BİYOKİMYA LABORATUVARI II

C VİTAMİNİ
TAYİNİ
Mustafa Efe ŞENGÜL

2019144018

17.03.2022
Deneyin Amacı:
Kuvvetli indirgeyici olan askorbik asitin 2,6 diklorofenol- indofenol boya çözeltisi ile yapılan
titrasyon sonucu oluşan dehidro askorbik asitin meydana getirdiği pembe renk ile numunedeki
askorbik asit miktarının hesaplanması.

Teorik Bilgi:
VİTAMİNİN TARİFİ

Vitaminler doğal olarak besinler içerisinde yer alan, büyük çoğunluğu ile dış kaynaklı,
büyüme, çoğalma ve sağlığın devamı için gerekli az miktarları ile etki yapan organik
bileşiklerdir. Vitaminler yapı taşı veya enerji kaynağı olarak kullanılmazlar. Genellikle ısıya
dayanıklı maddelerdir.

VİTAMİNLERİN SINIFLANDIRILMASI

Vitaminler yağda çözünen vitaminler, suda çözünen vitaminler olarak iki sınıfa ayrılırlar.

1- Yağda Çözünen Vitaminler:

 Vitamin A (A vitaminleri)
 Vitamin D (D Vitaminleri)
 Vitamin E (E Vitaminleri)
 Vitamin K (K Vitaminleri)

2- Suda Çözünen Vitaminler:

 Tiamin (B1 Vitamini)
 Riboflavin (B2 Vitamini)
 Niasin (B3 Vitamini, PP Vitamini)
 Pridoksin (B6 Vitamini)
 Pantotenik asit
 Biotin
 Folik asit
 C Vitamini
 Vitamin B12 [1]

1
YAĞDA ÇÖZÜNEN VİTAMİNLER

1- A Vitamini: Görme, büyüme, üreme, embriyo gelişmesi, kan yapımı, bağışıklık

sistemi ve doku hücresi farklılaşmasında gerekli bir vitamindir.
Eksikliğinde: Çocuklarda normal büyüme ve gelişme sağlanamaz , deri kuru ve
pütürlü olur,
bağışıklık sisteminin bozulur ,sindirim sistemi organlarının bozularak ve mide yaraları
oluşur.

2- D Vitamini: En önemli işlevi kalsiyum metabolizmasını denetlemek ve

düzenlemektir. Kemikler kalsiyum deposudur. Kalsiyumun kemiklere taşınmasına ve
yerleşmesine yardımcı olur. Aynı zamanda fosfor metabolizmasına da yardımcı
olmaktır.
Eksikliğinde: Raşitizm ve buna bağlı kemik ve dişlerde bozukluk görülür.
Dişler geç çıkar. Kafa kemikleri yumuşar ve eğrilir. Eklemlerde şişkinlik görülür.

3- E Vitamini: Hücre zarının koruyucusudur (antioksidan). Damar içerisinde akışkanlığı

sağlar, damar tıkanıklığını önler (ateroskleroz). Erken doğmuş bebeklerde demirin
kullanılmasına yardımcı olarak anemi (kansızlık) oluşumunu önler.
Eksikliğinde: Günlük besinler içinde yeterli miktarda bulunduğundan yetersizlik
belirtilerine insanlarda sıklıkla rastlanmamaktadır. Ancak deney hayvanlarında
kısırlığa, kalp ve diğer kaslarda yorgunluğa, karaciğer hastalıklarına, kırmızı kan
hücrelerinin kolayca parçalanmasına neden olmaktadır.

2
 4- K Vitamini: Kanın pıhtılaşma etmeni olarak tanımlanan vitamin K günlük
yiyeceklerimizde yeteri kadar bulunduğu ve kalın bağırsakta bakterilerce yapıldığı için
yetersizliğinde oluşan bir hastalık tanımlanmamıştır. Emilimi için safra asitlerine ve
yağa ihtiyaç vardır.

