43

ภาคผนวก ก
การเตรียมสารละลาย

1. การเตรี ย มสารละลายมาตรฐานกรดแกลลิ ก เข้ ม ข้ น 500.00

มิลลิกรัมต่อลิตร
ชั่ง กรดแกลลิ ก 0.0500 กรัม ละลายในเมทานอลปริ ม าตรน้ อ ย
แ ล้ ว เ ติ ม ล ง ใ น ข ว ด วั ด ป ริ ม า ต ร ข น า ด 1 0 0 .0 0
มิลลิลติ รและปรับปริมาตรด้วยเมทานอล

2. การเตรียมสารละลาย Folin - Ciocalteu’s reagent เข้มข้นร้อยละ

10.00 โดยปริมาตร
ปิ เปตสารละลาย Folin - Ciocalteu’s reagent ปริม าตร 10.00
มิ ล ลิ ลิ ต ร ล ง ใ น ข ว ด วั ด ป ริ ม า ต ร ข น า ด 1 0 0 .0 0 มิ ล ลิ ลิ ต ร
และปรับปริมาตรด้วยน้าปราศจากไอออน

3. การเตรี ย มสารละลายโซเดี ย มคาร์ บ อเนต เข้ ม ข้ น ร้อ ยละ 7.50

โดยมวลต่อปริมาตร
ชั่ ง โ ซ เ ดี ย ม ค า ร์ บ อ เ น ต ม า 7 . 5 0 0 0 ก รั ม
ล ะ ล า ย ด้ ว ย น้ า ป ร า ศ จ า ก ไ อ อ อ น เ ล็ ก น้ อ ย แ ล้ ว เ ติ ม ล ง ใ น
ข ว ด วั ด ป ริ ม า ต ร ข น า ด 1 0 0 . 0 0 มิ ล ลิ ลิ ต ร
ปรับปริมาตรด้วยน้าปราศจากไอออน

4. การเตรี ย มสารละลาย แอลฟ า – โทโคฟี รอล เข้ ม ข้ น 480.00

มิลลิกรัมต่อลิตร
ชั่ ง แ อ ล ฟ า - โ ท โ ค ฟี ร อ ล (9 8 % W/W) 0 . 0 5 0 0 ก รั ม
ละลายในโทลูอีนเล็กน้อย แล้วเติมลงในชวดวัดปริมาตร ขนาด 100.00
มิลลิลติ ร และปรับปริมาตรด้วยโทลูอีน

5 . ก ารเต รี ย ม ส ารละลาย 2,2-ไบ ไพ ริ ดี น เข้ ม ข้ น ร้ อ ย ละ 0 .0 1

โดยมวลต่อปริมาตร
ชั่ง 2,2-ไบไพริ ดี น 0.1000 กรัม ละลายในเอทานอลเล็ ก น้ อ ย
แ ล้ ว เติ ม ล ง ใน ข ว ด วัด ป ริ ม าต ร ข น า ด 1 0 0 .0 0 มิ ล ลิ ลิ ต ร
และปรับปริมาตรด้วยเอทานอล
 44

6. ก ารเตรี ย ม สารละลายเฟ อร์ ริ ก (III) ค ลอไรด์ เฮก ซ ะไฮเดรต

เข้มข้นร้อยละ 0.10 โดยมวลต่อปริมาตร
ชั่ ง เฟ อ ร์ ริ ก (III) ค ล อ ไ ร ด์ เฮ ก ซ ะ ไ ฮ เด ร ต 0 .1 0 0 0 ก รั ม
ละลายในเอทานอลเล็ ก น้ อ ย แล้ ว เติ ม ลงในขวดวัด ปริ ม าตรขนาด
100.00 มิลลิลต ิ ร และปรับปริมาตรด้วยเอทานอล

7. การเตรียมสารละลาย FRAP reagent

7.1 การเตรี ย มสารละลาย เฟอร์ ริก (III) คลอไรด์ เฮกซะไฮเดรต
เข้ม ข้น 20.00 mM โดยชั่ง เฟอร์ ริก คลอไรด์ เฮกซะไฮเดรต
0.2703 ก รัม ละลายใน ข วดวัด ป ริ ม าต รขน าด 50.0 0 มิ ล ลิ ลิ ต ร
ปรับปริมาตรด้วยน้าปราศจากไอออน
7.2 การเตรี ย มสารละลาย TPTZ เข้ ม ข้น 10.00 มิ ล ลิโ มลาร์ ใ น
สารละลายกรดไฮโดรคลอริกเข้มข้น 40.00 มิลลิโมลาร์
7.2.1 การเตรี ย มสารละลายกรดไฮโดรคลอริก เข้ม ข้น 40.00
มิ ล ลิ โ ม ล า ร์ โ ด ย ปิ เป ต ก ร ด ไ ฮ โ ด ร ค ล อ ริ ก เข้ ม ข้ น ม า 0 .1 6 6
มิ ล ลิ ลิ ต ร ใ ส่ ใ น ข ว ด วั ด ป ริ ม า ต ร ข น า ด 5 0 .0 0 มิ ล ลิ ลิ ต ร
ปรับปริมาตรด้วยน้าปราศจากไอออน
7.2.2 ชั่ ง TPTZ ม า 0 . 1 5 6 2 ก รั ม
ละลายในสารละลายกรดไฮโดรคลอริกเข้มข้น 40.00 มิลลิโมลาร์ (จากข้อ
7.2.1)
7.3 การเตรียมสารละลาย อะซิเตตบัฟเฟอร์ พีเอช 3.6
ละลายโซเดีย มอะซิเตตไตรไฮเดรต 1.50 กรัม ในกรดอะซิติก
8.00 มิลลิลิต ร จากนั้น ปรับ ปริม าตรด้วยน้ าปราศจากไอออนจนครบ
500.00 มิลลิลต ิ ร
การเตรี ยมสารละลาย FRAP เตรี ยมโดยปิ เปตสารละลายในข้อ
7 .1 7 .2 แ ล ะ 7 .3 ผ ส ม ใ ห้ เข้ า กั น ใ น อั ต ร า ส่ ว น 1 :1:10
เตรียมใหม่ทุกครัง้ ทีท ่ าการทดลอง

