Методи виділення чистих

культур мікроорганізмів
Виконала студентка 2 курсу 7 групи Войтова Вероніка
ДЕЯКІ МЕТОДИ ВИДІЛЕННЯ ЧИСТИХ
КУЛЬТУР МІКРООРГАНІЗМІВ

 Чистою культурою називають таку культуру, що містить мікроорганізми одного виду.

Виділення чистих культур бактерій – обов'язковий етап будь-якого бактеріологічного
дослідження. Чиста культура необхідна для вивчення морфологічних, культуральних,
біохімічних і антигенних властивостей, за сукупністю яких визначається видова
приналежність досліджуваного мікроорганізму.
 Метод Коха («пластинчасті розведення») – послідовне розведення досліджуваного
матеріалу в розплавленому агарі (температура 48-50°С), з наступним розливом у чашки
Петрі, де агар застигає. Висіви роблять, як правило, із 3-4 останніх розведень, де бактерій
стає мало і, надалі, при зростанні на чашках Петрі з'являються ізольовані колонії, що
утворюються з однієї вихідної материнської клітини. Із ізольованих колоній у глибині агару
отримують чисту культуру бактерій пересіванням на свіжі середовища.
Посів виснажливим штрихом

Область застосування: для виділення чистих

культур із матеріалів, що містять велику
змішану мікрофлору.
Матеріал відбирають петлею і на поверхні
щільного середовища проводять штрихи у
такому порядку, як зазначено на малюнку.
Перед кожним новим нанесенням петлю
стерилізують у полум'ї пальника.
Посів виснажливим штрихом
Досліджуваний матеріал розводять у пробірці стерильним
фізіологічним розчином або бульйоном. Одну краплю матеріалу
вносять у першу чашку та стерильним скляним шпателем розподіляють
по поверхні середовища. Потім цим же шпателем (не пропалюючи його
в полум'ї пальника) роблять такий же посів у другій та третій чашках. З
кожним посівом бактерій на шпателі залишається все менше і менше, і
при посіві на третю чашку бактерії розподілятимуться по поверхні
живильного середовища окремо один від одного.
Метод Шукевича

 Застосовується для отримання чистої

культури протею та інших мікроорганізмів,
що мають «повзучий» зростання. Посів
досліджуваного матеріалу виробляють
конденсаційну воду біля основи скошеного
агару. Рухливі мікроби (протей) здатні
підніматися вгору по скошеному агару,
нерухомі форми залишаються рости внизу на
місці посіву. Пересіваючи верхні краї
культури, можна отримати чисту культуру
Етапи виділення чистих культур
мікроорганізмів

 В перший день (1 етап дослідження) в стерильну посуд (пробірка, колба, флакон)

забирають патологічний матеріал. Вивчають його зовнішній вигляд, консистенцію, колір та
інші ознаки, готують мазок, фарбують та досліджують під мікроскопом. У деяких випадках
(гостра гонорея, чума) на цьому етапі можна поставити попередній діагноз, а крім того,
підібрати середовища, на які засіватиметься матеріал. Засів проводять бактеріологічною
петлею (застосовується найчастіше), за допомогою шпателя методом Дрігальського, ватно-
марлевим тампоном. Чашки закривають, перевертають догори дном, підписують
спеціальним олівцем і ставлять у термостат за оптимальної температури (37 °С) на 18-24
год. Мета етапу – отримати ізольовані колонії мікроорганізмів.
 Зростання на середовищі Ендо Сальмонели і шигели на середовищі Ендо утворюють безбарвні
колонії, кишкова паличка та інші мікроорганізми, що розкладають лактозу — малиново-червоні
колонії з металевим блиском або без нього.
 Тест на каталазу

 Каталаза - фермент, який каталізує

розкладання токсичного пероксиду
водню, що утворюється в процесі
біологічного окислення, на воду і
молекулярний кисень.
 У пробірку вносять 4-5 крапель 3%
розчину перекису водню. Дерев'яною
паличкою (зубочисткою) знімають з агару
колонію та опускають у реактив. При
позитивному результаті з'являться
бульбашки газу.
 Використані джерела

 https://studfile.net/preview/5599759/page:23/
 https://sinref.ru/000_uchebniki/05599_vinodelie/020_mikrobiologia_vinodel/064.htm
 https://virus-infekciya.ru/voprosy/pitatelnye-sredy-dlya-kishechnyh-infekcij.html
 https://www.syl.ru/article/417538/sreda-endo-sostav-i-prigotovlenie-pitatelnoy-sredyi