JOIN US ON THE

INTERNET VIA ØWW,

A
K hp.thoms
GOPHER,
EMAIL:
P on.com
FTP ORservice
EMAIL: of ž C
: @
WWW:.com
SOPHER: gopher.thomson.com
‫مواد و روش ها‬
‫انگلستان ‪ SE1 8HN،‬منتشر شده توسط چاپمن و هال‪ ،‬اثر علمی تامسون‪ 6-2 ،‬مرز ردیف‪ ،‬لندن‬

‫انگلستان تامسون علوم پایه‪ 115 ،‬پنجم ‪ SEI 8HN،‬لندن ‪ Boundary Row،‬تامسون علوم پایه‪6-2 ،‬‬
‫ایاالت متحده آمریکا ‪، NY 1tXD3،‬خیابان‪ ،‬جدید یورک‬
‫ایاالت متحده ‪، PA 19106،‬بازار خیابان‪ ،‬فیالدلفیا‪tXi :‬تامسون علوم پایه‪ ،‬سوئیت ‪4 ،750‬‬
‫آمریکا‬
‫تامسون علوم پایه‪ ،‬پاپاللی ‪ 69469 ،3‬واینهایم‪ ،‬آلمان‬

‫اولین نسخه ‪1973‬‬

‫تجدید‪ :‬چاپ شد ‪1976‬‬
‫دومین نسخه ‪1984‬‬
‫دومین نسخه صادر شده مانند شومیز ‪ 1988‬سوم نسخه‬
‫‪1998‬‬
‫هاربوم ‪O 1973، 1984، 1998 JB‬‬
‫تامسون علوم پایه است آ تقسیم از بین المللی تامسون انتشار باال‬
‫تایپ مجموعه که در ‪ 10/12‬پاالتینو توسط بهترین مجموعه تایپ ساز آموزشی ویبولیتین‪ ،‬هنگ کنگ چاپ شده‬
‫ادموندز‪ ،‬سافولک ‪ St‬ادموندزبری مطبوعات‪ ،‬دفن کنید ‪ St‬که در عالی بریتانیا توسط‬
‫شابک‬ ‫)‪ (PB‬و ‪5 57260 412 0 (HB) 2 57270 412 0‬‬
‫همه حقوق محفوظ است هیچ بخشی از این نشریه نیست ممکن است تکثیر شود‪ ،‬ذخیره شده است که در آ‬
‫بازیابی سیستم یا منتقل شده است که در هر فرم یا توسط هر به معنای‪ ،‬الکترونیکی‪ ،‬مکانیکی‪ ،‬فتوکپی‪،‬‬
‫ضبط یا غیره‪ ،‬بدون اجازه کتبی قبلی ناشران برنامه های کاربردی برای اجازه باید رسیدگی شود به مدیر‬
‫حقوق در لندن نشانی از را ناشر‬
‫ناشر باعث می شود بدون نمایندگی‪ ،‬صریح یا ضمنی‪ ،‬با توجه به صحت اطالعات موجود است در این‬
‫و نمی تواند هر کدام را بپذیرید مجاز مسئولیت یا مسئولیت برای هر گونه خطا یا حذفیات‪ :‬که ‪bmk‬‬
‫‪.‬ممکن است بودن ساخته شده است‬
‫است در دسترس از جانب را بریتانیایی کتابخانه کتابخانه از کنگره کاتالوگ ‪ bmk‬آ کاتالوگ رکورد برای‪ :‬این‬
‫'*‪k‬کارت عدد‪70&9 :‬‬

‫است ‪ jj‬تی‬
‫ارسیتی‬

‫‪900 01214‬‬

‫‪572.362‬‬
‫‪HAR‬‬
‫‪، manufaJ‬چاپ بر بدون اسید متن کاغذ &‬
‫آ‬ ‫‪siJxiso zss.«a-iesz (p«›n«e«o› .‬‬ ‫‪،‬‬
‫فهرست‬

‫پیشگفتار به اولین نسخه‬

‫پیشگفتار به دومین نسخه‬

‫پیشگفتار به سوم نسخه‬ ‫‪x1‬‬

‫واژه نامه‬ ‫‪XII‬‬

‫‪1‬‬ ‫مواد و روش ها از گیاه تحلیل و بررسی‬ ‫‪1‬‬

‫‪1.1‬‬ ‫معرفی‬
‫‪1.2‬‬ ‫مواد و روش ها از استخراج و انزوا‬
‫‪4‬‬
‫مواد و روش ها از جدایش‪ ،‬جدایی ‪1.3‬‬ ‫‪7‬‬
‫مواد و روش ها از شناسایی ‪1.4‬‬ ‫‪16‬‬
‫تحلیل و بررسی از نتایج ‪1.5‬‬ ‫‪30‬‬
‫برنامه های کاربردی ‪1.6‬‬ ‫‪32‬‬

‫فنولیک ترکیبات‬ ‫‪40‬‬

‫معرفی ‪2.1‬‬ ‫‪40‬‬
‫فنل ها و فنولیک اسیدها ‪2.2‬‬ ‫‪42‬‬
‫فنیل پروپانوئیدها ‪2.3‬‬ ‫‪49‬‬
‫فالونوئید رنگدانه ها ‪2.4‬‬ ‫‪60‬‬
‫آنتوسیانین ها ‪2.5‬‬ ‫‪66‬‬
‫فالونول ها و فالون ها ‪2.6‬‬ ‫‪74‬‬
‫فالونوئیدها‪ ،‬گزانتون ها و استیلبن ها ‪2.7‬‬ ‫جزئی‬ ‫‪83‬‬
‫تانن ها ‪2.8‬‬ ‫‪90‬‬
‫کینون رنگدانه ها ‪2.9‬‬ ‫‪96‬‬

‫‪3‬‬ ‫را ترپنوئیدها‬ ‫‪107‬‬

‫معرفی ‪3.1‬‬ ‫‪107‬‬
‫ضروری است روغن ها ‪3.2‬‬ ‫‪110‬‬
‫دیترپنوئیدها و جیبرلین ها ‪3.3‬‬ ‫‪124‬‬
‫تری ترپنوئیدها و استروئیدها ‪3.4‬‬ ‫‪129‬‬
‫کاروتنوئیدها ‪3.5‬‬ ‫‪138‬‬
‫‪ Vi‬مطالب‬

‫‪4‬‬ ‫ارگانیک‪ .‬آلی اسیدها‪ ،‬لیپیدها و مربوط ترکیبات‬

‫‪1s1‬‬
‫‪4.1‬‬ ‫گیاه اسیدها‬ ‫‪151‬‬
‫‪4.2‬‬ ‫چرب اسیدها و لیپیدها‬ ‫‪159‬‬
‫‪4.3‬‬ ‫آلکان ها و مربوط هیدروکربن ها‬ ‫‪170‬‬
‫‪4.4‬‬ ‫پلی استیلن ها‬ ‫‪174‬‬
‫‪4.5‬‬ ‫گوگرد ترکیبات‬ ‫‪179‬‬
‫نیتروژن ترکیبات‬
‫‪187‬‬
‫‪5.1‬‬ ‫معرفی‬ ‫‪187‬‬
‫‪5.2‬‬ ‫آمینو اسیدها‬ ‫‪189‬‬
‫‪5.3‬‬ ‫آمین ها‬ ‫‪198‬‬
‫‪5.4‬‬ ‫آلکالوئیدها‬ ‫‪203‬‬
‫‪5.5‬‬ ‫گلیکوزیدهای سیانوژنیک‬ ‫‪214‬‬
‫‪5.6‬‬ ‫ایندول ها‬ ‫‪2t8‬‬
‫‪5.7‬‬ ‫پورین ها‪ ،‬پیریمیدین ها و سیتوکینین ها‬ ‫‪222‬‬
‫‪5.8‬‬ ‫کلروفیل ها‬ ‫‪227‬‬
‫‪6‬‬ ‫قندها و آنها مشتقات‬ ‫‪235‬‬
‫معرفی ‪6.1‬‬ ‫‪235‬‬
‫مونوساکاریدها ‪6.2‬‬ ‫‪236‬‬
‫الیگوساکاریدها ‪6.3‬‬ ‫‪244‬‬
‫‪6.4‬‬ ‫قند الکل ها و سیکلیتول ها‬ ‫‪249‬‬
‫ماکرومولکول ها‬ ‫‪256‬‬
‫‪7.1‬‬ ‫معرفی‬ ‫‪256‬‬
‫‪7.2‬‬ ‫نوکلئیک اسیدها‬ ‫‪257‬‬
‫‪7.3‬‬ ‫پروتئین ها‬ ‫‪265‬‬
‫‪7.4‬‬ ‫پلی ساکاریدها‬ ‫‪278‬‬
‫ضمیمه آ‬ ‫تن ‪29‬‬
‫آ فهرست از توصیه شده‬ ‫سیستم های برای همه عمده کالس ها از گیاه شیمیایی ‪TLC‬‬

‫ضمیمه ب‬
‫مقداری مفید آدرس ها‬ ‫‪294‬‬
‫فهرست‪ :‬مطالب‬

‫‪295‬‬
‫پیشگفتار به اولین نسخه‬

‫در حالی که کتاب های زیادی در مورد روش های ارگانیک و زیستی موجود است‪ .‬در تجزیه و تحلیل همیکال‪ ،‬اکثریت یا عمدتا ً به‬
‫این موضوع توجه دارند استفاده از یک تکنیک خاص (مثالً کروماتوگرافی‪ :‬کاغذی) یا دارند‪ :‬برای نوشته شده است مخاطبان شیمیدانان‬
‫یا بیوشیمیانی که کار می کنند عمدتا با بافت های حیوانی‪ .‬بنابراین‪ ،‬هیچ راهنمای ساده ای برای روش های مدرن وجود ندارد تجزیه و‬
‫تحلیل گیاه وجود دارد و هدف از جلد حاضر پر کردن این است شکاف‪ .‬آی تی است در درجه اول مورد نظر برای دانش آموزان که‬
‫در را گیاه علوم‪ ،‬سازمان بهداشت جهانی دارند پس زمینه گیاه شناسی یا بیولوژیکی عمومی‪ .‬همچنین باید ارزش داشته باشد به‬
‫‪.‬دانشجویان بیوشیمی‪ ،‬فارماکوژنزی‪ ،‬علوم غذایی و طبیعی محصوالت ارگانیک‪ .‬آلی علم شیمی‬
‫اکثر کتاب ها بر کروماتوگرافی‪ ،‬در حالی که قابل تحسین پوشش را نیاز دارد از‬
‫کارگران پژوهشی‪ ،‬تمایل به غلبه دانش آموز با لیست طوالنی از حالل سیستم های و افشانه معرف ها که می توان بودن کاربردی به‬
‫هر یک کالس از ارگانیک‪ .‬آلی تشکیل دهنده‪ .‬را قصد اینجا است به ساده کردن را وضعیت توسط فهرست‪ :‬کردن فقط آ تعداد کمی‬
‫مخصوصا توصیه شده تکنیک که دارند وسیع واحد پول که در فیتوشیمیایی آزمایشگاه ها جزئیات کافی ارائه شده است اجازه‬
‫دادن را دانشجو به استفاده کنید را تکنیک برای خودشان و اکثر بخش ها حاوی چند آزمایش عملی مقدماتی که می تواند در کار‬
‫کالسی استفاده شود‪ .‬بعد از آ عمومی معرفی به فیتوشیمیایی تکنیک‪ ،‬را کتاب شامل شخصی فصل ها توصیف می کند مواد و روش ها‬
‫ترپنوئیدها‪ ،‬چرب اسیدها و مربوط ترکیبات‪ ،‬نیتروژن ‪ s،‬از شناسایی فنولیک کام پوند‬
‫قندها و مشتقات آنها و ماکرومولکولها‪ .‬در‪ -‬وسوسه شده است که تقریبا ً هر ‪COm pound s،‬‬
‫در این مورد ‪ ،‬با اينكه که در مقداری موارد‪ ،‬را حساب ‪ C‬کالس از گیاهان ارگانیک را پوشش دهد‬
‫‪-‬است لزوما مختصر بودن‬
‫از درون زا تنظیم کننده های رشد گیاه و به روش ‪ d etection‬علت محدودیت فضا با این حال توجه ویژه ای به آن شده است‬
‫ها از غربالگری گیاهان برای مواد مورد عالقه فارماکولوژیک‪ .‬هر فصل همراه با یک بخش مرجع کلی که یک کتابشناختی است‬
‫راهنما به بیشتر پیشرفته متن ها‬
‫در حالی که را عظیم شیمیایی‬ ‫اریاسیون از ثانوی متابولیسم که در ‪v‬‬
‫گیاهان دارد‪ :‬طوالنی بوده استقبال مینماید‪ ،‬تغییر که در اولیه متابولیسم (به عنوان مثال که در‬
‫‪viii‬‬ ‫پیشگفتار به‪/‬اولین نسخه‬

‫آنزیم های تنفس و مسیرهای فتوسنتزی) تنها دارد اخیراً آشکار شده است‪ .‬با تحقق چنین‬
‫شیمیایی تنوع در هر دو مولکول کوچک و بزرگ پادشاهی گیاهی‪ ،‬سیستم‌شناسان به‬
‫فیتوشیمی برای ریختن مواد جدید عالقه‌مند شده‌اند نور بر روابط گیاهی رشته جدیدی از‬
‫سیستماتیک بیوشیمیایی توسعه یافته است و از آنجایی که کتاب حاضر با برخی نوشته شده‬
‫است با تاکید بر جنبه های مقایسه ای‪ ،‬باید ابزار مفیدی باشد پژوهش کارگران که در این‬
‫‪.‬رشته‬
‫در آماده سازی این کتاب برای چاپ توصیه هایی به نویسنده شده است و پیشنهادات از جانب‬
‫‪ T.‬دکتر ‪ EC Bate-Smith،‬زیاد همکاران او خواهد کرد به خصوص دوست دارم از دکتر‬
‫و خانم کریستین تشکر کنید ویلیامز برای کمک های ارزشمندشان‪ TA Smith .‬دکتر ‪Swain،‬‬
‫او همچنین از کارکنان شرکت قدردانی می کند چپمن و سالن برای به سرعت دیدن را کتاب‬
‫‪.‬از طریق را مطبوعات‬

‫خواندن‪ ،‬ژوئن‬
‫‪JBH‬‬
‫‪1973‬‬
‫پیشگفتار به دومین نسخه‬

‫از زمان آماده سازی نسخه اول‪ ،‬چندین مورد اصلی وجود داشته است تحوالت در فیتوشیمیایی تکنیک‪ .‬مقدمه کربن طیف سنجی‬
‫اکنون اطالعات ساختاری بسیار دقیق تری را ارائه می دهد‪ .‬پیوند بر روی مولکول های پیچیده‪ ،‬در حالی که ‪13 NMR‬‬
‫امکان دستیابی به ‪ HPLC،‬می افزاید قدرتمند و بسیار ابزار تحلیلی حساس‪ :‬به تسلیحات کروماتوگراف‪ .‬با ‪HPLC‬‬
‫برای مواد فرار ایجاد می کند‪ .‬توسعه دیدنی‪ -‬در تکنیک های طیف سنجی ‪ GLC‬ترکیبات غیر فرار از نوع جداسازی هایی که‬
‫‪ FAB-MS‬جرمی نیز تغییراتی رخ داده است‪ .‬برای به عنوان مثال‪ ،‬در دسترس بودن منبع بمباران سریع اتم باعث می شود در‬
‫برای تعیین وزن مولکولی هر دو بسیار حساس ممکن است و ترکیبات غیر فرار‪ :‬گیاهی این تکنیک ها به اختصار در شرح داده شده است‬
‫‪.‬را مناسب بخش ها از این جدید نسخه‬
‫در طول دهه گذشته‪ ،‬تعداد سازه های جدید گزارش شده است منابع گیاهی به شدت افزایش یافته‬
‫است و در میان برخی از طبقات ترکیب طبیعی‪ ،‬تعداد مواد شناخته شده دو برابر شده است در داخل‬
‫این کوتاه مدت زمان‪ .‬را چالش ها و مسائل از نگه داشتن باال با را ادبیات فیتوشیمیایی در نتیجه همه‬
‫جستجو می ‪ Chemical‬این فعالیت ها کامالً در نظر گرفته شده است‪ .‬قادر‪ ،‬هر چند کامپیوتری از طریق‪:‬‬
‫کند چکیده ها دارند بار دانشمندانی را که توانایی پرداخت این امکانات را داشتند‪ :،‬کاهش داد‪ .‬به ترتیب‬
‫برای کمک به حداقل خواننده دانش آموز‪ ،‬منابع ادبیات در این ثانیه نسخه به طور گسترده به روز‬
‫شده است تا بیشترین مورد‪ :‬را در نظر بگیرد تحوالت‪ :‬اخیر عالوه بر این‪ ،‬برخی از آزمایش های عملی‬
‫جدید انجام شده است برای کمک به دانش آموز در توسعه تخصص در مطالعه اضافه شده است به‬
‫عنوان مثال‪ ،‬القای فیتوالکسین در گیاهان و فعل و انفعاالت آللوپاتیک بین گیاهان‬
‫از اولین نسخه‪ ،‬تکنیک‌های فیتوشیمیایی در ارزش فزاینده در تحقیقات اکولوژیکی‪ ،‬به دنبال درک‬
‫این موضوع ترکیبات‪ :‬اندری نقش بسزایی در تعیین دارند انتخاب غذا از حیوانات شلنگی که از گیاهان‬
‫تغذیه می کنند‪ .‬تالش زیادی صرف‪ :‬شده است تجزیه و تحلیل جمعیت های گیاهی برای سموم‪ :‬یا مواد‬
‫بازدارنده تغذیه‪ .‬اکثر چنین ترکیبات بود مشمول که در را اولین نسخه‪ ،‬بجز برای را گیاه‬
‫‪x‬‬ ‫پیشگفتار به دومین نسخه‬

‫تانن ها آ جدید بخش دارد از این رو بوده مشمول بر تانن تحلیل و بررسی که در‬
‫‪.‬فصل ‪2‬‬
‫برای همه ‪ TLC‬با این نسخه جدید‪ ،‬فرصت استفاده شده است برای اضافه کردن دو ضمائم ‪ -‬چک لیستی از رویه های‬
‫کالس های کارخانه فرعی موضع و لیستی از آدرس های مفید برای فیتوشیمیدانان‪ .‬برخی از خطاها در چاپ اول تصحیح شده است‪،‬‬
‫اما دیگران ممکن است باقی بماند و نویسنده خواهد شد خوش آمدی پیشنهادات‪ :‬برای به عالوه بهبودها‬
‫مانند چاپ اول‪ ،‬نویسنده به طور قابل توجهی از آن بهره برده است کمک و مشاوره از زیاد‬
‫همکاران او خواهد شد به ویژه پسندیدن به تشکر همکارانش در واحد فیتوشیمی و شاگردانش که‬
‫گینه خوک ها که در توسعه از جدید فیتوشیمیایی‪ :‬رویه ها ‪ willJg‬دارند بوده‬

‫‪،‬خواندن‬
‫جفری ب‪ .‬هاربورن‬
‫دسامبر ‪1983‬‬
‫پیشگفتار به را سوم نسخه‬

‫از سال ‪ 1984‬که چاپ دوم آن منتشر شد‪ ،‬وجود نداشته است هر گونه اکتشاف شگفت انگیز در روش های فیتوشیمیایی با این‬
‫معرفی شده اند‪ .‬اولین مجله ای که به طور خاص با گیاهان ‪ ods‬وجود‪ ،‬آن را شده است دوره تثبیت‪ ،‬زمانی که بهبود به روش موجود‬
‫به عنوان یک ‪ HPLC‬سروکار دارد تجزیه و تحلیل‪ ،‬به نام تجزیه و تحلیل فیتوشیمیایی‪ ،‬در سال ‪ 1990‬راه اندازی شد‪ .‬استفاده از‬
‫ابزار تحلیلی در حال حاضر تقریبا ً در هر کالسی گسترش یافته است متابولیت ثانویه و این در طول دوره در نظر گرفته شده‬
‫است تجدید نظر در ویرایش دوم ارجاعات جدید به ادبیات اولیه دارند بوده اضافه‪ .‬بخش ها بر آلکالوئیدها‪ ،‬آمین ها‪ ،‬ایریدوئیدها‪،‬‬
‫چربی دوست فالونوئیدها‪ ،‬گلوکوزینوالت ها و سسکوئی ترپن الکتون ها دارند همه بوده اند منبسط‪ .‬کاربرد روش های فیتوشیمیایی‬
‫در گیاهان اتوس اهمیت گیاه شناسی در سالهای اخیر افزایش چشمگیری داشته است و الف شرح مختصری از کاربرد فیتوشیمی در‬
‫‪.‬گیاهان دارویی دارد بوده اضافه به فصل ‪1‬‬
‫محصوالت‪ ،‬ویرایش‪ _ Natxrnl :‬سال ‪ 1990‬نقطه عطف مهمی بود برای‪ :‬فیتوشیمیدانان‪ :‬انتشارات را دید یون از را دیکشنری از‬
‫شده توسط جان باکینگهام‪ ،‬تحت تأثیر چپمن و هال‪ .‬این فرهنگ لغت ارائه می دهد کارگر فیتوشیمیایی برای اولین بار با لیست کامل همه‬
‫شناخته شده ترکیبات شیمیایی گیاهی (و حیوانی) و عالوه بر آن در حال تنظیم به روز شده است‪ .‬اکنون می توان به سرعت به این سوال‬
‫پاسخ داد‪ :‬آیا من الف را پیدا کرده ام ماده گیاهی جدید یا نه؟ انبوهی از کتاب ها و بررسی ها در مورد روش های تجزیه و تحلیل‬
‫به را مناسب ارجاع لیست ها در را پایان از هر یک فصل ‪ dded‬گیاهان در دهه اخیر ظاهر شده است و اینها بوده است یک‬
‫در تهیه این ویرایش جدید‪ ،‬نویسنده مایل است یک بار دیگر تشکر کند ج همکاران در خدمات تحقیقات فیتوشیمیایی در ریدینگ و‬
‫همچنین وی بسیاری از دانشجویان محقق‪ ،‬در طول سال ها‪ ،‬که بسیاری از آنها را امتحان کرده اند رویه های شرح داده شده در‬
‫اینجا او همچنین از خانم والری نوریس به خاطر او تشکر می کند کمک کارشناسان در تهیه این نسخه‪ ،‬و ناشران برای آنها تشویق‬

‫خواندن‬
‫جفری ب‪ .‬هاربورن‬
‫فوریه ‪1998‬‬
‫واژه نامه‬

‫عمومی اختصارات‬

‫‪ TLC‬الیه‬ ‫کروماتوگرافی‬ ‫‪MS‬‬ ‫‪ GLC‬طیف سنجی جرمی گاز =‬

‫مایع کروماتوگرافی‬ ‫فی‪،‬‬ ‫تحرک نسبت فامیلی به‬
‫جلو‬
‫کاغذ کامپیوتر‪:‬‬ ‫کروماتوگرافی‬ ‫‪fifi،‬‬ ‫نسبی حفظ‬
‫نانومتر فرابنفش‬ ‫‪UV‬‬
‫مادون‬ ‫قرمز مادون قرمز‬ ‫‪mol.wt.‬‬ ‫‪ NMR‬مولکولی وزن‬
‫هسته ای مغناطیسی‪ :‬رزونانس‬ ‫‪ M‬مولر‬
‫= ‪HPLC‬‬ ‫باال کارایی مایع کروماتوگرافی‬

‫مواد شیمیایی‬

‫‪BSA‬‬ ‫استامید )تری متیل سیلیل( ‪= N، O-bis‬‬

‫‪PVP‬‬ ‫= ‪ BHT‬پلی وینیل پیرولیدون (برای حذف کردن فنل ها) =‬ ‫بوتیله شده‬
‫هیدروکسی تولوئن (آنتی اکسیدان)‬
‫اتیلن دی آمین تتراستیک اسید (کالتینگ عامل) تریس = ‪EDTA‬‬ ‫= تریس (هیدروکسی متیل)‬
‫فنیل متان سولفونیل فلوراید = ‪ PMSF‬متیل آمین (بافر)‬
‫‪SDS‬‬ ‫=‬ ‫سدیم دودسیل سولفات‬

‫کروماتوگرافی پشتیبانی می کند‬

‫کیزلگوهر = دیاتومه زمین دکالسو = سدیم آلومینیوم سیلیکات‬
‫سلولز = تحت درمان با پلی اتیلن‪ :‬ایمین ‪ PEI -‬سلولز = دی اتیل آمینو اتیل تیمار شده ‪DEAE -‬‬
‫سلولز = اپی کلروهیدرین‪ - :‬تری اتانول آمین ‪ -‬قلیایی‪ :‬تحت درمان ‪ECTEOLA -‬‬
 ‫‪...‬‬
‫‪X111‬‬

‫= ‪PPE‬‬ ‫پلی فنیل اتر‬ ‫= ‪ TXP‬متیل سیلوکسان پلیمر = ‪OV‬‬

‫تریکسیلنیل فسفات‬ ‫سیلیکون روغن = ‪SE‬‬
‫درجه = دی اتیلن گلیکول سوکسینات‬ ‫نیتریل سیلیکون = ‪XE‬‬
‫= اسید شسته شده سلیت را گریس کنید ‪ Embacel‬ایست خروس = ‪Apiezon L‬‬
‫کربووکس = پلی اتیلن پشتیبانی از گلیکول‬
‫حمایت کنید ‪ Poropak‬کروموسرب = آجر نسوز از‬ ‫= استایرن پلیمر‬ ‫= ‪ODS‬‬ ‫پشتیبانی‬
‫‪octadecylsilane‬‬

‫کروماتوگرافی حالل ها‬

‫‪ MeOH‬متانول‬
‫اتانول‬ ‫اتانول‬ ‫فرمیک اسید = ‪HCO 2 H‬‬
‫‪ n-‬ایزوپروپانول ‪iso-PrOH‬‬ ‫استیک اسید = ‪HOAc‬‬
‫‪BuOH‬‬ ‫‪ iso-‬بوتانول‪= n-‬‬ ‫کلروفرم = ‪CHCl 3‬‬
‫‪ PhOH‬ایزو بوتانول = ‪BuOH‬‬ ‫‪ EtOAc‬متیلن دی کلراید = ‪CH 2 Cl 2‬‬
‫فنل =‬ ‫اتیل استات =‬
‫‪NHEt 2‬‬ ‫دی اتیل آمین =‬ ‫‪ CO‬من ‪2‬‬ ‫استون =‬
‫‪Et، O‬‬ ‫دی اتیل اتر =‬ ‫متیل اتیل کتون = ‪MeCOEt‬‬
‫‪ *h‬سی‬ ‫بنزن =‬
‫مواد و روش ها از گیاه تحلیل و بررسی‬

