Hoa Phan Tich Co Van p9 (Uvvis HPT) (Cuuduongthancong - Com)

PHỔ TỬ NGOẠI –
om
KHẢ KIẾN
.c
ng
UV–VIS
co
(PH K CH TH CH
an
th
ELECTRON)
o ng
du
u
cu
CuuDuongThanCong.com https://fb.com/tailieudientucntt
CHƢƠNG 9
PHỔ UV-VIS (PHỔ KÍCH THÍCH ELECTRON)
om
.c
9.1 Sự chuyển mức NL khi kích thích electron
ng
9.2 Các kiểu chuyển mức electron
co
9.3 Phân biệt các kiểu chuyển mức electron
an
9.4 Sự hấp thu bức xạ UV-VIS & màu sắc của vật
th
chất
ng
9.5 Sự hấp thu bức xạ UV-VIS của vật chất
o
9.6 Ứng dụng

du
9.7 Kỹ thuật thực nghiệm

u
cu
CHƢƠNG 9
om
9.1 Sự chuyển mức NL khi kích
.c
thích electron
ng
co
Khi phân tử hấp thu bức xạ UV-VIS, các electron
an
th
hóa trị bị kích thích và chuyển từ Eđt (0) → Eđt (*)
ng
o
Phổ thu được gọi là phổ tử ngoại – khả kiến UV-

du
VIS (Ultraviolet and Visible Spectra) hoặc được

u
cu
gọi là phổ kích thích electron
Sự chuyển mức NL khi kích thích e
om
Sự chuyển TT electron xảy ra rất nhanh (10–15–
.c
10–16 s) so với chu kỳ dao động của hạt nhân (10–12
ng
– 10–13 s)
co
an
Trong khoảng thời gian kích thích electron, hạt
th
nhân được xem như đứng yên (nguyên lý Frank
ng
– Condon)
o
du
u
Khi có sự thay đổi TT năng lượng, sự chuyển dời

cu
được đặc trưng bằng mũi tên thẳng đứng nối liền
hai TT
Sự chuyển mức NL khi kích thích e
om
.c
II
ng
co
ν' =
0 I
an
th
ng
ν=
0
o
du
u
cu
a) Giản đồ NL của phân b) Phổ hấp thu tƣơng

tử hai nguyên tử ứng
CHƢƠNG 9
om
9.2 Các kiểu chuyển mức electron
.c
ng
– Trạng thái NL của electron trong phân tử
co
– Chuyển mức N →V
an
– Chuyển mức N →Q
– Chuyển mức N →R th
ng
– Chuyển mức d-d & chuyển mức kèm chuyển
o
du
điện tích
u
cu
TRẠNG THÁI NĂNG LƢỢNG CỦA
ELECTRON TRONG PHÂN TỬ
om
.c
σ*
ng
co
π*
n
an
th
ng π
σ
o
du
u
cu
CHUYỂN MỨC N →V
Sự chuyển electron từ TT liên kết lên TT
om
phản liên kết, gồm:
.c
- Chuyển mức σ → σ * (vùng UV xa)
ng
- Chuyển mức π→π* (vùng UV gần hoặc
co
an
vùng VIS)
th
ng
N →V
o
du
u
cu
CHUYỂN MỨC N →Q
Sự chuyển electron từ TT không liên kết n
om
lên TT phản liên kết, gồm:
.c
- Chuyển mức n → σ * (vùng UV)
ng
- Chuyển mức n → π* (vùng UV gần hoặc
co
an
vùng VIS)
th
ng
N →Q
o
du
u
cu
CHUYỂN MỨC N →R
om
.c
Sự chuyển electron từ TT cơ bản lên TT
ng
kích thích có NL rất cao theo hướng ion
co
hóa phân tử
an
th
ng
Phổ thu được ở vùng UV xa và thường
o
được dùng để xác định NL ion hóa phân tử

du
u
cu
CHUYỂN MỨC KÈM SỰ CHUYỂN ĐIỆN
TÍCH & CHUYỂN MỨC d-d
om
Sự chuyển mức do sự chuyển dịch electron giữa
các orbital phân tử định vị ở các vị trí khác nhau
.c
ng
Vân hấp thu mạnh
co
Chuyển mức
(ε=104 trở lên) vùng
an
kèm theo sự
UV hoặc VIS (ở hợp
th
chuyển điện tích
chất vô cơ và phức chất)
o ng
Sự chuyển electron từ phối tử L
du
vào các orbital trống của các ion

