JOIN US ON THE

INTERNET
K hp.tho VIA
A
EMAIL: servic
ØWW,
P mson.GOPHER,
e of ž
FTP OR EMAIL:
: com C @
WWW:.com
SOPHER:
gopher.thomson.com
‫مواد و روش ها‬
‫انگلستان ‪ SE1 8HN،‬منتشر شده توسط چاپمن و هال‪ ،‬اثر علمی تامسون‪ 6-2 ،‬مرز ردیف‪ ،‬لندن‬

‫انگلستان تامسون علوم پایه‪ 115 ،‬پنجم ‪ SEI 8HN،‬لندن ‪ Boundary Row،‬تامسون علوم پایه‪6-2 ،‬‬
‫ایاالت متحده آمریکا ‪، NY 1tXD3،‬خیابان‪ ،‬جدید یورک‬
‫ایاالت متحده ‪، PA 19106،‬بازار خیابان‪ ،‬فیالدلفیا‪tXi U‬تامسون علوم پایه‪ ،‬سوئیت ‪4 ،750‬‬
‫آمریکا‬
‫تامسون علوم پایه‪ ،‬پاپاللی ‪ 69469 ،3‬واینهایم‪ ،‬آلمان‬

‫اولین نسخه ‪1973‬‬

‫تجدید‪ U‬چاپ شد ‪1976‬‬
‫دومین نسخه ‪1984‬‬
‫دومین نسخه صادر شده مانند شومیز ‪ 1988‬سوم نسخه‬
‫‪1998‬‬
‫هاربوم ‪O 1973، 1984، 1998 JB‬‬
‫تامسون علوم پایه است آ تقسیم از بین المللی تامسون انتشار باال‬
‫تایپ مجموعه که در ‪ 10/12‬پاالتینو توسط بهترین مجموعه تایپ ساز آموزشی ویبولیتین‪ ،‬هنگ کنگ چاپ شده‬
‫ادموندز‪ ،‬سافولک ‪ St‬ادموندزبری مطبوعات‪ ،‬دفن کنید ‪ St‬که در عالی بریتانیا توسط‬
‫شابک‬ ‫)‪ (PB‬و ‪5 57260 412 0 (HB) 2 57270 412 0‬‬
‫همه حقوق محفوظ است هیچ بخشی از این نشریه نیست ممکن است تکثیر شود‪ ،‬ذخیره شده است که در آ‬
‫بازیابی سیستم یا منتقل شده است که در هر فرم یا توسط هر به معنای‪ ،‬الکترونیکی‪ ،‬مکانیکی‪ ،‬فتوکپی‪،‬‬
‫ضبط یا غیره‪ ،‬بدون اجازه کتبی قبلی ناشران برنامه های کاربردی برای اجازه باید رسیدگی شود به مدیر‬
‫حقوق در لندن نشانی از را ناشر‬
‫ناشر باعث می شود بدون نمایندگی‪ ،‬صریح یا ضمنی‪ ،‬با توجه به صحت اطالعات موجود است در این‬
‫و نمی تواند هر کدام را بپذیرید مجاز مسئولیت یا مسئولیت برای هر گونه خطا یا حذفیات‪ U‬که ممکن ‪bmk‬‬
‫‪.‬است بودن ساخته شده است‬
‫است در دسترس از جانب را بریتانیایی کتابخانه کتابخانه از کنگره کاتالوگ ‪ bmk‬آ کاتالوگ رکورد برای‪ U‬این‬
‫'*‪k‬کارت عدد‪70&9 :‬‬

‫است ‪ jj‬تی‬
‫ارسیتی‬

‫‪900 01214‬‬

‫‪572.36‬‬
‫‪2‬‬
‫‪، manufaJ‬چاپ بر بدون اسید متن کاغذ &‬
‫آ‬ ‫‪siJxiso zss.«a-iesz (p«›n«e«o› .‬‬ ‫‪،‬‬
‫‪HAR‬‬
‫فهرست‬

‫پیشگفتار به اولین نسخه‬

‫پیشگفتار به دومین نسخه‬

‫پیشگفتار به سوم نسخه‬ ‫‪x1‬‬

‫واژه نامه‬ ‫‪XII‬‬

‫‪1‬‬ ‫مواد و روش ها از گیاه تحلیل و بررسی‬ ‫‪1‬‬

‫‪1.1‬‬ ‫معرفی‬
‫‪1.2‬‬ ‫مواد و روش ها از استخراج و انزوا‬
‫‪4‬‬
‫مواد و روش ها از جدایش‪ ،‬جدایی ‪1.3‬‬ ‫‪7‬‬
‫مواد و روش ها از شناسایی ‪1.4‬‬ ‫‪16‬‬
‫تحلیل و بررسی از نتایج ‪1.5‬‬ ‫‪30‬‬
‫برنامه های کاربردی ‪1.6‬‬ ‫‪32‬‬

‫فنولیک ترکیبات‬ ‫‪40‬‬

‫معرفی ‪2.1‬‬ ‫‪40‬‬
‫فنل ها و فنولیک اسیدها ‪2.2‬‬ ‫‪42‬‬
‫فنیل پروپانوئیدها ‪2.3‬‬ ‫‪49‬‬
‫فالونوئید رنگدانه ها ‪2.4‬‬ ‫‪60‬‬
‫آنتوسیانین ها ‪2.5‬‬ ‫‪66‬‬
‫فالونول ها و فالون ها ‪2.6‬‬ ‫‪74‬‬
‫فالونوئیدها‪ ،‬گزانتون ها و استیلبن ها ‪2.7‬‬ ‫جزئی‬ ‫‪83‬‬
‫تانن ها ‪2.8‬‬ ‫‪90‬‬
‫کینون رنگدانه ها ‪2.9‬‬ ‫‪96‬‬

‫‪3‬‬ ‫را ترپنوئیدها‬ ‫‪107‬‬

‫معرفی ‪3.1‬‬ ‫‪107‬‬
‫ضروری است روغن ها ‪3.2‬‬ ‫‪110‬‬
‫دیترپنوئیدها و جیبرلین ها ‪3.3‬‬ ‫‪124‬‬
‫تری ترپنوئیدها و استروئیدها ‪3.4‬‬ ‫‪129‬‬
‫کاروتنوئیدها ‪3.5‬‬ ‫‪138‬‬
‫‪ Vi‬مطالب‬

‫‪4‬‬ ‫ارگانیک‪ .‬آلی اسیدها‪ ،‬لیپیدها و مربوط ترکیبات‬ ‫‪1s1‬‬

‫‪4.1‬‬ ‫گیاه اسیدها‬ ‫‪151‬‬
‫‪4.2‬‬ ‫چرب اسیدها و لیپیدها‬ ‫‪159‬‬
‫‪4.3‬‬ ‫آلکان ها و مربوط هیدروکربن ها‬ ‫‪170‬‬
‫‪4.4‬‬ ‫پلی استیلن ها‬ ‫‪174‬‬
‫‪4.5‬‬ ‫گوگرد ترکیبات‬ ‫‪179‬‬
‫نیتروژن ترکیبات‬ ‫‪187‬‬
‫‪5.1‬‬ ‫معرفی‬ ‫‪187‬‬
‫‪5.2‬‬ ‫آمینو اسیدها‬ ‫‪189‬‬
‫‪5.3‬‬ ‫آمین ها‬ ‫‪198‬‬
‫‪5.4‬‬ ‫آلکالوئیدها‬ ‫‪203‬‬
‫‪5.5‬‬ ‫گلیکوزیدهای سیانوژنیک‬ ‫‪214‬‬
‫‪5.6‬‬ ‫ایندول ها‬ ‫‪2t8‬‬
‫‪5.7‬‬ ‫پورین ها‪ ،‬پیریمیدین ها و سیتوکینین ها‬ ‫‪222‬‬
‫‪5.8‬‬ ‫کلروفیل ها‬ ‫‪227‬‬

‫‪6‬‬ ‫قندها و آنها مشتقات‬ ‫‪235‬‬

‫معرفی ‪6.1‬‬ ‫‪235‬‬
‫مونوساکاریدها ‪6.2‬‬ ‫‪236‬‬
‫الیگوساکاریدها ‪6.3‬‬ ‫‪244‬‬
‫‪6.4‬‬ ‫قند الکل ها و سیکلیتول ها‬ ‫‪249‬‬

‫ماکرومولکول ها‬ ‫‪256‬‬

‫‪7.1‬‬ ‫معرفی‬ ‫‪256‬‬
‫‪7.2‬‬ ‫نوکلئیک اسیدها‬ ‫‪257‬‬
‫‪7.3‬‬ ‫پروتئین ها‬ ‫‪265‬‬
‫‪7.4‬‬ ‫پلی ساکاریدها‬ ‫‪278‬‬

‫ضمیمه آ‬ ‫‪29‬‬
‫آ فهرست از توصیه شده‬ ‫سیستم های برای همه عمده کالس ها از گیاه شیمیایی ‪TLC‬‬ ‫تن‬

‫ضمیمه ب‬
‫مقداری مفید آدرس ها‬
‫‪294‬‬
‫فهرست‪ U‬مطالب‬

‫‪295‬‬
‫پیشگفتار به اولین نسخه‬

‫در حالی که کتاب های زیادی در مورد روش های ارگانیک و زیستی موجود است‪ .‬در تجزیه و تحلیل همیکال‪ ،‬اکثریت ی‪UU‬ا عم‪UU‬دتا ً ب‪UU‬ه‬
‫این موضوع توجه دارند استفاده از یک تکنیک خاص (مثالً کروماتوگرافی‪ U‬کاغذی) یا دارند برای نوشته ش‪UU‬ده است مخاطب‪UU‬ان ش‪UU‬یمیدانان‬
‫یا بیوشیمیانی که کار می کنند عمدتا با بافت های حیوانی‪ .‬بنابراین‪ ،‬هیچ راهنمای ساده ای برای روش های مدرن وجود ندارد تجزیه و‬
‫تحلیل گیاه وجود دارد و هدف از جلد حاضر پر کردن این است شکاف‪ .‬آی تی است در درجه اول مورد نظر برای دانش آموزان که‬
‫در را گیاه علوم‪ ،‬سازمان بهداشت جهانی دارند پس زمین‪UU‬ه گی‪UU‬اه شناس‪UU‬ی ی‪UU‬ا بیول‪UU‬وژیکی عم‪UU‬ومی‪ .‬همچ‪UU‬نین بای‪UU‬د ارزش داش‪UU‬ته باشد ب‪UU‬ه‬
‫‪.‬دانشجویان بیوشیمی‪ ،‬فارماکوژنزی‪ ،‬علوم غذایی و طبیعی محصوالت ارگانیک‪ .‬آلی علم شیمی‬
‫اکثر کتاب ها بر کروماتوگرافی‪ ،‬در حالی که قابل تحسین پوشش را نیاز دارد از‬
‫کارگران پژوهشی‪ ،‬تمایل به غلبه دانش آموز با لیست طوالنی از حالل سیستم های و افشانه معرف ها که می توان بودن کاربردی به‬
‫هر یک کالس از ارگانیک‪ .‬آلی تشکیل دهنده‪ .‬را قصد اینجا است به ساده کردن را وضعیت توسط فهرست‪ U‬کردن فقط آ تعداد کمی‬
‫مخصوصا توصیه شده تکنیک که دارند وسیع واحد پول که در فیتوشیمیایی آزمایشگاه ها جزئیات کافی ارائه شده است اجازه‬
‫دادن را دانشجو به استفاده کنید را تکنیک برای خودشان و اکثر بخش ها حاوی چند آزمایش عملی مقدماتی که می تواند در کار‬
‫کالسی استفاده شود‪ .‬بعد از آ عمومی معرفی به فیتوشیمیایی تکنیک‪ ،‬را کتاب شامل شخصی فصل ها توصیف می کند مواد و روش ها‬
‫ترپنوئیدها‪ ،‬چرب اسیدها و مربوط ترکیبات‪ ،‬نیتروژن ‪ s،‬از شناسایی فنولیک کام پوند‬
‫قندها و مشتقات آنها و ماکرومولکولها‪ U.‬در‪ -‬وسوسه شده است که تقریبا ً هر کالس ‪COm pound s،‬‬
‫در این مورد ‪ ،‬با اينكه که در مق‪UU‬داری م‪UU‬وارد‪ ،‬را حس‪UU‬اب است ‪ C‬از گیاهان ارگانیک را پوشش دهد‬
‫‪-‬لزوما مختصر بودن‬
‫از درون زا تنظیم کننده های رشد گیاه و به روش ها ‪ d etection‬علت محدودیت فضا با این حال توجه ویژه ای به آن شده است‬
‫از غربالگری گیاهان برای مواد مورد عالقه فارماکولوژیک‪ .‬ه‪U‬ر فصل هم‪UU‬راه ب‪U‬ا ی‪UU‬ک بخش مرج‪UU‬ع کلی ک‪UU‬ه ی‪UU‬ک کتابش‪U‬ناختی است‬
‫راهنما به بیشتر پیشرفته متن ها‬
‫در حالی که را عظیم شیمیایی‬ ‫اریاسیون از ثانوی متابولیسم که در ‪v‬‬
‫گیاهان دارد‪ U‬طوالنی بوده استقبال مینماید‪ ،‬تغییر که در اولیه متابولیسم (به عنوان مثال که در‬
‫‪viii‬‬ ‫پیشگفتار به‪/‬اولین نسخه‬

‫آنزیم های تنفس و مسیرهای فتوسنتزی) تنها دارد اخیراً آش‪UU‬کار ش‪UU‬ده اس‪UU‬ت‪ .‬ب‪UU‬ا تحق‪UU‬ق چ‪UU‬نین‬
‫ش‪UU‬یمیایی تن‪UU‬وع در ه‪UU‬ر دو مولک‪UU‬ول کوچ‪UU‬ک و ب‪UU‬زرگ پادش‪UU‬اهی گی‪UU‬اهی‪ ،‬سیستم‌شناس‪UU‬ان ب‪UU‬ه‬
‫فیتوش‪UU‬یمی ب‪UU‬رای ریختن م‪UU‬واد جدی‪UU‬د عالقه‌من‪UU‬د ش‪UU‬ده‌اند ن‪UU‬ور ب‪UU‬ر رواب‪UU‬ط گی‪UU‬اهی رش‪UU‬ته جدی‪UU‬دی از‬
‫سیستماتیک بیوشیمیایی توسعه یافته است و از آنجایی که کتاب حاضر ب‪UU‬ا ب‪UU‬رخی نوش‪UU‬ته ش‪UU‬ده‬
‫است با تاکید بر جنبه های مقایسه ای‪ ،‬باید ابزار مفی‪UU‬دی باشد پ‪UU‬ژوهش ک‪UU‬ارگران ک‪UU‬ه در این‬
‫‪.‬رشته‬
‫در آماده سازی این کتاب برای چاپ توصیه هایی به نویسنده شده است و پیشنهادات از ج‪U‬انب‬
‫‪ T.‬دک‪UU‬تر ‪ EC Bate-Smith،‬زیاد همکاران او خواهد کرد به خصوص دوس‪UU‬ت دارم از دک‪UU‬تر‬
‫و خانم کریستین تشکر کنید ویلیامز برای کمک های ارزشمندشان‪ TA Smith .‬دکتر ‪Swain،‬‬
‫او همچنین از کارکنان شرکت قدردانی می کند چپمن و سالن برای به س‪UU‬رعت دی‪UU‬دن را کت‪UU‬اب‬
‫‪.‬از طریق را مطبوعات‬

‫خواندن‪ ،‬ژوئن‬
‫‪1973‬‬
‫‪JBH‬‬
‫پیشگفتار به دومین نسخه‬

‫از زمان آماده سازی نسخه اول‪ ،‬چندین مورد اصلی وجود داشته است تحوالت در فیتوشیمیایی تکنیک‪ .‬مقدمه کربن طی‪U‬ف س‪UU‬نجی‬
‫اکن‪UU‬ون اطالع‪UU‬ات س‪UU‬اختاری بس‪UU‬یار دقی‪UU‬ق ت‪UU‬ری را ارائ‪UU‬ه می ده‪UU‬د‪ .‬پیوند ب‪U‬ر روی مولک‪U‬ول ه‪U‬ای پیچی‪U‬ده‪ ،‬در ح‪UU‬الی که ‪13 NMR‬‬
‫امکان دستیابی به ترکیبات ‪ HPLC،‬می افزاید قدرتمند و بسیار ابزار تحلیلی حساس‪ U‬به تسلیحات کروماتوگراف‪ .‬با ‪HPLC‬‬
‫برای مواد فرار ایجاد می کند‪ .‬توسعه دیدنی‪ -‬در تکنیک های طیف سنجی ج‪UU‬رمی ن‪UU‬یز ‪ GLC‬غیر فرار از نوع جداسازی هایی که‬
‫ب‪UU‬رای تع‪UU‬یین ‪ FAB-MS‬تغییراتی رخ داده است‪ .‬برای به عنوان مثال‪ ،‬در دسترس بودن منبع بمباران سریع اتم باعث می شود در‬
‫وزن مولکولی هر دو بسیار حساس ممکن است و ترکیبات غیر فرار گیاهی این تکنیک ها ب‪UU‬ه اختص‪U‬ار در ش‪U‬رح داده ش‪U‬ده است را مناسب‬
‫‪.‬بخش ها از این جدید نسخه‬
‫در طول دهه گذشته‪ ،‬تعداد سازه های جدید گزارش شده است منابع گی‪UU‬اهی ب‪UU‬ه ش‪UU‬دت اف‪UU‬زایش یافت‪UU‬ه‬
‫است و در میان برخی از طبقات ترکیب طبیعی‪ ،‬تعداد مواد شناخته شده دو براب‪UU‬ر ش‪UU‬ده است در داخل‬
‫این کوتاه مدت زمان‪ .‬را چالش ها و مسائل از نگه داشتن ب‪U‬اال با را ادبی‪UU‬ات فیتوش‪UU‬یمیایی‪ U‬در نتیج‪U‬ه‪ U‬هم‪UU‬ه‬
‫جستجو‪ U‬می ‪ Chemical‬این فعالیت ها کامالً در نظر گرفته شده است‪ .‬قادر‪ ،‬هر چند کامپیوتری‪ U‬از طریق‬
‫کند چکیده ها دارند بار دانشمندانی را ک‪U‬ه توان‪U‬ایی پ‪U‬رداخت این امکان‪U‬ات را داش‪U‬تند‪ ،‬ک‪U‬اهش داد‪ .‬ب‪U‬ه ت‪U‬رتیب‬
‫برای کمک به حداقل خواننده دانش آموز‪ ،‬منابع ادبی‪UU‬ات در این ثانیه نس‪UU‬خه ب‪UU‬ه ط‪UU‬ور گس‪UU‬ترده ب‪UU‬ه روز‪U‬‬
‫شده است تا بیشترین مورد‪ U‬را در نظر بگیرد تحوالت اخیر عالوه بر این‪ ،‬ب‪U‬رخی از آزم‪U‬ایش ه‪U‬ای عملی‬
‫جدید انجام شده است برای کمک ب‪U‬ه دانش آم‪U‬وز در توس‪U‬عه تخص‪U‬ص در مطالع‪U‬ه اض‪U‬افه ش‪U‬ده است ب‪U‬ه‬
‫عنوان مثال‪ ،‬القای فیتوالکسین در گیاهان و فعل و انفعاالت آللوپاتیک بین گیاهان‬
‫از اولین نسخه‪ ،‬تکنیک‌های فیتوشیمیایی‪ U‬در ارزش فزاینده در تحقیقات اکولوژیکی‪ ،‬به دنب‪UU‬ال درک‬
‫این موضوع ترکیبات اندری نقش بسزایی در تعیین دارند انتخاب غذا از حیوانات شلنگی که از گیاه‪UU‬ان‬
‫تغذیه می کنند‪ .‬تالش زیادی صرف شده است تجزیه و تحلیل جمعیت های گیاهی برای سموم ی‪UU‬ا م‪UU‬واد‬
‫بازدارنده تغذیه‪ .‬اکثر چنین ترکیبات بود مشمول که در را اولین نسخه‪ ،‬بجز برای را گیاه‬
‫‪x‬‬ ‫پیشگفتار به دومین نسخه‬

‫تانن ها آ جدید بخش دارد از این رو بوده مشمول بر تانن تحلیل و بررسی که در‬
‫‪.‬فصل ‪2‬‬
‫ب‪UU‬رای هم‪UU‬ه ‪ TLC‬با این نسخه جدید‪ ،‬فرصت استفاده شده است برای اضافه کردن دو ض‪UU‬مائم ‪ -‬چ‪U‬ک لیس‪UU‬تی از روی‪UU‬ه ه‪UU‬ای‬
‫کالس های کارخانه فرعی موضع و لیستی از آدرس های مفید برای فیتوشیمیدانان‪ .‬برخی از خطاها در چاپ اول تصحیح شده اس‪UU‬ت‪،‬‬
‫اما دیگران ممکن است باقی بماند و نویسنده خواهد شد خوش آمدی پیشنهادات‪ U‬برای به عالوه بهبودها‬
‫مانند چ‪UU‬اپ اول‪ ،‬نویس‪UU‬نده ب‪UU‬ه ط‪UU‬ور قاب‪UU‬ل ت‪UU‬وجهی از آن به‪UU‬ره ب‪UU‬رده است کمک و مش‪UU‬اوره از زی‪UU‬اد‬
‫همکاران او خواهد شد به وی‪UU‬ژه پس‪UU‬ندیدن به تش‪UU‬کر همک‪UU‬ارانش در واح‪UU‬د فیتوش‪UU‬یمی و ش‪UU‬اگردانش ک‪UU‬ه‬
‫گینه خوک ها که در توسعه از جدید فیتوشیمیایی‪ U‬رویه ها ‪ willJg‬دارند بوده‬

‫‪،‬خواندن‬
‫جفری ب‪ .‬هاربورن‬
‫دسامبر ‪1983‬‬
‫پیشگفتار به را سوم نسخه‬

‫از سال ‪ 1984‬که چاپ دوم آن منتشر شد‪ ،‬وجود نداشته است هر گونه اکتش‪UU‬اف ش‪UU‬گفت انگ‪UU‬یز در روش ه‪UU‬ای فیتوش‪UU‬یمیایی ب‪UU‬ا این‬
‫معرفی ش‪U‬ده ان‪U‬د‪ .‬اولین مجل‪U‬ه ای ک‪U‬ه ب‪U‬ه ط‪U‬ور خ‪U‬اص ب‪U‬ا گیاه‪U‬ان ‪ ods‬وجود‪ ،‬آن را شده است دوره تثبیت‪ ،‬زمانی که بهبود به روش موجود‬
‫ب‪UU‬ه عن‪UU‬وان ی‪UU‬ک ‪ HPLC‬سروکار دارد‪ U‬تجزیه و تحلیل‪ ،‬به نام تجزیه و تحلیل فیتوشیمیایی‪ ،‬در سال ‪ 1990‬راه اندازی شد‪ .‬استفاده از‬
‫ابزار تحلیلی در حال حاضر تقریبا ً در هر کالسی گسترش یافت‪UU‬ه است مت‪UU‬ابولیت ثانوی‪UU‬ه و این در ط‪U‬ول دوره در نظ‪U‬ر گرفت‪UU‬ه ش‪UU‬ده‬
‫است تجدید نظر در ویرایش دوم ارجاعات جدید به ادبی‪UU‬ات اولیه دارند ب‪UU‬وده اض‪UU‬افه‪ .‬بخش ها بر آلکالوئی‪UU‬دها‪ ،‬آمین ه‪UU‬ا‪ ،‬ایریدوئی‪UU‬دها‪،‬‬
‫چربی دوست فالونوئیدها‪ ،‬گلوکوزینوالت ها و سسکوئی ترپن الکتون ها دارند همه بوده اند منبسط‪ .‬کاربرد روش های فیتوش‪UU‬یمیایی‬
‫در گیاهان اتوس اهمیت گیاه شناسی در سالهای اخیر افزایش چش‪UU‬مگیری داش‪UU‬ته اس‪UU‬ت و الف ش‪UU‬رح مختص‪UU‬ری از ک‪UU‬اربرد فیتوش‪UU‬یمی در‬
‫‪.‬گیاهان دارویی دارد بوده اضافه به فصل ‪1‬‬
‫محصوالت‪ ،‬ویرایش شده ‪ _ Natxrnl‬سال ‪ 1990‬نقطه عطف مهمی بود برای فیتوشیمیدانان انتشارات را دید یون از را دیکشنری از‬
‫توسط جان باکینگهام‪ ،‬تحت تأثیر چپمن و هال‪ .‬این فرهنگ لغت ارائه می دهد کارگر فیتوش‪U‬یمیایی ب‪U‬رای اولین ب‪U‬ار ب‪U‬ا لیس‪U‬ت کام‪U‬ل هم‪U‬ه‬
‫شناخته شده ترکیبات شیمیایی گیاهی (و حیوانی) و عالوه بر آن در حال تنظیم به روز شده است‪ .‬اکنون می توان به سرعت به این سوال‬
‫پاسخ داد‪ :‬آیا من الف را پیدا کرده ام ماده گیاهی جدید یا ن‪UU‬ه؟ انب‪U‬وهی از کت‪UU‬اب ه‪UU‬ا و بررس‪UU‬ی ه‪UU‬ا در م‪UU‬ورد روش ه‪UU‬ای تجزی‪U‬ه و تحلی‪U‬ل‬
‫به را مناسب‪ U‬ارجاع لیست ها در را پایان از هر یک فصل ‪ dded‬گیاهان در دهه اخیر ظاهر شده است و اینها بوده است یک‬
‫در تهیه این ویرایش جدید‪ ،‬نویسنده مایل است یک بار دیگر تشکر کند ج همکاران در خ‪UU‬دمات تحقیق‪UU‬ات فیتوش‪UU‬یمیایی در ری‪UU‬دینگ و‬
‫همچنین وی بسیاری از دانشجویان محقق‪ ،‬در طول سال ها‪ ،‬که بسیاری از آنها را امتح‪UU‬ان ک‪UU‬رده اند روی‪UU‬ه ه‪UU‬ای ش‪UU‬رح داده ش‪UU‬ده در‬
‫اینجا او همچنین از خانم والری نوریس به خاطر او تشکر می کند کمک کارشناسان در تهیه این نسخه‪ ،‬و ناشران برای آنها تشویق‬

‫خواندن‬
‫جفری ب‪ .‬هاربورن‬
‫فوریه ‪1998‬‬
‫واژه نامه‬

‫عمومی اختصارات‬

‫‪ TLC‬الیه‬ ‫کروماتوگرافی‬ ‫‪MS‬‬ ‫‪ GLC‬طیف سنجی جرمی گاز =‬

‫مایع کروماتوگرافی‬ ‫فی‪،‬‬ ‫تحرک نسبت فامیلی به‬
‫جلو‬
‫کاغذ کامپیوتر‪U‬‬ ‫کروماتوگرافی‬ ‫‪fifi،‬‬ ‫نسبی حفظ‬
‫نانومتر فرابنفش‬ ‫‪UV‬‬
‫مادون‬ ‫قرمز مادون قرمز‬ ‫‪mol.wt.‬‬ ‫‪ NMR‬مولکولی وزن‬
‫هسته ای مغناطیسی‪ U‬رزونانس‬ ‫‪ M‬مولر‬
‫= ‪HPLC‬‬ ‫باال کارایی مایع کروماتوگرافی‬

‫مواد شیمیایی‬

‫‪BSA‬‬ ‫استامید )تری متیل سیلیل( ‪= N، O-bis‬‬

‫‪PVP‬‬ ‫= ‪ BHT‬پلی وینیل پیرولیدون (برای حذف کردن فنل ها) =‬ ‫بوتیله شده‬
‫هیدروکسی تولوئن (آنتی اکسیدان)‬
‫اتیلن دی آمین تتراستیک اسید (کالتینگ عامل) تریس = ‪EDTA‬‬ ‫= تریس (هیدروکسی متیل)‬
‫فنیل متان سولفونیل فلوراید = ‪ PMSF‬متیل آمین (بافر)‬
‫سدیم دودسیل سولفات = ‪SDS‬‬

‫کروماتوگرافی پشتیبانی می کند‬

‫کیزلگوهر = دیاتومه زمین دکالسو = سدیم آلومینیوم سیلیکات‬
‫سلولز = تحت درمان با پلی اتیلن‪ U‬ایمین ‪ PEI -‬سلولز = دی اتیل آمینو اتیل تیمار شده ‪DEAE -‬‬
‫سلولز = اپی کلروهیدرین‪ - U‬تری اتانول آمین ‪ -‬قلیایی‪ U‬تحت درمان ‪ECTEOLA -‬‬
 ‫‪...‬‬
‫‪X111‬‬

‫= ‪PPE‬‬ ‫پلی فنیل اتر‬ ‫تریکسیلنیل = ‪ TXP‬متیل سیلوکسان پلیمر = ‪OV‬‬

‫فسفات‬ ‫سیلیکون روغن = ‪SE‬‬
‫درجه = دی اتیلن گلیکول سوکسینات‬ ‫نیتریل سیلیکون = ‪XE‬‬
‫را گریس کنید ‪ Embacel‬ایست خروس = ‪Apiezon L‬‬ ‫= اسید شسته شده سلیت‬
‫کربووکس = پلی اتیلن پشتیبانی از گلیکول‬
‫حمایت کنید ‪ Poropak‬کروموسرب = آجر نسوز از‬ ‫= استایرن پلیمر‬ ‫= ‪ODS‬‬ ‫پشتیبانی‬
‫‪octadecylsilane‬‬

‫کروماتوگرافی حالل ها‬

‫‪ MeOH‬متانول‬
‫اتانول‬ ‫اتانول‬ ‫فرمیک اسید = ‪HCO 2 H‬‬
‫‪iso-PrOH‬‬ ‫‪ n-‬ایزوپروپانول‬ ‫استیک اسید = ‪HOAc‬‬
‫‪BuOH‬‬ ‫‪ iso-‬بوتانول‪= n-‬‬ ‫کلروفرم‪CHCl 3 = U‬‬
‫= ‪ PhOH‬ایزو بوتانول = ‪BuOH‬‬ ‫= ‪CH 2 Cl 2‬‬ ‫‪ EtOAc‬متیلن دی کلراید‬
‫فنل‬ ‫اتیل استات =‬
‫‪NHEt 2‬‬ ‫دی اتیل آمین =‬ ‫‪ CO‬من ‪2‬‬ ‫استون =‬
‫‪Et، O‬‬ ‫دی اتیل اتر =‬ ‫متیل اتیل کتون = ‪MeCOEt‬‬
‫‪ *h‬سی‬ ‫بنزن =‬
‫مواد و روش ها از گیاه تحلیل و بررسی‬

‫‪1.1‬‬ ‫معرفی‬
‫‪1.2‬‬ ‫مواد و روش ها از استخراج و انزوا‬ ‫‪4‬‬
‫‪1.3‬‬ ‫مواد و روش ها از جدایی‬ ‫‪7‬‬
‫‪1.4‬‬ ‫مواد و روش ها از شناسایی‪U‬‬ ‫‪16‬‬
‫‪1.5‬‬ ‫تحلیل و بررسی‪ U‬از نتایج‬ ‫‪30‬‬
‫‪1.6‬‬ ‫برنامه های کاربردی‪U‬‬ ‫‪32‬‬