SUDA ÇÖZÜNEN VİTAMİNLER

1- TİAMİN (B1 Vitamini): En önemli görevi enerji metabolizmasındadır. Değişik

besinlerle vücuda alınan besin öğelerinin vücutta enerjiye çevrilmesi, yine en önemli
enerji kaynaklarından olan karbonhidratlardan enerji yapımında B1 vitamininin
önemli bir işlevi vardır.
Eksikliğinde: Yorgunluk ve isteksizlik, iştah azalması, kusma ve sindirim sisteminde
bozukluklar, kalp yetmezliği , huzursuzluk sıklıkla görülen yetersizlik belirtileridir.
Beriberi denilen ve sinir sistemi bozukluğu şeklinde tanımlanan, eklemlerde şişlik ve
ağrı, denge bozukluklarına neden olan hastalıklar en önemli yetersizlik belirtisidir.

2- RİBOFLAVİN (B2 Vitamini): Işığa duyarlı olması nedeniyle riboflavin bulunan

yiyecekler ışıkta bekletilmemeli, suda eriyen bir vitamin olduğu içinde sebzelerin
pişirilme suyu ve yoğurdun suyu dökülmemelidir. Karbonhidrat, protein ve yağların
metabolizmasında görev alan riboflavin bir düzenleyicidir.

3
Eksikliğinde: Deride yaralar (dermatit), dudaklarda ve göz çevresinde kesik şeklinde
yaralar oluşur. Sinir sisteminde bozukluk, anemi (kansızlık) görülebilir. Gözde yanma ve
kızarıklık, ishal oluşabilir.

3- NİASİN (B3 Vitamini, Nikotinik Asit): B grubu vitaminlerinden biri olarak

karbonhidrat, protein ve yağ metabolizmasında görevlidir.
Eksikliğinde: Diyette yeterince niasin alınmaması sonucu sinir sistemi, sindirim
sistemi ve güneş gören deride simetrik yaralarla kendini gösteren pellegra hastalığı
oluşur. Pellegra hastalığı daha çok tek yönlü beslenen; özellikle de sadece mısır
tüketen toplumlarda görülür. Hastada iştahsızlık, halsizlik belirtileri yaygın olup, kol
ve bacakların güneş gören yerlerinde yaralar oluşur. Depresyon yani ruhsal bozukluk
hastalarda yaygındır.

4- Pridoksin (B6 Vitamini): Protein, yağ ve karbonhidrat metabolizmasında

yardımcıdır. B6 vitamini aynı zamanda bağışıklık sistemi için gereklidir.
Eksikliğinde: En önemli bulgu sinir sisteminde, kan hücrelerinde görülür. Deride
yaralar oluşur. Sinir sistemi bozukluğuna bağlı olarak bayılma nöbetleri görülür.

4
 Dudak kenarları ve dilde yaralar, huzursuzluk ve kansızlık, çocukluk çağında sık
görülen B6 vitamini eksikliklerinden biridir. Büyüme geriliği, sindirim sistemi
bozukluğu ve böbrekte taş oluşumu da B6 eksikliğinde görülen hastalıklardan
bazılarıdır.

5- Pantotetik Asit: Karbonhidrat, protein ve yağ metabolizması için gerekli B grubu

vitaminlerden biridir. Sinir sisteminin, bazı hormonların çalışmasında ve yağların
sentezinde etkindir. Pantotenik asit suda erir, besinlerin pişme suyuna geçer, asit ve
alkalilere karşı duyarlıdır.
Eksikliğinde: Pantotenik asit yetersizliğinde insanlarda kusma, karın ağrıları ,kasılma
nöbetleri, yorgunluk gibi belirtiler saptanmıştır. Laboratuvar hayvanlarında yapılan
deneylerde büyüme geriliği, kısırlık, sinir sistemi bozukluğu, saç renginde değişme,
deride yaralar, ince barsak ülserleri, saç dökülmesi şeklinde bulgular vardır. Fazlalık
belirtileri bilinmemektedir.

