TEMA.

10
Citocines
 CITOCINES

Les citocines son proteïnes petites (< 40KD) secretades per cèl.lules de
l’immunitat innata i adaptativa ( i cèls. tissulars), en resposta a microbis i altres
antígens i que actuen de mediadors i reguladors en les funcions immunes.
- Monocines, produides per fagòcits mononuclears
- Limfocines, produides per limfòcits
- Interleucines, produïdes per leucòcits que actuen sobre leucòcits

S’utilitza el terme genèric citocina ja que monocines i limfocines poden

ser secretades indistintament per monòcits, limfòcits i una gran varietat de
cèls. tissulars
 CITOCINES

Segons les seves accions biològiques podem classificar-les en tres grups:

1. Mediadores de immunitat innata

2. Mediadores de immunitat adaptativa

3. Estimuladores d’hematopoiesi
 CITOCINES

Propietats generals

- La secreció de citocines és un esdeveniment curt i auto-limitat

No són emmagatzemades com a molècules pre-formades sinó que són
sintetitzades de nou com a resultat de l’activació cel.lular.
Un cop sintetitzades són ràpidament secretades.
- Sovint influencien la síntesi i secreció d’altres citocines
- Tenen accions locals (autocrina i paracrina) i/o sistèmiques (endocrina)
- Realitzen la seva acció per unió a receptors membranals de les cèl.lules diana.
- Vida mitja curta
 CITOCINES

A la immunitat innata, les citocines sintetitzades per M i NK donen lloc a reaccions imflamatòries que
afavoreixen l’eliminació del patògen. A l’adaptativa, les citocines estimulen la proliferació i diferenciació
de limfòcits activats i activen cèl.lules efectores com p.ex. Macròfags, Cèls B i T
CITOCINES
 CITOCINES

EFECTES

Les accions de les

citocines poden ser :
- Pleiotròpiques
- Redundants
- Sinèrgiques
- Antagòniques
 CITOCINES
RECEPTORS
Receptor tipus I
També anomenats hemopoietines. Contenen dominis amb 2 cisteines
i una sequència proximal a membrana amb seqüència WSXWS (trp-
ser-X-trp-ser).
Reconeixen citocines amb 4 hèlix α (IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, GM-CSF, G-
CSF...) i també GH i prolactina.

Citocines Familia 4-α-hèlix

 CITOCINES
RECEPTORS

Receptors tipus II
Presenten 2 regions conservades de cisteines però no WSXWS
seqüències.
p.ex. receptors per a citocines α-hèlix dimèriques (IFN, IL-10)
 CITOCINES
RECEPTORS

Receptors superfamilia Ig
Contenen dominis extracel.lulars d’Ig. IL-1, M-CSF.
 CITOCINES
RECEPTORS

Receptors deTNF
Amb regions conservades riques en cisteina. Receptors trimèrics de TNF,
CD40.

Familia TNF. Trimer β-sandwich

 CITOCINES
RECEPTORS

Receptors hèlix α transmembranals

Presenten 7 dominis transmembranals. Receptors de quimiocines

Quimiocina MCP-1
(Monocyte Chemoattractant Protein)
CITOCINES

A. Clasificació segons
estructures conservades dels
dominis extracel·lulars i
transducció de senyals

B. Es mostren alguns
receptors amb subunitats
idèntiques o d’alta homologia
 CITOCINES

-Les respostes cel.lulars a la majoria de citocines consisteix en canvis en

l’expressió gènica que resulten en l’expressió de noves funcions.

Segons les seves accions biològiques podem classificar-les en tres grups:

1. Mediadores de immunitat innata

2. Mediadores de immunitat adaptativa

3. Estimuladores d’hematopoiesi
 CITOCINES INNATES

Tumoral Necrosis Factor (TNF)

És el principal mediador d’imflamació aguda en resposta a

bacteris gram-negatius. Secretada principalment per fagòcits
mononuclears.

Cèls. T activades, NK i mastòcits també poden secretar-la.

