Professional Documents
Culture Documents
ﺟﻠﺪ ،27ﺷﻤﺎره 1393 ،4 ﻣﺠﻠﻪ ﭘﮋوﻫﺸﻬﺎي ﮔﻴﺎﻫﻲ )ﻣﺠﻠﻪ زﻳﺴﺖ ﺷﻨﺎﺳﻲ اﻳﺮان(
ﺑﺮرﺳﻲ اﺛﺮ ﺗﻨﺶ ﺷﻮري ﺑﺮ رﺷﺪ ،ﭘﺮاﻛﺴﻴﺪاﺳﻴﻮن ﻟﻴﭙﻴﺪﻫﺎ ،زﻳﻤﺎﻳﻪ ﻫﺎي ﭘﺎداﻛﺴﺎﻳﻨﺪه و
ﻓﻴﻜﻮﺑﻴﻠﻲ ﭘﺮوﺗﺌﻴﻦ ﻫﺎ در دو ﮔﻮﻧﻪ ﻧﻮﺳﺘﻮك
1
ﻣﺮﻳﻢ رﺿﺎﻳﻴﺎن ،1ﻣﺤﻤﺪﻋﻠﻲ ﻓﺮاﻣﺮزي ،2وﺣﻴﺪ ﻧﻴﻜﻨﺎم *1و ﺣﺴﻦ اﺑﺮاﻫﻴﻢ زاده
1ﺗﻬﺮان ،داﻧﺸﮕﺎه ﺗﻬﺮان ،ﭘﺮدﻳﺲ ﻋﻠﻮم ،داﻧﺸﻜﺪه زﻳﺴﺖ ﺷﻨﺎﺳﻲ و ﻗﻄﺐ ﺗﺒﺎرزاﺋﻲ ﻣﻮﺟﻮدات زﻧﺪه اﻳﺮان
ﭼﻜﻴﺪه
در اﻳﻦ ﭘﮋوﻫﺶ ،اﺛﺮ ﺗﻨﺶ ﺷﻮري ﺑﺮ رﺷﺪ و ﺑﺮﺧﻲ ﭘﺎراﻣﺘﺮﻫﺎي ﻣﺮﺗﺒﻂ ﺑﺎ ﺗﻨﺶ اﻛﺴﺎﻳﺸﻲ در آﺧﺮ ﻣﺮﺣﻠﻪ ﻟﮕﺎرﻳﺘﻤﻲ رﺷﺪ Nostoc
ellipsosporumو Nostoc piscinaleﻣﻮرد ﺑﺮرﺳﻲ ﻗﺮارﮔﺮﻓﺖ .ﺑﺮ اﺳﺎس ﻧﺘﺎﻳﺞ رﺷﺪ اﻳﻦ دو ﮔﻮﻧﻪ ﺳﻴﺎﻧﻮﺑﺎﻛﺘﺮي ﺑﺎ اﻓﺰاﻳﺶ
ﻏﻠﻈﺖ ﺷﻮري اﻓﺰاﻳﺶ ﻣﻲﻳﺎﺑﺪ .اﻳﻦ دو ﮔﻮﻧﻪ ﺑﻪ ﻣﻨﻈﻮر ﻛﺎﻫﺶ اﺛﺮات ﻣﺨﺮب اﻧﻮاع ﻓﻌﺎل اﻛﺴﻴﮋن از زﻳﻤﺎﻳﻪﻫﺎي ﭘﺎداﻛﺴﺎﻳﻨﺪه ﻣﺎﻧﻨﺪ
POX ،SOD ،CATو PPOاﺳﺘﻔﺎده ﻣﻲﻛﻨﻨﺪ و ﺑﺎ اﻓﺰاﻳﺶ ﺷﻮري ﻓﻌﺎﻟﻴﺖ اﻳﻦ زﻳﻤﺎﻳﻪﻫﺎ اﻓﺰاﻳﺶ ﻣﻲﻳﺎﺑﺪ .ﺑﺎﻻﺗﺮ ﺑﻮدن ﻣﺤﺘﻮاي ذاﺗﻲ
ﭘﺮوﻟﻴﻦ در N. ellipsosporumﻧﺴﺒﺖ ﺑﻪ N. piscinaleﻣﻲ ﺗﻮاﻧﺪ ﻳﻜﻲ از ﻋﻮاﻣﻞ ﺗﺤﻤﻞ ﺑﺎﻻﺗﺮ ﮔﻮﻧﻪ اول ﻧﺴﺒﺖ ﺑﻪ ﺷﻮري ﺑﺎﺷﺪ.
ﻣﺎﻟﻮن دي آﻟﺪﺋﻴﺪ) (MDAدر N. ellipsosporumﻧﺴﺒﺖ ﺑﻪ N. piscinaleدر ﺷﺮاﻳﻂ ﺷﺎﻫﺪ و در ﺗﻤﺎم ﺳﻄﻮح ﺷﻮري ﻛﻤﺘﺮ
اﺳﺖ .ﺑﻪ ﻋﻼوه ﻣﺤﺘﻮاي ﺗﻤﺎم ﻓﻴﻜﻮﺑﻴﻠﻲ ﭘﺮوﺗﺌﻴﻦﻫﺎي ﻣﻮرد ﻣﻄﺎﻟﻌﻪ در ﻳﺎﺧﺘﻪ ﻫﺎي N. ellipsosporumﻧﺴﺒﺖ ﺑﻪ ﮔﻮﻧﻪ دﻳﮕﺮ ﺑﺎﻻﺗﺮ
ﺑﻮده و ﺗﺤﺖ ﺗﻨﺶ ﺷﻮري اﻓﺰاﻳﺶ ﻣﻌﻨﻲ دار و ﻗﺎﺑﻞ ﻣﻼﺣﻈﻪ را ﻧﺸﺎن ﻣﻲ دﻫﺪ .ﻓﻴﻜﻮﺑﻴﻠﻲ ﭘﺮوﺗﺌﻴﻦ ﻫﺎ ﻣﻲ ﺗﻮاﻧﻨﺪ ﺑﻪ ﻋﻨﻮان ﭘﺎدﻛﺴﺎﻳﻨﺪه
ﻫﺎي ﻏﻴﺮ زﻳﻤﺎﻳﻪ اي در ﻛﻨﺎر زﻳﻤﺎﻳﻪ ﻫﺎي ﭘﺎداﻛﺴﺎﻳﻨﺪه ﻋﺎﻣﻞ ﻣﻘﺎوﻣﺖ ﺑﻴﺸﺘﺮ N. ellipsosporumﻧﺴﺒﺖ ﺑﻪ N. piscinaleﺑﺎﺷﻨﺪ.
ﻧﺴﺒﺖ ﻣﺠﻤﻮع ﻓﻴﻜﻮارﻳﺘﺮﻳﻦ و ﻓﻴﻜﻮﺳﻴﺎﻧﻴﻦ ﺑﻪ آﻟﻮﻓﻴﻜﻮﺳﻴﺎﻧﻴﻦ ﻧﻴﺰ ﺑﻪ ﻋﻨﻮان ﺷﺎﺧﺺ اﻧﺪازه ﻓﻴﻜﻮﺑﻴﻠﻲ زوم ﻣﻮرد ﻣﺤﺎﺳﺒﻪ ﻗﺮار ﮔﺮﻓﺖ.
اﻧﺪازه ﻓﻴﻜﻮﺑﻴﻠﻲ زوم ﺗﺤﺖ ﺗﻨﺶ ﺷﻮري در ﻫﺮ دو ﮔﻮﻧﻪ اﻓﺰاﻳﺶ ﻣﻲ ﻳﺎﺑﺪ وﻟﻲ اﻳﻦ اﻓﺰاﻳﺶ در N. ellipsosporumﻧﺴﺒﺖ ﺑﻪ ﮔﻮﻧﻪ
دﻳﮕﺮ ﺑﻴﺸﺘﺮ اﺳﺖ .ﻣﻲ ﺗﻮان ﻧﺘﻴﺠﻪ ﮔﻴﺮي ﻛﺮد ﻛﻪ اﻳﻦ ﺳﺒﺎﻧﻮﺑﺎﻛﺘﺮي ﺑﺎ اﻓﺰاﻳﺶ اﻧﺪازه ﻓﻴﻜﻮ ﺑﻴﻠﻲ زوم و اﻓﺰاﻳﺶ ﻛﺎراﺋﻲ اﻧﺘﻘﺎل اﻧﺮژي
ﻧﻮراﻧﻲ ﺑﺎ ﺗﻨﺶ ﺷﻮري ﻣﻘﺎﺑﻠﻪ ﻣﻲ ﻛﻨﺪ.
واژه ﻫﺎي ﻛﻠﻴﺪي :ﺷﻮري ،ﺳﻴﺎﻧﻮﺑﺎﻛﺘﺮي ،زﻳﻤﺎﻳﻪ ﻫﺎي ﭘﺎداﻛﺴﺎﻳﻨﺪه ،ﻓﻴﻜﻮﺑﻴﻠﻲ ﭘﺮوﺗﺌﻴﻦ ﻫﺎNostoc ،
ﻣﻘﺪﻣﻪ
ﻫﺎي آﺑﻴﺎري ﺷﺪه ﺗﺤﺖ ﺗﺎﺛﻴﺮ ﺗﻨﺶ ﻗﺮار ﻣﻲﮔﻴﺮﻧﺪ).(33 ﺗﻨﺶ ﺷﻮري از ﻣﻬﻤﺘﺮﻳﻦ ﺗﻨﺶﻫﺎي ﻏﻴﺮزﻳﺴﺘﻲ اﺳﺖ ﻛﻪ
ﻫﻤﭽﻨﻴﻦ ﺗﻨﺶ ﺷﻮري روي رﺷﺪ ﺳﻴﺎﻧﻮﺑﺎﻛﺘﺮي ﻫﺎ ﻧﻴﺰ ﺗﺎﺛﻴﺮ اﺛﺮات زﻳﺎﻧﺒﺎري ﺑﺮﻣﺤﺼﻮﻻت ﻛﺸﺎورزي ﺑﻪ ﺧﺼﻮص در
ﻣﻲ ﮔﺬارد ).(21 ﻣﻨﺎﻃﻖ ﺧﺸﻚ و ﻧﻴﻤﻪ ﺧﺸﻚ دارد و رﺷﺪ و ﻧﻤﻮ ﮔﻴﺎﻫﺎن
ﺳﻴﺎﻧﻮﺑﺎﻛﺘﺮيﻫﺎ اوﻟﻴﻦ ﭘﺮوﻛﺎرﻳﻮتﻫﺎي ﻓﺘﻮﺳﻨﺘﺰي ﻫﺴﺘﻨﺪ ﻛﻪ ﻏﻴﺮﻫﺎﻟﻮﻓﻴﺖ را ﻛﺎﻫﺶ ﻣﻲدﻫﺪ .وﺳﻌﺖ ﺧﺎك ﻫﺎي ﺷﻮر در
در دوره ﭘﺮﻛﺎﻣﺒﺮﻳﻦ ،ﺣﺪود 2/8ﺗﺎ 3/5ﻣﻴﻠﻴﺎرد ﺳﺎل ﻗﺒﻞ اﻳﺮان ﺣﺪود 24ﻣﻴﻠﻴﻮن ﻫﻜﺘﺎر اﺳﺖ ﻛﻪ ﻣﻌﺎدل 15درﺻﺪ از
ﺑﻮﺟﻮد آﻣﺪهاﻧﺪ و ﺷﺮاﻳﻂ را ﺑﺮاي ﺣﻴﺎت ﻫﻮازي ﻣﺴﺎﻋﺪ اراﺿﻲ ﻛﺸﻮر ﻣﻲﺑﺎﺷﺪ .اﻣﺮوزه 20درﺻﺪ از زﻣﻴﻦﻫﺎي
ﻛﺸﺖ داده ﺷﺪه در ﺟﻬﺎن و ﻧﺰدﻳﻚ ﺑﻪ ﻧﻴﻤﻲ از ﻫﻤﻪ زﻣﻴﻦ-
ﻛﺮدهاﻧﺪ ) .(28ﺳﻴﺎﻧﻮﺑﺎﻛﺘﺮي ﻫﺎ ﺗﻮﻟﻴﺪ ﻛﻨﻨﺪه ﻫﺎي اﺻﻠﻲ در
661
ﺟﻠﺪ ،27ﺷﻤﺎره 1393 ،4 ﻣﺠﻠﻪ ﭘﮋوﻫﺸﻬﺎي ﮔﻴﺎﻫﻲ )ﻣﺠﻠﻪ زﻳﺴﺖ ﺷﻨﺎﺳﻲ اﻳﺮان(
دﻳﮕﺮ ﭘﺎراﻣﺘﺮﻫﺎي ﺑﻴﻮﺷﻴﻤﻴﺎﺋﻲ و ﻓﻴﺰﻳﻮﻟﻮژﻳﻜﻲ اﻗﺪام ﺑﻪ ﺗﻬﻴﻪ ) (ROSﻣﻲﺷﻮﻧﺪ .اﻳﻦ ﺗﺮﻛﻴﺒﺎت اﺣﻴﺎﻛﻨﻨﺪهﮔﻲ و ﺳﻤﻴﺖ
ﻣﺤﻴﻂ ﻛﺸﺖ BG-11و ﻣﺤﻠﻮلﻫﺎي NaClﺑﺎ ﻏﻠﻈﺖﻫﺎي ﺑﺎﻻﻳﻲ دارﻧﺪ و ﺑﺎﻋﺚ آﺳﻴﺐ رﺳﺎﻧﺪن ﺑﻪ ﭘﺮوﺗﺌﻴﻦﻫﺎ ،ﻟﻴﭙﻴﺪﻫﺎ،
ﻣﺨﺘﻠﻒ 200 ،150 ،100 ،50 ،0 ،و 250ﻣﻴﻠﻲ ﻣﻮﻻر ﮔﺮدﻳﺪ. ﻛﺮﺑﻮﻫﻴﺪرات ﻫﺎ و DNAﻣﻲﺷﻮﻧﺪ .اﻧﻮاع ﻓﻌﺎل اﻛﺴﻴﮋن
ﺑﺮاي ﻛﺸﺖ دادن ﺟﻠﺒﻚﻫﺎ از ارﻟﻦﻫﺎي 250ﻣﻴﻠﻲ ﻟﻴﺘﺮي ﻫﻤﭽﻨﻴﻦ ﺑﺮ ﺑﻴﺎن ﺑﺮﺧﻲ از ژنﻫﺎ ﺗﺎﺛﻴﺮ ﻣﻲﮔﺬارد .ﺑﻨﺎﺑﺮاﻳﻦ
اﺳﺘﻔﺎده ﺷﺪ ﻛﻪ ﺑﻪ ﻫﺮ ارﻟﻦ ﺑﻌﺪ از ﺳﺘﺮون ﺷﺪن ﺗﻮﺳﻂ ﻓﺮاﻳﻨﺪﻫﺎﻳﻲ ﻣﺜﻞ رﺷﺪ ،ﭼﺮﺧﻪ ﺳﻠﻮﻟﻲ ،ﻣﺮگ ﺑﺮﻧﺎﻣﻪ رﻳﺰي
اﺗﻮﻛﻼو 45ﻣﻴﻠﻲ ﻟﻴﺘﺮ ﻣﺤﻴﻂ ﻛﺸﺖ BG-11و 5ﻣﻴﻠﻲ ﻟﻴﺘﺮ ﺷﺪه ) (PCDو دﻓﺎع در ﺑﺮاﺑﺮ ﻋﻮاﻣﻞ ﺑﻴﻤﺎري زا را ﻛﻨﺘﺮل
ﻣﺤﻠﻮل ﻧﻤﻚ ) (NaClاﺿﺎﻓﻪ ﺷﺪ .ﺑﻪ ﻣﻨﻈﻮر ﻛﺸﺖ ﻣﻘﺪار ﻣﻲ ﻧﻤﺎﻳﺪ ) .(30زﻳﻤﺎﻳﻪ ﻫﺎي ﭘﺎداﻛﺴﺎﻳﻨﺪه ﺑﺎ ﺟﺎروب ﻛﺮدن
Cell pack ﺑﺮاﺑﺮ ﺟﻠﺒﻚ در ﻫﺮ ارﻟﻦ ﻣﺠﺪدا از روش اﻳﻦ ﺗﺮﻛﻴﺒﺎت اﺛﺮات ﺳﻤﻲ آﻧﻬﺎ را ﻛﺎﻫﺶ ﻣﻲ دﻫﻨﺪ.
