Professional Documents
Culture Documents
دستورکار آز بیوتکنولوژی
دستورکار آز بیوتکنولوژی
دستور العمل
آزمايشگاه بيوتكنولوژي
)ويژه دانشجويان مهندسي شيمي(
-١هيدروليز نشاسته٣....................................................................................................................
-٥توليد بيوگاز١٧............................................................................................................................
2
هيدروليز نشاسته
مﻘدمه
مواد نشاستهاي
تركيبات حاوي نشاستﻪ از بزرگترين منابع توليد اتانول ميباشند .نشاستﻪ يك بيوپليمر است و بﻪ
ﺻورت يك هموپليمر شامل فقط -Dگلوكز است .براي توليد اتانول از نشاستﻪ ضروري است كﻪ اين
زنجيرههاي كربوهيدرات شكستﻪ شده و بﻪ گلوكز تبديل شود .اين نوع خوراك بيشترين استﻔاده را در
آمريكاي شمالي و اروپا دارد .در آمريكا امروزه بزرگترين منبع اوليﻪ اتانول ذرت و پس از آن گندم مي-
باشد .گندم و ذرت از مهمترين منابع نشاستﻪاي هستند كﻪ ميتوانند براي توليد اتانول بﻪ كار روند.
مواد نشاستﻪدار معموﻻ شامل نشاستﻪ ،آب ،پروتئين ،پنتوزان و چربي هستند كﻪ نشاستﻪ و پروتئين
ها بيشترين مقدار را تشكيل مي دهد.
ﺻرفﻪ نظر از منشا ،نشاستﻪ پليمري از واحدهاي شﺶ كربنﻪي گلوكز است كﻪ بواسطﻪي اتصال
پيوندهاي آلﻔا)١و (٤و آلﻔا)١و (٦اين واحدها ،پيوندهاي گلوكوسيديك 1تشكيل ميشود .از آنجايي كﻪ
گروه آلدئيدي موجود در بخﺶ انتهايي نشاستﻪ همواره آزاد ميباشد ،بنابراين نشاستﻪ همواره داراي يك
بخﺶ انتهايي احيا كننده ميباشد .از نظر ساختاري نشاستﻪ يك پليمر همگن نيست و از دو هموپلي
ساكاريد با نامهاي آميلوز و آميلوپكتين با وزن مولكولي باﻻ تشكيل شده است .آميلوز يك پليمر خطي
غير شاخﻪاي از -Dگلوكز است كﻪ بوسيلﻪي باندهاي آلﻔا)١و (٤گليكوسيديك بﻪ هم متصل شدهاند .آميلوز
معموﻻً ٢٥تا ٣٠درﺻد از نشاستﻪ را تشكيل ميدهد .وزن مولكولي آن ٢٥٠٠٠٠است .
آميلوپكتين پليمري با تعداد شاخﻪهاي باﻻ ميباشد كﻪ واحدهاي گلوكز بوسيلﻪي پيوندهاي آلﻔا)١و(٦
گليكوسيديك در مﺤل اتصال شاخﻪ و پيوندهاي آلﻔا)١و (٤بﻪ هم متصل شدهاند .ساختار آميلوپكتين
بصورت مارپيچي است .آميلوپكتين مولكول غالب در اكثر نشاستﻪها بشمار ميرود كﻪ بسيار بزرگتر از
آميلوز است و داراي ماهيت بلوري بوده و در گرانولهاي نشاستﻪ از نظم و ترتيب خاﺻي برخوردار است.
آميلوپكتين حدود ٧٠تا ٧٥درﺻد از وزن نشاستﻪ غﻼت را بﻪ خود اختصاص ميدهد و وزن مولكولي آن
٥٠٠تا ٥٠٠٠٠٠٠٠است.
1
Glucosidic
3
شكل هاي زير ساختار آميلوز و آميلوپكتين را نشان ميدهند:
هرگاه نسبت آميلوز بﻪ آميلوپكتين كم باشد) ١٥درﺻد( نشاستﻪ بﻪ عنوان نشاستﻪ مومي 1شناختﻪ
2
ميشود و هرگاه ١٦تا ٣٥درﺻد باشد نرمال و هنگامي كﻪ آميلوز از ٣٦درﺻد تجاوز كند آميلوز باﻻ
نام ميگيرد .آميلوز و آميلوپكتين بﻪ شكل آزاد در طبيعت وجود ندارند بلكﻪ بعنوان جزئي از تركيبات
نيمﻪ بلورين و جدا از هم يعني گرانولهاي نشاستﻪ مشاهده ميشوند.