 CITOCINES INNATES

TNF
Estructura: És sintetitzat com a homotrimer de membrana. L’homotrimer és
hidrolitzar per metaloproteinases alliberant un polipèptid de 17 KDa. La
polimerització de tres polipèptids conformen el TNFcirculant (51 KDa).
 CITOCINES INNATES
TNF: ACCIÓ BIOLÒGICA

La principal funció de TNF és reclutar neutròfils i

monòcits al lloc d’infecció.

- Expressió de molècules d’adhesió

(selectines i lligand per integrines)

- Secreció de quimiocines per macròfags

i cèls. endotelials

- Estimulació de l’activitat microbicida

de neutròfils i macròfags
 CITOCINES INNATES
TNF

A infeccions severes, la secreció de elevades quantitats de TNF pot

causar patologies sistèmiques per acció endocrina:

· Febre mediada per la síntesi de prostaglandines a HT com a

resposta a TNF

· Síntesi hepàtica de proteïnes de fase aguda i hipoglicèmia

· Caquexia (estat de desnutrició i atròfia muscular)

 CITOCINES INNATES

TNF a concentracions >>

· Inhibició de contractibilitat de
miocardi i musculatura llisa
· Trombosi intravascular (> Factor
tissular i < trombomodulina)

FIG. Funcions biològiques de TNF

 CITOCINES INNATES
TNF (IL-6, IL-6, …) i SHOCK SÈPTIC
 CITOCINES INNATES
INDUCTORS SHOCK SÈPTIC
 CITOCINES INNATES
SUPERANTIGENS

Superantigens (SAgs) are a class of antigens which cause non-specific activation of T-cells resulting
in and massive cytokine release. The large number of activated T-cells generates a massive immune
response which is not specific to any particular epitope on the SAg thus undermining one of the
fundamental strengths of the adaptive immune system, that is, its ability to target antigens with high
specificity
 CITOCINES INNATES

IL-12

Principal IL mediadora de l’immunitat innata en resposta a microbis

intracel.lulars.
Consisteixen un heterodímer (35 KDa – 40 KDa)
Secretada per fagòcits mononuclears i cèl.lules dendrítiques

FIG. IL-12
 CITOCINES INNATES
IL-12
ACCIÓ BIOLÒGICA:
És crítica per inicialitzar respostes per NK i cèls. T i eliminar microbis
intracel.lulars.
- Estimulació de secreció de IFNү per cèls. NK, Tc i Th1
- Diferenciació de Th0 en Th1
- Incrementa les funcions citolítiques de NK i CD8+
 CITOCINES INNATES
IL-12
 CITOCINES INNATES

IL-1

Funció similar a TNF com a mediador de resposta imflamatòria. Secretada

monòcits (i cels. endotelials i neutròfils)
Existeixen dos (IL-1α i IL-1β) provinents de precursors de 33 KDa i secretades
com a proteïnes funcionals de 17 KDa.

- IL-1α, efectes paracrins

- IL-β, és la IL-1 més abundant a circulació.
 CITOCINES INNATES

IL-1
ACCIÓ BIOLÒGICA:
- Expressió de molècules d’adhesió a cèls. endotelials.
- Elevades concentracions de IL-1 pot tenir acció endocrina (febre, prot.
de fase aguda hepàtiques, caquexia però no shock sèptic)

FIG. IL-1α
 CITOCINES INNATES
IFN-I

Existeixen dos tipus diferents d’IFN-I: IFN-α/β (familia de 20 pèptids diferents) .

Fagòcits mononuclears són els principals productors de IFN davant infeccions
víriques
El receptors per IFN és un heterodímer de dos polipèptids relacionats
estructuralment.

FUNCIÓ BIOLÒGICA
- Inhibició de la transcripció i replicació.
Té efecte paracrí  “Estat antiviral”
- Increment en la expressió de MHC-I ( eficiencia de CD8+ i NK)
- Desenvolupament de subpoblacions Th1
 CITOCINES INNATES
IFN-I
FUNCIÓ BIOLÒGICA
 CITOCINES INNATES
IL-10

És inhibidora de macròfags activats i cèl.lules dendrítiques, per tant està

involucrada en el control de la resposta innata. És secretada per macròfags
(feedback negatiu) encara que es desconeix l’orígen en la inducció d’IL-10
inhibidora.