‫‪1.1‬‬ ‫معرفی‬
‫‪1.2‬‬ ‫مواد و روش ها از استخراج و انزوا‬ ‫‪4‬‬
‫‪1.3‬‬ ‫مواد و روش ها از جدایی‬ ‫‪7‬‬
‫‪1.4‬‬ ‫مواد و روش ها از شناسایی‪:‬‬ ‫‪16‬‬
‫‪1.5‬‬ ‫تحلیل و بررسی‪ :‬از نتایج‬ ‫‪30‬‬
‫‪1.6‬‬ ‫برنامه های کاربردی‪:‬‬ ‫‪32‬‬

‫معرفی ‪1.1‬‬
‫موضوع فیتوشیمی‪ :‬یا شیمی گیاهی در دوباره توسعه یافته است‪ .‬صد سال به عنوان یک رشته متمایز‪،‬‬
‫جایی در بین محصول طبیعی‪ :‬شیمی ارگانیک و بیوشیمی گیاهی و ارتباط نزدیکی با هر دو دارد‪ .‬آی تی‬
‫مربوط به تنوع بسیار‪ :‬زیاد مواد آلی است ساخته شده و انباشته شده توسط گیاهان و برخورد با ساختار‬
‫‪.‬شیمیایی‪ :‬این مواد‪ ،‬بیوسنتز‪ ،‬گردش و متابولیسم آنها‪ ،‬آنها طبیعی توزیع‪ :‬و آنها بیولوژیکی‪ :‬تابع‬
‫در تمام این عملیات ها روش هایی برای جداسازی‪ ،‬تصفیه مورد نیاز است و شناسایی‪ :‬بسیاری‪ :‬از‬
‫ترکیبات مختلف موجود‪ :‬در گیاهان‪ .‬بنابراین‪ ،‬در درک ما پیشرفت‪ :‬می کند فیتوشیمی‪ :‬به طور‪ :‬مستقیم‬
‫هستند مربوط به بهره برداری‪ :‬موفقیت آمیز از تکنیک های شناخته شده‪ ،‬و شرایط‪ :‬توسعه مداوم‬
‫تکنیک های جدید برای حل مشکالت برجسته همانطور که ظاهر می شوند‪ .‬یکی از چالش های‬
‫فیتوشیمی انجام همه موارد است عملیات فوق بر روی مقادیر بسیار کم مواد‪ .‬فری بنابراین‪ :،‬حل یک‬
‫مشکل بیولوژیکی‪ :‬مثالً در تنظیم رشد گیاه در بیوشیمی فعل و انفعاالت گیاه‪-‬حیوان یا در درک منشا گیاهان‬
‫ساختارهای همیکال که ممکن است فقط ‪ c‬فسیلی‪ :‬به شناسایی‪ :‬طیف وسیعی از مجموعه ها بستگی دارد‬
‫برای مطالعه در میکروگرم در دسترس باشند مقادیر‬
‫آی تی است را هدف از این کتاب به فراهم‪ :‬کردن‪ ،‬برای را اولین زمان‪ ،‬یک معرفی‪ -‬یون به‬
‫حاضر در دسترس مواد و روش ها برای را تحلیل‪ :‬و بررسی از گیاه مواد و‬
‫‪2‬‬ ‫روش از گیاه تحلیل و بررسی‬

‫برای ارائه کلیدی برای ادبیات موضوع‪ .‬هیچ چیز جدیدی برای آن ادعا نشده است روش های شرح داده شده در اینجا در واقع‪ ،‬هدف‬
‫ترسیم این روش‌ها است‪ .‬شانس هایی که بیشتر بوده است استفاده شده؛ دانشجو یا تحقیق کارگر سپس می تواند به سرعت تکنیک‬
‫‪.‬های خود را برای حل تکنیک های خود توسعه دهد چالش ها و مسائل‬
‫مقداری آموزش در شیمی ساده آزمایشگاه تکنیک‪ :‬فرض بر این است مانند یک پس زمینه با این‬
‫با شیمی بسیار کمی‪ ،‬به ‪. Tists،‬حال‪ ،‬این امکان برای گیاه شناسان و سایر دانشمندان گیاهی وجود دارد‬
‫انجام فیتوشیمی‪ ،‬زیرا بسیاری‪ :‬از تکنیک ساده و سرراست هستند مانند سایر دروس عملی‪ ،‬دانش آموز‬
‫باید تخصص خود را توسعه دهد‪ .‬بدون دستور العمل‪ ،‬اما دقیقا نوشته شده است‪ ،‬می تواند در‬
‫آزمایشگاه جایگزین عقل سلیم و توانایی‪ :‬فکر کردن به چیزها از اصول اولیه‪ .‬نمونه هایی از عملی‬
‫آزمایش هایی که می توان از طریق‪ :‬آنها برای کسب تجربه کار کرد در اکثر بخش‌های فصل‌های‬
‫بعدی مشاهده می‌شود‪ .‬اینها به راحتی می توانند باشند سازگار برای آزمایشگاه دوره های آموزشی و‬
‫زیاد دارند قبال‪ ،‬پیش از این بوده استفاده شده برای این هدف‬
‫محدوده و تعداد ساختارهای‪ :‬مولکولی گسسته تولید شده توسط‪ :‬گیاهان بسیار بزرگ هستند و سرعت‬
‫کنونی پیشرفت دانش ما در مورد این است آنها که یک مشکل عمده در تحقیقات فیتوشیمیایی‪ ،‬گردآوری‪:‬‬
‫آنهاست داده های موجود در مورد هر کالس خاص از ترکیب‪ .‬برآورد شده است‪ ،‬به عنوان مثال‪ ،‬که‬
‫اکنون بیش از ‪ 10000‬آلکالوئید‪ :‬گیاهی شناخته شده وجود دارد عالقه دارویی‪ :‬به آلکالوئیدهای جدید‬
‫مانند آلکالوئیدهای جدید است بودن کشف شده و شرح داده شده‪ ،‬احتماال در را نرخ از یکی آ روز‪:‬‬
‫از آنجایی که تعداد مواد شناخته شده بسیار زیاد است‪ ،‬معرفی ویژه در هر فصل از کتاب مطالبی نوشته شده است که نشان‬
‫دهنده ساختار تنوع طبیعی موجود در هر کالس از ترکیبات‪ ،‬به تشریح آن ترکیباتی که معموالً وجود دارند و نشان می دهند شیمیایی‬
‫تغییر با فرمول های نماینده منابع داده می شود‪ ،‬در هر کجا ممکن است‪ ،‬به لیست های اخیر از ترکیبات شناخته شده در هر‬
‫واکنش های رنگی و طیفی خواص بیشتر ترکیبات رایج ‪ V ،‬را نشان می دهد ‪ .‬مقادیر ‪ R p‬کالس‪ .‬جداول گنجانده شده است که‬
‫گیاهی این جداول داده می شود به طور عمده برای گویا یا مقایسه ای اهداف و هستند نه منظور به بودن جامع‬
‫پیشرفت فیتوشیمیایی کمک زیادی به توسعه روشهای سریع و دقیق غربالگری گیاهان به ویژه مواد شیمیایی و تاکید در این‬
‫کتاب ناگزیر بر کروماتوگرافی است تکنیک‪ .‬این رویه ها نشان داده اند که بسیاری از مواد منشاء‪ -‬به طور کلی فکر به بودن نسبتا‬
‫نادر که در وقوع هستند از تقریبا جهانی توزیع که در را گیاه پادشاهی‪ .‬را اهمیت از ادامه دارد نظرسنجی ها گیاهان برای مواد‬
‫فعال بیولوژیکی نیازی به استرس ندارند‪ .‬قطعا‪ ،‬روش های تشخیص اولیه کالس های خاصی از ترکیبات هستند مورد بحث قرار‬
‫گرفت که در مقداری جزئیات که در را ذیل فصل ها‬
‫با اينكه را مدت‪ ،‬اصطالح 'گیاه' است استفاده شده اینجا به مراجعه کنید به را گیاه پادشاهی مانند آ‬
‫کل‪ ،‬آنجا است مقداری تاکید بر باالتر گیاهان و مواد و روش ها از تحلیل و بررسی‬
 ‫مقدمه‬ ‫‪3‬‬

‫برای میکروارگانیسم ها با هیچ جزئیات خاصی برخورد نمی شود‪ .‬به عنوان یک ژنرال قانون‪ ،‬روش های مورد استفاده در گیاهان‬
‫عالی برای شناسایی آلکالوئیدها‪ ،‬آمینو اسیدها‪ ،‬کینون ها و ترپنوئیدها را می توان مستقیما ً روی سیستم میکروبی اعمال کرد‪ .‬تم‪ .‬در‬
‫بسیاری از موارد‪ ،‬جداسازی بسیار آسان‌تر است‪ ،‬زیرا آلودگی‌های فرعی موادی مانند تانن ها و کلروفیل ها معموالً وجود ندارند‪.‬‬
‫در یک در موارد کمی‪ ،‬به دلیل انعطاف پذیری میکروبی‪ ،‬ممکن است دشوارتر باشد دیواره سلولی و نیاز به استفاده از اختالل مکانیکی‬
‫‪.‬برای آزادسازی برخی از مواد حاضر‬
‫تعدادی از ترکیبات آلی مانند پنی سیلین و آنتی بیوتیک های تتراسایکلین (ترنر‪1971 ،‬؛ ترنر و آلدریج‪ ،)1983 ،‬که به طور خاص‬
‫در میکروارگانیسم ها یافت می شوند و شناسایی آنها وجود ندارد به دلیل محدودیت فضا در اینجا پوشش داده شده است‪ .‬گلسنگ ها نیز‬
‫یک محدوده ایجاد می کنند از رنگدانه های خاص‪ ،‬از جمله دپسیدون ها و دپسیدها‪ .‬اینها هستند تجزیه و تحلیل با روش های‬
‫میکروشیمیایی ویژه‪ ،‬بر اساس واکنش های رنگی‪ ،‬تکنیک های کروماتوگرافی و طیفی یک حساب جامع از شیمی گلسنگ ها توسط‬
‫کولبرسون (‪ )1969‬ارائه شده است‪ .‬تجزیه و تحلیل از گلسنگ رنگدانه ها است ذکر شده به طور خالصه اینجا که در فصل ‪( 2‬پ‪.‬‬
‫‪)101.‬‬
‫ترکیبات شیمیایی گیاهان را می توان در چند دسته طبقه بندی کرد راه های مختلف؛ در این کتاب‪ ،‬طبقه بندی بر اساس منشاء‬
‫بیوسنتزی‪ ،‬خواص حاللیت و وجود گروه های عاملی کلیدی خاص‪ .‬فصل ‪ 2‬ترکیبات فنلی را پوشش می دهد‪ ،‬موادی که به آسانی وجود‬
‫دارند به دلیل ماهیت آبدوست آنها و منشاء مشترک آنها از پیش ساز معطر شیکیمیک اسید فصل ‪ 3‬به ترپنوئیدها می پردازد‪ :،‬که همگی‬
‫دارای‪ :‬خواص لیپیدی و منشا بیوسنتزی از ایزوپنتنیل‪ :‬هستند پیروفسفات فصل ‪ 4‬به اسیدهای آلی‪ ،‬لیپیدها و غیره اختصاص دارد کالس های‬
‫ترکیبی که به صورت بیوسنتزی از استات به دست می آیند‪ .‬فصل ‪ 5‬است بر روی ترکیبات نیتروژنی گیاهان‪ ،‬مواد اساسی شناسایی شده‬
‫به کربوهیدرات های محلول در آب و مشتقات ‪- ter 6‬فصل ‪ Dragendorff.‬توسط آنها پاسخ مثبت به نین هیدرین یا معرف‬
‫آنها می پردازد‪ .‬در نهایت‪ ،‬فصل ‪ 7‬به طور خالصه به درشت مولکول های گیاهان‪ ،‬هسته ای می پردازد اسیدها‪ ،‬پروتئین ها و پلی‬
‫ساکاریدها که به راحتی جدا می شوند از جانب دیگر اجزای تشکیل دهنده توسط باال بودن آنها مولکولی وزنه ها‬
‫‪،‬که در را باقی مانده از این مقدماتی فصل‪ ،‬آی تی است پیشنهاد شده به بحث و گفتگو‬
‫مواد و روش ‪. cal‬به طور کلی روش های استخراج‪ ،‬جداسازی و شناسایی‪ .‬آ بخش پایانی شامل نمونه هایی از کاربرد فیتوشیمی است‬
‫‪.‬ها که در ناهمسان مناطق از گیاه علوم پایه‬
‫‪ Methods in Plant‬دو اثر مرجع عمده در مورد روش های گیاهی موجود است تحلیل و بررسی‪ .‬اولین مورد با عنوان‬
‫به عنوان ویراستار سریال‪ .‬این در یک مجموعه ‪ 10‬جلدی ‪ JB Harbome‬است و ‪ PM Dey‬با ‪8iochemistnj‬‬
‫‪ JF‬و ‪ HF Linskens‬ظاهر شده است ( ‪ .)1997-1989‬دوم روش‌های مدرن گیاهی است تحلیل‪ ،‬سری جدید ویرایش شده توسط‬
‫که انتشار آن در سال ‪ 1985‬آغاز شد و به حدود ‪ 20‬جلد رسیده است‪ .‬بسیاری از متون دیگر از جمله به روشهای ‪Jackson،‬‬
‫فیتوشیمیایی و اینها در منابع در پایان ذکر شده است این و متعاقب فصل ها آ جاری مجله فیتوشیمیایی تحلیل و بررسی است‬
‫‪4‬‬ ‫روش از گیاه تحلیل و بررسی‬

‫‪ |Oufnal‬مستقیما مرتبط به خوانندگان این کتاب مجالت‪ :‬دیگری که ممکن است باشد مشاوره شده اند‬ ‫‪Of ChfO ft l0 tO‬‬
‫‪.‬علوم پایه ‪ YO f OtographiC‬تحلیلی بیوشیمیست ری و مجله از چ ‪Y0ph]،‬‬

‫مواد و روش ها از استخراج و انزوا ‪1.2‬‬

‫‪1.2.1‬‬ ‫را گیاه مواد‬

‫در حالت ایده آل‪ ،‬بافت های تازه گیاهی باید برای تجزیه و تحلیل‪ :‬فیتوشیمیایی‪ :‬و را مواد باید بودن غوطه‬
‫ور شد به غلیان الکل در داخل دقایق‪ :‬از آن مجموعه‪ .‬گاهی اوقات گیاه مورد مطالعه در دسترس و‬
‫مادی نیست ممکن است باید توسط یک کلکسیونر‪ :‬ساکن در قاره دیگری تامین شود‪ .‬در چنین‪ :‬در موارد‪،‬‬
‫دستمال تازه چیده شده‪ ،‬به صورت خشک در یک کیسه پالستیکی نگهداری می شود‪ ،‬معموالً‪ :‬باقی می ماند‬
‫در شرایط خوبی برای تجزیه و تحلیل در طی چند روز مورد نیاز برای ترانس بندر توسط‪ :‬پست هوایی‬
‫از طرف دیگر‪ ،‬ممکن است گیاهان قبل از استخراج خشک شوند‪ .‬اگر این کار انجام شود‪ ،‬همینطور‪:‬‬
‫است ضروری است که را خشك كردن عمل است انجام بیرون زیر کنترل می شود شرط اقداماتی‬
‫برای جلوگیری از وقوع تغییرات شیمیایی بیش از حد باید خشک شود به عنوان در سریع ترین زمان‬
‫بادکش خوب پس از خشک شدن کامل‪ ،‬گیاهان را می ‪ a‬ممکن‪ ،‬بدون استفاده از دماهای باال‪ ،‬ترجیحا در‬
‫توان قبل از تجزیه و تحلیل‪ :‬نگهداری کرد برای دوره های طوالنی از زمان در واقع‪ ،‬تجزیه و تحلیل‬
‫می کند برای فالونوئیدها‪ ،‬آلکالوئیدها‪ ،‬کینون ها و ترپنوئیدها با موفقیت بر روی هرباریوم انجام شده اند‬
‫‪.‬گیاه بافت دوستیابی بازگشت زیاد سال ها‬
‫‪-‬یکی مثال از را استفاده کنید از هرباریوم مواد است را ضروری است روغن تجزیه و تحلیل‪:‬‬
‫ساخته شده قبل از ‪ 1800‬به دست آمده است (هارلی و زنگ‪ Linneaus .)1967 ،‬منتا انجام شد برگ‪ ،‬مواد از مجموعه اصلی‬
‫کمی تغییر می کند که در ضروری است روغن محتوا ممکن است در هر دو بافت برگ و میوه با گذشت‪ :‬زمان رخ می دهد و این‬
‫احتمال باید وجود داشته باشد در نظر گرفته شده است‪ .‬به عنوان مثال‪ ،‬سندفورد و هاینز (‪ )1971‬دریافتند که میزان میریستسین در‬
‫به آرامی افزایش یافت در ذخیره سازی‪ ،‬در حالی که محتوای فرارتر §‪-‬پینن با ‪، Myristica fragrans‬میوه های جوز هندی‬
‫گذشت زمان کاهش یافت‪ .‬بر را دیگر دست‪ ،‬فالونوئیدها و آلکالوئیدها که در هرباریوم نمونه ها هستند به طور قابل مالحظه ای‬
‫در ابتدا در سال ‪ 1675‬جمع آوری شد‪ ،‬هنوز هم ‪ St ry chnos nuxvomica‬پایدار با زمان؛ بنابراین‪ ،‬یک نمونه برگ از‬
‫‪.‬حاوی ‪ ٪2-1‬وزنی آلکالوئید بود (فیلیپسون‪)1982 ،‬‬
‫برخی از زیر کالس های پلی فنل بهتر است تحت کنترل بیشتری استخراج شوند‪ .‬رهبری شرایط از آنها نشان داد در باال‪.‬‬
‫برای مثال‪ ،‬را بازده از باهم متراکم شده تانن از بید برگها بزرگترین است چه زمانی اندازه گیری ها هستند بر روی برگ های‬
‫تازه ای که به جای خشک شدن در هوا با خالء خشک شده اند ساخته می شوند‪ .‬در مقابل‪ ،‬گلیکوزیدهای فنلی ساده در همان‬
‫‪.‬گیاهان بهترین هستند استخراج شده است بعد از ساده خشک کردن هوا (اوریان‪)1995 ،‬‬
‫آزادسازی بافت گیاهی مورد مطالعه از آلودگی با گیاهان دیگر نکته واضحی است که باید در این مرحله مراقب آن باشید‪.‬‬
‫ضروری است‪ ،‬برای مثال‪ ،‬به استخدام کردن گیاهان که هستند رایگان از جانب بیماری‪ ،‬یعنی که هستند نه‬
 ‫مواد و روش ها از استخراج و‬ ‫‪isolnfion‬‬ ‫‪5‬‬
‫تحت تأثیر عفونت ویروسی‪ ،‬باکتریایی یا قارچی قرار می گیرد‪ .‬نه تنها ممکن است محصوالت از سنتز میکروبی در چنین گیاهانی‬
‫تشخیص داده می شود‪ ،‬اما ممکن است عفونت نیز وجود داشته باشد به طور جدی تغییر دهید گیاه متابولیسم و غیر منتظره‬
‫محصوالت میتوانست بودن شکل گرفت‪ ،‬احتماال که در بزرگ مقادیر‬
‫آلودگی همچنین‪ :‬ممکن است هنگام جمع آوری مواد گیاهی پایین برای تحلیل و بررسی‪ .‬زمانی که‬
‫قارچ های رشد انگلی روی درختان جمع آوری می شوند‪ ،‬اینطور است حذف تمام بافت درخت از‬
‫نمونه ها مهم است‪ .‬گزارش های قبلی (پاریس و همکاران‪ )1960 ،‬اسید کلروژنیک‪ ،‬یک محصول‪:‬‬
‫معمولی گیاهی باالتر‪ ،‬در دو قارچ ها تقریبا ً به دلیل آلودگی نادرست‪ :‬هستند‪ .‬تکرار تجزیه و تحلیل بر‬
‫روی مواد با دقت تمیز شده هیچ شواهدی از این عارضه را نشان نداد‪ .‬پوند بودن حاضر‬
‫از نو‪ ،‬خزه ها غالبا رشد که در بستن اتحادیه با ‪).‬منتشر‪ :‬نشده نتایج ‪ FB،‬و هورا ‪(Harborne JB‬‬
‫باالتر گیاهان و آی تی است گاهی اوقات به دست آوردن آنها بدون چنین بستر دشوار است‪ .‬در نهایت‪ ،‬در‬
‫مورد از باالتر گیاهان‪ ،‬مخلوط ها از گیاهان ممکن است گاهی بودن جمع آوری کرد که در خطا‬
‫ممکن است دو گونه چمن نزدیک به هم در کنار هم در مزرعه رشد کنند به اشتباه فرض شده است که‬
‫یکسان است‪ ،‬یا یک گیاه ممکن است با درک اینکه دارای یک انگل است (مانند دودر‪ ،‬کوسکوتا) ‪.‬‬
‫‪.‬اپیتیموم) در هم تنیده شده است با آی تی‬
‫در تجزیه و تحلیل فیتوشیمیایی‪ ،‬هویت گیاهی گیاهان مورد مطالعه قرار گرفت باید توسط یک مرجع تایید شده در برخی از‬
‫مراحل تأیید اعتبار شود تحقیق و بررسی‪ .‬اشتباهات زیادی در مورد هویت گیاه در این گیاه رخ داده است گذشته از اینکه ضروری‬
‫است در هنگام گزارش‪ ،‬صحت مطالب را تأیید کنید مواد جدید از گیاهان یا حتی مواد شناخته شده از گیاهان جدید منابع هویت‬
‫رشته گیاه ‪ a‬مثال الف مشترک گونه ها جمع آوری شده که در مورد انتظار زیستگاه توسط( مطالب یا باید فراتر از سؤال باشد‬
‫یا آی تی باید باشد ممکن است برای را هویت به بودن ایجاد توسط آ کارشناس طبقه بندی به این دالیل‪ ،‬امروزه در گیاهان )شناس‬
‫هرباریوم شناخته شده است ‪ ،‬به ‪ a‬گیاهی رایج است‪ .‬تحقیقات شیمیایی برای‪ :‬سپرده گذاری یک نمونه کوپن از یک گیاه بررسی شده در‬
‫‪.‬طوری که می توان در آینده به گیاه اشاره کرد مطالعه کرد اگر این تبدیل می شود الزم است‬

‫‪1.2.2‬‬ ‫استخراج‬

‫حالت دقیق استخراج به طور طبیعی به بافت و محتوای آب مواد گیاهی استخراج شده و بر اساس نوع سوئی که در حال منزوی شدن‬
‫است‪ .‬به طور کلی‪" ،‬کشتن" گیاه مطلوب است بافت‪ ،‬یعنی جلوگیری‪ :‬از اکسیداسیون یا هیدرولیز‪ :‬آنزیمی‪ ،‬و غوطه ور شدن‪ -‬بافت برگ یا‬
‫گل تازه را که در صورت لزوم به طور مناسب‪ :‬برش داده شود جوشاندن گرم اتانول راه خوبی برای دستیابی به این هدف است‪.‬‬
‫الکل‪ ،‬در هر صورت‪ ،‬یک حالل همه منظوره خوب برای استخراج اولیه است ‪ .‬متعاقبا‪ ،‬را مواد را می توان در مخلوط کن خیس کرد و‬
‫در صورت تالش برای استخراج جامع ضروری است‪ .‬هنگام انزوا موارد خاص از جانب سبز ‪ n‬فیلتر کرد اما این فقط واقعا ً است‬
‫بافت‪ ،‬را موفقیت از را استخراج با الکل است به طور مستقیم مربوط به را وسعت که کلروفیل است حذف شده به را حالل‬
‫‪6‬‬ ‫روش از گیاه تحلیل‪ :‬و بررسی‬