6- Biotin (B7 Vitamini): Biotin bazı hayvanlar için büyüme etmeni olarak yumurta
akında bulunmuştur. Kayıplara dayanıklı bir vitamindir; ancak suda çözünür. Biotin,
vücudumuzda ince barsak bakterileri tarafından sentezlenir. Karbonhidrat
metabolizmasında görev alır ve enerji oluşumuna katkı verir.
Eksikliğinde: Günlük tükettiğimiz besinlerde biotin yeterli miktarda bulunduğundan
eksiklik belirtileri görülmemektedir. Halk arasında besleyici olur düşüncesi ile
yumurta çiğ olarak tüketilmektedir. Çiğ yumurta akında avidin adlı bir protein vardır
ve bu protein biotinin vücutta kullanılmasını engeller. Çiğ yumurta yiyenlerde saç
dökülmesi, deri yaraları oldukça sık görülen durumlardır. O nedenle yumurtanın
pişirilerek tüketilmesi vücut için daha yararlıdır. Yetersiz tüketiminde deri yaraları,
iştahsızlık, kas ağrıları, solukluk gibi belirtiler ortaya çıkar.

5
7- Folik Asit (B9 Vitamini): Amino asit ve kan hücrelerinin yapımı için gereklidir.
Folik asitin vücutta deposu yoktur ve bağırsaktaki mikroorganizmalar tarafından da
sentez edilir. Vücutta görev yapabilmesi için C vitaminine ihtiyaç vardır.
Eksikliğinde: Kan yapımında azalma olmaktadır. Özellikle gebe kadınlarda ve
çocuklarda yetersizlik belirtileri yaygındır. Alkoliklerde de folik asit yetersizliği
görülebilir.

8- C Vitamini (Askorbik Asit): Bağ dokularını bir arada tutan. Zehirlenmeler ve ateşli
hastalıklarda vücudu koruyan ve bağışıklık sistemini güçlendiren bir vitamindir.
Vücudumuzda kan yapımı için gerekli olan demir ve folik asidin kana geçmesini
kolaylaştırır ve kullanımını arttırır. Böylelikle kansızlığı önler. Damar çeperlerini
güçlendirerek kanamaya ve gözde katarakt oluşumuna engel olur. Meme kanseri ve
güneş ışınlarının oluşturduğu deri kanserlerinin gelişimini yavaşlatır. Antioksidan bir
vitamindir. Oksidasyondaki ve redüksiyondaki rolü nedeniyle hemen hemen her canlı
dokuda bulunan askorbik asit beyaz, kristal halde bir bileşiktir. [3]
Eksikliğinde: Vitamin C yetersizliğinde; diş etlerinde kanama, dişlerde anormallikler,
yorgunluk, isteksizlik ve eklem ağrıları görülebilir. Aşırı yetersizliği skorbüt
hastalığına neden olur. Diş etlerinde kanama, eklemlerde şişlik ve ağrılarla belirti
veren skorbüt hastalığını tedavi eden vitamin olarak bilinmektedir.. Ateşli hastalıklara
dirençsizlik, sık hasta olma, bağışıklık sisteminin zayıflığı da yetersiz alıma
bağlanabilir. Fazla alındığı takdirde idrarla atılır. İhtiyaçtan çok fazla alımlarda
böbreklerde taş oluşumuna, ishale, allerjik deri belirtilerine neden olabilir.

6
9- B12 Vitamini: Bağışıklık sisteminde, protein metabolizmasında, sinir sisteminde ve
kemik iliğinde kan hücrelerinin yapımında görevlidir.
Eksikliğinde: Sinir sisteminde bozukluklarla pernisiyöz anemi oluşur. Kol ve
bacaklarda uyuşma, duyu azalması, ruhsal bunalım ve kasılmalar en belirgin eksiklik
belirtisidir. Özellikle sadece bitkisel kaynaklı besin tüketenlerde, besinlerin
saklanması ve pişirilmesindeki aksaklıklarda vitamin kaybı çok olmaktadır.

