Professional Documents
Culture Documents
פיזיו3 (1) מיכי עמיר
פיזיו3 (1) מיכי עמיר
שיטה:
השיטה בניסוי זה בודקת את ריכוז המומסים בתאי האפידרמיס ותאי פיוניות באור ובחושך ,ע"י השריית
רקמת האפידרמיס בתמיסות סוכרוז בריכוזים שונים ,ובדיקה מתי הרקמות מגיעות למצב של 50%
פלסמוליזה.
הוכנו מספר מבחנות ובהן תמיסות סוכרוז בריכוזים שונים עם ממס .) KCl ) mM20
מכניסים פיסות אפידרמיס מעלים של קומלינה ששהו באור ומעלים ששהו בחושך .
התבצעה צביעה של הפיסות ב"אדום ניטרלי" לשם בדיקת חיוניות התאים ולמען צביעת החללית וכך
נוכל לעקוב אחר הפלסמוליזה ,ולאחר מכן הכנסה לצלחות פטרי שמכילות את התמיסות הסוכרוז
בריכוזים השונים למשך 30דקות.
ביצוע בדיקה של כל אחת מהפיסות ומדידת הגעה יחסית (ב )%-לפלסמוליזה.
תוצאות:
להלן טבלה המסכמת את ממוצעי האחוזים שהתקבלו לקבוצות השונות במעבדה ע"פ תנאי הניסוי
שנקבעו לכל קבוצה (אור או חושך).
אור חושך
אחוז תאי אחוז תאי
ריכוז תמיסה אחוז פיוניות אפידרמיס אחוז פיוניות אפידרמיס
KCL בפלסמוליזה בפלסמוליזה בפלסמוליזה בפלסמוליזה
0.1 0 4.16 0 0
0.2 0 5 1.66 4.166
0.3 5 30 5.66 22.33
0.4 1.66 53.33 6.66 23.33
0.5 3.33 62.67 25.66 31.66
0.6 19 96.66 46.66 58.33
0.8 61.66 100 85.66 72.5
1 100 0 100 100
גרף מספר 1אחוז תאי האפידרמיס הנמצאים בפלסמוליזה ביחס לריכוז התמיסה:
80
60
40
20
0
אפידרמיס
חושך
0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 1 1.1
אפידרמיס אור ריכוז התמיסה []M
ניתן לראות ע"פ מגמת הגרף שככל שהריכוז עולה גדל %התאים שמגיעים לפלסמוליזה.
ניתן לראות שהריכוז הגורם ל 50%-פלסמוליזה של תאי האפידרמיס באור דומה לזה שבחושך
גרף מספר 2אחוז תאי הסגירה הנמצאים בפלסמוליזה ביחס לריכוז התמיסה:
0
-20 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 0.9 1 1.1
ריכוז התמיסה []M
ניתן לראות ע"פ מגמת הגרף שככל שהריכוז עולה גדל %התאים שמגיעים לפלסמוליזה.
ניתן לראות שריכוז התמיסה שהביא ל 50%פלסמוליזה בתאי הסגירה באור גבוה מזה שבחושך
מהשוואה בין התוצאות שהתקבלו בעלים השונים לגבי תאי האפידרמיס ניתן לראות כי התאים בעלים
המוחשכים מתחילים פלסמוליזה מהר יותר (בסביבות ) M 0.2מאשר התאים בעלים המוארים בריכוז
עולה של תמיסות סוכרוז(בסביבות . ) M 0.3
בהמשך המגמה מתחלפת וניתן לראות שקצב הכניסה לפלסמוליזה של התאים שטופלו באור גדול יותר
מאשר אלו ששהו בחושך,דבר העולה בקנה אחד עם הנחות היסוד של ניסוי זה הגורסת כי "תא
אפידרמיס באור מכיל פחות מומסים מאשר המקביל שלו בחושך" ,וזאת משום שבאור עוברים מומסים
לתוך תאי הסגירה ע"פ התהליכים שנלמדו בהרצאות (סיגנל אור כחול ו\או אדום וכו').
מאחר וישנם פחות מומסים הפוטנציאל האוסמוטי עולה ומכאן שפוט' המים גם כן עולה,כך שההגעה
לפלס' מהירה יותר מאשר בתאי אפידרמיס ששהו בחושך ,מאחר ובהם קיממת תופעה הפוכה של ריכוז
מומסים גבוה יותר,ובגרף ניתן לראות שבריכוזים השונים לאחר הסטיה ההתחלתית(ראה לעיל) אכן באור
ההגעה לפלסמוליזה מהירה יותר (גרף התאים המוארים היה צריך להתרומם ראשון).
מהשוואה בין התוצאות שהתקבלו בעלים השונים לגבי תאי הסגירה ניתן לראות כי התאים בעלים
) M 0.4מאשר תאי הסגירה בעלים המוארים המוחשכים מתחילים פלס' מהר יותר (בסביבות
(בסביבות .) M 0.5
היחס בין השיפועים נשמר לכל אורך הגרף והוא שתאי הסגירה מפיסות העלים שטופלו בחושך מגיעים
מהר יותר לפלסמוליזה מאשר אלו שנלקחו מעלים שטופלו באור וזאת בהתאם להנחת היסוד שגורסת
ש"בעלים שטופלו באור ,הפיוניות פתוחות עקב כניסת מים לתאי הסגירה" ומכאן שמכיוון שהם מלאים
במים (פוט' מים גבוהה יותר) ,ההגעה שלהם לפלסמוליזה תתרחש מאוחר יותר לעומת ההגעה של תאי
הסגירה שהיו בחושך בו רוב הפיוניות סגורות ובתאי הסגירה שלהן כמות מועטה של מים יחסית לתאי
הסגירה בפיוניות פתוחות.
