การหาขนาดของ DNA

และ
การหาลำดับนิวคลีโอไทด์

สามารถหาขนาด DNA ได้ด้วยเทคนิคเจลอิเล็กโทรฟอรีซิส (gel electrophoresis)

ซึ่งเเยกโมเลกุล DNA ที่มีขนาดเเตกต่างกันออกจากกันในสนามไฟฟ้าผ่านตัวกลาง ใช้
เเยกเเละศึกษาโมเลกุลของโปรตีนได้อีกด้วย

เทคนิคเจลอิเล็กโทรฟอรีซิส

เทคนิคเจลอิเล็กโทรฟอรีซิส ทำได้โดยให้
โมเลกุล DNA เคลื่อนที่ผ่านตัวกลาง เช่น
อะกาโรสเจล (agarose gel) เเละ พอลิอะคริลา
ไมด์เจล (polyacrylamide gel) ที่อยู่ภายใต้
สนามไฟฟ้า

โมเลกุล DNA

• โมเลกุล DNA มีประจุเป็นลบ เเละจะเคลื่อนที่

เข้าหาขั้วบวกของสนามไฟฟ้าโดยผ่านตัวกลาง
• โมเลกุล DNA ขนาดเล็กจะเคลื่อนที่ได้เร็วกว่า
โมเลกุลขนาดใหญ่ โมเลกุล DNA ขนาดต่างๆ
จึงเเยกออกจากกันภายใต้สนามไฟฟ้า
• โมเลกุล DNA ที่มีขนาดเดียวกันจะเคลื่อนที่ได้
ระยะทางเท่ากัน

การหาขนาดของ DNA และ

DNA ที่อยู่ในรูปสารละลาย
DNA ที่อยู่ในรูปสารละลาย มีลักษณะใส
ไม่มีสี จึงต้องอาศัยการย้อมสีเพื่อตรวจสอบ
DNA นิยมใช้อีธิเดียมโบรไมด์ (ethidium
bromide) เป็นตัวย้อมซึ่งจะจับกับ DNA เเละ
เมื่อสัมผัสกับรังสีอัลตราไวโอเลต เกิดการเรือง
เเสงฟลูออเรสเซนต์เป็นสีชมพูได้ บริเวณที่
โมเลกุล DNA ขนาดเท่ากันเคลื่อนที่ไปอยู่ด้วย
กันจำนวนมากจะมองเห็นเป็นเเถบ
การหาลำดับนิวคลีโอไทด์
• การหาขนาดของ DNA ทำได้โดยเปรียบเทียบ
กับโมเลกุลดีเอ็นเอมาตรฐาน ซึ่งประกอบด้วย
ชิ้น DNA ที่ทราบขนาดโมเลกุลของ DNA ที่
ต้องการศึกษาได้
• การหาการเรียงตัวของนิวคลีโอไทด์ในสาย
DNA เรียกว่า การหาลำดับดีเอ็นเอ (DNA
sequencing) สามารถทำได้โดยหาลำดับเบสที่
เป็นองค์ประกอบของนิวคลีโอไทด์บนสาย
DNA ด้วยเครื่องหาลำดับนิวคลีโอไทด์แบบ
อัตโนมัติ (automated sequencer)

เมื่อได้ลำดับเบสแล้วสามารถนำไปประยุกต์ใช้ได้หลากหลาย เช่น นำไปเทียบกับฐานข้อมูล

เพื่อให้ทราบว่าลำดับเบสนั้นเป็นยีนใดหรือมีมิวเทชันในตำแหน่งใดบ้าง นอกจากนี้ยังสามารถ
นำลำดับเบสนั้นไปแปลงเป็นลำดับกรดอะมิโนเพื่อใช้ทำนายโครงสร้างและหน้าที่ของโปรตีนได้
อีกด้วย