آميلوز و آميلوپكتين حدود ٩٩درﺻد از وزن خشك نشاستﻪ را تشكيل ميدهند .چربي فقط در
نشاستﻪي حبوبات وجود دارد و حدود ١/٥درﺻد از كل گرانول است .نشاستﻪي خالص شامل مقدار
كمي پروتئين است.
مواد نشاستﻪاي بيشتر بﻪ ﺻورت دانﻪاي هستند .توليد اتانول از دانﻪها شامل آسياب كردن دانﻪها،
هيدروليز نشاستﻪ بﻪ قندهاي قابل تخمير و در آخر تخمير است .شكل زير خﻼﺻﻪ اي از فرآيند توليد
اتانول از مواد نشاستﻪدار دانﻪاي را نشان مي دهد.
1
Waxy
2
High amylose
4
مخمرها نميتوانند نشاستﻪ را مستقيماً براي توليد اتانول مصرف كنند بنابراين نشاستﻪي دانﻪاي بايد
با استﻔاده از آنزيم بﻪ گلوكز شكستﻪ شود .واكنﺶ بيو شيميايي و فرايند هيدروليز و تخمير نشاستﻪ در
شكل زير نشان داده شده است .الكل در نهايت بوسيلﻪي تقطير استخراج ميشود و آنچﻪ كﻪ باقي مي-
ماند خوراك دامي بﻪ نام 1DDGSاست.
1
Distiller’s Dried Grain and Solubles
5
گلوتن
پروتئينهاي آرد بطور اهم شامل گلوتن) 1در حدود ٨٠درﺻد از كل پروتئين( و پروتئين هاي
مﺤلول در آب )در حدود ٢٠درﺻد از كل پروتئين( ميباشد .پروتئين هاي مﺤلول در آب شامل
2
مقداري آنزيم است .وقتي كﻪ گلوتن با آب مخلوط مي شود بﻪ دو پروتئين شكستﻪ مي شود :گلوتنين
كﻪ پروتئيني با وزن مولكولي باﻻ است و گليادين 3كﻪ پروتئيني با وزن مولكولي پايين است.
وقتي بﻪ آرد گندم آب اضافﻪ مي شود گليادين وگلوتنين بﻪ همراه آب كمپلكسي بﻪ نام گلوتن
تشكيل ميدهند .هر دو قسمت پروتئين از آمينو اسيد گلوتامين و پرولين غني هستند و مقدار آمينو
اسيد پايﻪ در آنها كم است .پروتئين گلوتن كﻪ در الكل مﺤلول است پروﻻمين 4ناميده ميشود و سﻪ
نوع غني از سولﻔور ،فقير از سولﻔور و پروﻻمين با وزن مولكولي باﻻ تقسيم ميشود.
گلوتن با ارزشترين جزء گندم از نظر اقتصادي است و داراي كاربردهاي گوناگوني ميباشد .از
كاربردهاي گلوتن ميتوان در شيريني پزي و بﻪ منظور استﺤكام بيشتر خمير ،ماندگاري بيشتر گازها در
خمير و جذب بيشتر آب و همچنين در ﺻنايع توليد سوسيس كالباس ،خوراك دام و شامپوهاي نرم
كنندهي مو اشاره كرد.
1
Gluten
2
Glutenin
3
Gliadin
4
Prolamin
6
مواد و روش ها
مواد موردنياز :از نشاستﻪ فوق تصﻔيﻪ و آرد گندم در اين آزمايﺶ استﻔاده مي گردد .براي هيدروليز از
آلﻔا-آميﻼز و گلوكوآميﻼز تجاري با نام ليكوزايم 1و دكستروزايم 2كﻪ از شركت نووزايم دانمارك تهيﻪ
شده استﻔاده مي شود.
روش انجام آزمايش هيدروليز آرد گندم و نشاسته
آزمايﺶ شامل هيدروليز در دو مرحلﻪ مﺤلول سازي و قند سازي مي باشد .راكتور انجام آزمايﺶ يك
بشر ١/٥ليتري مي باشد .
oمرحله محلول سازي :مقدار مشخصي نشاستﻪ كﻪ در اختيار هر گروه قرار مي گيرد با آب بﻪ حجم
يك ليتر رسانده شود .سپس بﻪ آن يك گرم CaCl2اضافﻪ شده و آنزيم آلﻔا آميﻼز بﻪ آن اضافﻪ مي
شود .سپس مخلوط در يك حمام آب با دماي ٨٥درجﻪ سانتيگراد قرار گرفتﻪ و پس از هم زدن
مقدار يك ميلي ليتر آنزيم آلﻔا-آميﻼز اضافﻪ شود .بعد از مدت نيم ساعت دماي آنرا بﻪ ٧٠درجﻪ
سانتيگراد برسانيد تا شرايط براي قند سازي آماده شود.
oقندسازي :يك ميلي ليتر آنزيم گلوكوآميﻼز بﻪ راكتور اضافﻪ شود و بﻪ مدت ١/٥ساعت مﺤلول در
دماي ٧٠درجﻪ قرار داده شود .
oاندازه گيري قند توليدي :براي اندازه گيري قند توليدي از روش رفراكتومتري استﻔاده شود.