valumeاﺳﺘﻔﺎده ﺷﺪ .ﺑﺮاي ﻫﺮ دو ﮔﻮﻧﻪ ﻧﻮﺳﺘﻮك از اﻳﻦ ﻓﻴﻜﻮﺑﻴﻠﻲ ﭘﺮوﺗﺌﻴﻦ ﻫﺎ ) (PBPﺗﺮﻛﻴﺒﺎﺗﻲ ﻣﺤﻠﻮل در آب
روش اﺳﺘﻔﺎده ﺷﺪ و ﺑﻌﺪ از ﻛﺸﺖ دادن ﺗﻤﺎم ارﻟﻦ ﻫﺎ ﺑﻪ ﻣﻲ ﺑﺎﺷﻨﺪ .اﻳﻦ ﺗﺮﻛﻴﺒﺎت ﺳﻤﻲ و ﺳﺮﻃﺎن زا ﻧﻴﺴﺘﻨﺪ و ﺑﻌﻨﻮان
دﺳﺘﮕﺎه ﻓﻴﺘﻮﺗﺮون ﻣﻨﺘﻘﻞ ﺷﺪﻧﺪ ﻛﻪ در اﻳﻦ دﺳﺘﮕﺎه ﺗﻤﺎم رﻧﮕﻴﺰه ﻫﺎي ﻃﺒﻴﻌﻲ اﻫﻤﻴﺖ ﺑﺴﻴﺎري دارﻧﺪ ) .(9ﻓﻴﻜﻮﺳﻴﺎﻧﻴﻦ
ﺷﺮاﻳﻂ از ﺟﻤﻠﻪ رﻃﻮﺑﺖ ﻧﺴﺒﻲ ،دﻣﺎ و ﺷﺪت ﻧﻮر ﻳﻜﺴﺎن ﻫﺎ ) (PCﺑﻪ دﻟﻴﻞ داﺷﺘﻦ ﺧﺼﻮﺻﻴﺎت زﻳﺴﺖ ﺷﻨﺎﺧﺘﻲ و
ﺑﻮد .دﻣﺎي ﻓﻴﺘﻮﺗﺮون 25±1ﺳﺎﻧﺘﻲ ﮔﺮاد و ﺷﺪت ﻧﻮر 3000 ﻓﺎرﻣﺎﻛﻮﻟﻮژﻳﻜﻲ ﻣﺨﺘﻠﻒ از ﺟﻤﻠﻪ ﺟﺎروب ﻛﺮدن اﻧﻮاع ﻓﻌﺎل
Luxﺑﻮده اﺳﺖ .ﺳﻴﺎﻧﻮﺑﺎﻛﺘﺮيﻫﺎي ﻛﺸﺖ داده ﺷﺪه ﺑﻌﺪ از 9 اﻛﺴﻴﮋن ،ﺧﺎﺻﻴﺖ ﺿﺪ ﺳﺮﻃﺎﻧﻲ و ﺧﻮاص ﺿﺪ اﻟﺘﻬﺎﺑﻲ
روز )آﺧﺮ ﻣﺮﺣﻠﻪ ﻟﮕﺎرﻳﺘﻤﻲ( ﺑﻪ ﻣﻨﻈﻮر ﺳﻨﺠﺶ ﭘﺎراﻣﺘﺮﻫﺎي ﺑﻴﺸﺘﺮﻳﻦ اﻫﻤﻴﺖ را دارﻧﺪ .ﺑﺮﺧﻲ از ﮔﺰارش ﻫﺎ ﺣﺎﻛﻲ از
ﻓﻴﺰﻳﻮﻟﻮژﻳﻜﻲ و ﺑﻴﻮﺷﻴﻤﻴﺎﻳﻲ ﻣﺨﺘﻠﻒ ﺟﻤﻊ آوري ﺷﺪ. ﻧﻘﺶ اﻳﻦ ﺗﺮﻛﻴﺒﺎت ﺑﻪ ﻋﻨﻮان ﭘﺎداﻛﺴﺎﻳﻨﺪه ﻫﺎي ﻏﻴﺮ زﻳﻤﺎﻳﻪ اي
ﺑﻪ ﻣﻨﻈﻮر اﻧﺪازه ﮔﻴﺮي وزن ﺧﺸﻚ ،اﺑﺘﺪا ﺳﻠﻮلﻫﺎ ﺑﻪ ﻛﻤﻚ ﻧﻴﺰ ﻫﺴﺘﻨﺪ ).(27
ﻛﺎﻏﺬ ﺻﺎﻓﻲ از ﻣﺤﻴﻂ ﻛﺸﺖ ﺟﺪا ﺷﺪه و ﺳﭙﺲ ﺑﻪ ﻣﻨﻈﻮر در اﻳﻦ ﭘﮋوﻫﺶ اﺛﺮ ﻏﻠﻈﺖ ﻫﺎي ﻣﺨﺘﻠﻒ ﺷﻮري NaClﺑﺮ
ﺟﺪا ﻛﺮدن ﻧﻤﻚ ازﺳﻠﻮلﻫﺎ ،آنﻫﺎ ﺑﺎ ﻣﺤﻠﻮل ﻧﺮﻣﺎل NaCl رﺷﺪ و ﺑﺮﺧﻲ ﭘﺎراﻣﺘﺮﻫﺎي ﻓﻴﺰﻳﻮﻟﻮژﻳﻜﻲ و ﺑﻴﻮﺷﻴﻤﻴﺎﺋﻲ ﻣﺎﻧﻨﺪ
) (%0/09ﺷﺴﺘﺸﻮ داده ﺷﺪﻧﺪ .ﺑﻪ ﻣﻨﻈﻮر ﻣﺤﺎﺳﺒﻪ وزن ﺧﺸﻚ زﻳﻤﺎﻳﻪ ﻫﺎي ﭘﺎداﻛﺴﺎﻳﻨﺪه و ﻣﺤﺘﻮاي ﻓﻴﻜﻮﺑﻴﻠﻲ ﭘﺮوﺗﺌﻴﻦ ﻫﺎ در
ﻛﺎﻏﺬ ﺻﺎﻓﻲﻫﺎ ﺑﻪ ﻣﺪت 4ﺳﺎﻋﺖ در دﻣﺎي 60درﺟﻪ ﺳﺎﻧﺘﻲ- ﻳﺎﺧﺘﻪ ﻫﺎي Nostoc ellipsosporumو Nostoc piscinale
ﮔﺮاد در آون ﻗﺮار داده ﺷﺪﻧﺪ .اﻃﻤﻴﻨﺎن از ﺧﺸﻚ ﺷﺪن در ﻣﺮﺣﻠﻪ ﻟﮕﺎرﻳﺘﻤﻲ رﺷﺪ ﺑﺮاي اوﻟﻴﻦ ﺑﺎر ﻣﻮرد ﻣﻄﺎﻟﻌﻪ ﻗﺮار
ﺳﻴﺎﻧﻮﺑﺎﻛﺘﺮي ﻫﺎ ﺑﻪ وﺳﻴﻠﻪ ﺗﻮزﻳﻦ ﻣﻜﺮر اﻳﻦ ﺳﻴﺎﻧﻮﺑﺎﻛﺘﺮي ﻫﺎ ﮔﺮﻓﺘﻪ و ﮔﺰارش ﻣﻲ ﺷﻮد.
662
ﺟﻠﺪ ،27ﺷﻤﺎره 1393 ،4 ﻣﺠﻠﻪ ﭘﮋوﻫﺸﻬﺎي ﮔﻴﺎﻫﻲ )ﻣﺠﻠﻪ زﻳﺴﺖ ﺷﻨﺎﺳﻲ اﻳﺮان(
) Packer (1968اﺳﺘﻔﺎده ﺷﺪ) .(13ﺑﺪﻳﻦ ﻣﻨﻈﻮر ﻣﻘﺪار 1ﮔﺮم ﺑﻪ ﻣﺪت 2ﺑﺎر ﺑﺎ ﻓﻮاﺻﻞ ﻳﻚ ﺳﺎﻋﺖ )ﭘﺲ از 4ﺳﺎﻋﺖ(
ﺟﻠﺒﻚ ﺗﺮ از N. ellipsospurumﺗﻮﺳﻂ 1/5ﻣﻴﻠﻲ ﻟﻴﺘﺮ TCA ﺣﺎﺻﻞ ﮔﺮدﻳﺪ).(17
)ﺗﺮيﻛﻠﺮواﺳﺘﻴﻚ اﺳﻴﺪ( 0/01درﺻﺪ و ﻫﻤﭽﻨﻴﻦ 2ﮔﺮم
اﺳﺘﺨﺮاج و ﺳﻨﺠﺶ ﭘﺮوﻟﻴﻦ آزاد :ﺑﻪ ﻣﻨﻈﻮر اﺳﺘﺨﺮاج و
زﻳﺘﻮده ﺗﺮ از N. piscinaleﺗﻮﺳﻂ 2ﻣﻴﻠﻲ ﻟﻴﺘﺮ 0 /01 ،TCA
ﺳﻨﺠﺶ ﻣﻘﺪار ﭘﺮوﻟﻴﻦ آزاد ﻣﻮﺟﻮد در ﻧﻤﻮﻧﻪﻫﺎ ،از روش
درﺻﺪ اﺳﺘﺨﺮاج ﺷﺪ .ﺳﭙﺲ ﻋﺼﺎره ﺑﺪﺳﺖ آﻣﺪه ﺑﻪ ﻣﺪت 10
) Bates et al. (1973اﺳﺘﻔﺎده ﮔﺮدﻳﺪ) .(7ﺑﺪﻳﻦ ﻣﻨﻈﻮر ﻣﻴﺰان
دﻗﻴﻘﻪ در 13000 rpmﺳﺎﻧﺘﺮﻳﻔﻮژﺷﺪ .در ﻣﺮﺣﻠﻪ ﺑﻌﺪي ﺑﻪ
1ﮔﺮم از زﻳﺘﻮده ﺗﺮ ﺟﻠﺒﻚ ﺑﺮداﺷﺘﻪ ﺷﺪ و ﺗﻮﺳﻂ 4ﻣﻴﻠﻲ ﻟﻴﺘﺮ
0/5ﻣﻴﻠﻲ ﻟﻴﺘﺮ از ﻣﺤﻠﻮل ﺣﺎﺻﻞ از ﺳﺎﻧﺘﺮﻳﻔﻮژ ﻣﻘﺪار 1ﻣﻴﻠﻲ
ﻣﺤﻠﻮل ﺳﻮﻟﻔﻮﺳﺎﻟﻴﺴﻴﻠﻴﻚ اﺳﻴﺪ %3در ﻳﻚ ﻫﺎون ﭼﻴﻨﻲ
ﻟﻴﺘﺮ ﻣﺤﻠﻮل 20درﺻﺪ TCAﺣﺎوي 0/5درﺻﺪ ﺗﻴﻮ
رﻳﺨﺘﻪ ﺷﺪ .دﻳﻮارة ﺳﻠﻮﻟﻲ ﻫﺮ دوﮔﻮﻧﻪ ﻧﻮﺳﺘﻮك ﻣﻮرد ﺑﺮرﺳﻲ
ﺑﺎرﺑﻴﺘﻮرﻳﻚ اﺳﻴﺪ اﺿﺎﻓﻪ ﺷﺪ .ﺳﭙﺲ ﻣﺨﻠﻮط ﺣﺎﺻﻞ ﺑﻪ ﻣﺪت
ﻧﺴﺒﺖ ﺑﻪ ﺳﺎﺋﻴﺪن ﻣﻘﺎوم ﺑﻮدﻧﺪ .از اﻳﻦ رو ،دﻳﻮارة ﺳﻠﻮﻟﻲ
30دﻗﻴﻘﻪ در دﻣﺎي 95درﺟﻪ ﺳﺎﻧﺘﻴﮕﺮاد ﺣﻤﺎم آب ﮔﺮم ﻗﺮار
در N. ellipsosporumﺑﺎ اﻣﻮاج ﻓﺮاﺻﻮت ﺑﻪ ﻣﺪت 10دﻗﻴﻘﻪ
داده ﺷﺪ و ﺳﭙﺲ ﻧﻤﻮﻧﻪ ﻫﺎ ﺑﻪ ﺳﺮﻋﺖ ﺳﺮد ﮔﺮدﻳﺪ .ﺑﻌﺪ از
) 5ﺛﺎﻧﻴﻪ ﭘﺎﻟﺲ 5 ،ﺛﺎﻧﻴﻪ اﺳﺘﺮاﺣﺖ( ﺷﻜﺴﺘﻪ ﺷﺪ اﻣﺎ ﺑﺮاي ﭘﺎره
اﻳﻦ ﻣﺮاﺣﻞ ﻣﺨﻠﻮط ﺣﺎﺻﻞ ﺑﻪ ﻣﺪت 10دﻗﻴﻘﻪ در دﻣﺎي
ﻛﺮدن دﻳﻮارة ﺳﻠﻮﻟﻲ N. piscinaleاز دو روش اﻧﺠﻤﺎد
ﻣﺤﻴﻂ و دور 13000 rpmﺳﺎﻧﺘﺮﻳﻔﻮژ ﺷﺪ .در ﻧﻬﺎﻳﺖ ﺟﺬب
واﻣﻮاج ﻓﺮا ﺻﻮت اﺳﺘﻔﺎده ﺷﺪ .اﺑﺘﺪا ﻳﻚ ﮔﺮم ﺑﺎﻓﺖ ﺗﺮ ﺑﻪ
ﻣﺤﻠﻮل روﻳﻲ ﺣﺎﺻﻞ از ﺳﺎﻧﺘﺮﻳﻔﻮژ در ﻃﻮل ﻣﻮجﻫﺎي 532
ﻫﻤﺮاه 4ﻣﻴﻠﻲ ﻟﻴﺘﺮ ﺑﺎﻓﺮ اﺳﺘﺨﺮاج را ﺑﻪ ﻣﺪت 30دﻗﻴﻘﻪ در
و 600ﻧﺎﻧﻮﻣﺘﺮ اﻧﺪازه ﮔﻴﺮي ﺷﺪ و در ﻧﻬﺎﻳﺖ ﻣﻘﺪار ﻣﺎﻟﻮن دي
دﻣﺎي -70ﻗﺮار داده ﺗﺎ ﻛﺎﻣﻼ ﻳﺦ ﺑﺰﻧﺪ ﺳﭙﺲ ﺑﺎ اﻣﻮاج ﻓﺮا
آﻟﺪﻫﻴﺪ )ﺑﺎ ﺿﺮﻳﺐ ﺧﺎﻣﻮﺷﻲ 155ﻣﻴﻠﻲ ﻣﻮل ﺑﺮ ﺳﺎﻧﺘﻲ ﻣﺘﺮ(
ﺻﻮت ﺑﻪ ﻣﺪت 20دﻗﻴﻘﻪ ) 5ﺛﺎﻧﻴﻪ ﭘﺎﻟﺲ 5 ،ﺛﺎﻧﻴﻪ اﺳﺘﺮاﺣﺖ(
ﻛﻪ ﻣﺤﺼﻮل ﭘﺮاﻛﺴﻴﺪاﺳﻴﻮن ﻟﻴﭙﻴﺪﻫﺎﺳﺖ ،ﺑﺮاﺳﺎس ﻧﺎﻧﻮﻣﻮل در
دﻳﻮارة ﺳﻠﻮﻟﻲ ﺷﻜﺴﺘﻪ ﺷﺪ .ﺑﻪ ﻣﻨﻈﻮر ﺑﺮداﺷﺖ ﻣﻮاد اﺿﺎﻓﻪ،
ﮔﺮم وزن ﺗﺮ ﻣﺤﺎﺳﺒﻪ ﮔﺮدﻳﺪ.
