‫‪Journal of Water and Soil‬‬ ‫ﻧﺸﺮﻳﻪ آب و ﺧﺎك )ﻋﻠﻮم و ﺻﻨﺎﻳﻊ ﻛﺸﺎورزي(‬

‫‪Vol. 24, No. 2, May-Jun 2010, p. 254-261‬‬ ‫ﺟﻠﺪ ‪ ،24‬ﺷﻤﺎره ‪ ،2‬ﺧﺮداد ‪ -‬ﺗﻴﺮ ‪ ،1389‬ص‪254-261 .‬‬

‫ﺟﺪاﺳﺎزي و ﺷﻨﺎﺳﺎﻳﻲ ﮔﻮﻧﻪﻫﺎي ﻣﺨﺘﻠﻒ ﺑﺎﻛﺘﺮي ﻓﻼوﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻮم )‪ (Flavobacterim spp.‬از‬

‫رﻳﺰوﺳﻔﺮ ﮔﻨﺪم ﻣﻨﺎﻃﻖ ﻣﺨﺘﻠﻒ اﻳﺮان‬

‫‪2‬‬
‫ﺳﻤﺎﻧﻪ رﻓﻴﻌﻲ‪ - *1‬ﻫﺎدي اﺳﺪي رﺣﻤﺎﻧﻲ‬
‫ﺗﺎرﻳﺦ درﻳﺎﻓﺖ‪88/3/9 :‬‬
‫ﺗﺎرﻳﺦ ﭘﺬﻳﺮش‪88/12/2 :‬‬

‫ﭼﻜﻴﺪه‬
‫در ﻣﻴﺎن ﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻬﺎي رﻳﺰوﺳﻔﺮي ﻣﺤﺮك رﺷﺪ ﮔﻴﺎه )‪ (PGPR‬ﺗﻮﺟﻪ زﻳﺎدي ﺑﻪ ﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻬﺎي ﺟﻨﺲ ﻓﻼوﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻮم و ﻧﻘﺶ آﻧﻬـﺎ در اﻓـﺰاﻳﺶ رﺷـﺪ و ﺳـﻼﻣﺖ‬
‫ﮔﻴﺎه ﺷﺪه اﺳﺖ‪ .‬در اﻳﻦ ﺗﺤﻘﻴﻖ ﺑﻪ ﻣﻨﻈﻮر ﺟﺪاﺳﺎزي و ﺷﻨﺎﺳﺎﻳﻲ ﻓﻼوﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻮم از رﻳﺰوﺳﻔﺮ ﮔﻨﺪم ﻣﻨﺎﻃﻖ ﻣﺨﺘﻠﻒ ﺗﺤﺖ ﻛﺸﺖ ﻛـﺸﻮر‪ ،‬ﺗﻌـﺪاد ‪ 65‬ﻧﻤﻮﻧـﻪ ﺧـﺎك‬
‫رﻳﺰوﺳﻔﺮي ﺗﻬﻴﻪ ﺷﺪ‪ .‬ﻃﺮاﺣﻲ و اﻧﺘﺨﺎب ﻣﺤﻴﻂ ﻛﺸﺖ اﺧﺘﺼﺎﺻﻲ ) ‪ (FIM‬ﺟﻬﺖ ﺟﺪاﺳﺎزي‪ ،‬ﻛﺸﺖ و ﻧﮕﻬﺪاري ﻓﻼوﺑـﺎﻛﺘﺮﻳﻮمﻫـﺎ از ﺑـﻴﻦ ﻓﺮﻣﻮﻻﺳـﻴﻮنﻫـﺎي‬
‫ﻣﺨﺘﻠﻒ و ﻣﺘﻨﻮﻋﻲ ﻧﻈﻴﺮ ‪ ATCC M1 65 ، ATCC64‬و ‪ M1 Medium‬ﻛﻪ ﺑﺮاي اﻳﻦ ﺑﺎﻛﺘﺮي ﭘﻴـﺸﻨﻬﺎد ﺷـﺪه اﺳـﺖ اﻧﺠـﺎم ﮔﺮدﻳـﺪ‪ .‬ﺗﻌـﺪاد ‪ 61‬ﺟﺪاﻳـﻪ‬
‫ﻣﻨﺴﻮب ﺑﻪ ﻓﻼوﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻮم ﺑﺎ اﺳﺘﻔﺎده از ﻣﺤﻴﻂ ﻛﺸﺖ اﺧﺘﺼﺎﺻﻲ )‪ (FIM‬ﺟﺪاﺳـﺎزي و ﺧـﺎﻟﺺ ﮔﺮدﻳـﺪ‪ .‬ﺷﻨﺎﺳـﺎﻳﻲ در ﺣـﺪ ﺟـﻨﺲ و ﮔﻮﻧـﻪ ﺑـﺎ آزﻣـﺎﻳﺶﻫـﺎي‬
‫ﻣﻴﻜﺮوﺳــﻜﻮﭘﻲ‪ ،‬ﻓﻴﺰﻳﻮﻟﻮژﻳــﻚ و ﺑﻴﻮﺷــﻴﻤﻴﺎﻳﻲ اﻧﺠــﺎم ﭘــﺬﻳﺮﻓﺖ‪ .‬ﻧﺘــﺎﻳﺞ ﺣﺎﺻــﻞ از آزﻣﺎﻳــﺸﺎت ﻧــﺸﺎن داد ﻛــﻪ ‪ 5‬ﮔﻮﻧــﻪ ‪،F.odoratum ،F.multivorum‬‬
‫‪ F.balastinum ،F.thalpophilum‬و ‪ F.indoltheticum‬در رﻳﺰوﺳﻔﺮ ﮔﻨﺪم ﻗﺎﺑـﻞ ﺷﻨﺎﺳـﺎﻳﻲ ﺑﻮدﻧـﺪ‪ .‬ﮔﻮﻧـﻪ‪ F.odoratum‬ﺑﻴـﺸﺘﺮﻳﻦ ﻓﺮاواﻧـﻲ)‪72‬‬
‫درﺻﺪ( و ﮔﻮﻧﻪﻫﺎي ‪ F.balastinum،F.thalpophilum‬و ‪ F.indoltheticum‬ﻛﻤﺘﺮﻳﻦ ﻓﺮاواﻧﻲ)‪ 1/6‬درﺻﺪ( را در ﺑـﻴﻦ ﮔﻮﻧـﻪﻫـﺎي ﺟﺪاﺳـﺎزي ﺷـﺪه‬
‫داﺷﺘﻨﺪ‪.‬‬

‫واژهﻫﺎي ﻛﻠﻴﺪي ‪ :‬ﻓﻼوﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻮم‪ ،PGPR ،‬رﻳﺰوﺳﻔﺮ‪ ،‬ﮔﻨﺪم‬

‫ﻃﺮﻳﻖ ﺗﻮﻟﻴﺪ ﺳﻴﺎﻧﻴﺪﻫﻴﺪروژن‪ ،‬ﺳﻴﺪروﻓﻮر‪ ،‬ﻣﺘﺎﺑﻮﻟﻴﺖﻫﺎي ﺿﺪ ﻗﺎرچ و آﻧﺘﻲ‬ ‫‪2‬‬ ‫‪1‬‬

‫ﻣﻘﺪﻣﻪ‬
‫ﺑﻴﻮﺗﻴﻚ ﻫﺎ ﺑﻪ رﺷﺪ ﺑﻬﺘﺮ ﮔﻴﺎه ﻛﻤﻚ ﻣﻲﻛﻨﻨﺪ‪ .‬ﺗﺤﺮﻳﻚ رﺷﺪ ﮔﻴﺎه ﺗﻮﺳـﻂ‬
‫رﻳﺰوﺳﻔﺮ ﺑﻪ ﻻﻳﻪ ﻧﺎزﻛﻲ )ﻣﻌﻤﻮﻻً ‪ 1-3‬ﻣﻴﻠﻲ ﻣﺘﺮي( از ﺧﺎك اﻃﺮاف‬
‫ﺑـــــﺎﻛﺘﺮيﻫـــــﺎي ﺟـــــﻨﺲ ‪،Azotobacter ،Flavobacterium‬‬
‫رﻳﺸﻪ اﻃﻼق ﻣﻲﺷﻮد ﻛﻪ ﻣﻮﺟﻮدات زﻧﺪه آن ﻧﺎﺣﻴﻪ از ﻧﻈﺮ ﻛﻤﻲ و ﻛﻴﻔﻲ‬
‫و‬ ‫‪Clostridium،‬‬ ‫‪Arthrobace ،Bacillus، Enterobacter‬‬
‫ﺗﺤﺖ ﺗﺎﺛﻴﺮ ﻓﻌﺎﻟﻴﺖﻫﺎي رﻳﺸﻪ ﻧﻈﻴﺮ ﺗﻨﻔﺲ و ﺗﺮﺷـﺤﺎت رﻳـﺸﻪ اي ﻗـﺮار‬
‫‪ Pseudomonas‬ﮔﺰارش ﺷﺪه اﺳﺖ )‪ 5‬و ‪.(10‬‬
‫دارﻧﺪ )‪ .(6‬در اﻳﻦ ﻧﺎﺣﻴﻪ ﮔﺮوهﻫﺎي ﻣﺨﺘﻠﻔﻲ از ﻣﻴﻜﺮوارﮔﺎﻧﻴﺴﻢﻫـﺎ ﻳﺎﻓـﺖ‬
‫ﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻬــﺎي ﺟــﻨﺲ ‪ Flavobacterium‬ﻳﻜــﻲ از اﻋــﻀﺎي ﺟﺎﻣﻌــﻪ‬
‫ﻣﻲﺷﻮﻧﺪ ﻛﻪ ﻣﻤﻜﻦ اﺳﺖ ﺑﺮاي ﮔﻴﺎه ﻣﻴﺰﺑﺎن‪ ،‬ﻣﻔﻴﺪ‪ ،‬ﻣﻀﺮ و ﻳﺎ ﺑـﻲ ﺿـﺮر‬
‫ﻣﻴﻜﺮوارﮔﺎﻧﻴﺴﻢﻫﺎي رﻳﺰوﺳﻔﺮي ﻣﻲﺑﺎﺷﺪ ﻛـﻪ ﻣﻄﺎﻟﻌـﺎت ﭘﺮاﻛﻨـﺪه اي در‬
‫ﺧﺼﻮص اﺛﺮات ﻣﺜﺒﺖ ﻧﺎﺷﻲ از ﺗﻠﻘﻴﺢ آﻧﻬﺎ ﺑﺮ رﺷﺪ ﮔﻴﺎﻫﺎن ﻣﺨﺘﻠﻒ اﻧﺠﺎم‬ ‫ﺑﺎﺷﻨﺪ )‪ .(5‬ﺑﺎﻛﺘﺮيﻫﺎي رﻳﺰوﺳﻔﺮي ﻣﺤـﺮك رﺷـﺪ ﮔﻴـﺎه )‪ 3(PGPR‬ﺑـﻪ‬
‫ﺷــﺪه اﺳــﺖ )‪ 16 ،8‬و ‪ .(26‬ﻓﻼوﺑــﺎﻛﺘﺮﻳﻮم ﺑــﺎﻛﺘﺮيﻫــﺎي از ﺧــﺎﻧﻮاده‬ ‫اﻧﻮاع ﺑﺎﻛﺘﺮيﻫﺎي ﻣﻔﻴﺪ ﻣﺴﺘﻘﺮ در اﻳﻦ ﻧﺎﺣﻴﻪ اﻃﻼق ﻣـﻲﺷـﻮد )‪ .(8‬اﻳـﻦ‬
‫ﻛﺮوﻣﻮﺑﺎﻛﺘﺮﻳﺎﺳﻪ )ﺧﺎﻧﻮاده ﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻬﺎي داراي رﻧﮕﺪاﻧﻪ( ﺑﻪ ﺷﻜﻞ ﺑﺎﺳﻴﻞ ﻳـﺎ‬ ‫ﺑﺎﻛﺘﺮيﻫﺎ ﺑﻪ دو ﺻﻮرت » ﻣﺴﺘﻘﻴﻢ « ﻳﻌﻨﻲ ﺗﺤﺮﻳﻚ رﺷﺪ ﮔﻴﺎه از ﻃﺮﻳﻖ‬
‫ﻛﻮﻛﻮﺑﺎﺳﻴﻞ‪ ،‬ﮔـﺮم ﻣﻨﻔـﻲ‪ ،‬ﺑـﺪون اﺳـﭙﻮر و ﻏﻴـﺮ ﻣﺘﺤـﺮك ﻣـﻲﺑﺎﺷـﻨﺪ‪.‬‬ ‫ﻣﻜﺎﻧﻴﺴﻢ ﻫﺎﻳﻲ ﻣﺎﻧﻨﺪ ﺗﺜﺒﻴﺖ ﻧﻴﺘﺮوژن ﻣﻮﻟﻜﻮﻟﻲ‪ ،‬ﺗﺮﺷﺢ ﺗﻨﻈﻴﻢ ﻛﻨﻨﺪهﻫﺎي‬
‫ﺟﺪاﻳﻪﻫﺎي ﺳﺎﭘﺮوﻓﻴﺖ ﻣﺤﻴﻄﻲ آن در دﻣﺎي ‪ 5 -30‬درﺟﻪ ﺳﺎﻧﺘﻲ ﮔﺮاد و‬ ‫رﺷﺪ و اﻓﺰاﻳﺶ ﺣﻼﻟﻴﺖ ﻓﺴﻔﺎتﻫﺎي ﻧﺎﻣﺤﻠﻮل و ﻳﺎ » ﻏﻴﺮ ﻣـﺴﺘﻘﻴﻢ « از‬
‫ﺟﺪاﻳﻪﻫﺎي ﺑﻴﻤﺎري زا در دﻣﺎي ‪ 37‬درﺟﻪ ﺳﺎﻧﺘﻲ ﮔﺮاد رﺷﺪ ﻣﻴﻜﻨﻨﺪ‪ .‬اﻳـﻦ‬
‫ﺑﺎﻛﺘﺮيﻫﺎ ﻫﻨﮕﺎم رﺷﺪ در ﻣﺤﻴﻂ ﺟﺎﻣﺪ رﻧﮕﺪاﻧﻪﻫﺎي زرد ﺗﺎ ﻧﺎرﻧﺠﻲ ﺗﻮﻟﻴﺪ‬ ‫‪ -1‬ﻣﺮﺑﻲ ﻣﺮﻛﺰ آﻣﻮزش ﻋﻠﻤﻲ‪-‬ﻛﺎرﺑﺮدي ﭘﺮدﻳﺲ ﻛﺸﺎورزي‪ ،‬ﻛﺎﺷﺎن‬
‫ﻣﻴﻜﻨﻨﺪ اﻣﺎ در ﺑﺎﻛﺘﺮيﻫﺎي اﻳﻦ ﺟﻨﺲ ﺳﻮﻳﻪﻫﺎي ﻓﺎﻗﺪ رﻧﮕﺪاﻧﻪ ﻧﻴﺰ ﻳﺎﻓـﺖ‬ ‫‪(Email: Rafiei1740@gmail.com‬‬ ‫)*‪ -‬ﻧﻮﻳﺴﻨﺪه ﻣﺴﺌﻮل‪:‬‬
‫‪ -2‬اﺳﺘﺎدﻳﺎرﻣﺮﻛﺰ ﺗﺤﻘﻴﻘﺎت ﺧﺎك و آب‪ ،‬ﮔﺮوه ﺑﻴﻮﻟﻮژي ﺧﺎك‪ ،‬ﺗﻬﺮان‬
‫ﻣﻴﺸﻮد‪ .‬در ﺑـﺎﻛﺘﺮيﻫـﺎي ﺟـﻨﺲ ﻓﻼوﺑـﺎﻛﺘﺮﻳﻮم ﻃﻴـﻒ رﻧـﮓ و ﺷـﺪت‬
‫‪3- Plant Growth Promothing Rizobacteria‬‬
‫‪255‬‬ ‫ﺟﺪاﺳﺎزي و ﺷﻨﺎﺳﺎﻳﻲ ﮔﻮﻧﻪﻫﺎي ﻣﺨﺘﻠﻒ ﺑﺎﻛﺘﺮي ﻓﻼوﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻮم‪...‬‬