‫معرفی ‪1.1‬‬
‫موضوع فیتوشیمی یا شیمی گیاهی در دوباره توسعه یافته است‪ .‬صد سال به عنوان ی‪UU‬ک رش‪UU‬ته متم‪UU‬ایز‪U،‬‬
‫جایی در بین محصول طبیعی‪ U‬شیمی ارگانیک و بیوشیمی‪ U‬گیاهی و ارتباط ن‪UU‬زدیکی ب‪UU‬ا ه‪UU‬ر دو دارد‪ .‬آی تی‬
‫مربوط‪ U‬به تنوع بسیار‪ U‬زیاد مواد آلی است ساخته شده و انباشته شده توسط گیاه‪UU‬ان و برخ‪UU‬ورد‪ U‬ب‪UU‬ا س‪UU‬اختار‬
‫‪.‬شیمیایی‪ U‬این مواد‪ ،‬بیوسنتز‪ ،‬گردش و متابولیسم آنها‪ ،‬آنها طبیعی توزیع‪ U‬و آنها بیولوژیکی‪ U‬تابع‬
‫در تمام این عملیات ها روش هایی ب‪UU‬رای جداس‪UU‬ازی‪ ،‬تص‪UU‬فیه م‪UU‬ورد نی‪UU‬از است و شناس‪UU‬ایی بس‪UU‬یاری‪ U‬از‬
‫ترکیبات مختلف موجود‪ U‬در گیاهان‪ .‬بنابراین‪ ،‬در درک ما پیشرفت‪ U‬می کند فیتوشیمی‪ U‬ب‪UU‬ه ط‪UU‬ور‪ U‬مس‪UU‬تقیم‬
‫هستند مربوط‪ U‬به بهره ب‪U‬رداری‪ U‬م‪U‬وفقیت آم‪UU‬یز از تکنی‪UU‬ک ه‪U‬ای ش‪U‬ناخته ش‪U‬ده‪ ،‬و ش‪UU‬رایط توس‪U‬عه م‪U‬داوم‪U‬‬
‫تکنی‪UU‬ک ه‪UU‬ای جدی‪UU‬د ب‪UU‬رای ح‪UU‬ل مش‪UU‬کالت برجس‪UU‬ته هم‪UU‬انطور ک‪UU‬ه ظ‪UU‬اهر می ش‪UU‬وند‪ .‬یکی از چ‪UU‬الش ه‪UU‬ای‬
‫فیتوشیمی انجام همه موارد است عملیات فوق بر روی مقادیر بس‪UU‬یار کم م‪UU‬واد‪ .‬ف‪UU‬ری بن‪UU‬ابراین‪ U،‬ح‪UU‬ل ی‪UU‬ک‬
‫مشکل بیولوژیکی‪ U‬مثالً در تنظیم رشد گیاه در بیوشیمی فعل و انفعاالت گیاه‪-‬حیوان یا در درک منشا گیاهان‬
‫ساختارهای همیکال‪ U‬که ممکن‪ U‬اس‪U‬ت فق‪U‬ط ‪ c‬فسیلی به شناسایی طیف وسیعی‪ U‬از مجموعه ها بستگی دارد‬
‫برای مطالعه در میکروگرم در دسترس باشند مقادیر‬
‫آی تی است را ه‪UU‬دف از این کت‪UU‬اب به ف‪UU‬راهم ک‪UU‬ردن‪ ،‬ب‪UU‬رای را اولین زم‪UU‬ان‪ ،‬یک مع‪UU‬رفی‪ -‬ی‪UU‬ون به‬
‫حاضر در دسترس مواد و روش ها برای را تحلیل‪ U‬و بررسی از گیاه مواد و‬
‫‪2‬‬ ‫روش از گیاه تحلیل و بررسی‬

‫برای ارائه کلیدی برای ادبیات موضوع‪ .‬هیچ چیز جدیدی برای آن ادعا نشده است روش های شرح داده شده در اینجا در واق‪UU‬ع‪ ،‬ه‪UU‬دف‬
‫ترسیم این روش‌ها است‪ .‬شانس هایی که بیشتر بوده است استفاده شده؛ دانشجو یا تحقیق کارگر سپس می تواند به سرعت تکنی‪UU‬ک‬
‫‪.‬های خود را برای حل تکنیک های خود توسعه دهد چالش ها و مسائل‬
‫مقداری آموزش در ش‪UU‬یمی س‪UU‬اده آزمایش‪UU‬گاه تکنیک‪ U‬ف‪UU‬رض ب‪UU‬ر این است مانند ی‪UU‬ک پس زمین‪UU‬ه ب‪UU‬ا این‬
‫با شیمی بسیار کمی‪ ،‬ب‪UU‬ه ‪. Tists،‬حال‪ ،‬این امکان برای گیاه شناسان و سایر دانشمندان گیاهی وجود دارد‬
‫انجام فیتوشیمی‪ ،‬زیرا بسیاری‪ U‬از تکنیک‪ U‬ساده و سرراست هستند مانن‪UU‬د س‪UU‬ایر دروس عملی‪ ،‬دانش آم‪UU‬وز‬
‫بای‪UU‬د تخص‪UU‬ص خ‪UU‬ود را توس‪UU‬عه ده‪UU‬د‪ .‬ب‪UU‬دون دس‪UU‬تور‪ U‬العم‪UU‬ل‪ ،‬ام‪UU‬ا دقیقا نوش‪UU‬ته ش‪UU‬ده اس‪UU‬ت‪ ،‬می توان‪UU‬د در‬
‫آزمایشگاه جایگزین عقل سلیم و توانایی‪ U‬فکر کردن ب‪UU‬ه چیزه‪UU‬ا از اص‪UU‬ول اولی‪UU‬ه‪ .‬نمون‪UU‬ه ه‪UU‬ایی از عملی‬
‫آزمایش هایی که می توان از طریق‪ U‬آنه‪U‬ا ب‪U‬رای کس‪UU‬ب تجرب‪U‬ه ک‪U‬ار ک‪UU‬رد در اک‪U‬ثر بخش‌ه‪UU‬ای فص‪U‬ل‌های‬
‫بعدی مشاهده می‌شود‪ .‬اینها به راحتی می توانند باشند سازگار ب‪UU‬رای آزمایش‪UU‬گاه دوره ه‪UU‬ای آموزشی و‬
‫زیاد دارند قبال‪ ،‬پیش از این بوده استفاده شده برای این هدف‬
‫محدوده و تعداد ساختارهای‪ U‬مولکولی گسسته تولید شده توسط‪ U‬گیاهان بسیار ب‪UU‬زرگ هس‪UU‬تند و س‪UU‬رعت‬
‫کنونی پیشرفت دانش ما در مورد این است آنها که یک مشکل عمده در تحقیقات فیتوشیمیایی‪ ،‬گ‪UU‬ردآوری‪U‬‬
‫آنهاست داده های موجود در مورد هر کالس خاص از ت‪UU‬رکیب‪ U.‬ب‪UU‬رآورد ش‪UU‬ده اس‪UU‬ت‪ ،‬ب‪UU‬ه عن‪UU‬وان مث‪UU‬ال‪ ،‬ک‪UU‬ه‬
‫اکنون بیش از ‪ 10000‬آلکالوئید‪ U‬گیاهی شناخته شده وج‪UU‬ود دارد عالق‪UU‬ه دارویی ب‪UU‬ه آلکالوئی‪UU‬دهای‪ U‬جدی‪UU‬د‬
‫مانند آلکالوئیدهای جدید است بودن کشف شده و شرح داده شده‪ ،‬احتماال در را نرخ از یکی آ روز‪U‬‬
‫از آنجایی که تعداد مواد شناخته شده بسیار زیاد است‪ ،‬معرفی ویژه در هر فصل از کتاب مط‪UU‬البی نوش‪U‬ته ش‪UU‬ده اس‪U‬ت ک‪UU‬ه نش‪UU‬ان‬
‫دهنده ساختار تنوع طبیعی موجود در هر کالس از ترکیبات‪ ،‬به تشریح آن ترکیباتی که معموالً وجود دارند و نشان می دهند ش‪UU‬یمیایی‬
‫تغییر با فرمول های نماینده منابع داده می ش‪U‬ود‪ ،‬در ه‪U‬ر کجا ممکن اس‪U‬ت‪ ،‬ب‪U‬ه لیس‪U‬ت ه‪U‬ای اخ‪U‬یر از ترکیب‪U‬ات ش‪U‬ناخته ش‪U‬ده در ه‪U‬ر‬
‫واکنش های رنگی و طیفی خواص بیشتر ترکیبات رایج ‪ V ،‬را نشان می دهد ‪ .‬مقادیر ‪ R p‬کالس‪ .‬جداول گنجانده شده است که‬
‫گیاهی این جداول داده می شود به طور عمده برای گویا یا مقایسه ای اهداف و هستند نه منظور به بودن جامع‬
‫پیشرفت‪ U‬فیتوشیمیایی کمک زیادی به توسعه روشهای سریع و دقیق غرب‪UU‬الگری گیاه‪UU‬ان ب‪UU‬ه وی‪U‬ژه م‪UU‬واد ش‪UU‬یمیایی و تاکی‪UU‬د در این‬
‫کتاب ناگزیر بر کروماتوگرافی است تکنیک‪ .‬این رویه ها نشان داده اند که بسیاری از مواد منشاء‪ -‬به طور کلی فکر به ب‪UU‬ودن نس‪UU‬بتا‬
‫نادر که در وقوع هستند از تقریبا جهانی توزیع که در را گیاه پادشاهی‪ .‬را اهمیت از ادامه دارد نظرس‪UU‬نجی ها گیاه‪UU‬ان ب‪UU‬رای م‪UU‬واد‬
‫فعال بیولوژیکی نیازی به استرس ندارند‪ .‬قطعا‪ ،‬روش های تشخیص اولیه کالس های خاصی از ترکیبات هستند م‪U‬ورد بحث ق‪U‬رار‬
‫گرفت که در مقداری جزئیات که در را ذیل فصل ها‬
‫با اينكه را مدت‪ ،‬اصطالح 'گیاه' است استفاده شده اینجا به مراجع‪U‬ه کنید به را گی‪UU‬اه پادش‪U‬اهی‪ U‬مانند آ‬
‫کل‪ ،‬آنجا است مقداری تاکید بر باالتر گیاهان و مواد و روش ها از تحلیل و بررسی‬
 ‫مقدمه‬ ‫‪3‬‬

‫برای میکروارگانیسم ها با هیچ جزئیات خاصی برخورد نمی شود‪ .‬به عنوان ی‪UU‬ک ژن‪UU‬رال ق‪UU‬انون‪ ،‬روش ه‪UU‬ای م‪UU‬ورد اس‪UU‬تفاده در گیاه‪UU‬ان‬
‫عالی برای شناسایی آلکالوئیدها‪ ،‬آمینو اسیدها‪ ،‬کینون ها و ترپنوئی‪UU‬دها را می ت‪UU‬وان مس‪UU‬تقیما ً روی سیس‪UU‬تم میک‪UU‬روبی اعم‪UU‬ال ک‪UU‬رد‪ .‬تم‪ .‬در‬
‫بسیاری از موارد‪ ،‬جداسازی بسیار آسان‌تر است‪ ،‬زیرا آلودگی‌های فرعی موادی مانند تانن ها و کلروفیل ه‪UU‬ا معم‪UU‬والً وج‪UU‬ود ندارن‪UU‬د‪.‬‬
‫در یک در موارد کمی‪ ،‬به دلیل انعطاف پذیری میکروبی‪ ،‬ممکن است دشوارتر باشد دیواره سلولی و نیاز به استفاده از اختالل مکانیکی‬
‫‪.‬برای آزادسازی برخی از مواد حاضر‬
‫تعدادی از ترکیبات آلی مانند پنی سیلین و آنتی بیوتیک های تتراسایکلین (ترنر‪1971 ،‬؛ ترنر و آلدریج‪ ،)1983 ،‬که به طور خ‪UU‬اص‬
‫در میکروارگانیسم ها یافت می شوند و شناسایی آنها وجود ندارد به دلیل محدودیت فضا در اینجا پوشش داده شده است‪ .‬گلس‪UU‬نگ ه‪UU‬ا ن‪UU‬یز‬
‫ی‪UU‬ک مح‪UU‬دوده ایج‪UU‬اد می کنند از رنگدان‪UU‬ه ه‪UU‬ای خ‪UU‬اص‪ ،‬از جمل‪UU‬ه دپس‪UU‬یدون ه‪UU‬ا و دپس‪UU‬یدها‪ .‬اینه‪UU‬ا هس‪UU‬تند تجزی‪UU‬ه و تحلی‪UU‬ل ب‪UU‬ا روش ه‪UU‬ای‬
‫میکروشیمیایی ویژه‪ ،‬بر اساس واکنش های رنگی‪ ،‬تکنیک های کروماتوگرافی و طیفی یک حساب جامع از ش‪UU‬یمی گلس‪UU‬نگ ه‪UU‬ا توس‪UU‬ط‬
‫کولبرسون (‪ )1969‬ارائه شده است‪ .‬تجزیه و تحلیل از گلسنگ رنگدانه ها است ذکر شده به طور خالصه اینجا که در فصل ‪( 2‬پ‪.‬‬
‫‪)101.‬‬
‫ترکیبات شیمیایی گیاهان را می توان در چند دسته طبق‪UU‬ه بن‪UU‬دی ک‪UU‬رد راه ه‪UU‬ای مختل‪UU‬ف؛ در این کت‪UU‬اب‪ ،‬طبق‪UU‬ه بن‪UU‬دی ب‪UU‬ر اس‪UU‬اس منش‪UU‬اء‬
‫بیوسنتزی‪ ،‬خواص حاللیت و وجود گروه های عاملی کلیدی خاص‪ .‬فصل ‪ 2‬ترکیبات فنلی را پوشش می دهد‪ ،‬موادی که به آسانی وج‪UU‬ود‬
‫دارند به دلیل ماهیت آبدوست آنها و منشاء مشترک آنها از پیش س‪U‬از معط‪UU‬ر ش‪U‬یکیمیک اس‪U‬ید فص‪UU‬ل ‪ 3‬ب‪UU‬ه ترپنوئی‪U‬دها می پ‪U‬ردازد‪ ،‬ک‪U‬ه همگی‬
‫دارای‪ U‬خواص لیپیدی و منشا بیوسنتزی از ایزوپنتنیل‪ U‬هستند پیروفسفات فصل ‪ 4‬به اسیدهای آلی‪ ،‬لیپیدها و غیره اختصاص دارد کالس ه‪U‬ای‬
‫ترکیبی که به صورت بیوسنتزی از استات به دست می آیند‪ .‬فصل ‪ 5‬است بر روی ترکیبات نیتروژنی‪ U‬گیاه‪UU‬ان‪ ،‬م‪UU‬واد اساس‪UU‬ی شناس‪UU‬ایی ش‪UU‬ده‬
‫به کربوهیدرات های محلول در آب و مشتقات آنها ‪- ter 6‬فصل ‪ Dragendorff.‬توسط آنها پاسخ مثبت به نین هیدرین یا معرف‬
‫می پردازد‪ .‬در نه‪UU‬ایت‪ ،‬فص‪UU‬ل ‪ 7‬ب‪UU‬ه ط‪UU‬ور خالص‪UU‬ه ب‪UU‬ه درش‪UU‬ت مولک‪UU‬ول ه‪UU‬ای گیاه‪UU‬ان‪ ،‬هس‪UU‬ته ای می پ‪U‬ردازد اس‪U‬یدها‪ ،‬پروت‪U‬ئین ها و پلی‬
‫ساکاریدها که به راحتی جدا می شوند از جانب دیگر اجزای تشکیل دهنده توسط باال بودن آنها مولکولی وزنه ها‬
‫‪،‬که در را باقی مانده از این مقدماتی فصل‪ ،‬آی تی است پیشنهاد شده به بحث و گفتگو‬
‫م‪UU‬واد و روش ‪. cal‬به طور کلی روش های استخراج‪ ،‬جداسازی و شناسایی‪ .‬آ بخش پایانی شامل نمونه هایی از کاربرد‪ U‬فیتوشیمی است‬
‫‪.‬ها که در ناهمسان مناطق از گیاه علوم پایه‬
‫‪ Methods in Plant‬دو اثر مرجع عمده در مورد روش های گیاهی موجود است تحلیل و بررس‪UU‬ی‪ .‬اولین م‪UU‬ورد ب‪UU‬ا عن‪UU‬وان‬
‫به عنوان ویراستار سریال‪ .‬این در یک مجموعه ‪ 10‬جلدی ظاهر ‪ JB Harbome‬است و ‪ PM Dey‬با ‪8iochemistnj‬‬
‫‪ JF‬و ‪ HF Linskens‬ش‪UU‬ده است ( ‪ UU.)1997-1989‬دوم روش‌ه‪UU‬ای م‪UU‬درن گی‪UU‬اهی است تحلی‪UU‬ل‪ ،‬س‪UU‬ری جدید وی‪UU‬رایش ش‪UU‬ده توسط‬
‫که انتشار آن در سال ‪ 1985‬آغ‪U‬از شد و ب‪U‬ه ح‪U‬دود ‪ 20‬جل‪U‬د رس‪U‬یده اس‪U‬ت‪ .‬بس‪U‬یاری از مت‪U‬ون دیگ‪U‬ر از جمل‪U‬ه به روش‪U‬های ‪Jackson،‬‬
‫فیتوشیمیایی و اینها در منابع در پایان ذکر شده است این و متعاقب فصل ها آ جاری مجله فیتوشیمیایی تحلیل و بررسی است‬
‫‪4‬‬ ‫روش از گیاه تحلیل و بررسی‬

‫‪ |Oufnal‬مستقیما مرتبط به خوانندگان این کتاب مجالت دیگری که ممکن است باشد مشاوره شده اند‬ ‫‪Of ChfO ft l0 tO‬‬
‫‪.‬علوم پایه ‪ YO f OtographiC‬تحلیلی بیوشیمیست ری و مجله از چ ‪Y0ph]،‬‬

‫مواد و روش ها از استخراج و انزوا ‪1.2‬‬

‫‪1.2.1‬‬ ‫را گیاه مواد‬

‫در حالت ایده آل‪ ،‬بافت های تازه گیاهی باید برای تجزیه‪ U‬و تحلیل فیتوشیمیایی‪ U‬و را مواد باید ب‪UU‬ودن غوط‪UU‬ه‬
‫ور شد به غلیان الکل در داخل دقایق از آن مجموعه‪ .‬گ‪UU‬اهی اوق‪U‬ات گی‪UU‬اه م‪U‬ورد مطالع‪UU‬ه در دس‪U‬ترس‪ U‬و‬
‫مادی نیست ممکن است باید توسط یک کلکسیونر‪ U‬ساکن در قاره دیگری ت‪UU‬امین ش‪UU‬ود‪ .‬در چ‪UU‬نین در م‪UU‬وارد‪،‬‬
‫دستمال تازه چیده شده‪ ،‬به صورت خشک در یک کیسه پالستیکی‪ U‬نگهداری می شود‪ ،‬معموالً ب‪UU‬اقی می ماند‬
‫در شرایط خوبی برای تجزیه و تحلیل در طی چند روز مورد نیاز برای ترانس بندر توسط‪ U‬پست هوایی‬
‫از طرف دیگر‪ ،‬ممکن است گیاهان قبل از استخراج خشک ش‪UU‬وند‪ .‬اگ‪UU‬ر این ک‪UU‬ار انج‪UU‬ام ش‪UU‬ود‪ ،‬همینط‪UU‬ور‬
‫است ضروری‪ U‬است که را خش‪U‬ك ك‪U‬ردن عمل است انج‪U‬ام ب‪U‬یرون زیر کن‪U‬ترل می ش‪U‬ود ش‪U‬رط اق‪UU‬داماتی‬
‫برای جلوگیری‪ U‬از وقوع تغییرات شیمیایی بیش از حد بای‪UU‬د خش‪UU‬ک ش‪UU‬ود ب‪UU‬ه عن‪UU‬وان در سریع ت‪UU‬رین زم‪UU‬ان‬
‫بادکش خوب پس از خشک شدن کامل‪ ،‬گیاهان را می ‪ a‬ممکن‪ ،‬بدون استفاده از دماهای باال‪ ،‬ترجیحا در‬
‫توان قبل از تجزیه و تحلیل‪ U‬نگهداری کرد برای دوره های ط‪UU‬والنی از زم‪UU‬ان در واق‪UU‬ع‪ ،‬تجزی‪UU‬ه و تحلی‪UU‬ل‬
‫می کند برای فالونوئیدها‪ ،‬آلکالوئیدها‪ ،‬کینون‪ U‬ها و ترپنوئیدها با موفقیت بر روی هرباریوم انجام ش‪UU‬ده اند‬
‫‪.‬گیاه بافت دوستیابی بازگشت زیاد سال ها‬
‫‪-‬یکی مثال از را استفاده کنید از هرباریوم مواد است را ضروری است روغن تجزیه و تحلیل‪U‬‬
‫ساخته شده قبل از ‪ 1800‬به دس‪UU‬ت آم‪UU‬ده است (ه‪U‬ارلی و زن‪U‬گ‪ Linneaus .)1967 ،‬منتا انجام شد برگ‪ ،‬مواد از مجموعه اصلی‬
‫کمی تغییر می کند که در ضروری است روغن محتوا ممکن است در هر دو بافت برگ و میوه با گذشت زمان رخ می ده‪UU‬د و این‬
‫احتمال باید وجود داشته باشد در نظر گرفته شده است‪ .‬به عنوان مثال‪ ،‬سندفورد و هاینز (‪ )1971‬دریافتند که میزان میریستسین در‬
‫به آرامی افزایش یافت در ذخیره سازی‪ ،‬در حالی ک‪UU‬ه محت‪UU‬وای فرارت‪UU‬ر §‪-‬پینن ب‪UU‬ا ‪، Myristica fragrans‬میوه های جوز هندی‬
‫گذشت زمان کاهش یافت‪ .‬بر را دیگر دست‪ ،‬فالونوئیدها و آلکالوئیدها که در هرباریوم نمون‪UU‬ه ه‪UU‬ا هس‪UU‬تند ب‪UU‬ه ط‪UU‬ور قاب‪UU‬ل مالحظ‪UU‬ه ای‬
‫در ابتدا در سال ‪ 1675‬جمع آوری شد‪ ،‬هنوز هم ‪ St ry chnos nuxvomica‬پایدار با زمان؛ بنابراین‪ ،‬یک نمونه برگ از‬
‫‪.‬حاوی ‪ ٪2-1‬وزنی آلکالوئید بود (فیلیپسون‪)1982 ،‬‬
‫برخی از زیر کالس های پلی فنل بهتر است تحت کنترل بیشتری اس‪UU‬تخراج ش‪UU‬وند‪ .‬ره‪UU‬بری ش‪UU‬رایط از آنها نش‪UU‬ان داد در ب‪UU‬اال‪.‬‬
‫برای مثال‪ ،‬را بازده از باهم متراکم شده تانن از بید برگها بزرگترین است چه زمانی اندازه گ‪U‬یری ها هس‪U‬تند ب‪U‬ر روی ب‪U‬رگ ه‪U‬ای‬
‫تازه ای که به جای خشک شدن در هوا ب‪U‬ا خالء خش‪U‬ک ش‪U‬ده ان‪U‬د س‪U‬اخته می ش‪U‬وند‪ .‬در مقاب‪U‬ل‪ ،‬گلیکوزی‪U‬دهای فنلی س‪U‬اده در هم‪U‬ان‬
‫‪.‬گیاهان بهترین هستند استخراج شده است بعد از ساده خشک کردن هوا (اوریان‪)1995 ،‬‬
‫آزادسازی بافت گیاهی مورد مطالعه از آلودگی با گیاهان دیگر نکته واضحی اس‪UU‬ت ک‪UU‬ه بای‪UU‬د در این مرحل‪UU‬ه م‪UU‬راقب آن باش‪UU‬ید‪.‬‬
‫ضروری است‪ ،‬برای مثال‪ ،‬به استخدام کردن گیاهان که هستند رایگان از جانب بیماری‪ ،‬یعنی که هستند نه‬
 ‫مواد و روش ها از استخراج و‬ ‫‪isolnfion‬‬ ‫‪5‬‬
‫تحت تأثیر عفونت ویروسی‪ ،‬باکتریایی یا قارچی قرار می گیرد‪ .‬نه تنها ممکن است محص‪UU‬والت از سنتز میک‪UU‬روبی در چ‪UU‬نین گیاه‪UU‬انی‬
‫تش‪UU‬خیص داده می ش‪U‬ود‪ ،‬ام‪U‬ا ممکن اس‪U‬ت عف‪U‬ونت ن‪U‬یز وج‪U‬ود داش‪UU‬ته باشد ب‪UU‬ه ط‪UU‬ور ج‪UU‬دی تغی‪UU‬یر دهید گی‪UU‬اه متابولیسم و غ‪UU‬یر منتظ‪UU‬ره‬
‫محصوالت میتوانست بودن شکل گرفت‪ ،‬احتماال که در بزرگ مقادیر‬
‫آلودگی همچنین‪ U‬ممکن است هنگام جم‪UU‬ع آوری م‪UU‬واد گی‪UU‬اهی پ‪UU‬ایین ب‪UU‬رای تحلیل و بررس‪UU‬ی‪ U.‬زم‪UU‬انی ک‪UU‬ه‬
‫قارچ های رش‪UU‬د انگلی روی‪ U‬درخت‪UU‬ان جم‪UU‬ع آوری می ش‪UU‬وند‪ ،‬اینط‪UU‬ور‪ U‬است ح‪UU‬ذف تم‪UU‬ام ب‪UU‬افت درخت از‬
‫نمون‪U‬ه‪ U‬ه‪UU‬ا مهم اس‪UU‬ت‪ .‬گ‪UU‬زارش ه‪UU‬ای قبلی (پ‪UU‬اریس و همک‪UU‬اران‪ )1960 ،‬اس‪UU‬ید کلروژنی‪UU‬ک‪ U،‬ی‪UU‬ک محص‪UU‬ول‬
‫معمولی گیاهی باالتر‪ ،‬در دو قارچ ها تقریبا ً به دلیل آلودگی نادرست هستند‪ .‬تکرار تجزی‪UU‬ه و تحلی‪UU‬ل ب‪UU‬ر‬
‫روی‪ U‬م‪UUU‬واد ب‪UUU‬ا دقت تم‪UUU‬یز ش‪UUU‬ده هیچ ش‪UUU‬واهدی از این عارض‪UUU‬ه را نش‪UUU‬ان ن‪UUU‬داد‪ .‬پوند ب‪UUU‬ودن حاضر‬
‫از نو‪ ،‬خزه ها غالبا رشد که در بس‪UU‬تن اتحادیه با ‪).‬منتشر نشده نتایج ‪ FB،‬و هورا ‪(Harborne JB‬‬
‫باالتر گیاهان و آی تی است گاهی اوقات به دست آوردن آنها بدون چنین بستر دشوار است‪ .‬در نهایت‪ ،‬در‬
‫مورد از ب‪U‬االتر گیاه‪UU‬ان‪ ،‬مخل‪U‬وط‪ U‬ها از گیاه‪UU‬ان ممکن است گ‪U‬اهی ب‪U‬ودن جم‪U‬ع آوری ک‪U‬رد ک‪U‬ه در خطا‬
‫ممکن است دو گونه چمن نزدیک به هم در کنار هم در مزرعه رشد کنند ب‪U‬ه اش‪U‬تباه ف‪U‬رض ش‪U‬ده اس‪U‬ت ک‪U‬ه‬
‫یکسان است‪ ،‬یا یک گیاه ممکن است با درک اینکه دارای ی‪U‬ک انگ‪U‬ل اس‪UU‬ت (مانن‪U‬د دودر‪ ،‬کوس‪UU‬کوتا) ‪.‬‬
‫‪.‬اپیتیموم) در هم تنیده شده است با آی تی‬
‫در تجزیه و تحلیل فیتوشیمیایی‪ ،‬هویت گیاهی گیاهان مورد مطالعه قرار گرفت بای‪UU‬د توس‪UU‬ط ی‪UU‬ک مرج‪UU‬ع تایی‪UU‬د ش‪UU‬ده در ب‪UU‬رخی از‬
‫مراحل تأیید اعتبار شود تحقیق و بررسی‪ .‬اشتباهات زیادی در مورد ه‪UU‬ویت گی‪UU‬اه در این گی‪UU‬اه رخ داده است گذش‪UU‬ته از اینک‪UU‬ه ض‪UU‬روری‬
‫است در هنگام گزارش‪ ،‬صحت مطالب را تأیید کنید مواد جدید از گیاهان یا حتی مواد ش‪UU‬ناخته ش‪UU‬ده از گیاه‪UU‬ان جدید من‪UU‬ابع ه‪UU‬ویت‬
‫رش‪U‬ته گی‪U‬اه ‪ a‬مثال الف مشترک گونه ها جمع آوری شده که در مورد انتظ‪U‬ار زیس‪U‬تگاه توسط( مطالب یا باید فراتر از سؤال باشد‬
‫یا آی تی باید باشد ممکن است برای را هویت به بودن ایجاد توسط آ کارشناس طبقه بندی به این دالی‪UU‬ل‪ ،‬ام‪UU‬روزه در گیاه‪UU‬ان )شناس‬
‫هرب‪UU‬اریوم ش‪UU‬ناخته ش‪UU‬ده اس‪U‬ت ‪ ،‬ب‪U‬ه ‪ a‬گیاهی رایج است‪ .‬تحقیقات شیمیایی برای‪ U‬سپرده گذاری یک نمونه کوپن از یک گیاه بررسی ش‪UU‬ده در‬
‫‪.‬طوری که می توان در آینده به گیاه اشاره کرد مطالعه کرد اگر این تبدیل می شود الزم است‬

‫‪1.2.2‬‬ ‫استخراج‬
‫حالت دقیق استخراج به طور طبیعی به بافت و محتوای آب مواد گیاهی استخراج شده و بر اساس نوع سوئی که در ح‪U‬ال م‪UU‬نزوی ش‪UU‬دن‬
‫است‪ .‬به طور کلی‪" ،‬کشتن" گیاه مطلوب است بافت‪ ،‬یعنی جلوگیری‪ U‬از اکسیداسیون یا هیدرولیز‪ U‬آنزیمی‪ ،‬و غوطه ور شدن‪ -‬بافت ب‪UU‬رگ ی‪UU‬ا‬
‫گل تازه را که در صورت لزوم به طور مناسب برش داده شود جوش‪U‬اندن گ‪U‬رم ات‪U‬انول راه خ‪U‬وبی ب‪U‬رای دس‪U‬تیابی ب‪U‬ه این ه‪U‬دف اس‪U‬ت‪.‬‬
‫الکل‪ ،‬در هر صورت‪ ،‬یک حالل همه منظوره خوب برای استخراج اولیه است ‪ .‬متعاقب‪UU‬ا‪ ،‬را م‪UU‬واد را می ت‪UU‬وان در مخل‪UU‬وط کن خیس ک‪UU‬رد و‬
‫در صورت تالش برای استخراج جامع ضروری است‪ .‬هنگام انزوا موارد خاص از جانب سبز ‪ n‬فیلتر کرد اما این فقط واقعا ً است‬
‫بافت‪ ،‬را موفقیت از را استخراج با الکل است به طور مستقیم مربوط به را وسعت که کلروفیل است حذف شده به را حالل‬
‫‪6‬‬ ‫روش از گیاه تحلیل‪ U‬و بررسی‬