بدين منظور يك قطره از مﺤلول نهايي فيلتر شده و عدد آن توسط رفراكتومتر خوانده شود.
1
Liquzyme
2
Dextrozyme
7
سواﻻت
موفق باشيد
8
توليد زيسﺖ توده قارچ موكور با استفاده از هيدروليزيﺖ نشاسته
مﻘدمه
قارچها گروه بسيار وسيعي از سلولهاي يوكاريوت هستند و نقﺶ بسيار مهمي در تخريب مواد آلي و
بازگشت آن بﻪ طبيعت دارند .اين ميكرو ارگانيسم ها ار دير باز نقﺶ بسيار مهمي در تامين غذاي انسان
داشتﻪ اند كﻪ از جملﻪ آنها مي توان بﻪ كاربرد قارچها بﻪ ﺻورت مستقيم در غذاي انسان ،استﻔاده از
قارچها در تهيﻪ نان ،استﻔاده از قارچها در تهيﻪ نوشيدني هاي خوراكي و استﻔاده ازآنها در تهيﻪ غذاهايي
نظير سس سويا ،تمپﻪ و توفو اشاره نمود .از سال ١٩٤٥قارچها نقﺶ بسيار مهمي در توليد مﺤصوﻻتي
نظير آنتي بيوتيك ها و آنزيم هاي مختلف مورد استﻔاده در شوينده هاي مختلف داشتﻪ اند .امروزه
قارچها در توليد طيف وسيعي از مﺤصوﻻت بيوتكنولوژيكي بﻪ كار مي روند .قارچهاي خانواده
زايگومايست گروهي از قارچها هستند كﻪ بﻪ واسطﻪ توانايي مصرف قندهاي پنﺞ كربنﻪ ،توانايي توليد
اتانول با بازده باﻻ و نيز داشتن زيست توده با ارزش از اهميت ويژه اي برخوردارند .قارچ مورد استﻔاده در
اين آزمايﺶ قارچ موكور اينديكوس است كﻪ جزو ميكروارگانيسم هاي GRASبﻪ شمار مي آيد .اين
قارچ توانايي رشد بروي طيف وسيعي از مواد از جملﻪ هيدروليزيت موارد ليگنوسلولزي را دارد .توانايي
توليد اتانول اين ميكروارگانيسم بﻪ خوبي با مخمر نان قابل مقايسﻪ است .بيومس اين قارچ منبع مغذي
با ارزشي است كﻪ عمدتا حاوي پروتئين و برخي اسيدهاي چرب مورد نياز موجودات زنده مي باشد.
هدف از اين آزمايﺶ كشت آزمايشگاهي قارچ موكور اينديكوس بر روي هيدروليزيت نشاستﻪ است.
9
مواد و روش ها
٣٠ميلي ليتر مﺤلولي شامل فسﻔات پتاسيم ) ١٧/٥٠گرم بر ليتر( ،سولﻔات آمونيوم ) ٣٧/٥٠گرم بر
ليتر( ،سولﻔات منيزيم ) ٣/٧٥گرم بر ليتر( و عصاره مخمر ) ٢٥گرم بر ليتر( تهيﻪ نموده و آن را بﻪ مدت
٢٠دقيقﻪ در اتوكﻼو استريل كنيد .مﺤلول حاﺻل را بﻪ ١٢٠ميلي ليتر از هيدروليزيت استريل شده
تهيﻪ شده در آزمايﺶ قبل اضافﻪ نماييد .غلظت قند را در اين مﺤلول اندازه گيري نماييد .
٥ميلي ليتر آب مقطر استريل بﻪ پليت قارچ موكور اضافﻪ نماييد و با لوپ روي سطح قارچ بكشيد تا
سوسپانسيون اسپور تهيﻪ شود .يك ميلي ليتر از سوسپانسيون حاﺻل را بﻪ مﺤيط كشت اضافﻪ كنيد و
از آن بﻼفاﺻلﻪ نمونﻪ گيري كنيد .درب ارلن كشت را با در پوش پنبﻪ اي ببنديد و آن را در انكوباتور با
دماي ٣٢درجﻪ سانتيگراد قرار دهيد تا رشد كند .
غلظت قند موجود در نمونﻪ مربوط بﻪ زمان ﺻﻔر را اندازه گيري كنيد .