‫و هنگامی که بقایای بافت‪ ،‬در استخراج مکرر‪ ،‬کامالً عاری از آن باشد رنگ سبز‪ ،‬می توان فرض‬
‫‪.‬کرد که تمام وزن مولکولی‪ :‬پایین پوند دارند بوده استخراج شده است‬
‫روش شیمیایی‪ :‬کالسیک برای به دست آوردن ترکیبات آلی از بافت خشک شده گیاه (چوب قلب‪،‬‬
‫دانه های خشک‪ ،‬ریشه‪ ،‬برگ) ادامه می یابد‪ .‬استخراج مواد پودری در دستگاه سوکسله با طیف‬
‫وسیعی از حالل ها‪ ،‬راه افتادن که در دور زدن با اتر‪ ،‬نفت و کلروفرم‪( :‬به جدایی‪ -‬میزان لیپیدها و‬
‫ترپنوئیدها) و سپس استفاده از الکل و اتیل استات (برای ترکیبات قطبی‪ :‬تر)‪ .‬این روش هنگام کار بر‬
‫روی آن مفید است مقیاس گرمی با این حال‪ ،‬به ندرت می توان به تفکیک کامل اجزای تشکیل دهنده دست‬
‫یافت‪ .‬انتها و همان ترکیبات ممکن است بازیابی شود (به نسبت های مختلف) که در چندین کسری‪:‬‬
‫عصاره به دست آمده با فیلتراسیون از طریق سلیت روی‪ :‬آب شفاف می شود پمپ می شود و سپس‬
‫این در حال حاضر معموال در انجام می شود یک اواپراتور چرخشی که ‪ uacuo‬غلیظ می شود در‬
‫محلول‪ :‬های حجیم‪ :‬را تا حد کوچک متمرکز می کند حجم ها‪ ،‬بدون ضربه‪ ،‬در دمای بین ‪ 30‬تا ‪ 40‬درجه‬
‫سانتی گراد‪ .‬عصاره تولید اجزای فرار‪ :‬از گیاهان نیاز به اقدامات احتیاطی خاصی دارد اینها هستند‬
‫‪.‬مورد‪ :‬بحث قرار گرفت بعد‪ ،‬که در فصل ‪3‬‬
‫میانبرهایی در روش های استخراج وجود دارد که فرد با آنها یاد می گیرد تمرین‪ .‬به عنوان مثال‪ ،‬هنگام جداسازی اجزای‬
‫محلول در آب از برگ بافت‪ ،‬لیپیدها باید دقیقا ً در مراحل اولیه برداشته شوند‪ ،‬قبل از تغلیظ‪ ،‬با شستشو عصاره به طور مکرر با نفت‬
‫در واقع زمانی که یک عصاره اتانولی مستقیم غلیظ شود روی چرخشی اواپراتور‪ ،‬تقریبا ً تمام کلروفیل و لیپید در کناره رسوب می‬
‫کند فالسک‪ ،‬و با مهارت‪ ،‬غلظت را می توان درست به سمت راست برد زمانی که کنسانتره آبی را بتوان با پیپت خارج کرد‪،‬‬
‫تقریبا ً به هم متصل شد به طور کامل رایگان از لیپید ناخالصی ها‬
‫عصاره غلیظ ممکن است کریستال ها را در حالت ایستاده رسوب دهد‪ .‬اگر چنین است‪ ،‬اینها باید از طریق فیلتراسیون جمع‬
‫‪.‬آوری شده و همگنی آنها توسط آن مورد آزمایش قرار گیرد کروماتوگرافی که در چندین حالل ها (دیدن بعد بخش)‬
‫اگر یک ماده واحد وجود دارد‪ ،‬کریستال ها را می توان با دوباره خالص سازی کرد‪ .‬تبلور و سپس مواد برای تجزیه و تحلیل‬
‫بیشتر در دسترس است‪ .‬که در در بیشتر موارد‪ ،‬مخلوطی از مواد در کریستال ها و آن وجود خواهد داشت سپس الزم است آنها‬
‫را دوباره در یک حالل مناسب حل کنیم و جدا کنیم‪ .‬ترکیبات را با کروماتوگرافی ارزیابی کنید‪ .‬بسیاری از ترکیبات نیز باقی می‬
‫مانند در مشروب مادر و اینها نیز در معرض کروماتوگرافی قرار می گیرند تقسیم بندی به عنوان یک اقدام احتیاطی استاندارد در‬
‫برابر از دست دادن مواد‪ ،‬تمرکز عصاره های تراشیده شده باید در یخچال و مقداری تولوئن نگهداری شوند اضافه به جلوگیری‬
‫کردن قارچی رشد‬
‫هنگام بررسی مشخصات فیتوشیمیایی کامل یک گیاه معین گونه ها‪ ،‬تفکیک‪ :‬عصاره خام به منظور‬
‫جداسازی مطلوب است طبقات اصلی مواد تشکیل دهنده از یکدیگر‪ ،‬قبل از کروماتوگرافی تحلیل و‬
‫بررسی‪ .‬یک روش مبتنی بر قطبیت های مختلف که ممکن است به کار گرفته شده است بر یک‬
‫حاوی آلکالوئید گیاه است نشان داد که در شکل‪ .1.1 .‬را‬
 ‫سپتامبر ‪ ‹:›f‬مواد و روش ها‬ ‫‪7‬‬
‫تازه برگها یا گل ها‬
‫همگن کردن برای ‪ 5‬دقیقه که در‬
‫فیلتر ‪ wt)،‬ایکس جلد یا ‪MeOH-HQ t4:1) (10‬‬

‫باقی مانده‬ ‫فیلتر کنید‬

‫استخراج کردن با‬ ‫‪ CI‬درجه ‪ voi î< 40‬تبخیر کنید به ‪1/10‬‬
‫من ایکس ‪EtOAc ،51‬‬ ‫‪ lvi HtSOt‬اسیدی کردن به ‪2‬‬
‫فیلتر‬ ‫ایکس ‪ CHCIt f‬استخراج‪ :‬کردن با‬
‫)‪3‬‬

‫باقی مانده‬ ‫فیلتر کنید‬ ‫استخراج ‪CHCI‬‬ ‫الیه اسیدی آبی‬

‫کردن‬
‫فیبر‪:‬‬ ‫تبخیر‬ ‫خشک‪ ،‬تبخیر شود‬ ‫‪ pH‬اساسی کردن به‬
‫به طور عمده پلی‬ ‫‪ NHtOH،‬با ‪10‬‬
‫ساکارید (برای تحلیل‬ ‫خنثی استخراج کردن نسبتا قطبی عصاره ها‬ ‫استخراج کردن با‬
‫دیدن فصل ‪)7‬‬ ‫)چربی ها‪ ،‬موم ها(‬ ‫ترپنوئیدها و جداگانه‪ ،‬مجزا (‬ ‫‪CHCI MeOH‬‬
‫‪ Trc‬توسط فنولیک های‬ ‫بر سیلیس ‪ TLC‬کامپیوتر یا )‬ ‫دو بار ‪l3t1،‬‬
‫‪ GLc‬یا‬ ‫روشن است سیلیس‬
‫‪l‬فصل ‪Tsee 4‬‬ ‫فصل ها ‪Tsee 2,31‬‬

‫‪CHClt-MeOH‬‬ ‫آبی پایه ای‬

‫استخراج‬ ‫الیه ها‬
‫تبخیر کنید‬
‫خشک‪ ،‬عصاره‬ ‫تبخیر با‬
‫‪MeOH‬‬
‫پایه ای استخراج کردن‬ ‫است ‪ MeOH‬عصاره‬
‫آلکالوئیدها ‪Tmost‬‬ ‫قطبی استخراج کردن‬
‫روی سیلیس یا ‪TLC‬‬ ‫دوره دوم‬
‫میبینم‬ ‫الکتروفورز‬ ‫آلکالوئیدها و‬
‫)فصل ‪5‬‬ ‫‪/\/-oxidesl‬‬
‫)می بینم فصل ‪5‬‬

‫شکل ‪ 1.1‬یک روش کلی برای استخراج بافت های تازه گیاهی و تکه تکه کردن به ناهمسان کالس ها با توجه به قطبیت‬

‫مقدار و نوع ترکیبات جدا شده به بخش های مختلف البته از گیاهی به گیاه دیگر متفاوت خواهد بود‪.‬‬
‫همچنین‪ :،‬چنین روشی ممکن است داشته باشد به بودن اصالح شده چه زمانی‪ :‬الغر مواد هستند زیر‬
‫‪.‬تحقیق و بررسی‪:‬‬

‫مواد و روش ها از جدایش‪ ،‬جدایی ‪1.3‬‬

‫‪1.3.1‬‬ ‫عمومی‬
‫جداسازی و خالص سازی ترکیبات گیاهی عمدتا ً انجام می شود با استفاده از یک یا دیگر یا ترکیبی از چهار تکنیک‬
‫)‪ (GLC‬مایع گازی کروماتوگرافی ‪ (TLC)،‬کروماتوگرافی الیه نازک ‪ (PC)،‬کروماتوگرافی‪ :‬کروماتوگرافی کاغذی‬
‫انتخاب تکنیک تا حد زیادی به حاللیت مناسب بستگی دارد‪ .‬روابط و نوسانات از ‪ (HPLC).‬و باال کارایی مایع کروماتوگرافی‬
‫را ترکیبات به بودن جدا از هم‪ .‬کامپیوتر است به ویژه‬
‫‪8‬‬ ‫‪ snslysis‬روش از گیاه‬

‫قابل استفاده برای ترکیبات گیاهی محلول در آب‪ ،‬یعنی کربوهیدرات ها‪ ،‬اسیدهای آمینه‪ ،‬بازهای اسید نوکلئیک‪ ،‬اسیدهای آلی و‬
‫‪،‬است را روش از انتخاب برای جدا کردن همه محلول در چربی اجزاء ‪. TLC‬ترکیبات فنلی‬
‫کاربرد اصلی خود ‪ GLC‬یعنی لیپیدها‪ ،‬استروئیدها‪ ،‬کاروتنوئیدها‪ ،‬کینون های ساده و کلروفیل ها‪ .‬توسط در مقابل‪ ،‬تکنیک سوم‬
‫می یابد‪ .‬ترکیبات کاشی‪ ،‬اسیدهای چرب‪ ،‬مونو و سسکوی ترپن ها‪ ،‬هیدروکربن ها و ترکیبات گوگردی با این ‪ vola-‬را با‬
‫حال‪ ،‬فرار از گیاه جوش باالتر اجزای تشکیل دهنده می توان بودن افزایش یافته است توسط تبدیل کردن آنها به استرها و‪/‬یا تری متیل‬
‫نامناسب‪ :‬متناوبا‪ ،‬اجزای ‪ GLC‬سیلیل اترها به طوری که کالس های کمی وجود دارد که به طور کامل هستند برای جداسازی‬
‫آ روش که ترکیب می کند ستون بهره وری با سرعت تحلیل عالوه بر ‪ HPLC،‬کمتر فرار می توان بودن جدا از هم توسط‬
‫این‪ ،‬ممکن است اشاره شود که وجود دارد قابل توجه همپوشانی که در را استفاده کنید از را در باال تکنیک و غالبا آ کام‪ -‬ترکیب‬
‫ممکن است بهترین باشد رویکرد برای جدا کردن آ خاص کالس از ‪ GLC‬و ‪ TLC‬یا ‪ HPLC‬و ‪ TLC، TLC‬و ‪PC‬‬
‫‪.‬گیاه ترکیب‬
‫همه را در باال تکنیک می توان بودن استفاده شده هر دو بر آ کوچک‪ -‬و آ کالن‬
‫و کامپیوتر ‪. ent‬بر روی الیه های ضخیم جذب انجام می شود ‪، TLC‬مقیاس برای کارهای آماده سازی‬
‫بر ضخیم ورق ها از فیلتر کاغذ‪ .‬برای انزوا بر یک زوج بزرگتر در مقیاس بیش از این‪ ،‬معموالً‪ :‬از‬
‫کروماتوگرافی ستونی‪ :‬همراه با استفاده می شود جمع آوری کسر خودکار این روش ترکیب خالص را‬
‫به دست می دهد توری ها که در گرم مقادیر‬
‫الکتروفورز‪ :‬است‪ .‬در وهله ‪. istry‬یک تکنیک‪ :‬دیگر که کاربرد نسبتا ً گسترده ای در فیتوشیمی‪ :‬دارد‬
‫اول‪ ،‬این تکنیک فقط کاربردی است کابل به ترکیبات که حمل آ شارژ‪ ،‬یعنی آمینو اسیدها‪ ،‬مقداری‬
‫آلکالوئیدها‪ ،‬آمین ها‪ ،‬ارگانیک‪ .‬آلی اسیدها و پروتئین ها با این حال‪ ،‬در عالوه بر این‪ ،‬گواهی می‬
‫توان کالس هایی از ترکیبات خنثی (قندها‪ ،‬فنل ها) ساخت حرکت کردن در میدان الکتریکی‪ :‬با تبدیل آنها‬
‫به مجتمع‪ :‬های فلزی (مثالً با استفاده از سدیم بورات)‪ .‬سارجنت (‪ )1969‬مقدمه ساده ای را ارائه کرده‬
‫‪.‬است الکتروفورتیک تکنیک‬
‫الکتروفورز مویرگی‪ :،‬که در حال حاضر در مد است‪ ،‬در انجام می شود لوله های سیلیسی ذوب شده‬
‫با سوراخ بسیار کوچک به طول حدود یک متر‪ .‬ولتاژ باال (‪ 30‬کیلوولت) اعمال می شود و تشخیص‬
‫در انتهای کاتد تمرین‪ :‬می شود‪ .‬را نمونه‪ ،‬اعمال شده در انتهای آند‪ ،‬می تواند در حد یک نانوگرم‪UV :‬‬
‫باشد‪ ،‬اما غلظت باید نسبتا باال باشد‪ .‬این تکنیک ثابت کرده است به عنوان یک ابزار تحلیلی ارزشمند‪:‬‬
‫برای اکثر کالس های متابولیت ثانویه‪ ،‬ولی بخصوص برای را گیاه پلی فنول ها (توماس‪-‬باربران‪،‬‬
‫‪)1995.‬‬
‫عالوه بر تکنیک‌هایی که تاکنون ذکر شد‪ ،‬از چند تکنیک دیگر نیز استفاده می‌شود‪ .‬متحد در تحقیقات فیتوشیمیایی جداسازی با‬
‫عصاره مایع‪-‬مایع ساده هنوز در زمینه کاروتنوئید از ارزش خاصی برخوردار است (به فصل ‪ ،3‬ص ‪ 138‬مراجعه کنید)‪ .‬را وسیله‬
‫ای برای استخراج خودکار مایع‪-‬مایع‪ ،‬همانطور که در کریگ گنجانده شده است دستگاه توزیع ضد جریان‪ ،‬مدتی است که در‬
‫دسترس بوده است اما زمانی که تکنیک های دیگر شکست می خورند‪ ،‬از آن به عنوان آخرین راه حل استفاده می شود‪ .‬آ دستگاه‬
‫)‪ (DCCC‬راحت تر برای مایع‪-‬مایع استخراج توسعه یافته است‪ -‬باز کرد‪ ،‬تماس گرفت قطره ضد جریان کروماتوگرافی‬
‫که‬
 ‫جدایی ‪ ‹:f‬مواد و روش ها‬ ‫‪9‬‬

‫در مقیاس آماده سازی‪ :‬عمدتا ً برای جداسازی مواد محلول در آب کار می کند‪ .‬دانش آموزان‬
‫اسیدهای‪ :‬کلئیک ‪ nu-‬جدایش‪ ،‬جدایی از گیاه پروتئین ها و ‪(Hostettmann el aI.، 1986).‬‬
‫اغلب به تکنیک های خاصی نیاز دارند که هنوز ذکر نشده است‪ ،‬مانند فیلتراسیون از طریق ژل‬
‫سفادکس‪ ،‬کروماتوگرافی میل‪ :‬ترکیبی‪ :‬و دیفرانسیل اولتراسانتریفیوژ‬
‫به عنوان مثال رجوع( از آنجایی که در جاهای دیگر در مورد کروماتوگرافی بسیار نوشته شده است‬
‫در اینجا فقط الزم است که جدایی اصلی را مورد بحث قرار دهیم تکنیک ‪ Heftmann، 1992)،‬کنید به‬
‫هایی که در تحقیقات فیتوشیمیایی به کار می روند و برای دادن الف تعداد کمی منتهی شدن منابع به‬
‫دیگر در دسترس متن ها‬

‫‪1.3.2‬‬ ‫کاغذ کروماتوگرافی‬

‫یکی از اصلی‌ترین مزیت‌های رایانه شخصی‪ ،‬راحتی زیاد در انجام آن است جداسازی‪ :‬به سادگی بر‬
‫روی ورق های کاغذ فیلتر‪ ،‬که هر دو به عنوان وسیله ای برای جداسازی‪ :‬و به عنوان تکیه گاه‪.‬‬
‫مقادیر تعیین شده بر روی کاغذ‪ ،‬به طوری که ‪ R‬مزیت دیگر این است تکرارپذیری‪ :‬قابل توجهی‪ :‬از‬
‫چنین اندازه گیری ها پارامترهای‪ :‬ارزشمندی هستند برای استفاده در توصیف جدید ترکیبات گیاهی در‬
‫‪، R‬واقع‪ ،‬برای موادی مانند آنتوسیانین‪ :‬ها‪ ،‬که دیگر خواص فیزیکی مشخص و مشخصی ندارند‬
‫‪.‬بیشترین است ابزار مهمی برای توصیف و تشخیص‪ :‬رنگدانه های مختلف است (هاربوم‪)1967 ،‬‬
‫کروماتوگرافی روی کاغذ معموالً‪ :‬شامل پارتیشن یا جذب می شود‪ .‬کروماتوگرافی یونی در پارتیشن‪،‬‬
‫( ترکیبات به صورت تقسیم بندی می شوند‪ :‬بین یک حالل الکلی تا حد زیادی‪ :‬غیر قابل امتزاج با آب‬
‫بوتانول‪-‬اسید استیک‪-‬آب (‪ ،5 :1 :4‬الیه‪، n-‬و اب‪ .‬مخلوط حالل کالسیک )بوتانول‪ n-‬به عنوان مثال‬
‫در واقع ابداع شد به عنوان وسیله ای از افزایش محتوای‪ :‬آب الیه )‪ BAW‬مخفف به عنوان( باالیی)‬
‫هنوز به طور گسترده قابل ‪، BAW‬بوتانول‪ :‬و در نتیجه بهبود کاربرد‪ :‬مخلوط‪ :‬حالل در واقع‪n-‬‬
‫استفاده است به عنوان یک حالل عمومی برای بسیاری از طبقات ترکیبات گیاهی‪ .‬در مقابل‪،‬‬
‫در حالل های آبی است‪ .‬آب خالص یک حالل ‪ PC‬نیروهای‪ :‬جذب یکی از ویژگی‪ :‬های اصلی‬
‫کروماتوگرافی‪ :‬همه کاره قابل توجه است می توان بودن استفاده شده به جداگانه‪ ،‬مجزا را پورین‬
‫های رایج و پیریمیدین ها و همچنین برای ترکیبات فنلی و گلیکوزیدهای‪ :‬گیاهی قابل استفاده است‬
‫‪.‬عمومی‬
‫انتخاب دستگاه برای کامپیوتر‪ :‬بستگی دارد تا حدودی در مقدار فضای آزمایشگاهی موجود‪ :‬برای مثال‬
‫استاندارد دارد ‪ .‬به طرز ‪ TLC‬افقی یا دایره ای می گیرد فضای کمی بیشتر از یک مخزن ‪PC‬‬
‫چشمگیری خوب است وضوح‪ :‬و برای مثال برای جداسازی کاروتنوئیدها‪ :‬استفاده می شود‪ .‬در بیشتر‪:‬‬
‫سخنرانی‪ :‬های آزمایشگاهی‪ ، :‬کامپیوتر است انجام بیرون توسط‪ :‬فرود‪ :،‬که در تانک ها که اراده جای‬
‫دادن‪ -‬تاریخ چه مردی اوراق از اندازه ‪ 46‬ایکس ‪ 57‬سانتی متر‪ .‬نزولی کامپیوتر بیشتر است مفید است‬
‫زیرا در صورت تمایل‪ :،‬حالل می تواند به راحتی‪ :‬بیش‪ :‬از حد مورد استفاده قرار گیرد‪ .‬این است همچنین‬
‫دو بعدی جدایی ها ‪ t‬اندکی بیشتر‪ :‬راحت برای‬
‫طیف قابل توجهی از کاغذهای صافی اصالح شده در تجارت موجود است‪ .‬بطور کلی برای دستیابی‬
‫‪،‬به خاص کروماتوگرافی جدایی ها برای مثال‬
‫‪10‬‬ ‫روش از گیاه تحلیل و بررسی‬

‫خواص قطبی‪ :‬سلولز را می توان با ترکیب سیلیس کاهش داد اسید یا آلومینا وارد کاغذها می شود و آنها‬
‫را برای جداسازی مناسب تر می کند لیپیدها مقاالت را نیز می توان در آزمایشگاه اصالح کرد‪ ،‬به عنوان‬
‫مثال‪ ،‬توسط خیساندن آنها در پارافین یا روغن سیلیکون به منظور انجام "معکوس" کروماتوگرافی‬
‫فاز‪ ،‬دوباره برای لیپیدها برای مقیاس بزرگ جدایی ها‪ ،‬ضخیم ورق ها فیلتر کروماتوگرافی کاغذ‬
‫موجود‪ :‬است (چه مردی نه ‪ 3‬یا ‪ 3‬میلی متر) و اینها اراده کنار آمدن با چندین‪ :‬میلی گرم از مواد مطابق‬
‫ورق‬
‫تشخیص داده می شوند‪ :‬لکه ‪ UV-fluorescent‬ترکیبات معموالً به صورت رنگی یا ‪ PC،‬در‬
‫ها‪ ،‬پس از واکنش با کروموژنیک‪ :‬معرف‪ ،‬به عنوان اسپری یا به عنوان یک شیب برای ورق های‬
‫بزرگ‪ ،‬فرو بردن معموال راحت تر اما حالل محتوا اسپری باید به منظور تسهیل در خشک شدن سریع‬
‫اصالح شود بنابراین از انتشار در طول غوطه وری جلوگیری کنید‪ .‬سپس کاغذ ممکن است در آن گرم‬
‫شود سفارش به توسعه دهد را رنگ ها‬
‫فاصله ای است که یک ترکیب در کروماتوگرافی حرکت می کند نسبت به جلوی حالل با ‪ fi‬مقدار‬
‫اندازه گیری فاصله از را اصل و نسب به را مرکز از را نقطه تولید شده توسط‪ :‬را ماده‪ ،‬و این است‬
‫تقسیم بر فاصله بین مبدا و جلوی حالل (یعنی مسافتی که حالل طی می کند)‪ .‬این همیشه به صورت‬
‫کسری‪ :‬و دروغ ظاهر می شود بین ‪ 0.01‬و ‪ .0.99‬ضرب این در ‪ 100‬راحت است و اسب بخار است‬
‫گاهی است معرفی‪ (X 100) :‬در جای دیگر‪ ،‬آر ‪ hps (x 100).‬نقل شده است که در این کتاب به عنوان‬
‫‪.‬ارزش ‪ hR،‬شده به مانند را‬
‫مفید ‪، flp‬یک سری از ترکیبات ساختاری مرتبط پوند‪ ،‬مراجعه به ثابت کروماتوگرافی دیگر ‪ *IP‬هنگام مقایسه مقادیر‬
‫‪:‬توسط را اصطالح ‪ fl،‬است ارزش‪ .‬این است مربوط به‬

‫( ‪ nd R‬فی ( ‪ R‬داده‪ :‬ها از فالونول ‪ -5‬متیل اترها‪ :‬مقایسه از واقعی ( ‪ R‬جدول ‪1.1‬‬
‫‪ ABp‬محاسبه شد از جانب‬

‫”)‪R، (xl00‬‬

‫‪forestnl‬‬ ‫‪50% HOAc‬‬ ‫‪PhOH‬‬ ‫ممنوع‬

‫کردن‬

‫کامپفرول‬ ‫‪62‬‬ ‫‪44‬‬ ‫‪58‬‬ ‫‪91‬‬

‫کوئرستین‬ ‫‪45‬‬ ‫‪31‬‬ ‫‪28‬‬ ‫‪76‬‬
‫میریستین‬ ‫‪29‬‬ ‫‪21‬‬ ‫‪10‬‬ ‫‪41‬‬
‫کامپفرول ‪ -5‬متیل اتر‬
‫واقعی ارزش‬ ‫‪70‬‬ ‫‪43‬‬ ‫‪78‬‬ ‫‪82‬‬
‫ارزش پیش بینی کرد از جانب‬ ‫‪Aflp‬‬ ‫‪70‬‬ ‫‪41‬‬ ‫‪76‬‬ ‫‪89‬‬
‫کوئرستین ‪ -5‬متیل اتر (آزالیتین)‬ ‫‪53‬‬ ‫‪29‬‬ ‫‪42‬‬ ‫‪55‬‬
‫میریستین ‪ -5‬متیل اتر‬ ‫‪37‬‬ ‫‪21‬‬ ‫‪23‬‬ ‫‪27‬‬

‫‪.‬اندازه گیری شده بر چه مردی نه ‪ 1‬کاغذ *‬

 ‫مواد و روش ها از جدایی‬ ‫‪11‬‬

‫در یک سری همولوگ معموال ثابت ‪ ARE‬برای ارتباط با تحرک‪ :‬کروماتوگرافی ارزشمند است به ساختار شیمیایی‪ ،‬از آنجایی‪ :‬که مقادیر‬
‫برای تعداد هیدروکسیل ثابت هستند و جایگزین های گلیکوزیل موجود در مولکول ‪، ARps‬هستند‪ .‬بنابراین‪ ،‬با ترکیبات فالونوئیدی‬
‫استفاده شود ناشناخته عضو یک سری ‪ an‬مقدار ‪ fi،‬این روش می تواند برای محاسبه ‪).‬و وستال‪(Bate-Smith 1956 ،‬‬
‫ترکیبات‪ ،‬به منظور تسهیل جستجو برای ترکیب خاص در عصاره های گیاهی‪ .‬چنین رویه ای به عنوان مثال‪ ،‬در توصیف یک متیل‬
‫پیش‌بینی‌شده و واقعی بسیار خوب بودند توافق (جدول ‪( )1.1‬هربرن‪ fi ،‬که در آن مقادیر ‪ kaempferol،‬اتر جدید استفاده شد‬
‫‪)1969.‬‬
‫)‪ Peereboom (1971‬در ادبیات گسترده در رایانه شخصی‪ ،‬یک حساب مقدماتی مفید نوشته شده است برای تازه کار‬
‫هستند‪ .‬لینک )‪ Lederer (1957‬و ‪ Lederer‬داده ها ‪ fl،‬است‪ .‬کتاب‌هایی که در رایانه شخصی هستند به عنوان منابع‬
‫‪.‬ها (‪ )1959‬و شرما و تسوایگ (‪)1971‬‬

‫‪1.3.3‬‬ ‫الغر الیه کروماتوگرافی‬

‫در مقایسه با به کامپیوتر شامل تطبیق پذیری‪ ،‬سرعت و حساسیت تطبیق پذیری به دلیل این واقعیت است که ‪ TLC‬مزایای ویژه‬
‫تعدادی از متفاوت است جاذب ها عالوه بر سلولز ممکن است روی یک صفحه شیشه ای یا موارد دیگر پخش شوند پشتیبانی و برای‬
‫کروماتوگرافی به کار گرفته شد‪ .‬اگر چه ژل سیلیکا بیشتر است به طور گسترده استفاده می شود‪ ،‬الیه ها ممکن است از اکسید‬
‫آلومینیوم‪ ،‬سلیت‪ ،‬کلسیم ساخته شوند‪ .‬سیوم هیدروکسید‪ ،‬رزین تبادل یونی‪ ،‬فسفات منیزیم‪ ،‬پلی آمید‪ ،‬سفادکس‪ ،‬پلی وینیل پیرولیدون‪،‬‬
‫به دلیل بیشتر بودن آن است ماهیت فشرده جاذب هنگامی که روی ‪ TLC‬سلولز و از مخلوط دو یا بیشتر از مواد فوق سرعت بیشتر‬
‫به گونه ای است که ‪ TLC‬صفحه پخش می شود و یک مزیت است زمانی که کار کردن با ترکیبات حساس در نهایت‪ ،‬حساسیت‬
‫‪.‬از مواد می تواند باشد به دست آورد اگر الزم است ‪ qg‬جدایی ها در مقادیر کمتر از‬
‫کار زیاد پخش بود صفحات شیشه ای با جاذب‪ ،‬کار تا حدودی با مقدمه بعدی آسان شد مجرای ‪ TLC،‬یکی از معایب اولیه‬
‫دستگاه های پخش خودکار‪ .‬با این وجود‪ ،‬حتی با وجود اینها‪ ،‬اقدامات احتیاطی خاصی الزم است‪ .‬صفحات شیشه ای باید با احتیاط‬
‫باشند برای از بین بردن چربی با استون تمیز می شود‪ .‬سپس دوغاب سیلیکاژل (یا جاذب دیگر ) در آب باید برای مدت معینی به‬
‫شدت تکان داده شود فاصله زمانی (مثالً دهه ‪ )90‬قبل از انتشار‪ .‬بسته به اندازه ذرات جاذب‪ ،‬همی هیدرات سولفات کلسیم (‪)%15‬‬
‫ممکن است الزم باشد به آن اضافه شود کمک بستن را جاذب بر به را شیشه‪ .‬سرانجام‪ ،‬بشقاب ها بعد از در حال گسترش‬
‫در ‪ 110 - 0 10‬ا‪:‬ی‪ :‬سی ‪ ove n‬گرمایش که در یک ‪ b y‬فعال شد _ ‪ n‬ب ه هوا خشک کردن د و ‪ t o‬دارند‬
‫مثال نیترات نقره( به مدت ‪ 30‬دقیقه در برخی از جداسازی ها‪ ،‬اصالح مناسب سودمند است‪ .‬جاذب را با افزودن یک نمک معدنی‬
‫و این بهترین کار زمانی است که صفحه در حال پخش شدن است‪ .‬دلیل دیگر استفاده از )‪ arg entat ion TLC‬برای‬
‫صفحات پوشش داده شده در آزمایشگاه این است که رطوبت سیلیکاژل را می توان کنترل کرد‪ ،‬عاملی که وجود دارد‬
‫برای مقداری جدایی ها ‪CPitiCal‬‬
‫‪12‬‬ ‫روش از گیاه تحلیل‪ :‬و بررسی‬

