不孕不育基因筛查

2018.07.23
科室会

科室会共31场
科室会
凯瑞安 BL 技术类 MaReCs
SPGD
2% 1% 3% 16%
8%

PGS
科室会内容占比
12%

NICS
16%

POC
11%

IFGS
31%
科室会

东北 华北
19% 13%

科室会区域占比
华东
19%

华南
26%
华中
23%
协助拜访
协助拜访：共完成现场支持 60+次，31家医院
科研项目
13%
NICS
29%

产品推广
13%

新产品调研
10%

临检报告解读及解 PGD资质申报
释 16%
19%
主要工作完成情况概述
1400 1320

1200

1000

800
703

600
473
400
291 286
224 218 226
200 176
132
58 69
0
IFGS NICS marecs PGS POC SPGD
第一季度 第二季度
Question？
目 录/CONTENTS

项目背景

项目简介

男性不育基因筛查

女性不孕不育基因筛查
项目背景

 中国目前女性怀孕后自然流产率高达10%-15%；

 全国不孕不育患者已超过4000万，占育龄夫妇比例12.5%；

 中国平均每8对夫妻中就有一对遭遇生育难题，不孕不育发病率20年增长8到15倍。

——中国人口协会《 不孕不育现状调研报告（2010年）》
项目背景

 全国不孕不育患者已超过5000万，占育龄夫妇比例15%，以25-30岁为主，呈年轻化趋势，平均
每8对育龄夫妇就有1对面临生育困难。西南地区不孕不育发生率高达20%！

 可以预计中国更真实的不孕不育患病率趋向25%-30%，即生育年龄积极要孩子的每4对或3对夫妇
就有一对遭遇不孕不育！

——《 2012年中国育龄女性生育环境抽样调查》
不孕不育的致病原因

不明原因
神经过度紧张
免疫因素： 双方因素, 10%
10% 感染性疾病： 内分泌异常：
抗精子抗体、封闭抗
宫内感染导致 激素水平低导
体
男方因素, 的流产、畸 致的生化妊娠
40% 或早期流产
胎、死胎

生精障碍：
女方因素, 遗传学因素：胚胎染
无精、少弱精子
40% 色体数目异常或单基
输精障碍：
排卵障碍 因病引起的流产或死
梗阻性无精症
输卵管阻塞或畸形 胎、畸胎等
子宫内膜异位症
盆腔粘连
激素异常
高龄

• 约15%到30%的男性不育和约10%的女性不孕是由于遗传异常导致的
• 遗传异常主要分为二类：染色体异常和单基因遗传病
O'Flynn O'Brien K L, , et al. Fertility & Sterility, 2010, 93(1):1.
Foresta C, et al. European Journal of Human Genetics Ejhg, 2002, 10(5):303-12.
不孕不育的致病原因

男性不育
遗传因素占比15-30%。

染色体异常：在遗传因素的不育男性中占比最高，在不育男性中占5.8%。

Y染色体微缺失：在遗传因素的不育男性中占比第二，占5-10%。

其他基因突变：在遗传因素的不育男性中占比第三。

女性不孕不育
10%的女性不孕不育是由遗传异常引起的，染色体异常造成的原因据估计占3.3-8%，其余为基因突变。
遗传学病因筛查指南

共识和指南推荐的主要检测项目

男性 女性

• 染色体核型分析 • 染色体核型分析
• Y染色体微缺失 • 单基因
• 单基因
目 录/CONTENTS

项目背景

项目简介

男性不育基因筛查

女性不孕不育基因筛查
不孕不育基因筛查 - 男性项目（54个基因+Y染色体微缺失）

疾病名称 对应症状 检测基因

先天性输精管缺如（CAVD） 梗阻性无精症 CFTR

精子发生障碍 非梗阻性无精症、严重少精 KLHL10、SYCP3、CATSPER1 等9个基因

Y染色体微缺失 非梗阻性无精症、严重少精 AZF

圆头精子症 罕见但严重的畸形精子 SPATA16、AURKC、DPY19L2

原发性纤毛运动障碍 严重的弱精症 DNAH5、DNAH11、CCDC39 等17个基因

隐睾症 隐睾 INSL3

雄激素不敏感症（AIS） 完全型、部分型和轻型AIS AR

特发性低促性腺激素性性腺功能 伴有嗅觉障碍的卡尔曼综合征(KS）和嗅觉
LHCGR、SPRY4、IL17RD 等22个基因
减退症（IHH）
正常的IHH(nIHH)
不孕不育基因筛查 - 女性项目（45个基因）