u
Chuyển mức
cu
trung tâm làm xuất hiện các vân

d–d hấp thu mạnh ở vùng UV (phức
chất không màu của một số
kim loại chuyển tiếp)
CHUYỂN MỨC d-d & THUYẾT
TRƢỜNG PHỐI TỬ
om
Phổ hấp thu electron và màu sắc của các phức kim
.c
loại chuyển tiếp còn được giải thích bằng thuyết
ng
trường tinh thể và thuyết trường phối tử
co
an
th
o ng
du
u
Tiết diện biên của các orbital d

cu
om
.c
ng
co
Tiết diện biên của các orbital d
an
th
Ở TT tự do, 5 orbital d của ion kim loại chuyển tiếp
ng
Mn+ (gồm các đám mây điện tử phân bố không theo
o
du
trục dxy, dxz và dyz và phân bố theo trục dz2 ,

u
dx2-y2 ) đều có mức năng lượng giống nhau (nên

cu
dd chứa Mn+ thường không màu)
om
Khi kết hợp với phối tử thành các phức có cấu trúc
.c
lập thể khác nhau, 5 orbital d bị tách ra thành 2
ng
nhóm có NL khác nhau:
co
dZ2 d X2 Y2
an
th
o ng
dXY dyz dxz
du
Ion tự do ion phức, trƣờng bát diện

u
cu
Sự chuyển e giữa các mức NL d bị tách ra bởi trường

phối tử (chuyển mức d – d) làm cho các phức kim loại
chuyển tiếp có khả năng hấp thu yếu bức xạ VIS
(ε khoảng 0,1 đến 100)
om
Độ mạnh của trƣờng phối tử tăng dần (∆E tăng
.c
dần) theo thứ tự:
ng
co
I–<Br–<Cl–<F –<OH –<CrO4 2– ≈ H2O < SCN– < NH3
an
< Ethylendiamine <NO3– <CN –
th
ng
Hiệu năng lƣợng ∆E trong chuyển mức d–d giữa
o
du
mức cao và mức thấp còn phụ thuộc vào độ bền

vững của liên kết σ giữa kim loại và phối tử:
u
cu
Mn 2+<Ni 2+<Co 2+<Fe 2+<V 2+<Fe3+ <Cr3+ <V3+ <Co3+ <Mn 4+
<Mo 3+ <Rh 3+ <Pd 4+ <Ir 3+ <Re 4+ <Pt4+
CHƢƠNG 9
om
9.3 Phân biệt các kiểu chuyển
.c
ng
mức electron
co
an
– Một số thuật ngữ
– Chuyển mức n → π* th
ng
– Chuyển mức π → π*
o
du
– Chuyển mức kèm chuyển điện tích

u
cu
– Chuyển mức d-d
MỘT SỐ THUẬT NGỮ
Nhóm nguyên tử chứa electron
om
Nhóm mang màu lãnh trách nhiệm hấp thu bức
.c
(chromophore) xạ : –N=O, –NO2–, –N=N–,
ng
>C=O– , >C=C<…
co
an
Có ít nhất 1 cặp electron n tạo
th
liên hợp với liên kết π của
Nhóm trợ màu
ng
nhóm mang màu hoặc có khả
(auxochrome)
o
năng tương tác với electron π
du
làm giảm mức NL của π*

u
cu
Nhóm trợ màu (SH, NH2, OH…) không hấp thu

trong vùng UV nhưng gây hiệu ứng trường sắc trên
nhóm mang màu làm các chất này từ không màu
thành có màu
MỘT SỐ THUẬT NGỮ
Hiệu ứng
om
Kết quả
.c
Trƣờng sắc Gây chuyển dịch đỏ
(red shift): làm tăng
ng
(bathochromic effect)
λCĐ
co
an
Cận sắc Gây chuyển dịch xanh
th
(hypsochromic effect) (blue shift): làm giảm
ng
λCĐ
o
Đậm màu Làm tăng ε