‫با این حال‪ ،‬امروزه استفاده از صفحات از پیش روکش شده تجاری معمول‪ :‬است‪ .‬در اکثر کارها تولید‬
‫اساسی است‪ ،‬زیرا اینها یکنواخت تر هستند و ارائه می دهند نتایج تکرارپذیرتر‪ :‬طیف وسیعی از این‬
‫صفحات موجود‪ :‬است ناهمسان جاذب ها‪ ،‬پوشش داده شده بر شیشه‪ ،‬آلومینیوم ورق ها یا پالستیک اینها‬
‫ممکن است با یا بدون نشانگر فلورسنت‪ ،‬اضافه کردن آن باشد امکان تشخیص تمام ترکیباتی که‬
‫با طول موج ‪ 254‬لبه مشاهده می شود‪ UV .‬فلورسانس را خاموش می کنند‪ ،‬هنگامی که صفحه در نور‬
‫آن است که با همان ریزذرات ریز پوشش داده شده است سیلیس که در ‪ TLC‬بیشترین‪ :‬نوع‪ :‬اخیر صفحه‬
‫و آی ‪ HPTLC‬استفاده می شود‪ .‬چنین کروماتوگرافی است نامگذاری‪ :‬شده است ‪ HPLC‬ستون های‬
‫‪.‬تی معموال می دهد بیشتر کارآمد و سریع جدایی ها نسبت به‪ .‬تا بر مرسوم سیلیس الیه های‬
‫و در داخل استفاده شده است به طور کلی‪ ،‬عرض جغرافیایی بیشتری ‪ PC‬نسبت به ‪ TLC‬طیف وسیع تری از حالل ها برای‬
‫در نسبت های دقیق حل های مختلف وجود دارد‪ .‬دریچه های مورد استفاده در سیستم حالل ب‪ ،‬مقادیر به طور قابل توجهی کمتر‬
‫بازتولید می شوند غیر از روی کاغذ است و بنابراین گنجاندن یک یا چند مورد ضروری است ترکیبات مرجع به عنوان نشانگر‬
‫را انجام می دهم ‪ ،‬اما این یک فرآیند بسیار ‪ TLC‬من ‪ R R‬امکان استانداردسازی وجود دارد شرایط برای اندازه گیری دقیق‬
‫معموالً از طریق صعود انجام می شود‪ ،‬در مخزنی که با کاغذ روکش شده است به طوری که اتمسفر داخل ‪. TLC‬خسته کننده است‬
‫افقی به کار گرفته می شود‪ ،‬چه زمانی که صفحات باید با حالل بیش از حد پر شوند و چه ‪. TLC‬با فاز حالل اشباع شده است‬
‫است استفاده شده که در ترکیبی با الکتروفورز ‪ TLC‬زمانی‬
‫معموال توسط با اسپری کردن‪ ،‬مساحت کوچکتر صفحه (‪ 20×20‬سانتی متر) این امر ‪ TLC‬تشخیص ترکیبات روی صفحات‬
‫را نسبتا ً مناسب می کند رویه ساده یک مزیت نسبت به کامپیوتر این است که صفحات شیشه ای ممکن است اسپری شده با کانکس‬
‫مفید است تشخیص معرف برای استروئیدها و لیپیدها "‪H SO‬‬
‫‪TLC‬‬ ‫به جای نازک انجام می شود (‪ 0.25-0.10‬میلی متر) الیه های از )‪ lmm‬تا( آماده سازی با استفاده از ضخامت‬
‫در را ‪. ent‬جاذب ساخته بشقاب ها هستند در دسترس برای این‪ .‬اجزای جدا شده با خراش دادن مواد جاذب بازیابی می شوند‬
‫مناسب‪ :‬مکان ها بر را توسعه یافته بشقاب‪ ،‬در حال شستشو را پودر با حاللی مانند اتر و در نهایت سانتریفیوژ برای حذف جاذب‬
‫چنین‪ :‬است را استحکام ‪ -‬قدرت از را جاذب الیه های بر شیشه که آی تی است ممکن است به‬
‫به طور‪ :‬مکرر یک صفحه با یک یا چند سیستم حالل مختلف ایجاد کنید‪ ،‬خشک کردن صفحه در بین‬
‫ابداع شده توسط ون سومر (‪ ،)1969‬می تواند مورد ‪ TLC،‬توسعه‪ .‬متناوبا‪ ،‬یک مضرب سیستم حذف‬
‫استفاده قرار گیرد‪ .‬این شامل بریدن یک مستطیل بلند است صفحه شیشه ای پخش‪ :‬شده با جاذب با یک‬
‫برش شیشه در مراحل مناسب در یک جداسازی پیچیده و حتی اسپری جاذب تازه روی صفحه در بین‬
‫ذکر ‪ TLC‬در کتاب ها شرح داده شده است بر ‪ TLC‬جداسازی‪ :‬ها‪ .‬زیاد سایر اصالحات رویه اصلی‬
‫شده زیر‬
‫بسیار زیاد است‪ .‬جامع ترین کتاب در را موضوع‪ :‬است شاید که ویرایش‪ :‬شده توسط ‪ TLC‬ادبیات‬
‫استال (‪ .)1969‬آ ساده معرفی است را کتاب توسط راستگو‪ .)1963( :‬دیگر مهم مشارکت ها هستند را‬
‫آثار از‬
 ‫مواد و روش ها از جدایی‬ ‫‪13‬‬

‫با صفحات رنگی ‪ TLC،‬بابیت (‪ ،)1963‬کرشنر‪ )1978( :‬و تاچ استون و دابینز (‪ .)1978‬آ اطلس‬
‫‪.‬از جداسازی الیه های نازک فراوان‪ ،‬بوده است تولید شده توسط‪ :‬واگنر‪ :‬و بالد (‪)1996‬‬

‫گاز مایع کروماتوگرافی ‪1.3.4‬‬

‫الزم ‪ TLC‬یا ‪ PC‬پیچیده است و گران‪ ،‬نسبت فامیلی به آنچه برای ‪ GLC‬دستگاه ضروری برای‬
‫دیگر وجود ندارد ج پیچیده نسبت به‪ .‬تا دیگر کروماتوگرافی ‪، GLC‬است‪ .‬با این حال‪ ،‬در اصل‬
‫رویه ها‬
‫‪:‬دارد چهار اصلی اجزاء مانند به شرح زیر است ‪ GLC‬دستگاه برای‬
‫)‪(1‬‬ ‫معموالً از فلز ساخته شده به شکل یک سیم پیچ برای )‪ lmm‬به عنوان مثال ‪ 3‬متر( ستون یک لوله باریک بلند است‬
‫حفظ فضا‪ .‬این با یک بسته بندی شده است ثابت فاز (به عنوان مثال ‪ ٪15-5‬سیلیکون روغن) بر یک بی اثر پودر‬
‫( کروموسورب دبلیو‪ ،‬سلیت و غیره)‪ .‬بسته بندی ضروری نیست و جایگزین به طور مستقیم از یک ستون سیلیسی باز استفاده‬
‫‪ GLC).‬مویرگی( می شود که در آن فاز ساکن است گسترش مانند آ فیلم بر را داخل سطح‬
‫برای گرم کردن تدریجی ستون از ‪ 50‬به ‪ 350‬درجه سانتی گراد با نرخ استاندارد و برای حفظ دما در باالتر ‪(2) Cenfer‬‬
‫در صورت لزوم محدود کنید دمای ورودی ستون جداگانه است کنترل می شود بنابراین که را نمونه می توان بودن به‬
‫طور سریع بخار شده مانند این است گذشت‪ :‬بر به را ستون را نمونه منحل شد که در اتر یا هگزان است توسط سرنگ‬
‫زیرپوستی از طریق یک الستیک به درگاه ورودی تزریق می شود سپتوم‬
‫)‪(3‬‬ ‫از یک گاز حامل بی اثر مانند نیتروژن یا آرگون تشکیل شده است‪ .‬جداسازی ترکیبات روی ستون به عبور ‪ Gris‬جریان‬
‫‪.‬از آن بستگی دارد گاز از طریق در آ کنترل می شود نرخ‬
‫)‪(4‬‬ ‫آ تشخیص‬ ‫است مورد نیاز است به اندازه گرفتن را ترکیبات مانند آنها هستند ‪dn›ice‬‬
‫ستون را جارو‪ :‬کرد تشخیص اغلب بر اساس هر کدام است یونیزاسیون شعله یا جذب الکترون‬
‫روش سابق مستلزم‪ :‬گاز هیدروژن به مخلوط گاز اضافه شود و در آن بسوزد آشکارساز واقعی‬
‫دستگاه تشخیص به یک پتانسیومتر متصل است ضبط کننده‪ ،‬که نتایج جداسازی‪ :‬را به صورت‬
‫‪.‬مجموعه ای از قله ها از متفاوت است شدت (دیدن شکل‪)1.2 .‬‬
‫را می توان بر حسب حجم نگهداری آن بیان کرد‪ ،‬که حجم گاز حامل مورد نیاز برای ‪ GLC‬نتایج‬
‫که زمان مورد نیاز برای آن "‪ A‬یا بر حسب زمان نگهداری ‪ n‬شستشوی یک جزء از آن است ستون‬
‫است شستشوی‪ :‬نمونه این پارامترها تقریبا ً همیشه در بیان می شوند‪ :‬اصطالحات مربوط‪ :‬به یک ترکیب‬
‫که ممکن‪ :‬است باشد به عصاره نمونه‪ :‬اضافه می شود یا می تواند ‪ AA)،‬یا ‪ AAA‬به عنوان( استاندارد‬
‫‪.‬به شکل حالل باشد استفاده شده برای حل شدن که نمونه‬
‫ماهیت فاز ساکن هستند ستون و را درجه حرارت از عمل‪ .‬اینها هستند متنوع با ‪ GLC‬اصلی در‬
‫توجه‪ :‬به‬
‫را قطبیت‬ ‫و نوسان از را ترکیبات بودن جدا از هم‪ .‬زیاد‬
‫‪14‬‬ ‫روش از گیاه تحلیل و بررسی‬

‫‪Peak‬‬ ‫‪6‬‬

‫‪43‬‬

‫‪70‬‬ ‫‪60‬‬ ‫‪50‬‬ ‫‪40‬‬ ‫‪30‬‬ ‫‪20‬‬

‫)حفظ زمان امین‬

‫از جداسازی مخلوط استرول استات موجود در جو دو سر دانه کلید‪ ،1 :‬کلسترول؛ ‪ GLC ،2‬شکل ‪ 1.2‬اثر‬
‫براسیکاسترول؛ ‪ ،3‬کامپسترول؛ ‪ ،4‬استیگماسترول؛‬
‫ثابت فاز ‪ %1‬است سیکلوهگزان متانول ‪، A 7 -avenasterol.‬و ‪، A 5 -avenasterol; 7‬سیتوسترول؛ ‪5، 6‬‬
‫‪.‬سوکسینات ‪ %2 +‬پلی وینیل پیرولیدون روی گاز اسید شسته کروم پ ‪( 225‬از جانب شوالیه ها‪)1965 ،‬‬

‫دسته هایی از مواد به طور معمول به مشتقات تبدیل می شوند (به ویژه به تری متیل سیلیل اترها) قبل از قرار گرفتن در معرض‬
‫‪.‬زیرا این امکان را به آنها می دهد جدایش‪ ،‬جدایی در آ پایین تر درجه حرارت ‪GLC،‬‬
‫داده های کمی و کیفی را در مورد گیاهان فرعی ارائه می دهد‪ .‬مواضع‪ ،‬از آنجایی که اندازه گیری های منطقه زیر ‪GLC‬‬
‫به طور مستقیم با غلظت های مختلف مرتبط است‪ .‬اجزاء را در مخلوط اصلی قرار )شکل ‪ GLC (1.2‬قله نشان داده شده در اثر‬
‫دهید‪ .‬دو کلی وجود دارد فرمول ها برای اندازه گیری اینها مناطق‪( :‬ن) اوج ارتفاع ایکس اوج عرض در نیم را ارتفاع‬
‫از مساحت قله (این فقط برای قله های متقارن صدق می کند)‪ ،‬و (ب) مساحت قله معادل مثلثی ‪= 94٪‬‬
‫است که با رسم مماس ایجاد می شود از طریق را نکته ها از عطف اوج مناطق‪ :‬می توان بودن مشخص‬
‫خودکار با صدا‪ ،‬به عنوان مثال توسط‪ :‬استفاده کنید از یک الکترونیکی یکپارچه ساز‬
‫را می توان به گونه ای تنظیم کرد که جدا شود اجزاء بیشتر در معرض تجزیه و تحلیل طیفی یا دیگر قرار ‪ GLC‬دستگاه‬
‫است بطور خودکار مرتبط به جرم طیف سنجی (ام‌اس) و را دستگاه ترکیبی ‪، GLC‬می گیرند‪ .‬رایگان ترین به طور مرتب‬
‫در سال های اخیر به عنوان یکی از دستگاه ها ظهور کرده است اکثر مهم از همه تکنیک برای فیتوشیمیایی ‪GC-MS‬‬
‫‪.‬تحلیل و بررسی‬
‫وجود دارد‪ ،‬تعداد کمی از آنها این کار را کرده اند با در نظر ‪ GLC‬اگرچه کتاب ها و بررسی های متعددی در مورد‬
‫گرفتن مخاطبان فیتوشیمیایی نوشته شده است‪ .‬یک معرفی مفید ‪ -‬توری متن‪ ،‬از جانب را کاربردی نقطه از چشم انداز‪ ،‬است که از‬
‫سیمپسون (‪ .)1970‬آ متن‬
 ‫مواد و روش ها از جدایی‬ ‫‪15‬‬

‫و استورز (‪ GLC )1962‬به طور خاص با کاربردهای بیوشیمیایی ‪d ealing‬‬ ‫‪.‬است که از برچفیلد‬

‫‪1.3.5‬‬ ‫‪ IHPLCI‬باال کارایی مایع کروماتوگرافی‬

‫است داده های کمی و کیفی در یک عملیات واحد‪ .‬در آن ‪ GLC‬از نظر حساسیت و توانایی آن در ارائه هر دو مشابه ‪H PLC‬‬
‫تفاوت دارد فاز ثابت متصل به یک پلیمر متخلخل‪ :‬در یک سوراخ باریک نگه داشته می شود ستون فوالد ضد زنگ و فاز متحرک مایع با‬
‫عمدتا ً به این دلیل که یک سیستم پمپاژ ‪ GLC،‬گران تر است از ‪ HPLC‬فشار وارد می شود تحت فشار قابل توجهی دستگاه‬
‫اتصاالت باید به صورت پیچی متصل شوند برای‪ :‬مقاومت در برابر‪ :‬فشارهای موجود فاز متحرک یک ‪ c‬مناسب مورد نیاز است و همه‬
‫یا ممکن است به طور مداوم تغییر کند در آن )جدایی ایزوکراتیک( ‪ c instant‬مخلوط حالل قابل اختالط است که یا باقی می ماند‬
‫نسبت‪ ،‬با گنجاندن یک محفظه اختالط در تنظیم (شیب شستشو)‪ .‬ترکیبات به عنوان شستشو از ستون توسط ابزاری از یک آشکارساز‪،‬‬
‫که معموال در اشعه ماوراء بنفش اندازه گیری می شود‪ .‬یک محاسبات ممکن است انتگرال‌کننده اضافه شود تا داده‌ها را در زمان ظهور و‬
‫کل مدیریت کند عمل قابل کنترل است از طریق آ ریزپردازنده‬
‫به طور معمول در دمای محیط عمل می کند‪ ،‬به طوری ‪ dure‬این است که روش قبلی ‪ GLC‬و ‪ HPLC‬تفاوت عمده بین‬
‫ممکن ‪ HPLC‬که ترکیبات قرار نمی گیرند به امکان حرارتی تنظیم مجدد در طول جدایش‪ ،‬جدایی‪ .‬با این حال‪ ،‬کنترل دمای ستون‬
‫است باشد سودمند برای جداسازی بحرانی به طوری که ترموستاتیک کنترل می شود ژاکت ممکن است مورد نیاز باشد‪ .‬ستون‪ ،‬که‬
‫معموال با بسیار بسته بندی شده است کم اهمیت کروی ذرات از سیلیس پوشش داده‪ :‬شده یا چسبانده شده با ثابت فاز‪ ،‬به ویژه نسبت به‬
‫مسمومیت با ناخالصی حساس است‪ ،‬به طوری که ضروری است عصاره های گیاهی را قبل از تزریق در سر‪ ،‬صاف کنید ستون‬
‫عمدتاً برای آن دسته از ترکیبات استفاده می شود که غیر فرار‪ ،‬به عنوان مثال ترپنوئیدهای باالتر‪ ،‬فنول ها از همه نوع‪HPLC ،‬‬
‫آلکالوئیدها‪ ،‬لیپیدها و قندها بهترین عملکرد را برای ترکیباتی دارد که می توان آنها را در دستگاه فوق العاده تشخیص داد‪ .‬نواحی بنفش یا‬
‫نشان داده شده است در شکل ‪ .1.3‬برای قندها‪ ،‬که نشان نمی دهند ‪ HPLC‬توسط ‪ ds‬مرئی طیف نمونه ای از جداسازی فالونوی‬
‫من‪ ،‬ممکن است برای‪ :‬استفاده از انکسار آشکارساز شاخص‪ ،‬اما این است آ کمتر حساس روش‪ .‬پروتئین ها دارند بوده جدا ‪ UV‬جذب‬
‫بر ‪ HPLC‬از هم توسط‬
‫از اصالح شده سفادکس‪ ،‬سیلیس ژل ها یا یون مبدل ها ‪ ns‬ستون‬
‫بسیاری از انواع از ‪ dfld‬مدرن‪ ،‬از ستون های از پیش بسته بندی شده استفاده می شود ‪ HPLC‬در اکثر جداسازی های‬
‫تولید کنندگان در دسترس هستند‪ .‬با این حال‪ ،‬این است انجام اکثر جداسازی ها با استفاده از میکرو متخلخل سیلیس امکان پذیر‬
‫پیوند خورده است ستون فاز (برای ترکیبات قطبی) (همیلتون و سیول‪ C,$ ،‬است ستون ذرات (برای‪ :‬ترکیبات غیر قطبی) یا فاز معکوس‬
‫‪ .)1982‬یکی جزئیات عملی نهایی نیاز به ذکر دارد‪ .‬حالل ها باید فوق خالص باشند و نیاز به بودن گاز زدایی شده قبل از استفاده‬
‫‪.‬کنید‬
‫‪ t6‬روش های‬ ‫از گیاهان تحلیل و بررسی‬

‫درست است ‪C.‬‬

‫سی‪ .‬برهنه‬

‫‪20 •--‬‬

‫‪30‬‬ ‫•"‬ ‫‪30‬‬

‫‪*Sy3G‬‬
‫‪G‬م ‪3/‬‬ ‫‪'،‬‬
‫‪40‬‬ ‫‪40‬‬

‫‪50‬‬
‫‪%‬‬

‫‪La3G‬‬ ‫•*‬ ‫آ‬ ‫‪La3GS 3G‬‬

‫‪60‬‬ ‫•‬ ‫‪60‬‬
‫‪IV •¿3G‬‬
‫‪70‬‬ ‫‪70‬‬

‫‪80‬‬ ‫‪80‬‬

‫‪0‬‬ ‫‪2‬‬ ‫‪4‬‬ ‫‪6‬‬ ‫‪8 10 12 14 16 18‬‬ ‫‪0‬‬ ‫‪2‬‬ ‫‪4‬‬ ‫‪6‬‬ ‫‪8 10 12 14‬‬ ‫‪16 18‬‬
‫)دقیقه(‬ ‫‪Tminl‬‬

‫که در آن ترکیبات یکسان اما در مقادیر متفاوت وجود ‪ Chondropetulum،‬از فالونوئیدهای دو گونه ‪ HPLC‬شکل ‪ 1.3‬آثار‬
‫الری سیترین = ‪ La3G‬میریستین ‪-3‬گاالکتوزید؛ = ‪ B، C. nudum; My3G‬رکتوم‪ ،‬گونه ‪ A، C.‬دارد‪ .‬کلید‪ :‬گونه‬
‫‪ Spherisorb‬جداسازی در ‪-dig1ycoside.‬سیرنجتین ‪-3‬گاالکتوزید؛ قله چهارم = سرنگتین ‪ -3 Sy3G = 3‬گاالکتوزید؛‬
‫و )‪ MeOH-HCO-HOAc (1 :18:1‬شستشوی گرادیان با ‪)،‬میلی متر ‪ 25 X 4.6‬سانتی متر( ستون ‪5qm C‬‬
‫و تشخیص در )‪MeOH-HCO-HOAc (18: 1 :1‬‬
‫نانومتر ‪365‬‬

‫آخرین تکنیک کروماتوگرافی‪ :‬است که به فیزیولوژی اضافه شده است‪ .‬اسلحه خانه ‪HPLC‬‬
‫توشیمیدان جدا از هزینه های دستگاه و حالل ها‪ ،‬مهم ترین و همه کاره ترین روش گیاهان کمی است‬
‫تحلیل‪ :‬و بررسی ولی آی تی دارد هنوز به ثابت كردن خود برای جدایی ها بر آ آماده سازی مقیاس‬

‫‪1.4‬‬ ‫مواد و روش ها از شناسایی‬

‫‪1.4.1‬‬ ‫عمومی‬

‫در شناسایی یک ترکیب گیاهی‪ ،‬پس از جداسازی آن و خالص شده‪ ،‬آن است الزم است اولین به تعیین‪:‬‬
‫کنید‪ :‬را کالس از ترکیب و سپس به پیدا کردن بیرون‪:‬‬
 ‫مواد و روش ها از شناسایی‬ ‫‪17‬‬

‫از قبل با دقت بررسی شده است ‪ ،‬یعنی باید به عنوان یک نقطه در داخل ‪ c‬کدام‪ :‬ماده خاص در آن کالس است‪ .‬همگنی آن باید باشد‬
‫‪ R‬و‪/‬یا رایانه شخصی‪ .‬کالس ترکیب معموالً واضح است از پاسخ آن به تست های رنگ‪ ،‬حاللیت آن و ‪ TLC‬حرکت کند سیستم های‬
‫آزمایش‌های بیوشیمیایی نیز ممکن است ارزشمند باشند‪ :‬یک گلوکزید‪ :‬می توان تایید ‪ sp ectral‬آن ویژگی‪ :‬های ‪ UV‬خواص و‬
‫شود توسط هیدرولیز با §‪-‬گلوکوزیداز‪ ،‬از یک گلیکوزید روغن خردل با هیدرولیز با میروزیناز و غیره‪ .‬برای رشد تنظیم کننده‪ ،‬آ‬
‫‪.‬سنجش زیستی است یک ضروری است بخش از شناسایی‬
‫شناسایی کامل در کالس به اندازه گیری سایرین بستگی دارد خواص و سپس مقایسه این داده ها با داده های موجود در ادبیات‪.‬‬
‫فعال ‪ y‬برای نوری( چرخش ‪ optica l‬این خواص شامل ذوب شدن است نقطه (برای مواد جامد)‪ ،‬جوشیدن نقطه (برای مایعات)‬
‫ماده گیاهی ‪ a‬با این حال‪ ،‬به همان اندازه آموزنده داده ها در مورد ‪).‬تحت شرایط استاندارد( ‪ !! ! t‬من ‪ o r‬و فی ) ترکیبات‬
‫)‪ (NMR‬رزونانس مغناطیسی هسته ای ‪ (IR)،‬مادون قرمز ‪ (UV)،‬ویژگی های طیفی آن است‪ :‬از جمله اشعه ماوراء بنفش‬
‫معموالً می توان یک ترکیب گیاهی شناخته شده را شناسایی کرد بر اساس فوق مقایسه مستقیم با )‪ (MS‬و طیف جرمی اندازه گیری‬
‫مواد معتبر (در صورت وجود‪ -‬قادر)‪ ،‬باید به عنوان تایید نهایی انجام شود‪ .‬اگر مواد اصیل باشد در دسترس نیست‪ ،‬مقایسه دقیق با‬
‫داده های ادبیات ممکن است برای آن کافی باشد شناسایی‪ .‬اگر یک ترکیب جدید وجود دارد‪ ،‬تمام داده های فوق باید باشد برای توصیف آن‬
‫کافی است‪ .‬با این حال‪ ،‬با ترکیبات جدید‪ ،‬ترجیح داده می شود قادر به تایید شناسایی از طریق تخریب شیمیایی یا توسط آماده كردن‬
‫‪.‬را ترکیب توسط آزمایشگاه سنتز‬
‫شناسایی ترکیبات گیاهی جدید‪ :‬توسط کریستالوگرافی اشعه ایکس در حال حاضر معمول است‪ ،‬و می تواند هر زمان که ماده به اندازه‬
‫کافی به دست می آید استفاده شود مقدار و به صورت کریستالی از جانب‪ .‬به خصوص است در این مورد ارزشمند است از مجتمع‬
‫‪.‬ترپنوئیدها‪ ،‬از آنجایی که هم ساختار و هم استریوشیمی را فراهم می کند تالش كردن که در را یکسان عمل‬
‫مختصر نظرات اراده اکنون بودن داده شده بر را ناهمسان طیفی تکنیک و اهمیت نسبی آنها برای شناسایی فیتوشیمیایی‪ .‬برای‬
‫بررسی دقیق‌تر روش‌های طیفی‪ ،‬خواننده ارجاع داده می‌شود به یکی از بسیاری از کتاب های موجود در مورد کاربرد طیف سنجی‬
‫‪.‬روشهای شیمی آلی (ویلیامز و فلمینگ‪1966 ،‬؛ شاینمن‪ ;1974 ،1970 ،‬هاروود و کلریج‪)1996 ،‬‬