疾病名称 对应症状 检测基因

40岁以前即闭经，FSH和LH上升，E2
卵巢早衰（POF） FMR1、BMP15、PSMC3IP 等18个基因
下降

反复促排卵无法获得成熟卵子，体
卵母细胞成熟缺陷 ZP1、TUBB8
外培养不能成熟，ICSI不能受精

自发性卵巢过度刺激综合征 FSHR

妊娠第28周之前出现连续2次或2次
复发性流产 FV、FII
以上的自然流产

特发性低促性腺激素性性腺功
能减退症 原发闭经和不孕 LHCGR、SPRY4、IL17RD 等22个基因
不孕不育基因筛查- 项目参数

检测内容 检测技术方法
适用人群：不孕不育的育龄人群 全外显子

男性：54个基因+Y染色体微缺失
全外显子+SNV或Small Indel 探针捕获+NGS
女性：44个基因+FMR1 CGG重复
可变剪接区域
样本类型：外周血（2ml以上）
FMR-1基因CGG重复 毛细管电泳检测
报告周期：15个自然日
Y染色体AZF基因 经典的PCR检测
目 录/CONTENTS

项目背景

项目简介

男性不育基因筛查

女性不孕不育基因筛查
男性不孕不育基因筛查–Y染色体微缺失

Y染色体AZF区段示意图

• 男性原发无精子症和少精子症患者中约有7%~15%存在Y 染色体AZF区域的微缺失

• 可以遗传给男性后代
男性不孕不育基因筛查–Y染色体微缺失

AZF各区域缺失的临床表型和指导意见

缺失区域 临床病理表现 临床指导意见 发生频率

临床无精子症，病理类型多为唯支持细胞
AZFa 0.5-4%
综合征（SCOS综合征）

AZFb 临床无精子症，病理类型为SCOS综合征或 1-5%

因睾丸中无精子生成，不推荐睾丸取精
精子发生组织导致的无精子症
AZFb+c （TESE*或者micro-TESE*）行ICSI助孕。 1-3%
可领养孩子或进行非配偶间人工受精
临床无精子症。核型检查通常是46，XX性
AZFa+b+c
反转男性综合症（46，XX male）或等臂双 NA
着丝粒Y染色体（iso（Y）*）

临床表型和睾丸组织学类型多种多样，以 建议尽早生育或者精子冷冻保存，近
无精子症、严重少精子症、精子数进行性 50%可通过睾丸穿刺获得精子行ICSI受
AZFc 约80%
下降最为常见。罕见情况下，也可自然垂 孕。这些患者的男性后代都将是AZFc缺
直遗传给其男性后代 失的携带者，可建议生育女婴。
男性不孕不育基因筛查–Y染色体微缺失