از نمونﻪ مربوط بﻪ زمان ﺻﻔر يك عكس ميكروسكوپي تهيﻪ كنيد .
پس از ٩٠دقيقﻪ از شروع آزمايﺶ مجددا غلظت قند را اندازه گيري كرده و از قارچ در حال رشد
عكس تهيﻪ كنيد .
كشت قارچ را بﻪ مدت ٧٢ساعت در انكوباتور ادامﻪ دهيد و پس از آن ارلن را بﻪ يخچال منتقل
كنيد .
درجلسﻪ آينده غلظت نهايي گلوكز را اندازه گيري كنيد .از قارچ توليد شده عكسبرداري كنيد .
زيست توده قارچي حاﺻل را در آون خشك نماييد و وزن خشك آن را اندازه گيري كنيد .
10
سواﻻت
-١تغييرات در شكل ميكروسكوپي سلولهاي قارچ در حين آزمايﺶ را گزارش كرده و مشاهدات خود را
تﺤليل كنيد.
-٢انواع مورفولوژي و عوامل موثر بر مورفولوژي قارچ موكور را بنويسيد.
-٣بازده زيست توده توليد شده بر حسب گلوكز مصرفي را مﺤاسبﻪ كنيد.
-٤در ﺻورتي كﻪ زيست توده حاﺻل را بتوان مستقيما بﻪ عنوان غذايي ماهي مورد استﻔاده قرار داد ،از
هر كيلوگرم نان خشك )با ٧٠٪وزني نشاستﻪ( چﻪ مقدار غذاي ماهي توليد مي شود؟ مﺤاسبات
خود را براي يك كيلوگرم سلولز بدست آمده از چوب تكرار كنيد .در هر دو مورد بازده فرآيند
هيدروليز را ٩٨درﺻد فرض نماييد.
-٥بﻪ نظر شما كشت اين قارچها در مقياس بزرگ با چﻪ مشكﻼتي مي تواند همراه باشد؟ چگونﻪ مي
توان اين مشكﻼت را بر طرف كرد؟
-٦ابعاد بيوراكتور توليد قارچ موكور ،با استﻔاده از ٣٠تن هيدروليزيت نشاستﻪ در روز را مﺤاسبﻪ
كنيد و اين بيوراكتور را بﻪ همراه تجهيزات جانبي آن رسم نماييد.
موفق باشيد
11
توليد بيوديزل
مﻘدمه
در پي افزايﺶ تقاضاي انرژي و مشكﻼت آلودگي زيست مﺤيطي ناشي از استﻔاده گسترده سوختهاي
فسيلي و همچنين با توجﻪ بﻪ كاهﺶ ذخاير نﻔتي و نياز روز افزون جهان بﻪ منابع جديد انرژي بﻪ ويژه
در بخﺶ حمل و نقل ،ﻻزم است بﻪ دنبال توسعﻪ يك سوخت جايگزين و منبع انرژي تجديد پذير بود.
همچنين بﻪ دليل پيامدهاي نامطلوب زيست مﺤيطي گازهاي حاﺻل از احتراق سوختهاي فسيلي،
سوخت بيوديزل بﻪ عنوان يك سوخت جايگزين از جايگاه ويژه اي برخوردار شده است .بيوديزل بﻪ
سوختي گﻔتﻪ مي شود كﻪ از مواد زيستي برگشت پذير بﻪ دست آيد و بتوان آن را بﻪ جاي گازوئيل بﻪ
كار برد .بيشتر بيوديزل ها منوآلكاليداسترهاي بلند زنجير هستند كﻪ از واكنﺶ شيميايي روغن با الكل
بﻪ دست مي آيند.
بيوديزل حاوي مونوالكيل استر اسيدهاي چرب مشتق شده از روغنهاي گياهان و يا چربي حيوانات
مي باشد .بﻪ عبارت ساده تر زمانيكﻪ يك روغن گياهي و يا چربي حيواني با الكل واكنﺶ مي دهد،
مونوالكيل اسيد چرب يا همان بيو ديزل توليد مي شود .معموﻻ اين واكنﺶ در حضور يك كاتاليست
قليايي همچون هيدروكسيد سديم يا پتاسيم انجام مي شود .گليسرول نيز بعنوان مﺤصول جانبي توليد
مي گردد.
هدف از اين آزمايﺶ توليد بيوديزل از روغن خوراكي است.