מהשוואה בין סוגי התאים –תאי הסגירה בפיוניות לעומת תאי האפידרמיס הצפי היה להבדלים בין
התאים בפיסות שהוארו וזאת משום שהאור נותן סיגנל לכניסת מומסים מהאפידרמיס אל תאי הסגירה
,מכאן שהגעה לפלסמוליזה תהיה בריכוז גבוה יותר לגבי תאי הסגירה מאשר בתאי האפידרמיס.
לעומת זאת בתאים שטופלו בחושך נצפה לכך שסוגי התאים השונים יגיעו לפלסמוליזה בריכוזים זהים/
קרובים וזאת עקב העובדה שבחושך משתווים ריכוזי המומסים בין תאי הסגירה לתאי האפי' שמסביבם
וזה מאפשר למים לצאת מתאי הסגירה ולפיוניות להיסגר,ואילו באור כאשר יש צמח זקוק לפתיחת
הפיוניות נוצר באופן מלאכותי ,ע"י השקעת אנרגיה ,פוטנציאל מומסים שלילי ,שמאפשר כניסת מומסים
ובעקבות זאת מים לתאי הסגירה ופתיחת הפיוניות.
ואכן בהתאם לציפיות אלו ניתן לראות שיש הבדל בין ההגעה ל 50%פלס' באור של תאי אפידרמיס
(בסביבות ריכוז )M 0.5לעומת 50%מתאי הסגירה (בסביבות ריכוז .) M 0.75ואילו בחושך ההגעה של
50%מתאי הסגירה ו 50%מתאי האפידרמיס מתרחשת בסביבות ריכוז M 0.6
תוצאות
טבלה מס' : 2ריכוז האשלגן בפיונית לעומת פתיחה\סגירה
בביקורת לא נראו כתמים כהים מה הייתה הביקורת בניסויי הזה?? ,לא בתאי הסגירה ולא בתאים
?שסביבם .הטבלה לא ברור מה הטיפול? איזה טיפול
(בדגימה שנחשפה לאור נצפו כתמים כהים-שחורים באזור תאי הסגירה (מעין שפתיים כהות
בדגימה שנשמרה בחושך רוב הצבע הכהה נצפה באזור התאים שסביב לפיונית-ולא בתאי הסגירה
עצמם .הניסוי פה לא ברור ולא מובן לי מה סיכמתם
דיון ומסקנות
בניסוי זה ניסינו לבדוק את הקשר בין רמת פתיחת הפיונית ובין כמות האשלגן הנמצאת בתאי הסגירה
באותו שלב.
ההשערה המוצעת היא :ריכוז גבוה של יוני אשלגן בתאי הסגירה גורם לכניסת מים לתא (כתוצאה
מהפרש פוטנציאלי המים) ולפתיחת הפיונית בשל המבנה המיוחד של הדפנות וסידור המיקרופיברילות.
הבדיקה עם ריאגנט קובלט איששה את ההשערה :בתאים שהיו באור ,מצאנו גרגירי משקע של התגובה
עם הריאגנט הנ"ל -משמע שהיה בהם ריכוז גבוה של יוני אשלגן .בתאים שהושמו קודם לכן בחושך,
לעומת זאת ,כמעט ולא מצאנו משקעים של התגובה בתוך תאי הסגירה ,אלא בעיקר מחוצה להם בצורה
מפוזרת ולא מרוכזת.
ומכאן שכניסת אשלגן לתאי הסגירה מביאה לפתיחת הפיוניות ויציאתו מביאה לסגירתן כך שניתן למצוא
פחות אשלגן בתאי הסגירה ופיזור רחב יותר בסביבה האפידרמלית העוטפת אותם.
טבלה מס' :3תוצאות אחוזי הפיוניות הפתוחות כפונקציה של הזמן ,בנוכחות ABA
120
אחוז פתיחה של הפיוניות
100
100 80
בופר ABA +
60
ללא ABA
בופר50
אחוז הפיוניות 40
20
0
0
בופר בלבד
0 0 5 10 15 20
10 בופרABA+
זמן (דקות)
זמן []Min 20
ניתן לראות שלאורך זמן יש ירידה בכמות הפיוניות הפתוחות בפיסות שטופלו בא.ב.א.אבא זה רק
.באנגלית מכוון שחומצה אבסיסית לא בדיוק יוצא א.ב.א
:דיון ומסקנות
השערת הניסוי :ההורמון הצמחי הנ"ל הינו גורם (סיגנל) לסגירת הפיוניות.
נצפה לראות כי תאי הסגירה של פיונית שהושמו קודם לכן באור (כלומר הפיוניות פתוחות) ,הועברו
לתמיסת ABAוהמשיכו להיות מוארים יסגרו .בעוד שתאים ששהו בחושך לפני כן לא יושפעו כמעט
מ ABAהיות ורוב הפיוניות שלהן כבר סגורות.
תוצאות הניסוי איששו את השערתנו ואכן כפונקציה של הזמן ABAגרמה לסגירת הפיוניות.
בבופר אחוז הפיוניות נשאר קבוע ולא השתנה לאורך הזמן – מעיד על השפעת . ABA
סיכום
בניסוי הנ"ל הודגם הקשר בין האות שנותן האור למערך התאים שבעלה,לבין תנועת המומסים אל ומהתאים
הסוגרים ובעקבותם סגירתה ופתיחה של הפיונית תוך דגש על ההבדלים הקרדינליים שבין התאים השונים.
הודגם הקשר שבין נוכחות יוני האשלגן לבין תנועת המים ויחד עמם פתיחת וסגירת הפיונית.
לבסוף נבחנה השפעת ההורמון הצמחי abaוהודגמה סגירה של פיוניות בתגובה להורמון הנ"ל.
מיכי עמיר
ציונכם 93
בהצלחה!