2نمونه 250ميلي ليتري را در دو ظرف جداگانه مي ريزيم.
به هر كدام 2.5ميلي ليتر محلول سولفات منگنز اضافه مي كنيم. محلول را هم مي زنيم و به آن ها 2.5ميلي ليتر محلول قليايي آزيد سديم و يدور اضافه مي كنيم و دوباره هم مي زنيم . چند دقيقه صبر مي كنيم تا رسوب تشكيل شود. به آن ها 2.5ميلي ليتر اسيد سولفوريك اضافه مي كنيم تا رسوب ها حل شود. يكي از نمونه ها را سريعا با محلول تيوسولفات سديم تيترازول و معرف چسب نشاسته تيتر كرده و نمونه ديگر را به مدت 5روز در انكوباتور نگهداري مي كنيم و بعد از 5روز تيتر مي كنيم. محاسبات : )DO= (A*N*8*1000)/(V-B = Vحجم نمونه = Nنرماليته تيوسولفات سديم = Aحجم مصرفي تيوسولفات سديم = Bحجم معرف هاي اضافه شده به نمونه مورد آزمايش
)BOD(5) = DO(5) – DO(0
محلول هاي مورد استفاده :
محلول سولفات منگنز : 96گرم MnSO4,4H2Oيا 72.66گرم MnSO4,2H2Oرا در آب مقطر حل كرده و به حجم 200ميلي ليتر برسد . محلول قليايي آزيد سديم و يدور : 125گرم سديم هيدروكسايد يا 175گرم پتاسيم هيدروكسايد را در 125ميلي ليتر آب مقطر حل كرده و در يك ظرف جداگانه 37.5گرم پتاسيم آيدايد را در 50ميلي ليتر آب مقطر حل كرده و هر دو را در حالت سرد شده به هم افزوده و هم بزنيد 2.5 .گرم NaN3را در 10 ميلي ليتر آب مقطر حل كرده و اين محلول را به محلول فوق افزوده و به حجم 200ميلي ليتر برسانيد.