案例-无精症

检测项目：

精子发生障碍+Y染色体微缺失

检测结果： Y染色体AZFc缺失

指导建议：考虑PGD，筛选女孩
男性不孕不育基因筛查–圆头精子症
• 圆头精子症（Globozoospermia）

– 罕见而严重的畸形精子症，患者精子头部呈圆形、顶体缺失或异常，不能使卵子受精而导致患者不育，
约占男性不育原因的0.1%。

• 致病基因及检测意义

– 常染色体隐性遗传病，具有遗传异质性，任何参与顶体形成过程的相关基因发生突变都可能导致顶体
异常或缺失进而形成圆头精子。

– 文献报道的SPATA16, DPY19L2 和AURKC 等3个圆头精子症致病相关基因，其中SPATA16和DPY19L2

与顶体形成密切相关，AURKC在生成精子的减数分裂过程中起到关键作用。

• 临床建议

– ICSI治疗是圆头精子症患者获得后代的唯一途径，辅以钙离子激动剂激活卵母细胞可以提高受精率。

– 配偶进行基因筛查进行基因诊断和遗传咨询，讨论行PGD治疗的必要性和可行性，以降低子代再次致
病导致不育的风险。
男性不孕不育基因筛查–圆头精子症

案例-圆头精子症

检测项目：

精子发生障碍+Y染色体微缺失

检测结果： DPY19L2纯合突变

指导建议：

家系验证位点，考虑PGD必要性
男性不孕不育基因筛查–圆头精子症

单精子突变位点验证：精子均携带致病位点

突变位点一代测序图
男性不育基因筛查 - 先天性输精管缺如
• 先天性输精管缺如（CAVD）
– 梗阻性无精症的重要原因，临床上分为先天性双侧输精管缺如(CBAVD)
和先天性单侧输精管缺如(CUAVD)。
– CBAVD在男性不育症中占1%～2%，CUAVD占0.4%, CUAVD患者多数因对侧生殖系存在先天性或
后天感染等病理因素而同时合并无精症。
• 囊性纤维化跨膜转导因子基因（CFTR）突变
– 囊性纤维化病与CFTR突变明确相关，患者多以慢性肺部疾患，胰腺功能不足等就诊，检查时可发
现汗液中电解质浓度升高等典型的囊性纤维化病症状，这类患者通常为CFTR纯合突变（常染色体
隐性遗传的疾病）。
– CBAVD与CFTR突变相关，约80%的CBAVD患者检测出CFTR基因突变，这类患者通常携带有一个
正常的CFTR拷贝；CUAVD病例报道较少，其CFTR突变检出率较CBAVD要低，从0到50%不等。
• 临床建议：
– 采用显微外科附睾精子吸引术(MESA)与ICSI结合进行治疗，可有效提高生育率。
– 另行PGD挑选健康胚胎移植，防止囊性纤维化患者、CAVD患者或携带者的出生。
男性不育基因筛查 - 先天性输精管缺如

案例-单侧输精管缺如

检测项目：

先天性输精管缺如+Y染色体微缺失

检测结果： CFTR基因2个突变位点

指导建议：家系验证位点，考虑PGD必要性
男性不育基因筛查 - 精子发生障碍

• 精子发生障碍：
– 精子发生是从精原细胞经增殖分化、减数分裂形成精子的复杂过程。

– 基因突变导致精子生成障碍，临床上表现为非梗阻性无精子症或严重少精。

• 致病相关基因
– 9个有文献报道的与精子发生障碍相关的致病基因KLHL10,CATSPER1和NANOS1等；

– 遗传模式包括常染色体显性、常染色体隐性和X染色体连锁隐性（TEX11）等。

• 临床建议
– 临床上尚无治疗手段逆转此种精子异常，部分严重少精症患者可考虑行ICSI治疗以增加
成功获得后代的可能性；
目 录/CONTENTS

项目背景

项目简介

男性不育基因筛查

女性不孕不育基因筛查
问题?

1. IFGS意义是什么？怎么指导临床？

2. 怎么这个患者没有检出突变？

3. 这个患者检出了一个突变，但是致病意义不明，要怎么办啊？
女性不孕基因筛查 - 卵巢早衰

• 卵巢早衰(premature ovarian failure, POF)

– 卵巢整体功能受损,包括卵巢储备不足以及无排卵, 临床特点包括：年龄<40岁；闭经≥4个月；性激
素异常,血清FSH和LH水平升高，而E2水平下降。
– 引起POF的原因很多，包括遗传因素、自身免疫、环境因素和医源性损伤等，其中遗传性基因变异
是重要致病因素。

卵巢早衰致病相关基因
卵巢发育不良 促性腺激素分泌障碍 卵泡或卵母细胞成熟障碍 脆性X综合征

PSMC3IP BMP15、EIF2B2、EIF2B4、
STAG3、MCM8、ERCC6、
NR5A1 EIF2B5、FIGLA、FOXL2、 FMR1
PGBD3、SYCE1、FSHR
POF1B HFM1、 NOBOX
女性不孕基因筛查 – 卵巢早衰
• 脆性X相关智力低下基因-1(FMR-1)突变
– FMR-1位于Xq27.3 处, 其5‘非编码区包含有CGG重复序
• 临床建议：
列, 是X染色体脆性的形成部位, 也是基因突变的常见目
– 尽早生育子女，对患者行卵巢活检，行
标区域, 这一区域常常多样且不稳定。
IVF 术前的雌激素刺激意义都不大。
– 散发性POF人群中，前突变携带率0.8～7.5%；家族遗传
性POF中，前突变携带率13%。 – 对高风险人群应尽早提供相应的咨询，建
立自身生育计划或考虑生殖能力保存方

FMR1基因型
CGG重复次数
临床意义 法，如卵巢组织冷冻等，并结合AMH值等
（N）
卵巢功能标记物进行密切随访。
正常型 N<45 低风险
中间型 N=45～55 风险不明确 – 鉴于前突变携带者后代有患脆性X综合征
的风险，建议专业遗传咨询，建议捐卵
21%发展成为POF，卵巢功能不足风险增
前突变型 N=55～200
高；后代患有脆性X综合征的风险增高。 IVF，或者PGD治疗

全突变型 N>200 脆性X综合征患者

女性不孕基因筛查 – 卵巢早衰

案例-卵巢早衰

检测项目：卵巢早衰相关基因

检测结果： FMR1前突变（74个CGG）

指导建议：考虑PGD
女性不孕基因筛查 –卵母细胞成熟缺陷

卵母细胞成熟缺陷

研究对象：24个具有卵子成熟障碍的家系
结果：24个家系中，7个家系存在TUBB8基因突变

TUBB8发生突变影响依赖伴侣蛋白的折叠以及α/β-微
管蛋白异二聚体组装过程，破坏了体外培养细胞的微
管表达方式，改变了体内微管动力学，导致纺锤体组
装过程出现严重缺陷，进而造成小鼠和人类卵母细胞
的发育停滞。

N Engl J Med. 2016 Jan 21;374(3):223-32. doi: 10.1056/NEJMoa1510791.