ACCIÓ BIOLÒGICA:
- Inhibició de producció de IL-12 secretada per macròfags i DC.
- Inhibició de l’expressió de MHC al macròfag i DC ( inhibició de
diferenciació Th1)
 CITOCINES INNATES

IL-15
Promou la proliferació de cèl.lules NK
Actua de factor de creixement per cèls. T

IL-18
Estimula la producció d’IFNү per cèls. T i NK i té acció sinèrgica amb IL-12
 CITOCINES INNATES
Cytokine Size (kD) Principal cell source Principal cellular targets and biologic effects
Tumor 17 kD; 51 kD homotrimer Macrophages, T cells Endothelial cells: activation (inflammation, coagulation)
necrosis Neutrophils: activation
factor Hypothalamus: fever
(TNF) Liver: synthesis of acute phase proteins
Muscle, fat: catabolism (cachexia)
Many cell types: apoptosis

Interleukin-1 17 kD mature form; 33 kD Macrophages, endothelial Endothelial cells: activation (inflammation, coagulation)
(IL-1) precursors cells, some epithelial cells Hypothalamus: fever
Liver: synthesis of acute phase proteins

Chemokines 8-12 kD Macrophages, endothelial Leukocytes: chemotaxis, activation; migration into tissues
cells, T cells, fibroblasts,
platelets

Interleukin- Heterodimer of 35 kD + 40 kD Macrophages, dendritic cells T cells: TH1 differentiation

12 (IL-12) subunits NK cells and T cells: IFN-γ synthesis, increased cytotoxic activity

Type I IFNs IFN-α: 15-21 kD IFN-α: macrophages All cells: antiviral state, increased class I MHC expression
(IFN-α, IFN- IFN-β: 20-25 kD IFN-β: fibroblasts NK cells: activation
β)

Interleukin- Homodimer of 34-40 kD; 18 kD Macrophages, T cells (mainly Macrophages, dendritic cells: inhibition of IL-12 production and
10 (IL-10) subunits regulatory T cells) expression of costimulators and class II MHC molecules

Interleukin-6 19-26 kD Macrophages, endothelial Liver: synthesis of acute phase proteins

(IL-6) cells, T cells B cells: proliferation of antibody-producing cells

Interleukin- 13 kD Macrophages, others NK cells: proliferation

15 (IL-15) T cells: proliferation (memory CD8+ cells)
Interleukin- 17 kD Macrophages NK cells and T cells: IFN-γ synthesis
18 (IL-18)

Interleukin- Heterodimer of unique 19 kD Macrophages and dendritic T cells: maintenance of IL-17 producing T cells
23 (IL-23) subunit and 40 kD subunit of IL- cells
12

Interleukin- Heterodimer of 28 kD and 13 kD Macrophages and dendritic T cells: inhibition of TH1 cells; role in TH1 differentiation?
27 (IL-27) subunits cells NK cells: IFN-γ synthesis
 CITOCINES ADAPTATIVES

IL-2
Factor de creixement per limfòcits T activats per antígen i l’IL responsable de
l’expansió clonal de cèls. T
Majoritàriament secretada per limfòcits CD4+ i en menor mesura per CD8+
amb un pic després de les 8-12 hores d’activació.
Es secretada com a una proteïna globular (4 hèlix α) de 14-17 KDa.

ACCIÓ BIOLÒGICA:
- Proliferació de T específics per antígen.
- Efectes anti-apoptòtics en cèls. T activades
- A elevades concentracions estimula NK incrementat la seva
capacitat citolítica
- La presència prolongada d’IL-2 promou l’apoptosi de cèls. T
CITOCINES ADAPTATIVES
 CITOCINES ADAPTATIVES
IL-4
És l’IL dels limfòcits Th2 i té la funció d’inductor i efector de aquesta subpoblació
de limfòcits CD4+.
ACCIÓ BIOLÒGICA:
- Estimula cèls. B a realitzar “switching” d’Ig a isotip IgE. També és
responsable del switching a IgG4 en humans
Animals defectius en aquesta IL tenen menys del 10% del nivells considerats
normals per a IgE.