‫و هنگامی که بقایای بافت‪ ،‬در استخراج مکرر‪ ،‬کامالً عاری از آن باشد رن‪UU‬گ س‪UU‬بز‪ ،‬می ت‪UU‬وان ف‪UU‬رض‬
‫‪.‬کرد که تمام وزن مولکولی‪ U‬پایین پوند دارند بوده استخراج شده است‬
‫روش شیمیایی‪ U‬کالسیک برای به دست آوردن ترکیبات آلی از بافت خش‪UU‬ک ش‪UU‬ده گی‪UU‬اه (چ‪UU‬وب قلب‪،‬‬
‫دانه های خشک‪ ،‬ریشه‪ ،‬برگ) ادام‪UU‬ه می یاب‪UU‬د‪ .‬اس‪UU‬تخراج م‪UU‬واد پ‪UU‬ودری‪ U‬در دس‪UU‬تگاه سوکس‪UU‬له ب‪UU‬ا طی‪UU‬ف‬
‫وسیعی‪ U‬از حالل ها‪ ،‬راه افتادن که در دور زدن با ات‪UU‬ر‪ ،‬نفت و کلروف‪UU‬رم (به ج‪UU‬دایی‪ -‬م‪UU‬یزان لیپی‪UU‬دها و‬
‫ترپنوئیدها) و سپس استفاده از الکل و اتیل استات (برای ترکیبات قطبی تر)‪ .‬این روش هنگام ک‪UU‬ار ب‪UU‬ر‬
‫روی‪ U‬آن مفید است مقیاس گرمی با این حال‪ ،‬به ندرت می توان به تفکیک‪ U‬کامل اجزای تشکیل‪ U‬دهنده دس‪UU‬ت‬
‫یافت‪ .‬انتها و همان ترکیبات ممکن است بازیابی شود (به نسبت های مختلف) که در چندین کسری‪U‬‬
‫عصاره به دست آمده با فیلتراسیون از طریق سلیت روی آب شفاف می شود پمپ می ش‪UU‬ود و س‪UU‬پس‬
‫این در حال حاضر معموال در انجام می شود یک اواپراتور چرخشی که محلول‪ uacuo U‬غلیظ می شود در‬
‫های حجیم را تا حد کوچک‪ U‬متمرکز‪ U‬می کند حجم ها‪ ،‬بدون ض‪UU‬ربه‪ ،‬در دم‪UU‬ای بین ‪ 30‬ت‪UU‬ا ‪ 40‬درج‪UU‬ه س‪UU‬انتی‬
‫گراد‪ .‬عصاره تولید اجزای فرار از گیاهان نیاز ب‪UU‬ه اق‪UU‬دامات احتی‪UU‬اطی خاص‪UU‬ی دارد اینها هس‪UU‬تند م‪UU‬ورد‪U‬‬
‫‪.‬بحث قرار گرفت بعد‪ ،‬که در فصل ‪3‬‬
‫میانبرهایی در روش های استخراج وجود دارد که فرد با آنه‪UU‬ا ی‪UU‬اد می گ‪UU‬یرد تم‪UU‬رین‪ .‬ب‪UU‬ه عن‪UU‬وان مث‪UU‬ال‪ ،‬هنگ‪UU‬ام جداس‪UU‬ازی اج‪UU‬زای‬
‫محلول در آب از برگ بافت‪ ،‬لیپیدها باید دقیقا ً در مراحل اولیه برداشته شوند‪ ،‬قبل از تغلیظ‪ ،‬با شستشو عصاره به طور مکرر با نفت‬
‫در واقع زمانی که یک عصاره اتانولی مستقیم غلیظ شود روی چرخشی اواپراتور‪ ،‬تقریبا ً تمام کلروفیل و لیپید در کن‪UU‬اره رس‪UU‬وب می‬
‫کند فالسک‪ ،‬و با مهارت‪ U،‬غلظت را می توان درست به سمت راست برد زمانی ک‪UU‬ه کنس‪UU‬انتره آبی را بت‪UU‬وان ب‪UU‬ا پیپت خ‪UU‬ارج ک‪UU‬رد‪،‬‬
‫تقریبا ً به هم متصل شد به طور کامل رایگان از لیپید ناخالصی ها‬
‫عصاره غلیظ ممکن است کریستال ها را در حالت ایستاده رسوب دهد‪ .‬اگر چنین است‪ ،‬اینها بای‪UU‬د از طری‪UU‬ق فیلتراس‪UU‬یون جم‪UU‬ع‬
‫‪.‬آوری شده و همگنی آنها توسط آن مورد آزمایش قرار گیرد کروماتوگرافی که در چندین حالل ها (دیدن بعد بخش)‬
‫اگر یک ماده واحد وجود دارد‪ ،‬کریستال ها را می توان با دوباره خالص سازی کرد‪ .‬تبلور و سپس مواد برای تجزیه و تحلی‪UU‬ل‬
‫بیشتر در دسترس است‪ .‬که در در بیشتر موارد‪ ،‬مخلوطی از مواد در کریستال ها و آن وجود خواهد داشت سپس الزم اس‪UU‬ت آنه‪UU‬ا‬
‫را دوباره در یک حالل مناسب حل کنیم و جدا کنیم‪ .‬ترکیبات را با کروماتوگرافی ارزیابی کنید‪ .‬بسیاری از ترکیبات نیز ب‪UU‬اقی می‬
‫مانند در مشروب مادر و اینها نیز در معرض کروماتوگرافی قرار می گیرند تقسیم بندی به عن‪UU‬وان ی‪UU‬ک اق‪UU‬دام احتی‪UU‬اطی اس‪UU‬تاندارد در‬
‫برابر از دست دادن مواد‪ ،‬تمرکز عصاره های تراشیده شده باید در یخچال و مقداری تولوئن نگهداری شوند اض‪UU‬افه به جلوگ‪UU‬یری‬
‫کردن قارچی رشد‬
‫هنگام بررسی مشخصات فیتوشیمیایی کامل یک گی‪UU‬اه معین گون‪UU‬ه ه‪UU‬ا‪ ،‬تفکی‪U‬ک‪ U‬عص‪UU‬اره خ‪UU‬ام ب‪UU‬ه منظ‪UU‬ور‬
‫جداسازی مطلوب است طبقات اصلی مواد تش‪UU‬کیل دهن‪UU‬ده از یک‪UU‬دیگر‪ ،‬قب‪UU‬ل از کروم‪UU‬اتوگرافی‪ U‬تحلی‪UU‬ل و‬
‫بررسی‪ U.‬یک روش مبتنی ب‪UU‬ر قط‪UU‬بیت ه‪UU‬ای مختل‪UU‬ف ک‪U‬ه ممکن است ب‪UU‬ه ک‪UU‬ار گرفت‪UU‬ه ش‪UU‬ده است بر یک‬
‫حاوی آلکالوئید گیاه است نشان داد که در شکل‪ .1.1 .‬را‬
 ‫سپتامبر ‪ ‹:›f‬مواد و روش ها‬ ‫‪7‬‬
‫تازه برگها یا گل ها‬
‫همگن کردن برای ‪ 5‬دقیقه که در‬
‫فیلتر ‪ wt)،‬ایکس جلد یا ‪MeOH-HQ t4:1) (10‬‬

‫باقی مانده‬ ‫فیلتر کنید‬

‫استخراج کردن با‬ ‫‪ CI‬درجه ‪ voi î< 40‬تبخیر کنید به ‪1/10‬‬
‫من ایکس ‪EtOAc ،51‬‬ ‫‪ lvi HtSOt‬اسیدی کردن به ‪2‬‬
‫فیلتر‬ ‫ایکس ‪ CHCIt f‬استخراج‪ U‬کردن با‬
‫)‪3‬‬

‫باقی مانده‬ ‫فیلتر کنید‬ ‫استخراج ‪CHCI‬‬ ‫الیه اسیدی آبی‬

‫کردن‬
‫فیبر‪U‬‬ ‫تبخیر‬ ‫خشک‪ ،‬تبخیر شود‬ ‫‪ pH‬اساسی کردن به‬
‫به طور عمده پلی‬ ‫‪ NHtOH،‬با ‪10‬‬
‫ساکارید (برای تحلیل‬ ‫خنثی استخراج کردن نسبتا قطبی عصاره ها‬ ‫استخراج کردن با‬
‫دیدن فصل ‪)7‬‬ ‫)چربی ها‪ ،‬موم ها(‬ ‫ترپنوئیدها و جداگانه‪ ،‬مجزا (‬ ‫‪CHCI MeOH‬‬
‫‪ Trc‬توسط فنولیک های‬ ‫بر سیلیس ‪ TLC‬کامپیوتر یا )‬ ‫دو بار ‪l3t1،‬‬
‫‪ GLc‬یا‬ ‫روشن است سیلیس‬
‫‪l‬فصل ‪Tsee 4‬‬ ‫فصل ها ‪Tsee 2,31‬‬

‫‪CHClt-MeOH‬‬ ‫آبی پایه ای‬

‫استخراج‬ ‫الیه ها‬
‫تبخیر کنید‬
‫خشک‪ ،‬عصاره‬ ‫تبخیر با‬
‫‪MeOH‬‬
‫پایه ای استخراج کردن‬ ‫است ‪ MeOH‬عصاره‬
‫آلکالوئی‪UUUU‬دها ‪Tmost‬‬ ‫قطبی استخراج کردن‬
‫روی س‪UU‬یلیس یا ‪TLC‬‬ ‫دوره دوم‬
‫الک‪UUUUU‬تروفورز می‪UUUUU‬بینم‬ ‫آلکالوئیدها و‬
‫)فصل ‪5‬‬ ‫‪/\/-oxidesl‬‬
‫)می بینم فصل ‪5‬‬

‫شکل ‪ 1.1‬یک روش کلی برای استخراج بافت های تازه گیاهی و تکه تکه کردن به ناهمسان کالس ها با توجه به قطبیت‬

‫مقدار و نوع ترکیبات جدا شده به بخش های مختلف البته از گی‪U‬اهی ب‪U‬ه گی‪U‬اه دیگ‪U‬ر متف‪U‬اوت خواه‪U‬د ب‪U‬ود‪.‬‬
‫همچنین‪ U،‬چنین‪ U‬روشی ممکن‪ U‬است داشته باشد به بودن اص‪UU‬الح ش‪UU‬ده چ‪U‬ه زم‪UU‬انی الغر م‪UU‬واد هس‪UU‬تند زیر‬
‫‪.‬تحقیق و بررسی‪U‬‬

‫مواد و روش ها از جدایش‪ ،‬جدایی ‪1.3‬‬

‫‪1.3.1‬‬ ‫عمومی‬
‫جداس‪UU‬ازی و خ‪UU‬الص س‪UU‬ازی ترکیب‪UU‬ات گی‪UU‬اهی عم‪UU‬دتا ً انج‪UU‬ام می ش‪UU‬ود ب‪UU‬ا اس‪UU‬تفاده از ی‪UU‬ک ی‪UU‬ا دیگ‪UU‬ر ی‪UU‬ا ترکی‪UU‬بی از چه‪UU‬ار تکنی‪UU‬ک‬
‫)‪ (GLC‬مایع گازی کروم‪UU‬اتوگرافی ‪ (TLC)،‬کروماتوگرافی الیه نازک ‪ (PC)،‬کروماتوگرافی‪ :‬کروماتوگرافی کاغذی‬
‫انتخاب تکنیک تا حد زیادی به حاللیت مناس‪UU‬ب بس‪UU‬تگی دارد‪ .‬روابط و نوسانات از ‪ (HPLC).‬و باال کارایی مایع کروماتوگرافی‬
‫را ترکیبات به بودن جدا از هم‪ .‬کامپیوتر است به ویژه‬
‫‪8‬‬ ‫‪ snslysis‬روش از گیاه‬

‫قابل استفاده برای ترکیبات گیاهی محلول در آب‪ ،‬یعنی کربوهیدرات ها‪ ،‬اسیدهای آمینه‪ ،‬بازه‪UU‬ای اس‪UU‬ید نوکلئی‪UU‬ک‪ ،‬اس‪UU‬یدهای آلی و‬
‫‪،‬است را روش از انتخاب برای جدا کردن همه محلول در چربی اجزاء ‪. TLC‬ترکیبات فنلی‬
‫کاربرد اصلی خود را ‪ GLC‬یعنی لیپیدها‪ ،‬استروئیدها‪ ،‬کاروتنوئیدها‪ ،‬کینون های ساده و کلروفیل ها‪ .‬توسط در مقابل‪ ،‬تکنیک سوم‬
‫می یابد‪ .‬ترکیبات کاشی‪ ،‬اسیدهای چرب‪ ،‬مونو و سسکوی ترپن ها‪ ،‬هیدروکربن ها و ترکیب‪UU‬ات گ‪UU‬وگردی ب‪UU‬ا این ح‪UU‬ال‪ vola- ،‬با‬
‫فرار از گیاه جوش باالتر اجزای تشکیل دهنده می توان بودن افزایش یافته است توسط تبدیل کردن آنها به استرها و‪/‬یا تری متیل س‪UU‬یلیل‬
‫نامناسب‪ U‬متناوب‪UU‬ا‪ ،‬اج‪UU‬زای کم‪UU‬تر ‪ GLC‬اترها به طوری که کالس های کمی وجود دارد که به طور کامل هستند برای جداسازی‬
‫آ روش که ت‪U‬رکیب می کند س‪U‬تون به‪U‬ره وری ب‪U‬ا س‪U‬رعت تحلی‪U‬ل عالوه ب‪U‬ر این‪ HPLC، ،‬فرار می توان بودن جدا از هم توسط‬
‫‪ PC‬ممکن است اشاره شود که وجود دارد قابل توجه همپوشانی که در را استفاده کنید از را در باال تکنیک و غالبا آ ک‪UU‬ام‪ -‬ت‪UU‬رکیب‬
‫ممکن است بهترین باشد رویکرد ب‪U‬رای ج‪UU‬دا ک‪UU‬ردن آ خ‪UU‬اص کالس از گی‪UU‬اه ‪ GLC‬و ‪ TLC‬یا ‪ HPLC‬و ‪ TLC، TLC‬و‬
‫‪.‬ترکیب‬
‫همه را در باال تکنیک می توان بودن استفاده شده هر دو بر آ کوچک‪ -‬و آ کالن‬
‫و کامپیوتر‪. ent U‬بر روی الیه های ضخیم جذب انجام می شود ‪، TLC‬مقیاس برای کارهای آماده سازی‬
‫بر ضخیم ورق‪ U‬ها از فیلتر‪ U‬کاغذ‪ .‬برای انزوا بر یک زوج بزرگتر‪ U‬در مقی‪UU‬اس بیش از این‪ ،‬معم‪UU‬والً از‬
‫کروماتوگرافی ستونی‪ U‬همراه با استفاده می شود جمع آوری کسر خودکار این روش ترکیب خ‪UU‬الص را‬
‫به دست می دهد توری ها که در گرم مقادیر‬
‫الکتروفورز است‪ .‬در وهل‪UU‬ه ‪. istry‬یک تکنیک‪ U‬دیگر که کاربرد نسبتا ً گسترده ای در فیتوشیمی‪ U‬دارد‬
‫اول‪ ،‬این تکنیک فقط کاربردی‪ U‬است کابل به ترکیب‪UU‬ات که حمل آ ش‪UU‬ارژ‪ ،‬یع‪UU‬نی آمینو اس‪UU‬یدها‪ ،‬مق‪UU‬داری‬
‫آلکالوئیدها‪ ،‬آمین ها‪ ،‬ارگانیک‪ .‬آلی اس‪UU‬یدها و پروت‪UU‬ئین ها ب‪UU‬ا این ح‪UU‬ال‪ ،‬در عالوه ب‪UU‬ر این‪ ،‬گ‪UU‬واهی می‬
‫توان کالس هایی از ترکیبات خنثی (قندها‪ ،‬فنل ها) ساخت حرکت کردن در میدان الکتریکی ب‪U‬ا تب‪UU‬دیل‪ U‬آنه‪U‬ا‬
‫به مجتمع‪ U‬های فلزی (مثالً با استفاده از سدیم بورات)‪ .‬سارجنت (‪ )1969‬مقدمه ساده ای را ارائ‪UU‬ه ک‪UU‬رده‬
‫‪.‬است الکتروفورتیک تکنیک‬
‫الکتروفورز مویرگی‪ ،‬که در حال حاضر در مد است‪ ،‬در انجام می شود لوله ه‪UU‬ای سیلیس‪U‬ی‪ U‬ذوب ش‪UU‬ده‬
‫با سوراخ بسیار کوچک به طول حدود‪ U‬یک متر‪ .‬ولتاژ باال (‪ 30‬کیل‪UU‬وولت) اعم‪UU‬ال می ش‪UU‬ود و تش‪UU‬خیص‬
‫در انتهای کاتد تمرین می شود‪ .‬را نمونه‪ ،‬اعمال شده در انتهای آند‪ ،‬می تواند در حد یک ن‪UU‬انوگرم‪UV U‬‬
‫باشد‪ ،‬اما غلظت باید نسبتا باال باشد‪ .‬این تکنیک ثابت کرده است ب‪UU‬ه عن‪UU‬وان ی‪UU‬ک اب‪UU‬زار تحلیلی ارزش‪UU‬مند‬
‫برای اکثر کالس های متابولیت ثانویه‪ ،‬ولی بخصوص برای را گی‪U‬اه پلی فن‪U‬ول ها (توم‪U‬اس‪-‬ب‪UU‬اربران‪،‬‬
‫‪)1995.‬‬
‫عالوه بر تکنیک‌هایی که تاکنون ذکر شد‪ ،‬از چند تکنیک دیگ‪UU‬ر ن‪UU‬یز اس‪UU‬تفاده می‌ش‪UU‬ود‪ .‬متح‪UU‬د در تحقیق‪UU‬ات فیتوش‪UU‬یمیایی جداس‪UU‬ازی ب‪UU‬ا‬
‫عصاره مایع‪-‬مایع ساده هنوز در زمینه کاروتنوئید از ارزش خاصی برخوردار است (ب‪UU‬ه فص‪UU‬ل ‪ ،3‬ص ‪ 138‬مراجع‪UU‬ه کنی‪UU‬د)‪ .‬را وس‪UU‬یله‬
‫ای برای استخراج خودکار مایع‪-‬مایع‪ ،‬همانطور که در کریگ گنجانده شده است دستگاه توزی‪UU‬ع ض‪UU‬د جری‪UU‬ان‪ ،‬م‪UU‬دتی اس‪UU‬ت ک‪UU‬ه در‬
‫دسترس بوده است اما زمانی که تکنیک های دیگر شکست می خورند‪ ،‬از آن به عنوان آخرین راه حل استفاده می شود‪ .‬آ دس‪UU‬تگاه‬
‫که )‪ (DCCC‬راحت تر برای مایع‪-‬مایع استخراج توسعه یافته است‪ -‬باز کرد‪ ،‬تماس گرفت قطره ضد جریان کروماتوگرافی‬
 ‫جدایی ‪ ‹:f‬مواد و روش ها‬ ‫‪9‬‬

‫در مقی‪UU‬اس آم‪UU‬اده س‪UU‬ازی عم‪UU‬دتا ً ب‪UU‬رای جداس‪UU‬ازی‪ U‬م‪UU‬واد محل‪UU‬ول در آب ک‪UU‬ار می کن‪UU‬د‪ .‬دانش آم‪UU‬وزان‬
‫اسیدهای کلئیک اغلب ‪ nu-‬جدایش‪ ،‬جدایی از گیاه پروتئین ها و ‪(Hostettmann el aI.، 1986).‬‬
‫به تکنیک های خاصی نیاز دارند که هنوز‪ U‬ذکر نش‪UU‬ده اس‪UU‬ت‪ ،‬مانند فیلتراس‪UU‬یون از طری‪UU‬ق ژل س‪UU‬فادکس‪،‬‬
‫کروماتوگرافی میل ترکیبی و دیفرانسیل اولتراسانتریفیوژ‬
‫ب‪UU‬ه عن‪UU‬وان مث‪UU‬ال رج‪UU‬وع( از آنجایی که در جاهای دیگر در مورد کروماتوگرافی بسیار نوشته شده است‬
‫در اینجا فقط الزم است که جدایی اصلی را مورد بحث قرار دهیم تکنی‪UU‬ک ‪ Heftmann، 1992)،‬کنید به‬
‫هایی که در تحقیقات فیتوشیمیایی‪ U‬به کار می روند و برای دادن الف تعداد کمی منتهی ش‪UU‬دن من‪UU‬ابع به‬
‫دیگر در دسترس متن ها‬

‫‪1.3.2‬‬ ‫کاغذ کروماتوگرافی‬

‫یکی از اصلی‌ترین مزیت‌های رایانه شخص‪UU‬ی‪ ،‬راح‪UU‬تی زی‪UU‬اد در انج‪UU‬ام آن است جداس‪UU‬ازی‪ U‬ب‪UU‬ه س‪UU‬ادگی ب‪UU‬ر‬
‫روی ورق های کاغذ فیلتر‪ ،‬که هر دو ب‪U‬ه عن‪UU‬وان وس‪UU‬یله ای ب‪UU‬رای جداس‪UU‬ازی‪ U‬و ب‪UU‬ه عن‪UU‬وان تکی‪UU‬ه گ‪UU‬اه‪.‬‬
‫مقادیر تعیین شده بر روی کاغذ‪ ،‬به ط‪UU‬وری‪ U‬که ‪ R‬مزیت دیگر این است تکرارپذیری قابل توجهی از‬
‫چنین اندازه گیری ها پارامترهای‪ U‬ارزشمندی هستند برای استفاده در توصیف‪ U‬جدید ترکیبات گی‪UU‬اهی در‬
‫‪، R‬واق‪UU‬ع‪ ،‬ب‪UU‬رای م‪UU‬وادی مانن‪UU‬د آنتوس‪UU‬یانین ه‪UU‬ا‪ ،‬که دیگ‪UU‬ر خ‪UU‬واص ف‪UU‬یزیکی مش‪UU‬خص و مشخص‪U‬ی‪ U‬ندارند‬
‫‪.‬بیشترین است ابزار مهمی برای توصیف و تشخیص‪ U‬رنگدانه های مختلف است (هاربوم‪)1967 ،‬‬
‫کروماتوگرافی روی کاغذ معموالً شامل پارتیشن یا جذب می شود‪ .‬کروماتوگرافی‪ U‬ی‪U‬ونی در پارتیش‪U‬ن‪،‬‬
‫( ترکیبات به صورت تقسیم بندی می شوند‪ U:‬بین یک حالل الکلی تا حد زیادی‪ U‬غیر قابل امتزاج ب‪UU‬ا آب‬
‫بوتانول‪-‬اسید استیک‪-‬آب (‪ ،5 U:1 U:4‬الیه‪، n-‬و اب‪ .‬مخلوط حالل کالسیک )بوتانول‪ n-U‬به عنوان مثال‬
‫در واقع ابداع شد به عنوان وسیله ای از افزایش محتوای‪ U‬آب الیه )‪ BAW‬مخفف به عنوان( باالیی)‬
‫هن‪UU‬وز ب‪U‬ه ط‪UU‬ور گس‪U‬ترده قاب‪UU‬ل ‪، BAW‬بوت‪U‬انول‪ U‬و در نتیج‪UU‬ه بهب‪U‬ود ک‪UU‬اربرد مخل‪UU‬وط حالل در واقع‪n-‬‬
‫اس‪UU‬تفاده است ب‪UU‬ه عن‪UU‬وان ی‪UU‬ک حالل عم‪UU‬ومی ب‪UU‬رای بس‪UU‬یاری از طبق‪UU‬ات ترکیب‪UU‬ات گی‪UU‬اهی‪ .‬در مقاب‪UU‬ل‪،‬‬
‫در حالل ه‪UU‬ای آبی اس‪UU‬ت‪ .‬آب خ‪UU‬الص ی‪UU‬ک حالل ‪ PC‬نیروه‪UU‬ای‪ U‬ج‪UU‬ذب یکی از وی‪UU‬ژگی‪ U‬ه‪UU‬ای اص‪UU‬لی‬
‫کروماتوگرافی همه کاره قابل توجه است می توان بودن استفاده شده به جداگانه‪ ،‬مج‪UU‬زا را پ‪UU‬ورین‬
‫های رایج و پیریمیدین‪ U‬ها و همچنین برای ترکیب‪UU‬ات فنلی و گلیکوزی‪UU‬دهای‪ U‬گی‪UU‬اهی قاب‪UU‬ل اس‪UU‬تفاده است‬
‫‪.‬عمومی‬
‫انتخاب دستگاه برای کامپیوتر‪ U‬بستگی دارد تا حدودی در مقدار فضای آزمایشگاهی موجود‪ U‬برای مثال‬
‫اس‪UU‬تاندارد‪ U‬دارد ‪ .‬ب‪U‬ه ط‪U‬رز‪ TLC U‬افقی ی‪UU‬ا دای‪UU‬ره ای می گ‪UU‬یرد فض‪U‬ای‪ U‬کمی بیش‪UU‬تر از ی‪U‬ک مخ‪U‬زن ‪PC‬‬
‫چشمگیری‪ U‬خوب است وضوح‪ U‬و برای مثال برای جداسازی کاروتنوئیدها‪ U‬استفاده می ش‪UU‬ود‪ .‬در بیش‪UU‬تر‪U‬‬
‫سخنرانی‪ U‬های آزمایشگاهی ‪ ،‬کامپیوتر‪ U‬است انجام بیرون توسط فرود‪ U،‬که در تان‪UU‬ک ها که اراده ج‪UU‬ای‬
‫دادن‪ -‬تاریخ چه مردی اوراق از اندازه ‪ 46‬ایکس ‪ 57‬سانتی متر‪ .‬نزولی کامپیوتر بیشتر است مفید است‬
‫زیرا در صورت تمایل‪ ،‬حالل می تواند به راحتی‪ U‬بیش از حد مورد استفاده ق‪UU‬رار گ‪UU‬یرد‪ .‬این است همچ‪UU‬نین‬
‫دو بعدی جدایی ها ‪ t‬اندکی بیشتر‪ U‬راحت برای‬
‫طیف قابل توجهی از کاغذهای صافی اصالح شده در تجارت موجود است‪ .‬بط‪UU‬ور‪ U‬کلی ب‪UU‬رای دس‪UU‬تیابی‬
‫‪،‬به خاص کروماتوگرافی جدایی ها برای مثال‬
‫‪10‬‬ ‫روش از گیاه تحلیل و بررسی‬

‫خواص قطبی‪ U‬سلولز را می توان با ترکیب سیلیس کاهش داد اسید یا آلومینا وارد کاغذها می شود و آنه‪UU‬ا‬
‫را برای جداسازی مناسب تر می کند لیپیدها مقاالت را نیز می توان در آزمایشگاه اصالح ک‪UU‬رد‪ ،‬ب‪UU‬ه عن‪UU‬وان‬
‫مثال‪ ،‬توسط خیساندن آنها در پارافین یا روغن س‪UU‬یلیکون ب‪UU‬ه منظ‪UU‬ور‪ U‬انج‪UU‬ام "معک‪UU‬وس" کروم‪UU‬اتوگرافی‬
‫فاز‪ ،‬دوباره برای لیپی‪UU‬دها ب‪UU‬رای مقی‪UU‬اس ب‪UU‬زرگ ج‪UU‬دایی ه‪UU‬ا‪ ،‬ض‪UU‬خیم ورق ها فیل‪UU‬تر کروم‪UU‬اتوگرافی کاغ‪UU‬ذ‬
‫موجود‪ U‬است (چه مردی نه ‪ 3‬یا ‪ 3‬میلی متر) و اینها اراده کنار آمدن با چندین‪ U‬میلی گرم از مواد مطابق‬
‫ورق‬
‫تشخیص داده می شوند‪ U‬لکه ها‪ UV-fluorescent ،‬ترکیبات معموالً به صورت رنگی یا ‪ PC،‬در‬
‫پس از واکنش با کروموژنیک‪ U‬معرف‪ ،‬به عنوان اسپری یا به عن‪UU‬وان ی‪U‬ک ش‪U‬یب ب‪U‬رای ورق ه‪U‬ای ب‪UU‬زرگ‪،‬‬
‫فرو بردن معموال راحت تر اما حالل محتوا اسپری باید به منظور تسهیل در خشک شدن سریع اص‪UU‬الح‬
‫شود بن‪U‬ابراین از انتش‪U‬ار در ط‪U‬ول غوط‪U‬ه وری جلوگ‪U‬یری کنی‪U‬د‪ U.‬س‪U‬پس کاغ‪U‬ذ ممکن‪ U‬اس‪U‬ت در آن گ‪U‬رم ش‪U‬ود‬
‫سفارش به توسعه دهد را رنگ ها‬
‫فاصله ای است که یک ترکیب در کروماتوگرافی‪ U‬حرکت می کند نسبت ب‪U‬ه جل‪U‬وی حالل ب‪U‬ا ‪ fi‬مقدار‬
‫اندازه گ‪UU‬یری فاص‪U‬له از را اص‪U‬ل و نسب به را مرکز از را نقطه تولی‪U‬د ش‪U‬ده توسط‪ U‬را م‪U‬اده‪ ،‬و این است‬
‫تقسیم بر فاصله بین مبدا و جلوی حالل (یعنی مسافتی‪ U‬که حالل طی می کن‪UU‬د)‪ .‬این همیش‪UU‬ه ب‪UU‬ه ص‪UU‬ورت‬
‫کسری‪ U‬و دروغ ظ‪U‬اهر می ش‪U‬ود بین ‪ 0.01‬و ‪ .0.99‬ض‪U‬رب این در ‪ 100‬راحت اس‪UU‬ت و اس‪UU‬ب بخ‪UU‬ار است‬
‫گاهی است معرفی‪ (X 100) U‬در جای دیگر‪ ،‬آر ‪ hps (x 100).‬نقل شده است که در این کتاب به عنوان‬
‫‪.‬ارزش ‪ hR،‬شده به مانند را‬
‫مفی‪U‬د ‪، flp‬یک سری از ترکیبات ساختاری مرتبط پوند‪ ،‬مراجعه ب‪UU‬ه ث‪UU‬ابت کروم‪UU‬اتوگرافی دیگر ‪ *IP‬هنگام مقایسه مقادیر‬
‫‪:‬توسط را اصطالح ‪ fl،‬است ارزش‪ .‬این است مربوط به‬

‫داده ها از فالونول ‪ -5‬متیل اترها‪ :‬مقایسه از واقعی ( ‪ R‬جدول ‪1.1‬‬ ‫( ‪ nd R‬فی ( ‪R‬‬
‫‪ ABp‬محاسبه شد از جانب‬
‫”)‪R، (xl00‬‬

‫‪forestnl‬‬ ‫‪50% HOAc‬‬ ‫‪PhOH‬‬ ‫ممنوع‬

‫کردن‬

‫کامپفرول‬ ‫‪62‬‬ ‫‪44‬‬ ‫‪58‬‬ ‫‪91‬‬

‫کوئرستین‬ ‫‪45‬‬ ‫‪31‬‬ ‫‪28‬‬ ‫‪76‬‬
‫میریستین‬ ‫‪29‬‬ ‫‪21‬‬ ‫‪10‬‬ ‫‪41‬‬
‫کامپفرول ‪ -5‬متیل اتر‬
‫واقعی ارزش‬ ‫‪70‬‬ ‫‪43‬‬ ‫‪78‬‬ ‫‪82‬‬
‫ارزش پیش بینی کرد از جانب‬ ‫‪Aflp‬‬ ‫‪70‬‬ ‫‪41‬‬ ‫‪76‬‬ ‫‪89‬‬
‫کوئرستین ‪ -5‬متیل اتر (آزالیتین)‬ ‫‪53‬‬ ‫‪29‬‬ ‫‪42‬‬ ‫‪55‬‬
‫میریستین ‪ -5‬متیل اتر‬ ‫‪37‬‬ ‫‪21‬‬ ‫‪23‬‬ ‫‪27‬‬

‫‪.‬اندازه گیری شده بر چه مردی نه ‪ 1‬کاغذ *‬

 ‫مواد و روش ها از جدایی‬ ‫‪11‬‬

‫در ی‪UU‬ک س‪UU‬ری همول‪UU‬وگ معم‪UU‬وال ث‪UU‬ابت ‪ ARE‬برای ارتباط با تحرک کروماتوگرافی ارزشمند‪ U‬است به ساختار شیمیایی‪ ،‬از آنجایی‪ U‬که مقادیر‬
‫برای تعداد هیدروکسیل ثابت هستند و جایگزین های گلیکوزیل موجود در مولک‪UU‬ول ‪، ARps‬هستند‪ .‬بنابراین‪ ،‬با ترکیبات فالونوئیدی‬
‫استفاده ش‪UU‬ود ناش‪UU‬ناخته عض‪UU‬و ی‪UU‬ک س‪UU‬ری ‪ an‬مقدار ‪ fi،‬این روش می تواند برای محاسبه ‪).‬و وستال‪(Bate-Smith 1956 ،‬‬
‫ترکیبات‪ ،‬به منظور تسهیل جستجو برای ترکیب خاص در عصاره های گیاهی‪ .‬چنین رویه ای به عنوان مثال‪ ،‬در توص‪UU‬یف ی‪UU‬ک متی‪UU‬ل‬
‫پیش‌بینی‌شده و واقعی بسیار خوب بودند توافق (جدول ‪( )1.1‬هربرن‪ fi ،‬که در آن مقادیر ‪ kaempferol،‬اتر جدید استفاده شد‬
‫‪)1969.‬‬
‫)‪ Peereboom (1971‬در ادبیات گسترده در رایانه شخصی‪ ،‬یک حس‪U‬اب مق‪U‬دماتی مفی‪U‬د نوش‪U‬ته ش‪U‬ده است ب‪U‬رای ت‪U‬ازه ک‪U‬ار‬
‫هستند‪ .‬لینک ها )‪ Lederer (1957‬و ‪ Lederer‬داده ها ‪ fl،‬است‪ .‬کتاب‌هایی که در رایانه شخصی هستند به عنوان منابع‬
‫‪ )1959(.‬و شرما و تسوایگ (‪)1971‬‬