女性不孕基因筛查 –卵母细胞成熟缺陷

案例-卵母细胞不成熟，MI阻滞

检测项目：卵母细胞成熟缺陷相关基因

检测结果： TUBB8杂合突变
卵母细胞成熟障碍-TUBB8
首次明确卵子成熟障碍是显性遗传病

突变由父亲遗传给女儿，TUBB8可能是疾病的原因？

卵子纺锤体组装异常
卵母细胞成熟障碍-TUBB8

收录为新的孟德尔遗传病

• TUBB8是构成人类卵子纺锤体的主要成员；TUBB8突变可以解释高达30-40%的卵子MI组织病人
• TUBB8突变遗传模式多态性，显性遗传/隐性遗传/dovo
• TUBB8突变病人表型多样性：卵子完全不成熟；有一些形态可见的成熟卵子，但受精后，表现为
胚胎发育阻滞；大部分成熟，但不受精
• 通过检测TUBB8是否突变，可以用来判断卵子的真实质量
女性不孕基因筛查 –激素水平异常
• 特发性低促性腺激素性性腺功能减退症(idiopathie hypogonadotropic hypogonadism，IHH)
– 是一种较常见的内分泌疾病。因先天性下丘脑GnRH神经元缺陷、或GnRH合成、分泌或作
用障碍，导致垂体分泌促性腺激素减少，进而引起性腺功能不足。

– 国内尚缺乏流行病学数据，国外数据显示总体发病率为1~10/100,000,男女比例为1:5。约有
1/3的患者可以找到这些基因的突变。

• 基因突变检测
– 目前已明确20余种基因突变可导致IHH，且近年来每年

发现1-2种IHH新致病基因。
激素水平异常-LHCGR

中山大学孙逸仙纪念医院 袁萍、杨冬梓等人 2017年4月在Human Reproduction

图1：家族遗传分析 表1 46例XX女性为LHCGR基因的表型和LHCGR基因型
Yuan P, He Z, Zheng L, et al. Human Reproduction, 2017, 32(4):1.
女性不孕基因筛查 –激素水平异常

案例-反复取卵未获卵

检测项目：女性全项

检测结果： LHCGR纯合突变

指导建议：调整促排方案
女性不孕基因筛查 –激素水平异常
女性不孕基因筛查 –激素水平异常
女性不孕基因筛查 –激素水平异常

案例-促卵卵泡不生长

检测项目：女性全项

检测结果： FSHR杂合突变

指导建议：调整促排方案
女性不孕基因筛查 –激素水平异常
女性不孕基因筛查 –激素水平异常

案例-原发不孕

检测项目：女性全项

检测结果： FSHR杂合突变
女性不孕基因筛查 –激素水平异常
不孕不育基因筛查检出率
突变位点检出率：38.54%，致病位点检出率：9.38%

项目 突变检出率 致病突变检出率

男性全项 73.33% 17.78%

Y染色体微缺失 6.67% 6.67%
精子发生障碍 30.43% 8.70%
先天性输精管缺如 20.00% 6.67%

女性全项 73.91% 8.70%

多发性流产 0.00% 0.00%
激素水平异常 100.00% 100.00%
卵巢早衰 20.45% 4.55%
卵母细胞成熟缺陷 28.57% 0.00%
推广策略

男性输精管缺如单项

卵母细胞成熟缺陷单项

男性全项

女性全项

能否搭配BL一起？
竞品

公司 基因数目 周期 优势
贝康医疗 男性：67 20个工作日 ？
女性：57

亿康基因 男性：54 15个自然日 ？

女性：45

明码 全外显子 10周 ？
不孕不育基因筛查的优势

检出率高 平均检出率35%，全项检出率62.16%

周期短 检测周期15个自然日

针对性强 74个基因明确与不孕不育相关，外显子以及可变剪接区域
送检单更新
报告更新
报告更新
报告更新
小结

1. IFGS多而准

2. 病例信息越全，报告意义越大
THANK YOU！