‫اشعه ماوراء بنفش و قابل رویت طیف سنجی ‪1.4.2‬‬

‫طیف جذبی اجزای گیاهی را می توان در بسیار اندازه گیری کرد محلول رقیق در برابر‪ :‬یک حالل خالی با استفاده از مشخصات ثبت‬
‫خودکار تروف اتومتر برای ترکیبات بی رنگ‪ ،‬اندازه گیری ها در محدوده ‪ 200‬تا ‪ 400‬نانومتر (رینگ)؛ برای ترکیبات رنگی‪،‬‬
‫محدوده است ‪ 200‬تا ‪ 700‬نانومتر طول موج ماکزیمم و مینیمم جذب طیف یون به دست آمده (در حاشیه) و همچنین شدت آن ثبت می شود‬
‫را جذب (یا نوری تراکم) در را خاص حداکثر و حداقل‬
‫‪18‬‬ ‫روش از گیاه «هیچ خواهر‬

‫‪Absorban‬‬

‫‪250‬‬ ‫‪300‬‬ ‫‪350‬‬ ‫‪400‬‬ ‫‪450‬‬

‫)‪ (nm‬طول موج‬

‫است‪ .‬طول موج حداکثر در ‪ 316 ،258 ،240‬و ‪٪ EtOH 364‬حالل ‪ A، 95‬شکل ‪ 1.4‬طیف جذب فرابنفش گزانتون منگیفرین‪ .‬منحنی‬
‫رینگ هستند‪ .‬حداقل در ‪ 285 ،248 ،215‬و ‪ 338‬نانومتر نسبت فامیلی شدت ها از جذب در حداکثر هستند ‪ 50 ،100 ،82‬و به ترتیب‬
‫‪N NaOH.‬قطره می کند ‪ 37% EtOH + 2 2‬درصد منحنی ب‪95 ،‬‬

‫فقط ردی از مواد مورد نیاز است‪ ،‬زیرا طیف استاندارد سلول فتومتریک (‪ 1×1‬سانتی متر) ‪).‬شکل ‪(1.4‬‬
‫تنها ‪ 3‬میلی لیتر محلول را در خود جای می دهد و با استفاده از دستگاه مخصوص‪ :‬سلول ها‪ ،‬تنها یک دهم‬
‫این حجم باید برای طیف سنجی در دسترس باشد‪ .‬متری چنین اندازه گیری های طیفی در شناسایی مهم‬
‫هستند بسیاری از ترکیبات گیاهی‪ ،‬برای نظارت بر مواد شوینده کروماتوگرافی‪ :‬ستون ها در طول‬
‫تصفیه محصوالت‪ :‬گیاهی و برای غربالگری نفت خام گیاه عصاره ها برای را حضور از خاص‬
‫کالس ها از ترکیب چنین مانند پلی استیلن ها‬
‫استفاده می‌شود‪ ،‬اتانول ‪ 95‬درصد است کالس ها از ‪ UV‬حاللی که به طور گسترده برای طیف‌سنجی‪:‬‬
‫ترکیب نشان می دهد مقداری انحالل پذیری که در آی تی‪ .‬تجاری مطلق‬
 ‫مواد و روش ها از شناسایی‬ ‫‪19‬‬

‫کوتاه‪ .‬حالل های دیگری که اغلب مورد استفاده قرار ‪ UV‬الکل باید اجتناب شود‪ ،‬زیرا حاوی بنزن باقی مانده است که جذب در‬
‫می گیرند آب هستند‪ ،‬متانول‪ ،‬هگزان‪ ،‬نفت و اتر‪ .‬حالل هایی مانند کلروفرم و به طور کلی باید از مصرف پیریدین اجتناب کرد‪ ،‬زیرا آنها‬
‫به شدت در ‪ -200‬جذب می شوند‪ .‬رینگ ‪ 260‬منطقه؛ آنها هستند‪ ،‬با این حال‪ ،‬کامال مناسب برای ساخت اندازه گرفتن‪ -‬در ناحیه مرئی‬
‫طیف با رنگدانه های گیاهی مانند را کاروتنوئیدها‬
‫هنگامی که مواد به عنوان ترکیبات کریستالی و موتور آنها جدا می شوند‪ .‬وزن لکولی شناخته شده یا قابل تعیین است‪ ،‬سپس‬
‫غلظت بر = ‪، C‬جذب = ‪ t = A/Cl (A‬ثبت می شود‪ ،‬جایی که ‪ log t‬شدت حداکثر طول موج معموالً بر حسب‬
‫با ترکیباتی که هیچکدام تمرکز نه را مولکولی ‪).‬حسب گرم مول در لیتر‪ = 1 ،‬سلول طول مسیر بر حسب سانتی متر‪ ،‬معموالً ‪1‬‬
‫وزن هستند شناخته شده‪ ،‬جذب ارزش های دارند مورد استفاده قرار گیرد‪ .‬در این موارد‪ ،‬ارتفاع ماکزیمم های مختلف ممکن‬
‫‪.‬است باشد در مقایسه با در نظر گرفتن جذب حداکثر به عنوان درصدی از آن شدید‪ ،‬قوی اوج‬
‫خالص سازی مقدماتی ضروری برای مطالعات طیفی و گیاهان است اجزایی که خواص جذب مشخصه ای از خود نشان می‬
‫دهند باید باشند به طور مکرر تصفیه می شود تا زمانی که این خواص ثابت شود‪ .‬در کروماتوگرافی تصفیه ها‪ ،‬میزان ناخالصی های‬
‫جذب کننده اشعه ماوراء بنفش موجود در فیلتر کاغذ را می توان با استفاده از آبکش یک کاغذ خالی تهیه کرد یکسان زمان مانند را‬
‫نمونه‪ ،‬برای متعادل کردن که در را اسپکتروفتومتر در برابر مایع شوینده حاوی آن نمونه رویه مشابهی باید اتخاذ شود چه زمانی‬
‫بشقاب ها ‪ TLC‬تطهیر است بودن انجام شده در‬
‫کاربرد اندازه گیری های طیفی برای اهداف شناسایی می تواند باشد با تکرار اندازه‌گیری‌های انجام‌شده در محلول خنثی تا حد‬
‫ارزش های یا که در را حضور از خاص نمک های معدنی به عنوان مثال‪ pH ،‬زیادی افزایش می‌یابد‪ ،‬یا در آ دامنه از ناهمسان‬
‫هنگامی که قلیایی به محلول های الکلی‪ :‬اضافه می شود ترکیبات فنلی‪ ،‬طیف ها به طور مشخص به سمت تغییر می کنند طول موج‌های‬
‫طوالنی‌تر (آنها تحت تغییرات باتوکرومیک قرار می‌گیرند) با افزایش در جذب (شکل ‪ .)1.4‬در مقابل‪ ،‬هنگامی که قلیایی به محلول‬
‫خنثی اضافه می شود با استفاده از اسیدهای کربوکسیلیک آروماتیک‪ ،‬تغییر در جهت مخالف است به سمت طول موج های کوتاه تر‬
‫(تغییرهای هیپسوکرومیک)‪ .‬واکنش هایی مانند شیمیایی کاهش (با بوروهیدرید سدیم) یا هیدرولیز‪ :‬آنزیمی‪ :‬می تواند به همان اندازه در‬
‫کووت سلولی یک اسپکتروفتو ضبط کننده دنبال می شود اندازه گیری متر و جذب در فواصل زمانی معین انجام می شود نشان‬
‫‪.‬می دهد چه کاهش یا هیدرولیز دارد گرفته شده محل‬
‫و قابل رویت طیف که در شناسایی ناشناخته تشکیل دهنده ‪ UV‬را ارزش از‬
‫است به طور مشخص مربوط به را نسبت فامیلی پیچیدگی از را طیف و به ‪ents‬‬
‫عمومی موقعیت از را طول موج حداکثر اگر آ ماده نشان می دهد آ ‪th e‬‬
‫تنها جذب باند بین ‪ 250‬و ‪ 260‬نانومتر‪ ،‬آی تی میتوانست هر گونه باشد یکی از آ‬
‫قابل توجه عدد از ترکیبات (به عنوان مثال آ‬ ‫ساده فنل‪ ،‬آ پورین یا‬
‫و بنابراین بر)‪ .‬اگر‪ ،‬با این حال‪ ،‬آی تی نشان می دهد سه‬ ‫اسید‬ ‫معطر‬ ‫آمینو‬ ‫یک‬ ‫پیریمیدین‪،‬‬
‫‪،‬متمایز قله ها که در را ‪ 500-400‬نانومتر منطقه‪ ،‬با مقدار کمی جذب جای دیگر‬
‫‪20‬‬ ‫روش از گیاه تحلیل و بررسی‬

‫جدول ‪ 1.2‬طیفی خواص از را ناهمسان کالس ها از گیاه رنگدانه‬

‫رنگدانه کالس‬ ‫قابل رویت طیفی دامنه‪ :‬میلی متر)*‬ ‫)اشعه ماوراء بنفش دامنه میلی متر‬

‫کلروفیل ها (سبز)‬
‫فیکوبیلین ها‬
‫و ‪64 60 470-430‬‬
‫)قرمز و آبی(‬ ‫یا ‪615-650 570-540‬‬ ‫جذب ناشی از به ‪ UV‬کوتاه شدید‬
‫سیتوکروم ها‬ ‫پروتئین پیوست‬
‫)رنگ زرد(‬ ‫‪545-605‬‬
‫جزئی گروه گاهی اوقات در ‪(-415‬‬
‫)‪440‬‬
‫آنتوسیانین ها‬
‫)ارغوانی یا قرمز (‬ ‫‪550-475‬‬ ‫حدود ‪275‬‬
‫بتاسیانین ها‬
‫رنگ (‬ ‫‪530-554‬‬ ‫‪250-270‬‬
‫)ارغوانی‬
‫کاروتنوئیدها‬
‫)رنگ زرد به نارنجی(‬ ‫‪500-400‬‬
‫آ اوج اصلی با دو جزئی قله ها یا (‬
‫)انحرافات‬
‫انتراکینون ها‬
‫)زرد(‬ ‫‪460-420‬‬ ‫شدید‪ ،‬قوی قله ها ‪3-4‬‬
‫بین ‪ 220‬و ‪290‬‬
‫چالکون و‬
‫آرونز (زرد)‬ ‫‪430-365‬‬ ‫‪240-260‬‬
‫رنگ زرد فالونول ها‬
‫)زرد(‬ ‫‪390-365‬‬ ‫‪256-270‬‬

‫و ‪ pH‬درجه همه ارزش های هستند تقریبی؛ واقعی ارزش های متفاوت با توجه به را حالل استفاده شده‪ ،‬را‬
‫را فیزیکی حالت را رنگدانه‬

‫تقریبا ً مطمئنا ً یک کاروتنوئید است‪ .‬عالوه بر این‪ ،‬اندازه گیری های طیفی در دو یا سه حالل دیگر و مقایسه با داده های ادبیات‬
‫‪.‬ممکن است زوج نشان می دهد که خاص کاروتنوئید آی تی است‬
‫اظهارات فوق پیشنهاد می دهد آن جذب طیف های خاص هستند ارزش در مطالعات‪ :‬رنگدانه گیاهی و این قطعا است برای‬
‫هر دو آب صادق است ‪ -‬و مواد رنگی گیاهی محلول در چربی (جدول ‪ .)1.2‬کالس های دیگر که نشان می دهد مشخصه‪ :‬جذب‬
‫خواص عبارتند از غیر اشباع کام‪ -‬پوند (به ویژه پلی استیلن ها)‪ ،‬ترکیبات معطر به طور کلی (به عنوان مثال اسیدهای هیدروکسی‬
‫جذب همچنین اطالعات ساختاری مفیدی را ارائه می دهد‪ .‬این نشان می دهد ‪ UV -‬سینامیک) و کتون ها‪ .‬عدم وجود کامل‬
‫وجود لیپیدها یا آلکان های اشباع در بخش های لیپیدی گیاه عصاره‪ ،‬یا از ارگانیک‪ .‬آلی اسیدها‪ ،‬آلیفاتیک آمینو اسیدها یا قندها که در‬
‫را اب‪ -‬محلول کسری‬
‫زیرا از فضا محدودیت‪ :‬ها‪ ،‬را طیفی خواص از فقط آ خیلی‬
‫محدود عدد از گیاه اجزای تشکیل دهنده می توان بودن داده شده که در این کتاب‪ .‬اینها هستند‬
 ‫مواد و روش ها از شناسایی‬ ‫‪21‬‬

‫عمدتا ً در قالب جداول ماکزیمم طیفی اما تعداد کمی ثبت شده است تصاویر منحنی های طیفی در صفحات بعدی گنجانده شده است‪.‬‬
‫برای بیشتر کام‪ -‬جداول جامع داده های طیفی ‪ ،‬خواننده به یکی از آنها ارجاع داده می شود مجموعه‌ای از چنین داده‌هایی مانند هرشنسون‬
‫(‪ )1966 :،1961 :،1956‬یا النگ (‪ .)1959‬مقدمه مفید متون برای جذب طیف سنجی هستند گیالم و استم (‪ )1957‬و ویلیامز و فلمینگ (‬
‫‪ .)1966‬بیشتر پیشرفته _ متن معامله به طور مشخص با را طیف از طبیعی محصوالت است اسکات (‪ .)1964‬همچنین گزارش‬
‫‪.‬جامعی از بیوشیمیایی وجود دارد طیف سنجی توسط مورتون (‪)1975‬‬

‫‪1.4.3‬‬ ‫فرو سرخ‬ ‫)‪(IR‬‬ ‫طیف سنجی‬

‫یا در محلول (در کلروفرم ‪ IR‬ممکن است بر روی مواد گیاهی در یک رکورد خودکار اندازه گیری شود‪ .‬اسپکتروفتومتر ‪ IR‬طیف‬
‫یا کربن تتراکلرید (‪ ،)%1-5‬به صورت مولد با روغن نوژول یا در حالت جامد‪ ،‬مخلوط شده با پتاسیم برمید که در را دومی مورد‪ ،‬آ‬
‫دیسک نازک است آماده شده زیر‬

‫‪ y (c m -‬فرکانس‬ ‫‪I‬‬
‫‪4000‬‬ ‫‪2000‬‬ ‫‪1600‬‬ ‫‪1300‬‬ ‫‪1100 1000‬‬ ‫‪900‬‬ ‫‪800‬‬ ‫‪700‬‬
‫‪Absorban‬‬

‫‪****! 1‬‬ ‫‪1‬‬ ‫‪1‬‬ ‫‪1‬‬ ‫‪t‬‬ ‫‪1‬‬ ‫‪1‬‬

‫‪Absorban‬‬

‫‪2‬‬ ‫‪3‬‬ ‫‪4‬‬ ‫‪5‬‬ ‫‪6‬‬ ‫‪7‬‬ ‫‪8‬‬ ‫‪9‬‬ ‫‪J0‬‬ ‫‪J1‬‬ ‫‪J2‬‬ ‫‪13‬‬ ‫‪14‬‬
‫طول موج (بعد از ظهر)‬

‫‪،‬فرو سرخ طیف از دو آلکالوئیدها از جانب تنباکو دود‪ .‬کلید‪( :‬آ) هارمان شکل‪1.5 .‬‬

‫به طور ‪ IR‬توجه داشته باشید که طیف های ‪ (II).‬نورهارمان‪ ،‬طبیعی (من) و مصنوعی )‪ tb‬؛)‪ (II‬طبیعی (من) و مصنوعی‬
‫و قابل رویت طیف (شکل‪ .)1.4 .‬بدین ترتیب‪ ،‬را جذب باندها اینجا نقطه به سمت‪ :‬پایین ‪ UV‬سنتی در مقایسه با‬
‫‪22‬‬ ‫روش‬ ‫‪af‬‬ ‫یالنت تحلیل و بررسی‬

‫جدول ‪ 1.3‬مشخصه فرو سرخ فرکانس ها از مقداری کالس ها از طبیعی محصوالت‬

‫" تقریبی موقعیت ها از مشخصه گروه های موسیقی‬

‫سانتی متر ‪ l200‬در باال‬
‫آلکان ها آلکن ها‬ ‫)‪2940 (S) 2860 (M) 1455 (S) 1380 (M‬‬
‫معطر استیلن ها‬
‫الکل ها و فنل ها آلدهیدها و کتون ها‬ ‫‪).‬که در( ‪)، 1650 (WM) 1410‬که در( ‪3050 (WM)، 1850‬‬
‫استرها و الکتون ها کربوکسیلیک‬ ‫)‪)، 1500 ،1580 ،1600 (W-M‬که در( ‪3050 (WM) 2100-1700‬‬
‫اسیدها آمین ها‬ ‫‪3310 (M) 2225 (W) 2150 (WM) 1300 (W).‬‬
‫سیانیدها‬ ‫)‪)، 1410 (M‬گسترده( ‪3610 (WM) 3600-2400‬‬
‫لوسیانات ها‬ ‫‪2750 (W) 2680 (W) 1820-1650 (S) 1420 (WM).‬‬
‫)‪1820-1680 (S‬‬
‫‪) 1760 (S) 1710 (S).‬گسترده‪ ،‬م( ‪ 3520 (W) 3400-2500‬باندها که در 'اثر انگشت' منطقه اگلینتون *‬
‫‪)1965(.‬‬
‫)‪)، 1610 (M‬متغیر( ‪3500 (M) 3400 (M) 3400-3100‬‬
‫‪2225 (WS).‬‬
‫)در مقابل( ‪2270‬‬

‫هستند حذف شده است برای سادگی داده ها سازگار از جانب نام تجاری و‬

‫با استفاده از قالب و ‪ KBr‬شرایط بی آب از پودری حاوی حدود ‪ 1‬میلی گرم ماده و ‪ 10‬تا ‪ 100‬میلی گرم‬
‫پرس‪ .‬محدوده اندازه گیری ‪ -‬اندازه از ‪ 4000‬تا ‪ 667‬سانتی متر است (یا ‪ 2.5‬تا ‪ 15‬کیلومتر) و طیف‬
‫معمولی به دست آمده در این مسیر هستند ‪ IR‬طول می کشد حدود سه دقیقه باید ضبط شود‪ .‬طیف‬
‫‪.‬نشان داده شده که در شکل‪1.5 .‬‬
‫‪ l200cm‬طیف در باال ‪ IR‬را منطقه که در را‬ ‫نشان می دهد طیفی باندها یا قله‬
‫ها ناشی از به را ارتعاشات‪ :‬از فردی اوراق قرضه یا کاربردی گروه ها که در را مولکول زیر‬
‫سانتی متر نشان می دهد باندها ناشی از به را ارتعاشات از ‪ l200‬معاینه (جدول ‪ .)1.3‬را منطقه زیر‬
‫را کل مولکول و زیرا از آن پیچیدگی‪ ،‬است شناخته شده مانند را 'اثر انگشت' منطقه شدت ها از‬
‫متوسط‪ (S) :‬را مختلف باندها هستند ثبت شده به صورت ذهنی بر آ ساده مقیاس مانند بودن یا قوی‪:‬‬
‫‪ (W).‬یا ضعیف )‪(M‬‬
‫را حقیقت که زیاد کاربردی گروه ها می توان بودن شناسایی‪ :‬شده توسط آنها شخصیت‪-‬‬
‫یکسان باشد‪ .‬ساده ترین و اغلب ‪ IR‬فرکانس‌های ارتعاش سه‌گانه (جدول ‪ )1.3‬باعث می‌شود‪ :‬که طیف‬
‫‪ IR‬مطمئن ترین روش برای تخصیص یک ترکیب به آن است کالس با وجود این‪ ،‬طیف‌سنجی‪:‬‬
‫بیشترین استفاده را در گیاهان دارویی‪ :‬دارد‪ .‬مطالعات شیمیایی به عنوان یک دستگاه "اثر انگشت" برای‬
‫به شما کمک می کند ‪ IR‬مقایسه طبیعی‪ :‬با یک نمونه مصنوعی (نگاه کنید به شکل ‪ .)1.5‬پیچیدگی‪ :‬طیف‬
‫خود به ویژه برای این منظور‪ :‬خوب است و چنین مقایسه هایی بسیار است مهم که در را کامل‬
‫به طور گسترده برای ‪ IR‬به عنوان مثال‪ ،‬طیف ‪ ent‬شناسایی‪ :‬از زیاد انواع از گیاه تشکیل دهنده‬
‫در یک پیش از ‪ GLC‬شناسایی‪ :‬استفاده شده است اجزای اسانس شناخته شده به عنوان آنها توسط‪:‬‬
‫جداسازی‪ :‬نمونه مقیاس‬
‫طیف برای "اثر انگشت" یک الکالوئید‪ :‬است داده شده که در ‪ IR‬یک تصویر‪ :‬از را استفاده کنید از‬
‫شکل‪ .1.5 .‬دو پی گیری اجزاء از تنباکو‪ :‬دود هستند شناخته شده است‬
 ‫مواد و روش ها از شناسایی‬ ‫‪23‬‬

‫ممکن است اشاره شود که ‪).‬پوندکستر و کارپنتر‪ KBr (1962 ،‬به عنوان پایه هارمانه و نورهارمان‪ ،‬با استفاده از رویه دیسک‬
‫برخی از جزئیات در ناحیه اثر انگشت هر دو آلکالوئید طبیعی وجود ندارد نمونه ها‪ ،‬احتماالً به دلیل‪ :‬وجود آثار ناخالصی است‪ .‬ممکن‬
‫آنها تفاوت فقط در این است که هارمان مشتق( است نیز باشد مشاهده کردند که اگرچه آلکالوئیدها از نظر ساختار بسیار مشابه هستند‬
‫طیف ‪ IR‬آنها می توان بودن به راحتی متمایز توسط آنها )متیل نورهارمان است‪C-‬‬
‫همچنین می‌تواند به طور مفید به روشن‌سازی ساختار کمک کند‪ ،‬هنگامی که ترکیبات جدید مواجه می شوند در ‪ IR‬طیف‌سنجی‬
‫ذکر شده است در پیک ها‪ ،‬تفسیر واقعی یک طیف پیچیده ‪ IR‬گیاهان با اينكه وجود دارد بسیاری از ارتباط بین ساختار شیمیایی و جذب‬
‫می تواند دشوار باشد و عملیات به تجربه زیادی نیاز دارد‪ .‬با برخی از کالس های کام‪ -‬پوند‪ ،‬با این حال‪ ،‬تفسیر می تواند یک موضوع‬
‫نسبتا ساده باشد‪ .‬اقدامات‪ -‬دفع فرکانس های کربونیل بین ‪ 1800‬تا ‪ 1650‬سانتی متر در کینون ها می توانند یکباره نشان دهند که آیا‬
‫گروه کربونیل با کیلیت است یا خیر یک هیدروکسیل مجاور یا نه‪ .‬برای مثال‪ ،‬با آنتراکینون ها‪ ،‬غیر کینون های کالت دارای نواری‬
‫و در ‪cm‬نشان می دهد دو باند‪ ،‬در ‪ o-OH 1647-1675‬بین ‪ 1678‬تا ‪ 1653‬سانتی متر هستند‪ .‬یک کینون با یک‬
‫‪1‬‬

‫‪M1608‬گروه ها دارد‪ :‬باندها در ‪ 1661 —1675‬سانتی متر و در ‪ 1621 -1637 o-OH 164‬سانتی متر لیتر ; و آ کینون با دو‬
‫‪ '.‬سانتی متر‬
‫می توان از کاتالوگ های مختلفی استفاده کرد‪ ،‬به عنوان مثال هرشنسون (‪ .)1964 ،1959‬برای آ ‪ IR،‬برای منابع داده های‬
‫را ببینید‪ .‬یک متن کاربردی مقدماتی محبوب ‪ -‬کتاب‪ ،‬اکنون )‪، Eglinton (1970‬طیف سنجی ‪ IR‬خوب مقدماتی مرور بر‬
‫‪.‬که در آن سوم نسخه‪ ،‬است که از صلیب و جونز (‪)1969‬‬

‫‪1.4.4‬‬ ‫جرم طیف سنجی (ام‌اس)‬

‫ام اس‪ ،‬از زمان معرفی نسبتا ً اخیر خود (حدود ‪ ،)1960‬انقالبی داشته است‪ .‬تحقیقات بیوشیمیایی را روی محصوالت طبیعی انجام‬
‫داده و کار را آسان کرده است فیتوشیمیدان از بسیاری جهات ارزش تکنیک این است که فقط به مقادیر میکروگرمی از مواد نیاز‬
‫دارد که بتواند آن را فراهم کند وزن مولکولی دقیق و اینکه ممکن است قطعه قطعه شدن پیچیده ای ایجاد کند الگویی که اغلب‬
‫‪.‬مشخصه آن خاص است (و ممکن است شناسایی کند)‪ .‬ترکیب‬
‫ام اس‪ ،‬در اصل‪ ،‬از تحقیرکننده تشکیل شده است مقادیر کمی از یک ماده آلی ترکیب‪ :‬و ثبت الگوی‬
‫تکه تکه شدن بر اساس جرم‪ .‬بخار نمونه در سیستم فشار کم جرم پخش می شود طیف سنج که در آن با‬
‫انرژی کافی یونیزه می شود تا باعث قطعه قطعه شود‪ .‬پیوندهای شیمیایی‪ :‬یونهای با بار مثبت حاصل‬
‫هستند شتاب در میدان مغناطیسی‪ :‬که پراکنده می شود و اجازه می دهد تا فراوانی نسبی رقصیدن اندازه‬
‫گیری ها از یون ها از داده شده انبوه برای شارژ نسبت را در نتیجه رکورد فراوانی یون در مقابل‬
‫جرم‪ ،‬نمودار طیفی جرمی را تشکیل‪ :‬می دهد‪ ،‬که به این ترتیب از یک سری خطوط با شدت های‬
‫‪.‬مختلف در موارد‪ :‬مختلف تشکیل شده است جرم واحدها (دیدن شکل‪)1.6 .‬‬
‫‪24‬‬ ‫‪:‬مواد و روش ها از گیاه تحلیلگر‬