ﻣﺤﻠﻮل ﺣﺎﺻﻞ ﺑﻪ ﻣﺪت 20دﻗﻴﻘﻪ ﺑﺎ ﺳﺮﻋﺖ 13000دور ﺑﺮ
ﻛﺎﺗﺎﻻز ) :(CATﺑﻪ ﻣﻨﻈﻮر ﺑﺮرﺳﻲ ﻓﻌﺎﻟﻴﺖ ﻛﺎﺗﺎﻻز از روش دﻗﻴﻘﻪ ) (rpmﺳﺎﻧﺘﺮﻳﻔﻮژ ﺷﺪ .ﺳﭙﺲ 1ﻣﻴﻠﻲ ﻟﻴﺘﺮ از روﺷﻨﺎور
) Aebi (1984اﺳﺘﻔﺎده ﺷﺪ) .(5ﺑﺪﻳﻦ ﻣﻨﻈﻮر 625ﻣﻴﻜﺮوﻟﻴﺘﺮ ﺣﺎﺻﻞ ﺑﺎ 2ﻣﻴﻠﻲ ﻟﻴﺘﺮ اﺳﺘﻴﻚ اﺳﻴﺪ ﮔﻼﺳﻴﺎل و 2ﻣﻴﻠﻲ ﻟﻴﺘﺮ
ﺑﺎﻓﺮ ﭘﺘﺎﺳﻴﻢ ﻓﺴﻔﺎت 50ﻣﻴﻠﻲ ﻣﻮﻻر را ﻫﻤﺮاه ﺑﺎ 75 اﺳﻴﺪ ﻧﻴﻦ ﻫﻴﺪرﻳﻦ )ﺷﺎﻣﻞ 1/25ﻣﻴﻠﻲ ﮔﺮم ﻧﻴﻦ ﻫﻴﺪرﻳﻦ ﺣﻞ
ﻣﻴﻜﺮوﻟﻴﺘﺮ ﭘﺮاﻛﺴﻴﺪ ﻫﻴﺪروژن 3درﺻﺪ و 10ﻣﻴﻜﺮوﻟﻴﺘﺮ ﺑﺎﻓﺮ ﺷﺪه در 20ﻣﻴﻠﻲ ﻟﻴﺘﺮ اﺳﻴﺪ ﻓﺴﻔﺮﻳﻚ 6ﻣﻮﻻر و 30ﻣﻴﻠﻲ
Tris-HClرا ﺑﻪ ﻳﻚ ﻛﻮوت ﻛﻮارﺗﺰ اﺿﺎﻓﻪ ﺷﺪ و ﺑﻪ وﺳﻴﻠﻪ آن ﻟﻴﺘﺮ اﺳﺘﻴﻚ اﺳﻴﺪ ﮔﻼﺳﻴﺎل( و 1ﻣﻴﻠﻲ ﻟﻴﺘﺮ آب ﻣﻘﻄﺮ ﺑﻪ ﻣﺪت
ﺟﻬﺖ ﻫﻀﻢ ﺗﺪرﻳﺠﻲ ،دﺳﺘﮕﺎه اﺳﭙﻜﺘﺮوﻓﺘﻮﻣﺘﺮ در ﻣﺪ 1ﺳﺎﻋﺖ در دﻣﺎي 100درﺟﻪ ﺳﺎﻧﺘﻴﮕﺮاد ﻗﺮار داده ﺷﺪ و
Kineticدر ﻃﻮل ﻣﻮج 240ﻧﺎﻧﻮﻣﺘﺮ ﺻﻔﺮ ﮔﺮدﻳﺪ و ﺳﭙﺲ ﺑﻼﻓﺎﺻﻠﻪ ﺑﻪ ﺣﻤﺎم ﻳﺦ ﻣﻨﺘﻘﻞ ﺷﺪ .در ﻧﻬﺎﻳﺖ ﺑﻪ ﻣﺤﻠﻮل
ﺑﺮاي اﻧﺪازه ﮔﻴﺮي ﻓﻌﺎﻟﻴﺖ ﻛﺎﺗﺎﻻز 10 ،ﻣﻴﻜﺮوﻟﻴﺘﺮ ﻋﺼﺎره واﻛﻨﺶ 4ﻣﻴﻠﻲ ﻟﻴﺘﺮ ﺗﻮﻟﻮﺋﻦ اﺿﺎﻓﻪ ﺷﺪ و ﺟﺬب ﻣﺤﻠﻮل )ﻓﺎز
زﻳﻤﺎﻳﻪ اﺳﺘﺨﺮاج ﺷﺪه ﺑﺮاي ﻫﺮ ﮔﻮﻧﻪ ﻧﻮﺳﺘﻮك را ﺑﻪ ﺟﺎي 10 رﻧﮕﻲ( در 520ﻧﺎﻧﻮﻣﺘﺮ اﻧﺪازه ﮔﻴﺮي ﺷﺪ .در ﻧﻬﺎﻳﺖ ﻣﻴﺰان
ﻣﻴﻜﺮوﻟﻴﺘﺮ ﺑﺎﻓﺮ Tris-HClﺑﻪ ﻛﻮوت اﺿﺎﻓﻪ ﺷﺪ و در ﻣﺪت ﭘﺮوﻟﻴﻦ ﺑﺮ ﺣﺴﺐ ﻣﻴﻜﺮوﮔﺮم ﭘﺮوﻟﻴﻦ ﺑﻪ ازاي ﮔﺮم وزن ﺗﺮ
180ﺛﺎﻧﻴﻪ ﻓﻌﺎﻟﻴﺖ ﻛﺎﺗﺎﻻز ﺑﺮ ﺣﺴﺐ ΔAbs/minﺗﺮﺳﻴﻢ ﺷﺪ. ﻣﺤﺎﺳﺒﻪ ﮔﺮدﻳﺪ.
در ﻧﻬﺎﻳﺖ ﻓﻌﺎﻟﻴﺖ آﻧﺰﻳﻤﻲ ﺑﺮ ﺣﺴﺐ واﺣﺪ زﻳﻤﺎﻳﻪاي ﻣﻴﻠﻲ ﺳﻨﺠﺶ ﻣﻴﺰان ﭘﺮاﻛﺴﻴﺪاﺳﻴﻮن ﻟﻴﭙﻴﺪﻫﺎ :ﺑﻪ ﻣﻨﻈﻮر ﺳﻨﺠﺶ
ﮔﺮم ﭘﺮوﺗﺌﻴﻦ) (Unit mg-1 proteinﮔﺰارش ﺷﺪ.
ﻣﻴﺰان ﭘﺮاﻛﺴﻴﺪاﺳﻴﻮن ﻟﻴﭙﻴﺪﻫﺎي ﻏﺸﺎء ﺑﺮ اﺳﺎس ﻣﻴﺰان ﻣﺎﻟﻮن
دي آﻟﺪﻫﻴﺪ ) (MDAﺗﻮﻟﻴﺪﺷﺪه ،از روش Heath and
663
ﺟﻠﺪ ،27ﺷﻤﺎره 1393 ،4 ﻣﺠﻠﻪ ﭘﮋوﻫﺸﻬﺎي ﮔﻴﺎﻫﻲ )ﻣﺠﻠﻪ زﻳﺴﺖ ﺷﻨﺎﺳﻲ اﻳﺮان(
ﻓﺴﻔﺎت mM 50ﺑﺎ ، pH=7/5ﻣﺘﻴﻮﻧﻴﻦ mM Na- ،13 mM ﭘﺮاﻛﺴﻴﺪاز ) :(POXﻓﻌﺎﻟﻴﺖ اﻳﻦ زﻳﻤﺎﻳﻪ ﺑﻪ روش )(1991
،0/1 EDTAﻧﻴﺘﺮوﺑﻠﻮ ﺗﺘﺮازوﻟﻴﻮم )،75 μM (NBT Abelesو Bilesاﻧﺪازه ﮔﻴﺮي ﺷﺪ ) .(3اﺑﺘﺪا 2ﻣﻴﻠﻲ ﻟﻴﺘﺮ
رﻳﺒﻮﻓﻼوﻳﻦ 75 μMو ﻣﻘﺪار 100ﻣﻴﻜﺮوﻟﻴﺘﺮ از ﻋﺼﺎره ﺑﺎﻓﺮ اﺳﺘﺎت ﺳﺪﻳﻢ 200ﻣﻴﻠﻲ ﻣﻮﻻر ﺑﺎ pH=5را ﻫﻤﺮاه ﺑﺎ
ﻣﻲ ﺑﺎﺷﺪ .اﻳﻦ روش ﺑﺮ اﺳﺎس ﺗﺒﺪﻳﻞ NBTﺑﻪ ﻓﻮرﻣﺎزان در 200ﻣﻴﻜﺮوﻟﻴﺘﺮ ﭘﺮاﻛﺴﻴﺪ ﻫﻴﺪروژن 3درﺻﺪ و 100
ﺣﻀﻮر ﻧﻮر و ﺗﺸﻜﻴﻞ رﻧﮓ ﻣﻲ ﺑﺎﺷﺪ .در ﺻﻮرﺗﻲ ﻛﻪ زﻳﻤﺎﻳﻪ ﻣﻴﻜﺮوﻟﻴﺘﺮ ﺑﻨﺰﻳﺪﻳﻦ 20ﻣﻴﻠﻲ ﻣﻮﻻر در ﻣﺘﺎﻧﻮل 50درﺻﺪ و
ﺳﻮﭘﺮاﻛﺴﻴﺪ دﻳﺴﻤﻮﺗﺎز در ﻣﺤﻴﻂ وﺟﻮد داﺷﺘﻪ ﺑﺎﺷﺪ ،از اﻧﺠﺎم 50ﻣﻴﻜﺮوﻟﻴﺘﺮ ﺑﺎﻓﺮ Tris-HClﺑﻪ ﻳﻚ ﻛﻮوت ﺷﻴﺸﻪ اي
واﻛﻨﺶ ﻣﺬﻛﻮر ﻣﻤﺎﻧﻌﺖ ﻛﺮده و ﺗﺸﻜﻴﻞ و ﻇﻬﻮر رﻧﮓ را اﺿﺎﻓﻪ ﺷﺪ و ﺑﻪ وﺳﻴﻠﻪ آن ،دﺳﺘﮕﺎه اﺳﭙﻜﺘﺮوﻓﺘﻮﻣﺘﺮ در ﻣﺪ
ﻛﺎﻫﺶ ﻣﻲ دﻫﺪ .ﭘﺲ از 12دﻗﻴﻘﻪ ﺟﺬب آﻧﻬﺎ ﺗﻮﺳﻂ دﺳﺘﮕﺎه Kineticدر ﻃﻮل ﻣﻮج 530ﻧﺎﻧﻮﻣﺘﺮ ﺻﻔﺮ ﺷﺪ و ﺳﭙﺲ ﺑﺮاي
اﺳﭙﻜﺘﺮوﻓﺘﻮﻣﺘﺮ و ﻃﻮل ﻣﻮج 560ﻧﺎﻧﻮﻣﺘﺮ ﺧﻮاﻧﺪه ﺷﺪ).(11 اﻧﺪازه ﮔﻴﺮي ﻓﻌﺎﻟﻴﺖ ﭘﺮاﻛﺴﻴﺪاز 50 ،ﻣﻴﻜﺮوﻟﻴﺘﺮ ﻋﺼﺎره
ﺳﻨﺠﺶ ﻓﻴﻜﻮﺑﻴﻠﻲ ﭘﺮوﺗﺌﻴﻦ ﻫﺎ :ﺑﺮاي ﺳﻨﺠﺶ ﻓﻴﻜﻮﺑﻴﻠﻲ- زﻳﻤﺎﻳﻪ اﺳﺘﺨﺮاج ﺷﺪه ﺑﺮاي ﻫﺮ ﮔﻮﻧﻪ ﻧﻮﺳﺘﻮك ﺑﻪ ﺟﺎي 50
ﭘﺮوﺗﺌﻴﻦﻫﺎ از روش Wymanو (1986) Fayاﺳﺘﻔﺎده ﺷﺪ ﻣﻴﻜﺮوﻟﻴﺘﺮ ﺑﺎﻓﺮ Tris-HClﺑﻪ ﻛﻮوت اﺿﺎﻓﻪ ﺷﺪ و در ﻣﺪت
) .(32ﻳﻚ ﻣﻴﻠﻲ ﻟﻴﺘﺮ از ﺳﻮﺳﭙﺎﻧﺴﻴﻮن ﻧﻮﺳﺘﻮك ﻛﺎﻣﻼ ﻫﻤﮕﻦ 60ﺛﺎﻧﻴﻪ ﻓﻌﺎﻟﻴﺖ ﭘﺮاﻛﺴﻴﺪاز ﺑﺮ ﺣﺴﺐ ΔAbs/minﺗﺮﺳﻴﻢ
ﺷﺪه ،ﺑﻪ ﻣﺪت 5ﺗﺎ 10دﻗﻴﻘﻪ ﺳﺎﻧﺘﺮﻳﻔﻮژ ﺷﺪ و ﺑﺨﺶ روﻳﻲ ﺷﺪ .در ﻧﻬﺎﻳﺖ ﻓﻌﺎﻟﻴﺖ آﻧﺰﻳﻤﻲ ﺑﺮ ﺣﺴﺐ واﺣﺪ زﻳﻤﺎﻳﻪ اي
درﻣﻴﻠﻲ ﮔﺮم ﭘﺮوﺗﺌﻴﻦ ) (Unit mg-1 proteinﻣﺤﺎﺳﺒﻪ ﮔﺮدﻳﺪ.
