IMMUNOLOGIA, 2on FARMÀCIA

BLOC TEMÀTIC 3: REGULACIÓ DE LA RESPOSTA

IMMUNITÀRIA

TEMA 11. Bases moleculars de l’activació limfocítica (I). Activació

dels limfòcits
- Característiques generals de l’activació dels limfòcits T
- Co-estimulació per l’activació limfocítica
- CD28 i els seus lligands CD80 (B7.1) i CD86 (B7.2)
- Sinapsi immunològica
- Vies de senyalització en l’activació del limfòcit T
- Activació transcripcional i expressió gènica

1
Fases de l’activació dels limfòcits T
 Característiques generals de l’activació dels limfòcits T
L’activació dels limfòcits T requereix:

- Reconeixement de l’Ag (TCR) presentat per molècules MHC classe I/II

- Molècules accessòries CD4/CD8
- Molècules d’adhesió que proporcionen adhesió estable (integrines)
- Molècules co-estimuladores (segona senyal)
- Citocines (produïdes per les APC o els propis limfòcits T) que induiran la
proliferació i diferenciació

3
 Activació dels limfòcits T verges i efectors
Els limfòcits T verges (naïve):
• Reconeixen Ag i s’activen als òrgans limfàtics secundaris.
• S’expandeixen clonalment i es diferencien a limfòcits efectors o memòria.
• Necessiten ésser activats per cèl·lules dendrítiques (quantitat Ag i co-estimulació).

Els limfòcits T efectors (o memòria):

• Reconeixen Ag i s’activen als teixits perifèrics (o als òrgans limfàtics secundaris), i
desenvolupen les seves funcions efectores (Th o Tc).
• Poden ésser activats per diferents APCs (necessiten menys Ag i menys co-
estimulació).
La importància de la co-estimulació en l’activació dels limfòcits T

• En absència de co-estimulació, els limfòcits T no responen a l’Ag:

– (1) moren per apoptosi,
– o (2) entren en un estat de anergia.
• L’expressió de molècules co-estimuladores està regulada per a que els limfòcits
T s’activin al lloc i al moment adequats.
• Pot ser induïda per productes microbians o per el mateix antigen. 5
 Primera i segona senyal en las respostes
immunitàries específiques

La correcta activació dels

limfòcits T requereix dues
senyals:

-Senyal 1: Reconeixement de
l’antigen pel receptor específic al
limfòcit T.

-Senyal 2: Co-estimulació.
Les molècules co-estimuladores
són induïdes durant el
Proliferació i diferenciació dels limfòcits reconeixement del patogen pel
sistema immune innat a les APC.
A l’activació dels limfòcits T, la via co-estimuladora que es coneix millor és:

 receptor CD28 del limfòcit T

 que s'uneix a les molècules co-estimuladores B7-1 (CD80) i B7-2 (CD86)
expressades en les APC.
 Presentació antigènica: Molècules involucrades

LFA-1: antigen de funció limfocitària 1 (integrina)

ICAM-1: molècula d’adhesió intracel·lular 1 (família de les immunoglobulines)
7
Esdeveniments primerencs i tardans en l’activació de les cèl·lules T
síntesi DNA
increment síntesi proteïna
Estimul increment síntesi mRNA
increment calci
activació cinases

Limfòcit
Limfoblaste Limfoblastes
no-activat
(resting)

Els fenòmens bioquímics inicials son:

-agrupament dels receptors de membrana (formació de la sinapsi immunitària)

-fosforilació de tirosines en certes proteïnes
-reclutament i l’activació de proteïnes adaptadores
-increment de la concentració intracitoplasmàtica de Ca2+ i segons mitjancers
lipídics
-activació de cascades bioquímiques (MAP cinases, Proteïna Cinasa C i
Calcineurina)
-reorganització del citoesquelet i activació de factors de transcripció 8
 Sinapsi immunològica

Talin (associated with cytoplasmic tail of LFA-1):

green
PKC-Q (associated with TCR): red

9
 Principals funcions de la sinapsi immunològica

- Promoure la senyalització: reclutament y activació de kinases

- Finalitzar la senyalització: reclutament de fosfatases,

ubiqüitina ligases, receptors inhibidors (p. e. CTLA-4) al lloc del
complex TCR

- Dirigir molècules efectores cap cèl·lules dianes rellevants:

citocines, CD40L, perforina etc
Vies de senyalització després de l’activació del limfòcit T

11
 Molècules que participen en l’activació dels limfòcits T

Tirosincinases:
Familia Src: lck (associada a CD4 i CD8), fyn (associada a CD3).
Familia Syk: ZAP-70 (associada a la cadena z (zeta)).

Tirosinfosfatases:
Transmembrana: CD45, activa les tirosincinases associades a CD4 i CD8
(lck).
Citosòliques: SHP-1 i SHP-2, inactiven proteïnes tirosinfosforilades

Adaptadors:
Transmembrana (LAT, SIT, PAG)
Citosòlics (Grb-2, SLP-76, Cbl-b)
(Cinases: enzims que afegeixen grups fosfat -> fosforilació;
Fosfatases: enzims que eliminen grups fosfat -> defosforilació)

Opposing actions of protein tyrosine kinases (PTKs) and protein tyrosine phosphatases (PTPs) determine the
level of tyrosine phosphorylation at any time
12
Vies de senyalització després de l’activació del limfòcit T
Via del inositol trifosfat

NFAT- P (inactiu)
IP 3 Ca2+
Calcineurina
Calmodulina
NFAT (actiu)

PIP2

DAG

nucli

13
Ciclosporina A

14
Cinètica de l’expressió de diversos gens després de
l’activació del limfòcit T

15
Lymphocyte clonal expansion

16
LLEIS DEL TRASPLANTAMENT (MEMORIA)

17
 TIPUS DE REBUIG

1. Rebuig hiperagut: minuts després del trasplantament; trombosi vascular (obstrucció dels
vasos sanguinis) i isquèmia irreversible; per anticossos pre-formats contra antígens ABO o
MHC naturals o induïts (transfusions, embaràs o transplantaments previs)
2. Rebuig agut: te lloc dies o setmanes després; activació primària de cèl·lules T
- Vascular: vasculitis, causat per anticossos anti-MHC i limfòcits T citotòxics
- Cel·lular: necrosi del parènquima principalment produïda per limfòcits T citotòxics
3. Rebuig crònic: mesos o anys; causes poc clares (anticossos, immunocomplexes, resposta
cel·lular lenta); fibrosi i pèrdua de estructura tissular normal; causa principal actual de pèrdua
de l’empelt

hiperagut agut agut crònic

(trombòsis) (infiltrat interstici) (endotelitis) (arterioscleròsi)
18
Material complementari

19
Vies de senyalització després de l’activació del limfòcit T

20
Multiple costimulatory and coinhibitory ligand-receptor interactions
ultimately determine the amplitude of T-cell activation

21
Interaccions lligand-receptor co-inhibidores: CTLA-4-B7
com un exemple
 Therapeutics based on the B7:CD28/CTLA-4 family
1. Costimulatory blockade
CTLA-4.Ig is being tested in
diseases caused by
excessive T cell activation --
rheumatoid arthritis
(FDA approved), psoriasis,
graft rejection

2. Coinhibitory blockade
Anti-CTLA-4 antibody is
used for tumor
immunotherapy
(enhancing immune
responses against tumors)