‫ﮔﻴﺮي و ﭘﺘﻲ )‪ (9‬ﺟﺪاﻳﻪ ‪ Flavobacterium sp TK2‬ﺑﺮگ ﭘﺎﺷﻲ ﺷﺪه‬ ‫ﺗﺸﻜﻴﻞ رﻧﮕﺪاﻧﻪ ﺑﻪ ﻃﻮر ﻗﺎﺑﻞ ﻣﻼﺣﻈﻪ اي ﺗﺤﺖ ﺗـﺎﺛﻴﺮ ﻣﺤـﻴﻂ ﻛـﺸﺖ‪،‬‬
‫در ﮔﻴﺎه ذرت ﺑﺎﻋﺚ ‪ 30-37‬درﺻﺪ اﻓﺰاﻳﺶ ﻋﻤﻠﻜﺮد ﮔﺮدﻳﺪ‪ .‬ﭘﻴﺸﭽﻴﻚ و‬ ‫درﺟﻪ ﺣﺮارت و ﻣﺪت زﻣﺎن ﻧﮕﻬﺪاري ﻗﺮار دارد‪ .‬ﺗﺸﻜﻴﻞ رﻧﮕﺪاﻧﻪ در اﻳﻦ‬
‫ﻫﻤﻜﺎران )‪ (23‬ﻧﺸﺎن دادﻧـﺪ ﻛـﻪ ﺟﺪاﻳـﻪ ‪Flavobacterium sp L30‬‬ ‫ﺑﺎﻛﺘﺮيﻫﺎ در دﻣﺎي ﭘﺎﻳﻴﻦ ﺗﺮ از ‪ 15-20‬درﺟﻪ ﺳـﺎﻧﺘﻲ ﮔـﺮاد واﺿـﺢ ﺗـﺮ‬
‫ﺑﺎﻋﺚ اﻓﺰاﻳﺶ ﻃﻮل رﻳﺸﻪ ﮔﻴﺎﻫﭽـﻪﻫـﺎي ﺟـﻮ و اﻓـﺰاﻳﺶ ﻣﺤـﺼﻮل در‬ ‫ﺑﻮده و روﺷﻨﺎﻳﻲ روز ﺑﺮاي ﺗـﺸﻜﻴﻞ ﺣـﺪاﻛﺜﺮ رﻧﮕﺪاﻧـﻪ دراﻳـﻦ ﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻬـﺎ‬
‫ﺧﺎﻛﻬﺎي آﻟﻮده ﺑﻪ ﻛﺎدﻣﻴﻮم ﮔﺮدﻳﺪ‪ .‬ﻣﻄﺎﻟﻌﺎت اﺳﭙﻜﺘﺮوﻓﺘﻮﻣﺘﺮي و ‪NMR‬‬ ‫ﺿﺮوري اﺳﺖ‪ .‬رﻧﮕﺪاﻧﻪﻫﺎي اﻳﻦ ﺑﺎﻛﺘﺮي ﻏﻴﺮﻛﺎرﺗﻨﻮﺋﻴﺪ ﺑـﻮده و در ﺑﺮاﺑـﺮ‬
‫ﻧﺸﺎن داده اﺳﺖ ﻛﻪ ﻓﻼوﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻮم ﻗﺎدر ﺑـﻪ ﺗﻮﻟﻴـﺪ آﻧﺘـﻲ ﺑﻴـﻮﺗﻴﻜﻲ ﺑﻨـﺎم‬ ‫ﻧﻮر ﻓﺮاﺑﻨﻔﺶ )‪ (254nm‬ﻏﻴﺮﻓﻠﻮرﺳﻨﺲ ﻣﻴﺒﺎﺷـﻨﺪ‪ .‬ﻛﻠـﻮﻧﻲ اﻳـﻦ ﺑـﺎﻛﺘﺮي‬
‫‪ Flavocin‬ﻣﻲﺑﺎﺷﺪ ﻛﻪ ﻣﺎﻧﻊ از رﺷـﺪ ﺑـﺎﻛﺘﺮيﻫـﺎ و ﻗﺎرﭼﻬـﺎي ﭘـﺎﺗﻮژن‬ ‫ﻧﻴﻤﻪ ﺷﻔﺎف )ﮔﺎﻫﺎً ﻛﺪر( ﺑﺎ ﻗﻄﺮ‪ 1-2‬ﻣﻴﻠﻲ ﻣﺘﺮ‪ ،‬ﻣﺤﺪب‪ ،‬ﺻﺎف و درﺧﺸﺎن‬
‫ﻣﻲﺷﻮد )‪.(25‬‬ ‫ﺑﺎ ﻟﺒﻪﻫﺎي ﻛﺎﻣﻞ ﻣﻴﺒﺎﺷﺪ‪ .‬ﻓﻼوﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻮمﻫﺎ ﻫﻮازي و از ﻧﻈﺮ ﻣﻨﺒﻊ اﻧﺮژي و‬
‫اﻳﻦ ﺗﺤﻘﻴﻖ ﺑﺎ ﻫـﺪف ﺟـﺪا ﺳـﺎزي و ﺷﻨﺎﺳـﺎﻳﻲ ﻓﻼوﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻮﻣﻬـﺎ از‬ ‫ﻛﺮﺑﻦ ﺷﻴﻤﻴﻮارﮔﺎﻧﻮﺗﺮوف ﻣﻲﺑﺎﺷﻨﺪ و ﺑﻪ ﻓﺮاواﻧﻲ درﺧﺎك ﻳﺎﻓـﺖ ﻣﻴـﺸﻮﻧﺪ‬
‫رﻳﺰوﺳﻔﺮ ﮔﻴﺎه ﮔﻨﺪم در ﻣﻨﺎﻃﻖ ﻣﺨﺘﻠﻒ ﻛﺸﻮر اﻧﺠﺎم ﮔﺮدﻳﺪ‪.‬‬ ‫)‪ 12‬و ‪ .(13‬ﺑﻴﺶ از ده ﮔﻮﻧﻪ در اﻳﻦ ﺟﻨﺲ ﺷﻨﺎﺧﺘﻪ ﺷﺪه اﻧـﺪ ﻛـﻪ اﻧـﻮاع‬
‫ﺷــــــــﻨﺎﺧﺘﻪ ﺷــــــــﺪه آن ﺷــــــــﺎﻣﻞ ﺟﻨــــــــﺴﻬﺎي‬
‫ﻣﻮاد و روش ﻫﺎ‬ ‫‪،F.multivorum،F.spiritivorum،F.indoltheticum‬‬
‫‪F.mizutahi،F.yabuuchiae،F.odoratum،F.thalpophilum‬و‬
‫ﻧﻤﻮﻧﻪ ﺑﺮداري از ﺧﺎك رﻳﺰوﺳﻔﺮي‬
‫‪ F.balustinum‬ﻣﻲﺑﺎﺷﻨﺪ )‪ 12‬و ‪.(13‬‬
‫ﺗﻌﺪاد ‪ 65‬ﻧﻤﻮﻧﻪ ﺧـﺎك رﻳﺰوﺳـﻔﺮي از ﻣـﺰارع ﮔﻨـﺪم در اﺳـﺘﺎﻧﻬﺎي‬ ‫آزﻣﻮن ﺗﻮﻟﻴﺪ اﻳﻨﺪول ﮔﻮﻧﻪﻫﺎي ﻓﻼوﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻮم را در دو ﮔـﺮوه اﺻـﻠﻲ‬
‫ﺗﻬﺮان‪ ،‬ﻗﺰوﻳﻦ‪ ،‬زﻧﺠﺎن‪ ،‬آذرﺑﺎﻳﺠﺎن ﺷﺮﻗﻲ‪ ،‬آذرﺑﺎﻳﺠﺎن ﻏﺮﺑﻲ‪ ،‬ﻛﺮدﺳﺘﺎن و‬ ‫‪) A‬اﻳﻨﺪول ﻣﺜﺒﺖ( و ‪ B‬و‪) C‬اﻳﻨﺪول ﻣﻨﻔﻲ( ﻗﺮار ﻣﻲدﻫﺪ )‪ .(12‬ﮔـﺮوه ‪A‬‬
‫ﻫﻤﺪان ﺗﻬﻴﻪ و ﺑﻪ آزﻣﺎﻳﺸﮕﺎه ﻣﻨﺘﻘﻞ ﮔﺮدﻳﺪ‪ .‬ﭘﺮاﻛﻨﺶ ﻣﻨﺎﺳﺐ ﻧﻤﻮﻧﻪﻫﺎ در‬ ‫ﺷـــﺎﻣﻞ ‪species IIb ،F. indoltheticum، F.balustinum‬‬
‫ﺗﻤﺎﻣﻲ اﺳﺘﺎﻧﻬﺎ رﻋﺎﻳﺖ ﮔﺮدﻳﺪ و ﻣﻮﻗﻌﻴﺖ ﺟﻐﺮاﻓﻴﺎﻳﻲ ﺗﻤﺎﻣﻲ ﻧﻘـﺎط ﻧﻤﻮﻧـﻪ‬ ‫‪ (13) Flavobacterium‬و ‪ (13) F.breve‬ﻣﻲﺑﺎﺷﺪ ‪ .‬ﮔﺮوه ‪ B‬ﺷـﺎﻣﻞ‬
‫ﺑﺮداري ﺗﻮﺳﻂ دﺳﺘﮕﺎه ‪ GPS‬ﻣﺸﺨﺺ ﺷﺪ‪ .‬ﻧﻤﻮﻧﻪﻫﺎي ﻣﺬﻛﻮر ﺗﺎ اﻧﺠـﺎم‬ ‫‪ F.odoratum‬و ﮔـــــــﺮوه ‪ C‬ﺷـــــــﺎﻣﻞ ‪،(13) F.multivorum‬‬
‫آزﻣﺎﻳﺸﺎت ﻣﺮﺑﻮط ﺑﻪ ﺟﺪاﺳﺎزي در دﻣﺎي ‪ 4‬درﺟﻪ ﺳﺎﻧﺘﻲ ﮔﺮاد ﻧﮕﻬـﺪاري‬ ‫‪ F.yabuuchiae ،(14) F.thalpophilum‬و‪(13) F.Spiritivorum‬‬
‫ﺷﺪﻧﺪ‪.‬‬ ‫و ‪ (14) F. mizutaii‬ﻣﻲﺑﺎﺷﺪ‪ .‬ﺟﻬﺖ اﻃﻤﻴﻨﺎن ﺑﻪ ﺗﻔﻜﻴﻚ ﻫﺮ ﭼﻪ ﺑﻴﺸﺘﺮ‬
‫ﮔﻮﻧﻪﻫﺎي ﻓﻼو ﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻮم ﺗﺎﻛﻴﺪ ﺑﻴﺸﺘﺮ ﺑـﺮ روي ﺗﺤـﺮك اﻳﺰوﻟـﻪﻫـﺎي آن‬
‫ﻃﺮاﺣﻲ و اﻧﺘﺨﺎب ﻣﺤﻴﻂ ﻛﺸﺖ اﺧﺘﺼﺎﺻﻲ ﺑﺮاي ﺟﺪاﺳﺎزي و‬ ‫ﺻﻮرت ﮔﺮﻓﺘﻪ اﺳﺖ‪ .‬ﺑﺮﺟﻲ و ﻫﻤﻜﺎران)‪ (1994‬ﮔﻮﻧﻪ ﻫﺎي ﻓﻼوﺑـﺎﻛﺘﺮﻳﻮم‬
‫ﻛﺸﺖ ﻓﻼوﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻮم‬ ‫را ﺑﻪ دو ﮔﺮوه ﺑﺎﻛﺘﺮيﻫﺎي ﻏﻴﺮ ﻣﺘﺤﺮك ﺑﺎ ‪ 30-42 G+C‬درﺻﺪ و ﻏﻴﺮ‬
‫ﺑﺎ ﺗﻮﺟﻪ ﺑﻪ ﻓﺮﻣﻮﻻﺳﻴﻮنﻫﺎي ﻣﺨﺘﻠـﻒ و ﻣﺘﻨـﻮﻋﻲ ﻧﻈﻴـﺮ ‪medium‬‬ ‫ﻣﺘﺤﺮك ﻳﺎ ﻣﺘﺤﺮك ﺑﺎ ﻓـﻼژل ﺑـﺎ درﺻـﺪ ‪ 63-70 G+C‬درﺻﺪﺗﻘـﺴﻴﻢ‬
‫‪ ) M1‬ﻋﺼﺎره ﮔﻮﺷﺖ ‪ 2‬ﮔﺮم در ﻟﻴﺘـﺮ‪ ،‬ﭘﺮوﺗﺌـﻮز ﭘﭙﺘـﻮن ‪ 5‬ﮔـﺮم در ﻟﻴﺘـﺮ‪،‬‬ ‫ﺑﻨﺪي ﻣﻴﻜﻨﻨﺪ‪.‬‬
‫ﻛﻠﺮور ﺳﺪﻳﻢ ‪ 3‬ﮔﺮم در ﻟﻴﺘـﺮ‪ ،‬آﮔـﺎر‪ 12‬ﮔـﺮم در ﻟﻴﺘـﺮ(‪ATCC M165 ،‬‬ ‫اﮔﺮﭼﻪ در ﺑﺮﺧﻲ ﮔﺰارﺷﺎت از ﺑﺎﻛﺘﺮيﻫﺎي ﺟﻨﺲ ﻓﻼوﺑـﺎﻛﺘﺮﻳﻮم ﺑـﻪ‬
‫)ﭘﺘﻴﻮن ‪ 1‬ﮔﺮم در ﻟﻴﺘﺮ‪ ،‬ﻓﺴﻔﺎت ﭘﺘﺎﺳﻴﻢ ‪ 0/5‬ﮔﺮم در ﻟﻴﺘﺮ‪ ،‬ﻛﺎزﺋﻴﻦ ‪ 2‬ﮔـﺮم‬ ‫ﻋﻨﻮان ﻳﻚ ﺑﺎﻛﺘﺮي ﻣﺤﺮك رﺷﺪ ﮔﻴﺎه ﻳﺎد ﺷﺪه اﺳﺖ )‪ (3‬وﻟﻲ ﺗﺤﻘﻴﻘـﺎت‬
‫در ﻟﻴﺘﺮ‪ ،‬ﻋـﺼﺎره ﻣﺨﻤـﺮ ‪ 0/5‬ﮔـﺮم در ﻟﻴﺘـﺮ‪ ،‬آﮔـﺎر ‪ 12‬ﮔـﺮم در ﻟﻴﺘـﺮ( و‬ ‫زﻳﺎدي در ﺧﺼﻮص ﺻﻔﺎت ﻣﺤﺮك رﺷﺪ ﮔﻴﺎﻫﻲ اﻳﻦ ﺑﺎﻛﺘﺮي و ﺗـﺄﺛﻴﺮ آن‬
‫‪) ATCC 647‬ﻋﺼﺎره ﮔﻮﺷﺖ ‪ 10‬ﮔﺮم در ﻟﻴﺘﺮ‪ ،‬ﭘﭙﺘﻮن‪ 10‬ﮔﺮم در ﻟﻴﺘـﺮ‪،‬‬ ‫ﺑﺮ رﺷﺪ و ﻧﻤﻮ ﮔﻴﺎﻫﺎن ﺻﻮرت ﻧﮕﺮﻓﺘﻪ اﺳﺖ‪.‬‬
‫ﻛﻠﺮور ﺳﺪﻳﻢ ‪ 5‬ﮔﺮم در ﻟﻴﺘﺮ‪ ،‬آﮔﺎر ‪ 12‬ﮔﺮم در ﻟﻴﺘﺮ( ﻛﻪ ﺑﺮاي ﺟﺪا ﺳـﺎزي‬ ‫ﺑﺮ اﺳﺎس ﻧﺘﺎﻳﺞ واﺳﻴﻮك و ﻫﻤﻜﺎران )‪ (26‬ﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻬﺎي ﺟـﻨﺲ ﻓـﻼو‬
‫و ﻛﺸﺖ و ﻧﮕﻬﺪاري اﻳﻦ ﺑﺎﻛﺘﺮي ﭘﻴﺸﻨﻬﺎد ﺷﺪه اﺳﺖ )‪ (22‬ﻓﺮﻣﻮﻻﺳﻴﻮن‬ ‫ﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻮم و ﺟـﻨﺲﻫـﺎي دﻳﮕـﺮي ﻣﺎﻧﻨـﺪ آزوﺳـﭙﻴﺮﻳﻠﻮم‪ ،‬رودوﺳـﭙﺮﻳﻠﻮم و‬
‫ﺟﺪﻳـﺪي ﺑـﺎ ﻧـﺎم اﺧﺘـﺼﺎﺻﻲ ‪Flovobacterium Isolation ) FIM‬‬ ‫ﺑﺎﺳﻴﻠﻮسﻫـﺎ در رﻳﺰوﺳـﻔﺮ ﻏـﻼت و ﮔﻴﺎﻫـﺎن ﻋﻠﻮﻓـﻪ اي وﺟـﻮد دارﻧـﺪ‪.‬‬
‫‪ (Media‬ﻃﺮاﺣﻲ ﮔﺮدﻳـﺪ‪ .‬اﺟـﺰاء ﻣﺤـﻴﻂ ﻛـﺸﺖ ‪ FIM‬ﺷـﺎﻣﻞ ﻛـﺎزﺋﻴﻦ‬ ‫ﻛﺮﻳﭽﻨﺮ و ﻫﻤﻜﺎران )‪ (17‬دﻟﻴﻞ اﻓﺰاﻳﺶ ﻋﻤﻜﺮد ﮔﻨﺪم و ﺟﻮ ﺗﻠﻘﻴﺢ ﺷـﺪه‬
‫ﻫﻴﺪروﻟﻴﺰ ﺷﺪه ) ‪ 2‬ﮔﺮم در ﻟﻴﺘﺮ(‪ ،‬ﭘﺮوﺗﻨﻮز ﭘﺘﻴﻮن )‪ 4‬ﮔﺮم در ﻟﻴﺘﺮ(‪ ،‬ﻛﻠـﺮور‬ ‫ﺑﺎ ﻓﻼوﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻮم را ﺗﺜﺒﻴﺖ ﻧﻴﺘﺮوژن‪ ،‬ﺗﻮﻟﻴﺪ ﻓﻴﺘﻮﻫﻮرﻣﻮﻧﻬﺎ‪ ،‬ﻓﻌﺎﻟﻴﺖ ﭘﻜﺘﻴﻨﺎز و‬
‫ﺳﺪﻳﻢ )‪ 3‬ﮔﺮم در ﻟﻴﺘﺮ(‪ ،‬ﻋﺼﺎره ﮔﻮﺷﺖ ) ‪2‬ﮔﺮم در ﻟﻴﺘﺮ(‪ ،‬ﺳﻮﻟﻔﺎت ﻣﻨﻴﺰﻳﻢ‬ ‫اﻓﺰاﻳﺶ ﺟﺬب ﻋﻨﺎﺻﺮ ﻏﺬاﻳﻲ ﻋﻨﻮان ﻛﺮده اﻧﺪ‪ .‬اﻳﻦ ﺗﺤﻘﻴﻘـﺎت ﻣﻨﺠـﺮ ﺑـﻪ‬
‫)‪0/1‬ﮔﺮم در ﻟﻴﺘﺮ(‪ ،‬ﻋﺼﺎره ﻣﺨﻤﺮ )‪0/5‬ﮔﺮم در ﻟﻴﺘﺮ(‪ ،‬آﮔﺎر ) ‪ 15-18‬ﮔﺮم‬ ‫ﺗﻮﻟﻴﺪ ﻛﻮد ﺑﻴﻮﻟﻮژﻳﻜﻲ ﺑﻪ ﻧﺎم ‪ Flavobacterin‬ﺷﺪه اﺳﺖ ﻛﻪ در ﺳـﻄﺢ‬
‫در ﻟﻴﺘﺮ( و‪ pH= 7/2-7/4‬ﺑﻮد‪ .‬اﻳـﻦ ﻣﺤـﻴﻂ ﺑﻌـﺪ از اﺗـﻮﻛﻼو ﺷـﺪن در‬ ‫وﺳﻴﻌﻲ ﺑﺮاي ﻏﻼت‪ ،‬ﺳﺒﺰي و ﺻﻴﻔﻲ ﺟﺎت ﻣﺼﺮف ﻣـﻲﺷـﻮد‪ .‬ﺑﻠﻤﻴـﻮف‬
‫ﭘﻠﻴﺖﻫﺎي اﺳﺘﺮﻳﻞ ﺗﻮزﻳﻊ و ﺑﻪ ﻣﻨﻈﻮر ﻛﺸﺖ ﺑﺎﻛﺘﺮي در ﻣﺮاﺣﻞ ﻣﺨﺘﻠـﻒ‬ ‫وﻫﻤﻜــﺎران )‪ (4‬ﻧــﺸﺎن دادﻧــﺪ ﻛــﻪ ﺗﻠﻘــﻴﺢ ﮔﻴﺎﻫﭽــﻪﻫــﺎي ﻛﻠــﺰا ﺑــﺎ‬
‫ﺗﺤﻘﻴﻖ ﻣﻮرد اﺳﺘﻔﺎده ﻗﺮار ﮔﺮﻓﺖ‪.‬‬ ‫‪ Flavobacterium sp p-4‬در ﺣﻀﻮر ﻳﺎ ﻋـﺪم ﺣـﻀﻮر ﻏﻠﻈـﺖﻫـﺎي‬
‫ﺑﺎﻻي ﻛﺎدﻣﻴﻮم ﺳﺒﺐ اﻓﺰاﻳﺶ ﻃﻮل رﻳﺸﻪ ﮔﺮدﻳـﺪ‪ .‬ﺑـﺮ اﺳـﺎس ﮔـﺰارش‬