du
(hyperchromic effect)
u
cu
Nhạt màu Làm giảm ε

(hypochromic effect)
PHÂN BIỆT CÁC CHUYỂN MỨC
n → π* π → π* Keøm chuyển d-d
điện tích
om
ε bé ε lớn ε lớn ε bé
(103– 105)
.c
(<103) (104) (102)
ng
-Chuyển dịch - Chuyển dịch Chịu hiệu ứng
co
xanh (5 – 20 đỏ (5 – 20 nm) cận sắc bởi
an
nm) trong dung trong dung môi dung môi có
th
môi phân cực phân cực / do
ng khả năng
hoặc có khả sự hiện diện solvat hóa tốt
o
năng tạo liên của các nhóm

du
kết hidro đẩy electron

u
cu
- Bị triệt tiêu gắn vào nhóm

trong môi mang màu
trường acid chứa electron n
mạnh
CHƢƠNG 9
om
9.4 Sự hấp thu bức xạ UV-VIS
.c
ng
& màu sắc của vật chất
co
an
th
o ng
du
u
cu
S HẤP THU B C X & M U S C
C A VẬT CHẤT
om
.c
Ánh sáng nhìn thấy (ánh sáng trắng) bao gồm dãi
ng
bức xạ từ 396 đến 700 nm
co
an
Ánh sáng trắng chiếu qua một lăng kính sẽ bị tách
th
thành một số tia CÓ MÀU (đỏ, cam, vàng, lục, lam,
ng
chàm, tím)
o
du
Trong vùng phổ của ánh sáng trắng sẽ có một số

u
màu phụ nhau, là các màu mà khi trộn chúng lại,

cu
ta sẽ có màu trắng
C A VẬT CHẤT
om
.c
Một vật có màu hay không màu được giải thích dựa
ng
vào kết quả tương tác khi chiếu ánh sáng vào vật đó:
co
an
Nếu ánh sáng bị khuếch tán hoàn toàn hoặc đi qua
th
hoàn toàn: vật có màu trắng hoặc không màu
o ng
du
Nếu tất cả các tia của ánh sáng trắng đều bị vật hấp
u
thu: vật sẽ có màu đen

cu
C A VẬT CHẤT
om
Một vật có màu khác màu đen hoặc màu trắng,
.c
ví dụ màu đỏ là do nó đã hấp thu chọn lọc trong vùng
VIS theo một trong các kiểu:
ng
co
Hấp thu tất cả các tia trừ tia màu đỏ
an
th
o ng
du
u
cu
Hấp thu ở hai vùng khác nhau của ánh sáng trắng sao
cho các tia còn lại cho mắt ta có cảm giác màu đỏ
Hấp thu tia phụ của tia đỏ (tia màu lục)

C A VẬT CHẤT
om
Tia bị hấp thu Màu của chất
.c
λ, nm Màu hấp thu
ng
400 - 430 Tím Vàng lục
co
an
430 - 490 Xanh Vàng da cam
th
490 – 510 ng Lục xanh Đỏ
510 – 530 Lục Đỏ tím
o
du
530 - 560 Lục vàng Tím

u
560 - 590 Vàng Xanh

cu
590 - 610 Da cam Xanh lục

610 - 730 Đỏ Lục
CHƢƠNG 9
om
9.5 Sự hấp thu bức xạ UV-VIS
.c
ng
của vật chất
co
an
– Hợp chất vô cơ đơn giản
th
– Phức chất ng
– Hợp chất hữu cơ:
o
• No
du
• Không no
u
cu
• Benzene & dẫn xuất
HỢP CHẤT VÔ CƠ ĐƠN GIẢN
Hợp chất Môi λCĐ ε Sự chuyển mức
hoặc ion trường (nm)
om
H2O Khí 166,7 1480 n →σ*
.c
SO2 Khí 360,0 0,05 n → π* trilet
ng
290,0 340 n → π* singlet
co
Br2 Khí 420,0 200 π *→ σ *
π *→ σ *
an
l2 Khí 520,0 950
n → π*
th
NO2- H2O 355,0 23
287,0 9 n → π*
ng
NO3- H2O 302,0 7 n → π*
o
du
194,0 8800 π → π*
CrO42- Kiềm 370 4900 kèm chuyển điện tích (từ
u
cu
orbital n của oxy vào orbital

của Cr)
KMnO4 Acid 525 2020 kèm chuyển điện tích (từ
orbital n của oxy vào orbital
của Mn)
PHỨC CHẤT
om
Sự chuyển mức BX hấp thu Màu của phức
.c
Kèm chuyển UV Không màu
ng
điện tích
co
an
VIS Phức đa nhân
th
ng VD: KFe[Fe(CN)6]
(xanh Pruss)
o
du
Chuyển mức d- VIS Có màu

