Tiếng anh
Indenoisoquinolines are second-generation
toposisomerase I (TopI) inhibitors with
enhanced pharmacokinetic and activity
profiles relative to the classical TopI poison,
camptothecin. (1, 2) Indenoisoquinolines
were first identified as atypical TopI
inhibitors after COMPARE analysis (3)
showed a strong correlation between the NCI
60 cell screen activities of NSC 314622 and
camptothecins. (4) This initial finding
prompted extensive structure−activity
relationship (SAR) studies to define clinically
relevant analogs. (5, 6) Indenoisoquinolines
have several properties that distinguish them
from camptothecins: the absence of the labile
hydroxylactone E-ring, which imparts
increased chemical stability, (5) they target
different DNA sequences than camptothecin,
and the TopI-drug−DNA complexes have
greater stability. (4, 7) Importantly,
indenoisoquinolines are also active at
nanomolar concentrations, overcome
multidrug resistance, and have promising in
vivo efficacy. (8, 9) As a consequence,
development has progressed to a point where
indenoisoquinolines are undergoing
evaluation in phase I clinical trials. Currently,
pharmacodynamic monitoring of
indenoisoquinoline activity relies on
quantitation of γH2AX, a phosphorylated
histone associated with the presence of
double-stranded DNA breaks (DSSBs). (10)
However, there is still considerable scope to
define other protein markers of activity and to
further elucidate molecular mechanisms
underlying drug-induced DNA damage. (11)
Several detailed studies have been reported
investigating the effects of camptothecin on
the cellular proteome. (12-14) These reports
highlighted profound alteration in proteins
related to the DNA damage response and
apoptosis induction and emphasized the
importance of organelle enrichment in
improving detection of differentially
expressed proteins. In this study, a proteomics
Việt
Indenoisoquinolines là chất ức chế toposisomerase I (TopI) thế
hệ thứ hai với đặc tính dược động học và hoạt tính được nâng
cao so với chất độc TopI cổ điển, camptothecin. (1, 2)
Indenoisoquinolines lần đầu tiên được xác định là chất ức chế
TopI không điển hình sau khi phân tích SO SÁNH (3) cho thấy
mối tương quan chặt chẽ giữa hoạt động sàng lọc tế bào NCI 60
của NSC 314622 và camptothecin. (4) Phát hiện ban đầu này đã
thúc đẩy các nghiên cứu sâu rộng về mối quan hệ cấu trúc-hoạt
động (SAR) để xác định các chất tương tự có liên quan đến lâm
sàng. (5, 6) Indenoisoquinolines có một số đặc tính giúp phân
biệt chúng với camptothecin: không có vòng E hydroxylactone
không bền, giúp tăng tính ổn định hóa học, (5) chúng nhắm vào
các chuỗi DNA khác với camptothecin và phức hợp TopI-
thuốc−DNA có độ ổn định cao hơn. (4, 7) Điều quan trọng là
indenoisoquinolines cũng hoạt động ở nồng độ nano, vượt qua
tình trạng kháng đa thuốc và có hiệu quả in vivo đầy hứa hẹn.
(8, 9) Kết quả là, sự phát triển đã tiến triển đến mức
indenoisoquinolines đang được đánh giá trong các thử nghiệm
lâm sàng giai đoạn I. Hiện nay, việc theo dõi dược lực học của
hoạt động indenoisoquinoline dựa vào định lượng γH2AX, một
histone được phosphoryl hóa liên quan đến sự hiện diện của
các đứt gãy DNA chuỗi kép (DSSB). (10) Tuy nhiên, vẫn còn
phạm vi đáng kể để xác định các dấu hiệu hoạt động khác của
protein và làm sáng tỏ thêm các cơ chế phân tử gây tổn hại DNA
do thuốc gây ra. (11)
Một số nghiên cứu chi tiết đã được báo cáo điều tra tác động
của camptothecin lên hệ protein của tế bào. (12-14) Các báo
cáo này nhấn mạnh sự thay đổi sâu sắc trong protein liên quan
đến phản ứng phá hủy DNA và cảm ứng apoptosis và nhấn
mạnh tầm quan trọng của việc làm giàu cơ quan trong việc cải
thiện khả năng phát hiện các protein được biểu hiện khác nhau.
Trong nghiên cứu này, nền tảng proteomics dựa trên 2D-PAGE
và LC−MS/MS đã được sử dụng để tạo ra hệ protein hạt nhân
cho các tế bào A375 và HCT-116 được xử lý bằng
indenoisoquinoline, NSC 724998. Kết quả cho thấy sự phong
phú của cơ quan dưới tế bào này đã được phát hiện trước đây.
những thay đổi không xác định được liên quan đến tổn thương
và sửa chữa DNA. Hơn nữa, trong các tế bào A375, các protein
liên quan đến quá trình apoptosis được biểu hiện quá mức
trong khi ở các điều kiện giống hệt nhau ở các tế bào HCT-116 ít
nhạy cảm hơn, các yếu tố của hệ thống ubiquitin-proteasome
cho thấy biểu hiện thay đổi để đáp ứng với điều trị, làm nổi bật
vai trò tiềm năng của proteasome trong DNA phản ứng hư hỏng
và suy thoái phức hợp Top1-DNA. (15-17) Cuối cùng, chúng tôi
xác định dạng phosphoryl hóa Ser824 của chất ức chế phiên mã
KAP1 (yếu tố trung gian phiên mã 1β) (18) là dấu hiệu bảo tồn
hoạt động của thuốc. Hy vọng rằng dữ liệu được trình bày ở đây
platform based on 2D-PAGE and cuối cùng sẽ cung cấp những hiểu biết hữu ích để hỗ trợ phát
LC−MS/MS was used to generate a nuclear triển lâm sàng indenoisoquinoline.
proteome for A375 and HCT-116 cells treated
with the indenoisoquinoline, NSC 724998.
Results showed that enrichment of this
subcellular organelle uncovered previously
unidentified changes implicated in DNA
damage and repair. Furthermore, in A375
cells, proteins implicated in apoptosis were
over-represented whereas under identical
conditions in less sensitive HCT-116 cells,
elements of the ubiquitin-proteasome system
showed altered expression in response to
treatment, highlighting the potential role of
the proteasome in DNA damage response and
Top1-DNA complex degradation. (15-17)
Lastly, we identify the Ser824 phosphorylated
form of the transcriptional repressor KAP1
(transcription intermediary factor 1β) (18) as
a conserved marker of drug activity. It is
hoped that the data presented here will
ultimately provide useful insights in support
of indenoisoquinoline clinical development.