‫‪1.3.3‬‬ ‫الغر الیه کروماتوگرافی‬

‫در مقایسه با به کامپیوتر شامل تط‪UU‬بیق پ‪UU‬ذیری‪ ،‬س‪UU‬رعت و حساسیت تط‪U‬بیق پ‪UU‬ذیری ب‪UU‬ه دلی‪U‬ل این واقعیت اس‪UU‬ت ک‪U‬ه ‪ TLC‬مزایای ویژه‬
‫تعدادی از متفاوت است جاذب ها عالوه بر سلولز ممکن است روی یک صفحه شیشه ای یا موارد دیگ‪UU‬ر پخش ش‪UU‬وند پش‪U‬تیبانی و ب‪UU‬رای‬
‫کروماتوگرافی به کار گرفته شد‪ .‬اگر چه ژل س‪UU‬یلیکا بیش‪UU‬تر است به ط‪UU‬ور گس‪UU‬ترده اس‪UU‬تفاده می ش‪U‬ود‪ ،‬الی‪UU‬ه ه‪U‬ا ممکن اس‪UU‬ت از اکس‪UU‬ید‬
‫آلومینیوم‪ ،‬سلیت‪ ،‬کلسیم ساخته شوند‪ .‬سیوم هیدروکسید‪ ،‬رزین تبادل یونی‪ ،‬فسفات منیزیم‪ ،‬پلی آمی‪UU‬د‪ ،‬س‪UU‬فادکس‪ ،‬پلی وینی‪UU‬ل پیرولی‪UU‬دون‪،‬‬
‫به دلیل بیشتر بودن آن است ماهیت فشرده ج‪U‬اذب هنگ‪UU‬امی ک‪UU‬ه روی ‪ TLC‬سلولز و از مخلوط دو یا بیشتر از مواد فوق سرعت بیشتر‬
‫به گون‪UU‬ه ای اس‪UU‬ت ک‪UU‬ه ‪ TLC‬صفحه پخش می شود و یک مزیت است زمانی که کار کردن با ترکیبات حس‪UU‬اس در نه‪UU‬ایت‪ ،‬حساس‪UU‬یت‬
‫‪.‬از مواد می تواند باشد به دست آورد اگر الزم است ‪ qg‬جدایی ها در مقادیر کمتر از‬
‫کار زیاد پخش بود صفحات شیش‪UU‬ه ای ب‪UU‬ا ج‪UU‬اذب‪ ،‬ک‪UU‬ار ت‪UU‬ا ح‪UU‬دودی ب‪UU‬ا مقدم‪UU‬ه بع‪UU‬دی آس‪UU‬ان شد مجرای ‪ TLC،‬یکی از معایب اولیه‬
‫دستگاه های پخش خودکار‪ .‬با این وجود‪ ،‬حتی با وجود اینها‪ ،‬اقدامات احتیاطی خاصی الزم است‪ .‬صفحات شیشه ای باید با احتیاط‬
‫باشند برای از بین بردن چربی با استون تمیز می شود‪ .‬سپس دوغاب سیلیکاژل (یا جاذب دیگر ) در آب باید برای مدت معینی ب‪UU‬ه‬
‫شدت تکان داده شود فاصله زمانی (مثالً دهه ‪ )90‬قبل از انتش‪U‬ار‪ .‬بس‪U‬ته ب‪U‬ه ان‪U‬دازه ذرات ج‪U‬اذب‪ ،‬همی هی‪U‬درات س‪U‬ولفات کلس‪U‬یم (‪)%15‬‬
‫ممکن است الزم باشد به آن اضافه شود کمک بستن را جاذب بر به را شیشه‪ .‬سرانجام‪ ،‬بشقاب ها بعد از در حال گسترش‬
‫در ‪ 110 - 0 10‬ا‪U‬ی‪ U‬سی ‪ ove n‬گرمایش که در یک ‪ b y‬فعال شد _ ‪ n‬ب ه هوا خشک کردن د و ‪ t o‬دارند‬
‫مثال نی‪UU‬ترات نق‪UU‬ره( به مدت ‪ 30‬دقیقه در برخی از جداسازی ها‪ ،‬اصالح مناسب سودمند است‪ .‬جاذب را با افزودن یک نم‪UU‬ک مع‪UU‬دنی‬
‫و این بهترین کار زمانی است که صفحه در حال پخش شدن است‪ .‬دلی‪UU‬ل دیگ‪UU‬ر اس‪UU‬تفاده از )‪ arg entat ion TLC‬برای‬
‫ص‪UU‬فحات پوش‪UU‬ش داده ش‪UU‬ده در آزمایش‪UU‬گاه این اس‪UU‬ت که رط‪UU‬وبت س‪UU‬یلیکاژل را می ت‪UU‬وان کن‪UU‬ترل ک‪UU‬رد‪ ،‬ع‪UU‬املی ک‪UU‬ه وج‪UU‬ود دارد‬
‫برای مقداری جدایی ها ‪CPitiCal‬‬
‫‪12‬‬ ‫روش از گیاه تحلیل‪ U‬و بررسی‬

‫با این حال‪ ،‬امروزه استفاده از صفحات از پیش روکش شده تجاری معمول است‪ .‬در اکثر کاره‪UU‬ا تولی‪UU‬د‬
‫اساسی است‪ ،‬زیرا اینها یکنواخت تر هستند و ارائ‪UU‬ه می دهند نت‪UU‬ایج تکرارپ‪UU‬ذیرتر طی‪UU‬ف وس‪UU‬یعی‪ U‬از این‬
‫صفحات موجود‪ U‬است ناهمسان جاذب ها‪ ،‬پوشش داده شده بر شیشه‪ ،‬آلومینیوم ورق ها یا پالستیک اینها‬
‫ممکن است با یا بدون نش‪UU‬انگر فلورس‪UU‬نت‪ ،‬اض‪UU‬افه ک‪UU‬ردن آن باشد امک‪UU‬ان تش‪UU‬خیص تم‪UU‬ام ترکیب‪UU‬اتی ک‪UU‬ه‬
‫با طول موج ‪ 254‬لبه مشاهده می ش‪UU‬ود‪ UV .‬فلورسانس‪ U‬را خاموش می کنند‪ ،‬هنگامی که صفحه در نور‬
‫آن است که با همان ریزذرات ریز پوش‪UU‬ش داده ش‪UU‬ده است س‪U‬یلیس ک‪U‬ه در ‪ TLC‬بیشترین نوع‪ U‬اخیر صفحه‬
‫و آی ‪ HPTLC‬استفاده می شود‪ U.‬چنین کروماتوگرافی است نامگذاری‪ U‬شده است ‪ HPLC‬ستون های‬
‫‪.‬تی معموال می دهد بیشتر کارآمد و سریع جدایی ها نسبت به‪ .‬تا بر مرسوم سیلیس الیه های‬
‫و در داخل استفاده شده است به طور کلی‪ ،‬عرض جغرافیایی بیشتری ‪ PC‬نسبت به ‪ TLC‬طیف وسیع تری از حالل ها برای‬
‫در نسبت های دقیق حل های مختلف وجود دارد‪ .‬دریچه های مورد استفاده در سیستم حالل ب‪ ،‬مقادیر به طور قابل ت‪U‬وجهی کم‪U‬تر‬
‫بازتولید می شوند غیر از روی کاغذ است و بنابراین گنجاندن یک یا چند مورد ضروری است ترکیب‪UU‬ات مرج‪UU‬ع ب‪UU‬ه عن‪UU‬وان نش‪UU‬انگر‬
‫را انجام می دهم ‪ ،‬اما این ی‪U‬ک فرآین‪U‬د بس‪U‬یار ‪ TLC‬من ‪ R R‬امکان استانداردسازی وجود دارد شرایط برای اندازه گیری دقیق‬
‫معموالً از طریق صعود انجام می شود‪ ،‬در مخزنی که با کاغذ روکش شده است به طوری که اتمسفر داخل ‪. TLC‬خسته کننده است‬
‫افقی به کار گرفته می شود‪ ،‬چه زمانی که صفحات باید با حالل بیش از حد پ‪UU‬ر ش‪UU‬وند و چ‪UU‬ه ‪. TLC‬با فاز حالل اشباع شده است‬
‫است استفاده شده که در ترکیبی با الکتروفورز ‪ TLC‬زمانی‬
‫معموال توسط با اسپری کردن‪ ،‬مساحت کوچکتر صفحه (‪ 20×20‬سانتی متر) این ام‪UU‬ر ‪ TLC‬تشخیص ترکیبات روی صفحات‬
‫را نسبتا ً مناسب می کند رویه ساده یک مزیت نسبت به کامپیوتر این است که صفحات شیشه ای ممکن است اسپری شده ب‪U‬ا ک‪U‬انکس‬
‫مفید است تشخیص معرف برای استروئیدها و لیپیدها "‪H SO‬‬
‫به جای نازک انج‪UU‬ام می ش‪U‬ود (‪ 0.25-0.10‬میلی م‪UU‬تر) الی‪UU‬ه ه‪UU‬ای از )‪ lmm‬تا( آماده سازی با استفاده از ضخامت ‪TLC‬‬
‫در را ‪. ent‬جاذب ساخته بشقاب ها هستند در دسترس برای این‪ .‬اجزای جدا شده با خراش دادن مواد جاذب بازیابی می شوند‬
‫مناسب‪ U‬مکان ها بر را توسعه یافته بشقاب‪ ،‬در حال شستشو را پودر با حاللی مانند اتر و در نهایت سانتریفیوژ برای حذف جاذب‬
‫چنین‪ U‬است را استحکام ‪ -‬قدرت از را جاذب الیه های بر شیشه که آی تی است ممکن است به‬
‫به طور مکرر یک صفحه با یک یا چند سیستم حالل مختلف ایجاد کنید‪ ،‬خشک ک‪UU‬ردن ص‪UU‬فحه در بین‬
‫ابداع شده توسط ون س‪UU‬ومر (‪ ،)1969‬می توان‪UU‬د م‪UU‬ورد ‪ TLC،‬توسعه‪ .‬متناوبا‪ ،‬یک مضرب سیستم حذف‬
‫استفاده قرار گیرد‪ .‬این شامل بریدن یک مستطیل بلن‪UU‬د است ص‪UU‬فحه شیش‪UU‬ه ای پخش‪ U‬ش‪UU‬ده ب‪UU‬ا ج‪UU‬اذب با ی‪UU‬ک‬
‫برش شیشه در مراحل مناسب در یک جداسازی پیچیده و حتی اسپری جاذب تازه روی صفحه در بین‬
‫ذک‪UU‬ر ‪ TLC‬در کتاب ها ش‪UU‬رح داده ش‪UU‬ده است بر ‪ TLC‬جداسازی‪ U‬ها‪ .‬زیاد سایر اصالحات رویه اصلی‬
‫شده زیر‬
‫بسیار‪ U‬زیاد است‪ .‬جامع ترین کتاب در را موضوع است شاید که ویرایش ش‪UU‬ده توسط ‪ TLC‬ادبیات‬
‫استال (‪ .)1969‬آ ساده معرفی است را کتاب توسط راستگو‪ .)1963( U‬دیگر مهم مشارکت ها هستند را‬
‫آثار از‬
 ‫مواد و روش ها از جدایی‬ ‫‪13‬‬

‫ب‪UU‬ا ص‪UU‬فحات رنگی ‪ TLC،‬بابیت (‪ ،)1963‬کرشنر (‪ )1978‬و تاچ استون و دابینز (‪ .)1978‬آ اطلس‬
‫‪.‬از جداسازی الیه های نازک فراوان‪ ،‬بوده است تولید شده توسط‪ U‬واگنر‪ U‬و بالد (‪)1996‬‬

‫گاز مایع کروماتوگرافی ‪1.3.4‬‬

‫الزم ‪ TLC‬یا ‪ PC‬پیچیده است و گران‪ ،‬نسبت ف‪UU‬امیلی ب‪U‬ه آنچ‪U‬ه ب‪UU‬رای ‪ GLC‬دستگاه ضروری برای‬
‫دیگر وجود‪ U‬ن‪UU‬دارد ج پیچی‪UU‬ده نس‪UU‬بت ب‪UU‬ه‪ .‬تا دیگر کروم‪UU‬اتوگرافی‪، GLC U‬است‪ .‬با این حال‪ ،‬در اصل‬
‫رویه ها‬
‫‪:‬دارد چهار اصلی اجزاء مانند به شرح زیر است ‪ GLC‬دستگاه برای‬
‫)‪(1‬‬ ‫معموالً از فلز ساخته شده به شکل یک سیم پیچ برای حفظ )‪ lmm‬به عنوان مثال ‪ 3‬متر( ستون یک لوله باریک بلند است‬
‫فض‪UU‬ا‪ .‬این ب‪UU‬ا ی‪UU‬ک بس‪UU‬ته بن‪UU‬دی ش‪UU‬ده است ث‪UU‬ابت ف‪UU‬از (ب‪UU‬ه عن‪UU‬وان مث‪UU‬ال ‪ ٪15-5‬س‪UU‬یلیکون روغن) بر یک بی اثر پ‪UU‬ودر‬
‫(کروموسورب دبلیو‪ ،‬سلیت و غیره)‪ .‬بسته بندی ضروری نیست و جایگزین به طور مستقیم از یک ستون سیلیسی باز اس‪U‬تفاده‬
‫‪ GLC).‬مویرگی( می شود که در آن فاز ساکن است گسترش مانند آ فیلم بر را داخل سطح‬
‫)‪(2‬‬ ‫برای گرم کردن تدریجی ستون از ‪ 50‬به ‪ 350‬درجه سانتی گراد با نرخ استاندارد و برای حفظ دما در ب‪UU‬االتر ‪Cenfer‬‬
‫در صورت لزوم محدود کنید دمای ورودی ستون جداگان‪UU‬ه است کن‪U‬ترل می ش‪U‬ود بن‪U‬ابراین که را نمونه می ت‪U‬وان ب‪U‬ودن ب‪U‬ه‬
‫طور سریع بخار شده مانند این است گذشت‪ U‬بر به را س‪UU‬تون را نمونه منح‪UU‬ل شد ک‪UU‬ه در اتر یا هگ‪UU‬زان است توس‪UU‬ط س‪UU‬رنگ‬
‫زیرپوستی از طریق یک الستیک به درگاه ورودی تزریق می شود سپتوم‬
‫)‪(3‬‬ ‫از یک گاز حامل بی اثر مانند نیتروژن یا آرگون تشکیل شده است‪ .‬جداسازی ترکیبات روی ستون به عب‪UU‬ور ‪ Gris‬جریان‬
‫‪.‬از آن بستگی دارد گاز از طریق در آ کنترل می شود نرخ‬
‫)‪(4‬‬ ‫است مورد نیاز است به اندازه گرفتن را ترکیبات مانند آنها هستند ‪ dn›ice‬آ تشخیص‬
‫ستون را جارو‪ U‬کرد تشخیص اغلب بر اساس هر کدام است یونیزاسیون شعله ی‪UU‬ا ج‪UU‬ذب الک‪UU‬ترون‬
‫روش سابق مستلزم‪ U‬گاز هیدروژن ب‪UU‬ه مخل‪UU‬وط گ‪UU‬از اض‪UU‬افه ش‪UU‬ود و در آن بس‪UU‬وزد آشکارساز واقعی‪U‬‬
‫دستگاه تشخیص به یک پتانسیومتر متصل است ضبط کننده‪ ،‬که نتایج جداس‪UU‬ازی را ب‪UU‬ه ص‪UU‬ورت‪U‬‬
‫‪.‬مجموعه ای از قله ها از متفاوت است شدت (دیدن شکل‪)1.2 .‬‬
‫را می توان بر حسب حجم نگهداری آن بیان کرد‪ ،‬که حجم گاز حامل مورد نیاز ب‪UU‬رای ‪ GLC‬نتایج‬
‫که زمان مورد‪ U‬نیاز ب‪U‬رای آن "‪ A‬یا بر حسب زمان نگهداری‪ n U‬شستشوی یک جزء از آن است ستون‬
‫است شستشوی‪ U‬نمونه این پارامترها‪ U‬تقریبا ً همیشه در بیان می شوند اصطالحات مربوط‪ U‬به ی‪UU‬ک ت‪UU‬رکیب‪U‬‬
‫که ممکن است باشد به عصاره نمونه‪ U‬اضافه می شود یا می توان‪UU‬د ‪ AA)،‬یا ‪ AAA‬به عنوان( استاندارد‬
‫‪.‬به شکل حالل باشد استفاده شده برای حل شدن که نمونه‬
‫ماهیت فاز ساکن هستند ستون و را درجه حرارت از عمل‪ .‬اینها هس‪U‬تند متن‪UU‬وع‪ U‬ب‪U‬ا ‪ GLC‬اصلی در‬
‫توجه‪ U‬به‬
‫را قطبیت‬ ‫و نوسان از را ترکیبات بودن جدا از هم‪ .‬زیاد‬
‫‪14‬‬ ‫روش از گیاه تحلیل و بررسی‬

‫‪Peak‬‬ ‫‪6‬‬

‫‪43‬‬

‫‪70‬‬ ‫‪60‬‬ ‫‪50‬‬ ‫‪40‬‬ ‫‪30‬‬ ‫‪20‬‬

‫)حفظ زمان امین‬

‫از جداس‪UUU‬ازی مخل‪UUU‬وط اس‪UUU‬ترول اس‪UUU‬تات موج‪UUU‬ود در ج‪UUU‬و دو سر دانه کلی‪UUU‬د‪ ،1 :‬کلس‪UUU‬ترول؛ ‪ GLC ،2‬ش‪UUU‬کل ‪ 1.2‬اثر‬
‫براسیکاسترول؛ ‪ ،3‬کامپسترول؛ ‪ ،4‬استیگماسترول؛‬
‫ث‪UU‬ابت ف‪UU‬از ‪ %1‬است س‪UU‬یکلوهگزان مت‪UU‬انول ‪، A 7 -avenasterol.‬و ‪، A 5 -avenasterol; 7‬سیتوس‪UU‬ترول؛ ‪5، 6‬‬
‫‪.‬سوکسینات ‪ %2 +‬پلی وینیل پیرولیدون روی گاز اسید شسته کروم پ ‪( 225‬از جانب شوالیه ها‪)1965 ،‬‬

‫دسته هایی از مواد به طور معمول به مشتقات‪ U‬تبدیل می شوند (به ویژه به تری متیل س‪UU‬یلیل اتره‪UU‬ا) قب‪UU‬ل از ق‪UU‬رار گ‪UU‬رفتن در مع‪UU‬رض‬
‫‪.‬زیرا این امکان را به آنها می دهد جدایش‪ ،‬جدایی در آ پایین تر درجه حرارت ‪GLC،‬‬
‫داده های کمی و کیفی را در مورد گیاهان فرعی ارائه می دهد‪ .‬مواضع‪ ،‬از آنجایی که اندازه گیری های منطقه زیر ‪GLC‬‬
‫به طور مستقیم با غلظت های مختلف مرتبط است‪ .‬اجزاء را در مخلوط اصلی ق‪U‬رار )شکل ‪ GLC (1.2‬قله نشان داده شده در اثر‬
‫دهید‪ .‬دو کلی وجود دارد فرمول ها برای اندازه گیری اینها مناطق‪( :‬ن) اوج ارتفاع ایکس اوج عرض در نیم را ارتفاع‬
‫از مساحت قله (این فقط برای قله های متقارن صدق می کند)‪ ،‬و (ب) مساحت قله معادل مثلثی‪= 94٪ U‬‬
‫است که با رسم مماس ایجاد می شود از طریق را نکته ها از عطف اوج مناطق‪ U‬می توان بودن مشخص‬
‫خودکار با صدا‪ ،‬به عنوان مثال توسط‪ U‬استفاده کنید از یک الکترونیکی یکپارچه ساز‬
‫را می توان به گونه ای تنظیم کرد که جدا شود اجزاء بیشتر در معرض تجزیه و تحلیل طیفی یا دیگ‪UU‬ر ق‪UU‬رار ‪ GLC‬دستگاه‬
‫است بطور خودکار مرتبط به ج‪U‬رم طی‪U‬ف س‪U‬نجی (ام‌اس) و را دس‪U‬تگاه ترکی‪U‬بی ‪، GLC‬می گیرند‪ .‬رایگان ترین به طور مرتب‬
‫در سال های اخیر به عنوان یکی از دستگاه ها ظهور کرده است اکثر مهم از همه تکنیک برای فیتوشیمیایی تحلیل ‪GC-MS‬‬
‫‪.‬و بررسی‬
‫وج‪UU‬ود دارد‪ ،‬تع‪UU‬داد کمی از آنه‪UU‬ا این ک‪UU‬ار را ک‪UU‬رده اند ب‪UU‬ا در نظ‪UU‬ر ‪ GLC‬اگرچه کتاب ها و بررسی های متعددی در م‪UU‬ورد‬
‫گرفتن مخاطبان فیتوشیمیایی نوشته شده است‪ .‬یک معرفی مفید ‪ -‬توری متن‪ ،‬از جانب را کاربردی نقطه از چشم ان‪UU‬داز‪ ،‬است که از‬
‫سیمپسون (‪ .)1970‬آ متن‬
 ‫مواد و روش ها از جدایی‬ ‫‪15‬‬

‫و استورز (‪ GLC )1962‬به طور خاص با کاربردهای بیوشیمیایی ‪d ealing‬‬ ‫‪.‬است که از برچفیلد‬

‫‪1.3.5‬‬ ‫‪ IHPLCI‬باال کارایی مایع کروماتوگرافی‬

‫‪H PLC‬‬ ‫است داده ه‪UU‬ای کمی و کیفی در ی‪U‬ک عملی‪UU‬ات واح‪U‬د‪ .‬در آن ‪ GLC‬از نظر حساسیت و توانایی آن در ارائه هر دو مشابه‬
‫تفاوت دارد فاز ثابت متصل به یک پلیمر‪ U‬متخلخل‪ U‬در یک سوراخ باریک نگه داشته می شود ستون فوالد ضد زنگ و فاز متحرک م‪UU‬ایع ب‪UU‬ا‬
‫عم‪UU‬دتا ً ب‪UU‬ه این دلی‪UU‬ل ک‪UU‬ه ی‪UU‬ک سیس‪UU‬تم پمپ‪UU‬اژ ‪ GLC،‬گران ت‪UU‬ر است از ‪ HPLC‬فشار وارد می شود تحت فشار قابل توجهی دستگاه‬
‫اتصاالت باید به صورت پیچی متصل شوند ب‪UU‬رای‪ U‬مق‪UU‬اومت در براب‪UU‬ر فش‪UU‬ارهای موج‪UU‬ود ف‪U‬از متح‪U‬رک ی‪U‬ک ‪ c‬مناسب مورد نیاز است و همه‬
‫یا ممکن است به طور مداوم تغی‪UU‬یر کند در آن )جدایی ایزوکراتیک( ‪ c instant‬مخلوط حالل قابل اختالط است که یا باقی می ماند‬
‫نسبت‪ ،‬با گنجاندن یک محفظه اختالط در تنظیم (شیب شستشو)‪ .‬ترکیبات به عنوان شستشو از س‪U‬تون توسط اب‪U‬زاری از ی‪U‬ک آشکارس‪U‬از‪،‬‬
‫که معموال در اشعه ماوراء بنفش اندازه گیری می شود‪ .‬یک محاسبات ممکن است انتگرال‌کننده اضافه شود ت‪U‬ا داده‌ه‪U‬ا را در زم‪U‬ان ظه‪U‬ور و‬
‫کل مدیریت کند عمل قابل کنترل است از طریق آ ریزپردازنده‬
‫به طور معمول در دمای محیط عمل می کند‪ ،‬به طوری که ‪ dure‬این است که روش قبلی ‪ GLC‬و ‪ HPLC‬تفاوت عمده بین‬
‫ممکن است ‪ HPLC‬ترکیبات قرار نمی گیرند به امکان حرارتی تنظیم مجدد در طول جدایش‪ ،‬جدایی‪ .‬با این حال‪ ،‬کنترل دمای ستون‬
‫باشد سودمند برای جداسازی بحرانی به طوری که ترموستاتیک کنترل می شود ژاکت ممکن است مورد نیاز باشد‪ .‬ستون‪ ،‬ک‪UU‬ه معم‪UU‬وال ب‪U‬ا‬
‫بسیار بسته بندی شده است کم اهمیت کروی ذرات از سیلیس پوشش داده شده یا چسبانده شده با ثابت فاز‪ ،‬به ویژه نس‪UU‬بت ب‪UU‬ه مس‪UU‬مومیت ب‪UU‬ا‬
‫ناخالصی حساس است‪ ،‬به طوری که ضروری است عصاره های گیاهی را قبل از تزریق در سر‪ ،‬صاف کنید ستون‬
‫عمدتاً برای آن دسته از ترکیبات استفاده می شود که غیر فرار‪ ،‬به عنوان مثال ترپنوئیدهای باالتر‪ ،‬فن‪UU‬ول ه‪UU‬ا از هم‪UU‬ه ن‪UU‬وع‪HPLC ،‬‬
‫آلکالوئیدها‪ ،‬لیپیدها و قندها بهترین عملکرد را برای ترکیباتی دارد که می توان آنها را در دستگاه فوق العاده تشخیص داد‪ .‬نواحی بنفش یا‬
‫نشان داده شده است در شکل ‪ .1.3‬برای‪ U‬قندها‪ ،‬که نشان نمی دهند جذب ‪ HPLC‬توسط ‪ ds‬مرئی طیف نمونه ای از جداسازی فالونوی‬
‫من‪ ،‬ممکن است برای‪ U‬استفاده از انکسار آشکارساز شاخص‪ ،‬اما این است آ کمتر حس‪U‬اس روش‪ .‬پروت‪U‬ئین ها دارند ب‪U‬وده ج‪U‬دا از ‪UV‬‬
‫بر ‪ HPLC‬هم توسط‬
‫از اصالح شده سفادکس‪ ،‬سیلیس ژل ها یا یون مبدل ها ‪ ns‬ستون‬
‫بسیاری از انواع از تولید ‪ dfld‬مدرن‪ ،‬از ستون های از پیش بسته بندی شده استفاده می شود ‪ HPLC‬در اکثر جداسازی های‬
‫کنندگان در دسترس هستند‪ .‬با این حال‪ ،‬این است انجام اکثر جداسازی ها با اس‪UU‬تفاده از میک‪UU‬رو متخلخ‪U‬ل س‪U‬یلیس امک‪UU‬ان پ‪U‬ذیر است‬
‫پیوند خورده است ستون فاز (برای‪ U‬ترکیبات قطبی) (همیلتون و سیول‪ C,$ .)1982 ،‬ستون ذرات (برای ترکیبات غیر قطبی) یا فاز معکوس‬
‫‪.‬یکی جزئیات عملی نهایی نیاز به ذکر دارد‪ .‬حالل ها باید فوق خالص باشند و نیاز به بودن گاز زدایی شده قبل از استفاده کنید‬
‫‪ t6‬روش های‬ ‫از گیاهان تحلیل و بررسی‬

‫درست است ‪C.‬‬

‫سی‪ .‬برهنه‬

‫‪20 •--‬‬

‫‪30‬‬ ‫•"‬ ‫‪30‬‬

‫‪*Sy3G‬‬
‫‪G‬م ‪3/‬‬ ‫‪'،‬‬
‫‪40‬‬ ‫‪40‬‬

‫‪50‬‬
‫‪%‬‬

‫‪La3G‬‬ ‫•*‬ ‫آ‬ ‫‪La3GS 3G‬‬

‫‪60‬‬ ‫•‬ ‫‪60‬‬
‫‪IV •¿3G‬‬

‫‪70‬‬ ‫‪70‬‬

‫‪80‬‬ ‫‪80‬‬

‫‪0‬‬ ‫‪2‬‬ ‫‪4‬‬ ‫‪6‬‬ ‫‪8 10 12‬‬ ‫‪14 16 18‬‬ ‫‪0‬‬ ‫‪2‬‬ ‫‪4‬‬ ‫‪6‬‬ ‫‪8 10 12 14‬‬ ‫‪16 18‬‬
‫)دقیقه(‬ ‫‪Tminl‬‬

‫که در آن ترکیبات یکسان اما در مقادیر متفاوت وجود ‪ Chondropetulum،‬از فالونوئیدهای دو گونه ‪ HPLC‬شکل ‪ 1.3‬آثار‬
‫الری سیترین = ‪ La3G‬میریستین ‪-3‬گاالکتوزید؛ = ‪ B، C. nudum; My3G‬رکتوم‪ ،‬گونه ‪ A، C.‬دارد‪ .‬کلید‪ :‬گونه‬
‫‪ Spherisorb‬جداس‪UU‬ازی در ‪-dig1ycoside.‬سیرنجتین ‪-3‬گاالکتوزید؛ قله چه‪UU‬ارم = س‪UU‬رنگتین ‪ -3 Sy3G = 3‬گاالکتوزید؛‬
‫و )‪ MeOH-HCO-HOAc (1 :18:1‬شستش‪UU‬وی گرادی‪UU‬ان با ‪)،‬میلی م‪UU‬تر ‪ 25 X 4.6‬س‪UU‬انتی م‪UU‬تر( س‪UU‬تون ‪5qm C‬‬
‫و تشخیص در )‪MeOH-HCO-HOAc (18: 1 :1‬‬
‫نانومتر ‪365‬‬

‫آخرین تکنیک کروم‪UU‬اتوگرافی‪ U‬اس‪UU‬ت ک‪UU‬ه ب‪UU‬ه ف‪UU‬یزیولوژی اض‪UU‬افه ش‪UU‬ده اس‪UU‬ت‪ .‬اس‪UU‬لحه خان‪UU‬ه ‪HPLC‬‬
‫توشیمیدان جدا از هزینه های دستگاه و حالل ه‪UU‬ا‪ ،‬مهم ت‪UU‬رین و هم‪UU‬ه ک‪UU‬اره ت‪UU‬رین روش گیاه‪UU‬ان کمی است‬
‫تحلیل‪ U‬و بررسی ولی آی تی دارد هنوز به ثابت كردن خود برای جدایی ها بر آ آماده سازی مقیاس‬

‫‪1.4‬‬ ‫مواد و روش ها از شناسایی‬

‫‪1.4.1‬‬ ‫عمومی‬

‫در شناسایی یک ت‪UU‬رکیب گی‪UU‬اهی‪ ،‬پس از جداس‪UU‬ازی آن و خ‪UU‬الص ش‪UU‬ده‪ ،‬آن است الزم است اولین به تع‪UU‬یین‬
‫کنید‪ U‬را کالس از ترکیب و سپس به پیدا کردن بیرون‪U‬‬
 ‫مواد و روش ها از شناسایی‬ ‫‪17‬‬

