان ،م 21.
.کروماتوگر .آ . J. 5085-5077 ، 1216 ، 2009مایکروویو
تقط††یر ب††ا بخ††ار م††ایکروویو تس††ریع ش††ده اس††انس . Visinoni، F.چمت ،اف .لوچس††ی ،من؛ اس††مادجا ،ج .ف††اورتو ،ال .کلنقی ،گ 22.
. Acta 2006 ، 555 ، 157-160.اسطوخودوس :رویکردی سریع ،تمیز و سازگار با محیط زیست .مقعدی چیم
بازل ،سوئیس .این مقاله یک مقاله با دسترسی آزاد است که تحت شرایط و ضوابط مجوز MDPI،توسط نویسندگان; دارنده مجوز © 2014
.توزیع شده است )Creative Commons Attribution (http://creativecommons.org/licenses/by/3.0/