8. การเตรี ย มสารละลาย เฟอร์ ร สั (II) ซัลเฟต เฮปตะไฮเดรต เข้ม ข้น

2.00 มิลลิโมลาร์
ชั่ ง เฟ อ ร์ รั ส (II) ซั ล เ ฟ ต เฮ ป ต ะ ไ ฮ เ ด ร ต 0 .1 1 1 2 ก รั ม
ล ะ ล า ย ใ น น้ า ป ร า ศ จ า ก ไ อ อ อ น เ ล็ ก น้ อ ย แ ล้ ว
เ ท ล ง ใ น ข ว ด วั ด ป ริ ม า ต ร ข น า ด 2 0 0 . 0 0 มิ ล ลิ ลิ ต ร
แล้วปรับปริมาตรด้วยน้าปราศจากไอออน

9. การเตรียมสารละลาย DPPH เข้มข้น 0.10 มิลลิโมลาร์

 45

ชั่ ง DPPH 0 . 0 0 7 9 ก รั ม
ละลายในเอทิลอะซิเตตเล็กน้ อยแล้วเทใส่ขวดวัดปริมาตรขนาด 200.00
มิ ล ลิ ลิ ต ร ป รั บ ป ริ ม า ต ร ด้ ว ย เอ ทิ ล อ ะ ซิ เต ต เ ก็ บ ที่ ใ น มื ด
เตรียมใหม่ทุกครัง้ ทีท ่ าการทดลอง

10. การเตรียมสารละลายน้ามันเมล็ดเสาวรสเข้มข้น 10 - 100

มิลลิกรัมต่อมิลลิลต
ิ ร จากสารละลาย น้ามันเมล็ดเสาวรสเข้มข้น
100.00 มิลลิกรัมต่อมิลลิลติ ร

ชั่ ง น้ า มั น เ ม ล็ ด เ ส า ว ร ส 5 . 0 0 0 x
กรัม ละลายในเอทิล อะซิ เตตเล็ ก น้ อ ยแล้ว เทใส่ข วดวัด ปริม าตรขนาด
5 0 . 0 0 มิ ล ลิ ลิ ต ร ป รั บ ป ริ ม า ต ร ด้ ว ย เ อ ทิ ล อ ะ ซิ เ ต ต
แล้วทาการเจือจางเป็ นความเข้มข้นต่างๆ ด้วยสูตร
C1V1 = C2V2
โดย C1 =
ความเข้มข้นของสารละลายน้ามันเมล็ดเสาวรสทีเ่ ตรียมไว้
V1 = ปริมาตรสารละลายน้ามันเมล็ดเสาวรสทีต ่ อ
้ งปิ เปตมา
C2 =
ความเข้มข้นของสารละลายน้ามันเมล็ดเสาวรสสุดท้ายทีต ่ อ
้ งการเจื
อจาง
V2 =
ปริมาตรของสารละลายน้ามันเมล็ดเสาวรสทีต ่ อ
้ งการเตรียม

11. การเตรี ย มสารละลายน้ ามัน เมล็ ด เสาวรสเข้ ม ข้ น 10 - 200

มิลลิกรัมต่อมิลลิลต
ิ ร จากสารละลาย
น้ามันเมล็ดเสาวรสเข้มข้น 200.00 มิลลิกรัมต่อมิลลิลต ิ ร
ชั่ ง น้ า มั น เ ม ล็ ด เ ส า ว ร ส 1 0 . 0 0 0 x
กรัม ละลายในเอทิล อะซิ เตตเล็ ก น้ อ ยแล้ว เทใส่ข วดวัด ปริม าตรขนาด
5 0 . 0 0 มิ ล ลิ ลิ ต ร ป รั บ ป ริ ม า ต ร ด้ ว ย เ อ ทิ ล อ ะ ซิ เ ต ต
แล้วทาการเจือจางเป็ นความเข้มข้นต่างๆ ด้วยสูตร
 46

C1V1 = C2V2

โดย C1 =
ความเข้มข้นของสารละลายน้ามันเมล็ดเสาวรสทีเ่ ตรียมไว้
V1 = ปริมาตรสารละลายน้ามันเมล็ดเสาวรสทีต ่ อ
้ งปิ เปตมา
C2 =
ความเข้มข้นของสารละลายน้ามันเมล็ดเสาวรสสุดท้ายทีต ่ อ
้ งการเจื
อจาง
V2 =
ปริมาตรของสารละลายน้ามันเมล็ดเสาวรสทีต ่ อ
้ งการเตรียม

12. การเตรียมสารละลายแอลฟา - โทโคฟี รอล เข้มข้น 1,000

ไมโครกรัมต่อมิลลิลต ิ ร
ชั่ ง แ อ ล ฟ า - โ ท โ ค ฟี ร อ ล 0 . 0 2 5 ก รั ม
ละลายในเอทิลอะซิเตตเล็กน้อยแล้วเทใส่ขวดวัดปริมาตรขนาด 25.00
มิลลิลติ ร แล้วปรับปริมาตรด้วยเอทิลอะซิเตต