‫‪100‬‬ ‫*]‪[M—OH‬‬

‫•‪80‬‬
‫*)‪(M- CH 2 OH‬‬

‫‪136‬‬
‫‪160‬‬
‫‪Relative‬‬

‫‪119‬‬
‫‪108‬‬ ‫‪135‬‬ ‫‪148‬‬ ‫*‪M‬‬
‫‪149‬‬

‫‪50‬‬ ‫‪100‬‬ ‫‪200‬‬

‫‪m/z‬‬

‫شکل‪ 1.6 .‬جرم طیف از را رشد تنظیم کننده زاتین‬

‫در بسیاری از موارد‪ ،‬برخی از ترکیبات اصلی از تبخیر زنده می مانند‪ .‬فرآیند یون و به عنوان پیک یون مولکولی ثبت می شود‪.‬‬
‫بسیار دقیق سپس اندازه گیری جرم (تا ‪ 0.0001‬واحد جرم) را می توان بر روی آن انجام داد (و هر یون دیگری) خاص‪ .‬دقت به‬
‫که معموالً به( ‪ sis‬اندازه ای است که دقیق را نشان می دهد فرمول مولکولی ماده‪ ،‬به طوری که تجزیه و تحلیل عنصری معمولی‬
‫‪.‬دیگر وجود ندارد الزم است )چندین میلی گرم ماده نیاز دارد‬
‫بازداشتن‪ NMR -‬که توسط فیتوشیمی خودش‪ ،‬سازها برای جرم طیفی و ‪ IR‬و ‪ UV‬بر خالف اسپکتروفتومترهای‬
‫مینیشن ها گران تر و بسیار پیچیده تر هستند‪ ،‬به طوری که آنها معموال توسط پرسنل آموزش دیده اداره می شوند‪ .‬بنابراین‪،‬‬
‫فیتوشیمیدان‪ ،‬نمونه خود را برای تجزیه و تحلیل تحویل می دهد و نتایج را در قسمت‪ :‬پس می گیرد شکل نمودار نشان داده شده در‬
‫شکل ‪ .1.6‬این تکنیک با موفقیت کار می کند تقریبا ً با هر نوع مولکولی کم وزن ماده تشکیل دهنده گیاه و حتی بوده است‬
‫استفاده شده برای تجزیه و تحلیل پپتید آن ترکیبات که هستند هم بی فرار به بخار کردن که در را ام‌اس ابزار هستند تبدیل شده‬
‫‪. MS‬است به تری متیل سیلیل اترها‪ ،‬متیل استرها یا مشتقات مشابه‪ .‬این درست است جیبرلین ها (نگاه کنید به ص ‪)124‬‬
‫و عملیات ترکیبی در یک حرکت کیفی و شناسایی کمی بسیاری از اجزای ساختاری پیچیده ‪ GLC،‬اغلب همراه با استفاده می شود‬
‫‪.‬که ممکن است بودن حاضر با یکدیگر که در آ خاص گیاه استخراج کردن‬
‫کافی باشد تحقیقات فیتوشیمیایی این مورد زاتین است‪ ،‬اولین مورد ‪ MS‬یک مثال باید برای نشان دادن ارزش اندازه‌گیری‌های‬
‫طبیعی تنظیم کننده رشد سیتوکینین حلقه ای که از گیاهان عالی جدا می شود‪ .‬آن ساختار به عنوان پورین ‪-4(-6‬هیدروکسی متیل‪-‬‬
‫به طور قابل توجهی در این )شکل ‪ MS (1.6‬آهن‪-2-‬بوتنیل آمینو) مانع شد‪ .‬استخراج شده توسط شانون و لتهام (‪ ;)1966‬نتایج‬
‫‪ C, 0‬شناسایی کمک کرد‪ .‬بنابراین‪ ،‬یک برجسته وجود داشت مولکولی یون در ‪ ،219‬تایید می کند را مولکولی فرمول‬
‫‪ /z‬را حضور از آ اولیه الکل بود آشکار کرد توسط قطعات در متر ‪H„ON 5 .‬‬
‫)‪202 (M-OH‬‬ ‫و‬ ‫‪m/z 188 (M-CH,OH).‬‬ ‫را محل از را آلکیل‬
‫گروه پیوست در‬ ‫‪N-‬‬ ‫‪ /z 148.‬بود نشان داد توسط را قطعه در متر‬
 ‫مواد و روش ها از‬ ‫‪ident'ifc‬‬ ‫بند‬ ‫‪25‬‬

‫به دست آمد‪ .‬قطعات فعال (نشان داده شده توسط بیشتر مشتقات ‪ char-‬در نهایت‪ :،‬تأیید هسته آدنین از‬
‫‪.‬و ‪ m/z 136، 135 108‬آدنین) در‬
‫پیشرفت های فنی جدید همچنان در طیف سنجی جرمی پدیدار می شوند و طیف‌سنج‌های مدرن ممکن است با بمباران اتمی سریع‬
‫ترکیبات ارگانیک‪ ،‬شامل نمک ها و وزن ‪ o‬و سپس قادر به تجزیه و تحلیل شکننده یا غیر فرار هستند )‪ (FAB‬ارائه شوند‪ .‬منبع‬
‫گلیکوزیدیک قندها در این‪، O-‬در تجزیه و تحلیل گلیکوزیدهای گیاهی ‪ MS‬مولکولی باالتر تی تریال ها قبال‪ ،‬هنگام استفاده از‬
‫می توان یون های مولکولی را برای نمونه اصلی به دست ‪ FAB-MS‬فرآیند از بین رفتند و از تشخیص فرار کردند ولی اکنون با‬
‫آورد گلیکوزید‬
‫مقداری از را زیاد برنامه های کاربردی از ام‌اس داده ها به گیاه بیوشیمیایی پژوهش‬
‫هستند پوشیده شده در دو رساله ها (والر‪ ;1972 ،‬والر و درمر‪ .)1980 ،‬را خواننده همچنین به‬
‫در طیف سنجی عمومی اشاره می کند کتاب ها قبال‪ ،‬پیش از این ذکر شده زودتر ‪ MS‬گزارش های‬
‫‪.‬که در این بخش‬

‫‪1.4.5‬‬ ‫)‪ (NMR‬اتمی مغناطیسی رزونانس طیف سنجی‬

‫اساسا ً وسیله ای برای تعیین فراهم می کند ساختار یک ترکیب آلی با اندازه گیری حرکت ‪ NMR‬طیف سنجی پروتون‬
‫‪ -‬مغناطیسی اتم های هیدروژن آن در بیشتر ترکیبات‪ ،‬اتم های هیدروژن هستند پیوست شده است به ناهمسان گروه ها (مانند‬
‫‪CH 2 -. —CH 3• - CHO، -NH 2r‬‬
‫طیف فراهم می کند آ رکورد‪ :‬از را ‪ NMR‬و غیره‪ ).‬و را پروتون ‪-CHOH-،‬‬
‫تعداد اتم های هیدروژن در این شرایط مختلف‪ .‬نمی تواند‪ ،‬چگونه‪ -‬همیشه‪ ،‬هر گونه اطالعات مستقیم در مورد ماهیت اسکلت کربن‬
‫‪.‬طیف سنجی‪ ،‬که است شرح داده شده بعد ‪ NMR‬از را مولکول؛ این می توان فقط بودن به دست آمده توسط کربن‪13-‬‬
‫در عمل‪ ،‬نمونه ماده در محلول‪ ،‬در یک بی اثر قرار می گیرد حالل‪ ،‬بین قطب های یک آهنربای قدرتمند و پروتون ها متحمل‬
‫می شوند ناهمسان شیمیایی تغییر می کند با توجه به آنها مولکولی محیط ها در داخل را مولکول اینها هستند اندازه گیری شده که‬
‫که یک ترکیب بی اثر است‪ .‬پوندی که ‪ (TMS)،‬دستگاه نسبت فامیلی به یک استاندارد‪ ،‬معموالً تترمتیل سیالن ‪ NMR‬در را‬
‫‪.‬می توان بدون احتمال به محلول نمونه اضافه کرد از مواد شیمیایی واکنش رخ می دهد‬
‫= ‪ T‬شیمیایی تغییر می کند هستند اندازه گیری شده که در یا ‪( 6‬دلتا) یا تی (تاو) واحدها جایی که‬
‫تفاوت در جذب فرکانس از را نمونه و را ارجاع ‪، Av‬فرکانس‪ :‬رادیویی‪ = Av X 10'/ :‬و ‪10 6 6‬‬
‫که در واحدهای هرتز از آنجایی که کل فرکانس‪ :‬رادیویی‪ :‬معموالً ‪ 60‬مگا هرتز (‪ TMS )60‬ترکیب‬
‫نامیده می ‪ ppm‬است میلیون هرتز) و شیفت ها در واحدهای‪ :‬هرتز اندازه گیری می شوند به عنوان‬
‫شود همچنین‪ :،‬شدت سیگنال ها ممکن است یکپارچه‪ :‬شود نشان می دهد را عدد از پروتون ها طنین انداز‬
‫‪.‬در هر یکی فرکانس‪:‬‬
‫اندازه گیری ها دارد بی اثر بودن و بدون پروتون ها یکی است‪ ،‬از این رو‪ ،‬محدود به استفاده كردن ‪ NMR‬را حالل برای‬
‫دوترو استون )‪ (DDO‬دوتریوم اکسید ‪ (CDCl 3 )،‬کربن تتراکلرید‪ ،‬دوتروکلوروفرم‬
‫‪26‬‬ ‫روش از گیاه تحلیل و بررسی‬

‫جدول ‪ 1.4‬برخی از ویژگی های شیمیائی رزونانس مغناطیسی هسته ای پروتون تغییر می کند از ناهمسان کالس ها از گیاه‬
‫محصوالت‬

‫کالس‬ ‫تایپ کنید از پروتون‬ ‫)‪ (ppm‬دامنه از شفت‪ ،‬ب‬

‫آلکان ها و چرب اسیدها‬

‫‪CHP-R R‬‬ ‫‪0.85-0.95‬‬
‫آلکن ها‬
‫‪—CHP-R‬‬ ‫‪1.20-1.35‬‬
‫‪CHP-C=C‬‬ ‫‪1.60-1.69‬‬
‫استیلن ها‬
‫‪-CH=C‬‬ ‫‪5.20-5.70‬‬
‫معطر ترکیبات نیتروژن ترکیبات‬ ‫‪HC>C‬‬ ‫‪2.45-2.65‬‬
‫‪ A r -‬ار‪-‬ح‬ ‫‪6.60-8.00‬‬
‫‪CH‬‬ ‫‪3‬‬ ‫‪2.25-2.50‬‬
‫‪Ar—CHO‬‬ ‫‪9.70-10.00‬‬
‫‪N -C H‬‬ ‫‪2.10-3.00‬‬
‫‪3N -‬‬ ‫‪7.90-8.10‬‬
‫‪CHO‬‬ ‫متغیر‬
‫‪NH‬‬

‫یا دوتره شده دی متیل سولفوکسید قطبی ترکیبات هستند اغلب در حالل های موجود و آنها به ندرت ) ‪(CD 3 COCD 3‬‬
‫میلی ‪ M10‬محلول یا نامحلول هستند برای اندازه گیری باید به تری متیل سیلیل اترها تبدیل شوند (نگاه کنید به شکل ‪ .)1.7‬حداقل‬
‫در بسیاری از آزمایشات‪ :‬فیتوشیمیایی با ‪ NMR‬گرم نمونه مورد نیاز است و این استفاده از آن را محدود می کند پکتروسکوپی‬
‫این حال‪ ،‬در ابزارهایی که برای آنالیز فقط به نمونه میلی گرم نیاز دارند‪ ،‬اکنون در دسترس هستند‪ .‬یکی از مزیت های طیف‬
‫این است که نمونه می تواند در حداقل باشد بهبود یافت بدون تغییر بعد از را عمل و استفاده شده ‪ MS‬نسبت به ‪ NMR‬سنجی‬
‫برای دیگر تعیین ها‬
‫می تواند باشد توسط فیتوشیمی‪ NMR :‬همانند سایر تکنیک های طیفی‪ ،‬طیف سنجی پروتون‬
‫استفاده می شود‪ :‬به عنوان یک تکنیک انگشت نگاری باید اینطور باشد به یاد آورد‪ ،‬با این حال‪ ،‬که‬
‫پیچیدگی از طیف مستقیم است مربوط‪ :‬به تعداد انواع مختلف پروتون‪ :‬موجود‪ :،‬به طوری که بسیار‬
‫آلکالوئید‪ :‬پیچیده جایگزین‪ :‬در واقع ممکن است سیگنال های کمتری نسبت به یک آلکالوئید‪ :‬ساده بدهد‬
‫برای ساختاری است تعیین‪ ،‬در ترکیب با سایر ‪ NMR‬هیدروکربن آلیفاتیک کاربرد‪ :‬عمده پروتون‬
‫تکنیک های طیفی‪ .‬استفاده از آن برای تعیین‪ :‬کننده کالس ترکیب بسیار قابل توجه‪ :‬است؛ چند نمونه از‬
‫شیمیایی تغییر می کند که هستند معمول از مسلم ‪ -‬قطعی کالس ها از محصوالت‪ :‬طبیعی در جدول‬
‫‪ 1.4‬آمده است‪ .‬پروتون های معطر (چه در مشتقات بنزن یا در ترکیبات هتروسیکلیک) به وضوح از‬
‫اغلب ‪ NMR‬پروتون های آلیفاتیک متمایز هستند‪ .‬در یک کالس از ترکیبات نیز‪ :،‬اندازه گیری های‬
‫‪.‬ممکن است فراهم شود را به معنای از شناسایی شخصی‪ :‬سازه های‬
‫می تواند بسیار پیچیده باشد‪ .‬به عنوان مثال‪ ،‬با توجه به برهمکنش بین پروتون های متصل به اتم های ‪ NMR‬طیف پروتون‬
‫کربن مجاور‪ ،‬ترال سیگنال ها ممکن است به نظر می رسد مانند "دوگانه" یا "سه قلو" بجای از مانند تنها قله ها من تفسیر می‬
‫‪-‬کنم‪ ،‬از این رو‪ ،‬نیاز دارد بسیار مهارت که در با وجود از این‪ ،‬مفید فی‬
 ‫مواد و روش ها از شناسایی‬ ‫‪27‬‬

‫اطالعات شیمیایی را می توان بدون نیاز به تجزیه‪ :‬و تحلیل به دست آورد طیف با جزئیات نزدیک دو مثال این را نشان خواهد داد‪ .‬اول‪ ،‬در‬
‫حالی که بازدارنده استخراج ساختار اسید استرکولیک‪ ،‬شیمیدانان در ابتدا نتوانستند آن را بپذیرند که این اسید چرب منحصر به فرد‬
‫دارای یک حلقه سیکلوپروپان ظاهراً کشیده است در ساختار و فرمول های جایگزین که در آن پیوند دوگانه بود قرار دادن در موقعیت‬
‫با این حال‪ ،‬نشان داد واضح است که باید یک حلقه ‪ NMR،‬های مجاور حلقه سیکلوپروپان ترجیح داده شد‪ .‬را پروتون طیف‬
‫و را جایگزین فرمول ها بود )‪ (5.7-5.2 ò‬سیکلوپروپن‪ ،‬از آنجایی که هیچ سیگنالی برای پروتون در الفین وجود نداشت منطقه‬
‫‪.‬بنابراین غیر ممکن است‬
‫مثال دوم از مطالعه ساختاری فالونوئید زرد است رنگدانه‪ ،‬تامبولتین این را کارگران اصلی هندی توصیف کردند که آن را جدا‬
‫در یک بار نشان داد که وجود یک واحد قند نامشخص‪ ،‬از آنجا که وجود ‪ NMR‬کرد‪ ،‬به عنوان یک فالونول آگلیکون اما طیف پروتون‬
‫ناشی از به قند پروتون ها خوب جدا از هم از جانب سیگنال ها ‪ ò‬دارد‪ :‬سیگنال ها در ‪ 5.15‬و ‪5.25‬‬

‫یا‬

‫‪R—O‬‬
‫یا‬
‫'‪36‬‬
‫‪R—O‬‬

‫'‪H-2‬‬ ‫‪H-8 H-6‬‬

‫‪H-6' H-5’ H-3‬‬
‫‪8-0‬‬ ‫‪60‬‬ ‫‪50‬‬

‫‪. !bl‬پ‪ .‬پ‪ .‬م‬

‫فالون لوتئولین (به عنوان تری متیل‪ :‬سیلیل اتر)‪ .‬تغییرات شیمیایی نسبت ‪ NMR‬شکل ‪ 1.7‬طیف پروتون‬
‫دادن خوب جدا ‪ l uteolin‬توجه داشته باشید که شش پروتون در ‪ (Mabry, 1969).‬است ‪ TMS‬به‬
‫از هم تغییر می کند‪ .‬اگر لوتئولین است به عالوه جایگزین‪ ،‬را موقعیت از‬
‫آن ‪ NMR‬جایگزینی از ناپدید شدن یکی از شش سیگنال مشخص است‪ .‬تامبولتین (نگاه کنید به متن) ‪ 8‬جایگزین است و طیف‬
‫‪.‬از این نظر مشابه است منطقه به لوتئولین بجز که را دوتایی عالمت در ‪ 6 6.5‬دارد ناپدید شد‬
‫‪28‬‬ ‫روش از مرحله که در‬ ‫‪dHdlJ5f5‬‬

‫‪).‬دیدن شکل‪ ò) (1.7 .‬بین ‪ 6‬تا ‪ (7.5‬توسط پروتون‪ :‬های متصل به هسته فالون نشان داده شده است‬
‫‪).‬آل‪ et 1971 ،.‬هاربورن‪ (:‬بدین ترتیب‪ ،‬را رنگدانه بود به وضوح‪ :‬آ گلیکوزید‪ ،‬نه یک آگلیکون‬
‫است ممکن است‪ ،‬به دلیل وجود‪ :‬مقادیر کم ‪ NMR‬تشخیص سیگنال های اتم های کربن در دستگاه‬
‫(حدود ‪ )٪1.1‬کربن ‪ 13‬همراه با کربن ‪ 12‬در مواد طبیعی گیاهی‪ .‬مغناطیسی‪ :‬کوچکتر‪ :‬لحظه تولید‬
‫در مقایسه با یک پروتون به این معنی است که سیگنال خیلی ضعیف تره فقط از زمان ‪C‬شده توسط‪3' :‬‬
‫تبدیل‪ :‬شده است‪ .‬متحد در ‪ C-NMR‬پالسی و آنالیز تبدیل فوریه به طیف‌سنجی ‪ NMR‬پیشرفت های فنی‬
‫مورد‪ NMR :‬دسترس و حتی با اینها پیشرفت ها‪ ،‬بیشتر‪ :‬ابزار زمان ممکن است نسبت به پروتون‬
‫نیاز است‪ .‬این روش به طور‪ :‬گسترده ای در تجزیه و تحلیل ساختاری‪ :،‬اگر چه نیاز به یک نمونه وزن‬
‫در مورد‪ 10 :‬میلی گرم است هنوز آ توضيحات‬
‫‪L‬‬
‫رزونانس بسیار بیشتر ‪ 3C‬استفاده می شود‪ ،‬اما محدوده ‪ NMR‬حالل های مشابهی مانند پروتون‪:‬‬
‫برای تشدید پروتون‪ ppm .‬در مقایسه با محدوده ‪ TMS 10-0‬پایین فیلد از ‪ ppm‬است‪ ،‬یعنی‪200-0 :‬‬
‫بسیار تفکیک‌شده‌تر هستند و در بیشتر موارد‪ ،‬هر کربن در داخل را ‪ NMR‬طیف‌های‪، "C- :‬بنابراین‬
‫مولکول (دیدن شکل‪ )1.8 .‬می توان بودن اختصاص داده به آ جداگانه‪ ،‬مجزا عالمت‪ .‬مانند با پروتون‬
‫اتم های کربن جایگزین متفاوتی دارند ایجاد تغییرات در محدوده ‪)،‬به جدول ‪ 1.4‬مراجعه کنید( ‪NMR‬‬
‫معطر ‪ ppm‬های خاص‪ .‬به عنوان مثال‪ ،‬اتم های کربن آلیفاتیک می دهند تغییر می کند بین ‪ 0‬و ‪40‬‬
‫کربن ها بین ‪ 110‬و ‪150‬‬
‫‪ ppm‬و کتونیک کربن ها بین ‪ 160‬و ‪ppm 230‬‬
‫‪l‬‬
‫و ترکیب این دو تکنیک بسیار ‪ NMR‬طیف سنجی اساسا است مکمل‪ :‬به پروتون‪3C-NMR :‬‬
‫قدرتمند است به معنای از ساختاری‪ :‬روشنگری‪ :‬برای جدید ترپنوئیدها‪ ،‬آلکالوئیدها یا فالونوئیدها آی‬
‫تی است مفید که در را تحلیل و بررسی از گلیکوزیدها‪ :‬که در نشان می دهد را‬

‫‪39.7‬‬
‫‪201.5‬‬
‫‪119.9‬‬
‫‪132.5‬‬
‫‪29.2‬‬ ‫‪110.9‬‬
‫‪77.2‬‬
‫‪125.0‬‬ ‫‪130.6‬‬ ‫‪70.‬‬ ‫‪154.8‬‬
‫‪132.7‬‬
‫‪09.6‬‬ ‫‪106.9‬‬ ‫‪OH‬‬
‫‪1‬‬
‫‪147.4‬‬ ‫‪147.4‬‬
‫‪103.2‬‬

‫‪101.3‬‬

‫برای‪ :‬موارد مختلف تغییر می کند کربن اتم ها در مولکول آلکالوئید اسپیرو )‪ ppm‬بر حسب( ‪ TMS‬شکل ‪ 1.8‬کربن‪ 13-‬نسبت به‬
‫‪ sibirica (Fumariaceae).‬بنزیلیزوکینولین سیبیریسین از کوریدالیس‬
 ‫مواد و روش ها از شناسایی‬ ‫‪29‬‬

‫با موفقیت در ‪ C-NMR‬ارتباط بین قطعات قند و پیکربندی آنها هم پروتون‪ :‬و هم "اندازه گیری‬
‫ساختارهای ساختاری استفاده شده است سایر تجزیه و تحلیل های پروتئین ها و سایر ماکرومولکول‬
‫گیاه ‪ %e‬طیف سنجی باهوش برای ها (نگاه کنید به جونز‪ .)1980 ،‬آنجا است نه ساده راهنما به‬
‫دانشمند‪ :‬با این حال‪ ،‬آثار زیادی‪ :‬وجود دارد که با کاربرد‪ :‬آن در ارتباط هستند شیمی آلی (به عنوان مثال‬
‫‪).‬به عنوان مثال جیمز‪ istry (75 19 ،‬جکمن‪1959 :،‬؛ شاینمن‪ )1970 :،‬یا به بیوشیمی‪:‬‬
‫تبیین طبیعی محصوالت گیاهی به ‪ stmc-‬در ‪ NMR‬در دهه گذشته‪ ،‬استفاده از طیف سنجی‬
‫طور قابل توجهی پیشرفت‪ :‬کرده است‪ .‬این دارد از طریق تولید طیف‌های با وضوح باال با استفاده از‬
‫هسته ‪ Overhauser‬اثر( ‪ NOE‬توان بیشتر‪ :‬ساز و ساز و از طریق توسعه اضافی رویه ها به عنوان‬
‫بسیاری‪ (&rom, 1986). :‬و غیره ‪. CDSY، NOESY، INEPT، DEPT‬تعیین شده است )ای‬
‫از سازه های پیچیده بوده است با استفاده از این تکنیک ها حل می شود‪ .‬عالوه بر این‪،‬‬
‫کریستالوگرافی اشعه ایکس دارای برای تجزیه و تحلیل ساختاری‪ :‬کامل به آسانی قابل دسترس است‬
‫‪.‬چنین مولکول ها‬

‫شاخص برای فیتوشیمیایی کاتیون های تیفی را شناسایی کنید ‪1.4.6‬‬

‫همانطور که قبال ذکر شده در باال‪ ،‬آ شناخته شده ترکیب کشف شده که در آ منبع گیاهی جدید را می‬
‫‪ aulentic.‬بر اساس کروماتوگرافی‪ :‬و شناسایی کرد مقایسه طیفی با ماکسیال ‪ %e‬توان بر اساس‬
‫‪ B‬به ضمیمه( نمونه های معتبر ممکن است باشد تجاری به دست آمده است از یک شرکت تامین کننده‬
‫توسط دوباره انزوا از جانب آ شناخته شده منبع یا‪ ،‬به عنوان یک آخر توسل‪)، ،‬مراجعه کنید‬
‫توسط‪ :‬درخواست‪ :‬از جانب یعنی وینتیستی‪ :‬که در ابتدا آن را منزوی و توصیف‪ :‬کردم ‪ .‬وسعت مقایسه‬
‫با توجه به کالس موجودات مرکب واکسی ها مطالعه شده است‪ ،‬اما به عنوان یک اصل کلی‪ ،‬مطلوب‬
‫است که از معیارهای بسیاری استفاده شود تا جایی که ممکن است برای اطمینان از درستی‪ :‬شناسه‬
‫‪(.‬دیدن جدول ‪)1.5‬‬
‫ووماتوگرافی مقایسه باید روشن باشد ‪ñ‬‬ ‫کروماتوگرافی مشترک ترکیب‬
‫مبنای اصلی مقایسه باشد‪ ،‬سپس ‪ TLC‬با مواد معتبر‪ :،‬بدون جداسازی‪ ،‬حداقل در چهار سیستم اگر ‪%e‬‬
‫و ) و سیلیکاژل‪ cePulose :‬مانند( هستند مزایای آشکار در استفاده از جاذب های مختلف ‪%ere‬‬
‫همچنین حالل های مختلف روی یک جاذب (جدول ‪ .)1.5‬در صورت امکان ‪ ،‬مقایسه ناشناخته و‬
‫‪ GLC‬استاندارد بر اساس مطلوب است سه معیار کروماتوگرافی مجزا‪ ،‬به عنوان مثال با زمان ماند توسط‬
‫‪ ele ctrophoresi‬و تحرک نسبی روشن ‪ TLG‬و ‪ PC‬روی‪ Rp :‬یا با ‪ TLC‬روی ‪ A،‬و ‪ HPLC‬و‬
‫باید هر جا که ممکن باشد پذیرفته شود‪ .‬در حالت ‪ sh‬دوباره‪ ،‬برای مقایسه طیفی‪ ،‬دو یا چند روش ‪s.‬‬
‫‪.‬طیف باید همه بودن مقایسه کرد ‪ 'H-NMR‬و ‪، UV، IR، MS‬ایده آل‬
‫اوره در اساس اندازه گیری های طیفی و ‪ mct‬با جدید گیاه مواد‪ ،‬آی تی است معموال ممکن است به تاسيس كردن را سنت‬
‫در با من سلسله‪ .‬تائیدیه از ‪ nown‬ترکیبات ‪ k‬ساخته شده بر روی ‪ %ose‬کروماتوگرافی‪ ،‬به خصوص در رابطه با‬
‫ساختار ممکن است بودن ممکن است توسط شیمیایی‬
‫‪30‬‬ ‫روش از گیاه تحلیل و بررسی‬