‫ﺑﺎﻻي ‪ 7/6‬ﺑﻪ رﻧﮓ آﺑﻲ در ﻣﻲآﻳﺪ )‪ .(24‬اﻣﻜـﺎن ﺗﻮﻟﻴـﺪ آﻧـﺰﻳﻢ ﻓـﺴﻔﺎﺗﺎز‬
‫ﺑـﺎﻛﺘﺮي آزﻣـﻮن ﮔﺮدﻳـﺪ‪ .‬ﺑـﺮاي اﻧﺠـﺎم اﻳـﻦ آزﻣـﻮن از ﻣﺤـﻴﻂ ‪PDP‬‬
‫‪ Nutrient Agar‬اﺳﺘﻔﺎده ﮔﺮدﻳﺪ‪ .‬ﺑﺎﻛﺘﺮي ﺑـﺎ روش ﻟﻜـﻪ ﮔـﺬاري روي‬
‫در اﺑﺘﺪا از ﺧﺎك رﻳﺰوﺳﻔﺮي ﺳﺮيﻫﺎي رﻗـﺖﻫـﺎي ‪ 10‬ﺗـﺎ ‪10‬‬
‫ﺳﻄﺢ ﻣﺤﻴﻂ ﻛﺸﺖ ﺗﻠﻘـﻴﺢ و ﺑـﻪ ﻣـﺪت ‪ 3-5‬روز در دﻣـﺎي ‪ 28‬درﺟـﻪ‬
‫ﺳﺎﻧﺘﻲ ﮔﺮاد ﻧﮕﻬﺪاري ﺷﺪ‪ .‬ﺗﻮﻟﻴﺪ آﻧﺰﻳﻢ ﻓـﺴﻔﺎﺗﺎز ﺗﻮﺳـﻂ ﺑـﺎﻛﺘﺮي ﺳـﺒﺐ‬
‫اﻳﺠﺎد ﻫﺎﻟﻪ ﺻﻮرﺗﻲ رﻧﮓ در اﻃﺮاف ﻛﻠﻨﻲ ﻣﻲﺷﻮد )‪.(1‬‬
‫ﺷﻨﺎﺳــﺎﻳﻲ ﮔﻮﻧــﻪﻫــﺎي ﻓﻼوﺑــﺎﻛﺘﺮﻳﻮم ﺑــﺎ اﺳــﺘﻔﺎده از آزﻣﻮﻧﻬــﺎي‬
‫ﺑﻴﻮﺷﻴﻤﻴﺎﻳﻲ و ﻓﻴﺰﻳﻮﻟﻮژﻳﻚ اﻧﺠﺎم ﺷﺪ‪ .‬آزﻣﻮنﻫﺎي ﺗﻮﻟﻴﺪ اﻳﻨﺪول‪ ،‬ﺗﻮاﻧﺎﻳﻲ‬
‫اﺳﺘﻔﺎده از ﻣﻨﺎﺑﻊ ﻛﺮﺑﻮﻫﻴﺪراﺗﻲ‪ ،‬ﻫﻴﺪروﻟﻴﺰ اﺳـﻜﻮﻟﻴﻦ‪ ،‬ﺗـﻮان رﺷـﺪ در ‪42‬‬
‫درﺟﻪ ﺳﺎﻧﺘﻲ ﮔﺮاد و اﺣﻴﺎء ﻧﻴﺘـﺮات در اﻳـﻦ راﺑﻄـﻪ ﻣـﻮرد اﺳـﺘﻔﺎده ﻗـﺮار‬
‫ﮔﺮﻓﺘﻨﺪ‪ .‬در آزﻣﻮن ﺗﻮﻟﻴﺪ اﻳﻨﺪول از ﻣﺤﻴﻂ ﻧﻴﻤﻪ ﺟﺎﻣـﺪ ‪ SIM‬ﻛـﻪ ﺣـﺎوي‬
‫ﺳﻮﺑﺴﺘﺮاﻫﺎي ﺗﺮﻳﭙﺘﻮﻓﺎن و ﭘﭙﺘﻮن ﻣﻲﺑﺎﺷﺪ‪ ،‬اﺳﺘﻔﺎده ﺷﺪ‪ .‬ﺑـﺎﻛﺘﺮيﻫـﺎ ﺑـﻪ‬
‫ﺻﻮرت ﻛﺸﺖ ﻋﻤﻘﻲ در ﻣﺤﻴﻂ ﺗﻠﻘﻴﺢ و ﺳﭙﺲ ﻧﮕﻬﺪاري ﺷـﺪﻧﺪ‪ .‬اﻳﺠـﺎد‬
‫ﻫﺎﻟﻪ ﻗﺮﻣﺰ رﻧﮓ روي ﻣﺤﻴﻂ ﭘﺲ از اﺿﺎﻓﻪ ﺷﺪن ﻣﻌﺮف ﻛﻮاﻛﺲ ﻧـﺸﺎﻧﻪ‬
‫ﻣﺜﺒﺖ ﺑﻮدن آزﻣﻮن ﻣﻲﺑﺎﺷـﺪ‪ .‬از ﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻬـﺎي ‪ E.coli‬ﺑـﻪ ﻋﻨـﻮان ﺷـﺎﻫﺪ‬
‫اﻳﻨﺪول ﻣﺜﺒﺖ و از‪ Enterobacter sp.‬ﺑﻪ ﻋﻨﻮان ﺷﺎﻫﺪ اﻳﻨـﺪول ﻣﻨﻔـﻲ‬
‫اﺳﺘﻔﺎده ﺷﺪ )‪ .(21‬ﺑﻪ ﻣﻨﻈﻮر ﺳـﻨﺠﺶ ﺗـﻮان ﺑـﺎﻛﺘﺮيﻫـﺎ در اﺳـﺘﻔﺎده از‬
‫ﻣﻨﺎﺑﻊ ﻛﺮﺑﻮﻫﻴﺪراﺗﻲ از آزﻣﻮن ﻓﻨـﻞ رد اﺳـﺘﻔﺎده ﺷـﺪ‪ .‬در اﻳـﻦ آزﻣـﻮن از‬
‫ﻗﻨﺪﻫﺎي ﺗﺮﻫﺎﻟﻮز‪ ،‬ﻣﺎﻧﻴﺘﻮل و ﻣﺎﻟﺘﻮز اﺳـﺘﻔﺎده ﺷـﺪ‪ .‬ارزﻳـﺎﺑﻲ ﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻬـﺎ ﺑـﺮ‬
‫اﺳﺎس زرد ﺷﺪن )ﻓﻨﻮل رد ﻣﺜﺒﺖ( و ﻳﺎ ﻗﺮﻣـﺰ ﺷـﺪن )ﻓﻨـﻮل رد ﻣﻨﻔـﻲ(‬
‫رﻧﮓ ﻣﺤﻴﻂ ﭘﺲ از ﭼﻬﺎر ﻫﻔﺘـﻪ اﻧﻜﻮﺑﺎﺳـﻴﻮن ﺻـﻮرت ﮔﺮﻓـﺖ )‪ .(24‬در‬
‫آزﻣﻮن ﺑﺎﻳﻞ اﺳﻜﻮﻟﻴﻦ ﺑﻌﺪ از ﺗﻠﻘﻴﺢ ﺑﺎﻛﺘﺮيﻫﺎ ﺑﻪ ﻣﺤﻴﻂ ﻛﺸﺖ‪ ،‬ﻟﻮﻟﻪﻫﺎ در‬
‫دﻣﺎي ‪ 28‬درﺟﻪ ﺳﺎﻧﺘﻲ ﮔﺮاد ﻧﮕﻬﺪاري ﺷﺪﻧﺪ‪ .‬ﻇﻬﻮر رﻧﮓ ﺗﻴﺮه در ﻧﻴﻤـﻲ‬
‫از آﮔﺎر ﻣﻮرب ﺑﻌﺪ از ﮔﺬﺷﺖ ‪ 24 -48‬ﺳﺎﻋﺖ ﺑﻪ ﻋﻨﻮان اﺳﻜﻮﻟﻴﻦ ﻣﺜﺒـﺖ‬
‫و در ﻣﻘﺎدﻳﺮ ﻛﻤﺘﺮ از ﻧﺼﻒ ﺑﻪ ﻋﻨﻮان ﻣﻨﻔﻲ در ﻧﻈﺮ ﮔﺮﻓﺘﻪ ﺷﺪ )‪.(24‬‬
‫ﺑﻪ ﻣﻨﻈـﻮر ﺑﺮرﺳـﻲ ﺗﻮاﻧـﺎﻳﻲ رﺷـﺪ ﺳـﻮﻳﻪ ﻫـﺎ در دﻣـﺎي‪ 42‬درﺟـﻪ‬
‫ﺳﺎﻧﺘﻲﮔﺮاد ﻳﻚ ﻟﻮپ از ﻛﺸﺖ ﺧﺎﻟﺺ ﺑﺎﻛﺘﺮي ﺑـﻪ ﺻـﻮرت ﻣﺨﻄـﻂ ﺑـﺮ‬
‫روي ﻣﺤﻴﻂ ﻛﺸﺖ ‪ FIM‬ﻛﺸﺖ و در دﻣﺎي‪ 42‬درﺟﻪ ﺳﺎﻧﺘﻲ ﮔـﺮاد ﻗـﺮار‬
‫داده ﺷﺪ‪ .‬رﺷﺪ روزاﻧﻪ ﺑﺎﻛﺘﺮي و اﻧﺪازه و ﺷﻜﻞ ﻛﻠﻮﻧﻲ ﺗﺎ روز دﻫﻢ ﻣـﻮرد‬
‫ﺑﺮرﺳﻲ ﻗﺮارﮔﺮﻓﺖ )‪ .(21‬ﺑﺮاي اﻧﺠﺎم آزﻣـﻮن اﺣﻴـﺎي ﻧﻴﺘـﺮات از ﻣﺤـﻴﻂ‬
‫‪ NB‬اﺳﺘﻔﺎده ﮔﺮدﻳﺪ‪ .‬ﺑﺎﻛﺘﺮيﻫﺎ ﺑﻪ ﻣﺤﻴﻂ ﻛﺸﺖ ﻣـﺎﻳﻊ ﺗﻠﻘـﻴﺢ و ‪24-48‬‬
‫ﺳﺎﻋﺖ در دﻣﺎي ‪ 28‬درﺟﻪ ﺳﺎﻧﺘﻲ ﮔﺮاد ﻧﮕﻬـﺪاري ﺷـﺪﻧﺪ‪ .‬ﻇﻬـﻮر رﻧـﮓ‬
‫ﺻﻮرﺗﻲ در اﺛﺮ اﻓﺰودن ﻣﻌﺮف ﻧﺸﺎﻧﻪ واﻛﻨﺶ ﻣﻨﻔﻲ و در ﻏﻴـﺮ اﻳﻨـﺼﻮرت‬
‫ﻣﺜﺒﺖ در ﻧﻈﺮ ﮔﺮﻓﺘﻪ ﺷﺪ )‪.(21‬‬
‫‪ leifsons of based medium‬اﺳﺘﻔﺎده ﮔﺮدﻳﺪ‪ .‬از ﻣﺤﻴﻂ ﺗﻬﻴـﻪ ﺷـﺪه‬
‫ﻧﮕﻬﺪاري ﺟﺪاﻳﻪﻫﺎ‬
‫ﭘﺲ از ﺷﻨﺎﺳﺎﻳﻲ ﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻬﺎ و اﻃﻤﻴﻨﺎن از ﺧﻠـﻮص آﻧﻬـﺎ‪ ،‬ﻳـﻚ ﻛﻠﻨـﻲ‬
‫ﺧﺎﻟﺺ از ﻣﺤﻴﻂ ﻛﺸﺖ ﺗﺎزه ﻫﺮ ﺑﺎﻛﺘﺮي در ﻟﻮﻟـﻪﻫـﺎي آزﻣـﺎﻳﺶ ﺣـﺎوي‬