12
مواد و روش ها
مواد مورد نياز :روغن خوراكي ظايعاتي ،متانول ،هيدروكسيد پتاسيم ،آب مقطر
وسايل مورد نياز :بشر ٢٥٠ميلي ليتري ،ارلن ٥٠٠ميلي ليتري ،لولﻪ سانتريﻔوژ ،استوانﻪ مدرج ١٠٠
ميلي ليتري ،چراغ الكلي ،سﻪ پايﻪ ،مثلث نسوز ،كبريت ،پيپت ٥٠ميلي ليتري ،پوآر ،دما سنﺞ
دستگاههاي مورد نياز :استيرر ،سانتريﻔوژ ،ترازو ،حمام آب
روش انجام آزمايش :
oمرحله اول :توليد بيوديزل
٢٥ميلي ليتر روغن خوراكي كﻪ در دماي ٦٠درجﻪ سانتيگراد قرار دارد را در يك ارلن ١٥٠ميلي
ليتري ريختﻪ و آن را روي يك مگنت استيرر قرار دهيد ٠/٢٥ .گرم هيدروكسيد سديم را در ٢٠ميلي
ليتر متانول حل كنيد .مﺤلول متوكسيد حاﺻل را بﻪ آرامي و در حين هم زدن روغن ،بﻪ آن اضافﻪ كنيد.
در ادامﻪ مخلوط حاﺻل را بﻪ مدت يك ساعت در يك حمام آب شيكر دار در دماي ٦٠درجﻪ سانتيگراد
قرار دهيد تا واكنﺶ توليد بيوديزل انجام شود .
در ادامﻪ مخلوط حاﺻل را بﻪ مدت ١٠دقيقﻪ با دور ٤٠٠٠rpmسانتريﻔوژ كنيد .پس از پايان اين
مرحلﻪ يك مخلوط دو فازي ايجاد شده است .فاز رويي فاز غني از بيوديزل و فاز زيري فاز غني از
گليسرين است .بﻪ دقت اين دو فاز را از هم جدا كرده و حجم آنها را اندازه گيري و ثبت نماييد.
وزن چراغ الكلي خالي را اندازه گيري كرده و ثبت نماييد .سپس ٢٠ميلي ليتر بيوديزل توليدي را
داخل چراغ ريختﻪ و مجددا وزن آن را ثبت نماييد .در ادامﻪ شعلﻪ را روشن نموده و آن را زير يك بشر
كﻪ مﺤتوي ١٠٠ميلي ليتر آب مقطر در دماي مﺤيط است قرار دهيد .زماني كﻪ دماي آب ١٠درجﻪ
سانتيگراد افزايﺶ پيدا كرد شعلﻪ را خاموش كرده و پس از سرد شدن چراغ آن را مجددا وزن نماييد .بﻪ
كمك داده هاي حاﺻل از آزمايﺶ حرارت حاﺻل از سوختن بيوديزل را مﺤاسبﻪ نماييد .
همين آزمايﺶ را بروي گازوئيل معمولي انجام دهيد و نتايﺞ را با هم مقايسﻪ كنيد .
13
سواﻻت
-١مراحل واكنﺶ ترانس استريﻔيكاسيون تري گليسريد ها را بنويسيد.
-٢واكنﺶ هاي جانبي ترانس استريﻔيكاسيون را بنويسيد .هر كدام در چﻪ ﺻورت رخ مي دهد و چﻪ
مشكﻼتي بﻪ همراه دارد؟
-٣چﻪ ناخالصيهايي در مﺤصوﻻت توليدي فرايند توليد بيوديزل وجود دارد؟
-٤راه جلوگيري از توليد ﺻابون در فرايند توليد بيوديزل چيست؟
-٥ميزان توليد بيوديزل و گليسرول از نظر تئوري چقدر است؟ راندمان توليد بيوديزل در آزمايﺶ شما
چقدر بوده است؟
-٦مقدار متانول اضافي مورد استﻔاده در آزمايﺶ شما چقدر بوده است؟
-٥ارزش حرارتي بيوديزل توليدي چقدر است؟
-٦بيوديزل توليدي در مقايسﻪ با گازوئيل چﻪ مزايا و معايبي دارد؟
-٧منابع خطا در مﺤاسبات را بيان كنيد.
-٨منابع اوليﻪ مناسب براي توليد بيوديزل را ذكر كنيد .