ﺧﺎرج ﺷﺪ .روي ﺗﻪ ﻧﺸﺴﺖ ﺑﺎﻗﻴﻤﺎﻧﺪه 60ﺗﺎ 150ﻣﻴﻜﺮوﻟﻴﺘﺮ
ﮔﻠﻴﺴﺮول ﺧﺎﻟﺺ اﺿﺎﻓﻪ ﺷﺪ و ﻣﺨﻠﻮط ﺑﻪ ﻣﺪت 24ﺳﺎﻋﺖ ﭘﻠﻲ ﻓﻨﻞ اﻛﺴﻴﺪاز ) :(PPOﻓﻌﺎﻟﻴﺖ اﻳﻦ زﻳﻤﺎﻳﻪ ﺑﻪ روش
در ﺗﺎرﻳﻜﻲ و در دﻣﺎي 4درﺟﻪ ﺳﺎﻧﺘﻴﮕﺮاد ﻗﺮار ﮔﺮﻓﺖ .ﺳﭙﺲ )Raymond et al. (1993اﻧﺪازه ﮔﻴﺮي ﺷﺪ) .(26اﺑﺘﺪا 2/5
ﺑﻪ ﻣﺨﻠﻮط ﻣﻘﺪاري آب ﻣﻘﻄﺮ اﺿﺎﻓﻪ ﺷﺪ ﺗﺎ ﻏﻠﻈﺖ ﮔﻠﻴﺴﺮول ﻣﻴﻠﻲ ﻟﻴﺘﺮ ﺑﺎﻓﺮ ﻓﺴﻔﺎت ﭘﺘﺎﺳﻴﻢ ﺑﺎ pH=6.8ﻛﻪ دﻣﺎي آن 40
10درﺻﺪ ﮔﺮدد .اﻳﻦ ﻋﻤﻞ ﺑﺎﻋﺚ ﺷﻮك اﺳﻤﺰي ﺷﺪه، درﺟﻪ ﺳﺎﻧﺘﻲ ﮔﺮاد ﻣﻲﺑﺎﺷﺪ ﺑﻪ ﻫﻤﺮاه ﺑﺎ 200ﻣﻴﻜﺮوﻟﻴﺘﺮ
ﺳﻠﻮلﻫﺎ ﺗﺮﻛﻴﺪه و ﻓﻴﻜﻮﺑﻴﻠﻲﭘﺮوﺗﺌﻴﻦﻫﺎ آزاد ﻣﻲﺷﻮﻧﺪ .ﺑﻪ ﭘﻴﺮوﮔﺎﻟﻮل و 20ﻣﻴﻜﺮوﻟﻴﺘﺮ ﺑﺎﻓﺮ Tris-HClﺑﻪ ﻳﻚ ﻛﻮوت
ﻣﺤﻠﻮل ﺣﺎﺻﻞ اﺳﺘﺎت ﺳﺪﻳﻢ ﺑﻪ ﻣﻘﺪاري اﻓﺰوده ﺗﺎ ﻏﻠﻈﺖ آن ﺷﻴﺸﻪ اي اﺿﺎﻓﻪ ﺷﺪ و ﺑﻪ وﺳﻴﻠﻪ آن ،دﺳﺘﮕﺎه اﺳﭙﻜﺘﺮوﻓﺘﻮﻣﺘﺮ
در ﻣﺤﻠﻮل 200ﻣﻴﻠﻲ ﻣﻮﻻر ﺷﻮد .ﻣﺨﻠﻮط ﺣﺎﺻﻞ ﺑﻪ ﻣﺪت در ﻣﺪ Kiniticدر ﻃﻮل ﻣﻮج 430ﻧﺎﻧﻮﻣﺘﺮ ﺻﻔﺮ ﺷﺪ و ﺳﭙﺲ
10دﻗﻴﻘﻪ ﺳﺎﻧﺘﺮﻳﻔﻮژ ﺷﺪ و ﺟﺬب ﺑﺨﺶ روﻳﻲ را در ﻃﻮل ﺑﺮاي اﻧﺪازه ﮔﻴﺮي ﻓﻌﺎﻟﻴﺖ ﭘﻠﻲ ﻓﻨﻞ اﻛﺴﻴﺪاز 20 ،ﻣﻴﻜﺮوﻟﻴﺘﺮ
ﻣﻮج ﻫﺎي 652 ،615 ،562و 750ﻧﺎﻧﻮﻣﺘﺮ اﻧﺪازه ﮔﻴﺮي ﺷﺪ. ﻋﺼﺎره زﻳﻤﺎﻳﻪ اﺳﺘﺨﺮاج ﺷﺪه ﺑﺮاي ﻫﺮﮔﻮﻧﻪ ﻧﻮﺳﺘﻮك ﺑﻪ
ﻏﻠﻈﺖ ﻓﻴﻜﻮﺑﻴﻠﻲﭘﺮوﺗﺌﻴﻦﻫﺎ ﺑﺎ اﺳﺘﻔﺎده از ﻓﺮﻣﻮلﻫﺎي زﻳﺮ ﺑﺮ ﺟﺎي 20ﻣﻴﻜﺮوﻟﻴﺘﺮ ﺑﺎﻓﺮ Tris-HClﺑﻪ ﻛﻮوت اﺿﺎﻓﻪ ﺷﺪ و
ﺣﺴﺐ ﻣﻴﻜﺮوﮔﺮم ﺑﺮ ﻣﻴﻠﻲ ﻟﻴﺘﺮ ﻣﺤﺎﺳﺒﻪ ﺷﺪ. در ﻣﺪت 60ﺛﺎﻧﻴﻪ ﻓﻌﺎﻟﻴﺖ ﭘﻠﻲ ﻓﻨﻞ اﻛﺴﻴﺪاز ﺑﺮ ﺣﺴﺐ
AP = [1000× (A652-A750)-208×(A615-A750)]/5.09 Abs/minﺗﺮﺳﻴﻢ ﺷﺪ .در ﻧﻬﺎﻳﺖ ﻓﻌﺎﻟﻴﺖ آﻧﺰﻳﻤﻲ ﺑﺮ ﺣﺴﺐ
PC = [1000× (A615-A750)-474×(A652-A750)]/5.34 واﺣﺪ زﻳﻤﺎﻳﻪ اي در ﻣﻴﻠﻲ ﮔﺮم ﭘﺮوﺗﺌﻴﻦ)(Unit mg-1 protein
PE = [1000× (A562-A750)-2.41×(PC)- ﮔﺰارش ﺷﺪ.
0.949×(AP)]/9.62
آﻧﺎﻟﻴﺰﻫﺎي آﻣﺎري :ﺗﻤﺎم آزﻣﺎﻳﺶ ﻫﺎي اﻳﻦ ﭘﮋوﻫﺶ در ﻗﺎﻟﺐ ﺳﻮﭘﺮ اﻛﺴﻴﺪ دﻳﺴﻤﻮﺗﺎز ) :(SODﻓﻌﺎﻟﻴﺖ اﻳﻦ زﻳﻤﺎﻳﻪ ﺑﺎ
ﻃﺮح ﻛﺎﻣﻼ ﺗﺼﺎدﻓﻲ ﺑﺎ 4ﺗﻜﺮار اﻧﺠﺎم ﺷﺪ .دادهﻫﺎي ﺣﺎﺻﻞ ﻗﺎﺑﻠﻴﺖ آن در ﺑﺎزدارﻧﺪﮔﻲ واﻛﻨﺶ اﺣﻴﺎﻳﻲ ﻓﺘﻮﺷﻴﻤﻴﺎﻳﻲ
از ﺑﺮرﺳﻲﻫﺎ ﺑﻮﺳﻴﻠﻪ ﻧﺮم اﻓﺰار آﻣﺎري ) SPSSﻧﺴﺨﻪ (21 ﻧﻴﺘﺮوﺑﻠﻮ ﺗﺘﺮازوﻟﻴﻮم ) (NBTﺗﻌﻴﻴﻦ ﮔﺮدﻳﺪ .ﻣﺤﻠﻮل واﻛﻨﺶ
ﻣﻮرد ﺗﺠﺰﻳﻪ وﺗﺤﻠﻴﻞ ﻗﺮار ﮔﺮﻓﺖ .ﻣﻘﺎﻳﺴﻪ ﻣﻴﺎﻧﮕﻴﻦ دادهﻫﺎ در ﺑﺮ اﺳﺎس ﺳﻨﺠﺶ ﻓﻌﺎﻟﻴﺖ زﻳﻤﺎﻳﻪ در ﻣﺤﻴﻂ ﻣﺤﺘﻮي ﺑﺎﻓﺮ
664
ﺟﻠﺪ ،27ﺷﻤﺎره 1393 ،4 ﻣﺠﻠﻪ ﭘﮋوﻫﺸﻬﺎي ﮔﻴﺎﻫﻲ )ﻣﺠﻠﻪ زﻳﺴﺖ ﺷﻨﺎﺳﻲ اﻳﺮان(
N. ellipsosporumﻧﺴﺒﺖ ﺑﻪ ﮔﻮﻧﻪ دﻳﮕﺮ ﺑﻴﺸﺘﺮ اﺳﺖ ﺳﻄﺢ ﺧﻄﺎي (P <%5 ) % 5ﺑﺎ آزﻣﻮن داﻧﻜﻦ )(DMRT
)ﺷﻜﻞ a، 1و.( b اﻧﺠﺎم ﺷﺪ.
ﻧﺘﺎﻳﺞ ﺣﺎﺻﻞ از ﺑﺮرﺳﻲ اﺛﺮ ﺗﻨﺶ ﺷﻮري ﺑﺮ ﻓﻌﺎﻟﻴﺖ زﻳﻤﺎﻳﻪ ﮔﻮﻧﻪ ﺳﻴﺎﻧﻮﺑﺎﻛﺘﺮي ﻣﻮرد ﻣﻄﺎﻟﻌﻪ ﻣﺸﺎﺑﻪ ﻣﻲﺑﺎﺷﺪ و ﻫﺮ دو
ﭘﺮاﻛﺴﻴﺪاز در N. ellipsosporumﻛﺎﻫﺶ ﻣﻌﻨﻲداري را ﮔﻮﻧﻪ در ﻏﻠﻈﺖ 200ﻣﻴﻠﻲ ﻣﻮﻻر ﻧﻤﻚ ﺑﻴﺸﺘﺮﻳﻦ ﻣﻴﺰان رﺷﺪ
ﻧﺴﺒﺖ ﺑﻪ ﺷﺎﻫﺪ ﻧﺸﺎن ﻣﻲدﻫﺪ .اﻣﺎ ﻓﻌﺎﻟﻴﺖ زﻳﻤﺎﻳﻪ ﭘﺮاﻛﺴﻴﺪاز را ﻧﺸﺎن ﻣﻲدﻫﻨﺪ .ﺑﺎ اﻳﻨﺤﺎل ﻣﻴﺰان اﻓﺰاﻳﺶ رﺷﺪ در
665
ﺟﻠﺪ ،27ﺷﻤﺎره 1393 ،4 ﻣﺠﻠﻪ ﭘﮋوﻫﺸﻬﺎي ﮔﻴﺎﻫﻲ )ﻣﺠﻠﻪ زﻳﺴﺖ ﺷﻨﺎﺳﻲ اﻳﺮان(
ﻏﻠﻈﺖ 50ﻣﻴﻠﻲ ﻣﻮﻻر ﻗﺎﺑﻞ اﻧﺪازه ﮔﻴﺮي اﺳﺖ ) ﺷﻜﻞ c ،3 در N. piscinaleﻧﺴﺒﺖ ﺑﻪ ﺷﺎﻫﺪ ﺑﺼﻮرت ﻣﻌﻨﻲ داري
و.(d اﻓﺰاﻳﺶ ﻣﻲ ﻳﺎﺑﺪ و ﻫﻤﭽﻨﻴﻦ ﺑﻴﺸﺘﺮﻳﻦ ﻓﻌﺎﻟﻴﺖ اﻳﻦ زﻳﻤﺎﻳﻪ در
ﺷﻜﻞ -2اﺛﺮ ﺗﻨﺶ NaClﺑﺮ ﻣﺤﺘﻮاي ﭘﺮوﻟﻴﻦ و ﻣﺎﻟﻮن دي آﻟﺪﺋﻴﺪ در دو ﮔﻮﻧﻪ ﻧﻮﺳﺘﻮك در اﻧﺘﻬﺎي ﻣﺮﺣﻠﻪ ﻟﮕﺎرﻳﺘﻤﻲ رﺷﺪ )ﻣﻘﺎدﻳﺮ ﻣﻴﺎﻧﮕﻴﻦ ﺳﻪ ﺗﻜﺮار ±
اﻧﺤﺮاف ﻣﻌﻴﺎر اﺳﺖ .ﻣﻘﺎﻳﺴﻪ ﻣﻴﺎﻧﮕﻴﻦ ﻫﺎ ﺑﺎ اﺳﺘﻔﺎده از آزﻣﻮن داﻧﻜﻦ اﻧﺠﺎم ﺷﺪ و ﺣﺮوف ﻣﺸﺘﺮك ﺑﻴﺎﻧﮕﺮ ﻋﺪم اﺧﺘﻼف ﻣﻌﺘﻲ دار ) (P≤0.05ﻣﻲ ﺑﺎﺷﺪ(.
ﺷﻜﻞ-3اﺛﺮ ﺗﻨﺶ NaClﺑﺮ ﻓﻌﺎﻟﻴﺖ زﻳﻤﺎﻳﻪ ﻫﺎي ﻛﺎﺗﺎﻻز) (CATو ﭘﺮاﻛﺴﻴﺪاز) (POXدر دو ﮔﻮﻧﻪ ﻧﻮﺳﺘﻮك در اﻧﺘﻬﺎي ﻣﺮﺣﻠﻪ ﻟﮕﺎرﻳﺘﻤﻲ رﺷﺪ )ﻣﻘﺎدﻳﺮ
ﻣﻴﺎﻧﮕﻴﻦ ﺳﻪ ﺗﻜﺮار ±اﻧﺤﺮاف ﻣﻌﻴﺎر اﺳﺖ .ﻣﻘﺎﻳﺴﻪ ﻣﻴﺎﻧﮕﻴﻦ ﻫﺎ ﺑﺎ اﺳﺘﻔﺎده از آزﻣﻮن داﻧﻜﻦ اﻧﺠﺎم ﺷﺪ و ﺣﺮوف ﻣﺸﺘﺮك ﺑﻴﺎﻧﮕﺮ ﻋﺪم اﺧﺘﻼف ﻣﻌﺘﻲ دار
) (P≤0.05ﻣﻲ ﺑﺎﺷﺪ(.