d (trƣờng phối [M(H2O)m]n+
u
cu
tử)
HỢP CHẤT HỮU CƠ
om
Phân tử có chứa
.c
Phổ electron thường
cùng một nhóm
giống nhau
ng
mang màu
co
an
th
Phân tử chứa ng Phổ electron của hợp
các nhóm mang màu chất sẽ là phổ tổng hợp
o
biệt lập (không liên của các nhóm mang
du
hợp với nhau) màu đó

u
cu
om
.c
Phân tử chứa các Có thể sẽ tạo thành nhóm
ng
nhóm mang màu mang màu mới với những
co
liên hợp với nhau hấp thu đặc trưng mới
an
th
ng
Ví dụ nhóm C=C và C=O ở cetone α, β - không no tạo
o
du
thành nhóm mang màu mới là C=C–C=O, hay ba nối

đôi trong nhân benzene tạo thành nhóm mang màu
u
cu
kiểu nhân thơm...
om
Bức xạ
Hợp chất Ứng dụng
.c
hấp thu
ng
co
Dùng làm
n–hexane,
dung môi
an
HỢP cyclohexane,
để đo phổ
th
CHẤT heptane, UV xa
electron
ng
NO methanol, (do chuyển
của các
o
mức σ → σ*)
du
ethanol,
hợp chất
chloroform…
u
khác
cu
HIDROCARBON KHÔNG NO
Hợp chất λmax (nm) Sự
om
Nhóm Dung môi
mang màu chuyển hoặc dạng
.c
mức đo
ng
Ethylene >C=C< 173 π → π* heptane
co
Hexene -2 >C=C< 183 π → π* heptane
(thế α, β)
an
th
Cyclohexene >C=C<
ng 183,5 π → π* khí
2-Metylpentene-2 >C=C< 192 π → π* heptane
o
(thế α, α, β)
du
Acetylene -C=C- 172 π → π* Heptane

u
cu
Dialkyl acetylene -C=C- 190 π → π* Heptane

CH2 = CH -CH = CH -C=C- 253 π → π* Hexane
– CH = CH2
om
Benzene cho ba vân hấp thu:
.c
ng
co
Một vân rất mạnh ở 184nm (ε≈ 60.000)
an
BENZENE
th
&DẪN
Vân K khá mạnh ở 204nm (ε≈ 7.900)
ng
XUẤT
o
du
Vân B rất yếu 256nm (ε≈ 200, là vân

u
cu
đặc trưng cho phổ UV của benzene)
CHƢƠNG 9
om
9.6 Ứng dụng
.c
ng
– Định lượng một cấu tử
co
– Kiểm tra độ tinh khiết
an
– Nhận biết chất & nghiên cứu cấu trúc
– Phân tích hỗn hợp th
ng
– Nghiên cứu sự hỗ biền
o
du
– XĐ khối lượng phân tử

u
– XĐ hằng số phân li acid-baz

cu
– XĐ thành phần của phức chất
ĐỊNH LƢỢNG MỘT CẤU TỬ
om
.c
Sử dụng ĐL Lambert-Beer để định lượng
một cấu tử trong dung dịch dựa trên các PP:
ng
co
an
- Trực tiếp
th
- So sánh ng
- Lập đường chuẩn
o
- Thêm chuẩn vào chuẩn
du
………………………………………………….
u
cu
KIỂM TRA ĐỘ TINH KHIẾT
om
Vết của tạp chất trong hợp chất hữu cơ tinh
khiết được phát hiện dễ dàng nếu có cường độ
.c
hấp thu đủ lớn
ng
co
NHẬN BIẾT CHẤT VÀ NGHIÊN CỨU
an
CẤU TRÚC
th
ng
So sánh phổ hấp thu với phổ hấp thu của hợp
o
du
chất thiên nhiên hoặc phổ của mẫu chuẩn