‫ﻣﺤﻴﻂ ﻛﺸﺖ ﺷﻴﺒﺪار ‪ NA‬ﻛﺸﺖ داده ﺷﺪ‪ .‬اﻳﻦ ﻟﻮﻟﻪﻫﺎ ﺑﻪ ﻣـﺪت ‪ 2‬ﺗـﺎ ‪4‬‬
‫روز در دﻣﺎي ‪ 28‬درﺟﻪ ﺳﺎﻧﺘﻲ ﮔﺮاد ﻧﮕﻬﺪاري ﺷﺪﻧﺪ و ﭘﺲ از رﺷﺪ ﻛﺎﻓﻲ‬
‫ﻧﺸﺮﻳﻪ آب و ﺧﺎك‪ ،‬ﺟﻠﺪ ‪ ،24‬ﺷﻤﺎره‪ ،2‬ﺧﺮداد – ﺗﻴﺮ ﺳﺎل ‪1389‬‬ ‫‪256‬‬
‫ﺟﺪاﺳﺎزي ﺑﺎﻛﺘﺮيﻫﺎي ﻓﻼوﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻮم‬
‫‪-10‬‬ ‫‪-1‬‬
‫ﺗﻬﻴﻪ ﮔﺮدﻳﺪ‪ .‬ﺳﭙﺲ ‪ 0/1‬ﻣﻴﻠﻲ ﻟﻴﺘﺮ از ﻫﺮ رﻗﺖ ﺑـﺮ روي ﻣﺤـﻴﻂ ﻛـﺸﺖ‬
‫اﺧﺘﺼﺎﺻﻲ ‪ FIM‬ﮔﺴﺘﺮده ﺷﺪ‪ .‬ﭘﺲ از ﮔﺬﺷﺖ ‪ 6‬روز از زﻣﺎن ﻧﮕﻬـﺪاري‬
‫ﭘﻠﻴﺖﻫﺎ در اﻧﻜﻮﺑﺎﺗﻮرﺑﺎ دﻣﺎي ‪ 15‬درﺟﻪ ﺳﺎﻧﺘﻲ ﮔﺮاد و ﺗﺤـﺖ ﺗـﺎﺑﺶ ﻧـﻮر‬
‫ﺳﻔﻴﺪ ﻓﻠﻮرﺳﻨﺖ )‪ (300 nm‬ﻧﺴﺒﺖ ﺑﻪ اﻧﺘﺨﺎب ﻛﻠﻨﻲﻫﺎي زرد ﺗﺎ ﻧﺎرﻧﺠﻲ‪،‬‬
‫ﻧﺴﺒﺘﺎ ًﺷﻔﺎف ﺗﺎ ﻛﻤﻲ ﻣﺎت ﺑﺎ ﻗﻄﺮ ‪ 1-2‬ﻣﻴﻠﻲ ﻣﺘﺮ و ﻣﺤﺪب و ﺑﺮاق اﻗﺪام‬
‫ﮔﺮدﻳﺪ‪ .‬ﭘﺲ از ﺑﺎزﻛﺸﺖ اﻳـﻦ ﻛﻠﻨـﻲﻫـﺎ ﺑـﺮ روي ﻣﺤـﻴﻂ ‪ FIM‬ﻛـﺸﺖ‬
‫ﺧﺎﻟﺺ اﻳﻦ ﺟﺪاﻳﻪﻫﺎ ﺗﻬﻴﻪ ﺷﺪ )‪12‬و‪.(13‬‬
‫ﺷﻨﺎﺳﺎﻳﻲ ﺟﺪاﻳﻪ ﻫﺎ‬
‫ﺑﺮاي ﺷﻨﺎﺳﺎﻳﻲ ﺟﻨﺲ ﻓﻼوﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻮم از ﻣﻴـﺎن ﺟﺪاﻳـﻪﻫـﺎي اﻧﺘﺨـﺎب‬
‫ﺷﺪه از آزﻣﻮن ﻫﺎي رﻧﮓ آﻣﻴﺰي ﮔﺮم و ﺑﺮرﺳﻲ ﻣﺸﺨﺼﺎت ﻣﺮﻓﻮﻟﻮژﻳﻚ‪،‬‬
‫اﻳﺠــﺎد رﻧــﮓ ﻓﻠﻮرﺳــﻨﺲ‪ ،‬ﻛﺎﺗــﺎﻻز‪ ،‬اﻛــﺴﻴﺪاز‪ ،‬ﻓــﺴﻔﺎﺗﺎز‪ OF ،‬و ﺗﺤــﺮك‬
‫اﺳﺘﻔﺎده ﺷﺪ )‪12‬و‪.(13‬‬
‫ﺑﺮاي ﺑﺮرﺳﻲ اﻳﺠﺎد رﻧﮓ ﻓﻠﻮرﺳﻨﺲ اﻗﺪام ﺑﻪ ﻛﺸﺖ ﺑﺎﻛﺘﺮي ﺑﺮ روي‬
‫ﻣﺤﻴﻂ ﻛﺸﺖ ‪ kingB‬ﮔﺮدﻳﺪ )‪ .(24‬ﭘﺲ از رﺷـﺪ ﺑـﺎﻛﺘﺮي روي ﻣﺤـﻴﻂ‬
‫ﻛﻠﻴﻪ ﻛﻠﻨﻲﻫﺎ ﺑﺎ اﺳﺘﻔﺎده از ﻻﻣﭗ ﺑـﺎ ﺗـﺎﺑﺶ ﻧـﻮر ﻣـﺎوراي ﺑـﻨﻔﺶ ﻣـﻮرد‬
‫ﺑﺮرﺳﻲ ﻗﺮار ﮔﺮﻓﺘﻨﺪ‪ .‬در آزﻣﻮن ﻛﺎﺗﺎﻻز از روش اﺿـﺎﻓﻪ ﻛـﺮدن ﻣﺤﻠـﻮل‬
‫‪ 30 H2O2‬درﺻﺪ ﺑﺮ روي ﻛﻠﻨﻲﻫـﺎ و ﻇﻬـﻮر ﺣﺒـﺎبﻫـﺎي اﻛـﺴﻴﮋن ﺑـﻪ‬
‫ﻋﻨﻮان ﺷﺎﺧﺼﻲ ﺑﺮاي اﻧﻮاع ﻛﺎﺗﺎﻻز ﻣﺜﺒـﺖ اﺳـﺘﻔﺎده ﺷـﺪ‪ .‬ﺑـﺮاي اﻧﺠـﺎم‬
‫آزﻣﻮن اﻛﺴﻴﺪاز ﭼﻨﺪ ﻗﻄﺮه از ﻣﻌﺮف اﻛﺴﻴﺪاز )ﻣﺤﻠـﻮل ﻳـﻚ درﺻـﺪ دي‬
‫ﻣﺘﻴﻞ ﭘﺎرا ﻓﻨﻴﻠﻴﻦ دي آﻣﻴﻦ ﻫﻴﺪرو ﻛﻠﺮاﻳﺪ( ﺑـﺮ روي ﻛﻠﻨـﻲﻫـﺎي رﻳﺨﺘـﻪ‬
‫ﺷﺪه و ﺗﻐﻴﻴﺮ رﻧﮓ ﺑﻪ ﺳﻤﺖ ﻗﺮﻣﺰ ﺗﻴﺮه ﻳﺎ ﺳﻴﺎه ﺑﻌﻨﻮان اﻛﺴﻴﺪاز ﻣﺜﺒﺖ در‬
‫ﻧﻈﺮ ﮔﺮﻓﺘﻪ ﺷﺪ )‪ .(19‬در آزﻣﻮن ﺗﻮان ﺗﺤـﺮك ﺑـﺎﻛﺘﺮي از ﻣﺤـﻴﻂ ﻧﻴﻤـﻪ‬
‫ﺟﺎﻣﺪ ﺑﺎ ﺗﺮﻛﻴﺐ ﭘﭙﺘﻮن )‪ 10‬ﮔﺮم در ﻟﻴﺘـﺮ( ﻋـﺼﺎره ﮔﻮﺷـﺖ ) ‪ 3‬ﮔـﺮم در‬
‫ﻟﻴﺘﺮ(‪ ،‬ﻛﻠﺮﻳﺪ ﺳﺪﻳﻢ )‪ 5‬ﮔﺮم در ﻟﻴﺘﺮ( و آﮔﺎر )‪ 0/4‬ﮔﺮم در ﻟﻴﺘـﺮ( اﺳـﺘﻔﺎده‬
‫ﮔﺮدﻳﺪ‪ .‬ﺑﺮاي اﻧﺠﺎم اﻳﻦ آزﻣﻮن ﺗﺤﺖ ﺷﺮاﻳﻂ ﺳﺘﺮون ﺑـﻪ ﻛﻤـﻚ ﺳـﻮزن‬
‫ﭘﻼﺗﻴﻦ از ﻛﺸﺖ ﺗﺎزه ﺑﺎﻛﺘﺮي ﻣﻘﺪاري ﺑﺮداﺷﺘﻪ ﺷﺪ و ﺑﻪ ﻃﻮر ﻋﻤﻮدي در‬
‫وﺳﻂ ﻟﻮﻟﻪﻫﺎي ﺣﺎوي ﻣﺤﻴﻂ ﻛﺸﺖ ﺗﻠﻘﻴﺢ ﮔﺮدﻳﺪ‪ .‬رﺷﺪ ﻣﻨﺤﺼﺮ ﺑﻪ ﺧـﻂ‬
‫ﺗﻠﻘﻴﺢ ﻧﺸﺎﻧﻪ ﻏﻴﺮﻣﺘﺤﺮك ﺑﻮدن ﺑﺎﻛﺘﺮي ﻣﻲﺑﺎﺷﺪ )‪ .(1‬ﺟﻬﺖ ﺗﻌﻴـﻴﻦ ﻧـﻮع‬
‫ﻣﺘﺎﺑﻮﻟﻴﺴﻢ ﺑﺎﻛﺘﺮي )اﻛﺴﺎﻳﺸﻲ ﻳﺎ ﺗﺨﻤﻴﺮي( از آزﻣﻮن ‪ OF‬اﺳـﺘﻔﺎده ﺷـﺪ‪.‬‬
‫ﺟﻬﺖ اﻧﺠـﺎم اﻳـﻦ آزﻣـﻮن از ﻣﺤـﻴﻂ ﻛـﺸﺖ ﻧﻴﻤـﻪ ﺟﺎﻣـﺪ ‪Hughand‬‬
‫ﺑﻪ ﻣﻴﺰان‪ 5‬ﻣﻴﻠﻲ ﻟﻴﺘﺮ درون ﻟﻮﻟﻪﻫﺎي اﺳﺘﺮﻳﻞ ﺗﻮزﻳـﻊ ﺷـﺪ و ﺳـﭙﺲ ﻫـﺮ‬
‫ﺟﺪاﻳﻪ ﺑﻮﺳﻴﻠﻪ ﺳﻮزن ﭘﻼﺗﻴﻨﻲ ﺑﻪ ﻣﺤﻴﻂ ﻧﻴﻤﻪ ﺟﺎﻣـﺪ در دو ﺗﻜـﺮار ﺗﻠﻘـﻴﺢ‬
‫ﮔﺮدﻳﺪ‪ .‬ﺑﺮ روي ﻳﻜﻲ از ﺗﻜﺮارﻫﺎ ﭘﺎراﻓﻴﻦ اﺳﺘﺮﻳﻞ ﺷـﺪه ﺑـﻪ ﻣﻴـﺰان ﻳـﻚ‬
‫ﻣﻴﻠﻲ ﻟﻴﺘﺮ اﺿﺎﻓﻪ ﮔﺮدﻳﺪ و ﻟﻮﻟﻪﻫـﺎ در دﻣـﺎي ﻣﻨﺎﺳـﺐ ﻧﮕﻬـﺪاري ﺷـﺪﻧﺪ‪.‬‬
‫ﻣﻌﺮف ﻣﻮﺟﻮد در ﻣﺤﻴﻂ در ‪ pH‬ﭘﺎﻳﻴﻦ ﺗﺮ از ‪ 6‬ﺑـﻪ رﻧـﮓ زرد و در ‪pH‬‬
 ‫‪257‬‬ ‫ﺟﺪاﺳﺎزي و ﺷﻨﺎﺳﺎﻳﻲ ﮔﻮﻧﻪﻫﺎي ﻣﺨﺘﻠﻒ ﺑﺎﻛﺘﺮي ﻓﻼوﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻮم‪...‬‬