‫از قبل با دقت بررسی شده است ‪ ،‬یعنی باید ب‪UU‬ه عن‪UU‬وان ی‪U‬ک نقط‪UU‬ه در داخ‪U‬ل ‪ c‬کدام ماده خاص در آن کالس است‪ .‬همگنی آن باید باشد‬
‫‪ R‬و‪/‬یا رایانه شخصی‪ .‬کالس ترکیب معموالً واضح است از پاسخ آن به تست ه‪UU‬ای رن‪UU‬گ‪ ،‬حاللیت آن و ‪ TLC‬حرکت کند سیستم های‬
‫آزمایش‌های بیوشیمیایی نیز ممکن است ارزشمند باشند‪ :‬یک گلوکزید‪ U‬می توان تایی‪U‬د ‪ sp ectral‬آن ویژگی‪ U‬های ‪ UV‬خواص و‬
‫شود توسط هیدرولیز با §‪-‬گلوکوزیداز‪ ،‬از یک گلیکوزید روغن خردل با هی‪UU‬درولیز ب‪UU‬ا میروزین‪UU‬از و غ‪UU‬یره‪ .‬ب‪UU‬رای رشد تنظیم کنن‪UU‬ده‪ ،‬آ‬
‫‪.‬سنجش زیستی است یک ضروری است بخش از شناسایی‬
‫شناسایی کامل در کالس به اندازه گیری سایرین بستگی دارد خواص و سپس مقایسه این داده ها ب‪UU‬ا داده ه‪UU‬ای موج‪UU‬ود در ادبی‪UU‬ات‪.‬‬
‫فعال ‪ y‬برای نوری( چرخش ‪ optica l‬این خواص شامل ذوب شدن است نقطه (برای مواد جامد)‪ ،‬جوشیدن نقطه (برای مایعات)‬
‫ماده گیاهی ‪ a‬با این حال‪ ،‬به همان اندازه آموزنده داده ها در مورد ‪).‬تحت شرایط استاندارد( ‪ !! ! t‬من ‪ o r‬و فی ) ترکیبات‬
‫)‪ (NMR‬رزونانس مغناطیسی هس‪U‬ته ای ‪ (IR)،‬مادون قرمز ‪ (UV)،‬ویژگی های طیفی آن است‪ :‬از جمله اشعه ماوراء بنفش‬
‫معموالً می توان یک ترکیب گیاهی شناخته شده را شناسایی کرد بر اساس فوق مقایسه مستقیم با )‪ (MS‬و طیف جرمی اندازه گیری‬
‫مواد معتبر (در صورت وجود‪ -‬قادر)‪ ،‬باید به عنوان تایید نهایی انجام شود‪ .‬اگر مواد اص‪U‬یل باشد در دس‪U‬ترس نیس‪UU‬ت‪ ،‬مقایس‪UU‬ه دقی‪UU‬ق ب‪UU‬ا‬
‫داده های ادبیات ممکن است برای آن کافی باشد شناسایی‪ .‬اگر یک ترکیب جدید وجود دارد‪ ،‬تمام داده های فوق باید باشد برای توص‪UU‬یف آن‬
‫کافی است‪ .‬با این حال‪ ،‬با ترکیبات جدید‪ ،‬ترجیح داده می شود قادر به تایید شناسایی از طریق تخریب شیمیایی ی‪U‬ا توسط آم‪U‬اده ك‪U‬ردن‬
‫‪.‬را ترکیب توسط آزمایشگاه سنتز‬
‫شناسایی ترکیبات گیاهی جدید توسط کریستالوگرافی‪ U‬اشعه ایکس در حال حاضر معمول است‪ ،‬و می تواند هر زم‪UU‬ان ک‪UU‬ه م‪UU‬اده ب‪UU‬ه ان‪UU‬دازه‬
‫کافی به دست می آید استفاده شود مقدار و ب‪UU‬ه ص‪U‬ورت کریس‪UU‬تالی از ج‪U‬انب‪ .‬ب‪UU‬ه خص‪U‬وص است در این م‪UU‬ورد ارزش‪UU‬مند است از مجتمع‬
‫‪.‬ترپنوئیدها‪ ،‬از آنجایی که هم ساختار و هم استریوشیمی را فراهم می کند تالش كردن که در را یکسان عمل‬
‫مختصر نظرات اراده اکنون بودن داده شده بر را ناهمسان طیفی تکنیک و اهمیت نسبی آنها برای شناس‪UU‬ایی فیتوش‪UU‬یمیایی‪ .‬ب‪UU‬رای‬
‫بررسی دقیق‌تر روش‌های طیفی‪ ،‬خواننده ارجاع داده می‌شود به یکی از بسیاری از کت‪U‬اب ه‪U‬ای موج‪U‬ود در م‪U‬ورد ک‪U‬اربرد طی‪U‬ف س‪U‬نجی‬
‫‪.‬روشهای شیمی آلی (ویلیامز و فلمینگ‪1966 ،‬؛ شاینمن‪ ;1974 ،1970 ،‬هاروود و کلریج‪)1996 ،‬‬

‫اشعه ماوراء بنفش و قابل رویت طیف سنجی ‪1.4.2‬‬

‫طیف جذبی اجزای گیاهی را می توان در بسیار اندازه گیری ک‪UU‬رد محل‪UU‬ول رقی‪UU‬ق در براب‪UU‬ر ی‪UU‬ک حالل خ‪UU‬الی ب‪UU‬ا اس‪UU‬تفاده از مشخص‪UU‬ات ثبت‬
‫خودکار تروف اتومتر ب‪U‬رای ترکیب‪U‬ات بی رن‪U‬گ‪ ،‬ان‪U‬دازه گ‪U‬یری ه‪U‬ا در مح‪U‬دوده ‪ 200‬ت‪U‬ا ‪ 400‬ن‪U‬انومتر (رین‪U‬گ)؛ ب‪U‬رای ترکیب‪U‬ات رنگی‪،‬‬
‫محدوده است ‪ 200‬تا ‪ 700‬نانومتر طول موج ماکزیمم و مینیمم جذب طیف یون به دست آمده (در حاشیه) و همچنین شدت آن ثبت می شود‬
‫را جذب (یا نوری تراکم) در را خاص حداکثر و حداقل‬
‫‪18‬‬ ‫روش از گیاه «هیچ خواهر‬

‫‪Absorban‬‬

‫‪250‬‬ ‫‪300‬‬ ‫‪350‬‬ ‫‪400‬‬ ‫‪450‬‬

‫)‪ (nm‬طول موج‬

‫است‪ .‬طول موج حداکثر در ‪ 316 U،258 U،240‬و ‪٪ EtOH 364‬حالل ‪ A، 95‬شکل ‪ 1.4‬طیف جذب فرابنفش گزانتون منگیفرین‪ .‬منحنی‬
‫رینگ هستند‪ .‬حداقل در ‪ 285 ،248 ،215‬و ‪ 338‬نانومتر نسبت فامیلی شدت ها از جذب در حداکثر هستند ‪ 50 ،100 ،82‬و به ترتیب‬
‫‪N NaOH.‬قطره می کند ‪ 37% EtOH + 2 2‬درصد منحنی ب‪95 ،‬‬

‫فقط ردی از مواد مورد نیاز است‪ ،‬زیرا طیف استاندارد سلول فتومتریک‪ 1×1( U‬سانتی م‪UU‬تر) ‪).‬شکل ‪(1.4‬‬
‫تنها ‪ 3‬میلی لیتر محلول را در خود جای می دهد و با استفاده از دستگاه مخصوص‪ U‬سلول ها‪ ،‬تنها یک دهم‬
‫این حجم باید برای طیف سنجی در دسترس باشد‪ .‬متری چنین‪ U‬اندازه گ‪UU‬یری ه‪UU‬ای طیفی در شناس‪UU‬ایی مهم‬
‫هستند بسیاری‪ U‬از ترکیبات گیاهی‪ ،‬برای نظارت ب‪UU‬ر م‪UU‬واد ش‪UU‬وینده کروم‪UU‬اتوگرافی‪ U‬س‪UU‬تون ه‪UU‬ا در ط‪UU‬ول‬
‫تصفیه محصوالت‪ U‬گیاهی و ب‪UU‬رای غرب‪UU‬الگری نفت خ‪UU‬ام گی‪UU‬اه عص‪UU‬اره ها ب‪UU‬رای را حض‪UU‬ور‪ U‬از خ‪UU‬اص‬
‫کالس ها از ترکیب چنین مانند پلی استیلن ها‬
‫استفاده می‌شود‪ ،‬اتانول ‪ 95‬درصد است کالس ها از ‪ UV‬حاللی که به طور گسترده برای طیف‌سنجی‪U‬‬
‫ترکیب نشان می دهد مقداری انحالل پذیری که در آی تی‪ .‬تجاری مطلق‬
 ‫مواد و روش ها از شناسایی‬ ‫‪19‬‬

‫کوتاه‪ .‬حالل های دیگری که اغلب م‪UU‬ورد اس‪UU‬تفاده ق‪UU‬رار ‪ UV‬الکل باید اجتناب شود‪ ،‬زیرا حاوی بنزن باقی مانده است که جذب در‬
‫می گیرند آب هستند‪ ،‬متانول‪ ،‬هگزان‪ ،‬نفت و اتر‪ .‬حالل هایی مانند کلروفرم و به طور کلی باید از مصرف پیریدین اجتناب کرد‪ ،‬زیرا آنها‬
‫به شدت در ‪ -200‬جذب می شوند‪ .‬رینگ ‪ 260‬منطقه؛ آنها هستند‪ ،‬با این حال‪ ،‬کامال مناسب برای ساخت اندازه گرفتن‪ -‬در ناحیه م‪UU‬رئی‬
‫طیف با رنگدانه های گیاهی مانند را کاروتنوئیدها‬
‫هنگامی که مواد به عنوان ترکیبات کریستالی و موتور آنها جدا می شوند‪ .‬وزن لکولی شناخته شده یا قابل تع‪UU‬یین اس‪UU‬ت‪ ،‬س‪UU‬پس‬
‫غلظت بر حسب‪، C = U‬جذب = ‪ t = A/Cl (A‬ثبت می شود‪ ،‬جایی که ‪ log t‬شدت حداکثر طول موج معموالً بر حسب‬
‫ب‪UU‬ا ترکیب‪UU‬اتی ک‪UU‬ه هیچک‪UU‬دام تمرکز نه را مولک‪U‬ولی وزن ‪).‬گرم مول در لیتر‪ = 1 ،‬سلول طول مسیر بر حسب سانتی م‪UU‬تر‪ ،‬معم‪UU‬والً ‪1‬‬
‫هستند شناخته شده‪ ،‬جذب ارزش های دارند مورد استفاده قرار گیرد‪ .‬در این موارد‪ ،‬ارتفاع ماکزیمم های مختلف ممکن است باشد‬
‫‪ .‬در مقایسه با در نظر گرفتن جذب حداکثر به عنوان درصدی از آن شدید‪ ،‬قوی اوج‬
‫خالص سازی مقدماتی ضروری برای مطالعات‪ U‬طیفی و گیاهان است اجزایی ک‪UU‬ه خ‪U‬واص ج‪U‬ذب مشخص‪UU‬ه ای از خ‪U‬ود نش‪U‬ان می‬
‫دهند باید باشند به طور مکرر تصفیه می شود تا زمانی که این خواص ثابت شود‪ .‬در کروماتوگرافی تصفیه ه‪UU‬ا‪ ،‬م‪UU‬یزان ناخالص‪UU‬ی ه‪UU‬ای‬
‫جذب کننده اشعه ماوراء بنفش موجود در فیلتر کاغذ را می توان با استفاده از آبکش یک کاغ‪UU‬ذ خ‪UU‬الی تهی‪UU‬ه ک‪UU‬رد یکس‪UU‬ان زم‪UU‬ان مانند را‬
‫نمونه‪ ،‬برای متعادل کردن که در را اسپکتروفتومتر در برابر مایع شوینده حاوی آن نمونه رویه مشابهی باید اتخ‪UU‬اذ ش‪UU‬ود چه زم‪UU‬انی‬
‫بشقاب ها ‪ TLC‬تطهیر است بودن انجام شده در‬
‫کاربرد اندازه گیری های طیفی برای اهداف شناسایی می تواند باشد با تکرار اندازه‌گیری‌های انجام‌ش‪UU‬ده در محل‪UU‬ول خن‪UU‬ثی ت‪UU‬ا ح‪UU‬د‬
‫ارزش های یا که در را حضور از خاص نمک های مع‪UU‬دنی ب‪UU‬ه عن‪UU‬وان مث‪UU‬ال‪ pH ،‬زیادی افزایش می‌یابد‪ ،‬یا در آ دامنه از ناهمسان‬
‫هنگامی که قلیایی به محلول های الکلی اضافه می شود ترکیبات فنلی‪ ،‬طیف ها به طور مشخص به سمت تغییر می کنند ط‪U‬ول موج‌ه‪U‬ای‬
‫طوالنی‌تر (آنها تحت تغییرات باتوکرومیک قرار می‌گیرند) با افزایش در جذب (ش‪UU‬کل ‪ .)1.4‬در مقاب‪UU‬ل‪ ،‬هنگ‪UU‬امی ک‪UU‬ه قلی‪UU‬ایی ب‪UU‬ه محل‪UU‬ول‬
‫خنثی اضافه می شود با استفاده از اسیدهای کربوکسیلیک آروماتیک‪ ،‬تغییر در جهت مخالف است به سمت طول موج های کوتاه ت‪UU‬ر‬
‫(تغییرهای هیپسوکرومیک)‪ .‬واکنش هایی مانند شیمیایی کاهش (ب‪UU‬ا بوروهیدری‪U‬د‪ U‬س‪UU‬دیم) ی‪UU‬ا هی‪UU‬درولیز آن‪UU‬زیمی می تواند به هم‪UU‬ان ان‪UU‬دازه در‬
‫کووت سلولی یک اسپکتروفتو ضبط کننده دنبال می شود اندازه گیری متر و جذب در فواصل زم‪UU‬انی معین انج‪UU‬ام می ش‪UU‬ود نش‪UU‬ان‬
‫‪.‬می دهد چه کاهش یا هیدرولیز دارد گرفته شده محل‬
‫و قابل رویت طیف که در شناسایی ناشناخته تشکیل دهنده ‪ UV‬را ارزش از‬
‫است به طور مشخص مربوط به را نسبت فامیلی پیچیدگی از را طیف و به ‪ents‬‬
‫عمومی موقعیت از را طول موج حداکثر اگر آ ماده نشان می دهد آ ‪th e‬‬
‫تنها جذب باند بین ‪ 250‬و ‪ 260‬نانومتر‪ ،‬آی تی میتوانست هر گونه باشد یکی از آ‬
‫قابل توجه عدد از ترکیبات (به عنوان مثال آ‬ ‫ساده فنل‪ ،‬آ پورین یا‬
‫پیریمیدین‪ ،‬یک آمینو معطر اسید و بنابراین بر)‪ .‬اگر‪ ،‬با این حال‪ ،‬آی تی نشان می دهد سه‬
‫‪،‬متمایز قله ها که در را ‪ 500-400‬نانومتر منطقه‪ ،‬با مقدار کمی جذب جای دیگر‬
‫‪20‬‬ ‫روش از گیاه تحلیل و بررسی‬

‫جدول ‪ 1.2‬طیفی خواص از را ناهمسان کالس ها از گیاه رنگدانه‬

‫رنگدانه کالس‬ ‫قابل رویت طیفی دامنه‪ U‬میلی متر)*‬ ‫)اشعه ماوراء بنفش دامنه میلی متر‬

‫کلروفیل ها (سبز)‬
‫فیکوبیلین ها‬
‫و ‪64 60 470-430‬‬
‫)قرمز و آبی(‬ ‫یا ‪615-650 570-540‬‬ ‫جذب ناشی از به ‪ UV‬کوتاه شدید‬
‫سیتوکروم ها‬ ‫پروتئین پیوست‬
‫)رنگ زرد(‬ ‫‪545-605‬‬
‫جزئی گروه گاهی اوقات در ‪(-415‬‬
‫)‪440‬‬
‫آنتوسیانین ها‬
‫)ارغوانی یا قرمز (‬ ‫‪550-475‬‬ ‫حدود ‪275‬‬
‫بتاسیانین ها‬
‫رنگ (‬ ‫‪530-554‬‬ ‫‪250-270‬‬
‫)ارغوانی‬
‫کاروتنوئیدها‬
‫)رنگ زرد به نارنجی(‬ ‫‪500-400‬‬
‫آ اوج اصلی با دو جزئی قله ها یا (‬
‫)انحرافات‬
‫انتراکینون ها‬
‫)زرد(‬ ‫‪460-420‬‬ ‫شدید‪ ،‬قوی قله ها ‪3-4‬‬
‫بین ‪ 220‬و ‪290‬‬
‫چالکون و‬
‫آرونز (زرد)‬ ‫‪430-365‬‬ ‫‪240-260‬‬
‫رنگ زرد فالونول ها‬
‫)زرد(‬ ‫‪390-365‬‬ ‫‪256-270‬‬

‫و ‪ pH‬درجه همه ارزش های هستند تقریبی؛ واقعی ارزش های متفاوت با توجه به را حالل استفاده شده‪ ،‬را‬
‫را فیزیکی حالت را رنگدانه‬

‫تقریبا ً مطمئنا ً یک کاروتنوئید است‪ .‬عالوه بر این‪ ،‬اندازه گیری های طیفی در دو یا سه حالل دیگر و مقایسه ب‪UU‬ا داده ه‪UU‬ای ادبی‪UU‬ات‬
‫‪.‬ممکن است زوج نشان می دهد که خاص کاروتنوئید آی تی است‬
‫اظهارات فوق پیشنهاد می دهد آن جذب طیف های خاص هستند ارزش در مطالعات رنگدان‪UU‬ه گی‪UU‬اهی و این قطع‪UU‬ا است ب‪UU‬رای‬
‫هر دو آب صادق اس‪U‬ت ‪ -‬و م‪UU‬واد رنگی گی‪UU‬اهی محل‪UU‬ول در چ‪UU‬ربی (ج‪UU‬دول ‪ .)1.2‬کالس ه‪UU‬ای دیگ‪UU‬ر که نش‪U‬ان می دهد مشخصه ج‪U‬ذب‬
‫خواص عبارتند از غیر اشباع کام‪ -‬پوند (به ویژه پلی استیلن ها)‪ ،‬ترکیبات معطر به طور کلی (به عنوان مث‪UU‬ال اس‪UU‬یدهای هیدروکس‪UU‬ی‬
‫جذب همچ‪UU‬نین اطالع‪U‬ات س‪U‬اختاری مفی‪U‬دی را ارائ‪U‬ه می ده‪UU‬د‪ .‬این نش‪U‬ان می ده‪UU‬د ‪ UV -‬سینامیک) و کتون ها‪ .‬عدم وجود کامل‬
‫وجود لیپیدها یا آلکان های اشباع در بخش های لیپیدی گیاه عصاره‪ ،‬یا از ارگانیک‪ .‬آلی اسیدها‪ ،‬آلیفاتیک آمینو اسیدها یا قندها ک‪UU‬ه در‬
‫را اب‪ -‬محلول کسری‬
‫زیرا از فضا محدودیت‪ U‬ها‪ ،‬را طیفی خواص از فقط آ خیلی‬
‫محدود عدد از گیاه اجزای تشکیل دهنده می توان بودن داده شده که در این کتاب‪ .‬اینها هستند‬
 ‫مواد و روش ها از شناسایی‬ ‫‪21‬‬

‫عمدتا ً در قالب جداول ماکزیمم طیفی اما تعداد کمی ثبت شده است تصاویر منحنی های طیفی در ص‪U‬فحات بع‪U‬دی گنجان‪U‬ده ش‪U‬ده اس‪U‬ت‪.‬‬
‫برای بیشتر کام‪ -‬جداول جامع داده های طیفی ‪ ،‬خواننده به یکی از آنها ارجاع داده می شود مجموعه‌ای از چنین داده‌هایی مانن‪UU‬د هرشنس‪UU‬ون‬
‫(‪ )1966 U،1961 U،1956‬یا النگ (‪ .)1959‬مقدمه مفید متون برای جذب طیف سنجی هستند گیالم و اس‪UU‬تم (‪ )1957‬و ویلی‪UU‬امز و فلمین‪U‬گ‪( U‬‬
‫‪ .)1966‬بیشتر پیشرفته _ متن معامله به ط‪UU‬ور مش‪UU‬خص با را طیف از ط‪UU‬بیعی محص‪UU‬والت است اس‪UU‬کات (‪ .)1964‬همچ‪UU‬نین گ‪UU‬زارش‬
‫‪.‬جامعی از بیوشیمیایی وجود دارد طیف سنجی توسط مورتون (‪)1975‬‬

‫‪1.4.3‬‬ ‫فرو سرخ‬ ‫)‪(IR‬‬ ‫طیف سنجی‬

‫یا در محلول (در کلروفرم ‪ IR‬ممکن است بر روی مواد گیاهی در یک رکورد خودکار اندازه گیری شود‪ .‬اسپکتروفتومتر ‪ IR‬طیف‬
‫یا کربن تتراکلرید (‪ ،)%1-5‬به صورت مولد با روغن نوژول یا در حالت جامد‪ ،‬مخلوط ش‪U‬ده با پتاس‪U‬یم برمید ک‪U‬ه در را دومی م‪U‬ورد‪ ،‬آ‬
‫دیسک نازک است آماده شده زیر‬

‫‪ y (c m -‬فرکانس‬ ‫‪I‬‬
‫‪4000‬‬ ‫‪2000‬‬ ‫‪1600‬‬ ‫‪1300‬‬ ‫‪1100 1000‬‬ ‫‪900‬‬ ‫‪800‬‬ ‫‪700‬‬
‫‪Absorban‬‬

‫‪****! 1‬‬ ‫‪1‬‬ ‫‪1‬‬ ‫‪1‬‬ ‫‪t‬‬ ‫‪1‬‬ ‫‪1‬‬

‫‪Absorban‬‬

‫‪2‬‬ ‫‪3‬‬ ‫‪4‬‬ ‫‪5‬‬ ‫‪6‬‬ ‫‪7‬‬ ‫‪8‬‬ ‫‪9‬‬ ‫‪J0‬‬ ‫‪J1‬‬ ‫‪J2‬‬ ‫‪13‬‬ ‫‪14‬‬
‫طول موج (بعد از ظهر)‬

‫‪،‬فرو سرخ طیف از دو آلکالوئیدها از جانب تنباکو دود‪ .‬کلید‪( :‬آ) هارمان شکل‪1.5 .‬‬
‫به طور ‪ IR‬توجه داشته باشید که طیف های ‪ (II).‬نورهارمان‪ ،‬طبیعی (من) و مصنوعی )‪ tb‬؛)‪ (II‬طبیعی (من) و مصنوعی‬
‫و قابل رویت طیف (شکل‪ .)1.4 .‬بدین ترتیب‪ ،‬را جذب باندها اینجا نقطه به سمت‪ U‬پایین ‪ UV‬سنتی در مقایسه با‬
‫‪22‬‬ ‫روش‬ ‫‪af‬‬ ‫یالنت تحلیل و بررسی‬

‫جدول ‪ 1.3‬مشخصه فرو سرخ فرکانس ها از مقداری کالس ها از طبیعی محصوالت‬

‫" تقریبی موقعیت ها از مشخصه گروه های موسیقی‬

‫سانتی متر ‪ l200‬در باال‬
‫آلکان ها آلکن ها‬
‫معطر استیلن ها‬
‫)‪2940 (S) 2860 (M) 1455 (S) 1380 (M‬‬
‫الکل ها و فنل ها آلدهیدها و کتون ها‬ ‫‪).‬که در( ‪)، 1650 (WM) 1410‬که در( ‪3050 (WM)، 1850‬‬
‫استرها و الکتون ها کربوکسیلیک‬ ‫)‪)، 1500 ،1580 ،1600 (W-M‬که در( ‪3050 (WM) 2100-1700‬‬
‫اسیدها آمین ها‬ ‫‪3310 (M) 2225 (W) 2150 (WM) 1300 (W).‬‬
‫سیانیدها‬ ‫)‪)، 1410 (M‬گسترده( ‪3610 (WM) 3600-2400‬‬
‫لوسیانات ها‬ ‫‪2750 (W) 2680 (W) 1820-1650 (S) 1420 (WM).‬‬
‫)‪1820-1680 (S‬‬
‫باندها که در 'اثر انگشت' منطقه اگلینتون *‬
‫‪)1965(.‬‬ ‫‪) 1760 (S) 1710 (S).‬گسترده‪ ،‬م( ‪3520 (W) 3400-2500‬‬
‫)‪)، 1610 (M‬متغیر( ‪3500 (M) 3400 (M) 3400-3100‬‬
‫‪2225 (WS).‬‬
‫)در مقابل( ‪2270‬‬

‫هستند حذف شده است برای سادگی داده ها سازگار از جانب نام تجاری و‬

‫با استفاده از ق‪UU‬الب و ‪ KBr‬شرایط بی آب از پودری حاوی حدود ‪ 1‬میلی گرم ماده و ‪ 10‬تا ‪ 100‬میلی گرم‬
‫پرس‪ .‬محدوده اندازه گیری ‪ -‬اندازه از ‪ 4000‬ت‪UU‬ا ‪ 667‬س‪UU‬انتی م‪UU‬تر است (ی‪UU‬ا ‪ 2.5‬ت‪UU‬ا ‪ 15‬کیلوم‪UU‬تر) و طیف‬
‫معم‪U‬ولی‪ U‬ب‪U‬ه دس‪U‬ت آم‪U‬ده در این مس‪UU‬یر هس‪U‬تند ‪ IR‬طول می کشد حدود سه دقیقه باید ضبط ش‪U‬ود‪ .‬طیف‬
‫‪.‬نشان داده شده که در شکل‪1.5 .‬‬
‫‪ l200cm‬طیف در باال ‪ IR‬را منطقه که در را‬ ‫نشان می دهد طیفی باندها یا قله‬
‫ها ناشی از به را ارتعاشات‪ U‬از فردی اوراق قرضه یا کاربردی گروه ها که در را مولکول زیر‬
‫سانتی متر نشان می دهد باندها ناشی از به را ارتعاشات از ‪ l200‬معاینه (جدول ‪ .)1.3‬را منطقه زیر‬
‫را کل مولکول و زیرا از آن پیچیدگی‪ ،‬است شناخته شده مانند را 'اثر انگشت' منطقه شدت ها از‬
‫متوسط )‪ (S‬را مختلف باندها هستند ثبت شده به صورت ذهنی بر آ ساده مقیاس مانند بودن یا قوی‪U‬‬
‫‪ (W).‬یا ضعیف‪(M) U‬‬
‫را حقیقت که زی‪UUU‬اد ک‪UUU‬اربردی گ‪UUU‬روه ها می ت‪UUU‬وان ب‪UUU‬ودن شناس‪UUU‬ایی‪ U‬ش‪UUU‬ده توسط آنها شخص‪UUU‬یت‪-‬‬
‫یکسان باشد‪ .‬ساده ترین و اغلب ‪ IR‬فرکانس‌های ارتعاش سه‌گانه (جدول ‪ )1.3‬باعث می‌شود‪ U‬که طیف‬
‫‪ IR‬مطمئن ت‪UU‬رین روش ب‪UU‬رای تخص‪UU‬یص ی‪UU‬ک ت‪UU‬رکیب ب‪UU‬ه آن است کالس ب‪UU‬ا وج‪UU‬ود این‪ ،‬طیف‌س‪UU‬نجی‬
‫بیشترین استفاده را در گیاهان دارویی‪ U‬دارد‪ .‬مطالعات شیمیایی به عنوان یک دستگاه "اثر انگشت" ب‪UU‬رای‬
‫به ش‪UU‬ما کم‪UU‬ک می کند ‪ IR‬مقایسه طبیعی‪ U‬با یک نمونه‪ U‬مصنوعی (نگاه کنید به شکل ‪ .)1.5‬پیچیدگی‪ U‬طیف‬
‫خ‪U‬ود ب‪U‬ه وی‪UU‬ژه ب‪UU‬رای این منظ‪U‬ور‪ U‬خ‪U‬وب اس‪U‬ت و چ‪U‬نین مقایس‪UU‬ه ه‪UU‬ایی بس‪UU‬یار است مهم ک‪U‬ه در را کامل‬
‫ب‪UU‬ه ط‪UU‬ور گس‪UU‬ترده ب‪UU‬رای ‪ IR‬به عن‪UU‬وان مث‪UU‬ال‪ ،‬طیف ‪ ent‬شناسایی‪ U‬از زیاد انواع از گیاه تشکیل دهنده‬
‫در ی‪UU‬ک پیش از ‪ GLC‬شناسایی‪ U‬استفاده شده است اجزای اس‪UU‬انس ش‪UU‬ناخته ش‪UU‬ده ب‪UU‬ه عن‪UU‬وان آنه‪UU‬ا توسط‬
‫جداسازی‪ U‬نمونه مقیاس‬
‫طیف برای "اثر انگشت" یک الکالوئید‪ U‬است داده شده که در ‪ IR‬یک تصویر‪ U‬از را استفاده کنید از‬
‫شکل‪ .1.5 .‬دو پی گیری اجزاء از تنباکو‪ U‬دود هستند شناخته شده است‬
 ‫مواد و روش ها از شناسایی‬ ‫‪23‬‬

‫ممکن اس‪U‬ت اش‪U‬اره ش‪U‬ود ک‪U‬ه ‪).‬پوندکس‪U‬تر و ک‪U‬ارپنتر‪ KBr (1962 ،‬به عنوان پایه هارمانه و نورهارمان‪ ،‬با استفاده از روی‪U‬ه دیسک‬
‫برخی از جزئیات در ناحیه اثر انگشت هر دو آلکالوئید طبیعی وجود ندارد نمونه ها‪ ،‬احتماالً به دلیل وج‪UU‬ود آث‪UU‬ار ناخالص‪UU‬ی اس‪UU‬ت‪ .‬ممکن‬
‫آنها تف‪U‬اوت فق‪U‬ط در این اس‪U‬ت ک‪U‬ه هارم‪U‬ان مش‪U‬تق( است نیز باشد مشاهده کردند که اگرچه آلکالوئیدها از نظر ساختار بسیار مشابه هس‪U‬تند‬
‫طیف ‪ IR‬آنها می توان بودن به راحتی متمایز توسط آنها )متیل نورهارمان است‪C-‬‬
‫همچنین می‌تواند به طور مفید به روشن‌سازی ساختار کمک کند‪ ،‬هنگ‪U‬امی ک‪U‬ه ترکیب‪U‬ات جدی‪UU‬د مواج‪UU‬ه می ش‪U‬وند در ‪ IR‬طیف‌سنجی‬
‫ذکر شده است در پیک ها‪ ،‬تفسیر واقعی یک طیف پیچیده ‪ IR‬گیاهان با اينكه وجود دارد بسیاری از ارتباط بین ساختار شیمیایی و جذب‬
‫می تواند دشوار باشد و عملیات به تجربه زیادی نیاز دارد‪ .‬با برخی از کالس های کام‪ -‬پوند‪ ،‬با این حال‪ ،‬تفسیر می توان‪UU‬د ی‪UU‬ک موض‪UU‬وع‬
‫نسبتا ساده باشد‪ .‬اقدامات‪ -‬دفع فرکانس های کربونیل بین ‪ 1800‬تا ‪ 1650‬سانتی متر در کینون ها می توانند یکباره نشان دهن‪UU‬د ک‪UU‬ه آی‪UU‬ا‬
‫گروه کربونیل با کیلیت است یا خیر یک هیدروکسیل مجاور یا نه‪ .‬برای مثال‪ ،‬با آنتراکینون ه‪UU‬ا‪ ،‬غ‪UU‬یر کین‪U‬ون ه‪U‬ای کالت دارای ن‪U‬واری‬
‫و در ‪cm‬نش‪UU‬ان می دهد دو بان‪UU‬د‪ ،‬در ‪ o-OH 1647-1675‬بین ‪ 1678‬ت‪UU‬ا ‪ 1653‬س‪UU‬انتی م‪UU‬تر هس‪UU‬تند‪ .‬ی‪U‬ک کین‪U‬ون با یک‬
‫‪1‬‬

‫‪M1608‬گروه ها دارد‪ U‬باندها در ‪ 1661 —1675‬سانتی متر و در ‪ 1621 -1637 o-OH 164‬سانتی متر لیتر ; و آ کینون با دو‬
‫‪ '.‬سانتی متر‬
‫می توان از کاتالوگ های مختلفی استفاده کرد‪ ،‬به عنوان مثال هرشنسون (‪ .)1964 ،1959‬برای آ ‪ IR،‬برای منابع داده های‬
‫را ببینید‪ .‬یک متن کاربردی مقدماتی محبوب ‪ -‬کتاب‪ ،‬اکن‪U‬ون )‪، Eglinton (1970‬طیف سنجی ‪ IR‬خوب مقدماتی مرور بر‬
‫‪.‬که در آن سوم نسخه‪ ،‬است که از صلیب و جونز (‪)1969‬‬