-٩واحد بيوديزلي با اتمامي تجهيزات اﺻلي و جانبي براي توليد ٤٠تن در روز بيوديزل از خوراك مورد
استﻔاده در اين آزمايﺶ طراحي كنيد .يك PFDكامل از اين واحد ارائﻪ كنيد؟
موفق باشيد
14
توليد بيواتانول
مﻘدمه
اتانول مهمترين مﺤصول فرآيندهاي تخميري از لﺤاظ ميزان توليد است .ميكروارگانيسم ﺻنعتي
توليد كننده اتانول مخمر نان است .اين ميكروارگانيسم با مصرف قندهاي شﺶ كربنﻪ طبق واكنﺶ زير
اتانول توليد مي كند:
𝐭𝐚𝐞𝐇 𝐂𝟔 𝐇𝟏𝟐 𝐎𝟔 → 𝟐 𝐂𝟐 𝐇𝟓 𝐎𝐇 + 𝟐𝐂𝐎𝟐 +
تخمير در غياب اكسيژن ميزان توليد اتانول را بهبود مي دهد .بﻪ منظور ايجاد شرايط بيهوازي مي
توان فرآيند تخمير را تﺤت جو گاز بي اثري نظير نيتروژن انجام داد .استﻔاده از دانسيتﻪ باﻻي سلولي
نيز در ابتداي فرآيند تخمير سبب مي شود تا اكسيژن مﺤلول در مﺤيط كشت بﻪ سرعت مصرف شده و
شرايط بيهوازي ايجاد گردد .از سوي ديگر سلولهاي مخمر در غلظت هاي باﻻ توانايي بيشتري را در
مقابلﻪ با ميكروارگانيسم هاي رقيب دارند و بﻪ اين ترتيب احتمال آلودگي در كشت سلولي با دانسيتﻪ
باﻻ كمتر از حالت عادي است.
اين آزمايﺶ بﻪ توليد اتانول با استﻔاده ازدانسيتﻪ باﻻي سلولهاي مخمر نان مي پردازد.
١٠٠ميلي ليتر از مﺤلولي شامل ١٠٠گرم بر ليتر گلوكز و ٥گرم بر ليتر عصاره مخمر تهيﻪ كنيد و
آن را تا دماي ٣٠درجﻪ سانتيگراد گرم نماييد .مﺤلول مذكور را داخل يك بطري پﻼستيكي ريختﻪ و بﻪ
آن ٥گرم مخمر نان اضافﻪ نماييد .مخلوط حاﺻل را هم زده و يك بادكنك را در دهانﻪ آن قرار دهيد.
ظرف آزمايﺶ را در حمام آب ٣٠درجﻪ سانتيگراد قرار دهيد .بﻪ مدت دو ساعت و هر ١٥دقيقﻪ يك بار
قطر بادكنك را اندازه گيري نماييد .غلظت گلوكز و همچنين ميزان گاز توليدي را در پايان دو ساعت
اندازه گيري و گزارش نماييد.
15
سواﻻت
-١مشاهدات خود را در حين انجام اين آزمايﺶ بيان كرده و آنها را تﺤليل كنيد.
-٢نمودار تغيرات حجم بادكنك را بر حسب زمان رسم نماييد و راجع بﻪ روند تغييرات بﺤث كنيد.
-٣بﻪ كمك نتايﺞ حاﺻل از آزمايﺶ غلظت اتانول را در زمانهاي مختلف مﺤاسبﻪ كنيد .راجع بﻪ فرضيات
مورد نياز در مﺤاسبﻪ غلظت اتانول توضيح دهيد.
-٤بﻪ كمك داده هاي آزمايﺶ رابطﻪ اي براي تعيين سرعت توليد اتانول بر حسب زمان بدست آوريد.
-٥با توجﻪ بﻪ مﺤاسبات شما بازده توليد اتانول در اين آزمايﺶ چند درﺻد مقدار تئوري آن است؟
-٦بﻪ نظر شما انجام فرآيند تخمير با دانسيتﻪ باﻻي سلولي در مقياس ﺻنعتي چﻪ مشكﻼتي را بﻪ همراه
دارد؟ پيشنهاد شما براي رفع اين مشكﻼت چيست؟
-٧بر مبناي داده هاي بدست آمده حجم فرمانتوري ﺻنعتي براي توليد ١٥متر مكعب در روز اتانول را
بدست آوريد.
-٨خوراك فرايند توليد ﺻنعتي بيواتانول بﻪ چند دستﻪ تقسيم مي شود؟ تﺤقيق كنيد.
-٩خﻼﺻﻪ اي از ساختار و عملكرد روش آناليز HPLCبيان كنيد.