‫ﺑﻴﻦ ‪ 61‬ﺑﺎﻛﺘﺮي ﺟﺪاﻳﻪ ﻫﺎي ‪ F20‬و ‪ F21‬اﻳﻨﺪول ﻣﺜﺒﺖ و ﻣﺎﺑﻘﻲ ﺟﺪاﻳﻪﻫـﺎ‬ ‫در ﻳﺨﭽﺎل در دﻣﺎي ‪ 4‬درﺟﻪ ﺳﺎﻧﺘﻲ ﮔﺮاد ﻧﮕﻬﺪاري ﺷﺪﻧﺪ‪.‬‬
‫اﻳﻨﺪول ﻣﻨﻔﻲ ﺑﻮدﻧﺪ‪ .‬در ارزﻳﺎﺑﻲ دو ﺟﺪاﻳﻪ ﮔﺮوه ‪ A‬ﻣﺸﺨﺺ ﺷﺪ ﻛﻪ اﻳﻦ‬
‫دو ﺟﺪاﻳﻪ اﺳﻜﻮﻟﻴﻦ ﻣﺜﺒﺖ و ﺗﺮﻫﺎﻟﻮز ﻣﻨﻔﻲ ﺑﻮدﻧﺪ‪ .‬اﻳﻦ دو ﺟﺪاﻳـﻪ از ﻧﻈـﺮ‬ ‫ﻧﺘﺎﻳﺞ و ﺑﺤﺚ‬
‫ﺗﻮان اﺳﺘﻔﺎده از ﻣﺎﻟﺘﻮز ﻧﻴﺰ ﻣﻮرد ارزﻳﺎﺑﻲ ﻗﺮار ﮔﺮﻓﺘﻨﺪ‪ .‬ﺟﺪاﻳﻪ ‪ F21‬ﻣـﺎﻟﺘﻮز‬
‫ﻛﺸﺖ ﺳﺮيﻫﺎي رﻗﺖ ‪ 61‬ﻧﻤﻮﻧﻪ ﺧﺎك رﻳﺰوﺳﻔﺮي ﺑﺮ روي ﻣﺤـﻴﻂ‬
‫ﻣﺜﺒﺖ و از ﮔﻮﻧﻪ ‪ F.indoltheticom‬و ﺟﺪاﻳﻪ ‪ F20‬ﻓﻨﻮل ﻣﺎﻟﺘﻮز ﻣﻨﻔﻲ و‬
‫ﻛﺸﺖ ‪ FIM‬ﻣﻨﺠﺮ ﺑﻪ ﺟﺪاﺳﺎزي ‪ 200‬ﺟﺪاﻳﻪ ﮔﺮدﻳـﺪ‪ .‬ﭘـﺲ از ﺑﺎزﻛـﺸﺖ‬
‫ﻣﺘﻌﻠﻖ ﺑﻪ ﮔﻮﻧﻪ‪ F.balastinum‬ﺑﻮد‪ .‬از آزﻣﻮن اﺣﻴﺎء ﻧﻴﺘﺮات ﻧﻴـﺰ ﺟﻬـﺖ‬
‫‪ 200‬ﺟﺪاﻳﻪ ﻣﺬﻛﻮر ‪ 180‬ﺟﺪاﻳﻪ ﻗﺎدر ﺑﻪ رﺷﺪ ﺑﺮ روي ﻣﺤﻴﻂ ﻛﺸﺖ ﻣﻮرد‬
‫ﺗﺎﻳﻴﺪ آزﻣﻮن ﻣﺎﻟﺘﻮز اﺳﺘﻔﺎده ﺷﺪ‪ .‬ﺟﺪاﻳﻪ‪ F20‬ﻗﺎدر ﺑﻪ اﺣﻴﺎ ﻧﻴﺘﺮات ﺑﻮد و ﻟـﺬا‬
‫ﻧﻈﺮ ﺑﻮدﻧﺪ‪ .‬رﺷﺪ ﻣﻨﺎﺳﺐ ﻛﻠﻨﻲﻫﺎ ﺑﺮ روي ﻣﺤﻴﻂ ﻛـﺸﺖ ‪ FIM‬ﻧـﺸﺎن از‬
‫ﻣﺘﻌﻠﻖ ﺑﻪ ﮔﻮﻧﻪ ‪ F.balastinum‬و ﺟﺪاﻳﻪ ‪ F21‬از ﻧﻈﺮ ﺗﻮان اﺣﻴﺎ ﻧﻴﺘـﺮات‬
‫ﺻﺤﺖ و ﺗﻮان آن ﺑﺮاي ﺟﺪا ﺳﺎزي اﺧﺘﺼﺎﺻﻲ ﻓﻼوﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻮم دارد‪ .‬ﺗـﻮان‬
‫ﻣﻨﻔﻲ و از ﮔﻮﻧﻪ ‪ F.indoltheticom‬ﺑﻮد ﻛﻪ ﻧﺘﺎﻳﺞ ﺣﺎﺻﻠﻪ ﺑﺎ ﻧﺘـﺎﻳﺞ ﺑـﻪ‬
‫ﺑﺎﻛﺘﺮيﻫﺎي ﻓﻼوﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻮم ﺑﺮاي رﺷﺪ ﺑﺮ روي ﻣﺤﻴﻂﻫﺎي ﺣﺎوي ﻛﺎزﺋﻴﻦ‬
‫دﺳﺖ آﻣﺪه از آزﻣﻮن ﻣﺎﻟﺘﻮز ﻣﻄﺎﺑﻘﺖ داﺷﺖ‪.‬‬
‫ﻫﻀﻢ ﺷﺪه و ﻳﺎ ژﻻﺗﻴﻦ ﻫﻴﺪروﻟﻴﺰ ﺷﺪه ﻛﻪ ﺑﺎ ﻋﺼﺎره ﻣﺨﻤﺮ ﺗﻘﻮﻳﺖ ﺷـﺪه‬
‫ارزﻳــﺎﺑﻲ ‪ 59‬ﺟﺪاﻳــﻪ ﮔــﺮوه ‪ B‬و ‪ C‬در ﺗﻮاﻧــﺎﻳﻲ اﺳــﺘﻔﺎده از ﻣﻨﺒــﻊ‬
‫اﻧﺪ ﺗﻮﺳﻂ ﺳﺎﻳﺮ ﻣﺤﻘﻘﻴﻦ ﻧﻴﺰ ﮔﺰارش ﺷـﺪه اﺳـﺖ )‪ .(20‬از ‪ 180‬ﺟﺪاﻳـﻪ‬
‫ﻛﺮﺑﻮﻫﻴﺪراﺗﻲ ﺗﺮﻫـﺎﻟﻮز ﻧـﺸﺎن داد ﺟﺪاﻳـﻪ ﻫـﺎي ‪،F 46 ،F35 ،F7 ،F6 ،F1‬‬
‫ﻣﻮرد ﺑﺮرﺳﻲ ‪ 100‬ﺟﺪاﻳﻪ از ﺧـﺼﻮﺻﻴﺎت ﻣﺮﻓﻮﻟﻮژﻳـﻚ و رﻧـﮓ ﭘـﺬﻳﺮي‬
‫‪ F61، F 60، F 59، F56، F53، F52، F51، F50 ،F49 ،F48 ،F47‬ﻣﺜﺒــﺖ و‬
‫ﻣﺸﺎﺑﻪ ﻓﻼوﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻮمﻫﺎ ﺑﺮﺧﻮردار ﺑﻮدﻧـﺪ‪ .‬ﭘـﺲ از ﻛـﺸﺖ و ﺑﺮرﺳـﻲ ‪100‬‬
‫ﻣﺘﻌﻠﻖ ﺑﻪ ﮔﺮوه ‪ C‬ﻣﻲﺑﺎﺷﻨﺪ و ﻣﺎﺑﻘﻲ ﺟﺪاﻳﻪﻫﺎ ﺗﺮﻫﺎﻟﻮز ﻣﻨﻔﻲ و ﻣﺘﻌﻠﻖ ﺑﻪ‬
‫ﺟﺪاﻳﻪ ﻣﻮرد ﻧﻈﺮ روي ﻣﺤﻴﻂ ‪ King B‬ﻣﺸﺨﺺ ﺷﺪ ﻛـﻪ ﻫـﻴﭻ ﻳـﻚ از‬
‫ﮔﺮوه ‪ B‬و از ﮔﻮﻧﻪ ‪ F.odoratum‬ﻣﻲﺑﺎﺷﻨﺪ‪ .‬ﻛﻠﻴﻪ ﺟﺪاﻳﻪﻫﺎي ﻣﺘﻌﻠﻖ ﺑـﻪ‬
‫اﻳﺰوﻟﻪﻫﺎ ﺗﻮاﻧﺎﻳﻲ اﻳﺠﺎد ﭘﻴﮕﻤﺎن رﻧﮕﻲ روي ﻣﺤـﻴﻂ ﻣـﺬﻛﻮر را ﻧﺪاﺷـﺘﻨﺪ‪.‬‬
‫ﮔﺮوه ‪ C‬از ﻧﻈﺮ ﺗﻮان اﺳﺘﻔﺎده از ﻣـﺎﻧﻴﺘﻮل ﻣـﻮرد ارزﻳـﺎﺑﻲ ﻗـﺮار ﮔﺮﻓﺘﻨـﺪ‪.‬‬
‫ﻧﺘﺎﻳﺞ آزﻣﻮن ﻛﺎﺗﺎﻻز و اﻛﺴﻴﺪاز ‪ 80‬درﺻﺪ از ﺟﺪاﻳﻪﻫﺎ ﻣﺜﺒﺖ ﮔﺰارش ﺷﺪ‪.‬‬
‫ﺟﺪاﻳﻪﻫﺎي ‪،F53 ،F52 ،F51 ،F50 ،F49 ،F48 ،F47 ،F 46 ،F35 ،F7،F6 ،F1‬‬
‫ﻫﻴﭻ ﻳﻚ از ﺟﺪاﻳﻪﻫﺎ ﻣﺘﺤﺮك ﻧﺒﻮدﻧﺪ‪ 61 .‬ﺟﺪاﻳﻪ ﻗﺎدر ﺑﻪ ﺗﻐﻴﻴـﺮ رﻧـﮓ و‬
‫‪ F60 ،F 59 ،F56‬ﻣﺎﻧﻴﺘﻮل ﻣﻨﻔﻲ و ﺟﺪاﻳﻪ ‪ F61‬ﻣﺎﻧﻴﺘﻮل ﻣﺜﺒﺖ ﺑـﻮد‪ .‬آزﻣـﻮن‬
‫ﻓﻌﺎﻟﻴﺖ ﻣﺘﺎﺑﻮﻟﻴﻚ در ﻟﻮﻟـﻪﻫـﺎي آزﻣـﻮن ‪ OF‬ﺣـﺎوي ﭘـﺎراﻓﻴﻦ )ﺷـﺮاﻳﻂ‬
‫رﺷﺪ در دﻣﺎي ‪ 42‬درﺟﻪ ﺳﺎﻧﺘﻲ ﮔﺮاد ﺑﺮاي ﺟﺪاﻳﻪﻫـﺎي ﻣـﺎﻧﻴﺘﻮل ﻣﻨﻔـﻲ‬
‫ﺗﺨﻤﻴﺮ( ﻧﺒﻮدﻧﺪ و ﻟﺬا اﻳﻦ ﺟﺪاﻳﻪﻫـﺎ ﺑـﺪﻟﻴﻞ ﺷـﺒﺎﻫﺖ ﻓﺮآﻳﻨـﺪ ﺗﻨﻔـﺴﻲ ﺑـﺎ‬
‫اﻧﺠﺎم ﺷﺪ‪ .‬ﻧﺘﻴﺠﻪ اﻳﻦ آزﻣﻮن ﺗﻨﻬﺎ ﺑﺮاي اﻳﺰوﻟﻪ ‪ F6‬ﻣﺜﺒﺖ ﮔﺰارش ﺷﺪ ﻛﻪ‬
‫ﺑﺎﻛﺘﺮيﻫﺎي ﻓﻼوﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻮم ﺑﻪ ﻋﻨﻮان ﺟﻨﺲ ﻓﻼوﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻮم در ﻧﻈﺮ ﮔﺮﻓﺘـﻪ‬
‫از ﮔﻮﻧﻪ ‪ F.thalpophilum‬ﺑﻮد‪ .‬ﻣﺎﺑﻘﻲ ﺟﺪاﻳﻪﻫﺎ ﻛﻪ ﻗـﺎدر ﺑـﻪ رﺷـﺪ در‬
‫ﺷﺪه و ﺑﺮاي اداﻣﻪ آزﻣﺎﻳﺸﺎت اﻧﺘﺨﺎب ﺷﺪﻧﺪ )ﺟـﺪول ‪ .(1‬ﻧﺘﻴﺠـﻪ آزﻣـﻮن‬
‫دﻣﺎي ‪ 42‬درﺟﻪ ﺳﺎﻧﺘﻲ ﮔﺮاد ﻧﺒﻮدﻧﺪ از ﻧﻈﺮ ﺗﻮان اﺣﻴﺎي ﻧﻴﺘﺮﻳﺖ ﻧﻴﺰ ﻣﻮرد‬
‫ﻓﺴﻔﺎﺗﺎز در ﺗﻤﺎﻣﻲ اﻳﻦ ‪ 61‬اﻳﺰوﻟﻪ ﻣﺜﺒﺖ ﮔﺰارش ﮔﺮدﻳﺪ‪.‬‬
‫ﺑﺮرﺳﻲ ﻗﺮار ﮔﺮﻓﺘﻨﺪ‪ .‬ﻛﻠﻴﻪ ﺟﺪاﻳﻪﻫﺎ ﻗﺎدر ﺑﻪ اﺣﻴﺎي ﻧﻴﺘﺮﻳﺖ ﻧﺒﻮده و ﻣﺘﻌﻠﻖ‬
‫ﺑﻪ ﻣﻨﻈﻮر ﺷﻨﺎﺳﺎﻳﻲ ﮔﻮﻧﻪﻫـﺎي ﻓﻼوﺑـﺎﻛﺘﺮﻳﻮم‪ 61 ،‬ﺟﺪاﻳـﻪ ﻣﺤـﺮز از‬
‫ﺑﻪ ﮔﻮﻧﻪ ‪ F. multivorum‬ﺑﻮدﻧﺪ‪.‬‬
‫ﻧﻈﺮ ﺟﻨﺲ ﻓﻼوﺑـﺎﻛﺘﺮﻳﻮم ﭘـﺲ از اﻧﺠـﺎم ﺗـﺴﺖ اﻳﻨـﺪول ﺑـﻪ دو ﮔـﺮوه‬
‫اﺻﻠﻲ‪) A‬اﻳﻨﺪول ﻣﺜﺒﺖ( و ﮔﺮوه ‪ B‬و‪) C‬اﻳﻨﺪول ﻣﻨﻔﻲ( ﺗﻔﻜﻴﻚ ﺷﺪﻧﺪ‪ .‬از‬