‫‪1.4.4‬‬ ‫جرم طیف سنجی (ام‌اس)‬

‫ام اس‪ ،‬از زمان معرفی نسبتا ً اخیر خود (حدود ‪ ،)1960‬انقالبی داشته است‪ .‬تحقیق‪U‬ات بیوش‪U‬یمیایی را روی محص‪U‬والت ط‪U‬بیعی انج‪U‬ام‬
‫داده و کار را آسان کرده است فیتوشیمیدان از بسیاری جهات ارزش تکنیک این است که فقط به مقادیر میکروگرمی از مواد نی‪UU‬از‬
‫دارد که بتوان‪U‬د آن را ف‪U‬راهم کند وزن مولک‪UU‬ولی دقی‪U‬ق و اینک‪UU‬ه ممکن اس‪UU‬ت قطع‪UU‬ه قطع‪UU‬ه ش‪UU‬دن پیچی‪U‬ده ای ایج‪UU‬اد کند الگ‪U‬ویی ک‪U‬ه اغلب‬
‫‪.‬مشخصه آن خاص است (و ممکن است شناسایی کند)‪ .‬ترکیب‬
‫ام اس‪ ،‬در اصل‪ ،‬از تحقیرکننده تشکیل شده است مقادیر کمی از یک ماده آلی ترکیب و ثبت الگ‪UU‬وی‬
‫تکه تکه شدن بر اساس جرم‪ .‬بخار نمونه در سیستم‪ U‬فشار کم جرم پخش می شود طیف سنج ک‪UU‬ه در آن ب‪UU‬ا‬
‫انرژی کافی یونیزه می شود تا باعث قطعه قطعه ش‪UU‬ود‪ .‬پیون‪U‬دهای‪ U‬ش‪U‬یمیایی یونه‪U‬ای‪ U‬ب‪U‬ا ب‪U‬ار مثبت حاص‪U‬ل‬
‫هستند شتاب در میدان مغناطیسی که پراکنده می شود و اجازه می دهد ت‪UU‬ا ف‪UU‬راوانی نس‪UU‬بی رقص‪UU‬یدن ان‪UU‬دازه‬
‫گیری ها از یون ها از داده شده انب‪UU‬وه ب‪UU‬رای ش‪UU‬ارژ نس‪UU‬بت را در نتیجه رک‪UU‬ورد ف‪UU‬راوانی ی‪UU‬ون در مقاب‪UU‬ل‬
‫جرم‪ ،‬نمودار طیفی جرمی را تش‪UU‬کیل می ده‪UU‬د‪ ،‬که ب‪UU‬ه این ت‪UU‬رتیب از ی‪UU‬ک س‪UU‬ری خط‪UU‬وط‪ U‬ب‪UU‬ا ش‪UU‬دت ه‪UU‬ای‬
‫‪.‬مختلف در موارد‪ U‬مختلف تشکیل شده است جرم واحدها (دیدن شکل‪)1.6 .‬‬
‫‪24‬‬ ‫‪:‬مواد و روش ها از گیاه تحلیلگر‬

‫‪100‬‬ ‫*]‪[M—OH‬‬

‫•‪80‬‬
‫*)‪(M- CH 2 OH‬‬

‫‪136‬‬
‫‪160‬‬
‫‪Relative‬‬

‫‪108‬‬ ‫‪119‬‬ ‫‪135‬‬ ‫‪148‬‬ ‫*‪M‬‬

‫‪149‬‬

‫‪50‬‬ ‫‪100‬‬ ‫‪200‬‬

‫‪m/z‬‬
‫شکل‪ 1.6 .‬جرم طیف از را رشد تنظیم کننده زاتین‬

‫در بسیاری از موارد‪ ،‬برخی از ترکیبات اصلی از تبخیر زنده می مانند‪ .‬فرآیند یون و به عنوان پیک یون مولکولی ثبت می شود‪.‬‬
‫بسیار دقیق سپس اندازه گیری جرم (تا ‪ 0.0001‬واحد جرم) را می توان بر روی آن انجام داد (و هر یون دیگری) خاص‪ .‬دقت به‬
‫ک‪UU‬ه معم‪UU‬والً ب‪UU‬ه( ‪ sis‬اندازه ای است که دقیق را نشان می دهد فرمول مولکولی ماده‪ ،‬به طوری که تجزیه و تحلیل عنصری معمولی‬
‫‪.‬دیگر وجود ندارد الزم است )چندین میلی گرم ماده نیاز دارد‬
‫بازداش‪UU‬تن‪ NMR -‬ک‪UU‬ه توسط فیتوش‪UU‬یمی خ‪UU‬ودش‪ ،‬س‪UU‬ازها ب‪U‬رای ج‪U‬رم طیفی و ‪ IR‬و ‪ UV‬بر خالف اسپکتروفتومترهای‬
‫مینیشن ها گ‪UU‬ران ت‪UU‬ر و بس‪UU‬یار پیچی‪UU‬ده ت‪UU‬ر هس‪UU‬تند‪ ،‬ب‪UU‬ه ط‪UU‬وری ک‪UU‬ه آنها معموال توس‪UU‬ط پرس‪U‬نل آم‪U‬وزش دی‪UU‬ده اداره می ش‪UU‬وند‪ .‬بن‪UU‬ابراین‪،‬‬
‫فیتوشیمیدان‪ ،‬نمونه خود را برای تجزیه و تحلیل تحویل می دهد و نتایج را در قسمت‪ U‬پس می گیرد شکل نمودار نشان داده شده در‬
‫شکل ‪ .1.6‬این تکنیک با موفقیت کار می کند تقریب‪U‬ا ً ب‪U‬ا ه‪U‬ر ن‪U‬وع مولک‪U‬ولی کم وزن م‪U‬اده تش‪U‬کیل دهن‪UU‬ده گی‪U‬اه و ح‪U‬تی ب‪U‬وده است‬
‫استفاده شده برای تجزیه و تحلیل پپتید آن ترکیبات که هستند هم بی فرار به بخار کردن که در را ام‌اس اب‪UU‬زار هس‪UU‬تند تب‪UU‬دیل ش‪UU‬ده‬
‫‪. MS‬است به تری متیل سیلیل اترها‪ ،‬متیل استرها یا مش‪UU‬تقات مش‪UU‬ابه‪ .‬این درس‪UU‬ت است جی‪UU‬برلین ه‪UU‬ا (نگ‪UU‬اه کنی‪UU‬د ب‪UU‬ه ص ‪)124‬‬
‫و عملیات ترکیبی در یک حرکت کیفی و شناسایی کمی بسیاری از اجزای ساختاری پیچیده ‪ GLC،‬اغلب همراه با استفاده می شود‬
‫‪.‬که ممکن است بودن حاضر با یکدیگر که در آ خاص گیاه استخراج کردن‬
‫کافی باشد تحقیقات فیتوشیمیایی این مورد زاتین اس‪UU‬ت‪ ،‬اولین م‪UU‬ورد ‪ MS‬یک مثال باید برای نشان دادن ارزش اندازه‌گیری‌های‬
‫طبیعی تنظیم کننده رشد سیتوکینین حلقه ای که از گیاهان عالی جدا می شود‪ .‬آن س‪U‬اختار ب‪UU‬ه عن‪UU‬وان پ‪U‬ورین ‪-4(-6‬هیدروکس‪U‬ی متی‪U‬ل‪-‬‬
‫به ط‪UU‬ور قاب‪UU‬ل ت‪UU‬وجهی در این )شکل ‪ MS (1.6‬آهن‪-2-‬بوتنیل آمینو) مانع شد‪ .‬استخراج شده توسط شانون و لتهام (‪ ;)1966‬نتایج‬
‫‪ C, 0‬شناسایی کمک کرد‪ .‬بنابراین‪ ،‬یک برجس‪UU‬ته وج‪UU‬ود داشت مولکولی ی‪UU‬ون در ‪ ،219‬تایی‪UU‬د می کند را مولک‪UU‬ولی فرم‪UU‬ول‬
‫‪ /z‬را حضور از آ اولیه الکل بود آشکار کرد توسط قطعات در متر ‪H„ON 5 .‬‬
‫را محل از را آلکیل ‪ m/z 188 (M-CH,OH).‬و )‪202 (M-OH‬‬
‫‪ /z 148.‬بود نشان داد توسط را قطعه در متر ‪ N-‬گروه پیوست در‬
 ‫مواد و روش ها از‬ ‫‪ident'ifc‬‬ ‫بند‬ ‫‪25‬‬

‫به دس‪U‬ت آم‪U‬د‪ .‬قطع‪U‬ات فع‪U‬ال (نش‪U‬ان داده ش‪U‬ده توس‪U‬ط بیش‪U‬تر مش‪U‬تقات ‪ char-‬در نهایت‪ U،‬تأیید هسته آدنین از‬
‫‪.‬و ‪ m/z 136، 135 108‬آدنین) در‬
‫پیشرفت های فنی جدید همچنان در طیف سنجی جرمی پدیدار می شوند و طیف‌س‪UU‬نج‌های م‪UU‬درن ممکن اس‪UU‬ت ب‪UU‬ا بمب‪UU‬اران اتمی س‪UU‬ریع‬
‫ترکیب‪UU‬ات ارگانی‪U‬ک‪ ،‬ش‪U‬امل نم‪U‬ک ه‪UU‬ا و وزن ‪ o‬و سپس قادر به تجزیه و تحلیل شکننده یا غیر فرار هستند )‪ (FAB‬ارائه شوند‪ .‬منبع‬
‫گلیکوزی‪UU‬دیک قن‪UU‬دها در این‪، O-‬در تجزی‪UU‬ه و تحلی‪UU‬ل گلیکوزی‪UU‬دهای گی‪UU‬اهی ‪ MS‬مولکولی باالتر تی تریال ها قبال‪ ،‬هنگام استفاده از‬
‫می توان یون های مولکولی را برای نمونه اصلی به دست ‪ FAB-MS‬فرآیند از بین رفتند و از تشخیص فرار کردند ولی اکنون با‬
‫آورد گلیکوزید‬
‫مقداری از را زیاد برنامه های کاربردی از ام‌اس داده ها به گیاه بیوشیمیایی پژوهش‬
‫هستند پوش‪UU‬یده ش‪UU‬ده در دو رس‪UU‬اله ها (وال‪UU‬ر‪ ;1972 ،‬والر و درم‪UU‬ر‪ .)1980 ،‬را خوانن‪UU‬ده همچ‪UU‬نین ب‪UU‬ه‬
‫در طیف سنجی عمومی اشاره می کند کتاب ها قبال‪ ،‬پیش از این ذکر ش‪UU‬ده زودتر ‪ MS‬گزارش های‬
‫‪.‬که در این بخش‬

‫‪1.4.5‬‬ ‫)‪ (NMR‬اتمی مغناطیسی رزونانس طیف سنجی‬

‫اساس‪U‬ا ً وس‪U‬یله ای ب‪U‬رای تع‪U‬یین ف‪U‬راهم می کند س‪U‬اختار ی‪U‬ک ت‪U‬رکیب آلی ب‪U‬ا ان‪U‬دازه گ‪U‬یری ح‪U‬رکت ‪ NMR‬طیف س‪U‬نجی پروت‪U‬ون‬
‫‪ -‬مغناطیسی اتم های هیدروژن آن در بیشتر ترکیبات‪ ،‬اتم های هیدروژن هستند پیوست شده است به ناهمس‪UU‬ان گ‪UU‬روه ها (مانند‬
‫‪CH 2 -. —CH 3• - CHO، -NH 2r‬‬
‫طیف فراهم می کند آ رکورد‪ U‬از را ‪ NMR‬و غیره‪ ).‬و را پروتون ‪-CHOH-،‬‬
‫تعداد اتم های هیدروژن در این شرایط مختلف‪ .‬نمی تواند‪ ،‬چگونه‪ -‬همیشه‪ ،‬هر گونه اطالعات مستقیم در مورد ماهیت اس‪U‬کلت ک‪U‬ربن‬
‫‪.‬طیف سنجی‪ ،‬که است شرح داده شده بعد ‪ NMR‬از را مولکول؛ این می توان فقط بودن به دست آمده توسط کربن‪13-‬‬
‫در عمل‪ ،‬نمونه ماده در محلول‪ ،‬در یک بی اثر قرار می گیرد حالل‪ ،‬بین قطب های یک آهنربای قدرتمن‪UU‬د و پروت‪UU‬ون ه‪UU‬ا متحم‪UU‬ل‬
‫می شوند ناهمسان شیمیایی تغییر می کند با توجه به آنها مولکولی محیط ها در داخل را مولکول اینها هستند اندازه گیری ش‪UU‬ده ک‪UU‬ه‬
‫که یک ترکیب بی اثر است‪ .‬پوندی که می ‪ (TMS)،‬دستگاه نسبت فامیلی به یک استاندارد‪ ،‬معموالً تترمتیل سیالن ‪ NMR‬در را‬
‫‪.‬توان بدون احتمال به محلول نمونه اضافه کرد از مواد شیمیایی واکنش رخ می دهد‬
‫= ‪ T‬شیمیایی تغییر می کند هستند اندازه گیری شده که در یا ‪( 6‬دلتا) یا تی (تاو) واحدها جایی که‬
‫تفاوت در جذب فرکانس‪ U‬از را نمونه و را ارجاع ‪، Av‬فرکانس‪ U‬رادیویی‪ = Av X 10'/ U‬و ‪10 6 6‬‬
‫که در واحدهای هرتز از آنجایی که کل فرکانس رادیویی معموالً ‪ 60‬مگ‪UU‬ا هرت‪UU‬ز (‪ TMS )60‬ترکیب‬
‫نامی‪UU‬ده می ‪ ppm‬است میلیون هرتز) و شیفت ها در واحدهای هرتز اندازه گیری می شوند ب‪UU‬ه عن‪UU‬وان‬
‫شود همچنین‪ U،‬شدت سیگنال ها ممکن است یکپارچه‪ U‬شود نشان می دهد را عدد از پروتون ها طنین انداز‬
‫‪.‬در هر یکی فرکانس‪U‬‬
‫اندازه گیری ها دارد بی اثر بودن و بدون پروتون ها یکی است‪ ،‬از این رو‪ ،‬محدود به استفاده كردن ‪ NMR‬را حالل برای‬
‫دوترو استون )‪ (DDO‬دوتریوم اکسید ‪ (CDCl 3 )،‬کربن تتراکلرید‪ ،‬دوتروکلوروفرم‬
‫‪26‬‬ ‫روش از گیاه تحلیل و بررسی‬

‫جدول ‪ 1.4‬برخی از ویژگی های شیمیائی رزونانس مغناطیسی هسته ای پروتون تغییر می کند از ناهمسان کالس ها از گیاه‬
‫محصوالت‬

‫کالس‬ ‫تایپ کنید از پروتون‬ ‫)‪ (ppm‬دامنه از شفت‪ ،‬ب‬

‫آلکان ها و چرب اسیدها‬

‫‪CHP-R R‬‬ ‫‪0.85-0.95‬‬
‫آلکن ها‬
‫‪—CHP-R‬‬ ‫‪1.20-1.35‬‬
‫‪CHP-C=C‬‬ ‫‪1.60-1.69‬‬
‫استیلن ها‬ ‫‪-CH=C‬‬ ‫‪5.20-5.70‬‬
‫معطر ترکیبات نیتروژن ترکیبات‬ ‫‪HC>C‬‬ ‫‪2.45-2.65‬‬
‫‪ A r -‬ار‪-‬ح‬ ‫‪6.60-8.00‬‬
‫‪CH‬‬ ‫‪3‬‬ ‫‪2.25-2.50‬‬
‫‪Ar—CHO‬‬ ‫‪9.70-10.00‬‬
‫‪N -C H‬‬ ‫‪2.10-3.00‬‬
‫‪3N -‬‬ ‫‪7.90-8.10‬‬
‫‪CHO‬‬ ‫متغیر‬
‫‪NH‬‬

‫‪(CD‬‬ ‫‪3‬‬ ‫‪COCD‬‬ ‫‪3‬‬ ‫یا دوتره شده دی متیل سولفوکسید قطبی ترکیبات هستند اغلب در حالل های موجود و آنه‪UU‬ا ب‪UU‬ه ن‪UU‬درت )‬
‫میلی ‪ M10‬محلول یا نامحلول هستند برای اندازه گیری باید به تری متیل سیلیل اترها تبدیل ش‪UU‬وند (نگ‪UU‬اه کنی‪UU‬د به ش‪UU‬کل ‪ .)1.7‬ح‪UU‬داقل‬
‫در بس‪U‬یاری از آزمایش‪U‬ات فیتوش‪U‬یمیایی ب‪U‬ا ‪ NMR‬گرم نمونه مورد نیاز است و این استفاده از آن را محدود می کند پکتروس‪U‬کوپی‬
‫این حال‪ ،‬در ابزارهایی که برای آنالیز فقط به نمونه میلی گرم نیاز دارن‪U‬د‪ ،‬اکن‪U‬ون در دس‪U‬ترس هس‪U‬تند‪ .‬یکی از م‪U‬زیت ه‪U‬ای طی‪U‬ف‬
‫این است که نمونه می تواند در حداقل باشد بهبود یافت بدون تغییر بعد از را عمل و استفاده شده ‪ MS‬نسبت به ‪ NMR‬سنجی‬
‫برای دیگر تعیین ها‬
‫می توان‪UU‬د باشد توس‪UU‬ط فیتوش‪UU‬یمی ‪ NMR‬همانند س‪UU‬ایر تکنی‪U‬ک ه‪UU‬ای طیفی‪ ،‬طی‪U‬ف س‪UU‬نجی پروت‪UU‬ون‬
‫استفاده می شود به عنوان یک تکنیک انگشت نگاری باید اینطور باشد ب‪UU‬ه ی‪UU‬اد آورد‪ ،‬ب‪UU‬ا این ح‪UU‬ال‪ ،‬ک‪UU‬ه‬
‫پیچی‪U‬دگی از طیف مس‪U‬تقیم است مرب‪UU‬وط ب‪UU‬ه تع‪UU‬داد ان‪UU‬واع مختل‪UU‬ف پروت‪UU‬ون‪ U‬موج‪UU‬ود‪ ،‬ب‪UU‬ه ط‪UU‬وری ک‪UU‬ه بس‪UU‬یار‬
‫آلکالوئید‪ U‬پیچیده ج‪UU‬ایگزین‪ U‬در واق‪UU‬ع ممکن اس‪UU‬ت س‪UU‬یگنال ه‪UU‬ای کم‪UU‬تری نس‪UU‬بت ب‪UU‬ه ی‪UU‬ک آلکالوئی‪U‬د‪ U‬س‪UU‬اده بدهد‬
‫برای س‪UU‬اختاری است تع‪UU‬یین‪ ،‬در ت‪UU‬رکیب ب‪UU‬ا س‪UU‬ایر ‪ NMR‬هیدروکربن آلیفاتیک کاربرد‪ U‬عمده پروتون‬
‫تکنیک های طیفی‪ .‬استفاده از آن برای تعیین کننده کالس ترکیب بسیار قابل توج‪UU‬ه اس‪UU‬ت؛ چن‪UU‬د نمونه از‬
‫شیمیایی تغییر می کند که هس‪U‬تند معم‪UU‬ول از مس‪UU‬لم ‪ -‬قطعی‪ U‬کالس ها از محص‪U‬والت‪ U‬ط‪U‬بیعی در ج‪U‬دول‬
‫‪ 1.4‬آمده است‪ .‬پروتون های معطر (چه در مشتقات بنزن یا در ترکیبات هتروسیکلیک) به وضوح از‬
‫اغلب ‪ NMR‬پروتون های آلیفاتیک متمایز هس‪UU‬تند‪ .‬در ی‪UU‬ک کالس از ترکیب‪UU‬ات ن‪UU‬یز‪ ،‬ان‪UU‬دازه گ‪UU‬یری ه‪UU‬ای‬
‫‪.‬ممکن است فراهم شود را به معنای از شناسایی شخصی‪ U‬سازه های‬
‫می تواند بسیار پیچیده باشد‪ .‬به عنوان مثال‪ ،‬با توجه به برهمکنش بین پروتون های متصل ب‪UU‬ه اتم ه‪UU‬ای ‪ NMR‬طیف پروتون‬
‫کربن مجاور‪ ،‬ترال سیگنال ها ممکن است به نظر می رسد مانند "دوگان‪U‬ه" یا "س‪U‬ه قل‪U‬و" بج‪U‬ای از مانند تنها قل‪U‬ه ها من تفس‪U‬یر می‬
‫‪-‬کنم‪ ،‬از این رو‪ ،‬نیاز دارد بسیار مهارت که در با وجود از این‪ ،‬مفید فی‬
 ‫مواد و روش ها از شناسایی‬ ‫‪27‬‬
‫اطالعات شیمیایی را می توان بدون نیاز به تجزیه و تحلیل‪ U‬به دست آورد طیف با جزئیات نزدیک دو مثال این را نشان خواه‪UU‬د داد‪ .‬اول‪ ،‬در‬
‫حالی که بازدارنده استخراج ساختار اسید استرکولیک‪ ،‬ش‪U‬یمیدانان در ابت‪U‬دا نتوانس‪U‬تند آن را بپذیرند ک‪U‬ه این اس‪U‬ید چ‪U‬رب منحص‪U‬ر ب‪U‬ه ف‪U‬رد‬
‫دارای یک حلقه سیکلوپروپان ظاهراً کشیده است در ساختار و فرمول های جایگزین که در آن پیوند دوگانه ب‪UU‬ود ق‪UU‬رار دادن در م‪UU‬وقعیت‬
‫ب‪UU‬ا این ح‪UU‬ال‪ ،‬نش‪UU‬ان داد واض‪UU‬ح اس‪U‬ت ک‪UU‬ه بای‪UU‬د یک حلق‪U‬ه ‪ NMR،‬های مجاور حلق‪U‬ه س‪UU‬یکلوپروپان ت‪UU‬رجیح داده ش‪U‬د‪ .‬را پروت‪UU‬ون طیف‬
‫و را ج‪UU‬ایگزین فرم‪UU‬ول ها ب‪UU‬ود )‪ (5.7-5.2 ò‬سیکلوپروپن‪ ،‬از آنجایی که هیچ س‪UU‬یگنالی ب‪UU‬رای پروت‪UU‬ون در الفین وج‪UU‬ود نداشت منطقه‬
‫‪.‬بنابراین غیر ممکن است‬
‫مثال دوم از مطالعه ساختاری فالونوئید زرد است رنگدانه‪ ،‬تامبولتین این را کارگران اصلی هندی توص‪UU‬یف کردند ک‪UU‬ه آن را ج‪UU‬دا‬
‫در یک بار نشان داد که وجود یک واحد قند نامشخص‪ ،‬از آنجا که وج‪UU‬ود ‪ NMR‬کرد‪ ،‬به عنوان یک فالونول آگلیکون اما طیف پروتون‬
‫ناشی از به قند پروتون ها خوب جدا از هم از جانب سیگنال ها ‪ ò‬دارد‪ U‬سیگنال ها در ‪ 5.15‬و ‪5.25‬‬

‫یا‬
‫‪R—O‬‬
‫'‪36‬‬ ‫یا‬
‫‪R—O‬‬

‫'‪H-2‬‬
‫‪H-5’H-8H-6‬‬
‫‪H-3‬‬
‫'‪H-6‬‬
‫‪8-0‬‬ ‫‪60‬‬ ‫‪50‬‬

‫‪. !bl‬پ‪ .‬پ‪ .‬م‬

‫فالون لوتئولین (به عنوان تری متیل‪ U‬سیلیل اتر)‪ .‬تغییرات شیمیایی نسبت ‪ NMR‬شکل ‪ 1.7‬طیف پروتون‬
‫دادن خوب جدا ‪ l uteolin‬توجه داشته باشید که شش پروتون در ‪ (Mabry, 1969).‬است ‪ TMS‬به‬
‫از هم تغییر می کند‪ .‬اگر لوتئولین است به عالوه جایگزین‪ ،‬را موقعیت از‬
‫آن ‪ NMR‬جایگزینی از ناپدید شدن یکی از شش سیگنال مشخص است‪ .‬تامبولتین (نگاه کنید به متن) ‪ 8‬ج‪UU‬ایگزین است و طیف‬
‫‪.‬از این نظر مشابه است منطقه به لوتئولین بجز که را دوتایی عالمت در ‪ 6 6.5‬دارد ناپدید شد‬
‫‪28‬‬ ‫روش از مرحله که در‬ ‫‪dHdlJ5f5‬‬
‫‪).‬دیدن ش‪UU‬کل‪ ò) (1.7 .‬بین ‪ 6‬تا ‪ (7.5‬توسط‪ U‬پروتون های متصل به هسته فالون نشان داده شده است‬
‫‪).‬آل‪ et 1971 ،.‬هاربورن‪ (U‬بدین ترتیب‪ ،‬را رنگدانه بود به وضوح‪ U‬آ گلیکوزید‪ ،‬نه یک آگلیکون‬
‫است ممکن است‪ ،‬به دلیل وجود‪ U‬مقادیر کم ‪ NMR‬تشخیص سیگنال های اتم های کربن در دستگاه‬
‫(حدود ‪ )٪1.1‬کربن ‪ 13‬همراه با کربن ‪ 12‬در مواد طبیعی‪ U‬گیاهی‪ .‬مغناطیس‪U‬ی‪ U‬کوچک‪UU‬تر‪ U‬لحظ‪UU‬ه تولی‪UU‬د‬
‫در مقایسه با یک پروتون به این معنی است که سیگنال خیلی ضعیف تره فقط از زم‪UU‬ان ‪C‬شده توسط‪3' U‬‬
‫تبدیل‪ U‬شده اس‪UU‬ت‪ .‬متحد در ‪ C-NMR‬پالسی و آنالیز تبدیل‪ U‬فوریه به طیف‌سنجی ‪ NMR‬پیشرفت های فنی‬
‫م‪U‬ورد‪ NMR U‬دسترس و حتی با اینها پیشرفت ها‪ ،‬بیشتر‪ U‬اب‪U‬زار زم‪U‬ان ممکن است نس‪U‬بت ب‪U‬ه پروت‪U‬ون‬
‫نیاز است‪ .‬این روش به طور‪ U‬گسترده ای در تجزیه و تحلیل ساختاری‪ U،‬اگر چه نیاز به یک نمونه وزن‬
‫در مورد‪ 10 U‬میلی گرم است هنوز آ توضيحات‬
‫‪L‬‬
‫رزونانس‪ U‬بسیار بیشتر ‪ 3C‬استفاده می شود‪ ،‬اما محدوده ‪ NMR‬حالل های مشابهی مانند پروتون‪U‬‬
‫ب‪UU‬رای تش‪UU‬دید پروت‪UU‬ون‪ ppm U.‬در مقایسه با محدوده ‪ TMS 10-0‬پایین فیلد از ‪ ppm‬است‪ ،‬یعنی‪200-0 U‬‬
‫بسیار‪ U‬تفکیک‌شده‌تر هستند و در بیشتر موارد‪ ،‬هر کربن در داخل را ‪ NMR‬طیف‌های ‪، "C-‬بنابراین‬
‫مولکول (دیدن شکل‪ )1.8 .‬می توان بودن اختصاص داده به آ جداگانه‪ ،‬مجزا عالمت‪ .‬مانند با پروتون‬
‫اتم های کربن جایگزین متفاوتی‪ U‬دارند ایجاد تغییرات در محدوده ‪)،‬به جدول ‪ 1.4‬مراجعه کنید( ‪NMR‬‬
‫معطر ‪ ppm‬های خاص‪ .‬به عنوان مثال‪ ،‬اتم های ک‪UU‬ربن آلیفاتی‪UU‬ک می دهند تغییر می کند بین ‪ 0‬و ‪40‬‬
‫کربن ها بین ‪ 110‬و ‪150‬‬
‫‪ ppm‬و کتونیک کربن ها بین ‪ 160‬و ‪ppm 230‬‬
‫‪l‬‬
‫و ت‪UU‬رکیب این دو تکنی‪UU‬ک بس‪U‬یار ‪ NMR‬طیف سنجی اساس‪UU‬ا است مکمل ب‪UU‬ه پروت‪UU‬ون ‪3C-NMR‬‬
‫قدرتمند‪ U‬است به معنای از ساختاری روشنگری برای جدید ترپنوئیدها‪ U،‬آلکالوئی‪UU‬دها‪ U‬یا فالونوئی‪UU‬دها‪ U‬آی‬
‫تی است مفید که در را تحلیل و بررسی از گلیکوزیدها‪ U‬که در نشان می دهد را‬

‫‪39.7‬‬
‫‪201.5‬‬
‫‪119.9‬‬
‫‪132.5‬‬
‫‪29.2‬‬ ‫‪110.9‬‬
‫‪77.2‬‬
‫‪125.0‬‬ ‫‪130.6 70.‬‬ ‫‪154.8‬‬
‫‪132.7‬‬
‫‪09.6 106.9‬‬ ‫‪OH‬‬
‫‪147.4‬‬ ‫‪147.4‬‬
‫‪103.2‬‬
‫‪1‬‬

‫‪101.3‬‬

‫برای‪ U‬موارد مختلف تغییر می کند کربن اتم ها در مولکول آلکالوئید اسپیرو )‪ ppm‬بر حسب( ‪ TMS‬شکل ‪ 1.8‬کربن‪ 13-‬نسبت به‬
‫‪ sibirica (Fumariaceae).‬بنزیلیزوکینولین سیبیریسین از کوریدالیس‬
 ‫مواد و روش ها از شناسایی‬ ‫‪29‬‬

‫ب‪UU‬ا م‪UU‬وفقیت در ‪ C-NMR‬ارتب‪UU‬اط بین قطع‪UU‬ات قن‪UU‬د و پیکربن‪UU‬دی‪ U‬آنه‪UU‬ا هم پروت‪UU‬ون و هم "ان‪UU‬دازه گ‪UU‬یری‬
‫ساختارهای ساختاری‪ U‬استفاده شده است سایر تجزیه و تحلیل های پروتئین ه‪UU‬ا و س‪UU‬ایر م‪UU‬اکرومولکول‪U‬‬
‫گیاه ‪ %e‬طیف سنجی باهوش برای ها (نگاه کنید به جونز‪ .)1980 ،‬آنجا است نه ساده راهنما به‬
‫دانشمند‪ U‬با این حال‪ ،‬آثار زیادی‪ U‬وجود دارد که با کاربرد‪ U‬آن در ارتباط هستند شیمی آلی (به عنوان مثال‬
‫‪).‬به عنوان مثال جیمز‪ istry (75 19 ،‬جکمن‪1959 U،‬؛ شاینمن‪ )1970 U،‬یا به بیوشیمی‪U‬‬
‫تبیین طبیعی محصوالت گیاهی به طور ‪ stmc-‬در ‪ NMR‬در دهه گذشته‪ ،‬استفاده از طیف سنجی‬
‫قابل توجهی پیشرفت کرده است‪ .‬این دارد از طریق تولی‪U‬د طیف‌ه‪U‬ای ب‪U‬ا وض‪U‬وح ب‪U‬اال ب‪U‬ا اس‪U‬تفاده از ت‪U‬وان‬
‫)هس‪UU‬ته ای ‪ Overhauser‬اثر( ‪ NOE‬بیشتر ساز و ساز و از طریق توسعه اضافی رویه ها ب‪UU‬ه عن‪UU‬وان‬
‫بسیاری‪ U‬از ‪ (&rom, 1986).‬و غیره ‪. CDSY، NOESY، INEPT، DEPT‬تعیین شده است‬
‫سازه های پیچیده بوده است با استفاده از این تکنیک ها ح‪U‬ل می ش‪U‬ود‪ .‬عالوه ب‪UU‬ر این‪ ،‬کریس‪U‬تالوگرافی‬
‫‪.‬اشعه ایکس دارای برای تجزیه و تحلیل ساختاری کامل به آسانی قابل دسترس است چنین مولکول ها‬