ﻣﻮﻻر ﻛﺎﻣﻼ اﻓﺰاﻳﺸﻲ اﺳﺖ و ﻫﻤﭽﻨﻴﻦ ﺑﻴﺸﺘﺮﻳﻦ ﻣﻴﺰان در ﺗﻤﺎم ﺗﻴﻤﺎرﻫﺎ ﻓﻌﺎﻟﻴﺖ زﻳﻤﺎﻳﻪ ﺳﻮﭘﺮاﻛﺴﻴﺪدﻳﺴﻤﻮﺗﺎز در
ﻓﻌﺎﻟﻴﺖ اﻳﻦ زﻳﻤﺎﻳﻪ در اﻳﻦ ﻏﻠﻈﺖ وﺟﻮد دارد .ﻓﻌﺎﻟﻴﺖ اﻳﻦ N. ellipsosporumاﻓﺰاﻳﺶ ﻣﻌﻨﻲ داري را ﻧﺴﺒﺖ ﺑﻪ ﺷﺎﻫﺪ
زﻳﻤﺎﻳﻪ در N. piscinaleﻧﻴﺰ ﺗﻘﺮﻳﺒﺎً در ﺗﻤﺎم ﺗﻴﻤﺎرﻫﺎي ﻣﻮرد ﻧﺸﺎن ﻣﻲدﻫﺪ و اﻳﻦ روﻧﺪ ﺗﻐﻴﻴﺮات ﺗﺎ ﻏﻠﻈﺖ 150ﻣﻴﻠﻲ
666
ﺟﻠﺪ ،27ﺷﻤﺎره 1393 ،4 ﻣﺠﻠﻪ ﭘﮋوﻫﺸﻬﺎي ﮔﻴﺎﻫﻲ )ﻣﺠﻠﻪ زﻳﺴﺖ ﺷﻨﺎﺳﻲ اﻳﺮان(
ﻣﻮﻻر ﻗﺎﺑﻞ ﺗﺸﺨﻴﺺ اﺳﺖ) ﺷﻜﻞ a ،4و .(b ﻣﻄﺎﻟﻌﻪ ﻧﺴﺒﺖ ﺑﻪ ﺷﺎﻫﺪ اﻓﺰاﻳﺶ ﻣﻌﻨﻲ داري را ﻧﺸﺎن ﻣﻲدﻫﺪ
و ﻫﻤﭽﻨﻴﻦ ﺑﻴﺸﺘﺮﻳﻦ ﻓﻌﺎﻟﻴﺖ اﻳﻦ زﻳﻤﺎﻳﻪ در ﺗﻴﻤﺎر 100ﻣﻴﻠﻲ
ﺷﻜﻞ-4اﺛﺮ ﺗﻨﺶ NaClﺑﺮ ﻓﻌﺎﻟﻴﺖ زﻳﻤﺎﻳﻪ ﻫﺎي ﺳﻮﭘﺮاﻛﺴﻴﺪ دﻳﺴﻤﻮﺗﺎز) (SODو ﭘﻠﻲ ﻓﻨﻞ اﻛﺴﻴﺪاز) (PPOدر دو ﮔﻮﻧﻪ ﻧﻮﺳﺘﻮك در اﻧﺘﻬﺎي ﻣﺮﺣﻠﻪ
ﻟﮕﺎرﻳﺘﻤﻲ رﺷﺪ )ﻣﻘﺎدﻳﺮ ﻣﻴﺎﻧﮕﻴﻦ ﺳﻪ ﺗﻜﺮار ±اﻧﺤﺮاف ﻣﻌﻴﺎر اﺳﺖ .ﻣﻘﺎﻳﺴﻪ ﻣﻴﺎﻧﮕﻴﻦ ﻫﺎ ﺑﺎ اﺳﺘﻔﺎده از آزﻣﻮن داﻧﻜﻦ اﻧﺠﺎم ﺷﺪ و ﺣﺮوف ﻣﺸﺘﺮك ﺑﻴﺎﻧﮕﺮ ﻋﺪم
اﺧﺘﻼف ﻣﻌﺘﻲ دار ) (P≤0.05ﻣﻲ ﺑﺎﺷﺪ(.
ﺷﻜﻞ-5اﺛﺮ ﺗﻨﺶ NaClﺑﺮ ﻣﺤﺘﻮاي آﻟﻮﻓﻴﻜﻮﺳﻴﺎﻧﻴﻦ) (APو ﻓﻴﻜﻮﺳﻴﺎﻧﻴﻦ) (PCدر دو ﮔﻮﻧﻪ ﻧﻮﺳﺘﻮك در اﻧﺘﻬﺎي ﻣﺮﺣﻠﻪ ﻟﮕﺎرﻳﺘﻤﻲ رﺷﺪ )ﻣﻘﺎدﻳﺮ ﻣﻴﺎﻧﮕﻴﻦ ﺳﻪ
ﺗﻜﺮار ±اﻧﺤﺮاف ﻣﻌﻴﺎر اﺳﺖ .ﻣﻘﺎﻳﺴﻪ ﻣﻴﺎﻧﮕﻴﻦ ﻫﺎ ﺑﺎ اﺳﺘﻔﺎده از آزﻣﻮن داﻧﻜﻦ اﻧﺠﺎم ﺷﺪ و ﺣﺮوف ﻣﺸﺘﺮك ﺑﻴﺎﻧﮕﺮ ﻋﺪم اﺧﺘﻼف ﻣﻌﺘﻲ دار )(P≤0.05
ﻣﻲ ﺑﺎﺷﺪ(.
ﻣﻮﻻر ﻛﺎﻣﻼ ﺻﻌﻮدي اﺳﺖ و ﺑﻴﺸﺘﺮﻳﻦ ﻣﻴﺰان ﻓﻌﺎﻟﻴﺖ اﻳﻦ N. ellipsosporum ﻓﻌﺎﻟﻴﺖ زﻳﻤﺎﻳﻪ ﭘﻠﻲﻓﻨﻞاﻛﺴﻴﺪاز در
زﻳﻤﺎﻳﻪ ﻏﻠﻈﺖ 200ﻣﻴﻠﻲ ﻣﻮﻻر ﻧﺸﺎن ﻣﻲدﻫﺪ .و ﻫﻤﭽﻨﻴﻦ در ﺗﺤﺖ ﺗﺎﺛﻴﺮ ﺗﻨﺶ ﺷﻮري ﻧﺴﺒﺖ ﺑﻪ ﺷﺎﻫﺪ اﻓﺰاﻳﺶ ﻣﻌﻨﻲداري
N. piscinaleﺑﺎ اﻓﺰاﻳﺶ ﺗﻨﺶ ﺷﻮري ﻓﻌﺎﻟﻴﺖ زﻳﻤﺎﻳﻪ ﭘﻠﻲﻓﻨﻞ را ﻧﺸﺎن ﻣﻲدﻫﺪ و اﻳﻦ روﻧﺪ ﺗﻐﻴﻴﺮات ﺗﺎ ﻏﻠﻈﺖ 200ﻣﻴﻠﻲ
667
ﺟﻠﺪ ،27ﺷﻤﺎره 1393 ،4 ﻣﺠﻠﻪ ﭘﮋوﻫﺸﻬﺎي ﮔﻴﺎﻫﻲ )ﻣﺠﻠﻪ زﻳﺴﺖ ﺷﻨﺎﺳﻲ اﻳﺮان(
اﻓﺰاﻳﺶ ﻓﻌﺎﻟﻴﺖ اﻳﻦ آﻧﺰﻳﻢ در N. ellipsosporumﻛﺎﻣﻼً اﻛﺴﻴﺪاز اﻓﺰاﻳﺶ ﻣﻌﻨﻲداري را ﻧﺴﺒﺖ ﺑﻪ ﺷﺎﻫﺪ ﻧﺸﺎن ﻣﻲدﻫﺪ
واﺑﺴﺘﻪ ﺑﻪ ﻏﻠﻈﺖ اﺳﺖ. و ﺑﻴﺸﺘﺮﻳﻦ ﻓﻌﺎﻟﻴﺖ اﻳﻦ زﻳﻤﺎﻳﻪ در ﻏﻠﻈﺖ 250ﻣﻴﻠﻲ ﻣﻮﻻر
وﺟﻮد دارد) ﺷﻜﻞ c ،4و .(dﺑﺎاﻳﻨﺤﺎل ﻻزم ﺑﻪ ذﻛﺮ اﺳﺖ ﻛﻪ
ﺷﻜﻞ-6اﺛﺮ ﺗﻨﺶ NaClﺑﺮ ﻣﺤﺘﻮاي ﻓﻴﻜﻮارﻳﺘﺮﻳﻦ) (PEو ﻓﻴﻜﻮﺑﻴﻠﻲ ﭘﺮوﺗﺌﻴﻦ) (PBPدر دو ﮔﻮﻧﻪ ﻧﻮﺳﺘﻮك در اﻧﺘﻬﺎي ﻣﺮﺣﻠﻪ ﻟﮕﺎرﻳﺘﻤﻲ رﺷﺪ )ﻣﻘﺎدﻳﺮ
ﻣﻴﺎﻧﮕﻴﻦ ﺳﻪ ﺗﻜﺮار ±اﻧﺤﺮاف ﻣﻌﻴﺎر اﺳﺖ .ﻣﻘﺎﻳﺴﻪ ﻣﻴﺎﻧﮕﻴﻦ ﻫﺎ ﺑﺎ اﺳﺘﻔﺎده از آزﻣﻮن داﻧﻜﻦ اﻧﺠﺎم ﺷﺪ و ﺣﺮوف ﻣﺸﺘﺮك ﺑﻴﺎﻧﮕﺮ ﻋﺪم اﺧﺘﻼف ﻣﻌﺘﻲ دار
) (P≤0.05ﻣﻲ ﺑﺎﺷﺪ(.
ﺗﻨﺶ ﺷﻮري ﺑﺮ اﻳﻦ دو رﻧﮕﻴﺰه زﻳﺴﺘﻲ درN. piscinale ﻧﺘﺎﻳﺞ ﺣﺎﺻﻞ از ﺑﺮرﺳﻲ اﺛﺮ ﺗﻨﺶ ﺷﻮري ﺑﺮ ﻣﺤﺘﻮاي
ﺑﺴﻴﺎر ﻛﻤﺘﺮ از ﮔﻮﻧﻪ دﻳﮕﺮ اﺳﺖ. آﻟﻮﻓﻴﻜﻮﺳﻴﺎﻧﻴﻦ در ﮔﻮﻧﻪ N. ellipsosporumﻧﺸﺎن ﻣﻲدﻫﺪ،
ﻣﺤﺘﻮاي ﻓﻴﻜﻮارﻳﺘﺮﻳﻦ در ﺗﻴﻤﺎرﻫﺎي 150، 100و 250ﻣﻴﻠﻲ ﻛﻪ ﻣﺤﺘﻮاي آﻟﻮﻓﻴﻜﻮﺳﻴﺎﻧﻴﻦ در ﺗﻤﺎم ﺗﻴﻤﺎرﻫﺎ ﻧﺴﺒﺖ ﺑﻪ ﺷﺎﻫﺪ
ﻣﻮﻻر در N. ellipsosporumﻧﺴﺒﺖ ﺑﻪ ﺷﺎﻫﺪ اﻓﺰاﻳﺶ ﻣﻌﻨﻲ اﻓﺰاﻳﺶ ﻣﻌﻨﻲداري را ﻧﺸﺎن ﻣﻲدﻫﺪ و ﺑﻴﺸﺘﺮﻳﻦ ﻣﻴﺰان آن در
داري را ﻧﺸﺎن ﻣﻲدﻫﺪ اﻣﺎ در ﺗﻴﻤﺎرﻫﺎي 50و 200ﻣﻴﻠﻲ ﻏﻠﻈﺖ 100ﻣﻴﻠﻲ ﻣﻮﻻر ﻣﻲﺑﺎﺷﺪ .ﻫﻤﭽﻨﻴﻦ ﻣﺤﺘﻮاي
ﻣﻮﻻر ﻧﺴﺒﺖ ﺑﻪ ﺷﺎﻫﺪ ﻛﺎﻫﺶ ﻣﻌﻨﻲداري را ﻧﺸﺎن ﻣﻲدﻫﺪ .اﻣﺎ آﻟﻮﻓﻴﻜﻮﺳﻴﺎﻧﻴﻦ ﻧﻴﺰ در N. piscinaleﻧﺴﺒﺖ ﺑﻪ ﺷﺎﻫﺪ اﻓﺰاﻳﺶ
در ﺣﺎﻟﻲ ﻛﻪ ﻣﺤﺘﻮاي ﻓﻴﻜﻮارﻳﺘﺮﻳﻦ در N. piscinaleﺗﺤﺖ ﻣﻌﻨﻲداري را ﻧﺸﺎن ﻣﻲدﻫﺪ و ﺑﻴﺸﺘﺮﻳﻦ ﻣﻴﺰان آن در ﺗﻴﻤﺎر 50
ﺗﺎﺛﻴﺮ ﺗﻨﺶ ﺷﻮري اﻓﺰاﻳﺶ ﻣﻲ ﻳﺎﺑﺪ .ﻣﺤﺘﻮاي ﻓﻴﻜﻮﺑﻴﻠﻲ ﻣﻴﻠﻲ ﻣﻮﻻر وﺟﻮد دارد) ﺷﻜﻞ a ،5و .(bﻣﺤﺘﻮاي
ﻓﻴﻜﻮﺳﻴﺎﻧﻴﻦ ﺗﺤﺖ ﺗﺎﺛﻴﺮ ﺗﻨﺶ ﺷﻮري در N. ellipsosporum
ﭘﺮوﺗﺌﻴﻦ در ﻫﺮ دو ﮔﻮﻧﻪ ﺳﻴﺎﻧﻮﺑﺎﻛﺘﺮي ﻧﺴﺒﺖ ﺑﻪ ﺷﺎﻫﺪ
اﻓﺰاﻳﺶ ﻣﻌﻨﻲ داري را ﻧﺸﺎن ﻣﻲ دﻫﺪ) ﺷﻜﻞ a ،6و .(b ﻧﻴﺰاﻓﺰاﻳﺶ ﻣﻌﻨﻲداري را ﻧﺸﺎن ﻣﻲدﻫﺪ و ﺑﻴﺸﺘﺮﻳﻦ ﻣﻴﺰان آن
ﻣﺸﺎﺑﻪ ﻧﺘﺎﻳﺞ ﺣﺎﺻﻞ از دو رﻧﮕﻴﺰه ﻗﺒﻠﻲ ﺗﻮﺟﻪ ﺑﻪ ﻧﺘﺎﻳﺞ ﻧﺸﺎن در ﻏﻠﻈﺖ 100ﻣﻴﻠﻲ ﻣﻮﻻر وﺟﻮد دارد .و ﻫﻤﭽﻨﻴﻦ ﻣﺸﺎﺑﻪ
ﺑﺎ ﮔﻮﻧﻪ ﻗﺒﻠﻲ ﻣﺤﺘﻮاي ﻓﻴﻜﻮﺳﻴﺎﻧﻴﻦ در N. piscinaleﻧﺴﺒﺖ
ﻣﻲ دﻫﺪ ﻛﻪ ﺗﺎﺛﻴﺮ ﺗﻨﺶ ﺷﻮري ﺑﺮ اﻳﻦ دو رﻧﮕﻴﺰه زﻳﺴﺘﻲ در
N. piscinaleﺑﺴﻴﺎر ﻛﻤﺘﺮ از ﮔﻮﻧﻪ دﻳﮕﺮ اﺳﺖ. ﺑﻪ ﺷﺎﻫﺪ ﺑﺼﻮرت ﻣﻌﻨﻲ دار اﻓﺰاﻳﺶ ﻣﻲ ﻳﺎﺑﺪ و ﻫﻤﭽﻨﻴﻦ
ﺑﻴﺸﺘﺮﻳﻦ ﻣﻴﺰان آن در ﻏﻠﻈﺖ 150ﻣﻴﻠﻲ ﻣﻮﻻر وﺟﻮد دارد
ﻧﺘﺎﻳﺞ ﺣﺎﺻﻞ از ﺑﺮرﺳﻲ اﺛﺮ ﺗﻨﺶ ﺷﻮري ﺑﺮ ﻣﺤﺘﻮاي
)ﺷﻜﻞ c ،5و .(dﺗﻮﺟﻪ ﺑﻪ ﻧﺘﺎﻳﺞ ﻧﺸﺎن ﻣﻲ دﻫﺪ ﻛﻪ ﺗﺎﺛﻴﺮ
ﻓﻴﻜﻮﺑﻴﻠﻲ ﭘﺮوﺗﺌﻴﻦ در دو ﮔﻮﻧﻪ ﺳﻴﺎﻧﻮﺑﺎﻛﺘﺮي ﻣﻮرد ﻣﻄﺎﻟﻌﻪ در
ﺷﻜﻞ ) c 6و (dﻧﺸﺎن داده ﺷﺪه اﺳﺖ .ﺑﺮ اﺳﺎس ﻧﺘﺎﻳﺞ
668
ﺟﻠﺪ ،27ﺷﻤﺎره 1393 ،4 ﻣﺠﻠﻪ ﭘﮋوﻫﺸﻬﺎي ﮔﻴﺎﻫﻲ )ﻣﺠﻠﻪ زﻳﺴﺖ ﺷﻨﺎﺳﻲ اﻳﺮان(
N. ellipsosporumﻧﺴﺒﺖ ﺑﻪ ﺷﺮاﻳﻂ ﺗﻨﺶ در ﺣﺎﺻﻞ از اﻳﻦ ﻣﻄﺎﻟﻌﻪ ﻣﺤﺘﻮاي ﻓﻴﻜﻮﺑﻴﻠﻲ ﭘﺮوﺗﺌﻴﻦ درﺗﻤﺎم
