การทดลองเรื่องการแยกและวิเคราะห์ชีวโมเลกุลในเซลล์ยีสต์

ยีสต์ 1 กรัม
-เติม 5% TCA 5 mL คนจนเป็นเนื้อเดียวกัน
-ปั่นในเครื่องหมุนเหวี่ยง 5 นาที ด้วยอัตราเร็ว 3,000 รอบต่อนาที

-ใส่หลอดขนาด 20 mL น้ำใส ตะกอน

- สกัดด้วยอีเทอร์ โดยเติมอีเทอร์
- เติม 5% TCA 5 mL คนให้เข้ากัน
5mL ปิดหลอดด้วยแผ่นอลูมิเนียม
- ต้มในน้ำเดือด 10 นาที
นำไป vortex เบา ๆ ให้เข้ากัน ทิ้ง
- ปั่นในเครื่องหมุนเหวี่ยง 5 นาที
ไว้ให้แยกชั้น
อัตราเร็ว 3,000 รอบต่อนาที
-ดูดแยกชั้นน้ำออกจากชั้นอีเทอร์

สารตัวอย่าง I (ชั้นน้ำ) ชั้นอีเทอร์ (1)

-ปิเปตต์ใส่หลอดทดลอง 1 mL - ปิเปตต์ใส่หลอดทดลอง - ปิเปตต์ใส่หลอด
- ปิดหลอดด้วยแผ่นอลูมิเนียม และ
- ไฮโดรไลซ์ โดย เติม 2 M HCI 3 mL หลอดละ 1mL 2 หลอด ทดลองหลอดละ 1mL
นำไปตู้ดูดควัน
- ต้มในน้ำเดือด 30 นาที
-ระเหยบนอ่างน้ำควบคุมอุณหภูมิในตู้
3. Molybdate test ควันจนเหลือ 0.1 mL
- นำไปรวมกับชั้นอีเทอร์ 2 และ 3
สารตัวอย่าง II

- ปิเปตต์ใส่หลอดทดลอง
หลอดละ 1mL 2 หลอด
น้ำใส ตะกอน

-1. Molisch's test - สกัดด้วยอีเทอร์ 3 mL - สกัดด้วยอีเทอร์ 3 mL

-2. Benedict's test - ทิ้งให้แยกชั้น - คนให้เข้ากัน
ทดสอบสารตัวอย่าง I II พร้อมกัน - ใช้พาสเจอร์ปิเปตต์ ดูดแยก - ใช้พาสเจอร์ปิเปตต์ ดูด
น้ำจากอีเทอร์ แยกน้ำจากอีเทอร์

สารตัวอย่าง (III) ชั้นอีเทอร์ (2) ชั้นอีเทอร์ (3) ตะกอน

3. Molybdate test
- เติมน้ำกลั่น 3 mL คนให้เข้ากัน
4. Dische test
- ปั่นในเครื่องหมุนเหวี่ยง 5 นาที
5. Orcinol test
- ปิดหลอดด้วยแผ่นอลูมิเนียม อัตราเร็ว 3,000 รอบต่อนาที
- ระเหยบนอ่างน้ำอุ่นในตู้ควั่น
จนเหลือปริมาตรประมาณ 0.2
mL
แบ่งส่วนใสมา 1 mL ทดสอบด้วย
สารละลายไบยูเร็ต (V)

- นำชั้นอีเทอร์ (1) (2) (3) ที่ระเหยแล้วมารวมกัน

6. ทดสอบด้วย Grease spot test (IV)
 1.Molisch's test
1.1 ปิเปตต์สารละลาย
1.2 เขย่าเบาๆให้เข้ากัน
1.3 เติมกรดซัลฟิวริกเขมข้น 0.5 mL ลง
หลอดช้าๆ ให้แยกชั้นกัน ห้ามเขย่า
1.4 สังเกตการเปลี่ยนแปลง
4.Dische test
4.1 ปิเปตต์สารละลาย
4.2 เขย่าเบาๆให้เข้ากัน
4.3 ต้มในน้ำเดือด 5 นาที
4.4 สังเกตสีและบันทึกผล
การทดลอง
2.benedict's test
2.1 ปิเปตต์สารละลาย
2.2 เขย่าเบาๆให้เข้ากัน
2.3 ต้มในอ่างน้ำเดือด 5 นาที ตั้ง
ทิ้งไว้ให้เย็น
2.4 สังเกตสีและการเกิดตะกอน สารที่ให้ผล
บวกคือ กลูโคส แป้ง สารที่ให้ผลลบ คือ
ซูโครส น้ำกลั่น
5.Orcinal test
5.1 ปิเปตต์สารละลาย
5.2 เขย่าเบาๆให้เข้ากัน
5.3 ต้มในน้ำเดือด 3 นาที
5.4 สังเกตสีและบันทึกผล
การทดลอง
3.Molybdate test
3.1 ปิเปตต์สารละลาย
3.2 เขย่าเบาๆให้เข้ากัน
3.3 สังเกตสีและบันทึกผลการ
ทดลอง
7.Biuret test
7.1 ปิเปตต์สารละลาย
7.2 เขย่าเบาๆให้เข้ากัน
7.3 สังเกตสีและบันทึกผลการ
ทดลอง
6.Grease test
-นำอีเทอร์ที่ระเหยแล้วไม่มีน้ำปน (IV) 0.3 mL
-หยดลงบนกระดาษสมุด
-ถ้ากระดาษมีความโปร่งแสงแสดงว่ามีไขมันใน
ชั้นอีเทอร์
โดยทดสอบเทียบกับน้ำมันพืชซึ่งให้ผลบวก น้ำ
กลั่นให้ผลลบ