‫)ﺟﺪول ‪ -(1‬ﻧﺘﺎﻳﺞ آزﻣﻮﻧﻬﺎي ﻓﻴﺰﻳﻮﻟﻮژﻳﻚ و ﺑﻴﻮﺷﻴﻤﻴﺎﻳﻲ ﺟﺪاﻳﻪﻫﺎي ﻓﻼوﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻮم‬

‫ﮔﻮﻧﻪ ﺷﻨﺎﺳﺎﻳﻲ‬

‫‪Phosphatase‬‬

‫‪Morphology‬‬

‫ﺷﻤﺎره ﺑﺎﻛﺘﺮي‬
‫‪Growth at‬‬

‫‪Terhalose‬‬
‫‪reduction‬‬

‫‪reduction‬‬

‫‪Catalase‬‬
‫‪Oxidase‬‬
‫‪Motility‬‬
‫‪Manitol‬‬
‫‪Maltose‬‬

‫‪Esculin‬‬

‫‪OF test‬‬

‫‪Colony‬‬
‫‪Indole‬‬

‫‪colour‬‬
‫‪NO2‬‬

‫‪NO3‬‬
‫ﺷﺪه‬

‫‪42°c‬‬

‫‪F.multivorum‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪+‬‬ ‫)‪BS(-‬‬ ‫زرد‪-‬ﻧﺎرﻧﺠﻲ‬ ‫‪F1‬‬

‫‪F. Odoratum‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪+‬‬ ‫)‪BS1(-‬‬ ‫زرد‪-‬ﻧﺎرﻧﺠﻲ‬ ‫‪F2‬‬
‫‪F. Odoratum‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪+‬‬ ‫)‪BS(-‬‬ ‫زرد‪-‬ﻧﺎرﻧﺠﻲ‬ ‫‪F3‬‬
‫‪F. Odoratum‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪+‬‬ ‫)‪BM2(-‬‬ ‫زرد‪-‬ﻧﺎرﻧﺠﻲ‬ ‫‪F4‬‬
‫‪F. .Odoratum‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪+‬‬ ‫)‪BS(-‬‬ ‫زرد‪-‬ﻧﺎرﻧﺠﻲ‬ ‫‪F5‬‬
‫‪F. thalpophilum‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪+‬‬ ‫)‪BS(-‬‬ ‫زرد‪-‬ﻧﺎرﻧﺠﻲ‬ ‫‪F6‬‬
‫‪F. multivorum‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪+‬‬ ‫)‪BS(-‬‬ ‫زرد‪-‬ﻧﺎرﻧﺠﻲ‬ ‫‪F7‬‬
‫‪F. odoratum‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪+‬‬ ‫)‪BS(-‬‬ ‫زرد‪-‬ﻧﺎرﻧﺠﻲ‬ ‫‪F8‬‬
‫‪F.odoratum‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪+‬‬ ‫)‪BS(-‬‬ ‫زرد‪-‬ﻧﺎرﻧﺠﻲ‬ ‫‪F9‬‬
‫‪F.odoratum‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪+‬‬ ‫)‪BS(-‬‬ ‫زرد‪-‬ﻧﺎرﻧﺠﻲ‬ ‫‪F10‬‬
‫‪F.odoratum‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪-‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪+‬‬ ‫‪+‬‬ ‫)‪BS(-‬‬ ‫ﻧﺎرﻧﺠﻲ‬ ‫‪F11‬‬

‫‪1- Small Bacill‬‬

‫‪2- modrate Bacill‬‬
 1389 ‫ ﺧﺮداد – ﺗﻴﺮ ﺳﺎل‬،2‫ ﺷﻤﺎره‬،24 ‫ ﺟﻠﺪ‬،‫ﻧﺸﺮﻳﻪ آب و ﺧﺎك‬ 258