N. piscinaleﺑﻴﺸﺘﺮ اﻓﺰاﻳﺶ ﻣﻲ ﻳﺎﺑﺪ .در ﺿﻤﻦ ﻧﺴﺒﺖ در ﻧﻤﻚ ﻏﻴﺎب در ﺣﺘﻲ و ﺷﻮري ﺳﻄﻮح
PE+PCﺑﻪ APCدر N. ellipsosporumﺑﺎ اﻓﺰاﻳﺶ ﺷﻮري N. ellipsosporumﻧﺴﺒﺖ ﺑﻪ N. piscinaleﺑﺎﻻﺗﺮ اﺳﺖ .در
ﺑﻪ ﺑﻴﺸﺘﺮ از 50ﻣﻴﻠﻲ ﻣﻮﻻر ﺑﻪ ﺻﻮرت ﻣﻌﻨﻲ داري ﻧﺴﺒﺖ ﺑﻪ ﺿﻤﻦ ﻣﺤﺘﻮاي اﻳﻦ رﻧﮕﻴﺰه ﻫﺎ در ﻫﺮ دو ﮔﻮﻧﻪ ﺗﺤﺖ ﺗﻨﺶ
ﺷﺎﻫﺪ اﻓﺰاﻳﺶ ﻣﻲ ﻳﺎﺑﺪ. ﺷﻮري ﺑﺼﻮرت ﻣﻌﻨﻲ دار اﻓﺰاﻳﺶ ﻣﻲ ﻳﺎﺑﺪ وﻟﻲ اﻳﻦ اﻓﺰاﻳﺶ
در N. ellipsosporumﻧﺴﺒﺖ ﺑﻪ ﮔﻮﻧﻪ دﻳﮕﺮ ﺑﻴﺸﺘﺮ و
ﺑﺤﺚ و ﻧﺘﻴﺠﻪ ﮔﻴﺮي
ﭼﺸﻤﮕﻴﺮ ﺗﺮ اﺳﺖ .در ﻣﺠﻤﻮع ﻣﺤﺘﻮاي ﻫﺮ 4ﺗﺮﻛﻴﺐ اﺧﻴﺮ
ﺗﻨﺶ ﺷﻮري ﻳﻜﻲ از ﺗﻨﺶﻫﺎي ﻏﻴﺮزﻳﺴﺘﻲ ﻣﻬﻢ اﺳﺖ و اﺛﺮات ﻣﻮرد ﻣﻄﺎﻟﻌﻪ در ﺷﺮاﻳﻂ ﺷﺎﻫﺪ و ﺗﺤﺖ ﺗﻨﺶ ﺷﻮري در
ﺟﺪي ﺑﺮ ﺑﻘﺎي ﻣﻮﺟﻮد زﻧﺪه و ﻧﻴﺰ ﺗﻮﻟﻴﺪ ﻣﺤﺼﻮل و ﺗﻮﻟﻴﺪ N. ellipsosporumﻧﺴﺒﺖ ﺑﻪ N. piscinaleﺑﻴﺸﺘﺮ اﺳﺖ
ﺗﺮﻛﻴﺒﺎت زﻳﺴﺘﻲ دارد .ﺟﻠﺒﻚ ﻫﺎ از ﻧﻈﺮ ﺗﺤﻤﻞ ﺷﻮري ﺑﻪ دو )ﺷﻜﻞ 5و .(6
ﮔﺮوه ﻛﻠﻲ ﻗﺎﺑﻞ ﺗﻘﺴﻴﻢ ﻣﻲﺑﺎﺷﻨﺪ ،ﻫﺎﻟﻮﻓﻴﻞ )= ﻧﻤﻚ دوﺳﺖ؛
ﺑﺮاي ﺑﻴﺸﺘﺮﻳﻦ ﻣﻴﺰان رﺷﺪ ﺑﻪ ﻧﻤﻚ ﻧﻴﺎز دارﻧﺪ( و ﻫﺎﻟﻮﺗﻮﻟﺮﻧﺖ
)= ﺟﻠﺒﻚ ﻫﺎي ﻣﺘﺤﻤﻞ ﺑﻪ ﺷﻮري ﻛﻪ ﻏﻠﻈﺖ ﻫﺎي ﺑﺎﻻي
ﻧﻤﻚ را ﺗﺤﻤﻞ ﻣﻲ ﻛﻨﻨﺪ( ﻛﻪ داراي ﺳﺎزوﻛﺎرﻫﺎﻳﻲ ﺟﻬﺖ
ﺣﻔﻆ ﺑﻘﺎ در ﺷﺮاﻳﻂ ﺷﻮر ﻣﻲﺑﺎﺷﻨﺪ .ﺟﻠﺒﻚ ﻫﺎ در ﻫﺮ دو
ﺣﺎﻟﺖ ،اﻧﻮاﻋﻲ از ﻣﺘﺎﺑﻮﻟﻴﺖﻫﺎي ﺛﺎﻧﻮﻳﻪ ﺑﺮاي ﻣﻘﺎﺑﻠﻪ ﺑﺎ
ﺗﻐﻴﻴﺮات اﻟﻘﺎ ﺷﺪه ﺗﻮﺳﻂ ﺷﻮري ،ﺑﺮاي رﺷﺪ و ﻫﻤﭽﻨﻴﻦ
ﺗﻌﺎدل اﺳﻤﺰي ﺗﻮﻟﻴﺪ ﻣﻲﻛﻨﻨﺪ ) .(15در ﻣﻄﺎﻟﻌﻪ ﺣﺎﺿﺮ اﺛﺮ
ﺗﻨﺶ ﺷﻮري ﺑﺮ رﺷﺪ دو ﮔﻮﻧﻪ ﺳﻴﺎﻧﻮﺑﺎﻛﺘﺮي ﻣﻮرد ﻣﻄﺎﻟﻌﻪ
ﻗﺮار ﮔﺮﻓﺖ ،در ﻫﺮ دو ﮔﻮﻧﻪ ﺑﺎ اﻓﺰاﻳﺶ ﻏﻠﻈﺖ ﻧﻤﻚ رﺷﺪ
اﻓﺰاﻳﺶ ﻳﺎﻓﺖ .ﻧﺘﺎﻳﺞ ﻧﺸﺎن ﻣﻲ دﻫﺪ ﻛﻪ اﻳﻦ دو ﮔﻮﻧﻪ
ﺳﻴﺎﻧﻮﺑﺎﻛﺘﺮي ﺗﻮاﻧﺎﻳﻲ ﺗﺤﻤﻞ ﻧﻤﻚ را دارﻧﺪ و ﺑﺮاي اﻳﻦ
ﺳﺎزش از راﻫﺒﺮد ﻫﺎي ﻣﺨﺘﻠﻒ ﻣﺎﻧﻨﺪ ﺳﻨﺘﺰ اﺳﻤﻮﻟﻴﺖ ﻫﺎي ﺷﻜﻞ-7اﺛﺮ ﺗﻨﺶ NaClﺑﺮ ﻧﺴﺒﺖ ﻣﺠﻤﻮع ﻣﺤﺘﻮاي ﻓﻴﻜﻮارﻳﺘﺮﻳﻦ و
ﺳﺎزﮔﺎر اﺳﻤﺰي ﻣﺎﻧﻨﺪ ﭘﺮوﻟﻴﻦ و ﺳﻴﺴﺘﻢ ﻫﺎي دﻓﺎﻋﻲ ﻓﻴﻜﻮﺳﻴﺎﻧﻴﻦ) (PE+PCﺑﻪ آﻟﻮﻓﻴﻜﻮﺳﻴﺎﻧﻴﻦ) (APدر دو ﮔﻮﻧﻪ ﻧﻮﺳﺘﻮك
ﭘﺎداﻛﺴﺎﻳﻨﺪه ،ﺷﺎﻣﻞ ﭘﺎداﻛﺴﺎﻳﻨﺪﻫﺎي زﻳﻤﺎﻳﻪ اي و ﻏﻴﺮ زﻳﻤﺎﻳﻪ در اﻧﺘﻬﺎي ﻣﺮﺣﻠﻪ ﻟﮕﺎرﻳﺘﻤﻲ رﺷﺪ )ﻣﻘﺎدﻳﺮ ﻣﻴﺎﻧﮕﻴﻦ ﺳﻪ ﺗﻜﺮار ±اﻧﺤﺮاف
ﻣﻌﻴﺎر اﺳﺖ .ﻣﻘﺎﻳﺴﻪ ﻣﻴﺎﻧﮕﻴﻦ ﻫﺎ ﺑﺎ اﺳﺘﻔﺎده از آزﻣﻮن داﻧﻜﻦ اﻧﺠﺎم ﺷﺪ و
اي اﺳﺘﻔﺎده ﻣﻲ ﻛﻨﻨﺪ .ﻣﻄﺎﻟﻌﺎت ﺑﺴﻴﺎري اﺛﺮ ﺗﻨﺶ ﺷﻮري ﺑﺮ
ﺣﺮوف ﻣﺸﺘﺮك ﺑﻴﺎﻧﮕﺮ ﻋﺪم اﺧﺘﻼف ﻣﻌﺘﻲ دار ) (P≤0.05ﻣﻲ ﺑﺎﺷﺪ(.
رﺷﺪ رﻳﺰﺟﻠﺒﻚﻫﺎ و ﺳﻴﺎﻧﻮﺑﺎﻛﺘﺮي ﻫﺎي ﻣﺨﺘﻠﻒ را ﻣﻮرد
در ﭘﺎﻳﺎن ﺑﺮرﺳﻲ ﻧﺴﺒﺖ PE+PCﺑﻪ APCدر دو ﮔﻮﻧﻪ ﺑﻪ
ﺑﺮرﺳﻲ ﻗﺮار داده اﺳﺖ .در ﺳﺎل Abdal-Rahman ،2005
ﻋﻨﻮان ﻣﻌﻴﺎري از اﻧﺪازه ﻓﻴﻜﻮﺑﻴﻠﻲ زوم ﻣﻮرد ﺑﺮرﺳﻲ و ﻧﻴﺰ
ﻧﺸﺎن داد ) (4ﻛﻪ ﺗﻨﺶ ﺷﻮري ﺑﺎﻋﺚ اﻓﺰاﻳﺶ رﺷﺪ در
ﻣﻮرد ﻣﺤﺎﺳﺒﻪ ﻗﺮار ﮔﺮﻓﺖ .ﻧﺘﺎﻳﺞ اﻳﻦ ﻣﺤﺎﺳﺒﺎت در ﺷﻜﻞ 7
Chorella vulgarisو Chlorococcum hummicola
) aو( bاراﺋﻪ ﺷﺪه اﺳﺖ .اﻳﻦ ﻧﺴﺒﺖ ﻳﺎ اﻧﺪازه ﻓﻴﻜﻮﺑﻴﻠﻲ زوم
ﻣﻲ ﺷﻮد .در ﺳﺎل Rao ،2007و ﻫﻤﻜﺎران ﻧﺸﺎن دادﻧﺪ ﻛﻪ
در ﺷﺮاﻳﻂ ﺷﺎﻫﺪ و در ﻏﻴﺎب ﺗﻨﺶ ﺷﻮري در N. piscinale
اﻓﺰاﻳﺶ ﻏﻠﻈﺖ ﻧﻤﻚ ﺳﺒﺐ اﻓﺰاﻳﺶ رﺷﺪ در ﺟﻠﺒﻚ ﺳﺒﺰ
ﻧﺴﺒﺖ ﺑﻪ N. ellipsosporumﺑﺎﻻﺗﺮ اﺳﺖ .ﺑﺎاﻳﻨﺤﺎل ﺗﻨﺶ
Botryococcus brauniiﻣﻲﺷﻮد).(25
ﺷﻮري ﺑﺎﻋﺚ ﺗﻐﻴﻴﺮ اﻳﻦ ﻧﺴﺒﺖ ﻣﻲ ﺷﻮد و اﻳﻦ ﻧﺴﺒﺖ در
669
ﺟﻠﺪ ،27ﺷﻤﺎره 1393 ،4 ﻣﺠﻠﻪ ﭘﮋوﻫﺸﻬﺎي ﮔﻴﺎﻫﻲ )ﻣﺠﻠﻪ زﻳﺴﺖ ﺷﻨﺎﺳﻲ اﻳﺮان(
ﺗﺮ ﺑﻮده اﺳﺖ .ﻟﺬا ﻣﻲ ﺗﻮان ﻧﺘﻴﺠﻪ ﮔﻴﺮي ﻛﺮد ﻛﻪ اﻳﻦ آﻧﺰﻳﻢ ﺳﻨﺠﺶ ﻣﺤﺘﻮاي ﭘﺮوﻟﻴﻦ ﻧﺸﺎن ﻣﻲ دﻫﺪ ﻛﻪ ﺑﺎﻻﺗﺮ ﺑﻮدن
ﻣﻲ ﺗﻮاﻧﺪ ﻳﻜﻲ از دﻻﻳﻞ ﻣﻘﺎوﻣﺖ ﺑﻬﺘﺮ اﻳﻦ ﮔﻮﻧﻪ در ﺑﺮاﺑﺮ ﻣﺤﺘﻮاي ذاﺗﻲ ﭘﺮوﻟﻴﻦ در N. ellipsosporumﻧﺴﺒﺖ ﺑﻪ
ﺗﻨﺶ ﺷﻮري و در ﻧﺘﻴﺠﻪ ﭘﺎﺋﻴﻦ ﺗﺮ ﺑﻮدن ﻣﺤﺘﻮاي ﻣﺎﻟﻮن دي N. piscinaleﻣﻲ ﺗﻮاﻧﺪ ﻳﻜﻲ از ﻋﻮاﻣﻞ ﺗﺤﻤﻞ ﺑﺎﻻﺗﺮ ﮔﻮﻧﻪ
آﻟﺪﺋﻴﺪ ﺑﺎﺷﺪ )ﺷﻜﻞ c ،2و .(dدر ﺳﺎل Lu ،2006و اول ﻧﺴﺒﺖ ﺑﻪ ﺷﻮري ﺑﺎﺷﺪ .ﺳﻨﺠﺶ ﻣﺎﻟﻮن دي آﻟﺪﺋﻴﺪ
ﻫﻤﻜﺎران ﻧﺸﺎن دادﻧﺪ ﻛﻪ زﻳﻤﺎﻳﻪ ﻛﺎﺗﺎﻻز ﺑﻪ ﻣﻨﻈﻮر ﺳﻢ زداﻳﻲ ) (MDAدر ﮔﻮﻧﻪ ﻫﺎي ﻣﻮرد ﻣﻄﺎﻟﻌﻪ ﻧﻴﺰ ﺣﺎﻛﻲ از ﭘﺎﺋﻴﻦ
H2O2در Ulva fasciataاﻓﺰاﻳﺶ ﻣﻲﻳﺎﺑﺪ ) .(19ﺑﺮ ﺑﻮدن ﻣﺤﺘﻮاي MDAدر N. ellipsosporumﻧﺴﺒﺖ ﺑﻪ
ﻋﻜﺲ Luoو Liuدر ﺳﺎل 2011ﻧﺸﺎن دادﻧﺪ ﻛﻪ ﺗﻨﺶ N. piscinaleدر ﺷﺮاﻳﻂ ﺷﺎﻫﺪ و در ﺗﻤﺎم ﺳﻄﻮح ﺷﻮري
Ulva ﺷﻮري ﺑﺎﻋﺚ ﻛﺎﻫﺶ ﻓﻌﺎﻟﻴﺖ زﻳﻤﺎﻳﻪ ﻛﺎﺗﺎﻻز در اﺳﺖ )ﺷﻜﻞ .(2در ﺳﻴﺎﻧﻮﺑﺎﻛﺘﺮي ﻫﺎ ﺗﺤﺖ ﺗﺎﺛﻴﺮ ﺗﻨﺶﻫﺎي
proliferaﻣﻲﺷﻮد ).(20 ﻣﺨﺘﻠﻒ ،ﭘﺮوﻟﻴﻦ و ﺗﺮﻛﻴﺒﺎت دﻳﮕﺮي ﺑﺎ وزن ﻣﻮﻟﻜﻮﻟﻲ ﻛﻢ
ﻧﻘﺶ دارد .ﺳﻮﭘﺮاﻛﺴﻴﺪدﻳﺴﻤﻮﺗﺎز اوﻟﻴﻦ ﺧﻂ دﻓﺎﻋﻲ در ﻣﻘﺎﺑﻞ ﻏﻴﺮزﻳﻤﺎﻳﻪ اي ﻫﺴﺘﻨﺪ وارد ﻋﻤﻞ ﺷﺪه و در ﻛﻨﺘﺮل رادﻳﻜﺎل-
ROSﻳﺎ اﻧﻮاع ﻓﻌﺎل اﻛﺴﻴﮋن اﺳﺖ .آﻧﻴﻮن ﺳﻮﭘﺮاﻛﺴﻴﺪ ﺑﻪ ﻫﺎي آزاد اﻛﺴﻴﮋن و وﺿﻌﻴﺖ اﻛﺴﺎﻳﺶ و اﺣﻴﺎي ﺳﻠﻮل ﻫﺎ
ﻧﻘﺶ ﻣﻬﻤﻲ را اﻳﻔﺎ ﻣﻲ ﻛﻨﻨﺪ .زﻳﻤﺎﻳﻪ ﻫﺎي ﭘﺎداﻛﺴﺎﻳﻨﺪه ﻣﺜﻞ
وﺳﻴﻠﻪ اﺣﻴﺎ اﻛﺴﻴﮋن در ﻓﺘﻮﺳﻴﺴﺘﻢ Iﺗﻮﺳﻂ واﻛﻨﺶ ﻣﻬﻠﺮ