موفق باشيد
16
توليد بيوگاز
مﻘدمه
حدود ٤٠٠سال پيﺶ ،با انقﻼب ﺻنعتي در اروپا و فراگير شدن آن در سراسر جهان ،انرژي مصرفي
جهان از انرژيهاي تجديدپذيري همچون خورشيد و بيوانرژي ،بﻪ انرژيهاي فسيلي غيرقابل تجديد
تغيير يافت .اگر چﻪ مصرف گسترده انرژي حاﺻل از سوختهاي فسيلي ،رشد سريع اقتصادي جوامع
پيشرفتﻪ ﺻنعتي را بﻪ همراه داشتﻪ ،اما بﻪ واسطﻪ انتشار آﻻيندههاي حاﺻل از واكنﺶ احتراق و افزايﺶ
دي اكسيد كربن در اتمسﻔر و پيامدهاي ناشي از آن ،جهان را با تغييرات برگشت ناپذيري روبرو ساختﻪ
است كﻪ افزايﺶ دماي زمين ،تغييرات آب و هوايي ،باﻻ آمدن سطح آب درياها و در نهايت تشديد
منازعات بين المللي از جملﻪ اين پيامدها مﺤسوب ميشوند .عﻼوه بر بروز مشكﻼت اشاره شده ،بﺤران
هاي نﻔتي دهﻪ ١٩٧٠ميﻼدي موجب گرديد استﻔاده از انرژيهاي تجديد شونده از رونقي دوباره
برخوردار گردند.
با توجﻪ بﻪ مﺤدود بودن منابع انرژي و مشكﻼت زيست مﺤيطي ناشي از سوختهاي فسيلي ،استﻔاده
از منابع انرژي زيستي و تجديدپذيردر دنيا توسعﻪ پيدا كرده است .در اين ميان ،بشر در دهﻪهاي اخير
در جستجوي راه حلهاي علمي بر مبناي تكنولوژي پاك برآمده ،با هوشياري از فرايند هاي پيچيده
طبيعي الهام گرفتﻪ ،و فرآيندهاي بيولوژيكي را بﻪ كمك تكنولوژي ماشيني در سطح ﺻنعتي گسترش
داده تا ﺻنعتي مشابﻪ طبيعت پاك پديد آيد .يكي از اين فرآيندهاي بيولوژيكي ،توليد گاز از زيست توده
است .كاربرد هضم بيهوازي براي توليد انرژي ،تصﻔيﻪ پسابهاي شهري ،كشاورزي و ﺻنعتي از زمان
هاي دور در دنيا مورد توجﻪ بوده است.
حﻔظ مﺤيط زيست ،افزايﺶ بيرويﻪ حجم پسابهاي شهري و ﺻنعتي ،استﻔاده ﺻﺤيح از منابع
انرژي موجود ،مﺤدويت منابع انرژي فسيلي ،مشكل آﻻيندههاي حاﺻل از مصرف انرژي فسيلي و
باﻻخره نياز حياتي بشر بﻪ استﻔاده از انرژيهاي تجديدپذير از جملﻪ مهمترين عوامل در روند توسعﻪ
فرآيند هضم بيهوازي در دنيا مﺤسوب ميشوند .هضم بيهوازي نهايتاً بﻪ توليد متان و دياكسيدكربن
بﻪ عنوان بيوگاز منجر ميشود .اگر چﻪ تاكنون مطالعات زيادي بﻪ منظور درك هر چﻪ بهتر مكانيسم
فرآيند هضم بيهوازي انجام شده است ،اما هنوز قواعد سينتيكي فرآيند و اثرات باكتريهاي مختلف بر
عملكرد فرآيند هضم بيهوازي بﻪ خوبي شناختﻪ شده نيست .اين در حالي است كﻪ كاربرد عملي و
بهينﻪ فرآيند بخصوص بﻪ منظور توليد انرژي و حذف آﻻيندهها نيازمند درك كاملتر اين قواعد و اثرات
17
است.
تﺮكيﺐ درصد اجزاي موجود در بيوگاز
بيوگاز توليدي در مرحلﻪ هضم بيهوازي مخلوطي از سﻪ تركيب عمده شامل ،متان ،دي اكسيدكربن
و سولﻔيد هيدروژن است .گازهاي ديگري بﻪ ﺻورت خيلي جزيي در بيوگاز موجود بوده كﻪ در جدول
زير آورده شدهاند.
جدول -١تركيب درصد اجزاء موجود در بيوگاز
ارزش حرارتي گاز زيستي بيشتر مربوط بﻪ گاز متان است كﻪ سوختن هر متر مكعب آن بدون ايجاد
بو و دود قادر بﻪ توليد ١/٢٥كيلو وات نيروي برق ميباشد .دركل انرژي حرارتي يك متر مكعب گاز
زيستي معادل ٠/٤كيلوگرم سوخت ديزل ٠/٦٦،كيلوگرم نﻔت و يا ٠/٨كيلوگرم زغال سنگ است.
مخلوط ميكروبي
مخلوط ميكروبي از بخﺶ لجن بيهوازي تصﻔيﻪخانﻪ آب و فاضﻼب شمال اﺻﻔهان تهيﻪ شده است.