F.odoratum - - - - - - - - + - + + + BS(-) ‫ﻧﺎرﻧﺠﻲ‬-‫زرد‬ F12

F.odoratum - - - - - - - - + - + + + BS(-) ‫زرد‬ F13
F.odoratum - - - - - - - - + - + + + BS(-) ‫زرد‬ F14
F.odoratum - - - - - - - - + - + + + BS(-) ‫زرد‬ F15
F.odoratum - - - - - - - - + - + + + BS(-) ‫زرد‬ F16
F.odoratum - - - - - - - - + - + + + BS(-) ‫زرد‬ F17
F.odoratum - - - - - - - - + - + + + BS(-) ‫ﻧﺎرﻧﺠﻲ‬ F18
F.odoratum - - - - - - - - + - + + + BS(-) ‫زرد‬ F19
F.balastinum - - + - - - + + + - + + + BS(-) ‫ﻧﺎرﻧﺠﻲ‬ F20
F.indoltheticum - - - + - - + + + - + + + BS(-) ‫ﻧﺎرﻧﺠﻲ‬-‫زرد‬ F21
F.odoratum - - - - - - - - + - + + + BS(-) ‫زرد‬ F22
F.odoratum - - - - - - - - + - + + + BS(-) ‫زرد‬ F23
F.odoratum - - - - - - - - + - + + + BS(-) ‫زرد‬ F24
F.odoratum - - - - - - - - + - + + + BS(-) ‫زرد‬ F25
F.odoratum - - - - - - - - + - + + + BS(-) ‫زرد‬ F26
F.odoratum - - - - - - - - + - + + + BS(-) ‫زرد‬ F27
F.odoratum - - - - - - - - + - + + + BS(-) ‫زرد‬ F28
F.odoratum - - - - - - - - + - + + + BS(-) ‫زرد‬ F29
F.odoratum - - - - - - - - + - + + + BS(-) ‫زرد‬ F30
F.odoratum - - - - - - - - + - + + + BS(-) ‫زرد‬ F31
F.odoratum - - - - - - - - + - + + + BS(-) ‫زرد‬ F32
F.odoratum - - - - - - - - + - + + + BM(-) ‫زرد‬ F33
F.odoratum - - - - - - - - + - + + + BM(-) ‫ﻧﺎرﻧﺠﻲ‬-‫زرد‬ F34
F .Multivorum - - - + - + - - + - + + + BM(-) ‫ﻧﺎرﻧﺠﻲ‬-‫زرد‬ F35
F.odoratum - - - - - - - - + - + + + BS(-) ‫ﻧﺎرﻧﺠﻲ‬-‫زرد‬ F36
F.odoratum - - - - - - - - + - + + + BS(-) ‫ﻧﺎرﻧﺠﻲ‬-‫زرد‬ F37
F.odoratum - - - - - - - - + - + + + BS(-) ‫زرد‬ F38
F.odoratum - - - - - - - - + - + + + BS(-) ‫ﻧﺎرﻧﺠﻲ‬ F39
F.odoratum - - - - - - - - + - + + + BS(-) ‫ﻧﺎرﻧﺠﻲ‬-‫زرد‬ F40
F.odoratum - - - - - - - - + - + + + BM(-) ‫ﻧﺎرﻧﺠﻲ‬-‫زرد‬ F41
F.odoratum - - - - - - - - + - + + + BM(-) ‫ﻧﺎرﻧﺠﻲ‬-‫زرد‬ F42
F.odoratum - - - - - - - - + - + + + BM(-) ‫ﻧﺎرﻧﺠﻲ‬-‫زرد‬ F43
F.odoratum - - - - - - - - + - + + + BM(-) ‫ﻧﺎرﻧﺠﻲ‬-‫زرد‬ F44
F.odoratum - - - - - - - - + - + + + BM(-) ‫ﻧﺎرﻧﺠﻲ‬-‫زرد‬ F45
F.multivorum - - - + - + - - + - + + + BS(-) ‫ﻧﺎرﻧﺠﻲ‬ F46

F.multivorum - - - + - + - - + - + + + BS(-) ‫ﻧﺎرﻧﺠﻲ‬-‫زرد‬ F47

F.multivorum - - - + - + - - + - + + + BS(-) ‫ﻧﺎرﻧﺠﻲ‬-‫زرد‬ F48
F.multivorum - - - + - + - - + - + + + BS(-) ‫ﻧﺎرﻧﺠﻲ‬ F49
F.multivorum - - - + - + - - + - + + + BS(-) ‫ﻧﺎرﻧﺠﻲ‬ F50
F.multivorum - - - + - + - - + - + + + BS(-) ‫ﻧﺎرﻧﺠﻲ‬ F51
F.multivorum - - - + - + - - + - + + + BS(-) ‫ﻧﺎرﻧﺠﻲ‬ F52
F.multivorum - - - + - + - - + - + + + BS(-) ‫ﻧﺎرﻧﺠﻲ‬ F53
F.odoratum. - - - - - - - - + - + + + BS(-) ‫ﻧﺎرﻧﺠﻲ‬ F54
F.odoratum. - - - - - - - - + - + + + BS(-) ‫ﻧﺎرﻧﺠﻲ‬ F55
F.multivorum - - - + - + - - + - + + + BS(-) ‫ﻧﺎرﻧﺠﻲ‬ F56
F.odoratum - - - - - - - - + - + + + BS(-) ‫ﻧﺎرﻧﺠﻲ‬-‫زرد‬ F57
F.odoratum - - - - - - - - + - + + + BS(-) ‫ﻧﺎرﻧﺠﻲ‬-‫زرد‬ F58
F.multivorum. - - - - - + - - + - + + + BS(-) ‫ﻧﺎرﻧﺠﻲ‬ F59
F. odoratum - - - - - + - - + - + + + BS(-) ‫ﻧﺎرﻧﺠﻲ‬-‫زرد‬ F60
‫ﻳﺎ‬F.yabuuchiue - - - + + + + - + - + + + BS(-) ‫ﻧﺎرﻧﺠﻲ‬-‫زرد‬ F61
F.spiriuvorum

‫( ﻧـﺸﺎن داد ﻛـﻪ‬27) ‫ ﮔﺰارﺷﺎت وﻻﺳﺎك وﻫﻤﻜـﺎران‬.‫)ﺑﺪون ﺟﺪاﻳﻪ( ﺑﻮد‬ ‫ ﺟﺪاﻳــﻪ ﻣﺤــﺮز ﺟﺪاﺳــﺎزي ﺷــﺪه ﺟــﻨﺲ‬61 ‫در اﻳــﻦ ﺗﺤﻘﻴــﻖ از‬
‫ﺟﻤﻌﻴﺖ ﺑﺎﻛﺘﺮيﻫﺎي ﻣﺤﺮك رﺷﺪ ﮔﻴـﺎه در رﻳﺰوﺳـﻔﺮ ﮔﻴﺎﻫـﺎن ﻣﻨـﺎﻃﻖ‬ ‫ ﻧﻤﻮﻧﻪ ﺧﺎك رﻳﺰوﺳﻔﺮي ﺑﻴﺸﺘﺮﻳﻦ ﻓﺮاواﻧﻲ ﻣﺮﺑﻮط ﺑﻪ‬65 ‫ﻓﻼوﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻮم از‬
‫( ﺿﻤﻦ ﺗﺤﻘﻴﻘﺎت ﺧـﻮد‬26) ‫ واﺳﻴﻮك وﻫﻤﻜﺎران‬.‫ﻣﺨﺘﻠﻒ ﻣﺘﻐﻴﺮ ﻣﻲﺑﺎﺷﺪ‬ ‫( و ﻛﻤﺘﺮﻳﻦ ﻓﺮاواﻧﻲ در اﺳـﺘﺎن آذرﺑﺎﻳﺠـﺎن ﻏﺮﺑـﻲ‬70/4) ‫اﺳﺘﺎن ﻫﻤﺪان‬
‫‪259‬‬ ‫ﺟﺪاﺳﺎزي و ﺷﻨﺎﺳﺎﻳﻲ ﮔﻮﻧﻪﻫﺎي ﻣﺨﺘﻠﻒ ﺑﺎﻛﺘﺮي ﻓﻼوﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻮم‪...‬‬

‫داﻧﻪ‪ ،‬ﻃﻮل ﺧﻮﺷﻪ و ﺳﺎﻗﻪ و رﻳﺸﻪ‪ ،‬ﺗﻌﺪاد ﭘﻨﺠﻪ و ﺗﻌﺪاد ﺧﻮﺷﻪ ﺑـﺎ ﺷـﺎﻫﺪ‬
‫ﺗﻠﻘﻴﺢ ﻧﺸﺪه اﺧﺘﻼف ﻣﻌﻨﻲ داري داﺷﺘﻨﺪ‪ .‬ﻫﺒﺎر وﻫﻤﻜﺎران )‪ (11‬از اﻧـﺪام‬
‫ﻫﻮاﻳﻲ آﻓﺘﺎﺑﮕﺮدان ‪ F.odoratum‬را ﺟﺪاﺳﺎزي ﻛﺮدﻧﺪ‪ .‬اﻳﻦ ﮔﻮﻧﻪ ﺗـﺄﺛﻴﺮ‬
‫ﺑﺴﻴﺎر زﻳﺎدي ﺑﺮ ﻛﻨﺘﺮل ﺑﻴﻤﺎري ﭘﻮﺳﻴﺪﮔﻲ رﻳـﺸﻪ آﻓﺘـﺎﺑﮕﺮدان داﺷـﺖ‪ .‬از‬
‫ﺑﻴﻦ ﺟﺪاﻳﻪﻫﺎي اﻳـﻦ ﺗﺤﻘﻴـﻖ ‪ 14‬ﺟﺪاﻳـﻪ ‪ F. multivorum‬ﺑﻮدﻧـﺪ ﻛـﻪ‬
‫ﻓﺮاواﻧﻲ ‪ 22/9‬درﺻﺪي در ﺑﻴﻦ ﮔﻮﻧﻪﻫﺎي ﺷﻨﺎﺳﺎﻳﻲ ﺷﺪه را داﺷﺘﻨﺪ‪ .‬ﺧﺎﻟﺪ‬
‫و ﻫﻤﻜﺎران )‪ (16‬ﮔﺰارش ﻛﺮدﻧﺪ ﻛﻪ ‪ F . multivorum‬ﺳـﺒﺐ اﻓـﺰاﻳﺶ‬
‫رﺷﺪ ﻃﻮﻟﻲ رﻳﺸﻪ )‪17/3‬درﺻﺪ( وزن ﺧﺸﻚ رﻳﺸﻪ )‪13/5‬درﺻـﺪ(‪ ،‬رﺷـﺪ‬
‫ﻗﺴﻤﺖ ﻫﻮاﻳﻲ )‪ 37/7‬درﺻﺪ(‪ ،‬وزن ﺧـﺸﻚ ﺟﻮاﻧـﻪ )‪36/3‬درﺻـﺪ( ﮔﻴـﺎه‬
‫ﮔﻨﺪم ﺷﺪ‪.‬‬
‫ﮔﻮﻧــــﻪﻫــــﺎي ‪،F. thalpophilum، F.indotheticum‬‬
‫‪ F.balastinhum‬ﻫﺮ ﻛﺪام ﺑﺎ ﻳﻚ اﻳﺰوﻟﻪ ﻓﺮاواﻧﻲ ‪1/6‬درﺻﺪ را داﺷﺘﻨﺪ‪.‬‬
‫ﻛﺎﺗﻠﻦ و ﻫﻤﻜﺎران )‪ (7‬ﺑﺎ ﺟـﺪا ﺳـﺎزي ﺑـﻴﺶ از ‪ 1000‬ﺟﺪاﻳـﻪ از ﺧـﺎك‬
‫رﻳﺰوﺳﻔﺮي و ﺑﺎ روش آﻧﺎﻟﻴﺰ اﺳﻴﺪﻫـﺎي ﭼـﺮب ﻣﺘﻴـﻞ اﺳـﺘﺮ )‪،(FAME‬‬
‫‪ F. indotheticum‬را ﺷﻨﺎﺳﺎﻳﻲ ﻛﺮدﻧـﺪ‪ .‬اﻳـﻦ ﻣﺤﻘﻘـﻴﻦ در ﻣﻄﺎﻟﻌـﺎت‬
‫ﮔﻠﺨﺎﻧﻪ اي ﻣﺸﺎﻫﺪه ﻛﺮدﻧﺪ ﻛﻪ اﻳﻦ ﮔﻮﻧﻪ ﺳﺒﺐ اﻓـﺰاﻳﺶ ﺻـﻔﺎت زراﻋـﻲ‬ ‫ﮔﻮﻧﻪﻫﺎ ﺑﺎﺷﺪ )‪ .(26‬ﻣﻄﺎﻟﻌـﺎت ﮔﻠﺨﺎﻧـﻪ اي ﺳـﻠﻄﺎﻧﻲ )‪ (2‬ﻧـﺸﺎن داد ﻛـﻪ‬
‫ﺳﻮﻳﺎ ﻣﺎﻧﻨﺪ وزن ﺧﺸﻚ ﻗﺴﻤﺖ ﻫﻮاﻳﻲ‪ ،‬ﺗﻌﺪاد و وزن ﮔﺮه ﮔﺮدﻳﺪ‪.‬‬
‫ﻧﺘﻴﺠﻪ ﮔﺮﻓﺘﻨﺪ ﻛﻪ ﻓﻼوﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻮﻣﻬﺎ در رﻳﺰوﺳـﻔﺮ ﻏـﻼت ﺑـﻪ وﻳـﮋه ﮔﻨـﺪم‬
‫وﺟﻮد دارﻧﺪ‪ .‬وﺟﻮد ﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻬﺎي ﻓﻼوﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻮم در رﻳﺰوﺳـﻔﺮ ﺳـﺎﻳﺮ ﮔﻴﺎﻫـﺎن‬
‫زراﻋﻲ ﺗﻮﺳﻂ ﺳﺎﻳﺮ ﻣﺤﻘﻘﻴﻦ ﻧﻴﺰ ﮔﺰارش ﺷﺪه اﺳﺖ )‪ .(10‬ﺑـﺮوز ﺻـﻔﺎت‬
‫ﻣﺤﺮك رﺷﺪ ﮔﻴﺎه ﺗﻮﺳﻂ ﻓﻼوﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻮم ﻫـﺎ ﺗﻮﺳـﻂ ﻣﺤﻘﻘـﻴﻦ ﺑـﻪ اﺛﺒـﺎت‬
‫رﺳــﻴﺪه اﺳــﺖ‪ .‬ﻛﺮﻳﭽﻨــﺮ وﻫﻤﻜــﺎران )‪ (17‬ﺿــﻤﻦ اﺷــﺎره ﺑــﻪ وﺟــﻮد‬
‫ﻓﻼوﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻮم در رﻳﺰوﺳﻔﺮ ﮔﻨﺪم و ﺟﻮ ﺑـﺎ ﺗﻠﻘـﻴﺢ اﻳـﻦ ﺑـﺎﻛﺘﺮي اﻓـﺰاﻳﺶ‬
‫ﻋﻤﻠﻜﺮدي ﻣﻌﺎدل ‪ 300-500‬ﻛﻴﻠﻮ ﮔﺮم در ﻫﻜﺘﺎر در اﻳﻦ ﻣﺤـﺼﻮﻻت را‬
‫ﮔﺰارش ﻛﺮدﻧﺪ‪ .‬ﻧﺘﺎﻳﺞ آزﻣﻮنﻫﺎي ﮔﻠﺨﺎﻧﻪ اي ﺳﻠﻄﺎﻧﻲ )‪ (2‬ﻧﺸﺎن داد ﻛـﻪ‬
‫ﺑﺮﺧﻲ ﺟﺪاﻳﻪ ﻫﺎي ﻓﻼوﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻮم ﺑﻪ ﻟﺤﺎظ ﺗﺄﺛﻴﺮ ﻣﺜﺒﺖ ﺑـﺮ ﺷـﺎﺧﺺﻫـﺎي‬
‫رﺷﺪ ﮔﻨﺪم ﺑﻬﺎره ﻣﻴﺘﻮاﻧﻨﺪ ﺑﻌﻨﻮان ﺑﺎﻛﺘﺮيﻫﺎي ﻣﺤﺮك رﺷﺪ ﮔﻴـﺎه ﮔﻨـﺪم‬
‫در آزﻣﺎﻳﺸﻬﺎي ﻣﺰرﻋﻪ اي اﺳﺘﻔﺎده ﺷﻮﻧﺪ‪.‬‬
‫ﻧﺘﺎﻳﺞ آزﻣﻮنﻫﺎي ﺑﻴﻮﺷﻴﻤﻴﺎﻳﻲ ﺷﻨﺎﺳﺎﻳﻲ ﮔﻮﻧﻪ ﻧﺸﺎن داد ﻛـﻪ ﻏﺎﻟـﺐ‬
‫ﻓﻼوﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻮﻣﻬﺎي ﺟﺪا ﺷﺪه از رﻳﺰوﺳﻔﺮ ﮔﻨﺪم از ﮔﻮﻧﻪ ‪ F.odoratum‬ﺑﺎ‬
‫ﻓﺮاواﻧﻲ ‪ 72‬درﺻﺪ ﺑﻮدﻧﺪ‪ .‬اﻳﻦ ﻓﺮاواﻧﻲ ﻣﻲﺗﻮاﻧﺪ ﺑﻪ دﻟﻴﻞ ﺗﻮان رﻗﺎﺑﺘﻲ ﺑﺎﻻ‬
‫و ﻛﻠﻮﻧﻴﺰاﺳﻴﻮن ﻣﺆﺛﺮ اﻳﻦ ﮔﻮﻧﻪ در رﻳﺰوﺳﻔﺮ ﮔﻨـﺪم در ﻣﻘﺎﻳـﺴﻪ ﺑـﺎ ﺳـﺎﻳﺮ‬
‫ﮔﻴﺎﻫﺎن ﮔﻨﺪم ﺗﻠﻘﻴﺢ ﺷﺪه ﺑﺎ ‪ F.odoratum‬از ﻧﻈﺮ ﻣﻴـﺎﻧﮕﻴﻦ وزن ﻫـﺰار‬