ﺗﻮﻟﻴﺪ ﻣﻲﺷﻮد و ﺑﻌﺪاً در اﺳﺘﺮوﻣﺎ ﺑﻪ اﻛﺴﻴﮋن و H2O2ﺗﺒﺪﻳﻞ CAT ،SODو APXﻧﻴﺰ در اﻳﻦ راﺑﻄﻪ ﻧﻘﺶ ﻣﺸﺎﺑﻪ و
ﻣﻲﺷﻮد .واﻛﻨﺶ H2O2ﺑﺎ ﻳﻮنﻫﺎي ﻓﻠﺰي اﺣﻴﺎ ﺷﺪه ،ﺑﺎﻋﺚ ﻣﻮﺛﺮي را ﺑﺎزي ﻣﻲ ﻛﻨﻨﺪ ).(30
ﺗﻮﻟﻴﺪ رادﻳﻜﺎل ﻫﻴﺪروﻛﺴﻴﻞ ﻣﻲﺷﻮد ،ﻛﻪ ﻳﻚ اﻛﺴﻴﺪﻛﻨﻨﺪه اﻧﻮاع ﻓﻌﺎل اﻛﺴﻴﮋن) (ROSدر ﻃﻲ ﻣﺘﺎﺑﻮﻟﻴﺴﻢ اﻛﺴﻴﮋن در
ﻗﻮي اﺳﺖ و ﻣﻲﺗﻮاﻧﺪ ﺑﺎ ﻣﻮﻟﻜﻮلﻫﺎي زﻳﺴﺘﻲ واﻛﻨﺶ دﻫﺪ و اﻧﺪاﻣﻚ ﻫﺎﺋﻲ ﻣﺎﻧﻨﺪ ﻛﻠﺮوﭘﻼﺳﺖ ،ﻣﻴﺘﻮﻛﻨﺪري و ﭘﺮاﻛﺴﻴﺰوم
ﺑﻪ آﻧﻬﺎ آﺳﻴﺐ رﺳﺎﻧﺪ ) .(23زﻳﻤﺎﻳﻪ ﺳﻮﭘﺮاﻛﺴﻴﺪدﻳﺴﻤﻮﺗﺎز در ﺗﻮﻟﻴﺪ ﻣﻲﺷﻮﻧﺪ .در ﺷﺮاﻳﻂ ﻃﺒﻴﻌﻲ ﺗﻮﻟﻴﺪ ROSﺑﻪ ﻛﻤﻚ
ﻣﻄﺎﻟﻌﻪ ﺣﺎﺿﺮ در دو ﮔﻮﻧﻪ ﻣﻮرد ﻣﻄﺎﻟﻌﻪ اﻓﺰاﻳﺶ ﻣﻌﻨﻲ دار و زﻳﻤﺎﻳﻪ ﻫﺎي ﭘﺎداﻛﺴﺎﻳﻨﺪه و ﺳﺎﻳﺮ ﭘﺎداﻛﺴﺎﻳﻨﺪه ﻫﺎ در اﻧﺪاﻣﻚ-
ﻗﺎﺑﻞ ﻣﻼﺣﻈﻪ اي ﻧﺸﺎن داد .ﻣﻄﺎﻟﻌﺎت زﻳﺎدي ﻣﻴﺰان ﻓﻌﺎﻟﻴﺖ ﻫﺎي ﻣﺨﺘﻠﻒ ﻛﻨﺘﺮل ﻣﻲﺷﻮد .در ﺷﺮاﻳﻂ ﺗﻨﺶ ﺗﻮﻟﻴﺪ ROS
ﺳﻮﭘﺮاﻛﺴﻴﺪدﻳﺴﻤﻮﺗﺎز را در ﮔﻴﺎﻫﺎن و رﻳﺰ ﺟﻠﺒﻚﻫﺎ ﻣﻮرد اﻓﺰاﻳﺶ ﻣﻲﻳﺎﺑﺪ و ﺑﺎﻋﺚ ﺗﻐﻴﻴﺮ ﺳﺎﺧﺘﺎر در اﺳﻴﺪﻫﺎي
ﺑﺮرﺳﻲ ﻗﺮار داده اﺳﺖ .از ﺟﻤﻠﻪ در ﺳﺎل Lu ،2006و ﻧﻮﻛﻠﺌﻴﻚ ،اﻛﺴﻴﺪﺷﺪن ﭘﺮوﺗﺌﻴﻦﻫﺎ و ﭘﺮاﻛﺴﻴﺪاﺳﻴﻮن ﻟﻴﭙﻴﺪﻫﺎ
ﻫﻤﻜﺎران ﻧﺸﺎن دادﻧﺪ ﻛﻪ ﻓﻌﺎﻟﻴﺖ SODﺗﺎ 5درﺻﺪ ﻧﻤﻚ در ﻣﻲﺷﻮد ROS .ﺑﺮ ﺑﻴﺎن ژن زﻳﻤﺎﻳﻪﻫﺎي ﺟﺎروب ﻛﻨﻨﺪه ﻣﺎﻧﻨﺪ
Ulva fasciataاﻓﺰاﻳﺶ ﻣﻲ ﻳﺎﺑﺪ) .(19ﺑﺎ ﺗﻮﺟﻪ ﺑﻪ ﻧﺘﺎﻳﺞ SODو CATﻧﻴﺰ اﺛﺮ ﻣﻲﮔﺬارد .ﺗﻌﺪادي از ﻣﻄﺎﻟﻌﺎت ﻧﺸﺎن
ﺣﺎﺻﻞ ﻧﻘﺶ آﻧﺰﻳﻢ SODدر ﻛﻨﺘﺮل اﻧﻮاع ﻓﻌﺎل اﻛﺴﻴﮋن و ﻣﻲدﻫﺪ ﻛﻪ ﺗﻮاﻧﺎﻳﻲ ﮔﻴﺎﻫﺎن ﺑﺮاي ﺗﺤﻤﻞ ﺷﻮري ﺑﻪ ﺗﻮاﻧﺎﻳﻲ آن
ﺗﺤﻤﻞ ﺑﻬﺘﺮ ﺗﻨﺶ در N. ellipsosporumﺑﻪ وﻳﮋه در ﺷﺪت ﻫﺎ در ﺟﺎروب ﻛﺮدن ROSﺗﺤﺖ ﺗﺎﺛﻴﺮ ﺷﺮاﻳﻂ ﺗﻨﺶ ﺑﺴﺘﮕﻲ
ﻫﺎي ﺑﺎﻻي ﺗﻨﺶ ﻣﺸﺨﺺ اﺳﺖ )ﺷﻜﻞ a ، 4و.( b دارد .اﻓﺰاﻳﺶ ﺳﻴﺴﺘﻢ ﭘﺎداﻛﺴﺎﻳﻨﺪه ،ﻛﻠﻴﺪ ﺟﻠﻮﮔﻴﺮي از آﺳﻴﺐ
ﻓﻴﻜﻮﺑﻴﻠﻲﭘﺮوﺗﺌﻴﻦﻫﺎ در ﺳﻴﺎﻧﻮﺑﺎﻛﺘﺮي ﻫﺎ در ﺳﻄﺢ اﺳﺘﺮوﻣﺎﺋﻲ ﺗﻨﺶ ﺷﻮري ﻣﻲﺑﺎﺷﺪ ) .(14ﻛﺎﺗﺎﻻز ﻳﻜﻲ از ﭘﺎداﻛﺴﺎﻳﻨﺪه ﻫﺎي
ﻏﺸﺎﻫﺎي ﺗﻴﻼﻛﻮﺋﻴﺪي ﻗﺮار دارﻧﺪ و ﺑﻪ ﻋﻨﻮان آﻧﺘﻨﻬﺎي اوﻟﻴﻪ ﻣﻬﻢ اﺳﺖ و در ﺟﺎروب ﻛﺮدن H2O2ﻧﻘﺶ اﺳﺎﺳﻲ را دارد.
ﺑﺮاي ﺟﺬب ﻧﻮر ﺑﺮاي PSIIﻋﻤﻞ ﻣﻲﻛﻨﻨﺪ .ﻣﻮﻗﻌﻴﺖ و در زﻳﻤﺎﻳﻪ اﻳﻦ ﻓﻌﺎﻟﻴﺖ ﺣﺎﺿﺮ، ﻣﻄﺎﻟﻌﻪ در
ﻋﻤﻠﻜﺮد PBPsدر ﺳﻴﺎﻧﻮﺑﺎﻛﺘﺮي ﻫﺎ در ﭘﺎﺳﺦ ﺑﻪ ﺷﺮاﻳﻂ ﺗﻨﺸﻲ N. ellipsosporumو N. piscinaleاﻓﺰاﻳﺶ ﻣﻲ ﻳﺎﺑﺪ .ﻻﻛﻦ
در CAT ﻓﻌﺎﻟﻴﺖ اﻓﺰاﻳﺶ ﻣﻴﺰان ﻣﺠﻤﻮع در
ﺗﻐﻴﻴﺮ ﻣﻲﻛﻨﺪ ) .(31در ﻣﻄﺎﻟﻌﻪ ﺣﺎﺿﺮ ﻣﺤﺘﻮاي اﻧﻮاع ﻣﺨﺘﻠﻒ
N. ellipsosporumﻧﺴﺒﺖ ﺑﻪ ﮔﻮﻧﻪ دﻳﮕﺮ ﺑﻴﺸﺘﺮ و ﭼﺸﻤﮕﻴﺮ
670
ﺟﻠﺪ ،27ﺷﻤﺎره 1393 ،4 ﻣﺠﻠﻪ ﭘﮋوﻫﺸﻬﺎي ﮔﻴﺎﻫﻲ )ﻣﺠﻠﻪ زﻳﺴﺖ ﺷﻨﺎﺳﻲ اﻳﺮان(
ﻣﻄﺎﺑﻘﺖ دارد .در ﭘﮋوﻫﺶ ﻫﺎي دﻳﮕﺮ اﻧﺠﺎم ﺷﺪه در رﻳﺰ ﻓﻴﻜﻮﺑﻴﻠﻲﭘﺮوﺗﺌﻴﻦ و ﻓﻴﻜﻮﺑﻴﻠﻲﭘﺮوﺗﺌﻴﻦ ﻛﻞ در دو ﮔﻮﻧﻪ ﻣﻮرد
ﺟﻠﺒﻚ ﻫﺎ ﺑﻪ ﻧﻘﺶ ﺳﺎﻳﺮ رﻧﮕﻴﺰه ﻫﺎ ﻣﺎﻧﻨﺪ ﺑﺘﺎﻛﺎروﺗﻦ در اﻳﻦ ﻣﻄﺎﻟﻌﻪ اﻓﺰاﻳﺶ ﻳﺎﻓﺘﻪ اﺳﺖ .ﺑﺮ ﻋﻜﺲ ﻧﺘﺎﻳﺞ ﻣﺎ Lu ،
اﻧﺪاﻣﮕﺎن ﻫﺎ ﺑﻪ ﻋﻨﻮان آﻧﺘﻲ اﻛﺴﻴﺪان ﻫﺎي ﻏﻴﺮ آﻧﺰﻳﻤﻲ ﺟﻬﺖ و (2000)Zhangﻧﺸﺎن دادﻧﺪ ﻛﻪ ﺗﻨﺶ ﺷﻮري ﺑﺎﻋﺚ ﻛﺎﻫﺶ
ﻣﻘﺎﺑﻠﻪ ﺑﺎ ﺗﻨﺶ ﺳﺮﻣﺎ ) (1و ﻧﻴﺰ ﺗﻨﺶ ﺷﻮري ) (2اﺷﺎره و ﻣﺤﺘﻮاي ﻓﻴﻜﻮﺳﻴﺎﻧﻴﻦ در Spirulina platensisﻣﻲﺷﻮد).(18
ﭘﺮداﺧﺘﻪ ﺷﺪه اﺳﺖ. Rafiqulو ﻫﻤﻜﺎران ﻧﻴﺰ در ﺳﺎل ،2003اﺛﺮ ﻛﺎﻫﺸﻲ ﺗﻨﺶ
ﺷﻮري ﺑﺮ ﻣﺤﺘﻮاي ﻓﻴﻜﻮﺳﻴﺎﻧﻴﻦ در Spirulina fusiformis
در ﻣﺠﻤﻮع ﻣﻲ ﺗﻮان ﮔﻔﺖ ﻛﻪ N. ellipsosporumاز ﻃﺮﻳﻖ
اﻓﺰاﻳﺶ ﻣﺤﺘﻮاي ﭘﺮوﻟﻴﻦ و ﻓﻌﺎﻟﻴﺖ آﻧﺰﻳﻢ ﻫﺎي آﻧﺘﻲ اﻛﺴﻴﺪان را ﻧﺸﺎن دادﻧﺪ).(24
ﻣﺎﻧﻨﺪ ﻛﺎﺗﺎﻻز و ﺳﻮﭘﺮاﻛﺴﻴﺪ دﻳﺴﻤﻮﺗﺎز و ﻧﻴﺰ اﻓﺰاﻳﺶ ﻣﺤﺘﻮاي ﻫﻤﺎﻧﻮرﻳﻜﻪ ﻗﺒﻼٌ ﻧﻴﺰ ذﻛﺮ ﺷﺪ ﻧﺴﺒﺖ PE+PCﺑﻪ APدر دو
ﻓﻴﻜﻮﺑﻴﻠﻲ زوم ﻫﺎ ﺑﻪ ﻋﻨﻮان آﻧﺘﻲ اﻛﺴﻴﺪان ﻫﺎي ﻏﻴﺮ آﻧﺰﻳﻤﻲ ﺑﺎ ﮔﻮﻧﻪ ﺑﻪ ﻋﻨﻮان ﻣﻌﻴﺎري از اﻧﺪازه ﻓﻴﻜﻮﺑﻴﻠﻲ زوم ﻣﻮرد
اﺛﺮات ﻣﺨﺮب ﺗﻨﺶ ﺷﻮري و ﺗﻨﺶ اﻛﺴﺎﻳﺸﻲ ﺣﺎﺻﻞ ﺑﻪ ﻧﺤﻮ ﻣﺤﺎﺳﺒﻪ ﻗﺮار ﮔﺮﻓﺖ .اﻧﺪازه ﻓﻴﻜﻮﺑﻴﻠﻲ زوم را ﻣﻲ ﺗﻮان ﺑﻪ
ﺑﻬﺘﺮي ﺑﻪ ﻣﻘﺎﺑﻠﻪ ﺑﺮ ﻣﻲ ﺧﻴﺰد .ﺑﻪ ﻋﻼوه ﺑﺎ ﺗﻮﺟﻪ ﺑﻪ ﻧﻘﺶ ﻋﻨﻮان ﺷﺎﺧﺼﻲ از ﭘﺎﻳﺪاري ﻓﻴﻜﻮﺑﻴﻠﻲ زوم در ﻧﻈﺮ ﮔﺮﻓﺖ
ﻓﻴﻜﻮﺑﻴﻠﻲ زوم ﻫﺎ ﺑﻪ ﻋﻨﻮان رﻧﮕﻴﺰه ﻫﺎي آﻧﺘﻨﻲ و دﺧﺎﻟﺖ در ) .(6اﻧﺪازه ﻓﻴﻜﻮﺑﻴﻠﻲ زوم ﻳﺎ ﻧﺴﺒﺖ PE+PCﺑﻪ APدر
ﺗﺮاﺑﺮي اﻧﺮژي ﻧﻮراﻧﻲ ﺑﻪ ﺳﻤﺖ ﻓﺘﻮﺳﻴﺴﺘﻢ ، 2اﻓﺰاﻳﺶ N. ellipsosporumﺑﺎ اﻓﺰاﻳﺶ ﺷﻮري ﺑﻪ ﺑﻴﺸﺘﺮ از 50ﻣﻴﻠﻲ
ﻣﺤﺘﻮاي اﻳﻦ رﻧﮕﻴﺰه ﻫﺎ و اﻓﺰاﻳﺶ اﻧﺪازه ﻓﻴﻜﻮﺑﻴﻠﻲ زوم ﻣﻮﻻر ﺑﻪ ﺻﻮرت ﻣﻌﻨﻲ داري ﻧﺴﺒﺖ ﺑﻪ ﺷﺎﻫﺪ اﻓﺰاﻳﺶ
ﻣﻲ ﺗﻮاﻧﺪ ﺳﺎزوﻛﺎر دﻳﮕﺮي ﺑﺮاي رﺷﺪ ﺑﻬﺘﺮ ﺳﻴﺎﻧﻮﺑﺎﻛﺘﺮي ﻣﻲ ﻳﺎﺑﺪ .اﻳﻦ ﺗﻐﻴﻴﺮ ﻣﻲ ﺗﻮاﻧﺪ ﺑﻪ ﻋﻨﻮان ﺳﺎزوﻛﺎري در ﮔﻴﺎه
ﺗﺤﺖ ﺗﻨﺶ ﺷﻮري ﺑﺎﺷﺪ .ﺑﺎ ﺗﻮﺟﻪ ﺑﻪ ﻛﺎرﺑﺮد ﻓﻴﻜﻮﺑﻴﻠﻲ ﺟﻬﺖ اﻓﺰاﻳﺶ ﻛﺎراﺋﻲ اﻧﺘﻘﺎل اﻧﺮژي ﻧﻮراﻧﻲ از رﻧﮕﻴﺰه ﻫﺎي
ﭘﺮوﺗﺌﻴﻦ ﻫﺎ در ﺻﻨﺎﻳﻊ ﻣﺨﺘﻠﻒ ﺑﻪ وﻳﮋه ﺻﻨﺎﻳﻊ داروﺋﻲ ﺑﺮ آﻧﺘﻨﻲ ﺣﺎﺷﻴﻪ اي ﺑﻪ ﻓﺘﻮﺳﻴﺴﺘﻢ 2در ﻧﻈﺮ ﮔﺮﻓﺘﻪ ﺷﻮد.