18
شرح روش اندازه گيري و آناليز بيوگاز توليد شده
آناليز بيوگاز توليدي و تعيين درﺻد متان و دياكسيدكربن با استﻔاده از يك دستگاه گاز
كروماتوگراف مجهز بﻪ آشكارساز TCDبا ستون Porapack Qانجام مي گيرد .دستگاه مجهز بﻪ نرم
افزار peak ABCاست كﻪ جهت تجزيﻪ و تﺤليل نمودارهاي حاﺻل از تزريق نمونﻪها از آن استﻔاده مي
شود .در شكل زير دستگاه GCمشاهده ميشود .از هليم بﻪ عنوان گاز حامل با دبي ٢٠ميلي ليتر بر
دقيقﻪ استﻔاده شده و دماي ستون ،دماي تزريق كننده و دماي شناساگر بﻪ ترتيب در ٩٠ ،٥٠و ١٤٠
درجﻪ سانتيگراد تنظيم مي شود.
دستگاه GC
در ابتدا peakهاي گازهاي خالص متان ،دياكسيدكربن ،نيتروژن و هواي مﺤيط تﺤت شرايط
مشخص و دبي مشخص گاز حامل دستگاه GCتعيين مي گردد .همچنين زمان آشكار شدن گاز توسط
شناساگر تعيين مي گردد .شكل زير پيكهاي حاﺻل از تزريق گازي حاوي نيتروژن ،متان ودي اكسيد
كربن بﻪ دستگاه GCرا نشان ميدهد.
mV
640 N2
'0.322
560
480
400
320
CH4
240
'0.509
160 CO2
'0.969
80
0
0.2 0.4 0.6 0.8 1 1.2 1.4 1.6 1.8 2 2.2 min
پيك هاي حاصل از تزريق گازي حاوي نيتروژن ،متان ودي اكسيد كربن به دستگاهGC
19
توليد بيواز در راكتور ناپيوسته
در اين آزمايﺶ از بطريهاي شيشﻪاي بﻪ حجم ١١٨ميليليتر بﻪ عنوان راكتور ناپيوستﻪ استﻔاده مي
شود .درون بطريها مقدار ٢٠ميليليتر از مخلوط ميكروبي و ٥ميليليتر آب بﻪ همراه ٠/٢٥گرم
)برمبناي وزن خشك( از سوبستراي مشخص شده بريزيد و درب آن توسط درپوشهاي ﻻستيكي و
كﻼهك آلومينيومي مﺤكم كنيد .سپس بﻪ مدت دو دقيقﻪ گاز نيتروژن بﻪ درون اين بطريها تزريق و
توسط سرنگي ديگر هواي داخل آن تخليﻪ كنيد تا سيستم بيهوازي ايجاد شود .اين سيستم ناپيوستﻪ بﻪ
روش هانسل معروف بوده و در آزمايشات بسياري از مﺤققين بﻪ عنوان راكتور ناپيوستﻪ مورد استﻔاده
قرار گرفتﻪ است .پس از بي هوازي كردن نمونﻪ ها را در آون در دماي ٣٥درجﻪ سانتيگراد قرار دهيد.
20
ب الف
د ج
و ه
مراحل راه اندازي راكتور ها ،الف( افزودن مخلوط ميكروبي ،ب( تزريق آب و ريختن سوبسترا ج( كپ زدن
راكتور ها ،د( بيهوازي كردن ،ه( تخليه ي گاز نيتروژن اضافي و رساندن فشار راكتور ها به فشار محيط ،و(
قرار دادن راكتور ها درون آون
21
آناليز مخلوط گازي حاصل از دستگاهGC
براي آناليز مخلوط گازي از دستگاه GCاستﻔاده مي شود .توسط سرنگ ٢٥٠ميكروليتري قﻔل
كنندهي فشار حجمهاي مختلف از گازهاي خالص تهيﻪ شده تﺤت شرايط مشخص بﻪ دستگاه GC
تزريق شده و پيكهاي حاﺻل بﻪ عنوان استاندارد ذخيره مي شود .اين كار براي هر نوع گاز سﻪ بار تكرار
شده و پس از سﻪ بار تزريق يك مقدار ميانگين براي مساحت زير پيك و حجم گاز تزريق شده بدست
مي آيد .با برازش خطي اين دادهها توسط نرمافزار Excelرابطﻪاي براي مﺤاسبﻪي حجم گاز متان و
دياكسيد كربن نمونﻪهاي مجهول حاﺻل مي شود.
CH4 standard
300
y = 0.000171x
250 R² = 0.998846
حجم گاز -ميکروليتر
200
150
100
50
0
0 500000 1000000 1500000 2000000
سطح زير پيک
برازش خطي استاندارد حجم گاز متان بر حسب سطح زير پيك
22
سواﻻت
موفق باشيد
23