- Estimula el desenvolupament de subpoblacions Th2 a partir de Th0

actuant com a un factor de creixement autocrí per l’expansió de cèls.
Th2
- Inhibeix l’activació de macròfags, sent antagònica d’IFNү
CITOCINES ADAPTATIVES
 CITOCINES ADAPTATIVES

IFN-ү

•La principal citocina activadora de macròfags incrementant la seva

activitat microbicida.

•Indueix switching cap a IgG (IgG2a) en cèls. B i inhibeix shitching cap

a IgE.

•Estimula diferenciació Th1 (inhibició de Th2)

•Incrementa l’expressió d’MHCs a APC.

CITOCINES ADAPTATIVES
 CITOCINES ADAPTATIVES
IL-5
La seva funció principal és la d’activar eosinòfils.

ACCIÓ BIOLÒGICA:
- Activació d’eosinòfils
- Estimula la proliferació de cèls. B i IgA.
- Col.laboració IL-4 – IL-5 contra infeccions per paràsits pluricel.lulars.
L’estimulació d’eosinòfils per IL-5 incrementa l’expressió de receptors d’ Ig i
IL-4 promou switching a IgE
 CITOCINES ADAPTATIVES
Cytokine Size (kD) Principal cell Principal cellular targets and biologic effects
source
Interleukin-2 14-17 kD T cells T cells: proliferation, increased cytokine synthesis; potentiates Fas-
(IL-2) mediated apoptosis; promotes regulatory T cell development, survival
NK cells: proliferation, activation
B cells: proliferation, antibody synthesis (in vitro)

Interleukin-4 18 kD CD4+ T cells (TH2), B cells: isotype switching to IgE

(IL-4) mast cells T cells: TH2 differentiation, proliferation
Macrophages: inhibition of IFN-γ-mediated activation
Mast cells: proliferation (in vitro)

Interleukin-5 45-50 kD; homodimer of 20 kD subunits CD4+ T cells (TH2) Eosinophils: activation, increased production
(IL-5) B cells: proliferation, IgA production (in vitro)

Interferon-γ 50 kD (glycosylated); homodimer of 21 to T cells (TH1, CD8+ Macrophages: activation (increased microbicidal functions)
(IFN-γ) 24 kD subunits T cells), NK cells B cells: isotype switching to opsonizing and complement-fixing IgG
subclasses
T cells: TH1 differentiation
Various cells: increased expression of class I and class II MHC molecules,
increased antigen processing and presentation to T cells

Transforming 25 kD; homodimer of 12.5 kD subunits T cells, T cells: inhibition of proliferation and effector functions
growth factor- macrophages, B cells: inhibition of proliferation; IgA production
β(TGF-β) other cell types Macrophages: inhibition of activation; stimulation of angiogenic factors
Fibroblasts: increased collagen synthesis

Lymphotoxin 21-24 kD; secreted as homotrimer or T cells Recruitment and activation of neutrophils
(LT) associated with LTβ2 on the cell Lymphoid organogenesis
membrane
Interleukin-13 15 kD CD4+ T cells (TH2), B cells: isotype switching to IgE
(IL-13) NKT cells, mast Epithelial cells: increased mucus production
cells Fibroblasts: increased collagen synthesis
Macrophages: increased collagen synthesis

Interleukin-17 20-30 kD T cells Endothelial cells: increased chemokine production

(IL-17) Macrophages: increased chemokine and cytokine production
Epithelial cells: GM-CSF and G-CSF production
 CITOCINES HEMATOPOIÈTIQUES

• Les citocines són necessàries per a l’hematopoiesi a moll d’ós.

Durant la resposta immnune les citocines alliberades tenen funcions
estimuladores del creixement i diferenciació de les cèl.lules progenitores
de moll d’ós.