اﺳﺎس ﻧﺘﺎﻳﺞ اﻳﻦ ﺗﺤﻘﻴﻖ ﻣﻲ ﺗﻮان از ﺳﻴﺎﻧﻮﺑﺎﻛﺘﺮي ﻫﺎ ﺟﻬﺖ N. ellipsosporumﺟﻬﺖ ﻣﻘﺎﺑﻠﻪ ﺑﻪ اﺛﺮات ﻣﻨﻔﻲ ﺗﻨﺶ
ﺗﻮﻟﻴﺪ زﻳﺴﺘﻲ اﻳﻦ زﻳﺴﺖ رﻧﮕﻴﺰه ﻫﺎ و از ﺗﻨﺶ ﺷﻮري ﺟﻬﺖ ﺷﻮري ﻣﻲ ﺗﻮاﻧﺪ از ﻃﺮﻳﻖ اﻓﺰاﻳﺶ اﻧﺪازه ﻓﻴﻜﻮﺑﻴﻠﻲ زوم ﺑﺎ
اﻓﺰاﻳﺶ ﺗﻮﻟﻴﺪ اﻳﻦ ﺗﺮﻛﻴﺒﺎت ارزﺷﻤﻨﺪ ﺑﻬﺮه ﮔﺮﻓﺖ. ﺗﻨﺶ ﺷﻮري ﻣﻘﺎﺑﻠﻪ ﻛﻨﺪ .اﻳﻦ ﻧﺘﺎﻳﺞ ﺑﺎ ﻳﺎﻓﺘﻪ ﻫﺎي Asadiو
ﻫﻤﻜﺎران ) (6در ﺳﻴﺎﻧﻮﺑﺎﻛﺘﺮي ﺗﺤﺖ ﺗﻨﺶ اﻣﻮاج ﻣﺎﻛﺮووﻳﻮ
ﻣﻨﺎﺑﻊ
-2ﻣﻌﻴﻦ م ،ﺷﺮﻳﻌﺘﻲ م .1389 .اﺛﺮ ﻫﻤﺰﻣﺎن ﺳﺎﻟﻴﺴﻴﻠﻴﻚ اﺳﻴﺪ و ﺗﻨﺶ -1ﭘﺎﺋﻴﺰي م ،ﻋﻴﻨﻌﻠﻲ ،ع ﺷﺮﻳﻌﺘﻲ ،م .1393 .ﺑﺮرﺳﻲ راﺑﻄﻪ ﺑﻴﻦ ﺗﺠﻤﻊ
ﺷﻮري ﺑﺮ رﺷﺪ )ﺗﻘﺴﻴﻢ ﺳﻠﻮﻟﻲ( ،رﻧﮕﻴﺰه ﻫﺎي ﻓﺘﻮﺳﻨﺘﺰي و ﻣﻘﺪار ﺑﺘﺎﻛﺎروﺗﻦ و ﻣﻘﺎوﻣﺖ ﺑﻪ ﺗﻨﺶ ﺳﺮﻣﺎ ﺑﺎ اﺳﺘﻔﺎده از ﻛﻴﻨﺘﻴﻚ
ﺑﺘﺎﻛﺎروﺗﻦ در ﺟﻠﺒﻚ ﺗﻚ ﺳﻠﻮﻟﻲ .ﻣﺠﻠﻪ زﻳﺴﺖ ﺷﻨﺎﺳﻲ اﻳﺮان. ﻓﻠﻮﺋﻮرﺳﺎﻧﺲ ﻛﻠﺮوﻓﻴﻞ aدر ﺟﻠﺒﻚ ﺳﺒﺰ ﺗﻚ ﺳﻠﻮﻟﻲ
.647-638 :(5)23 .Dunaliellaﻣﺠﻠﻪ ﭘﮋوﻫﺸﻬﺎي ﮔﻴﺎﻫﻲ.375-363 :(3)27 .
3- Abeles FB, Biles CL (1991) Characterization of 6- Asadi A, Soltani, N, Asadi AA (2013) Effect of
peroxidases in lignifying peach fruit endocarp. J various microwave frequencies on the
Plant Physiol 95: 269–273. physiologyof a cyanobacterium, Schizothrix
Mexicana. Acta Physiol Plant 35:1367–1372
)4- Abdel-Rahman MHM, Ali RM, Said HA (2005
Alleviation of NaCl-induced effects on 7- Bates LS, Waldren RP, Teare ID (1973) Rapid
Chlorella vulgaris and Chlorococcum hunmicola determination of free proline for water-stress
by riboflavin application. International Journal studies. Plant Soil 39:205–207.
of Agriculture and Biology 7:58–62.
8- Cardozo KHM, Guaratini T, Barros MP, Falcao
5- Aebi H (1984) Catalase in vitro. J Methods VR, Tonon AP, Lopes NP, Campos S, Torres
Enzymol 105: 121–126. )MA, Souza AO, Colepicolo P, Pinto E (2007
671
1393 ،4 ﺷﻤﺎره،27 ﺟﻠﺪ (ﻣﺠﻠﻪ ﭘﮋوﻫﺸﻬﺎي ﮔﻴﺎﻫﻲ )ﻣﺠﻠﻪ زﻳﺴﺖ ﺷﻨﺎﺳﻲ اﻳﺮان
Metabolites from algae with economical impact. defense system in Ulva fasciata. Marine Biology
J Comp Biochem Physiol 146: 60–78. 150:1–15.
9- Chaneva G, Furnadzhieva S, Minkova K, 20- Luo MB, Liu F (2011) Salinity-induced
Lukavsky J (2007) Effect of light and oxidative stress and regulation of antioxidant
temperature on the cyanobacterium Arthronema defense system in the marine macroalga Ulva
africanum- a prospective phycobiliprotein prolifera. Experimental Marine Biology and
producing strain. J Appl Phycol 19: 537–544. Ecology 409:223–228.
10- Elbaz A, Wei YY, Meng Q, Zheng Q, Yang ZM 21- Moisander PH, McClinton III E, Paerl HW
(2010) Mercury-induced oxidative stress and (2002) Salinity Effects on Growth,
impact on antioxidant enzymes in Photosynthetic Parameters, and Nitrogenase
Chlamydomonas reinhardtii. Ecotoxicology Activity in Estuarine Planktonic Cyanobacteria.
19:1285–1293. Microbiol Ecol 43: 432–442.
11- Giannopolitis CN, Ries SK (1977) Superoxide 22- Moradpour Z, Torshabi M, Faramarzi MA,
dismutases II. Purification and quantitative TabatabaeiYazdi M, Ghasemi Y, Jahandar H,
relationship with water-soluble protein in Zolfaghary N, Zarrini G (2010) Microalgal
seedlings. Plant Physiology 59:315–318. transformation of androst-4-en-3,17-dione by
Nostoc ellipsosporum. Res J Microbiol 5: 576–
12- Hader DP, Kumar HD, Smith RC, Worrest RC
580.
(2007) Effects of solar UV radiation on aquatic
ecosystems and interactions with climate 23- Okamoto OK,Pinto E, Latorre LR, Bechara EJH,
change. J Photochem photobiol Sci 6: 267–285. Colepicolo P (2001) Antioxidant Modulation in
Response to Metal-Induced Oxidative Stress in
13- Heath RL, Packer L (1968) Photoperoxidatin in
Algal Chloroplasts. Environmental
isolated chloroplasts. I. Kinetics and
Contamination and Toxicology 40:18–24.
stochiometry of fatty acid peroxidation. Arch
Biochem Biophys 125:189–198. 24- Rafiqul IM, Hassan A, Sulebele G, Orosco CA,
Roustaian P, Jalal KCA (2003) Salt stress
14- Jahnke LS, White AL (2003) Long-term
culture of blue-green algae Spirulina fusiformis.
hyposaline and hypersaline stresses produce
Biological Science 6: 648-650
distinct antioxidant responses in the marine alga
Dunaliella tertiolecta. Plant Physiology 160: 25- Rao AR, Dayananda C, Sarada R, Shamala TR,
1193–1202. Ravishankar GA (2007) Evect of salinity on
growth of green alga Botryococcus braunii and
15- Jayanta T, Chandra KM, Chandra GB (2012)
its constituents. Bioresource Technology 98:
Growth, total lipid content and fatty acid profile
560–564.
of a native strain of the freshwater oleaginous
microalgae Ankistrodesmus falcatus (Ralf) 26. Raymond J, Rakariyatham N, Azanza JL (1993)
grown under salt stress condition. International Purification and some properties of
Research Journal of Biological Sciences 1:27– polyphenoloxidase from sunflower seeds. J
35. Phytochem 34: 927–931.
16- Kalbasi A, Faramarzi MA, Hejazi MS, Jahandar 27- Sharma G, Kumar M, Ali MI, Jasuja ND (2014)
H, Amini M, Jalali SM (2009) 14α- Effect of Carbon Content, Salinity and pH on
Hydroxylation of androst-4-en-3, 17-dione by Spirulina platensis for Phycocyanin,
the whole cells of cyanobacterium Nostoc Allophycocyanin and Phycoerythrin
piscinale. J Biotech 8: 370–374. Accumulation. J Microb Biochem Technol
6:202-206.
17- Leganes F, Sanchez E, Fernandaz-Vaiente E
(1987) Effect of indoleacetic acid on growth and 28- Singh SP, Hader D-P, Sinha RP (2009)
dinitrogen fixation in cyanobacteria. J Plant Cyanobacteria and ultraviolet radiation (UVR)
Cell Physiol 28:529–533. stress: Mitigation strategies. Ageing Research
Reviews 9:79–90.
18- Lu C, Zhang J (2000) Role of light in the
response of PSII photochemistry to salt stress in 29- Singh SP, Montgomery BL (2011) Determining
the cyanobacterium Spirulina platensis. cell shape: adaptive regulation of cyanobacterial
Experimental Botany 51:911–917. cellular differentiation and morphology. J
Trends in Microbiology 19:278-285.
19- Lu IF, Sung MS, Lee TM (2006) Salinity stress
and hydrogen peroxide regulation of antioxidant 30- Singh Gill S, Tuteja N (2010) Reactive oxygen
species and antioxidant machinery in abiotic
672
1393 ،4 ﺷﻤﺎره،27 ﺟﻠﺪ (ﻣﺠﻠﻪ ﭘﮋوﻫﺸﻬﺎي ﮔﻴﺎﻫﻲ )ﻣﺠﻠﻪ زﻳﺴﺖ ﺷﻨﺎﺳﻲ اﻳﺮان
stress tolerance in crop plants. Plant Physiology 32- Wyman M, Fay P (1986) Underwater light
and Biochemistry 48:909–930. climate the growth and pigmentation of
planktonic blue-green (cyanobacteria). I. The
31- Sundaram S, Soumya KK (2011) Study of
influence of light quantity. J Proc R Soc Lond
physiological and biochemical alterations in
227:367–380.
cyanobacteria under organic stress. J Plant
physiol 6:1–16. 33- Zhu JK (2001) Plant salt tolerance. Trends in
Plant Science 6:66-71.
673