‫ﻣﻨﺎﺑﻊ‬
‫‪ -1‬ﺑﺎﻗﺮي ﺧﻴﺮآﺑﺎدي م‪ .1372 .‬ﺑﺮرﺳﻲ ﺑﻴﻮﺗﻴﭗﻫﺎي ﺑﺎﻛﺘﺮي ﻋﺎﻣﻞ ﭘﮋﻣﺮدﮔﻲ ﺳﻴﺐ زﻣﻴﻨﻲ در اﻳﺮان‪ .‬ﭘﺎﻳﺎن ﻧﺎﻣﻪ ﻛﺎرﺷﻨﺎﺳﻲ ارﺷﺪ ﺑﻴﻤﺎري ﺷﻨﺎﺳﻲ ﮔﻴـﺎﻫﻲ‪،‬‬
‫داﻧﺸﻜﺪه ﻛﺸﺎورزي داﻧﺸﮕﺎه ﺗﺮﺑﻴﺖ ﻣﺪرس‪.‬‬
‫‪ -2‬ﺳﻠﻄﺎﻧﻲ ﻃﻮﻻرود ع‪ .1385 .‬ﺟﺪاﺳﺎزي‪ ،‬ﺷﻨﺎﺳﺎﻳﻲ و ﺑﺮرﺳﻲ ﺻﻔﺎت ‪ PGP‬ﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻬﺎي ﻓﻼوﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻮم و ﺳـﻮدوﻣﻮﻧﺎس ﻫـﺎي ﻓﻠﻮرﺳـﻨﺖ ﺑـﻮﻣﻲ اﻳـﺮان‪.‬‬
‫ﭘﺎﻳﺎن ﻧﺎﻣﻪ ﻛﺎرﺷﻨﺎﺳﻲ ارﺷﺪ ﺧﺎﻛﺸﻨﺎﺳﻲ‪ ،‬داﻧﺸﻜﺪه ﻛﺸﺎورزي داﻧﺸﮕﺎه ﺗﻬﺮان‪.‬‬
‫‪3- Asghar H.N., Zahir Z.A. and Arshad M. 2004. Screening rhizobacteria for improving the growth, yield, and oil‬‬
‫‪content of conola (Brassica napus L.). Australian Journal of Agricultural Research. 55:187-194.‬‬
‫‪4- Belimov A.A., Hontazeas N., Safronova V.I., Demchinshaya S.V., Piluzza G., Bulitta S. and Glick B.R. 2005.‬‬
‫‪Cadmium-tolerant plant growth-promoting bacteria associated with the roots of Indian mustard (Brassica juncea‬‬
‫‪L.czern.). Soil Biol. Biochem. 37:241-250.‬‬
‫‪5- Beniziri E., Baudoin E. and Guckert A. 2001. Root colonization by inoculated plant growth-promoting‬‬
‫‪rhizobacteria. Biocontrol Science and Technology. 11: 557-574.‬‬
‫‪6- Boven G.D. and Rovina A.D. 1999. The rhizosphere and its management to improve plant growth . Advances in‬‬
‫‪Agronomy 66:1-102.‬‬
‫‪7- Cattelan A.J., Hartel P.G. and Fushrman J.J. 1999. Screening for plant growth promoting rhizobacteria to promote‬‬
‫‪early soybean growth . Soil Sci. Soc. Am. J. 62: 1579-1555.‬‬
‫‪8- DeBoer S.H. and Copeman R.J. 1974. Endophytic bacteria flora in Solanum tubersum and its significance in‬‬
‫‪bacterial ring rot diagnosis.Can. J. Plant Sci. 54:115-122.‬‬
‫‪9- Giri S. and Patti B.R. 2004. A comparative study on phyllosphere nitrogen fixation by newly isolated‬‬
‫‪Corynebacterium sp. and Flavobacterium sp. and their potential as biofertilizer. Acta Microbiol. Immunol. Hung.‬‬
‫‪51: 47-56.‬‬
‫‪10- Gray J.K. and Smith F. 2004. Plant growth promoting rhizobacteria as bio fertilizers. Plant and Soil. 255:571-586.‬‬
‫‪11- Hebbar, O., Berge, T. and Heulin, S.P. (1991). Bacterial antagonists of Sunflower (Helianthus annuse L.) fungal‬‬
‫‪pathogens. Plant and Soil. 133:131-140.‬‬
‫‪12- Holmes B. 1991. The genera Flavobacterium, sphingobacterium, and weeksella. In; Balows, A., Truper, H.,‬‬
‫‪Dworking, M., Hader, W., and Scheifer, K. (eds). The Prokayotes: a hand book on the biology of bacteria, vol. 4,‬‬
‫‪pp: 3620-3627, Spriger-Verlag, New York.‬‬
‫‪13- Holmes B., Owen R. and McMeekin T. 1984. Genus Flavobacterium. In: Krieg, N.R., and Holt, J.G.(eds) Bergys‬‬
‫‪Mannual of Systematic Bacteriology. Vl. pp: 353-361, Williams and wikins, USA.‬‬
 1389 ‫ ﺧﺮداد – ﺗﻴﺮ ﺳﺎل‬،2‫ ﺷﻤﺎره‬،24 ‫ ﺟﻠﺪ‬،‫ﻧﺸﺮﻳﻪ آب و ﺧﺎك‬ 260

14- Holmes B. 1983. The taxonomy of the genus Flavobacterium . in: Leclerc , H.(ed). Gram –negative bacteria of
medical and public health importance: taxonomy – identification – applications.( proceedings of symposium, lille,
May 25 to 27, 1983). Les edition INSERM. 114: 273-94.
15- Holt J.G. 1994. Bergey's Manual of Determinative Bacteriology. Williams and Wilkins, Baltimore, USA.
16- Khalid A., Arshad M. and Zahir A.Z. 2004. Screening plant growth- promoting rhizobacteria for improving growth
and yield of wheat. Journal of Applied Microbiology. 96: 473- 480.
17- Kirchner M.J., Wollum A.G. and King L.D. 1993. Soil microbial populations and activities in reduced chemical
input agroecosystems. Soil. Sci. Soc.Am. J. 57:129-1295.
18- Kloepper J. W. and Schroth M.N. 1978. Plant growth promoting rhizobacteria on radishs. Proceeding of the
International Conference on Plant Phathogenic Bacteria. 2:879-882.
19- Kovacs N. 1956. Identification of Pseudomonas pyocyana by the oxidase reaction. Nature. 178: 703-708.
20- Krieg N.R. and Holt J.G. 1984. Bergey s Manual Systematic Bacteriology. Vol. 1. Williams and Wilkins,
Baltimore, USA.
21- Lelliott R.A. and Stead D.E. 1987. Methods for Diagnosis of Bacterial Diseases of Plants.Blackwell Scientific
Publication, U.K. 215 pp.
22- Mac Faddin J.E. 2000. Biochemical Tests For the Identification of Medical Bacteria. Lippincott Williams &
Wilkins. 912pp.
23- Pishchik V.N., Vorobyev N.L., Chernyaeva I.I., Timofeeva S.V., Pleozhemyak V.A., Alexeer Y.V. and Lukin S.M.
2002. Experimental and mathematical simulation of plant growth promoting rhizobacteria and plant interaction
under cadmium stress. Plant and Soil. 243:173-186.
24- Schaad N.W. 2001. Laboratory guide for identification of plant phathogenic bacteria 3rd Ed.APS Press.
25- Shenin Y.D., Kruglikavo L.F., Vassyuk L., Kozhemyakov A.P., Popova T.A. and Tchebotar V.K. 1995.New
metabolite with fungistatic activity produced associative nitrogen-fixing bacteria beloning to genus Flavobacterium
in:Tikhonovich, I.A.,Provorov, N.A., Romanov,V.I. and Newion,W.E. (Eds) . Nitrogen Fixation: Fundamentals and
Application.Kluwer Academic Publishers.
26- Vassyuk l.F., Popova T.A., Tehebotar V.K. , Kaltchitsky A.E. and Ivanov N.S. 1995 .Assocative diazotrophs of
different systematic groups and their effect on productivity of agricultural crops. In:Polsinelli,M.,Materassi,R. And
Vincenzini,M.(Eds). Nitrogen Fixation Klower Academic Publichers.
27- Vlassak K., Holmes L.V., Duchatesu L., Vaderleyden J. and De Mot R. 1992. Isolation and characterization of
fluorescent Psedomonas associated with the roots of rice and banana growth in Srilanka. Plant and Soil. 145:51-63.
 Journal of Water and Soil (‫ﻧﺸﺮﻳﻪ آب و ﺧﺎك )ﻋﻠﻮم و ﺻﻨﺎﻳﻊ ﻛﺸﺎورزي‬
261 ...‫ﻓﻼوﺑﺎﻛﺘﺮﻳﻮم‬
Vol. 24, ‫ﻣﺨﺘﻠﻒ ﺑﺎﻛﺘﺮي‬
No. 2, May-Jun 2010, ‫ﻫﺎي‬‫ﺟﺪاﺳﺎزي و ﺷﻨﺎﺳﺎﻳﻲ ﮔﻮﻧﻪ‬
p. 254-261 254-261 .‫ ص‬،1389 ‫ ﺗﻴﺮ‬- ‫ ﺧﺮداد‬،2 ‫ ﺷﻤﺎره‬،24 ‫ﺟﻠﺪ‬

Isolation and Identification of the Different Species of Flavobacterium from the

Rhizosphere of Wheat Cultivated in the Different Regions of Iran

S. Rafiee1* – H. Asadi Rahmani2

Abstract
Among rhizospheric bacteria, great attention has been paid to the group of plant growth promoting
rhizobacteria (PGPR), and their role in increasing the growth and health of plants. Therefore, it is used largely as
inoculum all over the world. The rhizospheric bacterium, which has the genus of Flavobacterium, and promotes
plants growth, has been studied in recent years. In the present research, 65 samples of rhizospheric soil were
taken to isolate Flavobacterium from the rhizosphere of wheat cultivated in different regions of Iran. To isolate,
cultivate, and preserve Flavobacterium, different and diverse formulations such as ATCC 647, 65 ATTC M1,
and M1 Medium, which were recommended for this bacterium, were used for the development of a new specified
culture media (FIM). Sixty-one isolates attributed to Flavobacterium were isolated and purified using specified
culture medium (FIM). The genus and species were identified through microscopic, physiological and
biochemical tests. The results obtained from our tests indicated that there are 5 species F. multivorum,
F.odoratum, F. thalpophilum, F.balastinum and F. indoltheticum in the rhizosphere of wheat. Among the
isolated species, F.odoratum showed the most frequency (72 percent), and the F. thalpophilum and F.
balastinum and F. indoltheticum possessed the least frequency (1.6 percent).

Keywords: Flavobacterium, PGPR (Plant Growth Promoting Rhizobacteria), Rhizosphere, Wheat

1- InstructorScientific and Practical Center of Agriculture, Education Pardise, Kashan

(* - Corresponding author Email: Rafiei1740@gmail.com)
2- Assistnt prof., Research Institute of Soil and Water, Soil Biology Group. Tehran