• Mentres l’activació de la resposta immune consumeix cèl.lules;

s’estimula la producció de nous leucòcits.

• Les citocines amb accions hematopoiètiques també reben el nom de

factors estimuladors de colònies (CSF).

• Sota l’acció de diferents CSF, les cèl.lules progenitores es diferencien

en uns tipus cel.lulars o en uns altres (granulocits, fagòcits
mononuclears o limfocits)
 CITOCINES HEMATOPOIÈTIQUES
IL-7
Secretada per cèl.lules estromàtiques de moll d’ós.
Estimula la supervivència i expansió de cèl.lules limfoides

IL-3
Secretada per CD4+, estimula l’expansió de TOTS els tipus cel.lulars,
especialment de la linia mieloide.

IL-11
Es produïda per cèl.lules estromàtiques i promou la megacariocitopoiesi (usada
clinicament per deficiències plaquetàries)
 CITOCINES HEMATOPOIÈTIQUES
Stem Cell Factor (c-Kit L)
Cèl.lules pluripotencials del moll d’ós expressen un receptor producte del proto-
oncogen c-kit. La proteïna que actúa en aquest receptor (c-Kit L o Stem Cell
Factor) es sintetitzada per cèls, de l’estroma.
c-KitL sensibilitza cèls. pluripotencials a l’acció de citocines hematopoiètiques

Colonies Stimulating Factor (CSF)

Secretada per cèls. de l’estroma de moll d’ós, T, macròfags i cèls. endotelials
principalment.
Promou la maduració i diferenciació de cèls. progenitores en leucòcits
imflamatoris:
-GM-CSF
- G-CSF
- M-CSF
Hematopoiesis and the role of cytokines in vivo. Cytokines act on both multipotential progenitors and
their committed offspring. Major points, pinpointed by gene-targeting studies, at which cytokines act to
provide survival and proliferation signals and, in some cases, differentiative signals are indicated. SCF,
stem cell factor; BCP, B-cell progenitor; CLP, common lymphoid progenitor; TPO, thrombopoietin; CMP,
common myeloid progenitor; EP, erythroid progenitor; HSC, hematopoietic stem cell; GMP, granulocyte–
macrophage progenitor; MEP, megakaryocyte erythroid progenitor; MkP, megakaryocyte progenitor; TNK,
T-cell natural killer cell progenitor.
 QUIMIOCINES

Extensa familia de citocines que estimulen la migració cel·lular (citocines

quimiotròpiques). Són pèptids petits (8-12 KDa) amb ponts disulfur.
Segons els residus de Cys lligats en classifiquen en:
- CC (monòcits, limfòcits i eosinòfils)
- CXC (actuen a neutròfils)
-C
- CX3C

Promouen migració de leucòcits a llocs d’infecció

Regulen el tràfic de limfòcits als òrgans limfoides secundaris (p.ex. CCR7)
Participen en el desenvolupament de òrgans no-limfoides (p.ex. ratolins
defectius en CXCR4 tenen defectes en el desenvolupament de cor i cervell)
QUIMIOCINES
 CITOCINES
• Familia de proteïnes intermediàries de la resposta immune
innata i adaptativa.

• Produïdes per diferents tipus cel.lulars en resposta a

estímuls antigènics o imflamatoris, poden actuar a diferents
tipus cel.lulars. Algunes d’elles són estimuladores de
l’hematopoiesi.

• Activitat autocrina, paracrina i en ocasions endocrina.

• Realitzen la seva acció per unió a receptors (tipus I, II, tipus

Ig, IFN i transmembrana) d’alta afinitat.
 CITOCINES

•Citocines són crítiques per a la defensa contra microorganismes

coordinant la especialització de la resposta immune, regulant el
creixement i la diferenciació de limfòcits i amplificant els
mecanismes d’activació.

• L’excessiva producció de citocines poden tenir

consequències patològiques.

• L’administració de citocines exògenes o els seus inhibidors

és un potent mecanisme per a la modificació de les respostes
biològiques associades a malalties imflamatòries.