7
  2,6 diklorofenol-indofenol ile C Vitamini Tayini Reaksiyonu:

L
-

Askorbik asit + 2,6-Diklorofenol-indofenol Dehidroaskorbik + Löko boyası(renksiz)

Hesaplamalar:
İlk olarak titrant derişimi bulunur. 1 mol askorbik asit 1 mol boyayla reaksiyona girer.

Askorbik asidin molünü ve Ma’sını (176,13 g/mol) biliyoruz. Buradan mg/100mL bulunur.
Boyanın derişimi biliniyor. Meyve suyunda ne kadar askorbik asit var bulunur.

8
9
Yorum – Sonuç:
1. Yaptığımız deneyde portakal içersinde ( 2mL meyve suyunda) C vitamin (askorbik
asit ) 12,42 mg/100ml bulduk. Numune  2,6-diklorofenolindofenol (boya) çözeltisi ile titre
edilerek numunedeki  askorbik asit miktarının hesaplanması prensibine dayanır. 2,6-
diklorofenolindofenol çözeltisi titrasyon esnasında askorbik asit tarafından
indirgenirken, asitin kendisi okside olarak dehidroaskorbik asit oluşur. Titrasyonun son
noktasında, ortamda askorbik asitin tamamen bitmiş olması nedeniyle artık reaksiyona
girmeyen 2,6-diklororfenolindofenolun verdiği pembe renk görülür.
2.  Deneyde Askorbik asidi stok çözelti, saf suyu seyreltme amaçlı ve stabilizör olarak
okzalik asit, boya çözeltisi hazırladık.Ben deneye başlarken rengin artacağını
düşünmüştüm ancak boya çözeltisi indirgen bir madde olduğundan deney sonuna doğru
rengin artmadığını tersine azaldığını gözlemledim.
3. Deneyde kloroform eklememizin nedeni ; renk değişimini görmek içindi. Ayrıca
kloroform reaksiyonu hızlandırdığı için deneyi daha kısa sürede tamamlamış olduk.
4. C vitamini suda çözünen  vitaminler arasında en az  stabil olandır. Bazı oksi
doredüksiyon olaylarında kosubstrat  olarak görev alır. En güçlü antioksidandır.
Askorbik asit indirgen bir maddedir bu nedenle oksijen, nitrat, sitokrom A, sitokrom C,
indirgeyici bir kapasitesi vardır.
5. İnsan vücudu C vitamini üretmez. Besinlerle alınan C vitamini 2 saat içerisinde
kullanılır, 4 saat sonunda kandan uzaklaşır. İnsan vücudu için gereksinim 60mg/gün ve
vücut C vitaminini 1.5 gr depo eder.
6. Kivi, turunç,portakal ve limonun deney sonundaki askorbik asit değerlerine bakacak
olursak; portakalda 12,42 mg askorbik asit, limonda 0,1493 mg askorbik asit, turunçta
9,7 mg askorbik asit ve kivide 1,036 mg askorbik asit tayin edildi. Burada içersindeki
Askorbik asit ( C Vitamini) miktarlarını kıyaslayacak olursak; Portakal > Turunç >
Limon > Kivi olarak buluruz yani içersinde en fazla C vitamini bulunduran Portakalken en
az bulunduran kividir.

Kaynaklar:

1. file:///C:/Users/musta/Downloads/Vitaminler%20ve%20Enzimler.pdf [1]
2. https://sbu.saglik.gov.tr/Ekutuphane/kitaplar/B%202.pdf [2]
3. https://dergipark.org.tr/en/download/article-file/308831 [3]

10
11