‫شاخص برای فیتوشیمیایی کاتیون های تیفی را شناسایی کنید ‪1.4.6‬‬

‫همانطور که قبال ذکر شده در باال‪ ،‬آ شناخته شده ترکیب کشف شده که در آ منبع گیاهی جدید را می‬
‫‪ aulentic.‬بر اساس کروم‪UU‬اتوگرافی و شناس‪UU‬ایی ک‪UU‬رد مقایس‪UU‬ه طیفی ب‪UU‬ا ماکس‪UU‬یال ‪ %e‬توان بر اساس‬
‫‪ B‬ب‪UU‬ه ض‪UU‬میمه( نمونه های معتبر ممکن است باشد تجاری به دست آمده است از یک شرکت ت‪UU‬امین کنن‪UU‬ده‬
‫توسط دوب‪UU‬اره انزوا از ج‪UU‬انب آ ش‪UU‬ناخته ش‪UU‬ده منبع ی‪UU‬ا‪ ،‬ب‪UU‬ه عن‪UU‬وان یک آخر توس‪UU‬ل‪)، ،‬مراجعه کنید‬
‫توسط‪ U‬درخواست‪ U‬از جانب یعنی وینتیستی‪ U‬که در ابتدا آن را منزوی و توصیف‪ U‬کردم ‪ .‬وسعت مقایسه‬
‫با توجه به کالس موجودات مرکب واکسی ها مطالعه شده است‪ ،‬اما به عن‪U‬وان ی‪U‬ک اص‪U‬ل کلی‪ ،‬مطل‪U‬وب‬
‫است که از معیارهای بسیاری‪ U‬استفاده شود تا ج‪UU‬ایی ک‪UU‬ه ممکن است ب‪UU‬رای اطمین‪UU‬ان از درس‪UU‬تی‪ U‬شناسه‬
‫‪(.‬دیدن جدول ‪)1.5‬‬
‫ووماتوگرافی مقایسه باید روشن باشد ‪ñ‬‬ ‫کروماتوگرافی مشترک ترکیب‬
‫مبنای اصلی مقایسه باشد‪ ،‬سپس ‪ TLC‬با مواد معتبر‪ ،‬بدون جداسازی‪ ،‬حداقل در چهار سیستم اگر ‪%e‬‬
‫و ) و س‪UU‬یلیکاژل‪ cePulose U‬مانند( هس‪UU‬تند مزای‪UU‬ای آش‪UU‬کار در اس‪UU‬تفاده از ج‪UU‬اذب ه‪UU‬ای مختلف ‪%ere‬‬
‫همچنین حالل ه‪U‬ای مختل‪U‬ف روی ی‪U‬ک ج‪U‬اذب (ج‪U‬دول ‪ .)1.5‬در ص‪UU‬ورت امک‪UU‬ان ‪ ،‬مقایس‪UU‬ه ناش‪UU‬ناخته و‬
‫‪ GLC‬استاندارد بر اساس مطلوب است سه معیار کروماتوگرافی مجزا‪ ،‬به عنوان مثال با زمان ماند توسط‬
‫‪ ele ctrophoresi s.‬و تحرک نسبی روشن ‪ TLG‬و ‪ PC‬روی‪ Rp U‬یا با ‪ TLC‬روی ‪ A،‬و ‪ HPLC‬و‬
‫باید هر جا که ممکن باشد پذیرفته شود‪ .‬در ح‪UU‬الت ای‪UU‬ده ‪ sh‬دوباره‪ ،‬برای مقایسه طیفی‪ ،‬دو یا چند روش‬
‫‪.‬طیف باید همه بودن مقایسه کرد ‪ 'H-NMR‬و ‪، UV، IR، MS‬آل‬
‫اوره در اساس اندازه گیری ه‪UU‬ای طیفی و ‪ mct‬با جدید گیاه مواد‪ ،‬آی تی است معموال ممکن است به تاسيس كردن را سنت‬
‫در ب‪UU‬ا من سلس‪UU‬له‪ .‬تائیدیه از ‪ nown‬ترکیب‪UU‬ات ‪ k‬س‪UU‬اخته ش‪UU‬ده ب‪UU‬ر روی ‪ %ose‬کروماتوگرافی‪ ،‬به خص‪UU‬وص در رابط‪UU‬ه با‬
‫ساختار ممکن است بودن ممکن است توسط شیمیایی‬
‫‪30‬‬ ‫روش از گیاه تحلیل و بررسی‬

‫جدول ‪ 1.5‬را نوع از شاخص مورد نیاز است برای را شناسایی از شناخته شده گیاه باهم دانش آموزان را شناسایی از ‪-6‬هیدروکسی‬
‫لوتئولین ‪-7‬متیل اتر که در برگها از کروکوس‬

‫معیار‬ ‫ویژگی ثبت شده‬

‫فیزیکی خواص ‪1.‬‬ ‫‪، mp 245-6°C‬رنگ زرد پودر‬

‫مولکولی فرمول توسط ام اس ‪2.‬‬ ‫‪ C " H 1 2 O 7‬یافت ‪ r io n 316.0574‬مولکول‬
‫نیاز دارد ‪316.0582‬‬
‫‪3.‬‬ ‫ام‌اس تکه تکه شدن الگو‬ ‫قطعه یون توسط دی متیالسیون در‬
‫‪.‬و غیره ‪)،‬نیاز دارد ‪301.0344 (C"WO، 301.0345‬‬
‫‪4. UV‬‬ ‫طیفی خواص (و تغییر می کند با‬ ‫‪.‬ماکسیما در ‪ 346 ،273 ،254‬نانومتر‪ ،‬و غیره‬
‫قلیایی و غیره)‬
‫‪5.‬‬ ‫بشقاب ‪ TLC‬رنگ بر‬
‫رنگ زرد که در نور روز‬
‫‪ N H 3‬من ‪ UV‬قهوه ای تیره که در‬
‫بر سلولز ‪6. TLC‬‬
‫)‪ a-BuOH-HOAc- H2 ** (4: 1 : 5‬فی‪ 0.73 ،‬که در‬
‫‪% HOAc‬که در ‪R، 0.59 50‬‬
‫)‪ CHCl، - HOAc- H 2 O (90: 45: 6‬که در ‪R، 0.67‬‬
‫بر پلی آمید ‪7. TLC‬‬
‫‪ C 6 H 6- MeCOEt- MeOH‬آر اف ‪ 0.36‬که در‬
‫)‪(4: 3: 3‬‬
‫شیمیایی تبدیل ‪8.‬‬
‫د متیالسیون با پیریدینیم کلرید‬
‫به ‪-6‬هیدروکسی ‪ 1‬یوتولین‬

‫تبدیل به یک ترکیب شناخته شده در یک زمان‪ ،‬یک مرحله ضروری در شناسایی ساختاری تع‪UU‬یین شد از فرم‪UU‬ول مولک‪UU‬ولی‬
‫با تجزیه و تحلیل میکرو‪ ،‬حداقل با تعیین کربن‪ ،‬هیدروژن‪ .‬چنین ریز آنالیز هنوز بسیار مطلوب است‪ ،‬ام‪UU‬ا زم‪UU‬انی ک‪UU‬ه تنه‪UU‬ا‬
‫میکروگرم از مواد موجود هستند‪ ،‬می توان از اندازه گیری دقیق جرم استفاده کرد یون مولکولی‪ ،‬تعیین شده توسط طی‪UU‬ف س‪UU‬نجی‬
‫‪،‬جرمی (به بخش ‪ 1.4.4‬مراجعه کنید و جدول ‪ .)1.5‬مشتق سازی است همچنین با ارزش با جدید ترکیبات‬
‫به عنوان مثال تهیه استات ها‪ ،‬متیل اترها و غیره از زمان تجزیه و تحلیل آنها تایید مفیدی از فرمول مولکولی اصلی ارائ‪UU‬ه‬
‫می دهد ماده‬

‫تحلیل و بررسی از نتایج ‪1.5‬‬

‫‪1.5.1‬‬ ‫کیفی تحلیل و بررسی‬

‫تجزیه و تحلیل گیاهی زیادی به جداسازی و شناسایی بخش های مختلف اختصاص داده شده است‪ .‬اجزای تشکیل دهنده آن‪UU‬دری در‬
‫یک گونه خاص یا گروهی از گونه ها با انتظ‪UU‬ار این اس‪U‬ت ک‪U‬ه ب‪U‬رخی از اج‪U‬زای تش‪U‬کیل دهن‪UU‬ده ممکن اس‪U‬ت ب‪UU‬دیع ی‪U‬ا غیرع‪U‬ادی باش‪U‬ند‬
‫ساختار که در چنین موارد‪ ،‬آی تی است مهم به تشخیص که زیاد از را بیشتر‬
 ‫نتایج‬ ‫‪Ann/ysis‬‬ ‫‪31‬‬
‫اجزای به راحتی جدا شده یا معموالً وجود‪ U‬دارند یا جه‪UU‬انی هس‪UU‬تند در وق‪UU‬وع‪ U.‬س‪UU‬اکارز ممکن اس‪UU‬ت از‬
‫یک گیاه آبی متبلور شود کنسانتره و سیتوسترول از کسر فیتوسترول‪ U.‬جالب تر اجزاء هستند غالبا آن‬
‫ها حاضر که در پایین تر مقادیر‬
‫هنگامی که یک س‪UU‬اختار ظ‪UU‬اهرا جدی‪UU‬د ب‪UU‬ه دس‪UU‬ت آم‪UU‬ده اس‪UU‬ت‪ ،‬الزم است به دقت بررس‪UU‬ی کنی‪UU‬د ک‪UU‬ه قبال‬
‫گزارش نشده باشد‪ .‬مرجع ممکن است ب‪UU‬ه مجموع‪UU‬ه ه‪UU‬ای مختل‪UU‬ف ادبی‪UU‬ات موج‪UU‬ود‪( U‬مثالً فرهن‪UU‬گ لغت‬
‫‪ Chemical Abstracts‬آلکالوئیدها‪ ،‬ساتون و باکینگهام‪ )1989 ،‬اما ی‪U‬ک جس‪UU‬تجوی ک‪UU‬امپیوتری در‬
‫نیز مطلوب اس‪UU‬ت‪ .‬به‪UU‬ترین منب‪UU‬ع اطالع‪UU‬ات در م‪UU‬ورد محص‪UU‬والت ط‪UU‬بیعی ش‪UU‬ناخته ش‪UU‬ده دیکش‪UU‬نری است‬
‫طبیعی محصوالت‪( U‬باکینگهام‪ .)1994 ،‬این به هفت جلد‪ ،‬با سه ضمیمه بعد‪ ،‬اجرا می شود در دس‪UU‬ترس‬
‫‪.‬مانند آ سی دی رام‬
‫انگیزه دیگر برای تجزیه و تحلیل فیتوشیمیایی‪ ،‬تعیین خصوصیات یک اصل فع‪UU‬ال مس‪UU‬ئول ب‪UU‬رخی‬
‫از اثرات سمی یا مفید نشان داده شده است توس‪U‬ط ی‪UU‬ک عص‪U‬اره گی‪U‬اهی خ‪UU‬ام هنگ‪U‬امی ک‪U‬ه در براب‪U‬ر ی‪UU‬ک‬
‫سیس‪UU‬تم زن‪UU‬ده آزم‪UU‬ایش می ش‪UU‬ود‪ .‬در اینگون‪U‬ه‪ U‬م‪UU‬وارد‪ ،‬نظ‪UU‬ارت ب‪UU‬ر مراح‪UU‬ل اس‪UU‬تخراج و جداس‪UU‬ازی‪ U‬در آن‬
‫ضروری است در هر مرحله به منظور‪ U‬دنبال کردن ماده فعال به عنوان خالص شده اس‪UU‬ت‪ .‬را فع‪UU‬الیت‬
‫گاهی اوقات می تواند ناپدید شدن در طول شکنش‪ ،‬به دلیل پایداری آن و ی‪UU‬ک ت‪UU‬رکیب کریس‪UU‬تالی خ‪UU‬الص‬
‫ممکن است در نهایت به دست آید که فاقد آن باشد فعالیت عصاره اصلی احتمال آسیب به اکتیو اص‪UU‬ل در‬
‫طول انزوا و شخصیت پردازی‪ U‬باید همیشه رعایت شود ذهن‬
‫به همین ترتیب‪ ،‬آی تی است ضروری‪ U‬است به پی بردن که را تولید از مصنوعات است‬
‫ویژگی مشترک آنالیز گیاهی بسیاری از ترکیباتی‪ U‬که رخ می دهد در بافت های گیاهی ک‪UU‬امالً ناپای‪UU‬دار‪U‬‬
‫هستند و تقریبا ً به طور‪ U‬اجتناب ناپذیری‪ U‬ممکن است دچار آن شوند‪ U‬تغییر در ط‪UU‬ول اس‪UU‬تخراج رنگدان‪UU‬ه‬
‫های پالستید‪ ،‬کلروفیل ها و کاروتنوئیدها‪ ،‬مستعد هستند به اصالح در ط‪UU‬ول کروم‪UU‬اتوگرافی (فص‪UU‬ل ‪3‬‬
‫و ‪ 4‬را ببینید)‪ .‬همه گلیکوزیدهای گیاهی در معرض هیدرولیز هستند‪ ،‬یا آنزیمی یا غیر آن‪UU‬زیمی‪ ،‬در حین‬
‫ان‪UU‬زوا‪ ،‬در ح‪UU‬الی که اس‪UU‬ترها ممکن است در حض‪UU‬ور‪ U‬حالل ه‪UU‬ای الکلی‪ ،‬ت‪UU‬رانس استریفیکاس‪UU‬یون می‬
‫ش‪UU‬وند‪ .‬را ترپن‌ه‪UU‬ای ف‪UU‬رار‪ U‬مس‪UU‬تعد بازآرایی‌ه‪UU‬ای مولک‪UU‬ولی هس‪UU‬تند تقط‪UU‬یر ب‪UU‬ا بخ‪UU‬ار (فص‪UU‬ل ‪ )3‬و‬
‫فعال نوری مواردی ممکن است رخ دهد‪ ،‬مگر اینکه اقدامات احتیاطی‪ U‬خاصی انجام ‪racemization‬‬
‫شود‪ .‬از نو‪ ،‬پروتئین ها ممکن است در طی مراحل جداسازی‪ U‬در معرض حمل‪UU‬ه پروتئ‪UU‬از‪ U‬ق‪UU‬رار گیرند‪U‬‬
‫‪(.‬فصل ‪)7‬‬
‫عالوه بر این‪ ،‬مصنوعات ممکن است ناخواسته از آزمایشگاه معرفی شوند تجهیزات تی در حین تطهیر‪U‬‬
‫را اکثر مشترک افزودنی است بوتیل‪ U‬ایزوفتاالت که نرم کننده ای است که تقریب‪U‬ا ً همیش‪UU‬ه گی‪UU‬اه را آل‪UU‬وده می‬
‫منش‪U‬اء ‪ o‬کند استخراج اس‪ .‬علیرغم وجود‪ U‬آن در واق‪U‬ع ب‪U‬ه عن‪U‬وان ی‪U‬ک ت‪U‬رکیب‪ U‬گی‪U‬اهی گ‪U‬زارش ش‪U‬ده است‬
‫‪ lS Olation.‬آشکار از یک بطری شستشوی پالستیکی که توسط اپراتور در طول مدت استفاده می ش‪UU‬ود‬
‫برای اجتناب از مصنوعات‪ ،‬الزم است که خام اولیه را بررسی کنید عص‪UU‬اره گی‪UU‬اه ب‪UU‬رای دی‪UU‬دن اینک‪UU‬ه آی‪UU‬ا‬
‫‪.‬یک ترکیب تنها پس از تصفیه گسترده جدا شده است یا خیر یون است در حقیقت حاضر آنجا‬
‫‪32‬‬ ‫روش از گیاه تحلیل و بررسی‬

‫کمی تحلیل و بررسی ‪1.5.2‬‬

‫به همان اندازه که اندازه گیری های کیفی روی عصاره گیاه مهم است تعیین مقادیر اجزای موجود در س‪U‬اده ت‪UU‬رین ح‪U‬الت روش‪ ،‬داده‬
‫های کمی را می توان با وزن کردن مقدار به دست آورد مواد گیاهی در ابتدا استفاده ش‪UU‬ده (ب‪UU‬ا ف‪UU‬رض ب‪UU‬افت خش‪UU‬ک ش‪UU‬ده) و مق‪UU‬دار‬
‫محصول به دست آمده چنین بازدهی به عنوان درصدی از کل ی‪UU‬ک خواه‪UU‬د ب‪UU‬ود ح‪UU‬داقل رقم ک‪UU‬اتیون تلف‪UU‬ات را می ت‪UU‬وان ب‪UU‬ا اض‪UU‬افه‬
‫کردن وزن شناخته شده زیر خالص تخمین زد‪ .‬موضع به عصاره خام‪ ،‬تکرار تصفیه و تعیین مقدار بازیافت ش‪UU‬ده اگ‪UU‬ر ب‪UU‬افت ت‪UU‬ازه‬
‫استخراج شود‪ ،‬تبدیل عامل (بیشتر برگ های گیاه ‪ 90‬درصد آب است) مورد نیاز است عن‪U‬وان ک‪U‬ردن نتیج‪U‬ه ب‪U‬ه عن‪U‬وان درص‪U‬د ‪ -‬سن‬
‫‪.‬خشک وزن‬
‫کمی اندازه گیری ها می توان نیز باشد انجام شده بر خشک شده‪ ،‬پودر شده‬
‫مواد گیاهی برای تعیین محتوای کل قند‪ ،‬نیتروژن‪ ،‬پروتئین‪ ،‬فنل‪ ،‬تانن و غیره‪ .‬برخی از روش هایی که می ت‪UU‬وان از آنه‪UU‬ا اس‪UU‬تفاده‬
‫کرد بودن ذکر شده ک‪UU‬ه در بعد فص‪UU‬ل ها چ‪UU‬نین روی‪UU‬ه ها هس‪UU‬تند مس‪UU‬ئول به خطا ناش‪UU‬ی از به دخ‪UU‬الت از ج‪UU‬انب دیگر اج‪UU‬زاء‬
‫حاضر‪ .‬چه چنین بازداشتن‪ -‬مین گذاری دارند بسیار ارزش که در مقررات از‪ ،‬ب‪UU‬رای مث‪UU‬ال‪ ،‬را م‪UU‬یزان از گی‪UU‬اه خ‪UU‬واری آ خ‪UU‬اص‬
‫‪.‬گیاه عضو رنج می برد نیاز دارد به بودن ارزیابی شد‬
‫در حالت ایده آل‪ ،‬که در کمی اندازه گیری ها را مقادیر از را شخصی‬
‫‪ HPLC‬یا ‪ GLC‬اجزای درون یک کالس خاص از اجزا باید تعیین شوند و این در حال حاضر به راحتی توسط‬ ‫به دس‪UU‬ت می آی‪UU‬د‪.‬‬
‫مقادیر چرب اسیدها مقید شده است خنثی گیاه لیپی‪U‬دها می توان‪U‬د‪ ،‬ب‪U‬رای مث‪UU‬ال‪ ،‬ب‪U‬ودن مش‪U‬خص ب‪U‬ه روش‪UU‬ی ک‪UU‬امالً تکرارپ‪U‬ذیر پس از‬
‫ان‪UU‬دازه ‪، HPLC‬ش‪UU‬بیه لری ‪).‬فص‪UU‬ل ‪ GLC (4‬صابون سازی‪ ،‬متیل استر برای جفت گیری و کمی سازی متی‪UU‬ل اس‪UU‬ترها توسط‬
‫گیری ها می توان مورد استفاده قرار گیرد برای تعیین مقادیر از فالونوئید رنگدانه ها در ارقام و ژنوتیپ های مختلف از باغ گ‪UU‬ل ها‬
‫‪(.‬فصل ‪)2‬‬
‫اهمیت تکرار اندازه گیری ها به گونه ای که بتوان آنها را دید معنی دار بودن از نظر آماری واضح است اما همیشه قابل قدردانی‬
‫نیست‪ .‬تغییر در مقادیر ناشی از محیط زیست پارامترها باید حذف شوند و نمونه برداری باید در رابطه با سن و منش‪UU‬اء گی‪UU‬اه در نظ‪UU‬ر‬
‫گرفته شود‪ .‬راهنمایی بر اینها مسائل هستند در دسترس که در اکثر مدری گیاه متن ها‬

‫برنامه‪ U‬های کاربردی ‪1.6‬‬

‫عمومی ‪1.6.1‬‬
‫در حالی که روش های فیتوشیمیایی‪ U‬امروزه نقش ثابتی در عم‪UU‬ل دارن‪UU‬د‪ .‬فراخ‪UU‬وانی‪ U‬همه ش‪UU‬اخه ها از گی‪UU‬اه‬
‫عل‪UU‬وم پای‪UU‬ه‪ ،‬این دارد نه همیشه ب‪UU‬وده بن‪UU‬ابراین‪ .‬ب‪UU‬ا اينكه این روش ه‪UU‬ا ب‪UU‬دیهی اس‪UU‬ت ک‪UU‬ه در تم‪UU‬ام م‪UU‬واد‬
‫شیمیایی‪ U‬و بیوشیمیایی‪ U‬ضروری‪ U‬هستند مطالعات‪ ،‬کاربرد آنه‪UU‬ا در ح‪UU‬وزه ه‪UU‬ای ک‪UU‬امالً بیول‪UU‬وژیکی‪ U‬فق‪UU‬ط‬
‫دارد بیا در داخل را آخر دو دهه ها زوج که در رشته ها بنابراین از راه دور از جانب‬
 ‫برنامه های کاربردی‬ ‫‪33‬‬

‫فیتوش‪UU‬یمیایی‪ palaeobotany، U‬آزمایشگاه شیمی به عنوان سیستماتیک‪ ،‬جغرافیای‪ U‬گیاهی‪ ،‬اکولوژی و‬

‫مواد و روش ها مهم شده اند برای حل‪ -‬انواع خاصی از مش‪UU‬کالت را ایج‪UU‬اد می کن‪UU‬د و ب‪UU‬دون ش‪UU‬ک در‬
‫‪.‬اینجا با آنها استفاده می شود افزایش می یابد فرکانس‪ U‬که در را آینده‬
‫وج‪UU‬ود دارد فق‪UU‬ط ات‪UU‬اق ک‪UU‬ه در این کت‪UU‬اب به اش‪UU‬اره آ تع‪UU‬داد کمی از را زی‪UU‬اد ک‪UU‬اربرد‪ -‬روش ه‪UU‬ای‬
‫فیتوشیمیایی برخی از برنامه های ک‪UU‬اربردی‪ U‬آش‪UU‬کار در کش‪UU‬اورزی‪ ،‬در تغذی‪UU‬ه و ص‪UU‬نایع غ‪UU‬ذایی و در‬
‫داروسازی‪ U‬تحقیق‪ U‬باید بدیهی‪ U‬تلقی شود‪ .‬برنامه های زیر به سادگی هستند برای نشان دادن ارزش تکنیک‬
‫‪.‬های فیتوشیمیایی‪ U‬در برخی از آنها ارائه شده است عمده شاخه ها از گیاه علوم پایه‬

‫‪1.6.2‬‬ ‫گیاه فیزیولوژی‬

‫سهم عمده مطالعات فیتوشیمیایی در ف‪UU‬یزیولوژی‪ U‬گی‪UU‬اهی ب‪UU‬دون ش‪UU‬ک در تع‪UU‬یین س‪UU‬اختارهای‪ U‬ش‪UU‬یمیایی‪،‬‬
‫بیوسنتزی هستند منشا و نحوه عملکرد هورمون های رش‪UU‬د ط‪UU‬بیعی در نتیجه ادام‪UU‬ه دارد همک‪UU‬اری ب‪UU‬ر‬
‫فراز‪ U‬را سال ها بین فیزیولوژیست ها و فیتوشیمیدانان‪ ،‬پنج دسته از تنظیم کننده های رشد در حال حاضر‬
‫ک‪UU‬ه ‪ tion،‬شناخته شده اند‪ :‬اکسین ها‪ ،‬سیتوکینین ها‪ ،‬آبسیزین ها‪ ،‬جیبرلین ها و اتیلن‪ .‬روش های تشخیص‬
‫متفاوت است‪ ،‬در ادامه مورد‪ U‬بحث قرار خواهد گرفت صفحات به شرح زیر ‪ PC‬تا ‪ TLC‬تا ‪ GLC‬از‬
‫است‪ :‬اکسین ها (ص ‪ ،)218‬سیتوکینین‪ U‬ها (ص ‪ ،)226‬آبسیسین ها (ص ‪ )122‬و جیبرلین ه‪UU‬ا (ص ‪.)127‬‬
‫یکی از قابل توجه‪ U‬ترین جنبه های جیبرلین‪ U‬گروه از هورم‪UU‬ون ها است را ب‪UU‬زرگ ع‪UU‬دد از ش‪UU‬ناخته‬
‫شده سازه های (بر فراز‪ U‬صد)‪ ،‬ظاهراً همه با طی‪UU‬ف مش‪UU‬ابهی‪ U‬از خ‪UU‬واص رش‪UU‬د‪ .‬نی‪UU‬از ب‪UU‬ه روش ه‪UU‬ای‬
‫ب‪UU‬رای آنها ‪ GC—MS‬بسیار دقیق تش‪UU‬خیص و تم‪U‬ایز‪ U‬بین جی‪UU‬برلین ها ره‪UU‬بری ب‪U‬ه توس‪U‬عه از ت‪UU‬رکیب‬
‫تحلیل و بررسی‪ .‬کتاب کلی در مورد روش های جداسازی رشد گیاه مواد‪ ،‬ویرایش‪ U‬شده توس‪UU‬ط‪ U‬هیلمن‬
‫(‪ ،)1978‬می تواند برای اطالعات بیشتر مورد‪ U‬مشورت ق‪UU‬رار گ‪UU‬یرد‪ .‬دم الزام‪UU‬ات الزم ب‪UU‬رای تجزی‪UU‬ه و‬
‫تحلیل‪ U‬دقیق هورمونی بسیار مهم است‪ .‬توسط‪ U‬ریو و کروزی‪UU‬ر (‪ )1980‬م‪UU‬ورد‪ U‬توج‪UU‬ه ق‪UU‬رار گ‪UU‬رفت‪ .‬ی‪UU‬ک‬
‫است ‪ Horgan‬بررس ‪U‬ی‪ U‬ع‪UU‬الی از تکنی‪UU‬ک ه‪UU‬ا‪ ،‬از جمل‪UU‬ه اس‪UU‬تفاده از روش رادی‪UU‬و ایمونواس‪UU‬ی‪ ،‬روش‬
‫یک ششم کالس رشد تنظیم‪ U‬کننده ش‪UU‬رح داده ش‪UU‬ده ب‪UU‬ه ت‪UU‬ازگی هس‪UU‬تند را براسینوس‪UU‬تروئیدها؛ ‪(1S81).‬‬
‫‪.‬مواد و روش ها از استروئید‪ U‬تحلیل و بررسی‪ U‬هستند داده شده بر پ‪134 .‬‬

‫‪1.6.3‬‬ ‫گیاه آسيب شناسي‬

‫تکنی‪UU‬ک ه‪UU‬ای فیتوش‪UU‬یمیایی در درج‪UU‬ه اول ب‪UU‬رای آس‪UU‬یب ش‪UU‬ناس مهم هس‪UU‬تند خصوص‪UU‬یات ش‪UU‬یمیایی‬
‫فیتوتوکسین ها (محصوالت سنتز میکروبی پایان نامه تولید شده در گیاه‪UU‬ان ع‪UU‬الی هنگ‪UU‬ام ته‪UU‬اجم توس‪UU‬ط‬
‫محصوالت‪ U‬متابولیسم گیاهی باالتر که در پاسخ تش‪UU‬کیل می ش‪UU‬وند ب‪UU‬ه( باکتری های قارچ) و فیتوالکسین ها‬
‫طی‪UU‬ف وس‪UU‬یعی‪ U‬از س‪UU‬اختارهای ش‪UU‬یمیایی مختل‪UU‬ف درگ‪UU‬یر هس‪UU‬تند در ه‪UU‬ر دو م‪UU‬ورد‪ TiiCrobial ). .‬حمله‬
‫آشناترین فیتوتوکسین ها لیکوماراسمین و فوزاریک هستند اس‪UU‬ید‪ ،‬مش‪UU‬تقات اس‪UU‬ید آمین‪UU‬ه ک‪UU‬ه عوام‪UU‬ل پژم‪UU‬رده‬
‫کننده در گوجه فرنگی هستند‪ .‬دیگر سموم‪ U‬که دارند بوده جدا شده هستند گلیکوپپتیدها‪ ،‬نفتاکینون ها یا‬

‫‪،‬فی‬
‫‪34‬‬ ‫روش از یالنت تحلیل و بررسی‬

‫‪sesquiterpenoids (Durbin، 1981).‬‬ ‫برخی از فیتوتوکسین ها از نظر شیمیایی حساس‪ U‬هستند به طوری ک‪UU‬ه‬
‫‪.‬در هنگام جداسازی آنها باید احتیاطات خاصی صورت گیرد شناسایی‬
‫ممکن منسفیلد‪ .)1982 ،‬آنها فیتوالکسین ها همچنین دارند ناهمسان سازه های‪ ،‬با توجه به را گیاه منبع (بیلی و‬
‫ریشیتین( ‪ sesquiterpenoid‬است بودن‬ ‫از‬ ‫‪Solanum‬‬
‫ایزوفالوانوئید ‪tuberosum)،‬‬ ‫پیزاتین از(‬ ‫پیسوم‬
‫یا "فنولیک" (اورچینول از جانب ارکیز میلیتریس)‪ .‬شناسایی ها از )فابا ‪ Vicia‬وایرون اسید از( استیلنیک ‪s«iirum)،‬‬
‫ایزوفالوانوئیدها و استیلن ها هستند شرح داده شده که در فصل ها ‪ 2‬و ‪ 5‬به ترتیب و آ روش برای فیتوالکسین القاء است‬
‫مشمول مانند آ کاربردی آزمایش که در فصل ‪ .2‬مواد "پیش عفونی"‪( .‬طبیعی است ثانویه رخ می دهد اجزای تشکیل دهنده)‬
‫در نظر گرفته شده اند توسط برخی گیاه آسیب شناسان مهم بودن در انتقال بیماری مقاومت به گیاهان فنولیک ترکیبات‪ ،‬چنین‬
‫مانند فلوریدزین در سیب‪ ،‬تانن که در تمشک‪ ،‬هستند به طور عمده دخیل است اینجا‪ .‬مواد و روش ها از شناسایی از چنین‬
‫ترکیبات هستند تحت پوشش که در جزئیات که در فصل ‪ .2‬دیگر مثال ها از گیاه ترکیبات که دارند بوده مشخص شده‬
‫است مانند فیتوالکسین ها یا پیش عفونی مواد می توان بودن یافت که در را مرور از‬
‫‪.‬خاکستری و هاربوم (‪)1994‬‬

‫گیاه بوم شناسی ‪1.6.4‬‬

‫دو پژوهش مناطق جایی که ثانوی گیاه اجزای تشکیل دهنده هستند قابل توجه که در اکولوژی گیاهی در تعامالت گیاه‪-‬حیوان و گیاه‪-‬‬
‫گی‪UU‬اه اس‪UU‬ت‪ .‬آن‪UU‬ا‪ -‬مش‪UU‬کالت لیتی‪UU‬ک در ه‪UU‬ر دو م‪UU‬ورد ب‪UU‬ه دلی‪UU‬ل مح‪UU‬دودیت بس‪UU‬یار دش‪UU‬وار است مق‪UU‬دار م‪UU‬واد بیول‪UU‬وژیکی در اختی‪UU‬ار‬
‫فیتوشیمیدان‪ .‬برای به عنوان مثال‪ ،‬در پیگیری سرنوشت ترکیبات ثانویه در تغذیه حشرات روی گیاهان‪ ،‬الزم اس‪U‬ت ان‪UU‬دام ه‪U‬ای مختل‪U‬ف‬
‫‪.‬حشره را تجزیه و تحلیل کرد تا ببیند جایی که ترکیبات ذخیره می شوند؛ چنین تحلیل هایی اغلب پیچیده و زمان بر‬
‫ترکیباتی که تاکنون شناخته شده اند که در فعل و انفعاالت گیاه و حیوان نقش دارند در درجه اول آلکالوئی‪UU‬دها و گلیکوزی‪UU‬دهای‬
‫قلبی‪ ،‬گلیکوزیدهای روغن خردل‪ ،‬سیانوژن ها‪ ،‬استروئیدها یا ترپن های فرار‪ .‬ترکیبات گیاهی ممکن است متفاوت باشد به عنوان‬
‫جاذب تغذیه یا دافع عمل می کنند‪ ،‬اثرات هورمونی ب‪UU‬ر روی ب‪UU‬دن دارند حشرات و ی‪UU‬ا مکانیس‪UU‬م دف‪UU‬اعی مفی‪UU‬دی را در براب‪UU‬ر حش‪UU‬رات‬
‫‪.‬فراهم کنند شکار (هاربوم ‪)1993‬‬
‫فعل و انفعاالت گیاه‪-‬گیاه شامل مواد به اصطالح آللوپاتیک است که یک گیاه از ریشه یا برگ خود تراوش می کند ت‪UU‬ا از رش‪UU‬د آن‬
‫جلوگیری کند سایر گونه های گیاهی در مجاورت آن‪ .‬ترکیبات یا فرار هستند ترپن ها (به عنوان مثال سینئول) ی‪UU‬ا اس‪UU‬یدهای فنولی‪UU‬ک‬
‫ساده‪ ،‬بسته به اینکه آیا گیاه در حال رشد است در یک نیم‪UU‬ه گرمس‪U‬یری ی‪UU‬ا معت‪UU‬دل اقلیم‪ .‬را فیتوش‪UU‬یمیایی مطالع‪UU‬ه آللوپ‪U‬اتی می توان‪UU‬د‬
‫دشوار باشد زیرا نیاز دارد تعیین روی عصاره های برگ کامل‪ ،‬شیرابه ه‪U‬ای ط‪U‬بیعی ب‪U‬رگ و روی خ‪U‬اک نمون‪UU‬ه ه‪U‬ا ن‪U‬یز گ‪U‬ردش‬
‫‪.‬سریع احتمالی مواد فعال در خاک همچنین خطر تحلیلی دیگری در این زمینه فراهم می کند (پاتنام و تانگ‪)1986 ،‬‬
 ‫برنامه های کاربردی‬ ‫‪35‬‬