‫جدول ‪ 1.5‬را نوع از شاخص مورد نیاز است برای را شناسایی از شناخته شده گیاه باهم دانش آموزان را شناسایی از ‪-6‬هیدروکسی‬
‫لوتئولین ‪-7‬متیل اتر که در برگها از کروکوس‬

‫معیار‬ ‫ویژگی ثبت شده‬

‫فیزیکی خواص ‪1.‬‬ ‫‪، mp 245-6°C‬رنگ زرد پودر‬

‫مولکولی فرمول توسط ام اس ‪2.‬‬ ‫‪ C " H 1 2 O 7‬یافت ‪ r io n 316.0574‬مولکول‬
‫نیاز دارد ‪316.0582‬‬
‫‪3.‬‬ ‫ام‌اس تکه تکه شدن الگو‬ ‫قطعه یون توسط دی متیالسیون در‬
‫‪.‬و غیره ‪)،‬نیاز دارد ‪301.0344 (C"WO، 301.0345‬‬
‫‪4. UV‬‬ ‫طیفی خواص (و تغییر می کند با‬ ‫‪.‬ماکسیما در ‪ 346 ،273 ،254‬نانومتر‪ ،‬و غیره‬
‫قلیایی و غیره)‬
‫‪5.‬‬ ‫بشقاب ‪ TLC‬رنگ بر‬
‫رنگ زرد که در نور روز‬
‫‪ N H 3‬من ‪ UV‬قهوه ای تیره که در‬
‫بر سلولز ‪6. TLC‬‬
‫)‪ a-BuOH-HOAc- H2 ** (4: 1 : 5‬فی‪ 0.73 ،‬که در‬
‫‪% HOAc‬که در ‪R، 0.59 50‬‬
‫)‪ CHCl، - HOAc- H 2 O (90: 45: 6‬که در ‪R، 0.67‬‬
‫بر پلی آمید ‪7. TLC‬‬
‫‪ C 6 H 6- MeCOEt- MeOH‬آر اف ‪ 0.36‬که در‬
‫)‪(4: 3: 3‬‬
‫شیمیایی تبدیل ‪8.‬‬ ‫د متیالسیون با پیریدینیم کلرید‬
‫به ‪-6‬هیدروکسی ‪ 1‬یوتولین‬

‫تبدیل به یک ترکیب شناخته شده در یک زمان‪ ،‬یک مرحله ضروری در شناسایی ساختاری تعیین شد از فرمول مولکولی‬
‫با تجزیه و تحلیل میکرو‪ ،‬حداقل با تعیین کربن‪ ،‬هیدروژن‪ .‬چنین ریز آنالیز هنوز بسیار مطلوب است‪ ،‬اما زمانی که تنها‬
‫میکروگرم از مواد موجود هستند‪ ،‬می توان از اندازه گیری دقیق جرم استفاده کرد یون مولکولی‪ ،‬تعیین شده توسط طیف سنجی‬
‫‪،‬جرمی (به بخش ‪ 1.4.4‬مراجعه کنید و جدول ‪ .)1.5‬مشتق سازی است همچنین با ارزش با جدید ترکیبات‬
‫به عنوان مثال تهیه استات ها‪ ،‬متیل اترها و غیره از زمان تجزیه و تحلیل آنها تایید مفیدی از فرمول مولکولی اصلی ارائه‬
‫می دهد ماده‬

‫تحلیل و بررسی از نتایج ‪1.5‬‬

‫‪1.5.1‬‬ ‫کیفی تحلیل و بررسی‬

‫تجزیه و تحلیل گیاهی زیادی به جداسازی و شناسایی بخش های مختلف اختصاص داده شده است‪ .‬اجزای تشکیل دهنده آندری در‬
‫یک گونه خاص یا گروهی از گونه ها با انتظار این است که برخی از اجزای تشکیل دهنده ممکن است بدیع یا غیرعادی باشند‬
‫ساختار که در چنین موارد‪ ،‬آی تی است مهم به تشخیص که زیاد از را بیشتر‬
 ‫نتایج‬ ‫‪Ann/ysis‬‬ ‫‪31‬‬
‫اجزای به راحتی جدا شده یا معموالً وجود‪ :‬دارند یا جهانی هستند در وقوع‪ .‬ساکارز‪ :‬ممکن است از‬
‫یک گیاه آبی متبلور شود کنسانتره و سیتوسترول از کسر فیتوسترول‪ .‬جالب تر اجزاء هستند غالبا آن‬
‫ها حاضر که در پایین تر مقادیر‬
‫هنگامی که یک ساختار ظاهرا جدید به دست آمده است‪ ،‬الزم است به دقت بررسی‪ :‬کنید که قبال‬
‫گزارش نشده باشد‪ .‬مرجع ممکن است به مجموعه های مختلف ادبیات موجود (مثالً فرهنگ لغت‬
‫‪ Chemical Abstracts‬آلکالوئیدها‪ ،‬ساتون و باکینگهام‪ )1989 ،‬اما یک جستجوی کامپیوتری در‬
‫نیز مطلوب است‪ .‬بهترین منبع اطالعات در مورد محصوالت طبیعی شناخته شده دیکشنری است‬
‫طبیعی‪ :‬محصوالت‪( :‬باکینگهام‪ .)1994 :،‬این به هفت جلد‪ ،‬با سه ضمیمه بعد‪ ،‬اجرا می شود‪ :‬در دسترس‪:‬‬
‫‪.‬مانند آ سی دی رام‬
‫انگیزه دیگر برای تجزیه و تحلیل فیتوشیمیایی‪ ،‬تعیین خصوصیات یک اصل فعال مسئول برخی‬
‫از اثرات سمی یا مفید نشان داده شده است توسط یک عصاره گیاهی خام هنگامی که در برابر یک‬
‫سیستم زنده آزمایش می شود‪ .‬در اینگونه‪ :‬موارد‪ ،‬نظارت بر مراحل استخراج و جداسازی‪ :‬در آن‬
‫ضروری‪ :‬است در هر مرحله به منظور دنبال کردن ماده فعال به عنوان خالص شده است‪ .‬را فعالیت‬
‫گاهی اوقات می تواند ناپدید شدن در طول شکنش‪ ،‬به دلیل پایداری آن و یک ترکیب کریستالی خالص‬
‫ممکن است در نهایت به دست آید که فاقد آن باشد فعالیت عصاره اصلی احتمال آسیب به اکتیو اصل در‬
‫طول انزوا و شخصیت پردازی‪ :‬باید همیشه رعایت شود ذهن‬
‫به همین ترتیب‪ ،‬آی تی است ضروری‪ :‬است به پی بردن که را تولید از مصنوعات است‬
‫ویژگی‪ :‬مشترک آنالیز گیاهی بسیاری‪ :‬از ترکیباتی که رخ می دهد در بافت های گیاهی کامالً ناپایدار‪:‬‬
‫هستند و تقریبا ً به طور‪ :‬اجتناب ناپذیری‪ :‬ممکن است دچار آن شوند‪ :‬تغییر در طول استخراج رنگدانه‬
‫های پالستید‪ ،‬کلروفیل ها و کاروتنوئیدها‪ ،‬مستعد هستند به اصالح در طول کروماتوگرافی (فصل ‪3‬‬
‫و ‪ 4‬را ببینید)‪ .‬همه گلیکوزیدهای گیاهی در معرض هیدرولیز هستند‪ ،‬یا آنزیمی یا غیر آنزیمی‪ ،‬در حین‬
‫انزوا‪ ،‬در حالی که استرها ممکن است در حضور حالل های الکلی‪ ،‬ترانس استریفیکاسیون می‬
‫شوند‪ .‬را ترپن‌های فرار‪ :‬مستعد بازآرایی‌های مولکولی هستند تقطیر با بخار (فصل ‪ )3‬و‬
‫فعال نوری مواردی ممکن است رخ دهد‪ ،‬مگر اینکه اقدامات احتیاطی‪ :‬خاصی ‪racemization‬‬
‫انجام شود‪ .‬از نو‪ ،‬پروتئین ها ممکن است در طی مراحل جداسازی در معرض حمله پروتئاز قرار‬
‫‪.‬گیرند (فصل ‪)7‬‬
‫عالوه بر این‪ ،‬مصنوعات ممکن است ناخواسته از آزمایشگاه معرفی شوند تجهیزات تی در حین تطهیر‪:‬‬
‫را اکثر مشترک افزودنی است بوتیل ایزوفتاالت که نرم کننده ای است که تقریبا ً همیشه گیاه را آلوده می‬
‫منشاء ‪ o‬کند استخراج اس‪ .‬علیرغم وجود آن در واقع به عنوان یک ترکیب‪ :‬گیاهی گزارش شده است‬
‫‪ lS Olation.‬آشکار از یک بطری شستشوی پالستیکی‪ :‬که توسط اپراتور در طول مدت استفاده می شود‬
‫برای اجتناب از مصنوعات‪ ،‬الزم است که خام اولیه را بررسی کنید عصاره گیاه برای دیدن اینکه آیا‬
‫‪.‬یک ترکیب تنها پس از تصفیه گسترده جدا شده است یا خیر یون است در حقیقت حاضر آنجا‬
‫‪32‬‬ ‫روش از گیاه تحلیل و بررسی‬

‫کمی تحلیل و بررسی ‪1.5.2‬‬

‫به همان اندازه که اندازه گیری های کیفی روی عصاره گیاه مهم است تعیین مقادیر اجزای موجود در ساده ترین حالت روش‪ ،‬داده‬
‫های کمی را می توان با وزن کردن مقدار به دست آورد مواد گیاهی در ابتدا استفاده شده (با فرض بافت خشک شده) و مقدار‬
‫محصول به دست آمده چنین بازدهی به عنوان درصدی از کل یک خواهد بود حداقل رقم کاتیون تلفات را می توان با اضافه‬
‫کردن وزن شناخته شده زیر خالص تخمین زد‪ .‬موضع به عصاره خام‪ ،‬تکرار تصفیه و تعیین مقدار بازیافت شده اگر بافت تازه‬
‫استخراج شود‪ ،‬تبدیل عامل (بیشتر برگ های گیاه ‪ 90‬درصد آب است) مورد نیاز است عنوان کردن نتیجه به عنوان درصد ‪ -‬سن‬
‫‪.‬خشک وزن‬
‫کمی اندازه گیری ها می توان نیز باشد انجام شده بر خشک شده‪ ،‬پودر شده‬
‫مواد گیاهی برای تعیین محتوای کل قند‪ ،‬نیتروژن‪ ،‬پروتئین‪ ،‬فنل‪ ،‬تانن و غیره‪ .‬برخی از روش هایی که می توان از آنها استفاده‬
‫کرد بودن ذکر شده که در بعد فصل ها چنین رویه ها هستند مسئول به خطا ناشی از به دخالت از جانب دیگر اجزاء‬
‫حاضر‪ .‬چه چنین بازداشتن‪ -‬مین گذاری دارند بسیار ارزش که در مقررات از‪ ،‬برای مثال‪ ،‬را میزان از گیاه خواری آ خاص‬
‫‪.‬گیاه عضو رنج می برد نیاز دارد به بودن ارزیابی شد‬
‫در حالت ایده آل‪ ،‬که در کمی اندازه گیری ها را مقادیر از را شخصی‬
‫به دست می آید‪ HPLC .‬یا ‪ GLC‬اجزای درون یک کالس خاص از اجزا باید تعیین شوند و این در حال حاضر به راحتی توسط‬
‫مقادیر چرب اسیدها مقید شده است خنثی گیاه لیپیدها می تواند‪ ،‬برای مثال‪ ،‬بودن مشخص به روشی کامالً تکرارپذیر پس از‬
‫اندازه ‪، HPLC‬شبیه لری ‪).‬فصل ‪ GLC (4‬صابون سازی‪ ،‬متیل استر برای جفت گیری و کمی سازی متیل استرها توسط‬
‫گیری ها می توان مورد استفاده قرار گیرد برای تعیین مقادیر از فالونوئید رنگدانه ها در ارقام و ژنوتیپ های مختلف از باغ گل ها‬
‫‪(.‬فصل ‪)2‬‬
‫اهمیت تکرار اندازه گیری ها به گونه ای که بتوان آنها را دید معنی دار بودن از نظر آماری واضح است اما همیشه قابل قدردانی‬
‫نیست‪ .‬تغییر در مقادیر ناشی از محیط زیست پارامترها باید حذف شوند و نمونه برداری باید در رابطه با سن و منشاء گیاه در نظر‬
‫گرفته شود‪ .‬راهنمایی بر اینها مسائل هستند در دسترس که در اکثر مدری گیاه متن ها‬

‫برنامه‪ :‬های کاربردی ‪1.6‬‬

‫عمومی ‪1.6.1‬‬
‫در حالی که روش های فیتوشیمیایی امروزه نقش ثابتی در عمل دارند‪ .‬فراخوانی‪ :‬همه شاخه ها از گیاه‬
‫علوم پایه‪ ،‬این دارد نه همیشه بوده بنابراین‪ .‬با اينكه این روش ها بدیهی است که در تمام مواد‬
‫شیمیایی‪ :‬و بیوشیمیایی‪ :‬ضروری هستند مطالعات‪ ،‬کاربرد آنها در حوزه های کامالً بیولوژیکی‪ :‬فقط‬
‫دارد بیا در داخل را آخر دو دهه ها زوج که در رشته ها بنابراین از راه دور از جانب‬
 ‫برنامه های کاربردی‬ ‫‪33‬‬

‫‪ palaeobotany،‬آزمایشگاه شیمی به عنوان سیستماتیک‪ ،‬جغرافیای‪ :‬گیاهی‪ ،‬اکولوژی و‬

‫فیتوشیمیایی‪ :‬مواد و روش ها مهم شده اند برای حل‪ -‬انواع خاصی از مشکالت را ایجاد می کند و بدون‬
‫‪.‬شک در اینجا با آنها استفاده می شود افزایش می یابد فرکانس‪ :‬که در را آینده‬
‫وجود‪ :‬دارد فقط اتاق که در این کتاب به اشاره آ تعداد کمی از را زیاد کاربرد‪ -‬روش های‬
‫فیتوشیمیایی برخی از برنامه های کاربردی آشکار در کشاورزی‪ ،‬در تغذیه و صنایع غذایی و در‬
‫داروسازی‪ :‬تحقیق‪ :‬باید بدیهی‪ :‬تلقی شود‪ .‬برنامه های زیر به سادگی هستند برای نشان دادن ارزش تکنیک‬
‫‪.‬های فیتوشیمیایی‪ :‬در برخی از آنها ارائه شده است عمده شاخه ها از گیاه علوم پایه‬

‫گیاه فیزیولوژی ‪1.6.2‬‬

‫سهم عمده مطالعات فیتوشیمیایی در فیزیولوژی گیاهی بدون شک در تعیین ساختارهای‪ :‬شیمیایی‪،‬‬
‫بیوسنتزی‪ :‬هستند منشا و نحوه عملکرد هورمون های رشد طبیعی در نتیجه ادامه دارد همکاری بر‬
‫فراز‪ :‬را سال ها بین فیزیولوژیست ها و فیتوشیمیدانان‪ ،‬پنج دسته از تنظیم کننده های رشد در حال حاضر‬
‫که ‪ tion،‬شناخته شده اند‪ :‬اکسین ها‪ ،‬سیتوکینین ها‪ ،‬آبسیزین ها‪ ،‬جیبرلین‪ :‬ها و اتیلن‪ .‬روش های تشخیص‬
‫متفاوت است‪ ،‬در ادامه مورد بحث قرار‪ :‬خواهد گرفت صفحات به شرح ‪ PC‬تا ‪ TLC‬تا ‪ GLC‬از‬
‫زیر است‪ :‬اکسین ها (ص ‪ ،)218‬سیتوکینین ها (ص ‪ ،)226‬آبسیسین ها (ص ‪ )122‬و جیبرلین ها (ص‬
‫‪ .)127‬یکی از قابل توجه ترین جنبه های جیبرلین گروه از هورمون ها است را بزرگ عدد از‬
‫شناخته شده سازه های (بر فراز صد)‪ ،‬ظاهراً همه با طیف مشابهی از خواص رشد‪ .‬نیاز به روش‬
‫برای آنها ‪ GC—MS‬های بسیار‪ :‬دقیق تشخیص و تمایز بین جیبرلین ها رهبری به توسعه از ترکیب‬
‫تحلیل و بررسی‪ .‬کتاب کلی در مورد‪ :‬روش های جداسازی‪ :‬رشد گیاه مواد‪ ،‬ویرایش‪ :‬شده توسط هیلمن‬
‫(‪ ،)1978‬می تواند برای اطالعات بیشتر مورد مشورت قرار‪ :‬گیرد‪ .‬دم الزامات الزم برای تجزیه و‬
‫تحلیل‪ :‬دقیق هورمونی بسیار مهم است‪ .‬توسط‪ :‬ریو و کروزیر‪ )1980( :‬مورد توجه قرار گرفت‪ .‬یک‬
‫است ‪ Horgan‬بررسی‪ :‬عالی از تکنیک ها‪ ،‬از جمله استفاده از روش رادیو ایمونواسی‪ ،‬روش‬
‫یک ششم کالس رشد تنظیم کننده شرح داده شده به تازگی‪ :‬هستند را براسینوستروئیدها؛ ‪(1S81).‬‬
‫‪.‬مواد و روش ها از استروئید‪ :‬تحلیل و بررسی‪ :‬هستند داده شده بر پ‪134 .‬‬

‫گیاه آسيب شناسي ‪1.6.3‬‬

‫تکنیک های فیتوشیمیایی در درجه اول برای آسیب شناس مهم هستند خصوصیات شیمیایی‬
‫فیتوتوکسین‪ :‬ها (محصوالت‪ :‬سنتز میکروبی‪ :‬پایان نامه تولید شده در گیاهان عالی هنگام تهاجم توسط‬
‫محصوالت‪ :‬متابولیسم گیاهی باالتر که در پاسخ تشکیل‪ :‬می شوند به( باکتری های قارچ) و فیتوالکسین ها‬
‫طیف وسیعی‪ :‬از ساختارهای شیمیایی مختلف درگیر هستند در هر دو مورد‪ TiiCrobial ). .‬حمله‬
‫آشناترین فیتوتوکسین‪ :‬ها لیکوماراسمین و فوزاریک هستند اسید‪ ،‬مشتقات اسید آمینه که عوامل پژمرده‬
‫کننده در گوجه فرنگی هستند‪ .‬دیگر سموم‪ :‬که دارند بوده جدا شده هستند گلیکوپپتیدها‪ ،‬نفتاکینون ها یا‬

‫‪،‬فی‬
‫‪34‬‬ ‫روش از یالنت تحلیل و بررسی‬

‫‪sesquiterpenoids (Durbin، 1981).‬‬ ‫برخی از فیتوتوکسین ها از نظر شیمیایی حساس هستند به طوری که‬
‫‪.‬در هنگام جداسازی آنها باید احتیاطات خاصی صورت گیرد شناسایی‬
‫ممکن منسفیلد‪ .)1982 ،‬آنها فیتوالکسین ها همچنین دارند ناهمسان سازه های‪ ،‬با توجه به را گیاه منبع (بیلی و‬
‫ریشیتین( ‪ sesquiterpenoid‬است بودن‬ ‫از‬ ‫‪Solanum‬‬
‫ایزوفالوانوئید ‪tuberosum)،‬‬ ‫پیزاتین از(‬ ‫پیسوم‬
‫یا "فنولیک" (اورچینول از جانب ارکیز میلیتریس)‪ .‬شناسایی ها از )فابا ‪ Vicia‬وایرون اسید از( استیلنیک ‪s«iirum)،‬‬
‫ایزوفالوانوئیدها و استیلن ها هستند شرح داده شده که در فصل ها ‪ 2‬و ‪ 5‬به ترتیب و آ روش برای فیتوالکسین القاء است‬
‫مشمول مانند آ کاربردی آزمایش که در فصل ‪ .2‬مواد "پیش عفونی"‪( .‬طبیعی است ثانویه رخ می دهد اجزای تشکیل دهنده)‬
‫در نظر گرفته شده اند توسط برخی گیاه آسیب شناسان مهم بودن در انتقال بیماری مقاومت به گیاهان فنولیک ترکیبات‪ ،‬چنین‬
‫مانند فلوریدزین در سیب‪ ،‬تانن که در تمشک‪ ،‬هستند به طور عمده دخیل است اینجا‪ .‬مواد و روش ها از شناسایی از چنین‬
‫ترکیبات هستند تحت پوشش که در جزئیات که در فصل ‪ .2‬دیگر مثال ها از گیاه ترکیبات که دارند بوده مشخص شده‬
‫است مانند فیتوالکسین ها یا پیش عفونی مواد می توان بودن یافت که در را مرور از‬
‫‪.‬خاکستری و هاربوم (‪)1994‬‬

‫گیاه بوم شناسی ‪1.6.4‬‬

‫دو پژوهش مناطق جایی که ثانوی گیاه اجزای تشکیل دهنده هستند قابل توجه که در اکولوژی گیاهی در تعامالت گیاه‪-‬حیوان و گیاه‪-‬‬
‫گیاه است‪ .‬آنا‪ -‬مشکالت لیتیک در هر دو مورد به دلیل محدودیت بسیار دشوار است مقدار مواد بیولوژیکی در اختیار‬
‫فیتوشیمیدان‪ .‬برای به عنوان مثال‪ ،‬در پیگیری سرنوشت ترکیبات ثانویه در تغذیه حشرات روی گیاهان‪ ،‬الزم است اندام های مختلف‬
‫‪.‬حشره را تجزیه و تحلیل کرد تا ببیند جایی که ترکیبات ذخیره می شوند؛ چنین تحلیل هایی اغلب پیچیده و زمان بر‬
‫ترکیباتی که تاکنون شناخته شده اند که در فعل و انفعاالت گیاه و حیوان نقش دارند در درجه اول آلکالوئیدها و گلیکوزیدهای‬
‫قلبی‪ ،‬گلیکوزیدهای روغن خردل‪ ،‬سیانوژن ها‪ ،‬استروئیدها یا ترپن های فرار‪ .‬ترکیبات گیاهی ممکن است متفاوت باشد به عنوان‬
‫جاذب تغذیه یا دافع عمل می کنند‪ ،‬اثرات هورمونی بر روی بدن دارند حشرات و یا مکانیسم دفاعی مفیدی را در برابر حشرات‬
‫‪.‬فراهم کنند شکار (هاربوم ‪)1993‬‬
‫فعل و انفعاالت گیاه‪-‬گیاه شامل مواد به اصطالح آللوپاتیک است که یک گیاه از ریشه یا برگ خود تراوش می کند تا از رشد آن‬
‫جلوگیری کند سایر گونه های گیاهی در مجاورت آن‪ .‬ترکیبات یا فرار هستند ترپن ها ( به عنوان مثال سینئول) یا اسیدهای فنولیک‬
‫ساده‪ ،‬بسته به اینکه آیا گیاه در حال رشد است در یک نیمه گرمسیری یا معتدل اقلیم‪ .‬را فیتوشیمیایی مطالعه آللوپاتی می تواند‬
‫دشوار باشد زیرا نیاز دارد تعیین روی عصاره های برگ کامل‪ ،‬شیرابه های طبیعی برگ و روی خاک نمونه ها نیز گردش‬
‫‪.‬سریع احتمالی مواد فعال در خاک همچنین خطر تحلیلی دیگری در این زمینه فراهم می کند (پاتنام و تانگ‪)1986 ،‬‬
 ‫برنامه های کاربردی‬ ‫‪35‬‬

‫‪1.6.5‬‬ ‫گیاه بافت فرهنگ‬

‫فیتوشیمی نقش مهمی‪ :‬در کشت بافت گیاهی در تشخیص تجزیه و تحلیل محصوالت متابولیسم ثانویه که‬
‫ممکن است باشد در چنین بافت هایی تشکیل می شود‪ .‬در طول کشت‪ ،‬غلظت ثانویه متابولیت ها ممکن‬
‫است بسته به هورمون های گیاهی اضافه شده متفاوت باشد‪ .‬وجود نور و عوامل دیگر در برخی موارد‬
‫متابولیت ها تولید می شوند که در گیاهی که بافت از آن گرفته شده وجود‪ :‬ندارد‪ .‬برای به عنوان مثال‪،‬‬
‫آنتوسیانین ها ممکن است در کشت گیاهانی تولید شوند که فاقد آن هستند رنگ سیانیک ترکیبات فعال‬
‫دارویی جدید ممکن است برای در کشت سلولی یا کالوس و تکنیک های فیتوشیمیایی خوبی ایجاد می‬
‫شود برای تشخیص آنها الزم است‪ .‬تولید چنین ساختارهایی‪ :‬ممکن است الکی باشد مورد اشاره قرار‬
‫گرفت که در سلول فرهنگ توسط اضافه كردن باکتریایی‪ :‬یا قارچی سلول عصاره ها (استافورد و آزادی‬
‫‪.‬مشروط‪)1997 ،‬‬
‫برخی از متابولیت های ثانویه‪ :‬مانند آلکالوئیدها ممکن است در سلول تولید شوند کشت در مقادیر بسیار‬
‫کم و تکنیک‌های رادیو ایمونواسی ممکن است برای تحلیل آنها مورد نیاز باشد (زنک و همکاران‪،‬‬
‫‪ .)1997‬یک سری عالی از نه جلد منتشر شده است که شرایط آزمایشی را شرح می دهد ثانوی تولید ‪-‬‬
‫محصول سنتز که در سلول فرهنگ و مواد و روش ها از فیتوشیمی‪ :‬تجزیه و تحلیل کالری برای اکثر‬
‫‪.‬گیاهانی که در کشت سلولی استفاده شده اند (باجاج‪)1996 ،‬‬