u
có thể cho kết luận về một sản phẩm tổng hợp

cu
PHÂN TÍCH HỖN HỢP
Để phân tích các hỗn hợp phức tạp với nhiều
om
thành phần, thường dùng PP SK LỎNG với
.c
detector UV- VIS. Sau khi tách bằng sắc ký,
ng
mỗi thành phần được nhận dạng nhờ vào phổ
co
UV – VIS
an
th
Các máy QP UV-VIS hiện đại có khả năng xác
ng
định các nồng độ của hỗn hợp gồm n cấu tử. Khi
o
được cung cấp một ma trận gồm n cột và tối thiểu

du
n hàng lần lượt bằng các DD chuẩn của từng cấu

u
cu
tử cần được xác định, máy sẽ sử dụng tính chất

cộng độ hấp thu để giải hệ phương trình và cho
kết quả nồng độ từng cấu tử.
CHƢƠNG 9
om
9.7 Kỹ thuật thực nghiệm
.c
ng
– Dung môi
co
– Các yếu tố ảnh hưởng đến KQ phân tích
an
– Máy QP UV-VIS một chùm tia
th
ng
– Máy QP UV-VIS hai chùm tia
o
du
u
cu
DUNG MÔI
om
Dung môi dùng đo phổ UV-VIS phải không hấp
.c
thu ở vùng cần đo:
ng
co
Ở vùng UV gần, thường dùng n – hexane,
an
cyclohexane, metanol, etanol, nước…(chỉ hấp
thu bức xạ vùng tử ngoại xa)
th
o ng
du
Đo ở vùng VIS, ngoài các dung môi trên

u
cu
còn có thể dùng chloroform, dioxane, benzene…
CÁC YẾU TỐ ẢNH HƢỞNG ĐẾN KQPT
om
-Làm thay đổi β của phức
.c
-Ảnh hưởng lên ε và giá trị T (hoặc A)
ng
Điều kiện bỏ qua cân bằng phụ:
co
ẢNH
an
HƢỞNG CB phụ ảnh hưởng lên cân bằng chính
th
CỦA không đáng kể khi tỷ lệ [sản phẩm chính]:
ng
CÂN [cấu tử khảo sát] ≥103 lần
o
BẰNG
du
PHỤ Ảnh hưởng do tủa hoặc phức phụ được

u
cu
xem không đáng kể khi nồng độ của chúng

<103 lần nồng độ của cấu tử mà chúng
gây nhiễu
MÁY QUANG PHỔ UV-VIS 1 CHÙM TIA
1.MÁY QUANG PHỔ SPECTRONIC 20D
om
Dùng nút (1) mở máy trước khi đo khoảng 15 phút
.c
ng
Dùng nút (2) để chọn bước sóng thích hợp
co
an
Dùng phím (6) để chọn kiểu
th
ng đo T
o
Dùng nút (3) để chỉnh dòng tối
du
về 0%T (nắp buồng chứa (4)

u
phải đậy lại)

cu
1.MÁY QUANG PHỔ SPECTRONIC 20D
om
Đặt cuvet chứa C0 (trắng chuẩn) vào buồng chứa mẫu đo (4)
.c
ng
Dùng nút (5) để điều chỉnh độ hấp thu A về 0
co
Thay cuvet chứa trắng chuẩn
an
lần lượt bằng cuvet chứa các
th DD chuẩn từ C1 đến C5 và
ng
các dung dịch mẫu
o
du
Đọc độ hấp thu A của các DD

u
cu
chuẩn và dd mẫu trên màn

hình (7)
2.MÁY SPECTRONIC UNICAM
om
.c
ng
co
an
th
o ng
du
-Mở công tắc nguồn (A) trước khi đo 15 phút

u
-Dùng phím (1) hoặc (2) để chọn và chỉnh bước sóng đo

cu
- Đặt cuvet chứa C0 (trắng chuẩn) vào buồng chứa mẫu đo

(C) (mặt nhẵn của cuvet vuông góc với chiều truyền của
ánh sáng, tức theo hướng mũi tên)
2.MÁY SPECTRONIC UNICAM
om
.c
ng
co
an
th
o ng
du
- Nhấn phím (3) để điều chỉnh A về 0 (hoặc T về 100%)

u
cu
-Thay cuvet chứa C0 bằng cuvet chứa chuẩn/mẫu cần đo
-Đọc A (hoặc T) trên màn hình (6)

om
Các thế hệ máy quang phổ tử ngoại – khả kiến
.c
(UV –VIS spectrophotometer) hiện nay:
ng
1) Nguồn bức xạ (UV: deuterium; VIS: đèn
co
W/I2)
an
2) Bộ tạo đơn sắc
3) Bộ chia chùm sáng
th
ng
4) Cuvet chứa mẫu
o
du
5) Cuvet chứa dung môi

u
6) Detector
cu
7) Bộ tự ghi
om
(4)
.c
ng
(1)
co
(3)
an
(2)
th
ng
(5)
(6) (7)
o
du
Sơ đồ máy quang phổ UV – VIS

u
cu

Hoa Phan Tich Co Van p9 (Uvvis HPT) (Cuuduongthancong - Com)