‫‪1.6.5‬‬ ‫گیاه بافت فرهنگ‬

‫فیتوشیمی نقش مهمی‪ U‬در کشت بافت گیاهی در تشخیص تجزیه و تحلیل محصوالت متابولیس‪UU‬م ثانوی‪UU‬ه ک‪UU‬ه‬
‫ممکن است باشد در چنین بافت هایی تشکیل می شود‪ .‬در طول کشت‪ ،‬غلظت ثانویه متابولیت ها ممکن‬
‫است بسته به هورمون‪ U‬های گیاهی اضافه شده متفاوت باشد‪ .‬وجود نور و عوامل دیگ‪UU‬ر در ب‪UU‬رخی م‪UU‬وارد‬
‫متابولیت ها تولید می شوند که در گیاهی که بافت از آن گرفته شده وجود‪ U‬ندارد‪ .‬برای به عنوان مث‪UU‬ال‪،‬‬
‫آنتوسیانین ها ممکن است در کشت گیاهانی تولید شوند‪ U‬که فاقد‪ U‬آن هستند رنگ سیانیک ترکیب‪UU‬ات فع‪UU‬ال‬
‫دارویی‪ U‬جدید ممکن است برای در کشت سلولی یا کالوس و تکنیک های فیتوشیمیایی‪ U‬خوبی ایج‪UU‬اد می‬
‫شود برای تشخیص آنها الزم است‪ .‬تولید چنین س‪U‬اختارهایی ممکن اس‪U‬ت الکی باشد م‪UU‬ورد اش‪U‬اره ق‪U‬رار‬
‫گرفت که در سلول فرهنگ توسط اضافه كردن باکتریایی یا ق‪UU‬ارچی س‪UU‬لول عص‪UU‬اره ها (اس‪UU‬تافورد و آزادی‬
‫‪.‬مشروط‪)1997 ،‬‬
‫برخی‪ U‬از متابولیت های ثانویه مانند آلکالوئیدها ممکن است در سلول تولید شوند کشت در مق‪UU‬ادیر بس‪UU‬یار‬
‫کم و تکنیک‌ه‪UU‬ای رادی‪UU‬و ایمونواسی ممکن اس‪UU‬ت ب‪UU‬رای تحلی‪UU‬ل آنه‪UU‬ا م‪UU‬ورد نی‪UU‬از باش‪UU‬د (زن‪UU‬ک و همک‪UU‬اران‪،‬‬
‫‪ .)1997‬یک سری عالی از نه جلد منتشر شده است ک‪UU‬ه ش‪UU‬رایط آزمایش‪UU‬ی را ش‪UU‬رح می دهد ثانوی تولی‪UU‬د ‪-‬‬
‫محصول‪ U‬سنتز که در سلول فرهنگ و مواد و روش ها از فیتوشیمی‪ U‬تجزیه و تحلیل کالری برای اک‪UU‬ثر‬
‫‪.‬گیاهانی که در کشت سلولی استفاده شده اند (باجاج‪)1996 ،‬‬

‫گیاه ژنتیک ‪1.6.6‬‬

‫در گذشته‪ ،‬فیتوشیمی به ژنتیک باالتر گیاهان کمک ک‪UU‬رده است ارائ‪UU‬ه اب‪UU‬زاری ب‪UU‬رای شناس‪UU‬ایی آنتوس‪UU‬یانین‪ ،‬فالون و کاروتنوئید رنگدان‪UU‬ه‬
‫های موجود در ژنوتیپ های رنگی مختلف گیاهان باغی‪ .‬را نتایج نشان داده است که اثرات بیوشیمیایی این ژن ها دارای الف س‪UU‬اده و‬
‫در این موجودات (آلس‪UU‬تون‪ .)1964 ،‬وراثت در گیاه‪UU‬ان دیگ‪UU‬ران وی‪UU‬ژگی ه‪UU‬ای ش‪UU‬یمیایی ‪ sis‬نش‪UU‬ان داده اند محتمل مس‪UU‬یر س‪UU‬نتز رنگدانه‪U‬‬
‫‪(.‬آلکالوئیدها‪ ،‬ترپن ها‪ ،‬و غیره) نیز با موفقیت انجام شده است نقشه برداری شده است بیرون توسط فیتوشیمیایی تحلیل و بررسی‬
‫سهم جدیدتر فیتوشیمی در ژنتیک در شناسایی گیاهان هیبری‪UU‬د و در روش‪UU‬ن س‪UU‬ازی ب‪UU‬ا روش ه‪U‬ای ش‪UU‬یمیایی آنها وال‪UU‬دین اص‪UU‬ل و نس‪UU‬ب‪.‬‬
‫فیتوشیمی دارد همچنین برنده شد افزایش می یابد به رسمیت شناختن‬
‫مانند آ مفید ابزار‪ ،‬با یکدیگر با سیتولوژی‪ ،‬به بودن استفاده شده که در را تحلیل و بررسی‪ U‬از‬
‫‪،‬ژنتیکی‪ U‬تغییر در داخل گیاه جمعیت ها (ر‪.‬ک‪ .‬هاربوم‪ U‬و ترنر‬

‫گیاه سیستماتیک ‪1.6.7‬‬

‫یکی از را اکثر به طور سریع در حال توسعه زمینه های که در فیتوشیمی در را‬
‫حاضر‬ ‫زمان است را ترکیبی انضباط بین علم شیمی و طبقه بندی‪ ،‬مانند بیوشیمیایی‪ U‬سیستماتیک‪U‬‬
‫صاحب‬ ‫یا شیمی تاکسونومی‪ U‬اساسا‪ ،‬آی تی است‬
‫ج نگران با را شیمیایی نظر سنجی از محصور گروه ها از گیاه‪ ،‬به طور عمده‬
‫‪36‬‬ ‫روش‬ ‫گیاه‬ ‫‪nnnlysis‬‬
‫برای اجزای ثانویه بلکه برای درشت مولکول ها و کاربرد‪ U‬یون از را داده ها بن‪UU‬ابراین ب‪UU‬ه دس‪UU‬ت آم‪UU‬ده‬
‫‪.‬به گیاه طبقه بندی (هاربوم و ترنر‪)1984 ،‬‬
‫شاید مفیدترین دسته از ترکیبات برای چنین مطالعه ای باشند فالونوئی‪UU‬دها بررس‪UU‬ی بس‪UU‬یاری از کالس‬
‫ه‪UU‬ای دیگ‪UU‬ر از ترکیب‪UU‬ات (ب‪UU‬ه وی‪UU‬ژه آلکا لوی‪UU‬دها‪ ،‬اس‪UU‬یدهای آمین‪UU‬ه غ‪UU‬یر پروتئی‪UU‬نی‪ ،‬ت‪UU‬رپن ه‪UU‬ا و ترکیب‪UU‬ات‬
‫گوگردی) دارند همچنین‪ U‬اطالعات بالقوه مفید جدی‪U‬دی را ب‪U‬ه هم‪U‬راه داشت ب‪UU‬رای اه‪UU‬داف طبق‪UU‬ه بن‪U‬دی روش‬
‫های دقیق‪ ،‬هم در غربالگری اولیه گیاهان ضروری‪ U‬است و که در را بیشتر‪ U‬دقیق تحلیل و بررسی‪ U‬از‬
‫‪.‬شخصی‪ U‬اجزاء‬
‫تجزیه و تحلیل ش‪U‬یمیایی از ت‪U‬والی اس‪U‬ید آمین‪U‬ه پروت‪U‬ئین ه‪U‬ای گی‪U‬اهی است ن‪U‬یز آورده ش‪U‬ده است ب‪U‬ه‬
‫صورت سیس‪U‬تماتیک مش‪U‬کالت در س‪U‬طوح‪ U‬ب‪U‬االتر از طبق‪U‬ه بن‪U‬دی‪ .‬نت‪U‬ایج دارند ب‪U‬وده ب‪U‬ه دس‪U‬ت آم‪U‬ده با‬
‫سیتوکروم ج پالستوسیانین و فردوکسین؛ توالی اسیدهای نوکلئیک گی‪UU‬اهی دارد همچ‪UU‬نین تس‪UU‬لیم شد داده‬
‫‪ et nl.، 1992).‬سولتیس( ها از طبقه بندی عالقه‬

‫‪1.6.8‬‬ ‫دارویی گیاه پژوهش‬

‫و تاکنون تنها بخش کوچکی از گیاه‪UU‬ان ‪ tive‬پادشاهی گیاهی نشان دهنده مخزن عظیمی از مواد بیولوژیکی است‪ .‬مولکول های‬
‫دارویی دارند فعالیت مورد سنجش قرار گرفت‪UU‬ه اس‪UU‬ت‪ .‬نزدی‪UU‬ک ب‪UU‬ه ‪ 50‬درص‪UU‬د از داروه‪UU‬ایی ک‪UU‬ه در پزش‪UU‬کی اس‪UU‬تفاده می ش‪UU‬ود‪ ،‬از منشا‬
‫گیاهی آنجا بنابراین است بسیار جاری پژوهش اختصاص داده ش‪U‬ده است به بررس‪U‬ی فیتوش‪U‬یمیایی گیاه‪U‬ان ع‪U‬الی ک‪UU‬ه اتنوبوتانیک‪U‬ال‬
‫دارند اطالعات مرتبط با آنها سپس فیتوکمیکال ها جدا می شوند غربال شده است برای متفاوت ان‪UU‬واع بیول‪UU‬وژیکی فع‪UU‬الیت‪ .‬س‪UU‬میت‬
‫سلولی از طريق را آزمایش میگوی آب نمک به منظور آشکارسازی ترکیب‪UU‬ات ض‪UU‬د س‪UU‬رطانی جدی‪UU‬د م‪U‬ورد مطالع‪UU‬ه ق‪UU‬رار گرفت‪UU‬ه‬
‫کشف ش‪UU‬د‪ .‬اِرد ک‪U‬ه در این مس‪U‬یر‪ .‬متناوب‪U‬ا‪ ،‬از س‪UU‬وی ‪ Taxus breoifolia،‬است‪ .‬تاکسول‪ ،‬داروی بیمارستانی جدید از پوست‬
‫دیگر‪ ،‬خام گیاه عصاره ها می توان بودن اولین م‪UU‬ورد س‪UU‬نجش ق‪UU‬رار گ‪UU‬رفت ب‪UU‬رای خ‪UU‬اص فع‪UU‬الیت ها و را فع‪UU‬ال کس‪UU‬ری س‪UU‬پس‬
‫تجزیه و تحلیل کرد گیاهی شیمیایی انواع زیست سنجی اکنون در دسترس هستند برای فیتوشیمیدان به استفاده کنید که در چ‪UU‬نین ک‪UU‬ار‬
‫‪ (Hostettmann, 1991).‬کردن‬

‫عمومی منابع‬
‫فیتوالکسین ها‪ ،‬بلکی‪ ،‬گالسکو )‪) (1982‬ویرایش‌ها( ‪، JW‬و منسفیلد ‪، JA‬بیلی‬
‫الغر الیه )‪، JM (1963‬دارویی و گیاهان معطر‪ ،‬جلد ‪ ،9‬اسپرینگر‪ ،‬برلین‪ .‬بابیت )‪Bajaj, YPS (ed.) (1996‬‬
‫‪.‬کروماتوگرافی‪ ،‬راینهولد میخانه شرکت‪ ،‬جدید یورک‬
‫‪.‬باکینگهام‪ ،‬جی‪( .‬ویرایش) (‪ )1994‬دیکشنری رای از طبیعی محصوالت‪ ،‬چپمن و سالن‪ ،‬لندن‬
‫‪ -‬بیوشیمیایی کاربرد از گریس کروماتوگرافی‪، EE (1962) U‬و استورز ‪، HP‬برچفیلد‬
‫‪.‬فی‪ ،‬علمی مطبوعات‪ ،‬جدید یورک‬
‫‪.‬باترورث‪ ،‬لندن ‪ edn،‬طیف سنجی‪ IR 3 ،‬یک معرفی به کاربردی )‪، RA (1969‬صلیب‪ ،‬آگهی و جونز‬
‫شیمیایی و گیاه شناسی راهنما به گلسنگ محصوالت‪ ،‬شمال کارولینا دانشگاه مطبوعات‪ ،‬نمازخانه )‪، CF (1969‬کولبرسون‬
‫‪.‬تپه‪ ،‬ایاالت متحده آمریکا‬
‫نوین برای تکنیک برای علم شیمی )‪، AE (1986‬دروم‬ ‫پژوهش‪ ،‬پرگامون‬
‫مطبوعات‪ ،‬آکسفورد‬
 ‫عمومی‬ ‫مراجع ‪ri::‬‬ ‫‪37‬‬

‫مواد و روش ها که در گیاه بیوشیمی رای ‪ ،‬که در ‪) (1997-1989) 10‬ویرایش‌ها( ‪، JB‬و هاربورن ‪، PM‬دی‬
‫‪.‬جلدها‪ ،‬علمی مطبوعات‪ ،‬لندن‬
‫)‪، ES (1957‬و استرن ‪، AE‬سموم که در گیاه بیماری‪ ،‬علمی مطبوعات‪ ،‬جدید یورک‪ .‬گیالم )‪) (1981‬ویرایش( ‪، RD‬دوربین‬
‫‪ edn،‬الکترونیکی جذب طیف سنجی‪2 ،‬‬
‫‪.‬ادوارد آرنولد‪ ،‬لندن‬
‫‪.‬چپمن و سالن‪ ،‬لندن ‪ edn،‬معرفی به باال کارایی مایع کروماتوگرافی‪، PA (1982) 2 ،‬و سول ‪، RJ‬همیلتون‬
‫‪.‬لندن ‪ -laoonoids، Academic Press،‬مقایسه ای بیوشیمی از )‪Harborne, JB (1967‬‬
‫علمی ‪ edn،‬معرفی به زیست محیطی بیوشیمی رای ‪، JB (1993) 4 ،‬هاربورن‬
‫‪.‬مطبوعات‪ ،‬لندن‬
‫‪.‬گیاه شیمی سیستماتیک‪ ،‬علمی مطبوعات‪ ،‬لندن )‪، BL (1984‬و ترنر ‪، JB‬هاربورن‬
‫‪،‬معرفی به ارگانیک‪ .‬آلی طیف سنجی )‪، TDW (1996‬و کلریج ‪، LM‬هاروود‬
‫دانشگاه مطبوعات‪ ،‬آکسفورد‬
‫‪-‬هفتمن‪ ،‬اف‪ )1992( .‬کروماتوگرافی‪ :‬مبانی و برنامه های کاربردی از کروماتو‬
‫گرافیکی و الکتروفورتیک تکنیک‪ 5 ،‬ویرایش‪ ،‬الزویر‪ ،‬آمستردام‬
‫هیلمن‪،‬‬ ‫جی آر (ویرایش) (‪ )1978‬انزوا از م‪UU‬و‪UU‬ا‪UU‬د‪ UU‬رشد‬ ‫گیاهی‬ ‫‪ ،‬کمبریج‬
‫‪.‬دانشگاه مطبوعات‪ ،‬کمبریج‬
‫‪.،‬فیتوشیمی ‪. Prog.‬هورگان‪ ،‬آر‪ )1981( .‬مودم مواد و روش ها برای گیاه هورمون تحلیل و بررسی‬
‫‪7، 137-70.‬‬
‫‪Hostettmann,‬‬ ‫‪K., Hostettmann,‬‬ ‫مقدماتی )‪M. and Marston, A. (1986‬‬
‫‪.‬کروماتوگرافی تکنیک‪ ،‬اسپرینگر‪ ،‬برلین‬
‫‪ ،‬طیف سنجی که در ارگانیک‪ .‬آلی شیمیدان رای ‪ NMR‬برنامه های کاربردی از )‪، LM (1959‬جکمن‬
‫پرگامون مطبوعات‪ ،‬آکسفورد‬
‫‪،‬نه که در بیوشیمی رای ‪ :‬اصول و برنامه های کاربردی‪ U.‬علمی مطبوعات )‪، TL (1975‬جیمز‬
‫‪.‬جدید یورک‬
‫و لیدرر‪ ،‬م‪ )1957( .‬کاغذ ‪، E.‬جان وایلی‪ ،‬جدید یورک‪ .‬لیدرر ‪ edn،‬کرشنر‪ ،‬جی جی (‪ )1978‬الغر الیه کروماتوگرافی‪2 ،‬‬
‫‪،‬الزویر ‪ edn،‬کروماتوگرافی‪2 ،‬‬
‫آمستردام‬
‫‪ Verlag،‬گیاه شناسی‪ ،‬اسپرینگر ‪ der‬کاغذ کروماتوگرافی که در )‪، HF (1959‬لینک‌ها‬
‫‪.‬برلین‬
‫و جکسون‪ ،‬جی اف (‪ )-1985‬نوین مواد و روش ها از گیاه تحلیل و بررسی‪ ،‬جدید ‪، HF‬لینک‌ها‬
‫‪.‬سلسله‪ ،‬اسپرینگر‪ ،‬برلین‬
‫‪.‬طیف سنجی‪ ،‬آدم هیلگر‪ ،‬لندن ‪، RA (1975) 8 iochemicuI‬مورتون‬
‫ریو‪ ،‬دکتر و سی روزیر‪ ،‬آ‪ )1980( .‬کمی تحلیل و بررسی از گیاه هورمون ها‬
‫‪.‬فیزیول‪ .‬جدید> سلسله‪. Pl. 80-20 ،9 ،‬دایره‬
‫آموزشی ویبولیتین‪ ،‬پول‪ Zone Electrophoresis، edn 2، BDH Chemicals ،‬روش های سارجنت‪ ،‬جی آر (‪ .)1969‬در‬
‫‪.‬انگلستان‬
‫‪ Ident'i:fi-‬شاینمن‪ ،‬اف‪( .‬ویرایش) (‪ )1970‬یک مقدمه به اسپکروسکوپی مواد و روش ها برای را‬
‫یون از ارگانیک‪ .‬آلی ترکیبات (جلد‪ U‬من)‪ ،‬پرگامون مطبوعات‪ ،‬آکسفورد!«‪o‬‬
‫)‪ II‬جلد( از ارگانیک‪ .‬آلی ترکیبات ‪ Ident'fl-‬یک مقدمه به طیف سنجی مواد و روش ها برای )‪، F. (ed.) (1970‬شاینمن‬
‫پرگامون مطبوعات‪ ،‬آکسفورد‬
‫‪،‬طیف از طبیعی محصوالت ‪ Idltraviolet‬اسکات‪ ،‬هوش مصنوعی (‪ .)1964‬تفسیر از را‬
‫پی ارگامون مطبوعات‪ ،‬آکسفورد‬
‫‪.‬شرما‪ ،‬جی‪ .‬و تسوایگ‪ ،‬جی‪ )1971( .‬کاغذ کروماتوگرافی‪ ،‬علمی مطبوعات‪ ،‬جدید‪ U‬یورک‬
‫‪.‬کوگان صفحه‪ ،‬لندن ‪ Chromato$r«phy،‬سی‪ .)1970( .‬گاز ‪S im pson،‬‬
‫و باکینگهام‪ ،‬جی‪ )1989( .‬دیکشنری رای از آلوئیدها‪ ،‬چپمن و ‪، IW‬اس اوتون‬
‫‪.‬سالن‪ ،‬لندن‬
‫‪.‬جورج آلن و برنده نشدن‪ ،‬لندن ‪ edn،‬الغر الیه کروماتوگرافی‪) (1969) 2 ،‬ویرایش‪ ، E. (U‬استال‬
‫‪،‬تمرین از الغر الیه کروماتوگرافی )‪، MF (1978‬و دابین ‪، JC‬تو اوچستون‬
‫جان وایلی‪ ،‬چیچستر‬
‫‪38‬‬ ‫روش از طرح تی تحلیل و بررسی‬

‫‪ ung« f‬ل )‪، WB (1971‬نازک فیلم کروماتوگرافی‪ ،‬پاک کننده هیوم پرس‪ ،‬لندن‪ .‬ترنر )‪، EV (1963‬راستگو‬
‫‪.‬علمی مطبوعات‪ ،‬لندن ‪efa6olifes،‬‬
‫و آلدریج‪ ،‬دی سی (‪، WB )1983‬ترنر‬ ‫‪.‬علمی مطبوعات‪ ،‬لندن ‪ ff،‬متابولیت ها ‪-ungul‬‬
‫‪.‬اسپرینگر‪ ،‬برلین ‪ edn،‬واگنر‪ ،‬اچ‪ .‬و بالد‪ ،‬اس‪ )1996( .‬گیاه دارو تحلیل و بررسی‪2 ،‬‬
‫بیوشیمیایی مجوز برنامه ها )‪) (1972‬ویرایش( ‪، GR‬والر‬ ‫طیف سنجی‪ ،‬وایلی‬
‫‪.‬بین علوم‪ ،‬جدید یورک‬
‫‪،‬طیف سنجی ‪ QMass‬بیوشیمیایی برنامه های کاربردی‪، OC (1980) U‬و درمر ‪، GR‬والر‬
‫وایلی‪ ،‬چیچستر ‪ hn‬اول مکمل‪ ،‬جو‬
‫‪،‬و فلمینگ‪ ،‬من‪ )1966( .‬طیف سنجی مواد و روش ها که در ارگانیک‪ .‬آلی علم شیمی ‪، DH‬ویلیامز‬
‫‪.‬مک گراو هیل‪ ،‬لندن‬

‫تکمیلی منابع‬

‫که در بیوشیمی )‪، RE (1964‬آلستون‬ ‫)هاربورن ‪ JB‬ویرایش( فنولیک ترکیبات‬

‫‪، pp. 171-204.‬علمی مطبوعات‪ ،‬لندن‬
‫‪.‬بیوچینی‪ .‬بیوفیز‪ .‬آکتا‪، RG (1956) 427 ،4 ،‬و وستال ‪، EC‬بیت اسمیت‬
‫‪ F.‬ویرایش( در مقدمه به طیف سنجی مواد و روش ها برای شناسایی ارگانیک‪ .‬آلی ترکیبات (جلد اول) )‪، G. (1970‬اگلینتون‬
‫‪، pp. 123-144.‬پرگامون مطبوعات‪ ،‬آکسفورد ‪Scheinmann)،‬‬
‫‪، JB (1994) Phyfocheniisfry، 37، 19.‬خاکستری‪ ،‬آر‪ .‬و هاربورن‬
‫‪.‬فیتوشیمی رای ‪، JB (1969) 419 ،8‬هاربورن‬
‫هاربورن‪ ،‬جی بی‪ ،‬برتون‪ ،‬پ‪ ،.‬کمبیر‪ ،‬ح‪ ،.‬مابری‪ ،‬تی‪.‬جی‪ .‬و همام‪ ،‬ز‪)1971( .‬‬
‫‪Phyfochemisfry، 10، 883.‬‬
‫‪.‬پیدا کردن‪ Nntore 1241 ،213 ).‬و زنگ‪ ،‬ام جی (‪، RM )1967‬هارلی‬
‫‪.‬و قابل رویت جذب طیف (جلد من‪، HM (1956) UV )54-1930 ،‬هرشنسون‬
‫‪.‬علمی مطبوعات‪ ،‬نیویورک‬
‫‪، HM (1959) f‬هرشنسون‬ ‫‪.‬قرمز جذب طیف (جلد من‪ .)57-1945 ،‬علمی مطبوعات‪ ،‬جدید یورک ‪a‬‬
‫‪ II، 1955-9).‬جلد( و قابل رویت جذب طیف ‪، HM (1961) UV‬هرشنسون‬
‫‪.‬علمی مطبوعات‪ ،‬نیویورک‬
‫‪ II، 1958-62).‬جلد( زیر قرمز جذب طیف )‪، HM (1964‬هرشنسون‬
‫‪.‬علمی مطبوعات‪ ،‬جدید یورک‬
‫‪ III، 1960-3).‬جلد( و قابل رویت جذب طیف ‪، HM (1966) UV‬هرشنسون‬
‫‪.‬علمی مطبوعات‪ ،‬جدید یورک‬
‫هاستتمن‪ ،‬ک‪( .‬ویرایش) (‪ )1991‬مواد و روش ها که در گیاه بیوشیمی رای ‪ ،‬جلد ‪ ،6‬سنجش برای‬
‫‪.‬زیست فعالی‪ ،‬علمی مطبوعات‪ ،‬لندن‬
‫‪.‬علمی مطبوعات‪ ،‬لندن ‪)،‬براون ‪ SB‬ویرایش( در یک مقدمه به طیف سنجی دور بیوشیمی )‪، R. (1980‬جونز‬
‫‪، BA (1995) Phyfocheniisfry 4، 857.‬شوالیه ها‬
‫انتشارات آکادمی علوم‪ ،‬بوداپست‪ .‬مابری‪ ،‬تی جی (‪ )1969‬که در ‪ Spectra،‬جذب )‪Lang, L. (1959‬‬
‫‪.‬هاربورن و تی ‪ JB‬که در فیتوشیمی رای (ویرایش‌ها ‪Perspecfioes‬‬
‫‪، pp. 1-46.‬سویین) علمی مطبوعات‪ ،‬لندن‬
‫‪.‬اوریان‪ ،‬سانتی متر (‪ )1995‬جی‪ .‬شیمی اکول‪1235 ،21 ،.‬‬
‫‪.‬پاریس‪ ،‬ر‪ ،.‬دیورند‪ ،‬م‪ .‬و کاپوت‪ ،‬جی ال (‪ )1960‬ان فارم‪ .‬فرانک‪769 ،18 ،‬‬
‫ویلسون ‪ CL‬تحلیلی علم شیمی (ویرایش ‪ Comprefiensire‬که در )‪، JWC 11971‬پیربوم‬
‫‪، pp. 1-129.‬الزویر‪ ،‬آمستردام ‪ HC)،‬جلد( )ویلسون ‪ DW‬و‬
‫‪.‬فیتوشیمیست ری ‪، JD (1982) 56-2441 ،21 ،‬فیلیپسون‬
‫‪.‬فیتوشیمی رای ‪، RD (1962) 215 ،1 ،‬و نجار ‪، EH‬پویندکستر‬
‫‪،‬را علوم پایه از آللوپاتی‪ ،‬جان وایلی )‪) (1986‬ویرایش‌ها( ‪، CS‬و زبانه ‪، AR‬پاتنام‬
‫چیچستر‬
‫‪.‬فیتوشیمی‪، DE (1971) 1245 ،10 ،‬و هاینز ‪، KJ‬سندفورد‬
 ‫مکمل مراجع‬ ‫‪39‬‬

‫‪.‬نیوزلند ‪ ./‬علمی‪، DS (1966) Neu 833 ،9 ،‬و لتهام ‪، JS‬شانون‬

‫‪ Pfnnts،‬و دویل‪ ،‬جی جی (‪ )1992‬مولکولی سیستماتیک از ‪، DE‬سولتیس ‪، PS،‬سولتیس‬
‫‪.‬چپمن و سالن‪ ،‬جدید یورک‬
‫ویرایشگر( محصوالت صنعتی ‪ @Nm‬بدبختی ‪ -‬منبع ‪ Phytochemic «l‬در )‪ Pazole، CJ (1997‬و ‪Stafford، AM‬‬
‫‪.‬رویال جامعه‪ U‬از علم شیمی‪ ،‬لچورث‪ ،‬هرتس ‪S. Wrigley، M. Hayes، R. Thomas and E. Chrystal)،‬‬
‫‪.‬فیتوشیمیایی تحلیل‪ U‬و بررسی ‪، FA (1995) 177 ،6‬توماس‪-‬باربران‬
‫از صنایع غذا ‪ ct‬آروم _ _ از تخمیرها )‪، CF (19-9‬ون سومری‬
‫‪) 139-91 ،24.‬بروکسل(‬
‫و متراکم‪ ،‬ب‪، EW )1977( .‬الشاگی‪ ،‬ح‪ ،.‬آرنس‪ ،‬ح‪ ،.‬در انبار‪ ،‬جی‪ ،.‬ویلر ‪، MH،‬زنک‬
‫‪.‬گیاه بافت فرهنگ و آن بیوتکنولوژیک کاربرد‪ ،‬اسپرینگر‪ ،‬برلین‪U‬‬
‫‪2‬‬
‫فنولیک ترکیبات‬

‫‪2.1‬‬ ‫مقدمه‬ ‫‪40‬‬

‫‪2.2‬‬ ‫فنل ها و فنولیک اسیدها‬ ‫‪42‬‬
‫‪2.3‬‬ ‫فنیل پروپانوئیدها‬ ‫‪49‬‬
‫‪2.4‬‬ ‫فالونوئید رنگدانه‬ ‫‪60‬‬
‫‪2.5‬‬ ‫آنتوسیانین‬ ‫‪66‬‬
‫‪2.6‬‬ ‫فالونول ها و فالون ها‬ ‫‪74‬‬
‫‪2.7‬‬ ‫جزئی فالونوئیدها‪ ،‬گزانتون ها و استیلبنز‬ ‫‪83‬‬
‫‪2.8‬‬ ‫تانن‬ ‫‪90‬‬
‫‪2.9‬‬ ‫کینون رنگدانه‬ ‫‪96‬‬

‫معرفی ‪2.1‬‬
‫اصطالح ترکیب فنلی طیف وسیعی‪ U‬از مواد گیاهی را در بر می گیرد که به طور مشترک دارای یک حلق‪UU‬ه‬
‫معطر حاوی یک یا چند هیدروکسیل هستند جایگزین ها مواد فنلی معم‪UU‬والً محل‪UU‬ول در آب هس‪UU‬تند‪ ،‬زی‪UU‬را‬
‫آنها اغلب در ترکیب با قند به عنوان گلیکوزید رخ می ده‪UU‬د و آنه‪UU‬ا هس‪UU‬تند معم‪UU‬والً در واکوئ‪UU‬ل س‪UU‬لولی‬
‫قرار‪ U‬دارد‪ .‬از جمله ترکیبات فنلی طبیعی پوند‪ U،‬که چندین‪ U‬هزار ساختار آن شناخته شده است‪ ،‬فالونوئی‪UU‬دها‬
‫بزرگترین‪ U‬گروه ام‪UU‬ا فن‪UU‬ل ه‪U‬ای ت‪UU‬ک حلق‪UU‬ه ای س‪U‬اده‪ ،‬فنی‪UU‬ل پروپانوئی‪UU‬دها را تش‪UU‬کیل‪ U‬می دهند و کین‪U‬ون ه‪U‬ای‬
‫فنولیک همگی در تعداد قابل توجهی وجود دارند‪ .‬چندین مورد مهم گروه های رنگی از م‪UU‬واد پلیم‪UU‬ری‬
‫در گیاهان ‪ -‬لیگنین ها‪ ،‬مالنین ها و تانن ‪ -‬پلی فنولی هستند (شکل ‪ 2.1‬را ببینید) و واحدهای فنلی گاه ب‪UU‬ه‬
‫گاه هستند مواجه شده که در پروتئین ها‪ ،‬آلکالوئیدها‪ U‬و در میان را ترپنوئیدها‪U‬‬
‫در حالی که عملک‪U‬رد ب‪U‬رخی از طبق‪U‬ات ترکیب‪U‬ات فنلی خ‪U‬وب است ایج‪U‬اد ش‪U‬ده (مثالً لیگ‪U‬نین ه‪U‬ا ب‪U‬ه‬
‫عنوان ماده ساختاری دیواره سلولی؛ آنتوسیانین ها به عنوان رنگدانه های گل)‪ ،‬ه‪UU‬دف از کالس ه‪UU‬ای‬
‫دیگر هنوز یک است موضوعی از حدس و گمان‪ .‬فالونول ها‪ ،‬برای مثال‪ ،‬به نظ‪U‬ر می رسد به ب‪U‬ودن‬
‫مهم که در‬
‫‪ (Isman‬و آنها اثرات نامطلوب بر تغذیه حشرات )‪ (Galston, 1969‬تنظیم‪ U‬کنترل رشد در گیاه نخود‬
‫نشان داده اند که ممکن است عوامل مق‪UU‬اومت ط‪UU‬بیعی‪ U‬باش‪UU‬ند‪ .‬هیچ ی‪UU‬ک از این )‪and Duffey, 1981‬‬
‫‪.‬توابع‪ ،‬با این حال‪ ،‬دارد هنوز بوده محکم ایجاد‬