‫گیاه ژنتیک ‪1.6.6‬‬

‫در گذشته‪ ،‬فیتوشیمی به ژنتیک باالتر گیاهان کمک کرده است ارائه ابزاری برای شناسایی آنتوسیانین‪ ،‬فالون و کاروتنوئید رنگدانه‬
‫های موجود در ژنوتیپ های رنگی مختلف گیاهان باغی‪ .‬را نتایج نشان داده است که اثرات بیوشیمیایی این ژن ها دارای الف ساده و‬
‫در این موجودات (آلستون‪ .)1964 ،‬وراثت در گیاهان دیگران ویژگی های شیمیایی ‪ sis‬نشان داده اند محتمل مسیر سنتز رنگدانه‪:‬‬
‫‪ (.‬آلکالوئیدها‪ ،‬ترپن ها‪ ،‬و غیره) نیز با موفقیت انجام شده است نقشه برداری شده است بیرون توسط فیتوشیمیایی تحلیل و بررسی‬
‫سهم جدیدتر فیتوشیمی در ژنتیک در شناسایی گیاهان هیبرید و در روشن سازی با روش های شیمیایی آنها والدین‪ :‬اصل و نسب‪.‬‬
‫فیتوشیمی دارد همچنین برنده شد افزایش می یابد به رسمیت شناختن‬
‫مانند آ مفید ابزار‪ ،‬با یکدیگر با سیتولوژی‪ ،‬به بودن استفاده شده که در را تحلیل و بررسی‪ :‬از‬
‫‪،‬ژنتیکی‪ :‬تغییر در داخل گیاه جمعیت ها (ر‪.‬ک‪ .‬هاربوم‪ :‬و ترنر‬

‫گیاه سیستماتیک ‪1.6.7‬‬

‫یکی از را اکثر به طور سریع در حال توسعه زمینه های که در فیتوشیمی در را‬
‫حاضر‬ ‫زمان است را ترکیبی انضباط بین علم شیمی و طبقه بندی‪ ،‬مانند بیوشیمیایی‪ :‬سیستماتیک‪:‬‬
‫صاحب‬ ‫یا شیمی تاکسونومی‪ :‬اساسا‪ ،‬آی تی است‬
‫ج نگران با را شیمیایی نظر سنجی از محصور گروه ها از گیاه‪ ،‬به طور عمده‬
‫‪36‬‬ ‫روش‬ ‫گیاه‬ ‫‪nnnlysis‬‬
‫برای اجزای ثانویه بلکه برای درشت مولکول ها و کاربرد‪ :‬یون از را داده ها بنابراین به دست آمده‬
‫‪.‬به گیاه طبقه بندی (هاربوم و ترنر‪)1984 ،‬‬
‫شاید مفیدترین دسته از ترکیبات برای چنین مطالعه ای باشند فالونوئیدها بررسی بسیاری از کالس‬
‫های دیگر از ترکیبات (به ویژه آلکا لویدها‪ ،‬اسیدهای آمینه غیر پروتئینی‪ ،‬ترپن ها و ترکیبات‬
‫گوگردی) دارند همچنین‪ :‬اطالعات بالقوه مفید جدیدی را به همراه داشت برای اهداف طبقه بندی روش‬
‫های دقیق‪ ،‬هم در غربالگری اولیه گیاهان ضروری‪ :‬است و که در را بیشتر‪ :‬دقیق تحلیل و بررسی‪ :‬از‬
‫‪.‬شخصی‪ :‬اجزاء‬
‫تجزیه و تحلیل شیمیایی‪ :‬از توالی اسید آمینه پروتئین های گیاهی است نیز آورده شده است به‬
‫صورت سیستماتیک مشکالت در سطوح‪ :‬باالتر از طبقه بندی‪ .‬نتایج دارند بوده به دست آمده با‬
‫سیتوکروم ج پالستوسیانین و فردوکسین؛ توالی اسیدهای نوکلئیک گیاهی دارد همچنین تسلیم شد داده‬
‫‪ et nl.، 1992).‬سولتیس( ها از طبقه بندی عالقه‬

‫‪1.6.8‬‬ ‫دارویی گیاه پژوهش‬

‫و تاکنون تنها بخش کوچکی از گیاهان ‪ tive‬پادشاهی گیاهی نشان دهنده مخزن عظیمی از مواد بیولوژیکی است‪ .‬مولکول های‬
‫دارویی دارند فعالیت مورد سنجش قرار گرفته است‪ .‬نزدیک به ‪ 50‬درصد از داروهایی که در پزشکی استفاده می شود‪ ،‬از منشا‬
‫گیاهی آنجا بنابراین است بسیار جاری پژوهش اختصاص داده شده است به بررسی فیتوشیمیایی گیاهان عالی که اتنوبوتانیکال‬
‫دارند اطالعات مرتبط با آنها سپس فیتوکمیکال ها جدا می شوند غربال شده است برای متفاوت انواع بیولوژیکی فعالیت‪ .‬سمیت‬
‫سلولی از طريق را آزمایش میگوی آب نمک به منظور آشکارسازی ترکیبات ضد سرطانی جدید مورد مطالعه قرار گرفته‬
‫کشف شد‪ .‬اِرد که در این مسیر‪ .‬متناوبا‪ ،‬از سوی ‪ Taxus breoifolia،‬است‪ .‬تاکسول‪ ،‬داروی بیمارستانی جدید از پوست‬
‫دیگر‪ ،‬خام گیاه عصاره ها می توان بودن اولین مورد سنجش قرار گرفت برای خاص فعالیت ها و را فعال کسری سپس‬
‫تجزیه و تحلیل کرد گیاهی شیمیایی انواع زیست سنجی اکنون در دسترس هستند برای فیتوشیمیدان به استفاده کنید که در چنین کار‬
‫‪ (Hostettmann, 1991).‬کردن‬

‫عمومی منابع‬
‫فیتوالکسین ها‪ ،‬بلکی‪ ،‬گالسکو )‪) (1982‬ویرایش‌ها( ‪، JW‬و منسفیلد ‪، JA‬بیلی‬
‫الغر الیه )‪، JM (1963‬دارویی و گیاهان معطر‪ ،‬جلد ‪ ،9‬اسپرینگر‪ ،‬برلین‪ .‬بابیت )‪Bajaj, YPS (ed.) (1996‬‬
‫‪.‬کروماتوگرافی‪ ،‬راینهولد میخانه شرکت‪ ،‬جدید یورک‬
‫‪.‬باکینگهام‪ ،‬جی‪( .‬ویرایش) (‪ )1994‬دیکشنری رای از طبیعی محصوالت‪ ،‬چپمن و سالن‪ ،‬لندن‬
‫‪ -‬بیوشیمیایی کاربرد از گریس کروماتوگرافی )‪، EE (1962‬و استورز ‪، HP‬برچفیلد‬
‫‪.‬فی‪ ،‬علمی مطبوعات‪ ،‬جدید یورک‬
‫‪.‬باترورث‪ ،‬لندن ‪ edn،‬طیف سنجی‪ IR 3 ،‬یک معرفی به کاربردی )‪، RA (1969‬صلیب‪ ،‬آگهی و جونز‬
‫شیمیایی و گیاه شناسی راهنما به گلسنگ محصوالت‪ ،‬شمال کارولینا دانشگاه مطبوعات‪ ،‬نمازخانه )‪، CF (1969‬کولبرسون‬
‫‪.‬تپه‪ ،‬ایاالت متحده آمریکا‬
‫نوین برای تکنیک برای علم شیمی )‪، AE (1986‬دروم‬ ‫پژوهش‪ ،‬پرگامون‬
‫مطبوعات‪ ،‬آکسفورد‬
 ‫عمومی‬ ‫مراجع ‪ri::‬‬ ‫‪37‬‬

‫مواد و روش ها که در گیاه بیوشیمی رای ‪ ،‬که در ‪) (1997-1989) 10‬ویرایش‌ها( ‪، JB‬و هاربورن ‪، PM‬دی‬
‫‪.‬جلدها‪ ،‬علمی مطبوعات‪ ،‬لندن‬
‫)‪، ES (1957‬و استرن ‪، AE‬سموم که در گیاه بیماری‪ ،‬علمی مطبوعات‪ ،‬جدید یورک‪ .‬گیالم )‪) (1981‬ویرایش( ‪، RD‬دوربین‬
‫‪ edn،‬الکترونیکی جذب طیف سنجی‪2 ،‬‬
‫‪.‬ادوارد آرنولد‪ ،‬لندن‬
‫‪.‬چپمن و سالن‪ ،‬لندن ‪ edn،‬معرفی به باال کارایی مایع کروماتوگرافی‪، PA (1982) 2 ،‬و سول ‪، RJ‬همیلتون‬
‫‪.‬لندن ‪ -laoonoids، Academic Press،‬مقایسه ای بیوشیمی از )‪Harborne, JB (1967‬‬
‫علمی ‪ edn،‬معرفی به زیست محیطی بیوشیمی رای ‪، JB (1993) 4 ،‬هاربورن‬
‫‪.‬مطبوعات‪ ،‬لندن‬
‫‪.‬گیاه شیمی سیستماتیک‪ ،‬علمی مطبوعات‪ ،‬لندن )‪، BL (1984‬و ترنر ‪، JB‬هاربورن‬
‫‪،‬معرفی به ارگانیک‪ .‬آلی طیف سنجی )‪، TDW (1996‬و کلریج ‪، LM‬هاروود‬
‫دانشگاه مطبوعات‪ ،‬آکسفورد‬
‫‪-‬هفتمن‪ ،‬اف‪ )1992( .‬کروماتوگرافی‪ :‬مبانی و برنامه های کاربردی از کروماتو‬
‫گرافیکی و الکتروفورتیک تکنیک‪ 5 ،‬ویرایش‪ ،‬الزویر‪ ،‬آمستردام‬
‫هیلمن‪،‬‬ ‫جی آر (ویرایش) (‪ )1978‬انزوا از م‪::‬و‪::‬ا‪::‬د‪ ::‬رشد‬ ‫گیاهی‬ ‫‪ ،‬کمبریج‬
‫‪.‬دانشگاه مطبوعات‪ ،‬کمبریج‬
‫‪.،‬فیتوشیمی ‪. Prog.‬هورگان‪ ،‬آر‪ )1981( .‬مودم مواد و روش ها برای گیاه هورمون تحلیل و بررسی‬
‫‪7، 137-70.‬‬
‫مقدماتی )‪Hostettmann, K., Hostettmann, M. and Marston, A. (1986‬‬
‫‪.‬کروماتوگرافی تکنیک‪ ،‬اسپرینگر‪ ،‬برلین‬
‫‪ ،‬طیف سنجی که در ارگانیک‪ .‬آلی شیمیدان رای ‪ NMR‬برنامه های کاربردی از )‪، LM (1959‬جکمن‬
‫پرگامون مطبوعات‪ ،‬آکسفورد‬
‫‪،‬نه که در بیوشیمی رای ‪ :‬اصول و برنامه های کاربردی‪ .‬علمی مطبوعات )‪، TL (1975‬جیمز‬
‫‪.‬جدید یورک‬
‫و لیدرر‪ ،‬م‪ )1957( .‬کاغذ ‪، E.‬جان وایلی‪ ،‬جدید یورک‪ .‬لیدرر ‪ edn،‬کرشنر‪ ،‬جی جی (‪ )1978‬الغر الیه کروماتوگرافی‪2 ،‬‬
‫‪،‬الزویر ‪ edn،‬کروماتوگرافی‪2 ،‬‬
‫آمستردام‬
‫‪ Verlag،‬گیاه شناسی‪ ،‬اسپرینگر ‪ der‬کاغذ کروماتوگرافی که در )‪، HF (1959‬لینک‌ها‬
‫‪.‬برلین‬
‫و جکسون‪ ،‬جی اف (‪ )-1985‬نوین مواد و روش ها از گیاه تحلیل و بررسی‪ ،‬جدید ‪، HF‬لینک‌ها‬
‫‪.‬سلسله‪ ،‬اسپرینگر‪ ،‬برلین‬
‫‪.‬طیف سنجی‪ ،‬آدم هیلگر‪ ،‬لندن ‪، RA (1975) 8 iochemicuI‬مورتون‬
‫ریو‪ ،‬دکتر و سی روزیر‪ ،‬آ‪ )1980( .‬کمی تحلیل و بررسی از گیاه هورمون ها‬
‫‪.‬فیزیول‪ .‬جدید> سلسله‪. Pl. 80-20 ،9 ،‬دایره‬
‫آموزشی ویبولیتین‪ ،‬پول‪ Zone Electrophoresis، edn 2، BDH Chemicals ،‬روش های سارجنت‪ ،‬جی آر (‪ .)1969‬در‬
‫‪.‬انگلستان‬
‫‪ Ident'i:fi-‬شاینمن‪ ،‬اف‪( .‬ویرایش) (‪ )1970‬یک مقدمه به اسپکروسکوپی مواد و روش ها برای را‬
‫یون از ارگانیک‪ .‬آلی ترکیبات (جلد‪ :‬من)‪ ،‬پرگامون مطبوعات‪ ،‬آکسفورد!«‪o‬‬
‫)‪ II‬جلد( از ارگانیک‪ .‬آلی ترکیبات ‪ Ident'fl-‬یک مقدمه به طیف سنجی مواد و روش ها برای )‪، F. (ed.) (1970‬شاینمن‬
‫پرگامون مطبوعات‪ ،‬آکسفورد‬
‫‪،‬طیف از طبیعی محصوالت ‪ Idltraviolet‬اسکات‪ ،‬هوش مصنوعی (‪ .)1964‬تفسیر از را‬
‫پی ارگامون مطبوعات‪ ،‬آکسفورد‬
‫‪.‬شرما‪ ،‬جی‪ .‬و تسوایگ‪ ،‬جی‪ )1971( .‬کاغذ کروماتوگرافی‪ ،‬علمی مطبوعات‪ ،‬جدید‪ :‬یورک‬
‫‪.‬کوگان صفحه‪ ،‬لندن ‪ Chromato$r«phy،‬سی‪ .)1970( .‬گاز ‪S im pson،‬‬
‫و باکینگهام‪ ،‬جی‪ )1989( .‬دیکشنری رای از آلوئیدها‪ ،‬چپمن و ‪، IW‬اس اوتون‬
‫‪.‬سالن‪ ،‬لندن‬
‫‪.‬جورج آلن و برنده نشدن‪ ،‬لندن ‪ edn،‬الغر الیه کروماتوگرافی‪) (1969) 2 ،‬ویرایش‪ ، E. (:‬استال‬
‫‪،‬تمرین از الغر الیه کروماتوگرافی )‪، MF (1978‬و دابین ‪، JC‬تو اوچستون‬
‫جان وایلی‪ ،‬چیچستر‬
‫‪38‬‬ ‫روش از طرح تی تحلیل و بررسی‬

‫‪ ung« f‬ل )‪، WB (1971‬نازک فیلم کروماتوگرافی‪ ،‬پاک کننده هیوم پرس‪ ،‬لندن‪ .‬ترنر )‪، EV (1963‬راستگو‬
‫‪.‬علمی مطبوعات‪ ،‬لندن ‪efa6olifes،‬‬
‫و آلدریج‪ ،‬دی سی (‪، WB )1983‬ترنر‬ ‫‪.‬علمی مطبوعات‪ ،‬لندن ‪ ff،‬متابولیت ها ‪-ungul‬‬
‫‪.‬اسپرینگر‪ ،‬برلین ‪ edn،‬واگنر‪ ،‬اچ‪ .‬و بالد‪ ،‬اس‪ )1996( .‬گیاه دارو تحلیل و بررسی‪2 ،‬‬
‫بیوشیمیایی مجوز برنامه ها )‪) (1972‬ویرایش( ‪، GR‬والر‬ ‫طیف سنجی‪ ،‬وایلی‬
‫‪.‬بین علوم‪ ،‬جدید یورک‬
‫‪،‬طیف سنجی ‪ QMass‬بیوشیمیایی برنامه های کاربردی‪، OC (1980) :‬و درمر ‪، GR‬والر‬
‫وایلی‪ ،‬چیچستر ‪ hn‬اول مکمل‪ ،‬جو‬
‫‪،‬و فلمینگ‪ ،‬من‪ )1966( .‬طیف سنجی مواد و روش ها که در ارگانیک‪ .‬آلی علم شیمی ‪، DH‬ویلیامز‬
‫‪.‬مک گراو هیل‪ ،‬لندن‬

‫تکمیلی منابع‬

‫که در بیوشیمی )‪، RE (1964‬آلستون‬ ‫)هاربورن ‪ JB‬ویرایش( فنولیک ترکیبات‬

‫‪، pp. 171-204.‬علمی مطبوعات‪ ،‬لندن‬
‫‪.‬بیوچینی‪ .‬بیوفیز‪ .‬آکتا‪، RG (1956) 427 ،4 ،‬و وستال ‪، EC‬بیت اسمیت‬
‫‪ F.‬ویرایش( در مقدمه به طیف سنجی مواد و روش ها برای شناسایی ارگانیک‪ .‬آلی ترکیبات (جلد اول) )‪، G. (1970‬اگلینتون‬
‫‪، pp. 123-144.‬پرگامون مطبوعات‪ ،‬آکسفورد ‪Scheinmann)،‬‬
‫‪، JB (1994) Phyfocheniisfry، 37، 19.‬خاکستری‪ ،‬آر‪ .‬و هاربورن‬
‫‪.‬فیتوشیمی رای ‪، JB (1969) 419 ،8‬هاربورن‬
‫هاربورن‪ ،‬جی بی‪ ،‬برتون‪ ،‬پ‪ ،.‬کمبیر‪ ،‬ح‪ ،.‬مابری‪ ،‬تی‪.‬جی‪ .‬و همام‪ ،‬ز‪)1971( .‬‬
‫‪Phyfochemisfry، 10، 883.‬‬
‫‪.‬پیدا کردن‪ Nntore 1241 ،213 ).‬و زنگ‪ ،‬ام جی (‪، RM )1967‬هارلی‬
‫‪.‬و قابل رویت جذب طیف (جلد من‪، HM (1956) UV )54-1930 ،‬هرشنسون‬
‫‪.‬علمی مطبوعات‪ ،‬نیویورک‬
‫‪، HM (1959) f‬هرشنسون‬ ‫‪.‬قرمز جذب طیف (جلد من‪ .)57-1945 ،‬علمی مطبوعات‪ ،‬جدید یورک ‪a‬‬
‫‪ II، 1955-9).‬جلد( و قابل رویت جذب طیف ‪، HM (1961) UV‬هرشنسون‬
‫‪.‬علمی مطبوعات‪ ،‬نیویورک‬
‫‪ II، 1958-62).‬جلد( زیر قرمز جذب طیف )‪، HM (1964‬هرشنسون‬
‫‪.‬علمی مطبوعات‪ ،‬جدید یورک‬
‫‪ III، 1960-3).‬جلد( و قابل رویت جذب طیف ‪، HM (1966) UV‬هرشنسون‬
‫‪.‬علمی مطبوعات‪ ،‬جدید یورک‬
‫هاستتمن‪ ،‬ک‪( .‬ویرایش) (‪ )1991‬مواد و روش ها که در گیاه بیوشیمی رای ‪ ،‬جلد ‪ ،6‬سنجش برای‬
‫‪.‬زیست فعالی‪ ،‬علمی مطبوعات‪ ،‬لندن‬
‫‪.‬علمی مطبوعات‪ ،‬لندن ‪)،‬براون ‪ SB‬ویرایش( در یک مقدمه به طیف سنجی دور بیوشیمی )‪، R. (1980‬جونز‬
‫‪، BA (1995) Phyfocheniisfry 4، 857.‬شوالیه ها‬
‫انتشارات آکادمی علوم‪ ،‬بوداپست‪ .‬مابری‪ ،‬تی جی (‪ )1969‬که در ‪ Spectra،‬جذب )‪Lang, L. (1959‬‬
‫‪.‬هاربورن و تی ‪ JB‬که در فیتوشیمی رای (ویرایش‌ها ‪Perspecfioes‬‬
‫‪، pp. 1-46.‬سویین) علمی مطبوعات‪ ،‬لندن‬
‫‪.‬اوریان‪ ،‬سانتی متر (‪ )1995‬جی‪ .‬شیمی اکول‪1235 ،21 ،.‬‬
‫‪.‬پاریس‪ ،‬ر‪ ،.‬دیورند‪ ،‬م‪ .‬و کاپوت‪ ،‬جی ال (‪ )1960‬ان فارم‪ .‬فرانک‪769 ،18 ،‬‬
‫ویلسون ‪ CL‬تحلیلی علم شیمی (ویرایش ‪ Comprefiensire‬که در )‪، JWC 11971‬پیربوم‬
‫‪، pp. 1-129.‬الزویر‪ ،‬آمستردام ‪ HC)،‬جلد( )ویلسون ‪ DW‬و‬
‫‪.‬فیتوشیمیست ری ‪، JD (1982) 56-2441 ،21 ،‬فیلیپسون‬
‫‪.‬فیتوشیمی رای ‪، RD (1962) 215 ،1 ،‬و نجار ‪، EH‬پویندکستر‬
‫‪،‬را علوم پایه از آللوپاتی‪ ،‬جان وایلی )‪) (1986‬ویرایش‌ها( ‪، CS‬و زبانه ‪، AR‬پاتنام‬
‫چیچستر‬
‫‪.‬فیتوشیمی‪، DE (1971) 1245 ،10 ،‬و هاینز ‪، KJ‬سندفورد‬
 ‫مکمل مراجع‬ ‫‪39‬‬

‫‪.‬نیوزلند‪ ./ :‬علمی‪، DS (1966) Neu 833 ،9 ،‬و لتهام ‪، JS‬شانون‬

‫‪ Pfnnts،‬و دویل‪ ،‬جی جی (‪ )1992‬مولکولی سیستماتیک از ‪، DE‬سولتیس ‪، PS،‬سولتیس‬
‫‪.‬چپمن و سالن‪ ،‬جدید یورک‬
‫ویرایشگر( محصوالت صنعتی ‪ @Nm‬بدبختی ‪ -‬منبع ‪ Phytochemic «l‬در )‪ Pazole، CJ (1997‬و ‪Stafford، AM‬‬
‫رویال جامعه‪ :‬از علم شیمی‪ ،‬لچورث‪S. Wrigley، M. Hayes، R. Thomas and E. Chrystal)، ،‬‬
‫‪.‬هرتس‬
‫‪.‬فیتوشیمیایی تحلیل و بررسی ‪، FA (1995) 177 ،6‬توماس‪-‬باربران‬
‫از صنایع غذا ‪ ct‬آروم _ _ از تخمیرها )‪، CF (19-9‬ون سومری‬
‫‪) 139-91 ،24.‬بروکسل(‬
‫و متراکم‪ ،‬ب‪، EW )1977( .‬الشاگی‪ ،‬ح‪ ،.‬آرنس‪ ،‬ح‪ ،.‬در انبار‪ ،‬جی‪ ،.‬ویلر ‪، MH،‬زنک‬
‫‪.‬گیاه بافت فرهنگ و آن بیوتکنولوژیک کاربرد‪ ،‬اسپرینگر‪ ،‬برلین‪:‬‬
‫‪2‬‬
‫فنولیک ترکیبات‬

‫‪2.1‬‬ ‫مقدمه‬ ‫‪40‬‬

‫‪2.2‬‬ ‫فنل ها و فنولیک اسیدها‬ ‫‪42‬‬
‫‪2.3‬‬ ‫فنیل پروپانوئیدها‬ ‫‪49‬‬
‫‪2.4‬‬ ‫فالونوئید رنگدانه‬ ‫‪60‬‬
‫‪2.5‬‬ ‫آنتوسیانین‬ ‫‪66‬‬
‫‪2.6‬‬ ‫فالونول ها و فالون ها‬ ‫‪74‬‬
‫‪2.7‬‬ ‫جزئی فالونوئیدها‪ ،‬گزانتون ها و استیلبنز‬ ‫‪83‬‬
‫‪2.8‬‬ ‫تانن‬ ‫‪90‬‬
‫‪2.9‬‬ ‫کینون رنگدانه‬ ‫‪96‬‬

‫معرفی ‪2.1‬‬
‫اصطالح ترکیب فنلی طیف وسیعی از مواد گیاهی را در بر می گیرد که به طور مشترک دارای یک حلقه‬
‫معطر حاوی یک یا چند هیدروکسیل‪ :‬هستند جایگزین ها مواد فنلی معموالً محلول در آب هستند‪ ،‬زیرا‬
‫آنها اغلب در ترکیب با قند به عنوان گلیکوزید رخ می دهد و آنها هستند معموالً در واکوئل سلولی‪:‬‬
‫قرار دارد‪ .‬از جمله ترکیبات فنلی طبیعی‪ :‬پوند‪ ،‬که چندین هزار ساختار آن شناخته شده است‪ ،‬فالونوئیدها‬
‫بزرگترین‪ :‬گروه اما فنل های تک حلقه ای ساده‪ ،‬فنیل پروپانوئیدها را تشکیل‪ :‬می دهند و کینون های‬
‫فنولیک همگی در تعداد قابل توجهی وجود‪ :‬دارند‪ .‬چندین مورد مهم گروه های رنگی از مواد پلیمری‬
‫در گیاهان ‪ -‬لیگنین ها‪ ،‬مالنین ها و تانن ‪ -‬پلی فنولی هستند (شکل ‪ 2.1‬را ببینید) و واحدهای فنلی گاه به‬
‫گاه هستند مواجه شده که در پروتئین ها‪ ،‬آلکالوئیدها‪ :‬و در میان را ترپنوئیدها‪:‬‬
‫در حالی که عملکرد برخی از طبقات ترکیبات فنلی خوب است ایجاد شده (مثالً لیگنین ها به‬
‫عنوان ماده ساختاری دیواره سلولی؛ آنتوسیانین ها به عنوان رنگدانه های گل)‪ ،‬هدف از کالس های‬
‫دیگر هنوز یک است موضوعی از حدس و گمان‪ .‬فالونول ها‪ ،‬برای مثال‪ ،‬به نظر می رسد به بودن‬
‫مهم که در‬
‫و آنها اثرات نامطلوب بر تغذیه حشرات )‪ (Galston, 1969‬تنظیم‪ :‬کنترل رشد در گیاه نخود‬
‫نشان داده اند که ممکن است عوامل مقاومت طبیعی‪ :‬باشند‪ .‬هیچ یک )‪(Isman and Duffey, 1981‬‬
‫‪.‬از این توابع‪ ،‬با این حال‪ ،‬دارد هنوز بوده محکم ایجاد‬