Uploaded by

Document Information

Original Title

Copyright

Available Formats

Share this document

Share or Embed Document

Sharing Options

Did you find this document useful?

Is this content inappropriate?

Copyright:

Available Formats

Hoa Phan Tich Co Van p9 (Uvvis HPT) (Cuuduongthancong - Com)

Uploaded by

Copyright:

Available Formats

PHỔ TỬ NGOẠI –

9.6 Ứng dụng

9.7 Kỹ thuật thực nghiệm

Phổ thu được gọi là phổ tử ngoại – khả kiến UV-

VIS (Ultraviolet and Visible Spectra) hoặc được

gọi là phổ kích thích electron

Khi có sự thay đổi TT năng lượng, sự chuyển dời

a) Giản đồ NL của phân b) Phổ hấp thu tƣơng

được dùng để xác định NL ion hóa phân tử

vào các orbital trống của các ion

trung tâm làm xuất hiện các vân

Tiết diện biên của các orbital d

trục dxy, dxz và dyz và phân bố theo trục dz2 ,

dx2-y2 ) đều có mức năng lượng giống nhau (nên

dd chứa Mn+ thường không màu)

Ion tự do ion phức, trƣờng bát diện

Sự chuyển e giữa các mức NL d bị tách ra bởi trường

mức cao và mức thấp còn phụ thuộc vào độ bền

Mn 2+<Ni 2+<Co 2+<Fe 2+<V 2+<Fe3+ <Cr3+ <V3+ <Co3+ <Mn 4+

<Mo 3+ <Rh 3+ <Pd 4+ <Ir 3+ <Re 4+ <Pt4+

– Chuyển mức kèm chuyển điện tích

– Chuyển mức d-d

làm giảm mức NL của π*

Nhóm trợ màu (SH, NH2, OH…) không hấp thu

Đậm màu Làm tăng ε

Nhạt màu Làm giảm ε

năng tạo liên của các nhóm

kết hidro đẩy electron

- Bị triệt tiêu gắn vào nhóm

Trong vùng phổ của ánh sáng trắng sẽ có một số

màu phụ nhau, là các màu mà khi trộn chúng lại,

thu: vật sẽ có màu đen

Hấp thu tia phụ của tia đỏ (tia màu lục)

530 - 560 Lục vàng Tím

560 - 590 Vàng Xanh

590 - 610 Da cam Xanh lục

• Benzene & dẫn xuất

orbital n của oxy vào orbital

Chuyển mức d- VIS Có màu

hợp với nhau) màu đó

thành nhóm mang màu mới là C=C–C=O, hay ba nối

kiểu nhân thơm...

Acetylene -C=C- 172 π → π* Heptane

Dialkyl acetylene -C=C- 190 π → π* Heptane

Vân B rất yếu 256nm (ε≈ 200, là vân

đặc trưng cho phổ UV của benzene)

– XĐ khối lượng phân tử

– XĐ hằng số phân li acid-baz

– XĐ thành phần của phức chất

chất thiên nhiên hoặc phổ của mẫu chuẩn

có thể cho kết luận về một sản phẩm tổng hợp

Để phân tích các hỗn hợp phức tạp với nhiều

được cung cấp một ma trận gồm n cột và tối thiểu

n hàng lần lượt bằng các DD chuẩn của từng cấu

tử cần được xác định, máy sẽ sử dụng tính chất

Đo ở vùng VIS, ngoài các dung môi trên

còn có thể dùng chloroform, dioxane, benzene…

PHỤ Ảnh hưởng do tủa hoặc phức phụ được

xem không đáng kể khi nồng độ của chúng

về 0%T (nắp buồng chứa (4)

phải đậy lại)

Đọc độ hấp thu A của các DD

chuẩn và dd mẫu trên màn